JP2005323652A - 細胞吸着材の照射滅菌方法および照射滅菌された細胞吸着材 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】水不溶性担体の表面に細胞の表面抗原に対する抗体が共有結合された細胞吸着材の照射滅菌方法であって、該細胞吸着材を、アスコルビン酸塩を5mM〜2Mの濃度で含み、pHが3.0〜11、エンドトキシン濃度が0.5EU/ml以下、且つ浸透圧比が0.5〜12である水性溶液で浸漬又は湿潤化し、放射線により照射滅菌することを特徴とする。
Description
また、特許文献2では、生物学的物質を滅菌する際に、ラジカルスカベンジャーとしてアスコルビン酸、グリシングリシン等を共存させて生物学的物質を滅菌する方法が開示されている。しかしながら特許文献2においてはL−アスコルビン酸を用いて細胞吸着器を照射滅菌する詳細な検討はなされておらず、特許文献2に記載の条件だけでは抗体が照射滅菌により変性してしまい、安定して滅菌することができなかった。
即ち本発明は以下を含む。
(1)水不溶性担体の表面に細胞の表面抗原に対する抗体が共有結合された細胞吸着材の照射滅菌方法であって、該細胞吸着材を、アスコルビン酸塩を5mM〜2Mの濃度で含み、pHが3.0〜11、エンドトキシン濃度が0.5EU/ml以下、且つ浸透圧比が0.5〜12である水性溶液で浸漬又は湿潤化し、放射線により照射滅菌することを特徴とする細胞吸着材の照射滅菌方法。
(2)細胞吸着材が入口と出口を有する細胞吸着器に充填されている上記(1)に記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(3)抗体が血液中の白血球の表面抗原に対する抗体である上記(1)又は(2)に記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(4)抗体が細胞性免疫に関与する細胞の表面抗原に対する抗体である上記(1)〜(3)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(5)抗体がヘルパーT細胞の表面抗原に対する抗体である上記(1)〜(4)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(6)抗体が抗ヒトCD4抗体である上記(1)〜(5)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(7)水不溶性担体の表面への共有結合が、抗体のFc部分でなされている上記(1)〜(6)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(8)水性溶液の酸素濃度が、20ppm未満である上記(1)〜(7)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(9)照射滅菌時の細胞吸着材の温度が、−80〜60℃である上記(1)〜(8)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(10)水性溶液に芳香族アルコール及び/またはパラベンを含有する上記(1)〜(9)の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
(11)上記(1)〜(10)の何れかに記載の照射滅菌方法により滅菌された細胞吸着材。
(12)上記(1)〜(10)の何れかに記載の照射滅菌方法により滅菌された細胞吸着材が充填された細胞吸着器。
本発明でいう細胞吸着器とは、水不溶性担体の表面に細胞の表面抗原に対する抗体が共有結合された細胞吸着材が入口と出口を有する容器に充填されてなる。容器の入口から被処理液を導入し、細胞吸着材に接触させた後に出口から処理された液を回収することによって、目的細胞が吸着された処理後の液が得られる。また、本発明は、被処理液を容器内に導入し、細胞吸着材に接触させた後に細胞吸着材に吸着された目的細胞を分離回収して、処理液中から目的とする細胞のみを得る場合にも有効に用いられる。
このような低酸素濃度の水性溶液は、例えば、減圧脱気する或いは亜硫酸塩を添加する等の公知の方法により調整すればよい。
ガラス製のフラスコにN‐ヒドロキシメチルヨードアセトアミド0.6g、濃硫酸5.7ml及びニトロベンゼン7.2mlを加えて常温にて撹拌溶解し、更にパラホルムアルデヒド0.036gを加え、撹拌した.これにポリプロピレンからなる不織布(平均繊維直径3.5μm)0.3gを入れ常温にて24時間遮光反応した。24時間反応後不織布を取り出し,エタノール及び純水にて洗浄し、これを真空乾燥して活性化不織布を得た。
この活性化不織布を直径0.68cmの円に切断したもの4枚を、カルシウム、マグネシウムを含まないリン酸緩衝液(以下PBS(−))に溶解した抗ヒトCD4モノクローナル抗体液(以下抗ヒトCD4液)400μL(16μg/400μL)に常温で2.5時間浸し、モノクローナル抗体(以下抗体)を固定後、PBS(−)2mlで洗浄した.次に0.2%ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート/PBS(−)溶液(以下Tween20溶液)を加え常温で2.5時間浸漬した後、PBS(−)2mlで洗浄し、目的の細胞吸着材を得た。
入口と出口を有する容量1mlの容器に上記細胞吸着材4枚と、滅菌保護液としてエンドトキシン濃度0.020EU/mL、pH=7.0、浸透圧比1.0である10mMアスコルビン酸PBS(−)溶液(分子量176)を充填し細胞吸着器を作成した。この細胞吸着器に25kGyのγ線を照射して滅菌した。
〔細胞吸着性の評価〕
このときのCD4(+)細胞の吸着率を、フローサイトメーター(COULTER EPICS ELITE ESP ASSYNO.66056078)を用いてフローサイトメトリー法で測定したところCD4(+)細胞の吸着率は94%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は23%、Bリンパ球の吸着率は24%、血小板の吸着率は16%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は40%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は14%、Bリンパ球の吸着率は17%、血小板の吸着率は0.5%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は90%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は11%、Bリンパ球の吸着率は38%、血小板の吸着率は21%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は41%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は20%、Bリンパ球の吸着率は17%、血小板の吸着率は5.0%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は89%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は29%、Bリンパ球の吸着率は36%、血小板の吸着率は8.0%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は7.9%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は9.0%、Bリンパ球の吸着率は40%、血小板の吸着率は0.1%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は91%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は23%、Bリンパ球の吸着率は29%、血小板の吸着率は8.0%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は12%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は9.0%、Bリンパ球の吸着率は37%、血小板の吸着率は5.0%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は23%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は25%、Bリンパ球の吸着率は34%、血小板の吸着率は57%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は15%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は20%、Bリンパ球の吸着率は35%、血小板の吸着率は0.0%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は94%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は10%、Bリンパ球の吸着率は22%、血小板の吸着率は20%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は30%であった。またこのときCD8(+)細
実施例1、2と比較例1,2との比較から、滅菌保護液のアスコルビン酸濃度が5mM〜2Mの範囲内であればCD4(+)細胞を特異的に吸着できるのに対して、その範囲外であるときはCD4(+)細胞を特異的に吸着できないことが分かる。
また、実施例1〜5と比較例3、4の対比から、滅菌保護液のpHが3〜11の範囲内であれば、CD4(+)細胞を特異的に吸着できるのに対して、その範囲外であるときはCD4(+)細胞を特異的に吸着できない。
さらに、実施例1〜5と比較例5との対比から、滅菌保護液のエンドトキシン濃度が0.5EU/ml以下であれば、CD4(+)細胞を特異的に吸着できるのに対して、それ以上であるときはCD4(+)細胞を特異的に吸着できない。
さらにまた、実施例1〜5と比較例2、7との対比から、滅菌保護液の浸透圧比が0.5〜12であればCD4(+)細胞を特異的に吸着できるのに対して、その範囲外であるときはCD4(+)細胞を特異的に吸着できない。
このときのCD4(+)細胞の吸着率は3.6%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は8.0%、Bリンパ球の吸着率は23%、血小板の吸着率は19%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD14(+)細胞の吸着率は83.4%であった。またこのとき顆粒球の吸着率は7.2%、血小板の吸着率は0.0%でありCD14(+)細胞を特異的に吸着できた。
このときのCD14(+)細胞の吸着率は10.8%であった。またこのとき顆粒球の吸着率は1.7%、血小板の吸着率は43.3%でありCD14(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
ことのときのCD25(+)細胞の吸着率は85.0%であった。またこのとき顆粒球の吸着率は5.8%、血小板の吸着率は5.7%でありCD25(+)細胞を特異的に吸着できた。
ことのときのCD25(+)細胞の吸着率は21.8%であった。またこのとき顆粒球の吸着率は4.6%、血小板の吸着率は0.5%でありCD25(+)細胞を特異的に吸着できなかった。
このときのCD4(+)細胞吸着率は、99.0%であった。またこのときCD8(+)細胞の吸着率は30%、Bリンパ球の吸着率は30%、血小板の吸着率は23%であり、CD4(+)細胞を特異的に吸着できた。
Claims (12)
- 水不溶性担体の表面に細胞の表面抗原に対する抗体が共有結合された細胞吸着材の照射滅菌方法であって、該細胞吸着材を、アスコルビン酸塩を5mM〜2Mの濃度で含み、pHが3.0〜11、エンドトキシン濃度が0.5EU/ml以下、且つ浸透圧比が0.5〜12である水性溶液で浸漬又は湿潤化し、放射線により照射滅菌することを特徴とする細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 細胞吸着材が入口と出口を有する細胞吸着器に充填されている請求項1に記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 抗体が血液中の白血球の表面抗原に対する抗体である請求項1又は2に記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 抗体が細胞性免疫に関与する細胞の表面抗原に対する抗体である請求項1〜3の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 抗体がヘルパーT細胞の表面抗原に対する抗体である請求項1〜4の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 抗体が抗ヒトCD4抗体である請求項1〜5の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 水不溶性担体の表面への共有結合が、抗体のFc部分でなされている請求項1〜6の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 水性溶液の酸素濃度が、20ppm未満である請求項1〜7の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 照射滅菌時の細胞吸着材の温度が、−80〜60℃である請求項1〜8の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 水性溶液に芳香族アルコール及び/またはパラベンを含有する請求項1〜9の何れかに記載の細胞吸着材の照射滅菌方法。
- 請求項1〜10の何れかに記載の照射滅菌方法により滅菌された細胞吸着材。
- 請求項1〜10の何れかに記載の照射滅菌方法により滅菌された細胞吸着材が充填された細胞吸着器。
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JP2008125932A (ja) * | 2006-11-24 | 2008-06-05 | Asahi Kasei Kuraray Medical Co Ltd | 特定細胞吸着器 |
JP2008206915A (ja) * | 2007-02-28 | 2008-09-11 | Toray Ind Inc | 化合物の滅菌方法およびこれを用いた医療材料の製造方法 |
WO2010061580A1 (ja) * | 2008-11-25 | 2010-06-03 | 旭化成クラレメディカル株式会社 | Hla-dr陽性単球の選択除去器及びその製造のための抗酸化剤の使用 |
JP2012506269A (ja) * | 2008-10-24 | 2012-03-15 | フレゼニウス メディカル ケア ドイチュランド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング | 滅菌のための、特に吸着器の滅菌のための方法および装置 |
CN102784616A (zh) * | 2012-08-22 | 2012-11-21 | 江苏大学 | 一种尼泊金甲酯表面印迹吸附剂及其制备方法和应用 |
WO2015109246A1 (en) | 2014-01-17 | 2015-07-23 | Repligen Corporation | Sterilizing chromatography columns |
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2004
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Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008125932A (ja) * | 2006-11-24 | 2008-06-05 | Asahi Kasei Kuraray Medical Co Ltd | 特定細胞吸着器 |
JP2008206915A (ja) * | 2007-02-28 | 2008-09-11 | Toray Ind Inc | 化合物の滅菌方法およびこれを用いた医療材料の製造方法 |
JP2012506269A (ja) * | 2008-10-24 | 2012-03-15 | フレゼニウス メディカル ケア ドイチュランド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング | 滅菌のための、特に吸着器の滅菌のための方法および装置 |
WO2010061580A1 (ja) * | 2008-11-25 | 2010-06-03 | 旭化成クラレメディカル株式会社 | Hla-dr陽性単球の選択除去器及びその製造のための抗酸化剤の使用 |
JP5484354B2 (ja) * | 2008-11-25 | 2014-05-07 | 旭化成メディカル株式会社 | Hla−dr陽性単球の選択除去器及びその製造のための抗酸化剤の使用 |
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CN102784616B (zh) * | 2012-08-22 | 2014-03-12 | 江苏大学 | 一种尼泊金甲酯表面印迹吸附剂及其制备方法和应用 |
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