JP2005526142A - Coriolusversicolorから取得した、検証可能な経口吸収性を有する免疫調節ペプチド結合グルカンの調製および標定 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、出願日を2002年5月22日とする米国仮出願 番号60/383,339と、出願日を2002年9月6日とする米国正規出願 番号10/236,996とに基づくPCT出願である。
I.定義
本発明に関して使用されている用語について、以下に定義する。
本発明は、Coriolus versicolor(CV)の精製抽出物とその活性成分、該抽出物を精製するための方法および該抽出物を用いて免疫反応を刺激する方法を提供する。本発明の精製抽出物の活性成分は、低分子量(0.7〜5kDa、好ましくは0.7〜3kDa)のひとつ以上のペプチド結合グルカンである。前記ペプチド結合グルカンは、定期的摂取で健康状態を改善し、長寿命を実現するための手段として、中国社会で広く推進されてきた粗CV抽出物の免疫刺激特性を保持している。近年、従来の抽出物が、一般的な免疫能の衰弱や腫瘍の治療にさらに広く用いられるようになってきている。外科手術、化学療法、および/または放射線療法を受けた癌患者に従来のCV抽出物を長期間にわたって経口投与した結果、免疫能と健康状態双方における大幅な改善が観察されている。
本発明の精製抽出物は、篩分けクロマトグラフィーによって定量された0.7〜5kDaの分子量をもつ少なくともひとつのペプチド結合グルカンを有している。前記少なくともひとつのペプチド結合グルカンは、免疫刺激活性を有している。前記免疫刺激活性は、以下に述べる試験または例に掲載する試験のいずれにおいても、統計的に有意な反応によって観察することができる。
1.Coriolus versicolorの活性抽出物水溶液の調製
図1のフローチャートに示されているように、液体溶剤で子実体を抽出し、得られた溶液を濃縮して濃縮抽出物を形成することにより、CVの活性抽出物水溶液をCVの乾燥子実体から調製することができる。一部の方法では、CVの乾燥子実体を浸軟し、色素を脱失させ、0.01Nの水酸化ナトリウム溶液などの希釈アルカリ性水溶液中で煮沸する。水酸化カリウムなどの他のアルカリ性溶液も使用可能である。このような加熱条件下では、これらのアルカリ抽出剤溶液の濃度が0.1N未満で、活性の損失を回避できることが好ましい。抽出後には、不溶性物質を、例えば、ろ過などによって取り除き、残留生成物を遠心分離法またその他の手段によって清澄化する。清澄化して得た上澄みを保存および使用する前に濃縮し、凍結乾燥する。
図15のフローチャートは、部分精製抽出物を調製するための模範的方法が示されている。乾燥粗CV抽出物を水中で溶解させ、水に溶けにくい物質を遠心分離法によって取り除く。pH4の水溶性CV抽出物の陽イオン物質をカチオン交換樹脂によって吸着し、除去することができる。次に、負電荷分子にするために選択可能ないずれかの技術を用いて、活性成分をさらに精製することができる。カチオン交換樹脂であるDEAEセルロースを使用していることが好ましい。部分精製分画は、分子量に基づいて分子を分離する段階的エタノール分画化またはゲルろ過によって、さらに細分画化することができる。好ましい分子量の範囲は、0.7〜3kDaである。5段階のエタノール勾配では、95%のエタノール水溶性物質を除き、活性分画がすべての段階で単離された。クロマトグラフィーなどのような技術で知られているいくつかの標準の方法を用いて、さらに精製を行うことができる。例えば、ペプチド結合グルカンのグルカン成分は、ペプダーゼで処理することによって、ペプチド成分から分離することができる。前記ペプチドは、グルカナーゼで処理することによって、グルカン成分から分離することができる。ペプチド結合グルカンのペプチドフラグメントは、選択したタンパク質分析消化作用によって調製することもできる。個々のペプチド結合グルカンは、任意選択により二次元でゲル電気泳動を行い、分離したバンドを切り取ることによって分離することができる。
免疫刺激活性は、種類の異なる細胞で異なる効果を発揮する。未成熟の免疫細胞の場合、免疫刺激剤を負荷すると、リン脂質の合成の亢進および二価の陽イオンの浸透性の増強などといった一連の生化学的イベントが発生する。タンパク質、RNAおよび最終的DNAの合成が、その後すぐに開始する。これは最終的現象、すなわちリンパ球および骨髄細胞の活性化を測定するための定量的基盤を形成する、DNA合成(最終的に細胞分裂に導く)の亢進である。DNA合成は、トリチウム化チミジン(3H‐Tdr)、すなわち新たに合成されたDNAに取り込まれるヌクレオシド前駆物質で培養液にパルスラベルすることによって観察する。DNA合成速度に関する3H‐Tdrの取り込み量は、シンチレーション計数法によって定量化される。シンチレーション計数法では、マイトジェン反応性の標準の指標として一般に使用されている、カウント/分(CPM)のデータが得られる。刺激した培養液のCPMは、対照培養液で測定したCPMで正規化して、刺激指数と呼ばれる比率を求める。
本発明の精製抽出物、ペプチド結合グルカンまたはそれらの活性成分に対しては、腸壁透過性スクリーニングを実施することもできる。このようにすると、経口投与が可能となり、好都合である。スクリーニングは、in vitro腸壁吸収度を調査するための腸壁表皮細胞の代用として、厳正に正当性が評価された結腸直腸悪性腫瘍に由来する高分化ヒト腸細胞系であるCaco−2細胞系を用いて実施することができる。ヒトにおける生物学的利用能と、Transwell(登録商標) インサートでCaco−2単分子層を用いて取得した浸透性試験の結果との間には、良好な相関関係が認められた。Caco−2単分子層全体にわたってトランスポート可能な成分の分子量分布と免疫原性は、前記の篩い分けクロマトグラフィーおよび生物学的検定法によって特徴づけすることができる5,6。浸透度は、in vivo動物モデルでも測定することができる。
CV抽出物、ペプチド結合グルカン、または活性成分は、多数のin vitro法またはex vivo法で利用できる。一部の方法では、これら作用薬に対する細胞反応を分析し、これらの作用物質のin vivo投与計画を最適化するための情報を取得している。また別の一部の方法では、CV抽出物、ペプチド結合グルカンまたは活性成分は、脾細胞または骨髄細胞の増殖あるいはマクロファージの分泌に対する効果について他の薬剤をスクリーニングするための陽性コントロールとして使用されている。陽性コントロールが脾細胞または骨髄細胞の増殖あるいはマクロファージの分泌を刺激する一方で、候補薬が併発反応を示さない場合には、試験薬は効果がないという結論に達しうる。それ以外の方法では、増殖しているPMBを、免疫障害の患者から取得している。リンパ球をCV抽出物、ペプチド結合グルカンまたは活性成分でex vivo処理した後で、患者の体内に戻す。さらに、ConAまたはLPSなどの免疫系を刺激する他の作用薬と同様に、CV抽出物、ペプチド結合グルカンまたは活性成分は、研究所で細胞の活性化状態を調査するのに使用する科学的試薬として市販したり、免疫系を刺激する他の作用薬を発見するための対照薬として使用することも可能である。
治療に敏感に反応する患者には、免疫不全発症のリスクのある患者が含まれるが、実際の免疫不全症患者はその対象とはならず、現在免疫不全症である患者もまた除外される。免疫不全を発症すると、日和見感染に対する感受性が増長される。したがって、CV抽出物またはペプチド結合グルカンまたはそれらの活性成分を投与された患者は、日和見感染に対する感受性が低下している。
A.治療法
予防のための利用法では、免疫不全を発症している疑いのある患者、またはそれ以外に発症するリスクのある患者に適切な量の薬剤組成物または薬剤を投与して、免疫不全の発症を予防、緩和または抑制する。治療を目的とした利用法では、組成物や薬剤は、免疫疾患症候群の症状を好転、抑制または少なくとも一部抑制することができるだけの十分な量で免疫不全疾患を発症している疑いのある患者または発症している患者に投与する。予防投与計画と治療投与計画の両方で、本発明のCoriolus versicolor抽出物またはペプチド結合グルカンまたは活性成分は、一般に、十分な反応を示すまで数種類の投与量で投与されている。ただし、予防計画と治療計画の両方で、本発明の抽出物、ペプチド結合グルカンまたは活性成分、あるいは本発明の部分精製CV抽出物を、十分な反応が得られるまで、一種類の投与量で投与してもよい。通例、治療をモニタして、反復投薬を実施してもよい。さらに治療計画には、他の免疫媒介障害を治療するのに使用されている投与量、投与経路および投与頻度と同じ内容を採用することができる。
CV抽出物、ペプチド結合グルカンおよびそれらの活性成分は、哺乳類、例えばヒトの患者または被験体に、単独で、あるいは薬理学的に許容可能な塩またはその加水分解型前駆物質の形態または、化合物が効果的投与量で好適な担体または賦形剤と混合されている薬理学的組成形態で供給するか投与することが可能である。薬理学的組成としては、固形の経口投与が好ましい。効果的計画とは、十分な量と頻度で、免疫学的疾患の少なくともひとつの症状の抑制、遅延、阻害、または逆発症を検出するのに適切な経路を用いて一種類の薬剤または併用薬剤類を投与することを意味する。『効果的投与量』、『薬理学的許容可能な用量』、『薬理学的許容可能な量』とは、適切な計画で十分な量のCV抽出物、ペプチド結合グルカンまたは活性成分が投与されたときに、例えば免疫反応の刺激、または免疫疾患の進行の防止、遅延、阻害または好転などを実現することを意味する。
以下の例は、図解するために提供されているもので、制限することは意味していない。したがって、試薬の選択だけでなく、試薬の濃度、温度および他の様々なパラメータは、本発明の適用を例示することを目的として使用されており、それらの制限事項と考えてはならない。本分野の当業者は、本書に記載されている本発明を実現するために変更することができる非重要パラメータをすぐに認識することができるであろう。
粗Coriolus versicolor(CV)抽出物の調製
粗Coriolus versicolor(CV)抽出物は、以下のプロセスを実施することによって調製する。乾燥したCoriolus versicolor(CV)子実体を浸軟させる。浸軟させたCV子実体を細かく刻む。浸軟させ、細かく刻んだCV子実体から色素を脱失させるプロセスを実施してもよい。次に、CV子実体を抽出する。抽出は、アルカリ性溶液、例えば水酸化ナトリウムや水酸化カリウムなどでCV子実体を煮沸することによって実施してもよい。0.1N未満のアルカリ性水溶液が好ましい。抽出プロセスに続き、粗CV抽出物の調製では、ろ過などの不溶性物質の除去、遠心分離などによる抽出物の清澄化、ロータリーエバポレータなどによる前記抽出物の濃縮、前記抽出物の凍結、またはフリーズドライヤなどによる前記抽出物の凍結乾燥などの各種プロセスのひとつまたは複数に従ってもよい。その後、精製された粗CV抽出物を使用するか、または後で使用できるように保管しておくことができる。
粗CV抽出物の物理化学的特性
粗CV抽出物を分析し、その溶解性、融点、分解温度および吸湿性を調べた。分析に使用した方法および個々の結果について、表1にまとめる。
例III
粗CV抽出物とin vitro接触させた生存マウス脾細胞の増殖
頚椎脱臼によって3匹のICRマウスを屠殺した。屠殺したマウスの脾臓を無菌状態で除去した。ステンレススチール製の篩いを用いて、各マウスの脾臓を静かに押し当てて単離した。各マウスから単離された脾細胞を浸せきし、得られた細胞懸濁液を3分間1600rpmの遠心分離にかけ、上澄みを静かに注ぎ出した。細胞ペレットに約6mlの溶解緩衝液を添加し、前記ペレット中に存在している赤血球を破壊させた。次に、残留溶解緩衝液をPBSで洗浄した。次に、脾細胞を完全な培地内で懸濁した。
粗CV抽出物にin vitro接触させたマウス骨髄細胞
5匹のICRマウスを頚椎脱臼によって屠殺した。屠殺したマウスの大腿骨を無菌状態で切除した。大腿骨に付随している筋肉を可能なかぎりすべて除去し、骨髄栓子を25Gの針を取りつけた2mlの注射器を用いてPBSで洗浄した。各骨髄栓子から単離した骨髄細胞を浸せきした。得られた細胞懸濁液を調製し、細胞懸濁液の生存可能性を、上記例IIIに記載されているように試験した。生存細胞懸濁液の密度4x106個/mlの細胞懸濁液が精製されるように調整した。100μlの細胞懸濁液を96ウェルのマイクロタイタープレート(NUNCTM)にシードした。
粗CV抽出物とin vitro接触させたマウスマクロファージ
1mlの3%w/v水溶性チオグリコール酸を10匹のICRマウス腹腔内に注射した。3日後に頚椎脱臼によって上記マウスを屠殺した。腹腔を開き、PBSで腹腔洞内を洗浄した。各マウスから得られたPBS洗浄物を集積した。得られた細胞懸濁液を調製し、細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。生存細胞懸濁液の密度を、4x106個/mlの細胞懸濁液を精製できるように調製した。100μlの細胞懸濁液を96ウェルのマイクロタイタープレート(NUNCTM)にシードした。
例VI
正常なマウスに対する粗CV抽出物の投与
治験計画
20匹のICRマウスを5匹のマウスからなる4対象群に分類した。表IIIに示されているように、群1に対しては、粗CV抽出物を腹腔内投与した。群2に対しては、正常食塩水を陰性コントロールとして腹腔内投与した。群3に対しては、粗CV抽出物を経口投与した。さらに群4に対しては、脱イオン化水を陰性コントロールとして経口投与した。経口投与は、胃腸管を通じてマウスの体内に強制注射した。
コントロールマウス(群2)に比べ、マウス(群1)に腹腔内投与した粗CV抽出物は、58.6%分、in vivo生存脾細胞の数を増加させた。(図6Aを参照。)脾細胞を、上記例IIIに記載されているように、収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を腹腔内投与したマウスの骨髄細胞(群1)は、コントロールマウス(群2)の骨髄細胞に比べ、ex vivo LPS刺激増殖活性が亢進していた。(図6Bを参照。)骨髄細胞を、上記例IVに記載されているように収集し、単離した。骨髄細胞に対する粗CV抽出物の増殖活性を上記例IVに記載されているように試験した。
マウス(群3)に経口投与した粗CV抽出物は、コントロールマウス(群4)に比べ、40%in vivo生存脾細胞の数を増加させた。(図7Aを参照。)脾細胞を、上記例IIIに記載されているように、収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を経口投与したマウス(群3)の骨髄細胞は、コントロールマウス(群4)の骨髄細胞に比べ、ex vivo LPS刺激増殖活性が亢進していた。(図7Bを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように、収集し、単離した。骨髄細胞に対する粗CV抽出物の増殖活性を、上記例IVに記載されているように試験した。
免疫障害のあるマウスまたは重篤な免疫障害のあるマウスに対する、CV抽出物の投与
治験計画
40匹のICRマウスを5匹からなる8対象群に分類した。一日目に、群1−4のマウスに対し20mg/kgのシクロホスファミドを腹腔内注射することによって免疫障害を発生させた。一日目にさらに、群5−8のマウスに対し、100mg/kgのシクロホスファミドを腹腔内注射することによって重篤な免疫障害を引き起こさせた。(シクロホスファミドの用量と投与計画については表IVを参照。)免疫抑制後、第5、6および7日目に、群1に対し、粗CV抽出物を腹腔内注射し、群2に対し、正常食塩水を腹腔内注射した。免疫抑制後、1−7日目に、群3に対し、粗CV抽出物を経口投与し、群4に対し脱イオン化水を投与した。重度の免疫抑制処置後、1−7日目に、群5に対し、粗CV抽出物を経口投与し、群6に対し、脱イオン化水を投与した。重度の免疫抑制処置後1−14日目に、群7に対し、粗CV抽出物を経口投与し、群8に対し脱イオン化水を投与した。(粗CV抽出物の用量、投薬計画および投与経路については、表IVを参照。)群2、4、6および8は陰性コントロール群である。群1−6のマウスは、8日目に屠殺した。群7と群8のマウスは15日目に屠殺した。
免疫障害を発生させたマウス(群1)に対して腹腔内投与した粗CV抽出物は、コントロールマウス(群2)に比べ、in vivo生存細胞の数を有意に増加させた(p<0.001)。(図8Aを参照。)脾細胞を上記例IIIに記載されているように収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を腹腔内投与したマウスの骨髄細胞は、コントロールマウス(群2)の骨髄細胞に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数を有意に増加させた(p<0.05)。(図8Aを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように収集し、単離した。前記骨髄細胞の生存可能性を、上記例IIIに記載されているように試験した。
免疫抑制マウス(群3)に対して経口投与粗CV抽出物は、コントロールマウス(群4)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させることはなかった(p<0.005)。(図8Bを参照。)脾細胞を上記例IIIに記載されているように収集し、単離した。前記骨髄細胞の生存可能性を、上記例IIIに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を経口投与したマウス(群3)の骨髄細胞は、コントロールマウス(群4)の骨髄細胞に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数を有意に増加させた(p<0.005)。(図8Bを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように収集し、単離した。前記骨髄細胞の生存可能性を、上記例IIIに記載されているように試験した。
重篤な免疫障害を発生させたマウス(群5)に対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群6)に比べ、in vivo生存可能脾細胞の数を増加させた。ただし、前記増加は統計的に有意なものではなかった。(図8Cを参照。)脾細胞を上記例IIIに記載されているように収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
重篤な免疫障害を発生させたマウス(群5)に対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群6)に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数を有意に増加させた(p<0.01)。(図8Cを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
免疫抑制処置したマウス(群7)に対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群8)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を増加させることはなかった。(図9Aを参照。)脾細胞を上記例IIIに記載されているように収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
免疫抑制処置したマウス(群7)に対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群8)に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数を有意に増加させた(p<0.05)。(図9Aを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液の生存可能性を上記例IVに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を経口投与したマウス(群7)の脾細胞は、コントロールマウス(群8)の脾細胞に比べ、ex vivo増殖活性が亢進した。(図9Bを参照。)前記脾細胞を上記例IIIに記載されているように収集し、単離した。前記脾細胞に対する粗CV抽出物の増殖活性を、上記例IIIに記載されているように試験した。
粗CV抽出物を経口投与したマウス(群7)の骨髄細胞は、コントロールマウス(群8)の骨髄細胞に比べ、ex vivo LPS刺激増殖活性が亢進した(p<0.05)。(図9Cを参照。)骨髄細胞を上記例IVに記載されているように収集し、単離した。骨髄細胞に対する粗CV抽出物の増殖活性は、上記例IVに記載されているように試験した。
免疫障害発生マウスにおける用量反応に関する治験
治験計画
20匹のICRマウスを5匹からなる4対象群に分類した。1日目に、1−4群のマウスに対し、20mg/kgのシクロホスファミドを腹腔内注射することによって免疫抑制処置を施した。(シクロホスファミドの用量および投与計画については、表Vを参照。)シクロホスファミド投与後1−7日目に、1、2および3の各群のマウスに対し、5mg/kg/日、20mg/kg/日および50mg/kg/日の粗CV抽出物をそれぞれ経口投与した。シクロホスファミド投与後1−7日目には、群4のマウスに対し、脱イオン化水を投与した。(粗CV抽出物の用量および投与計画については、表Vを参照。)群4は陰性コントロール群である。群1−4のマウスは、8日目に屠殺した。
5mg/kg/日(群1)および20mg/kg/日(群2)の用量でマウスに対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群4)に比べ、用量依存法でin vivo生存脾細胞数を増加させた。(図10を参照。)50mg/kg/日(群3)の用量でマウスに対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群4)に比べ、in vivo生存脾細胞数を増加させることはなかった。(図10を参照。)群3のマウスに観察されたデータは、上記例VIIIおよび図8Aに示されている結果と一致している。
5mg/kg/日(群1)、20mg/kg/日(群2)および50mg/kg/日(群3)の用量でマウスに対し経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群4)に比べ、用量依存法でin vivo生存骨髄細胞数を増加させた。(図10を参照。)コントロールマウス(群4)に比べ、群2のマウスに経口投与したCV抽出物は、骨髄細胞の増殖率を高め(p<0.01)、さらにコントロールマウス(群4)に比べ、群3のマウスに対し経口投与したCV抽出物は、骨髄細胞の増殖率を高めた(p<0.001)。
正常なマウス、免疫障害を与えたマウスおよび重篤な免疫障害を与えたマウスに対するCV抽出物の経口投与;細胞媒介免疫反応に対する効果
治験計画
マウスモデルを用いて、細胞媒介免疫反応における増加率を判定した。接触性過敏症、細胞媒介免疫反応である。このモデルは、接触性過敏症の発症を判定するのにマウスの耳介膨満測定に依存する、標準の接触性過敏症に関する治験を根拠としている。
正常なマウス(群1)は、コントロールマウス(群2)に比べ、耳介の膨満を測定したときに、過敏症反応が有意に亢進していた(p<0.05)。(図11参照。)
コントロールマウス(群4)に比べ、耳介の膨満を測定したときに、免疫抑制マウス(群3)は過敏症反応が有意に亢進していた(p<0.05)。(図11を参照。)
コントロールマウス(群6)に比べ、耳介の膨満を測定したときに、重度の免疫抑制処置マウス(群5)の過敏症反応は有意に亢進していた(p<0.001)。(図11参照。)
CV抽出物の正常なマウスに対する長期(30日)経口投与
治験計画
ICRマウスを5匹からなる2群に分類した。表VIIに示されているように、群1に対しては、粗CV抽出物を経口投与し、群2に対しては、脱イオン化水を陰性コントロールとして経口投与した。表VIIは各群の容量と投与計画をまとめたものである。両群ともマウスを31日目に屠殺した。上記例VIに記載されているように、粗CV抽出物を調製、保管および投与した。(表VIIも参照。)
マウス(群1)に経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群2)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させることはなかった。(図12Aを参照。)上記例IIIに記載されているように、脾細胞を収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、前記細胞懸濁液を上記例IIIに記載されているように試験した。
マウス(群1)に経口投与された粗CV抽出物は、コントロールマウス(群2)に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数を有意に増加させることはなかった。(図12Aを参照。)上記例IVに記載されているように、骨髄細胞を収集し、単離した。骨髄細胞の生存可能性を上記例IIIに記載されているように試験した。
コントロールマウス(群2)の増殖反応に比べ、粗CV抽出物を投与した(群1)脾細胞の増殖反応は亢進していた。(図12Bを参照。)上記例IIIに記載されているように、脾細胞を収集し、単離した。得られた細胞懸濁液を調製し、上記例IIIに記載されているように、細胞懸濁液の生存可能性を試験した。脾細胞をCon Aで刺激し、刺激指数を上記例Vに記載されているように計算した。
コントロールマウス(群2)の骨髄細胞に比べ、粗CV抽出物を経口投与したマウス(群1)骨髄細胞のex vivoLPS刺激増殖活性は亢進していた。(図12Cを参照。)
経口投与した粗CV抽出物の急性毒性
1日目にメスとオスのICRマウスそれぞれ5匹ずつに対して、1g/kgの粗CV抽出物を経口投与し、14日目まで中毒の兆候がないか観察した。観察期間中、いずれのマウスも死に至らず、観察期間全体を通じて10匹のマウスのいずれもが中毒の兆候を示すことはなかった。
ペプチドグルカン結合の免疫活性に対する負の電荷密度の効果
陽イオン交換クロマトグラフィーすなわちC1D2、C1D3、C1D4およびC1D5の手段を用いて、各種負電荷密度群に分画化したCVペプチドグルカンのin vitro免疫活性を比較した。図13は、C1D2、C1D3、C1D4およびC1D5にin vitroで接触させた生存マウス脾細胞の増殖率を表している。免疫の潜在的可能性における大きな相違が各種分画間に観察された。高負電荷密度のペプチド結合グルカンは、低い負電荷密度分画や分画化されていないCV抽出物に比べ、高い最大活性(すなわちプラトーレベル)および潜在的可能性(すなわち低いサンプル濃度における急峻な活性の上昇)を示した。この結果は、負の電荷密度がCV誘導ペプチド結合グルカンの免疫原性の重要な決定因子であることを示している。in vitro免疫活性は、上記例IIIに記載されているとおりに評価した。
ペプチド結合グルカンの免疫活性に対する分子量の効果
分画C1E8、C1E6、C1E4、C1E2およびC1E0に関するin vitro免疫活性を判定した。図14は、C1E8、C1E6、C1E4、C1E2およびC1E0とin vitroで接触させたマウスの腹膜マクロファージによって増加した一酸化窒素の分泌を表している。免疫活性は、特定の分子量範囲内に限定されてはいなかった。C1E8、C1E6、C1E4C1E2およびC1E0では、同様の用量反応像が認められ、プラトーは100と200μg/mlの間に達していた。最大(プラトー)活性は、分画の分子量が増大するに伴って高まっていった。in vitro免疫活性は上記例IIIに記載されているとおりに評価した。
Coriolus versicolorの部分精製抽出物の調製
部分精製Coriolus versicolor(CV)抽出物を、例Iに記載されている方法で調製した粗CV抽出物を分解して調製し、二回のクロマトグラフィーによる分離プロセスと一回のエタノール分画化プロセスを実施した。粗CV抽出溶液に対し一回目のクロマトグラフィー(例えばCMセルロースカラムなど)を実施し、陽イオン物質を除去した。得られた溶出液を二回目のクロマトグラフィー、例えばDEAEセルロースカラム、を実施して陰イオン物質を結合させた。この溶出液に対して、分子量を基準とした分離プロトコル、例えばエタノール分画化やゲルろ過などを実施した。得られた溶出液すなわち部分精製CV抽出液は、部分精製CV抽出物から陽イオンをさらに取り除く方法によってさらに精製してもよい。
CVペプチド結合グルカンにおける抗原決定因子としてのペプチド成分の役割
この例は、in vitroマイトジェン活性とCV分画基本構造単位(中性糖、ウロン酸およびタンパク/ペプチド)の組成とを関係付けるものである。図16は、in vitroマイトジェン反応の刺激指数と反応性分画の基本構造単位の含有量との間の相関関係を示している。分析したCV分画に関しては、ペプチドの含有量がマイトジェン活性と強い相関関係を示した(r=0.99、p<0.05)。マイトジェン活性とウロン酸含有量との間の相関係数は、10%レベル(r=0.61)で、ほとんど有意な値は認められなかったが、中性糖との相関関係は有意であった。in vitro免疫活性を上記例IIIのように評価した。
部分精製したCV分画の生理化学的および生物学的特徴付け
分子量の範囲と平均分子量を、分画C1D5E8、C1D5E7およびC1D5EXで定量した。(表Aを参照。)
粗CV抽出物および部分精製CV抽出物の腸壁吸収率に対する分子量の効果
粗CV抽出物および部分精製CV抽出物すなわち分画C1D5E8、C1D5E7およびC1D5EXの腸壁吸収率を、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法を用いてin vitroで定量した。天然(native)のCVサンプルとそれらのCaco−2細胞透過性化合物の分子量分布を比較した。分析は、Supedex 75 10/30カラムを連結したHPLCシステムを用いて実施した。溶出緩衝液は、200mMの塩化ナトリウム溶液pH7.0で、溶出物をUV 210nmでモニタした。
Caco−2細胞単分子層(kDa)を透過する粗CV抽出物の成分を以下の表Cに示す。
3.Caco−2細胞単層(kDa)を透過可能な分画C1D5E8、C1D5E7およびC1D5EXの成分を以下の表Dに示す。
部分精製CV抽出物のCaco−2透過性成分とin vitroで接触させたマウスクロファージ
図22は、部分精製CV抽出物またはLPSのCaco−2細胞透過性成分と接触させたマウス腹膜マクロファージによる一酸化窒素の分泌に対するin vitroの効果を表している。部分精製CVサンプルすべての細胞透過性成分が免疫学的には活性を有し、サンプルすべてがLPSの活性に比べ大きな活性を有していた。低分子量分画と中分子量分画である、C1D5E8、C1D5E7はそれぞれ、高分子量分画C1D5EXより強い活性を示した。C1D5E8、C1D5E7におけるペプチド結合グルカンの平均分子量は、約3kDa未満である。
正常なマウスに対する部分精製CV抽出物の投与
治験計画
25匹のICRマウスを5匹ずつの5群に分類した。表VIIIに示されているように、各群を以下のように処置した。
全群(群1−4)(p<0.001)で、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivoの生存脾細胞の数が増加していた。(図23Aを参照。)群1−3、すなわちC1D5E8、C1D5E7およびC1D5E4の投与群はそれぞれ、約100%脾細胞数が増加していた。C1D5EX投与群の群4(高分子量の部分精製CV抽出物)は約64%の脾細胞数の増加を示した。
全群(群1−4)で、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数が増加していた。(図23Bを参照。)C1D5EXを投与した群4のみ、生存骨髄細胞の数が統計的に有意に増加していた(p<0.002)。
免疫障害マウスに対する部分精製CV抽出物の投与
一般的材料と実験法
25匹のICRマウスを5匹ずつの5群に分類した。表IXに示されているように、これらの群を次のように処置した。群1−5のマウスに対し、上記例VIIに記載されているように免疫抑制処置を施した。群1に対しては、部分精製CV抽出物であるC1D5E8を経口投与し、群2に対しては、部分精製CV抽出物であるC1D5E7を経口投与し、群3に対しては、部分精製CV抽出物であるC1D5E4を経口投与し、群4に対しては、部分精製CV抽出物であるC1D5EXを経口投与し、さらに群5に対しては、陰性のコントロールとして、脱イオン水を経口投与した。表IXは、各群の用量と投与計画を表している。群1−5のマウスは8日目に屠殺した。
群1−4のマウスに経口投与した部分精製CV抽出物は、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を増加させた。(図24Aを参照。)群1に投与したC1D5E8は、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させた(p<0.01)(66%)。群2に投与したC1D5E7は、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させた(p<0.01)。群3に投与したC1D5E4は、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させた(p<0.05)。群4に投与したC1D5EXは、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存脾細胞の数を有意に増加させることはなかった。
全群(1−4)で、コントロールマウス(群5)に比べ、in vivo生存骨髄細胞の数の増加が認められた。(図24Bを参照。)
(近交系)のInstitute of Cancer Research (ICR)マウスは、Animal House、The Chinese Univercity of Hong Kongから提供された。これらのマウスを各檻に多くて20匹ずつ収容した。これらのマウスを、18−26℃の温度条件、約40−70%の相対湿度条件の施設で飼育した。12時間間隔で、点灯/消灯サイクルを繰り返した。これらのマウスたちには、食餌基準の齧歯類用餌を与え続けた。上記例で使用したマウスの体重は25−30gであり、週齢は8−12歳であった。
Caco−2細胞(American Type Culture Collection、Rockville、Md.から取得)(30〜50回通過)を成長させ、5%のCO2および90の%O2雰囲気中で、10%のFBS、1%の非必須アミノ酸、1%のLグルタミン、1mMのピルビン酸ナトリウム、ペニシリン(100U/ml)およびストレプトマイシン(100μg/ml)を含有した25mM Dグルコース(すべてGibbs BRL、Life Technologies Inc.、Gaithersburg、Md.から取得)を補給したDMEM培地内で37℃の温度条件下で成長させ、日常的に維持管理を行った。それらの細胞を0.05%のトリプシンEDTAを含む約70%のコンフルーエンスで収集し、フィルターごとに3×105細胞の細胞密度でTranswell細胞培養チャンバー(Costar−Corning、Rockville、MDから取得)内でI型コラーゲンを事前に塗布したポリカーボネートフィルター(3.0μmのポア径、4.71cm2成長面積)上にシードした。培地(Transwellインサート内で1.5mlおよびクラスタープレート上に2.6ml)を48時間ごとに交換した。シード後21日〜25日目に単分子層を使用した。
溶解緩衝液
8.29g NH4Cl
1.002g NaHCO3
29.2mg EDTA
すべて1Lの脱イオン化水で溶解し、pHを7.2に調整し、0.22μmの滅菌フィルターでろ過することによって滅菌した。
10%のv/v fetal bovine食塩水(FBS)、100IU/mlペニシリンおよび100μg/mlストレプトマイシンと混合したRMPI 1640培地(Gibco)。
1. Parslow T.G.、“免疫反応”、Stites D.P.、Terr A.I.、Parslow T.G.編、Medical Immunology、Appleton and Lange、ロンドン、1997年、p.63-73
2. Tsukagoshi S. Krestin(PSK)、“Cancer treatment review”、1984年11月、p131-155
3. Descotes J.、“細胞性免疫の評価”、An Introduction to Immunotoxicity、Taylor & Francis Ltd.、ロンドン、1999年、p103-110
4. Descotes J.、“免疫抑制の評価”、An Introduction to Immunotoxicity、Taylor & Francis Ltd.、ロンドン、1999年、p125-136
5. Lennernas H.、“Human intestinal permeability”、J.Pharm. Sci.、1998年87(4)、pp403-410
6. Borchardt R.T.、Hidalgo I.J.、Hillgren K.M.、Hu M、“細胞培養の医薬応用:概要”、Wilson G.編、Pharmaceutical Applications of Cell and Tissue Culture to Drug Transport、Plenum press、ニューヨーク、1991年、p1-14
7. Lee V.H.L.、“ペプチドおよびタンパク質のドラッグデリバリ”、Lee V.H.L、Hashida M.、Mizushima Y.編、Trends and Future Perspectives in Peptide and Protein Drug Delivery、Harwood academic publishers、ロンドン、1995年、p3-15
8. Ueno S.、Yoshikumi C.、Omura Y.、Fujii T.、Wada T.、Takahashi E.、Hirose F.、米国特許第4,699,787号明細書、「窒素含有多糖類」、1987年10月13日
9. Ueno S.、Yoshikumi C.、Omura Y.、Fujii T.、Wada T.、Takahashi E.、Hirose F.、米国特許第4,851,395号明細書、「窒素含有多糖類」1989年7月25日
10. Ikuzawa M.、Oguchi Y.、Matsunaga K.、Toyoda N.、Furusho T.、Fujii T.、Yoshikumi C.、米国特許第4,820,689号明細書、「糖タンパクを含有する医薬組成」、1989年4月11日
11. Ikuzawa M.、Oguchi Y.、Matsunaga K.、Toyoda N.、Furusho T.、Fujii T.、Yoshikumi C.、米国特許第5,008,243号明細書、「糖タンパクを含有する医薬組成」、1991年4月6日
12. Sugiura M.、Ohno H.、Sasaki Y.、Hama K.、米国特許第4,225,673号明細書、「抗腫瘍作用を有するグルカン」、1980年9月30日
13. Yang M.P.、Chen G.、米国特許第5,824,648号明細書、「Rnase-CV(Coriolus versicolor)」、1998年10月20日
14. Yang M.P.、Chen G.、米国特許第6,087,335号明細書、「Rnase-CV(Coriolus versicolor)」、2000年7月11日。
Claims (58)
- (1→3)結合によって結合されたグルコース分子を有し、篩い分けクロマトグラフィーによって定量された0.3kDa〜5kDaの分子量をもち、免疫刺激活性を備えた少なくともひとつのペプチド結合グルカンを有する、Coriolus versicolorの精製抽出物。
- 前記分子量が0.7kDaであることを特徴とする、請求項1に記載の精製抽出物。
- 前記平均分子量が2.6kDaであることを特徴とする、請求項1に記載の精製抽出物。
- ペプチド結合グルカンが、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって判定されるような腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項2に記載の精製抽出物。
- ペプチド結合グルカンが、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって判定されるような腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項3に記載の精製抽出物。
- 請求項1に記載の精製抽出物であって、
Coriolus versicolorをアルカリで処理し、その後で上澄みを分離するプロセスと、
前記上澄みを陽イオン交換に供するプロセスと、
前記陽イオン交換から得た溶出液を陰イオン交換に供するプロセスと、
前記陰イオン交換から得られた前期溶出液を篩い分けし、少なくともひとつのペプチド結合グルカンを有する分画を収集するプロセスとによって調製された
精製抽出物。 - 前期篩い分け法が、分子篩い分けクロマトグラフィーまたはエタノール分画化であることを特徴とする、請求項6に記載の精製抽出物。
- 前記陽イオン交換がCMセルロースカラムで実施されることを特徴とする、請求項6に記載の精製抽出物。
- 前記陰イオン交換がDEAEセルロースカラムで実施されることを特徴とする、請求項6に記載の精製抽出物。
- ペプチド結合グルカンが、水、エタノール、アセトン中で可溶性であり、クロロホルムおよびジクロロホルム中で不溶性であり、さらに非吸湿性であることを特徴とする、請求項1に記載の精製抽出物。
- (1→3)結合によって結合され、分子量が、篩い分けクロマトグラフィーによって定量された0.7〜3.0kDaの分子量をもつ、複数のグルコース分子を有するCoriolus versicolorの単離ペプチド結合グルカンであって、前記グルカンとその活性成分が、免疫刺激活性を有していることを特徴とするグルカン
- ペプチド結合グルカンのペプチド成分である、請求項11に記載の活性成分。
- ペプチド結合グルカンのグルカン成分である、請求項11に記載の活性成分。
- ペプチド結合グルカンが、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって定量される、腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項1に記載の精製抽出物。
- 平均分子量が、0.8kDaであることを特徴とする、請求項11に記載の複数のペプチド結合グルカン。
- 分子量が、0.7kDaであることを特徴とする、請求項11に記載の、ペプチド結合グルカン。
- 平均分子量が、2.6kDaであることを特徴とする、請求項11に記載の複数のペプチド結合グルカン。
- 平均分子量が、6.2kDaであることを特徴とする、請求項11に記載の複数のペプチド結合グルカン。
- 平均分子量が、3.0kDa未満であることを特徴とする、請求項11に記載の複数のペプチド結合グルカン。
- ペプチド結合グルカンが、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって定量される、腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項11に記載のペプチド結合グルカン。
- 活性成分が、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって定量される、腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項12に記載の活性成分。
- 活性成分が、Caco−2細胞単分子層トランスウェル法によって定量される、腸壁吸収が可能であることを特徴とする、請求項13に記載の活性成分。
- Coriolus versicolorのアルカリ処理と上澄みのを分離行うプロセスと、
前記上澄みを陽イオン交換に供するプロセスと、
前記陽イオン交換から得られた溶出液を陰イオン交換に供するプロセスと、
前記陰イオン交換から得られた溶出液を篩い分けし、ひとつのペプチド結合グルカンを有する分画を収集するプロセスとによって精製された、請求項11に記載のペプチド結合グルカン。 - 篩い分け法が分子篩い分けクロマトグラフィーまたはエタノール段階勾配法であることを特徴とする、請求項23に記載のペプチド結合グルカン。
- 陽イオン交換がCMセルロースカラムで実施されることを特徴とする、請求項23に記載のペプチド結合グルカン。
- 先行請求項のどれかひとつに記載の抽出物または単離ペプチド結合グルカンを有する薬理学的組成物。
- Coriolus versicolorのアルカリ処理と上澄みの分離を行うプロセスと、
前記上澄みを陽イオン交換に供するプロセスと、
前記陽イオン交換から得られた溶出液を陰イオン交換に供するプロセスと、
前記陰イオン交換から得られた溶出液を篩い分けし、分子量0.7〜5kDaをもつペプチド結合グルカンを有する分画を収集するプロセスとから、ペプチド結合グルカンを精製する方法。 - 処置プロセスに、Coriolus versicolorの子実体を浸軟するプロセスと、
前記浸軟したCoriolus versicolorの子実体をアルカリで抽出することによって抽出物を取得するプロセスと、
前記抽出物からの不溶性物質を除去するプロセスと、
前記第一の抽出物から上澄みを清澄化するプロセスと、
第三の粗抽出物を陽イオン交換に供することを特徴とする、前記第三の抽出物を取得するため上澄みを濃縮するプロセスを含むことを特徴とする、請求項27に記載の方法。 - アルカリ抽出プロセスが、アルカリ性水溶液内で浸軟したCoriolus versicolor子実体を煮沸するプロセスを含むことを特徴とする、請求項28に記載の方法。
- アルカリ性水溶液が、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムからなる群から選択されることを特徴とする、請求項29に記載の方法。
- アルカリ性水溶液の常態が、0.1N未満かまたはこれに等しいことを特徴とする、請求項29に記載の方法。
- アルカリ性水溶液の常態が0.01Nであることを特徴とする、請求項29に記載の方法。
- 不溶性物質が、ろ過によって前記第一の抽出物から除去されることを特徴とする、請求項27に記載の方法。
- 分子量0.7〜5kDaを持つペプチド結合グルカンを有する分画を、遠心分離法によって清澄化することを特徴とする、請求項29に記載の方法。
- 分子量0.7〜5kDaをもつペプチド結合グルカンを有する分画を、ロータリーエバポレーション、凍結または凍結乾燥によって濃縮することを特徴とする、請求項29に記載の方法。
- ペプチド結合グルカンを有する分画が分子量0.7〜約3.0kDaをもつことを特徴とする、請求項27に記載の方法。
- 請求項1、請求項6または請求項11のどれかひとつの抽出物、ペプチド結合グルカンまたはその活性成分と免疫系の細胞とを接触させるプロセスを有する、免疫反応を刺激する方法。
- 細胞が脾細胞または骨髄細胞で、接触により、前記細胞の増殖反応が誘導されることを特徴とする、請求項37に記載の方法。
- 前記細胞がマクロファージで、接触が前記細胞による一酸化窒素の分泌を誘導することを特徴とする、請求項37に記載の方法。
- 接触がin vivoで行われることを特徴とする、請求項37に記載の方法。
- 接触がin vitroで行われることを特徴とする、請求項37に記載の方法。
- 免疫反応を刺激するための、請求項1、請求項6、請求項11または請求項23に記載の、抽出物、精製ペプチド結合グルカンまたはその活性成分の効果的量を患者に投与するプロセスを有する、免疫系の刺激を必要とする患者を治療するための方法。
- 前記患者が免疫不全症であることを特徴とする、請求項42に記載の方法。
- 前記患者が無症候であるが免疫不全の疑いのあることを特徴とする、請求項42に記載の方法。
- 前記免疫不全症が、感染症、悪性新生物疾患、自己免疫疾患、タンパク質損失常態、免疫抑制治療、外科手術または麻酔の投与の結果として発生したことを特徴とする、請求項42に記載の方法。
- 前記感染症が、風疹、先天性風疹、麻疹、ハンセン氏病、結核、コクシジオイデス症、慢性感染症、急性ウイルス感染症、サイトメガロウイルス、多重ウイルス感染症および反復性ウイルス感染症からなる群から選択されることを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記悪性新生物疾患が、ホジキンス病、急性白血病、慢性白血病、非リンパ系ガンおよび骨髄腫からなる群から選択されることを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記自己免疫疾患が、全身性エリテマトーデス(SLE)、リューマチ様関節炎および慢性能動性肝炎からなる群から選択されることを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記タンパク質損失状態が、ネフローゼ症候群およびタンパク質損失腸症からなる群から選択されることを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記免疫抑制治療が、コルチコステロイド、細胞傷害性薬、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗胸腺細胞グロブリン、放射線、サイクロポリン、フェニトインおよびペニシラミンからなる群から選択されることを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記免疫不全症が、糖尿病、アルコール性肝硬変、栄養不良、熱傷、サルコイドーシス、脾臓摘出、鎌状赤血球病、尿毒症、加齢、亜急性硬化性汎脳炎、ダウン症候群、新生児および早産児からなる群から選択された症状の結果として発生することを特徴とする、請求項45に記載の方法。
- 前記免疫反応が、脾細胞または骨髄細胞の増殖もしくはマクロファージによる一酸化窒素の分泌を含むことを特徴とする、請求項42に記載の方法。
- 投薬プロセスに反応する症状の改善または予防を検出するための、前記患者の症状をモニターするプロセスをさらに有している、請求項42に記載の方法。
- 前記免疫不全症が、患者における獲得免疫不全症であることを特徴とする、請求項42に記載の方法。
- 前記獲得免疫不全症が、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)に対する感染の結果から発生していることを特徴とする、請求項54に記載の方法。
- 前記患者が、ヘルペスウイルス1型、ヘルペスウイルス2型、サイトメガロウイルス、水痘、アデノウイルス、EBウイルス、HTLV−I、HTLV−III、Candida albicans、Cryptococcus neoformans、Nocardia sps.、Pneumocystis carinii、Toxoplasma gondii、Isospora sp、Cyptosporidium、Giardia lamblia、Entamoeba histolytica、Mycobacterium tuberculosis、Mycobacterium avium−intracellulare、Mycobacterium kansassii、Legionella sp、Treponema sp、Treponema pallidum、Campylobacter sp、Neisseria sp、Neisseria gonorrhoeae、Shigella sp、Salmonella spおよびChlamydiaに感染しているかまたは感染している疑いがあることを特徴とする、請求項55に記載の方法。
- 投薬プロセスに反応する免疫刺激を検出するため、患者における脾細胞および/または骨髄細胞の増殖をモニターするプロセスをさらに含む、請求項42に記載の方法。
- 請求項11に記載のペプチド結合グルカンは、アミノ酸配列がSEQ ID NO:1であるというさらなる特徴を示す。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005075740A (ja) * | 2003-08-28 | 2005-03-24 | Hajime Otani | 免疫賦活化組成物、並びにそれが含まれた医薬品、動物薬、食品、飼料及び化粧品 |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2492823A1 (en) * | 2001-09-14 | 2003-03-27 | Martin F. Bachmann | In vivo activation of antigen presenting cells for enhancement of immune responses induced by virus like particles |
WO2004096113A2 (en) * | 2003-04-28 | 2004-11-11 | Medical Instill Technologies, Inc. | Container with valve assembly for filling and dispensing substances, and apparatus and method for filling |
ES2683919T3 (es) * | 2006-04-24 | 2018-09-28 | Medical Instill Technologies, Inc. | Dispositivo de liofilización que puede perforarse con una aguja y volverse a sellar, y método relacionado |
US7854936B2 (en) * | 2008-01-14 | 2010-12-21 | Active Organics, Inc. | Anti-inflammatory hydrolysate of C. versicolor |
WO2012046145A2 (en) | 2010-10-06 | 2012-04-12 | Purapharm International (Hk) Limited | Coriolus versicolor extracts, methods of preparation and uses thereof |
CN109400686A (zh) * | 2018-10-23 | 2019-03-01 | 西北农林科技大学 | 一种云芝β-葡聚糖肽的提取方法及其在肥胖或相关疾病中的应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5446830A (en) * | 1977-09-16 | 1979-04-13 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Pesticide for plant viral disease |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4051314A (en) | 1970-10-14 | 1977-09-27 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polysaccharides and method for producing same |
JPS5290614A (en) | 1975-12-18 | 1977-07-30 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of anti-tumor substance |
PH14773A (en) * | 1976-01-01 | 1981-12-09 | Kureha Chemical Ind Co Ltd | Protein-bound polysaccharides |
US4851395A (en) | 1976-07-07 | 1989-07-25 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kausha | Nitrogen-containing polysaccharide |
JPS536413A (en) | 1976-07-07 | 1978-01-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of n-containing polysaccharides |
JPS536412A (en) | 1976-07-07 | 1978-01-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of n-containing polysaccharides |
JPS5315495A (en) | 1976-07-22 | 1978-02-13 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of polysaccharides |
JPS5329977A (en) | 1976-08-30 | 1978-03-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Novel mono-nucleus mycelium of corilus species and its production |
JPS5461112A (en) | 1977-10-24 | 1979-05-17 | Ono Pharmaceut Co Ltd | Oncostatic polysaccharide* its preparation* and oncostatic drugs containing it as an effective component |
US4268505A (en) | 1978-04-13 | 1981-05-19 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Pharmaceutical composition comprising a nitrogen-containing polysaccharide and an antibiotic agent, and a method of treating an infectious disease therewith |
US4289888A (en) * | 1978-08-11 | 1981-09-15 | The Upjohn Company | 2-Decarboxy-2-tetrazolyl-4-halo-5,9-epoxy-9-deoxy-PGF1 compounds |
US4288505A (en) * | 1980-10-24 | 1981-09-08 | Ray-O-Vac Corporation | High energy density solid state cell |
JPS5932480B2 (ja) | 1981-02-10 | 1984-08-09 | 呉羽化学工業株式会社 | 新規な糖蛋白複合体 |
US4614733A (en) | 1981-12-31 | 1986-09-30 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Polysaccharides pharmaceutical compositions and the use thereof |
DE3429551A1 (de) | 1983-08-11 | 1985-02-21 | Kureha Kagaku Kogyo K.K., Nihonbashi, Tokio/Tokyo | Pharmazeutische zubereitung, die ein glycoprotein enthaelt |
US4975421A (en) | 1985-08-19 | 1990-12-04 | Bioglucan, Lp. | Soluble phosphorylated glucan: methods and compositions for wound healing |
US4739046A (en) | 1985-08-19 | 1988-04-19 | Luzio Nicholas R Di | Soluble phosphorylated glucan |
JPH0825896B2 (ja) * | 1987-06-18 | 1996-03-13 | 呉羽化学工業株式会社 | 抗レトロウィルス剤 |
JPH0643336B2 (ja) | 1988-06-30 | 1994-06-08 | 呉羽化学工業株式会社 | 血管増殖抑制剤 |
CN1008537B (zh) * | 1989-02-01 | 1990-06-27 | 上海师范大学 | 一种云芝糖肽(psp)的生产方法 |
US5374714A (en) | 1992-11-30 | 1994-12-20 | Yang; Mable M. P. | Purified coriolus versicolor polypeptide complex |
AU3230393A (en) | 1992-11-30 | 1994-06-22 | Department Of The Army | Purified coriolus versicolor polypeptide complex |
CA2156767A1 (en) * | 1994-08-25 | 1996-02-26 | Kenichi Matsunaga | Binding agent for growth factor |
JPH08208704A (ja) * | 1995-02-06 | 1996-08-13 | Kureha Chem Ind Co Ltd | 新規な糖タンパク質複合体、その製造方法、並びに抗腫瘍剤、免疫調節剤及び増殖因子阻害剤 |
JP3651697B2 (ja) | 1995-03-24 | 2005-05-25 | 株式会社アミノアップ化学 | 新規多糖体物質 |
-
2002
- 2002-09-06 US US10/236,996 patent/US7048932B2/en not_active Expired - Lifetime
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-
2004
- 2004-03-18 HK HK04102013.5A patent/HK1059088A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-11-22 US US11/285,815 patent/US8158750B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5446830A (en) * | 1977-09-16 | 1979-04-13 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Pesticide for plant viral disease |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005075740A (ja) * | 2003-08-28 | 2005-03-24 | Hajime Otani | 免疫賦活化組成物、並びにそれが含まれた医薬品、動物薬、食品、飼料及び化粧品 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HK1059088A1 (en) | 2004-06-18 |
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GB0425752D0 (en) | 2004-12-22 |
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