JP2005525120A - でんぷんの同時の糖化及び醗酵による、乳酸又はその塩の製造のための方法 - Google Patents
でんぷんの同時の糖化及び醗酵による、乳酸又はその塩の製造のための方法 Download PDFInfo
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Abstract
Description
1) 熱いスラリーが、60〜95℃、好ましくは80〜85℃の間で加熱され、そして少なくともα-アミラーゼが添加される;
2) 該スラリーは、該スラリーのゲル化を完了するために、95〜140℃、好ましくは105〜125℃の間の温度でジェットクックされる;
3) 該スラリーが、60〜95℃まで冷やされ、そして更にα-アミラーゼが加水分解を終了するために添加される。
SSF実験
培地及び培養条件
pH 5.65に適合された培養バチルス・コアギュランスが、温度及びpHコントロール(Applikon、シーダム、オランダ)を装備された、3リットルのガラス製ジャケット付き撹拌付きリアクター中で培養された。該培養は、マルトデキストリン培地の新しく調製されたバッチを含む発酵槽に、活発に発酵している培養物の180〜200mlを24時間毎に移すことによって、定期的に維持された(表1を参照)。発酵は、純粋なマルトデキストリン並びにブレア(ネブラスカ州、米国)にあるCargill Refineryからの液化でんぷん及びまたブレア(ネブラスカ州、米国)にあるCargill Refineryからのグルコースシロップで行われた。(表1を参照)。
SSF発酵のためのベンチマークは、基質としてグルコースシロップ(DE 98)での発酵によって設定された。SSF研究は、Roquette Freres からのマルトデキストリン調製物(Glucidex(商標)TM 12, DE 11〜14)で開始され、そして成功裡に終了された。2つのグルコアミラーゼ調製物が広範囲にテストされた:NovozymesからのAMG E(商標)(高分岐活性を有するグルコアラーゼ)及びGenencorからのOptimax(商標) 7525 HP(グルコアミラーゼ/プルラナーゼ)。純粋なマルトデキストリンでの典型的なSSF発酵は、2日以内に残留の糖類がなかった。しかしながら、基質としてDE 98グルコースシロップを受け取った比較培養内よりも一貫してより低い濃度において、存在する主な残留の糖類は、グルコース及びイソマルトースであった。マルトース濃度は、pH 6.4〜6.6で実施される比較可能なDE 98培養物とは対照的に低かった(<50mg/l)。かなりの量のマルトースが、Glucidex 12の添加を伴う発酵において導入された。マルトースが低いpHで発酵されえたという事実は、重要な発見であった。発酵収率(消費されたグルコースモル当たり生産された(S)-乳酸塩モル)は、100%よりもわずかに高かった。糖類のないSSFブロス中の有機酸が解析され、そしてレベルがpH 6.4〜6.6でのバチルス・コアギュランス培養と同等であった。pH 5.55より下では、SSF発酵は比較的遅かった。pH 5.90では、残留の糖類の合計における50%増加が、pH 5.55〜5.75の間で実行された培養と比較して観察された。同様の結果が、粗液化でんぷんを使用して得られた。最終段階では、成功のSSF実験が、粗液化でんぷん加水分解物で実行された。発酵時間に関して、精製されたマルトデキストリンでのSSF発酵とCargill Refineryからの液化でんぷんとの間で観察された違いはない。両方のSSF発酵は、30〜40時間で終了した。基質として、粗液化でんぷん又はマルトデキストリンを含む培養物は、典型的に180〜200g/lの(S)-乳酸を含んだ。乳酸の鏡像体純度は、99.5%よりもよかった。
SSF実験は、バチルス・コアギュランス、バチルス・サーモアミロボランス、バチルス・スミッチイ、ゲオバチルス・ステアロサーモフィラス及び4つの全ての混合物で行なわれた。これに関して、上記されたSSF実験でと同じ手続及び条件を使用し、該培養物が液化でんぷんの組み合わされた糖化及び発酵において生長されそして使用された。使用された全ての微生物(該混合培養を含む)は、高い光学的純度を有する乳酸を生産することができた。該結果が、表2にまとめられる。
Claims (9)
- でんぷんが同時の糖化及び醗酵の工程に付される乳酸又はその塩の製造のための方法であって、少なくともグルコアミラーゼを含む培地中ででんぷんを糖化すること、及び同時に微生物を使用して該でんぷんを醗酵すること、及び任意的に該培地から乳酸を分離することを含む方法において、中庸に好熱性の乳酸生産微生物が使用されることを特徴とする方法。
- 該でんぷんが、グルコアミラーゼと、プルラナーゼ及びα−アミラーゼの少なくとも1つとの混合物内で、糖化され、醗酵され、及び任意的に液化される、請求項1に記載の方法。
- 乳酸又はその塩が、95%よりもよい鏡像体純度で作られる、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記工程が、pH 3〜8.5で実行される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記工程が、pH 5〜6で、好ましくはpH 5.35〜5.80で、より好ましくはpH 5.50〜5.60で実行される、請求項4に記載の方法。
- 前記好熱性の乳酸生産微生物が、前記工程で使用されるようなpH範囲に適合されている、請求項4又は5に記載の方法。
- 前記工程が30〜70℃で実行される、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記グルコアミラーゼ、又はグルコアミラーゼと、プルラナーゼ及びα−アミラーゼの少なくとも1つとの混合物が、少なくとも2つの部分に分けて添加される、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記微生物が、菌株バチルス・コアギュランス(Bacillus coagulans)、バチルス・サーモアミロボランス(Bacillusthermoamylovorans)、バチルス・スミッチイ(Bacillus smithii)、ゲオバチルス・ステアロサーモフィラス(Geobacillus stearothermophilus)、又はそれらの混合物から得られる、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
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