JP6621414B2 - 濾過装置 - Google Patents

Description

本発明は、血液又は血液成分から物質を除去する濾過装置８であって、該濾過装置８が注入口及び注出口を有するハウジングと、少なくとも上記ハウジング内に設置された、第１のリガンドによって連結された第１の吸着材と、少なくとも上記ハウジング内に設置された、第２のリガンドによって連結された第２の吸着材とを備え、上記注入口から注出口へと上記濾過装置８を通過する上記血液又は血液成分から、上記第１のリガンドが遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）を除去するものであり、上記第２のリガンドが微小胞（ＭＶ）を除去するものであり、上記第１のリガンド及び第２のリガンドが互いに異なり、上記第１の吸着材及び第２の吸着材が互いに同一又は異なる、濾過装置に関する。

赤血球輸血は命を救うことができるが、リスクがないわけではない。危篤状態の患者では、赤血球輸血は罹病率及び死亡率の増加を伴い、罹病率及び死亡率は輸血前の赤血球の長期保存により増加する場合がある。

最近の研究は、溶血が赤血球輸血を受けた後の死亡率及び罹病率の増加と関連する１つの基本メカニズムを表すという認識の高まりを支持している。

この概念は、外傷患者がヘモグロビン−ＮＯ−スカベンジング反応によって引き起こされるヘモグロビン系酸素運搬体によって発症する高血圧及び多臓器傷害を受けることを示唆する臨床試験の所見、並びに異常ヘモグロビン症及び溶血性貧血を伴う患者における脈管障害の合併症の臨床所見に端を発する。

溶血は、特に使用前の長期保存に際して赤血球輸血により直面する問題である。溶血は、遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）の放出をもたらす。ｆＨｂはヘムの供給源であり、活性酸素種によって引き起こされる傷害の増加に寄与する場合がある。

好気性生物には、活性酸素種に対する保護を提供する酵素オキシダント防御（正：enzy defense）系が与えられている。しかしながら、活性酸素によって引き起こされる傷害は、酸化還元活性を有する鉄によって大幅に拡大され得る。毒性を持ち得る酸化還元活性を有する鉄の豊富な供給源の１つはヘムであり、内因性及び外因性の両方のヘムが、相乗的にオキシダントが媒介する細胞傷害を増大する可能性がある。

ヘムは非常に疎水性であり、容易に細胞膜に入り込んでオキシダントが媒介する殺傷に対する細胞の感受性を大幅に高める。また、ヘムは、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の酸化に対して触媒として作用し、血管内皮に対して毒性の生成物を生じる。

ヘムの毒作用は、幾つかの病理に重要な場合がある。これらは、血管内溶血（腎不全をもたらす場合がある）等の急性状態のみならず、病巣内の鉄の蓄積（おそらくは、エリスロサイトに由来し、これはアテローム硬化性病変を誘導することが知られている）が見られるアテローム形成等のより潜行性のプロセスを含む。

血漿中の遊離ヘモグロビンは、酸化されると血管内皮にヘムを供給し、オキシダントが媒介する細胞傷害に対する細胞の感受性を大幅に増大する。

赤血球輸血と関連して観察される有害作用に寄与する第二の要因は、いわゆる微小胞（ＭＶ）である。エクトソーム（ectosomes）とも記載されるＭＶは、エリスロサイト、血小板、白血球、又は内皮細胞によって血液中に放出される１μｍ以下のリン脂質小胞の集団である。ＭＶの産生は非常に制御されたプロセスであり、細胞刺激及びアポトーシスを含む様々な刺激によって誘発される。ＭＶは細胞塵埃（cell dust）として最初に説明されたが、現在では血栓症及び鬱血、炎症、血管及び免疫の機能、アポトーシス、又は更には表面タンパク質の移行による細胞間情報伝達等の幅広い生体活動に関与すると認識されている。

また、ＭＶは健康な個体でも検出され得るが、血栓リスクの上昇、血管障害又は転移を伴う様々な疾患でＭＶの増加が観察されている。

典型的には、血液又は血液成分（例えば、赤血球細胞、血小板、血漿）等の血液製剤は、それらを必要とする対象に投与される前に更なる処理及び保存を経る。血液又は血液成分の品質は保存時間の増加と共に低下し得ることが知られている。特に、血液製剤中のｆＨｂ及びＭＶの濃度は、保存時間の増加に伴って高まる。

特に、血液バンクの状態下では、赤血球は一般的に「保存損傷（storage lesion）」と呼ばれる進行性の構造上の及び生化学的な変化を経る。赤血球（エリスロサイトとも示される）は、両凹の円板から硬直したウニ状赤血球（sphero-echinocyte）への進行性の細胞の変形を示し、針状物の先端からのＭＶの放出及び血液製剤中のＭＶの蓄積を伴う。さらに、ＡＴＰの枯渇、ｐＨの酸性化、及び溶血があり、溶血はｆＨｂの蓄積をもたらす。

保存中の赤血球細胞膜の修飾はＡＴＰ枯渇及び酸化によって誘発され、これはバンド３における変化に集中し、赤血球の変形能、浸透圧抵抗、及び輸血後の生存に影響を及ぼすであろう膜の剥離及び破壊をもたらす。

赤血球のＭＶ形成は、血液バンクの初期に起こる膜リモデリングの連続的な過程であり、赤血球上のホスファチジルセリンの暴露を抑制する。赤血球濃厚液に見られるＭＶは、一般的には赤血球に起因し、保存時間に伴ってその数を徐々に増加する。

しかしながら、ドナーによる血液供給が変動するのに対し、血液製剤に対する需要は増加しており、血液製剤の定期的な不足が生じている。そのため、保存血液製剤の品質及び安全性を改善することは、需要増加に対処するために重要である。

したがって、血液製剤を必要とする対象への投与に先立って全血又は血液成分等の血液製剤、特に赤血球を含む血液製剤におけるｆＨｂ及びＭＶの含有量を減少することが非常に望ましい。これにより、長期保存後にも血液製剤の安定性及び品質を改善するであろう。

保存された血液製剤から細胞片及び望ましくない物質を除去するため、保存後で、かつ投与に先立って、特に赤血球を含む血液又は血液成分の「洗浄」が試みられてきた。そのため、生理食塩水に赤血球を再懸濁した後に遠心分離を行い、上清から分離することが試みられてきた。しかしながら、この方法は、レシピエントに対する感染症リスクを回避するために無菌状態で行われなければならないことから、非常に手間がかかるうえ高価である。

一方で、（例えば、嫌気的条件の下での赤血球を含有する血液製剤の保存による）保存損傷の発生の遅延を目的とする方法は、既に血液を採取した後に、したがって血液製剤の保存前に全ての血液製剤の処理を必要とする。そのため、このアプローチは、長期保存に起因して上記処理を必要とする血液製剤のみを選択的に処理することができない。代わりに、保存時間に関わらず全ての血液製剤を処理する。これも費用を増大し、また、操作時間の延長をもたらす可能性がある。

したがって、血液製剤を必要とする対象に対する投与に先立って保存された血液製剤、特に赤血球を含む製剤の品質及び安全性を改善する方法及び装置に対する要求が存在する。

本発明の一実施の形態によれば、血液又は血液成分から物質を除去する濾過装置８であって、該濾過装置８が注入口及び注出口を有するハウジングと、少なくとも上記ハウジング内に設置された、第１のリガンドによって連結された第１の吸着材と、少なくとも上記ハウジング内に設置された、第２のリガンドによって連結された第２の吸着材とを備え、上記注入口から注出口へと上記濾過装置８を通過する上記血液又は血液成分から、上記第１のリガンドが遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）を除去するものであり、上記第２のリガンドが微小胞（ＭＶ）を除去するものであり、上記第１のリガンド及び第２のリガンドが互いに異なり、上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材が互いに同一又は異なる、濾過装置が提供される。

任意に、上記第１の吸着材が上記第２のリガンドによって連結されておらず、上記第２の吸着材が上記第１のリガンドによって連結されていない。

上記第１の吸着材及び／又は上記第２の吸着材がポリマーを含むことができ、上記ポリマーがポリメタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーを含む。好ましいポリマーはポリメタクリレートを含むポリマーである。

ｆＨｂを除去する上記第１のリガンドが、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーを含むことができる。

ＭＶを除去する上記第２のリガンドが、少なくとも１つのＲ−ＮＨ_２基（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）_ｎであり、ｎは１〜５、好ましくは１〜３、より好ましくは１〜２である）を含むことができる。上記第１の吸着材は結合反応によって少なくとも上記第１のリガンドに連結し、及び／又は、上記第２の吸着材は結合反応によって少なくとも上記第２のリガンドに連結することができる。

上記第１の吸着材及び／又は上記第２の吸着材が、ビーズ及び繊維からなる群から選択することができる。

上記ビーズが約１００μｍ〜約４００μｍ、例えば、約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有することができる。

上記ビーズが約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えることができる。

そのため、上記ビーズは約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、及び／又は約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備える。また、上記ビーズは、約１００μｍ〜約４００μｍの直径を有し、及び／又は約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備える。

上記濾過装置８が約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えるビーズである第１の吸着材を含むことができる。代替として又はさらに、上記濾過装置８が約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えるビーズである第２の吸着材を含むことができる。

上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材を、約１〜約２の比率（体積：体積）で上記ハウジング内に設けることができる。

上記第１の吸着材は上記ハウジング内に少なくとも１つの層を形成してもよく、上記第２の吸着材は上記ハウジング内に少なくとも１つの層を形成することができる。上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材によって形成される上記層は、積み重ねることができる。

上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材は、ハウジング内に実質的に均等に分散されてもよい。

上記濾過装置８を輸血システムへの統合に対して適合することができ、及び／又は、
上記濾過装置８が血液又は血液成分を含む容器に接続可能である。

上記濾過装置８のハウジングが長さ及び直径を有することができ、長さ：直径の比率が約２〜約４、好ましくは約２〜約３、より好ましくは約３であり、任意に上記ハウジングがカラムであるか、又はカートリッジである。

上記濾過装置８は上記ハウジング内に設置されたネットを更に備えることができ、上記ネットが第１の吸着材及び／又は第２の吸着材を収容し、上記ネットが上記ハウジングからの上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材の捕捉及び／又は除去に対して適合する。

濾過対象の上記血液成分が赤血球を含むことができ、好ましくは上記血液成分が赤血球濃厚液（ＲＣＣ）である。

更なる実施の形態によれば、少なくとも１つの本発明による濾過装置８を備えた、輸血システムが提供される。

本発明による１つの実施の形態は、血液及び／又は血液成分からｆＨｂ及びＭＶ等の物質の除去に対する本発明による濾過装置８の使用を提供する。

また、更なる実施の形態によれば、血液又は血液成分からｅｘ ｖｉｖｏで物質を除去する方法であって、（ａ）本発明による濾過装置８又は本発明による輸血システムを準備する工程と、（ｂ）注入口から注出口へ、上記濾過装置８に血液又は血液成分を通過させる工程とを含む、方法が提供される。

本発明による方法に供される血液成分は、赤血球を含むことができ、好ましくは上記血液成分が赤血球濃厚液（ＲＣＣ）である。

本発明による方法に供される血液又は血液成分は、保存血又は保存血液成分とすることができる。したがって、上記血液又は上記血液成分を濾過に先立って保存することができる。

また更なる実施の形態によれば、キットが提供され、該キットは、血液又は血液成分から物質を除去する第１の濾過装置８であって、注入口及び注出口を有するハウジングと、上記ハウジング内に設置された少なくとも第１の吸着材とを備え、第１の吸着材が、上記注入口から上記注出口へと上記第１の濾過装置８を通過する血液又は血液成分からｆＨｂを除去する少なくとも１つの第１のリガンドによって連結されている、第１の濾過装置と；血液又は血液成分から物質を除去する第２の濾過装置８であって、注入口及び注出口を有するハウジングと、上記ハウジング内に設置された少なくとも第２の吸着材とを備え、第２の吸着材が、上記注入口から上記注出口へと上記第２の濾過装置８を通過する血液又は血液成分からＭＶを除去する少なくとも１つの第２のリガンドによって連結されている、第２の濾過装置と；を備え、上記第１のリガンド及び第２のリガンドが互いに異なり、上記第１の吸着材及び上記第２の吸着材が互いに同一又は異なる。任意に上記第１の吸着材が上記第２のリガンドに連結されておらず、上記第２の吸着材が上記第１のリガンドに連結されていない。

上記第１の濾過装置８及び／又は上記第２の濾過装置８が輸血システムへの統合に対して適合することができる。上記第１の濾過装置８及び／又は上記第２の濾過装置８が血液又は血液成分を含む容器に接続可能である。

上記第１の濾過装置８及び上記第２の濾過装置８が輸血システムへ統合することができ、血液又は血液成分を含む容器に接続可能である。

本発明による濾過装置８は、第１の吸着材及び／又は上記第２の吸着材がビーズを含む又はビーズからなり、更に該ビーズが固定化されている、濾過装置８であってもよい。固定化は、焼結（sinterization）によって又は凝集によって行われてもよい。固定化されたビーズを濾過装置８のハウジングに設置してもよい。

本発明による輸血システムの例を示す図である。

定義
本明細書で参照される特許及び科学文献は、当業者に利用可能な知識を立証する。本明細書で参照される特許及び科学文献は、各々が具体的かつ個別に引用することにより本明細書の一部をなすと指示される場合と同じ程度に引用することにより本明細書の一部をなす。

本出願を通して使用される段落及び見出しは、限定と解釈されない。

「ａ」、「ａｎ」の冠詞は、その物品の１又は２以上（すなわち、少なくとも１つ）の文法上の目的物を指すため本明細書において使用される。例として、「吸着材（a sorbent material）」は、別段の指示がない限り１つの吸着材又は２以上の吸着材を意味する。

「及び／又は」の用語は、別段の指示がない限り「及び」又は「又は」のいずれかを意味するため本明細書において使用される。

列挙される値と共に本明細書で使用される「約」の用語は、その列挙される値を意味し、また列挙される値の±１０％の範囲を包含する。

必要に応じて、本明細書を通して更なる定義及び説明を提供する。

詳細な説明
本発明は、血液及び／又は血液成分から物質を除去する濾過材、濾過装置８、キット、及び方法に関する。また、本発明は、少なくとも１つの本発明による濾過装置８を備えた輸血装置に関する。

上記血液は全血であってもよい。血液成分の例は、赤血球、血小板、及び血漿である。赤血球は赤血球濃厚液（ＲＣＣ）の形態で又は濃厚赤血球（ＰＲＣ）として提供されてもよい。好ましい血液成分は赤血球であり、該赤血球はＲＣＣであることが最も好ましい。

いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、本発明者らは、驚いたことに、本発明による材料、装置８、方法、キット及び輸血システムが、輸血を受ける対象の罹病率及び死亡率の増加に寄与し得る、ＮＯスカベンジャーであるｆＨｂ及びＭＶの非常に効率的な血液及び血液成分からの除去を可能とすることを見出した。幾つかの実施形態によれば、１又は複数の追加の物質を血液又は血液成分から除去することができる。該１又は複数の追加の物質は、可溶性物質、サイトカイン、生物活性脂質又は細胞フラグメントからなる群から選択され得る。

上記除去は、ｆＨｂ及びＭＶの除去に先立って保存された血液又は血液成分において特に効率的であったことが分かった。そのため、本発明の濾過装置８、方法、キット及び輸血システムは、保存された血液又は血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの除去に特に適している。

本発明者らは、驚いたことに、本発明の濾過材、装置８、方法、キット及び輸血システムが、少なくとも５日間、少なくとも１０日間、少なくとも１５日間、少なくとも２０日間、少なくとも３０日間、少なくとも３５日間、少なくとも４０日間、４１日間、又は最大４２日間保存された血液又は血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの効率的な除去を可能とすることを見出した。上記保存は血液バンクの条件下で生じることが好ましい。幾つかの例では、上記血液又は血液成分を、約１日間〜約４２日間、例えば、約５日間〜約３５日間、約１０日間〜約３０日間、約３０日間〜約４０日間、又は約１６日間〜約２５日間に亘って保存した。上記血液又は血液成分は血液バンクの条件下で保存されていることが好ましい。

このように、本発明による材料、装置８、方法、及び他の材料は、保存された血液及び血液成分の品質を改善し、保存血液製剤に典型的に観察されるｆＨｂ及びＭＶの含有量の増加によって引き起こされる輸血レシピエントにおける有害作用のリスクを減少するため有利に使用され得る。

したがって、本発明の濾過材、装置８、方法、キット及び輸血システムは、血液又は血液成分の品質、特にｆＨｂ及びＭＶの含有量が重大なパラメーターである全ての手順において非常に有用である。手順の例は、輸血が必要な対象に血液又は血液成分を供給する輸血、特に心臓及び小児科の手術における輸血、また術後の非洗浄自己血（すなわち、輸血を受ける同じ個体から回収される血液）の輸血である。

さらに、本発明による濾過材、装置８、方法、キット及び輸血システムを、保存した血液又は血液成分に対して容易かつ安全に適用することができる。試料処理時間、操作及び取り扱いは、従来技術の「洗浄」アプローチと比較して著しく減少される。

追加の利点として、本発明による濾過材、装置８、方法、キット及び輸血システムは、「オンデマンド」の保存血又は保存血液成分の濾過を可能とする。そのため、例えば保存前に血液又は血液成分を処理することによってｆＨｂの形成を回避することを目的とする従来技術の方法とは対照的に、本発明の手段及び方法を、必要に応じて（例えば、血液の又は血液成分の保存時間、及び血液又は血液成分を受ける対象の状態に応じて）保存後に血液又は血液成分に対して選択的に適用することができる。

本発明の材料、装置８、方法、キット及び輸血システムを以下により詳細に説明する。

以下の段落の見出しは、本発明の開示を限定すると解釈されるものではない。

濾過装置
本発明は、該濾過装置８を通過する血液及び血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの効率的な除去を可能とする濾過装置８を提供する。

幾つかの実施形態によれば、本発明は、本発明による濾過装置８の詳細な説明と関連して以下に更に詳述される少なくとも１つの第１のリガンド及び／又は第２のリガンドによって連結される吸着材を含む又はそれからなる濾過材も提供する。

ハウジング
典型的には、本発明による濾過装置８は注入口及び注出口を有するハウジングを備える。該ハウジングは、注入口から注出口へと血液及び血液成分が通過することができるように適合され得る。

上記ハウジングは、当該技術分野で知られている任意の好適な材料で作製され得る。したがって、該ハウジングは、例えば、軟質材料（ポリ塩化ビニル等）製、硬質材料（ポリカーボネート又はポリアクリレート等）製、又はそれらの組合せで作製されてもよい。

また、上記ハウジングは長さ及び直径を有する場合がある。該ハウジングの長さ及び直径は、濾過の間の液流量（liquid flow）に影響を与える場合があり、また上記濾過装置８を通過する血液又は血液成分からの物質の除去効率に影響を与える場合もある。本発明者らは、約２〜約４のハウジングの長さ：ハウジングの直径の比率が液流量（ｍｌ／分）に有利に影響を及ぼすことを見出した。そのため、好ましい実施形態によれば、ハウジングの長さ：ハウジングの直径の比率は約２〜約４である。該比率は、約２〜約３が好ましく、該比率は約３であることがより好ましい。約２〜約３の比率では、血液成分、特にＲＣＣの最適な流量に達し得ることがわかった。

上記比率を計算するため、ハウジングの長さをハウジングの直径で除する。長さ及び直径は、幾何学の一般的な法則を適用して特定される。例えば、ハウジングの長さはハウジングの上端とハウジングの下端との距離を特定することによって特定され得る。ハウジングの上端は注入口が設置される末端とすることができ、ハウジングの下端は注出口が設置される末端とすることができる。

円形断面を有するハウジングの直径は、円の中心を通り、その終点が円上にある任意の直線分の長さを特定することによって特定され得る。凸面の断面形状については、直径は、その境界に接する２つの反対側の平行線の間に形成され得る最も長い距離を特定することによって特定され得る。

濾過装置８は、注入口から注出口へと該濾過装置８を通って濾過される血液又は血液成分の約５ｍｌ／分〜約１２ｍｌ／分、好ましくは約８ｍｌ／分〜約１１ｍｌ／分、最も好ましくは約１０ｍｌ／分〜約１１ｍｌ／分の流量を可能とする。

上記ハウジングはカートリッジ又はカラムであってもよい。

吸着材
少なくとも１つの吸着材が上記ハウジング内に設置される。例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つ、又は少なくとも４つの吸着材、例えば１つ、２つ、３つ、又は４つの吸着材を上記ハウジング内に設置することができる。しかしながら、２つの吸着材を上記ハウジング内に設置することが好ましい。時には、第１の吸着材が上記ハウジング内に設置される。代替として又はさらに、第２の吸着材を上記ハウジング内に設置することができる。典型的には、第２の吸着材を第１の吸着材に加えて上記ハウジング内に設置することができる。しかしながら時には、例えば、少なくとも２つの濾過装置８がキットの形態で提供される場合、第１の吸着材は第１の濾過装置８の第１のハウジングに提供されてもよく、第２の吸着材は第２の濾過装置８の第２のハウジングに提供されてもよい。

本明細書で使用される「吸着材」は、その材料、すなわち血液若しくは血液成分、又はそれらの両方からｆＨｂ及び／又はＭＶを除去するリガンドによる連結に適した任意の材料への物質の収着を可能とする（すなわち、吸着及び／又は吸収、吸着が好ましい）任意の材料（例えば、化合物又は組成物）であってもよい。

「物質」は、ｆＨｂ、ＭＶ、他のＮＯスカベンジャー、可溶性物質、サイトカイン、生物活性脂質、細胞フラグメント、又はそれらの組合せ等の血液又は血液成分から除去される物質とすることができる。上記物質はｆＨｂ、ＭＶ、又はそれらの両方であることが好ましい。

本発明による濾過装置８に使用される吸着材は、血液濾過用途における使用に適する場合がある。

例えば、本発明の濾過装置８に使用される吸着材（第１の吸着材及び／又は第２の吸着材等）は、ポリメタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマー等のポリマーを含んでもよく又は本質的にそれらからなってもよい。好ましい吸着材は、ポリメタクリレートを含む又は本質的にそれからなる。ポリメタクリレートを含む又は本質的にそれからなる吸着材は、本明細書では「ポリメタクリレート系」であると示される場合がある。本発明の濾過装置８で使用される吸着材は、メタクリレート又はそのコポリマーを含んでもよく又は本質的にそれからなってもよい。

幾つかの実施形態によれば、上記吸着材は、１又は複数のカップリング反応（例えば、限定されないが、いずれもそれらの全体が引用することにより本明細書の一部をなす、Prog. Polym. Sci. 25 (2000) 711-779又はChem. Commun., 1998, 2275-2286に記載される）によって特定の化学基で官能化されてもよい。

限定ではなく例として、好ましい実施形態によれば、吸着材はメタクリレートの架橋コポリマー、例えばオキシラン基を含有するメタクリレートの架橋コポリマー（Ｓｅｐａｂｅａｄｓ（商標）ＥＣ−ＥＰ又はＲｅｌｉＺｙｍｅ（商標）ＥＰ４０３等、いずれもイタリア、ビナスコ（MI）のResindion SRLより商業的に入手可能）であってもよい。同様に、限定ではなく例として、好ましい実施形態によれば、上記吸着材は、メタクリルアミドのコポリマー、Ｎ，Ｎ’−メチレン−ビス（アクリルアミド）、及びオキシラン基、エポキシドポリマー結合を持つモノマー（Ｅｕｐｅｒｇｉｔ（商標）等、ドイツのシュタインハイムのSigma-Aldrich Chemie GmbHより商業的に入手可能）であってもよい。

上記ハウジング内に設置される吸着材はビーズ又は繊維であってもよく、ビーズであることが好ましい。少なくとも１つの吸着材（例えば、第１の吸着材又は第２の吸着材）はビーズであってもよく、少なくとも１つの吸着材（例えば、第１の吸着材又は第２の吸着材）は繊維であってもよい。好ましい実施形態では、２以上の全ての吸着材がビーズを含む又はビーズからなる。

上記ビーズは固定化されたビーズであってもよい。固定化は、焼結によって又は凝集によって実施され得る。固定化されたビーズは、濾過装置８のハウジングに取り付けられてもよい。

上記ビーズは、約１００μｍ〜約４００μｍ、例えば約１５０μｍ〜約３５０μｍ、又は約２００μｍ〜約３００μｍの粒径を有してもよい。約１００μｍ〜約２００μｍの粒径も同様に好ましい。幾つかの実施形態によれば、上記粒径は商業的に入手可能なＭａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（MalvernのＨｙｄｒｏ ２０００ＭＵサンプリングユニット及びＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００ソフトウェアを備えたＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００）によって特定される。「粒径」及び「ビーズ径」の表現は、本明細書において同じ意味で使用される。

また、上記ビーズは孔を備えてもよい。当業者に知られている標準的な手順に従って孔径を特定することができる。幾つかの実施形態では、孔径は、水銀ポロシメーター（Porosimeter demo autoPore IV 9500 V1.09 serial 413, Micromeritics Instrument Corporation; Penetrometer 10-0718 5 Bulb, 1.131 Stem, Powder; B.E.T. Gemini V - Windows - Micromeritics Instrument Corporation）を使用して特定される。上記孔は、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径、例えば約５５ｎｍ〜約１００ｎｍ、約６０ｎｍ〜約９０ｎｍ、又は約７０ｎｍ〜約８０ｎｍの孔径を有してもよい。上記孔は、約６０ｎｍ〜約８０ｎｍ、より好ましくは約６５ｎｍ〜約７５ｎｍ、最も好ましくは約７０ｎｍの孔径を有してもよい。

したがって、幾つかの実施形態では、上記ビーズは、約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、及び／又は約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備える。

また、幾つかの実施形態では、上記ビーズは、約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、及び／又は約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備える。

少なくとも第１の吸着材及び第２の吸着材が上記ハウジング内に設けられる実施形態では、第１の吸着材はビーズであってもよく、第２の吸着材は繊維であってもよい。また、第１の吸着材は繊維であってもよく、第２の吸着材はビーズであってもよい。

しかしながら、第１の吸着材と第２の吸着材との両方がビーズであることが好ましい。第１の吸着材及び第２の吸着材のビーズは互いに同一であってもよく、又は異なってもよい。

例えば、限定されないが、第１の吸着材及び第２の吸着材のビーズは、ビーズ径において互いに異なってもよい。好ましい実施形態によれば、第１の吸着材のビーズは約１００μｍ〜約２００μｍのビーズ径を有してもよく、第２の吸着材のビーズは約１００μｍ〜約４００μｍのビーズ径を有してもよい。

好ましい実施形態によれば、第１の吸着材のビーズは約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有してもよく、第２の吸着材のビーズは約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有してもよい。

少なくとも第１の吸着材及び第２の吸着材が上記ハウジング内に設けられる実施形態では、第１の吸着材及び第２の吸着材は約０．５〜約２、例えば約０．７５〜約１．２５の比率で上記ハウジング内に存在してもよい。約１の比率が好ましい。上記比率は、上記ハウジングに含まれる第１のタイプの吸着材の総体積を上記ハウジングに含まれる第２のタイプの吸着材の総体積で除することにより計算される。計算は、第１の吸着材及び第２の吸着材の湿体積に基づいてもよい。本発明者らは、上記比率においてＮＯスカベンジャーであるｆＨｂ及びＭＶが濾過対象の血液又は血液成分から非常に効率的に除去され、それによって保存された血液及び血液成分の品質を著しく改善し得ることを見出した。その効果は、約１の比率で特に顕著であることが分かった。

異なる吸着材（例えば、第１の吸着材及び第２の吸着材）を濾過装置８のハウジング外で合わせるか、又は混合してもよく、その組み合わせ又は混合物をその後濾過装置８のハウジングに充填してもよい。

代替として、２以上の吸着材（例えば、少なくとも第１の吸着材及び第２の吸着材）を個別に上記ハウジングに充填してもよく、既にハウジング内に設置されている場合は、その後混合してもよい。

また、２以上の吸着材（例えば、少なくとも第１の吸着材及び第２の吸着材）を、ハウジング内に異なる吸着材の層を得るため、該ハウジング内に個別に充填することができる。例えば、第１の吸着材及び第２の吸着材がハウジング内に含まれる場合、第１の吸着材は該ハウジング内に少なくとも１つの層を形成してもよく、第２の吸着材は該ハウジング内に少なくとも１つの層を形成してもよい。好ましい実施形態によれば、第１の吸着材及び第２の吸着材は互いに異なる。更なる好ましい実施形態によれば、第１の吸着材は血液又は血液成分からのｆＨｂの除去のため少なくとも第１のリガンドによって連結され、第２の材料は血液又は血液成分からのｆＨｂの除去のため少なくとも第２のリガンドによって連結される。任意に、第１の吸着材は第２のリガンドによって連結されておらず、及び／又は第２の吸着材は第１のリガンドによって連結されていない。第１の吸着材及び第２の吸着材によって形成される層を、注入口から注出口へとハウジング内に交互に積み重ねることができる。１つの実施形態によれば、第１の吸着材及び第２の吸着材によって形成される各層は、約０．４ｃｍ〜約１ｃｍ、例えば約０．５ｃｍ、約０．６ｃｍ、約０．７ｃｍ、約０．８ｃｍ、又は約０．９ｃｍの厚みを有してもよい。ハウジング内に重ねられる層の総数は、少なくとも２、例えば約２〜約１５、例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、又は１４であってもよい。

リガンド
本発明による濾過装置８のハウジング内に設置される第１の吸着材は、少なくとも第１のリガンドによって連結される。そのため、第１の吸着材は、１又は複数のリガンド、例えば１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、又は少なくとも５のリガンドによって連結されてもよい。好ましい実施形態では、第１の吸着材は１又は２のリガンドによって連結される。

好ましい実施形態では、第１の吸着材及び第１の吸着材を連結する少なくとも１つのリガンドは樹脂を形成する。

本発明による濾過装置８のハウジング内に設置される第２の吸着材は、少なくとも第２のリガンドによって連結される。そのため、第２の吸着材は、１又は複数のリガンド、例えば１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、又は少なくとも５のリガンドによって連結されてもよい。好ましい実施形態では、第２の吸着材は１又は２のリガンドによって連結される。

好ましい実施形態では、第２の吸着材及び第２の吸着材を連結する少なくとも１つのリガンドは樹脂を形成する。

本明細書で使用される「リガンド」は、血液及び／又は血液成分からの物質の除去に適した及び／又はそれに適合された任意の化合物（例えば、分子）であってもよい。血液及び／又は血液成分から除去され得る物質の例は、ｆＨｂ、ＭＶ、他のＮＯスカベンジャー、可溶性物質、サイトカイン、生物活性脂質、細胞フラグメント、又はそれらの組合せである。好ましい物質はｆＨｂである。同様に、ＭＶも好ましい物質を表す。そのため、好ましいリガンドは、血液又は血液成分からｆＨｂを除去するリガンドである。「第１のリガンド」及び「遊離ヘモグロビンを除去するリガンド」の表現は同じ意味で使用され得る。同様に、血液又は血液成分からＭＶを除去するリガンドが好ましい。また、リガンドは、血液又は血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの除去に適してもよく及び／又はそれに適合されてもよい。また、「第２のリガンド」及び「微小胞を除去するリガンド」の表現は同じ意味で使用され得る。

この発明の目的上、「遊離ヘモグロビン」（ｆＨｂ）の表現は、エリスロサイト内に包含されないヘモグロビンとして定義される。換言すれば、その表現は、例えばエリスロサイト細胞に対して生じる溶解又は他の損傷によってエリスロサイトから放出されたヘモグロビンを包含する。

また、本発明の目的上、「微小胞」（ＭＶ）の用語は、１．０μｍ以下、例えば約５０ｎｍ〜１０００ｎｍ（例えば、約１００ｎｍ〜約９００ｎｍ、約２００ｎｍ〜約８００ｎｍ、約３００ｎｍ〜約７００ｎｍ、約４００ｎｍ〜約６００ｎｍ、又は約５００ｎｍ）の大きさを有し、血液の細胞成分及び／又は血管の内膜から生じる、リン脂質小胞として定義される。ＭＶは起源細胞の形質膜のフラグメントを含み、それらの膜の外葉上にアニオンリン脂質（ＰＬ）であるホスファチジルセリン（ＰＳ）を露出することができ、また、それらの細胞起源を反映する表面膜抗原を持つ。ＭＶはエリスロサイト起源のＭＶであってもよい。

本明細書で使用される「によって連結された（Coupled with）」は、「とつながった（linked with）」、「と合わせた（combined with）」、「に接続された（connected to）」、「に結合された（bound to）」、及び／又は「によって表面修飾された」を意味する場合がある。そのため、本発明による濾過装置８のハウジング内に設置される吸着材は、当業者に知られている好適な手段によって少なくとも１つのリガンドによって連結され、それによってつながり、それと合わせられ、それに接続され、それに結合され及び／又はそれによって表面修飾され得る。好ましい実施形態によれば、上記リガンドは上記吸着材に共有結合される。また、該吸着材はリガンドによって表面修飾されることが好ましい。

限定ではなく例として、吸着材は、オキシラン基を含むポリメタクリレートポリマーを含んでもよく又は本質的にそれからなってもよく、リガンドはポリアクリル酸を含んでもよく又は本質的にそれからなってもよい。ポリメタクリレートに含まれるオキシラン基はアミノ化合物と反応して、ポリアクリル酸リガンドによる連結を可能とする中間体を発生し得る。上記リガンドは上記吸着材に共有結合され得る。該吸着材は第１の吸着材であってもよい。

同様に、限定ではなく例として、吸着材はメタクリレート又はそのコポリマーを含んでもよく又は本質的にそれからなってもよく、リガンドは構造Ｒ−ＮＨ_２（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）ｎであり、更にｎは１〜５の整数である）を有してもよい。該リガンドは上記吸着材に共有結合され得る。リガンドは、メタクリレート又はそのコポリマーに共有結合されるエチルアミノ基又はメチルアミノ基であることが好ましい。また、メタクリレートはエチルアミノ基又はメチルアミノ基によって表面修飾されることが非常に好ましい。該吸着材は第２の吸着材であってもよい。

第１の吸着材及び第２の吸着材以外の吸着材が上記ハウジング内に含まれる場合、更なる吸着材を、第１の吸着材及び／又は第２の吸着材と同じリガンド（複数の場合がある）によって又は異なるリガンドによって連結することができる。

吸着材（例えば、第１の吸着材及び／又は第２の吸着材）が２以上のリガンドによって連結される幾つかの実施形態では、該連結は独立している。そのため、幾つかの実施形態によれば、吸着材とリガンドとが互いに連結される方法は、その吸着材と別のリガンドとが互いに連結される方法に影響を及ぼさず、また吸着材とリガンドとが互いに連結される方法は、別の吸着材とそのリガンドとが互いに連結される方法に影響を及ぼさない。

第１の吸着材は、少なくとも第１のリガンドによって、又は少なくとも第１のリガンド及び第２のリガンドによって連結される。第１のリガンド及び第２のリガンドは互いに同一であってもよく、又は異なってもよい。典型的には、第１のリガンドと第２のリガンドとは互いに異なる。例えば、第１のリガンドと第２のリガンドとは、構造及び／又は化学的特性において互いに異なってもよい。

第２の吸着材は、少なくとも第２のリガンドによって、又は少なくとも第２のリガンド及び第１のリガンドによって連結される。第１のリガンド及び第２のリガンドは互いに同一であってもよく、又は異なってもよい。典型的には、第１のリガンドと第２のリガンドとは互いに異なる。例えば、第１のリガンドと第２のリガンドとは、構造及び／又は化学的特性において互いに異なってもよい。

第１の吸着材は、結合反応によって少なくとも第１のリガンドによって連結されてもよい。第２の吸着材は、結合反応によって少なくとも第２のリガンドによって連結されてもよい。１つの実施形態によれば、結合反応は共有結合をもたらす。

本明細書で使用される「第１のリガンド」は、試料から、特に血液又は血液成分からの遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）の除去に適した及び／又はそれに適合されたリガンドである。

幾つかの実施形態によれば、第１のリガンドは、試料から、特に血液又は血液成分からのｆＨｂの除去に適している及び／又はそれに適合される。

第１のリガンドは、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーを含んでもよく、又は本質的にそれらからなってもよい。好ましい実施形態によれば、第１のリガンドはポリアクリル酸を含むか、又は本質的にそれからなる。

ｆＨｂを除去するリガンドとしてのポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーの使用は、アデノシン誘導体（例えば、ＡＴＰ）又は２，３−ジホスホグリセリン酸（ＤＰＧ）等のヘモグロビン結合に時々使用される他のリガンドに対して費用及び化学的安定性に関して顕著な利点を提供する。

本明細書で使用される「第２のリガンド」は、試料から、特に血液又は血液成分からの微小胞（ＭＶ）の除去に適した及び／又はそれに適合されたリガンドである。

幾つかの実施形態によれば、第２のリガンドは、試料から、特に血液又は血液成分からのＭＶの除去に適している及び／又はそれに適合される。

第２のリガンドは、Ｒ−ＮＨ_２基を含んでもよく又は本質的にそれからなってもよい。ＭＶの除去は短いＲ−ＮＨ_２基を使用する場合に最も効率的であることがわかった。そのため、第２のリガンドは、Ｒ−ＮＨ_２基（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）ｎであり、ｎは１〜５の整数である）を含んでもよく又は本質的にそれからなってもよい。したがって、第２のリガンドは、−ＣＨ_２−ＮＨ_２基、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基、又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含んでもよく又は本質的にそれからなってもよい。

第２のリガンドは、Ｒ−ＮＨ_２基（式中、Ｒが（−ＣＨ_２−）ｎであり、更にｎが１〜３である）を含む又はそれからなることが好ましい。ｎは１〜２であることが最も好ましい。したがって、非常に好ましい第２のリガンドは、−ＣＨ_２−ＮＨ_２基又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含むか又はそれからなる。

本発明者らは、驚いたことに、上のＲ−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなる第２のリガンドを使用する場合に血液又は血液成分からのＭＶの除去が非常に効率的であることを見出した。その効果は、−ＣＨ_２−ＮＨ_２基又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなる第２のリガンドを使用した場合に特に顕著であった。

本発明の好ましい実施形態によれば、第２の吸着材等の吸着材は、−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む若しくは本質的にそれからなるリガンド、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む若しくは本質的にそれからなるリガンド、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む若しくは本質的にそれからなるリガンド、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む若しくは本質的にそれからなるリガンド、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む若しくは本質的にそれからなるリガンド、又はそれらの組合せによって連結される。

本発明の更に好ましい実施形態によれば、第２の吸着材等の吸着材は−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなるリガンドによって連結され、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなるリガンドによって更に連結される。

限定ではなく例として、好ましい実施形態によれば、第２の吸着材等の吸着材は、メタクリレート又はその架橋コポリマーであってもよく、リガンドは−ＣＨ_２−ＮＨ_２又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ_２であってもよい。吸着材は該リガンドによって表面修飾されてもよい。リガンドは、吸着材に共有結合されてもよい。

１つの実施形態によれば、リガンドによって連結される吸着材は、１ｍｌ当たり少なくとも０．３ミリ当量（ｍｅｑ）のリガンド、１ｍｌ当たり少なくとも０．４ｍｅｑのリガンド、又は１ｍｌ当たり少なくとも０．５ｍｅｑのリガンドを含む。吸着材は、１ｍｌ当たり０．３ｍｅｑ〜０．４ｍｅｑのリガンドを含み得ることが好ましい。

更なる特徴
当業者は、本発明による濾過装置８は、追加の構造上の要素を備えてもよいことを認識するであろう。

例えば、本発明による濾過装置８は、上記ハウジング内に設置されたネットを更に備えてもよい。該ネットは、第１の種類の吸着材及び／又は第２の種類の吸着材を収容し、該ハウジングから第１の種類の吸着材及び／又は第２の種類の吸着材の捕捉及び／又は除去を可能とする。該ネットは、約１５μｍ〜約４０μｍ、例えば約２０μｍ〜約３５μｍ、又は約２５μｍ〜約３０μｍのメッシュサイズを有してもよい。

また、本発明による濾過装置８は、血液又は血液成分から脂肪及び／又は微小凝集体（細胞の微小凝集体、特に血小板を含む微小凝集体等）の除去のため予備フィルタを備えてもよい。好適な予備フィルタは当該技術分野で知られており、現在、標準的な輸血手順において使用される。予備フィルタの使用は、非洗浄自己血の濾過に特に好ましい。

本発明の濾過装置８は、血液又は血液成分を含む容器（例えば、バッグ）への接続に対して適合されてもよい。例えば、本発明の濾過装置８は、容器への接続のための接続手段、例えばスパイクを備えてもよい。

また、本発明の濾過装置８を輸血システムへの統合、又はそれとの接続に対して適合することができる。そのため、１つの実施形態によれば、濾過装置８は、輸血システムへの無菌接続のための１又は複数の配管７、９、１又は複数の接続デバイス２、３、又はそれらの組合せ等の手段を備える。

上記濾過装置８は使い捨てであってもよい。

好ましい実施形態の例
好ましい実施形態によれば、本発明は、血液又は血液成分から物質を除去する濾過装置８であって、該濾過装置８は、注入口及び注出口を有するハウジングと、該ハウジング内に設置される第１の吸着材（注入口から放出口へと上記濾過装置８を通過する血液又は血液成分からｆＨｂを除去するため第１の吸着材は少なくとも第１のリガンドによって連結される）と、該ハウジング内に設置される第２の吸着材（注入口から放出口へと上記濾過装置８を通過する血液又は血液成分から微小胞（ＭＶ）を除去するため第２の吸着材は少なくとも第２のリガンドによって連結される）とを備える、濾過装置を提供する。

第１の吸着材及び第２の吸着材はビーズであり、第１の吸着材のビーズは約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備え、第２の吸着材のビーズは約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えることが更に好ましい。

ｆＨｂの除去のため第１のリガンドによって連結される第１の吸着材がポリメタクリレート系ビーズ（例えば、ビーズ径約１００μｍ〜約２００μｍ、孔径約５０ｎｍ〜約９０ｎｍを有する）であり、第１の吸着材を連結するｆＨｂを除去する第１のリガンドがポリアクリル酸を含む又は本質的にそれからなることがより一層好ましい。

また、ＭＶを除去するため第２のリガンドによって連結される第２の吸着材がポリメタクリレート系ビーズ（例えば、ビーズ径約１００μｍ〜約４００μｍ、孔径約５５ｎｍ〜約１００ｎｍを有する）であり、第２のリガンドがＲ−ＮＨ_２基（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）ｎであり、更にｎは１〜５、好ましくは１〜３、より好ましくは１〜２である）を含む又は本質的にそれからなることがより一層好ましい。

ポリメタクリレート系ビーズ及びビーズを連結するポリアクリル酸を含む又は本質的にそれからなる第１のリガンドが樹脂を形成し、ポリメタクリレート系ビーズ及びビーズを連結するＲ−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなる第２のリガンドが樹脂を形成することがより一層好ましい。上記ビーズは上記リガンドによって表面修飾されることが最も好ましい。

また、ビーズ表面積は７０ｍ^２／ｇ〜１００ｍ^２／ｇであること、及び／又はリガンドによって連結される第１の吸着材及び／又は第２の吸着材は１ｍｌ当たり少なくとも０．３ミリ当量（ｍｅｑ）のリガンド、例えば１ｍｌ当たり０．３ミリ当量（ｍｅｑ）〜０．４ｍｅｑのリガンドを含むことが好ましい。

第１の吸着材及び第２の吸着材は、約１の比率（体積：体積）で上記ハウジング内に存在することが最も好ましい。第１の吸着材及び第２の吸着材の湿体積に基づいて、該比率を計算することができる。

輸血システム
１つの実施形態によれば、少なくとも１つの本発明による濾過装置８を備える輸血システムが提供される。

上記輸血システムは、血液又は血液成分を含む容器への接続のための手段２、３（例えば、スパイク）を備えてもよい。上記輸血システムは、滴下チャンバー５を備えてもよい。好ましい実施形態によれば、滴下チャンバー５は脂肪及び／又は微小凝集体を除去する予備フィルタ（約１５０μｍ〜約２００μｍの孔径を有する予備フィルタ等）を備える。

また、上記輸血システムは、導管手段４、７、９を備えてもよい。上記輸血システムは、使い捨てであってもよい。

本発明による輸血システムの非限定的な例を図１に示す。

輸血システムの例は、キャップ１と、該輸血システムと血液又は血液成分を含む容器との接続を可能とする手段２及び手段３と、手段２及び手段３と滴下チャンバー５（滴下チャンバー５は脂肪及び／又は微小凝集体の除去に対する予備フィルタを任意に備える）を接続する第１の導管手段４と、第２の導管手段７とを備える。上記輸血システムは、本発明による濾過装置８を更に備え、該濾過装置８は注入口及び注出口を有するハウジングを備える。濾過装置８は、第２の導管手段７によって滴下チャンバー５に接続され、第３の導管手段９を介してアダプタ１２との接続を可能とする手段１１に接続される。図１による輸血システムの例に備えられる更なる任意の構成要素は、第２の導管手段６に設置されるクランプ６及びローラー１０である。

当業者は、本発明による輸血システムが図１に示され、上に記載される構成要素を備えてもよく、又は本質的にそれからなってもよいことを理解するであろう。しかしながら、追加の要素又は特徴を備える輸血システムも同様に本発明者らによって検討される。

少なくとも１つの濾過装置８がハウジング内に設置されたネットを備え、該ネットが第１の吸着材及び／又は第２の吸着材を収容し、該ネットが第１の吸着材及び／又は第２の吸着材を上記ハウジングから捕捉及び／又は除去するように適合される、本発明による輸血システム（例えば、図１に示されるシステム）が特に好ましい。

方法
また、本発明は、血液又は血液成分から物質を除去する方法を提供する。該方法を、本発明による濾過装置８又は輸血システムを使用して行うことができる。該方法をｅｘ ｖｉｖｏで行うことができる。

したがって、血液又は血液成分から物質を除去する方法であって、（ａ）本発明による濾過装置８又は本発明による輸血システムを準備する工程と、（ｂ）注入口から注出口へ、上記濾過装置８に血液又は血液成分を通過させる工程とを含む、方法が提供される。

濾過対象の血液成分は、赤血球を含むことが好ましい。該血液成分はＲＣＣであることがより一層好ましい。

本明細書に提供される方法は、血液又は血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの除去に特に有用である。したがって、好ましい実施形態では、本発明は血液又は血液成分からｆＨｂ及びＭＶを除去する方法であって、（ａ）本発明による濾過装置８又は本発明による輸血システムを準備する工程と、（ｂ）注入口から注出口へ、濾過装置８に血液又は血液成分を通過させる工程とを含む、方法を提供する。

更なる実施形態によれば、本発明による方法は、保存された血液又は血液成分に対して適用される。

本発明者らは、本発明による方法が、少なくとも５日間、少なくとも１０日間、少なくとも１５日間、少なくとも２０日間、少なくとも３０日間、又は少なくとも３５日間、少なくとも４０日間、少なくとも４１日間、又は最大４２日間保存された血液又は血液成分からのｆＨｂ及びＭＶの効率的な除去を可能とすることを見出した。上記保存は血液バンクの条件下で生じることが好ましい。例えば、特に血液又は血液成分が血液バンクの条件下で保存されていた場合に、約１日間〜約４２日間、例えば、約５日間〜約３５日間、約１０日間〜約３０日間、約３０日間〜約４０日間、又は約１６日間〜約２５日間に亘って保存された血液又は血液成分に上記方法を適用することができる。

本明細書で使用される「血液バンクの条件下での保存」は、その保存が４℃の保存温度等の血液バンクで典型的に使用される条件下で生じることを意味する。

血液又は血液成分から物質を除去する本発明の方法は、該方法に供される血液又は血液成分の品質の改善をもたらすことができる。特に、１５日より長く保存された血液又は血液成分の品質を顕著に改善することができる。血液又は血液成分（ＲＣＣ等）に残留するｆＨｂ及びＭＶを、１５日より長く（例えば、少なくとも１６日間、少なくとも２０日間、少なくとも３０日間、少なくとも３５日間、少なくとも約４０日間、又は約３０日間〜約４０日間）保存された試料において顕著に減少することができることがわかった。

例えば、１５日間に亘って同一の条件下で保存された血液又は血液成分において検出可能な値まで残留ｆＨｂ及びＭＶを減少することができる。

残留ｆＨｂを含むｆＨｂの濃度を当該技術分野で知られている標準的な手順に従って特定することができる。例えば、先に記載されるように（Cardigan R., Smith K. Evaluation of the HemoCue plasma Haemoglobin analyser for assessing haemolysis in red cell concentrates during storage. Vox Sanguinis (2002); 82, 76）３０００ＲＰＭで５分間の試料の遠心分離の後に、ＨａｅｍｏＣｕｅ Ｐｌａｓｍａ Ｌｏｗ Ｈａｅｍｏｇｌｏｂｉｎ光度計（HemoCue AB）を使用してｆＨｂの濃度を特定することができる。

同様に、残留ＭＶを含むＭＶの濃度を特定する方法が記載され、確立されている。例えば、Ｇｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎ Ａ及びＡｎｎｅｘｉｎ Ｖによる二重標識に基づくフローサイトメトリーアプローチが文献において広く報告されている（Rubin O, Crettaz D, Canellini G, et al. Microparticles in stored red blood cells: an approach using flow cytometry and proteomic tools. Vox Sanguinis. 2008; 95: 288-297; Xiong Z, Oriss TB, Cavaretta JP, et al. Red cell microparticle enumeration: validation of a flow cytometric approach. Vox Sanguinis. 2012; 103, 42-48）。

本発明による方法は、濾過の前に血液又は血液成分中に含まれるｆＨｂの約５０％〜約８０％（例えば、約５５％〜約７５％、又は約６０％〜約７０％、最も好ましくは約７０％〜約８０％）の除去を可能とすることが好ましい。したがって、上記方法に供される血液又は血液成分の所与の単位においてｆＨｂの開始濃度を著しく減少することができ、得られる精製された血液又は血液成分中のｆＨｂの濃度は開始濃度の約５０％〜約２０％となり得る。先に記載されるように（Cardigan R., Smith K. Evaluation of the HemoCue plasma Haemoglobin analyser for assessing haemolysis in red cell concentrates during storage. Vox Sanguinis (2002); 82, 76）３０００ＲＰＭで５分間の試料の遠心分離の後に、ＨａｅｍｏＣｕｅ Ｐｌａｓｍａ Ｌｏｗ Ｈａｅｍｏｇｌｏｂｉｎ光度計（HemoCue AB）を使用して濾過の前及び後のｆＨｂの濃度を特定することができる。

また、本発明による方法は、濾濾過の前の血液又は血液成分中に含まれるＭＶの約５０％〜約７０％（例えば、約５５％〜約６５％、又は約６０％、最も好ましくは約６０％〜約７０％）の除去を可能とすることが好ましい。したがって、上記方法に供される血液又は血液成分の所与の単位においてＭＶの開始濃度を著しく減少することができ、得られる精製された血液又は血液成分中のＭＶの濃度は開始濃度の約５０％〜約３０％となり得る。ＦＡＣＳ解析に対する標準的な実験手順に従って、ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩＩフローサイトメーター（Becton-Dickinson）を使用して、ＰＥ標識抗ヒトＧｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎ Ａ抗体（BD Bioscience）及びＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＡＰＣ（BD Bioscience）による二重標識を用いて濾過の前及び後のＭＶの濃度を特定することができる。

キット
また、本発明は血液又はＲＣＣ等の血液成分からｆＨｂ及びＭＶ等の物質を除去するキットを提供する。

本発明によるキットは、本発明による少なくとも１つの濾過装置８及び／又は少なくとも１つの輸血システムを備える。

そのため、少なくとも１個、少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個又は少なくとも１０個の本発明による濾過装置８を備えるキットが提供される。濾過装置８は互いに同一であってもよく、又は異なってもよい。

上記キットは、少なくとも２個の本発明による濾過装置８を備え、該濾過装置８は互いに同一であってもよく、又は異なってもよいことが好ましい。上記キットは少なくとも２個の本発明による濾過装置８を備え、該濾過装置８は互いに異なることがより好ましい。

上記キットは、少なくとも２つの濾過装置８を備えてもよく、第１の濾過装置８は血液又は血液成分からのｆＨｂの除去に対して適合され、第２の濾過装置８は血液又は血液成分からのＭＶの除去に対して適合される。

本発明によるキットに備えられる濾過装置８は、輸血システムへの統合に対して適合されてもよく、血液若しくは血液成分、又はそれらの両方を含む容器に接続可能であってもよい。

また、本発明によるキットに備えられる濾過装置８は、輸血システムに統合されてもよく、血液又は血液成分を含む容器に接続可能であってもよい。

１つの実施形態によれば、キットが提供され、該キットは血液又は血液成分から物質を除去する第１の濾過装置８を備え、該第１の濾過装置８が注入口及び注出口を有するハウジングと、少なくとも該ハウジング内に設置される第１の吸着材とを備え、ここで、注入口から注出口へと第１の濾過装置８を通過する血液又は血液成分からｆＨｂを除去するため、少なくとも第１のリガンドによって第１の吸着材が連結される。

この実施形態によるキットは、好ましくは本発明による血液又は血液成分から物質を除去する第２の濾過装置８を更に備えてもよく、該第２の濾過装置８は注入口及び注出口を有するハウジングと、少なくとも該ハウジング内に設置される第２の吸着材とを備え、ここで、注入口から注出口へと第２の濾過装置８を通過する血液又は血液成分からＭＶを除去するため、少なくとも第２のリガンドによって第２の吸着材が連結される。

この実施形態によれば、第１の吸着材及び第２の吸着材は互いに同一でもよく、又は異なっていてもよい。

また、第１のリガンド及び第２のリガンドもまた、互いに同一でもよく、又は異なっていてもよい。第１のリガンド及び第２のリガンドは互いに異なることが好ましい。第１の吸着材及び第２の吸着材が互いに異なり、第１のリガンド及び第２のリガンドが互いに異なることがより好ましい。

任意に、第１の吸着材は第２のリガンドによって連結されておらず、また第２の吸着材は第１のリガンドによって連結されていない。

さらに、第１の濾過装置８のハウジングに設置される第１の吸着材及び第２の濾過装置８のハウジングに設置される第２の吸着材は、約１〜約２の比率（体積：体積）で上記キットに備えられてもよい。第１の吸着材及び第２の吸着材の湿体積に基づいて該比率を計算することができる。

非常に好ましい実施形態によれば、上記キットは、注入口及び注出口を有するハウジングと、該ハウジング内に設置される第１の吸着材とを備える第１の濾過装置８を備え、ここで、注入口から注出口へと該濾過装置８を通過する血液又は血液成分からｆＨｂを除去するため、少なくとも第１のリガンドによって該第１の吸着材が連結される。上記キットは、注入口及び注出口を有するハウジングと、該ハウジング内に設置される第２の吸着材とを備える第２の濾過装置８を更に備え、ここで、注入口から注出口へと該濾過装置８を通過する血液又は血液成分から微小胞（ＭＶ）を除去するため、少なくとも第２のリガンドによって該第２の吸着材が連結される。

第１の吸着材及び第２の吸着材がビーズであり、第１の吸着材のビーズが約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜１００ｎｍの孔径を有する孔を備え、第２の吸着材のビーズが約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えることが更に好ましい。

ｆＨｂを除去する第１のリガンドによって連結される第１の吸着材は、ポリメタクリレート系ビーズ（例えば、ビーズ径約１００μｍ〜約２００μｍ、孔径約５０ｎｍ〜約９０ｎｍを有する）であり、第１の吸着材を連結するｆＨｂを除去するための第１のリガンドがポリアクリル酸を含むか又は本質的にそれからなることがより一層好ましい。

また、ＭＶを除去する第２のリガンドによって連結される第２の吸着材がポリメタクリレート系ビーズ（例えば、ビーズ径約１００μｍ〜約４００μｍ、孔径約５５ｎｍ〜約１００ｎｍを有する）であり、第２のリガンドがＲ−ＮＨ_２基（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）ｎであり、更にｎは１〜５、好ましくは１〜３、最も好ましくは１〜２である）を含むか又は本質的にそれからなることがより一層好ましい。

上記ポリメタクリレート系ビーズと、ビーズを連結するポリアクリル酸を含む又は本質的にそれからなる第１のリガンドとが樹脂を形成し、上記ポリメタクリレート系ビーズと、ビーズを連結するＲ−ＮＨ_２基を含む又は本質的にそれからなる第２のリガンドとが樹脂を形成することがより一層好ましい。上記ビーズは上記リガンドによって表面修飾されていることが最も好ましい。

また、ビーズ表面積は７０ｍ^２／ｇ〜１００ｍ^２／ｇであり、及び／又はリガンドによって連結される第１の吸着材及び／又は第２の吸着材が少なくとも１ｍｌ当たり０．３ミリ当量（ｍｅｑ）のリガンド、例えば１ｍｌ当たり０．３ミリ当量（ｍｅｑ）〜０．４ｍｅｑのリガンドを含むことが好ましい。

第１の吸着材及び第２の吸着材が約１の比率（体積：体積）で上記キット内に存在することが最も好ましい。第１の吸着材及び第２の吸着材の湿体積に基づいて該比率を計算することができる。

以下の実施例により本発明を更に解説するが、これらは限定として解釈されるものではない。当業者は、通常の実験を用いるだけで、本明細書に記載される具体的な物質及び手順に対する多くの等価物を認識するか、又は確認することができる。かかる等価物は、以下の実施例に続く特許請求の範囲に包含されることが意図される。

実施例１
遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）及び微小胞（ＭＶ）を保存赤血球濃厚液（ＲＣＣ）から除去する本発明による濾過装置８及び輸血システムの能力を、制御条件下において既知の開始濃度のｆＨｂ及びＭＶにより試験した。使用した濾過装置８は、以下の寸法を有するハウジングを備えた：長さ８ｃｍ及び直径２．６ｃｍ（長さ：直径の比率約３）。ポリアクリル酸により連結されたポリメタクリレート系ビーズ（ビーズ径１００μｍ〜２００μｍ、孔径５０ｎｍ〜９０ｎｍ）を保存ＲＣＣからのｆＨｂの除去のため上記ハウジング内に設置した。また、一般式Ｒ−ＮＨ_２（式中、Ｒは（−ＣＨ_２−）ｎであり、ｎ＝１〜２）の短鎖アミノ基により連結されたメタクリレート系表面を有するビーズ（ビーズ径１００μｍ〜４００μｍ、孔径５５ｎｍ〜１００ｎｍ、表面積７０ｍ^２／ｇ〜１００ｍ^２／ｇ、０．３ｍｅｑ／ｍｌ〜０．４ｍｅｑ／ｍｌ）を上記ハウジング内に設置し、保存ＲＣＣからのＭＶの除去に使用した。

上記実験の準備において、生理学的食塩水に溶解された、ポリアクリル酸によって連結されたポリメタクリレート系ビーズ２２ｍｌと、短鎖アミノ基によって連結されたメタクリレート系表面を有するビーズ２２ｍｌとを共に混合した後、濾過装置８のハウジングに充填した。

その後、濾過装置８を輸血装置に接続した。輸血装置は、必要に応じて、ＲＣＣを含む容器への接続のためのスパイクと、微小凝集体に対する１５０μｍ〜２００μｍの予備フィルタを備える滴下チャンバー５と、導管手段４、７、９とを更に備えた。図１を参照されたい。

空気を除去するため、２５０ｍｌの生理的食塩水でプライミングを達成した。

標準的な血液バンク条件（４℃）で３０日間〜４０日間保存したＲＣＣに白血球除去（leukodepleted）を行い、該試料中のｆＨｂ及びＭＶの初期濃度を特定した。３０００ＲＰＭで５分間試料を遠心分離した後、ＨａｅｍｏＣｕｅ Ｐｌａｓｍａ Ｌｏｗ Ｈａｅｍｏｇｌｏｂｉｎ光度計（HemoCue AB）により遊離ヘモグロビンを測定し、Ｇｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎ Ａ、Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖによる二重標識に基づいてフローサイトメトリーアプローチによってＭＶを測定した。４５０ｍｇ／ｄｌ、４６０ｍｇ／ｄｌ又は１０２０ｍｇ／ｄｌの既知の正確なｆＨｂ開始濃度を有する試料を得るため、ヒトｆＨｂを用いて上記試料をスパイク（spiked）した。上記試料において特定されるＭＶの開始濃度は、濾過の前で６０．０００ＭＶ／μｌ〜８０．０００ＭＶ／μｌの範囲であった。

１つの試験に使用したＲＣＣの容量は２４０ｍｌ〜２６０ｍｌの範囲であり、ヘマトクリットは５５％〜６０％であった。

各試験に対し、保存ＲＣＣを含む容器を上記システムに接続し、濾過を開始した。濾過装置８を濾過全体の間転倒させ、流量値１０ｍｌ／分に達するようにローラーを使用して流量を制御した。最初に上記システムをプライムするため使用した生理的食塩水を溶出し、排出した。その後、精製したＲＣＣを収集し、分析した。

ｆＨｂ及びＭＶの濃度を濾過後に特定した。

結果を表１に示す。

表１に示される結果は、本発明の濾過装置８及び輸血システムが保存血液成分からのｆＨｂ、またＭＶの除去に非常に効率的であり、同時に、典型的な臨床の輸血時間に適した優れた流速を可能とすることを明確に示す。

実施例２
実施例１について上に記載される通りであるが、生理的食塩水による上記システムの初期プライミングをせずに実験を行った。代わりに、空気を除去するため、濾過装置８の上流、すなわち、濾過装置８とＲＣＣを含む容器に対する接続用スパイクとの間に設置される導管手段４、７をＲＣＣで満たした後、濾過装置８に接続した。実施例１の通り、濾過を行った。結果を表２に示す。

このように、上記システムをプライムするための生理的食塩水を使用しなくてもｆＨｂ及びＭＶは効率的に除去される。

実施例３
リンカーによって連結された種々の吸着材の保存血液成分（ＲＣＣ）からのＭＶの除去に対する効果を評価した。

リンカーによって連結された試験吸着材は、種々の鎖長のアミノ基によって連結されることにより表面修飾されたメタクリレート系ビーズの架橋コポリマーであった。

吸着材に連結されたアミノ基は、一般式Ｒ−ＮＨ_２（Ｒ＝（−ＣＨ_２−）ｎ）を有した。Ｒ＝（−ＣＨ_２−）ｎ、ｎ＝１又は２の一般式Ｒ−ＮＨ_２のアミノ基についてＲを「短」とし、一方、Ｒ＝（−ＣＨ_２−）ｎ、ｎ＝３〜５の一般式Ｒ−ＮＨ_２のアミノ基についてＲを「中」とした。Ｒ＝（−ＣＨ_２−）ｎ、ｎが５超の一般式Ｒ−ＮＨ_２のアミノ基について、Ｒを「長」とした。

ビーズ径は１００μｍ〜４００μｍの範囲であった。イオン交換容量（ＩＥＣ）は０．３ｍｅｑ／ｇ〜０．９ｍｅｑ／ｇの範囲であった。

既知の量の開始ＭＶを含む１つのＲＣＣ単位（献血容量（volume donation）及び手順に応じて２５０ｍｌ〜３２０ｍｌの容量に対応する）を使用するため、スケールダウン実験を行った。

リンカーによって連結された試験吸着材は、短（試験５）、中（試験６）、又は長（試験７）のアミノ基による連結によって表面修飾されたメタクリレート系ビーズの架橋コポリマーであった。

標準的な血液バンク条件（４℃）で４１日間保存した白血球減少ＲＣＣ単位を３つの試料に等分した。ＲＣＣの容量は各アリコートについて８０ｍｌであり、ヘマトクリットは５８％であった。

フローサイトメトリーに基づく方法を使用して微小胞を測定した。ＭＶ検出及び同定に対してＰＥ抗ヒトＧｌｙｃｏｐｈｏｒｉｎ Ａ抗体（BD Bioscience）及びＡｎｎｅｘｉｎ Ｖ−ＡＰＣ（BD Bioscience）等の種々の特異的マーカーを使用した。絶対計数のため標準化された数の蛍光ビーズを含有するＴｒｕＣｏｕｎｔチューブ（BD Bioscience）を使用した。

試験５〜試験７に同等のイオン交換能力を提供するため、各濾過装置８に充填された、リンカーによって連結された吸着材の容量を計算した。濾過装置８に注いだ容量は６ｍｌ〜９ｍｌであった。

各試験について、濾過装置８（長さ：直径の比率約３）を上記システムに接続し、０．９％のＮａＣｌ（生理的食塩水）１５０ｍｌでプライムした。

その後、上記システムから生理食塩水を除去し、該生理食塩水バッグを外してＲＣＣバッグと置き換えた。空気を除去するため上流のチューブをＲＣＣで満たした後、濾過装置８に接続した。その後、濾過を開始した。濾過全体の間、カートリッジを逆位置に保持し、ビーズの寸法によってのみ流量を制御した。

濾過前及び濾過後にＭＶを測定した。表３は、種々の鎖長のアミノ酸基によって連結された上述のビーズについて達成されたＭＶ除去（％）を示す。

表３に示される結果は、アミノ基の鎖長が血液又はＲＣＣ等の血液成分からのＭＶの除去に影響を及ぼすことを明確に示す。除去は、短い鎖長で優れている。除去は、中間の鎖長で減少する。長い鎖長に対しては、試験試料に由来するＭＶの除去は観察されなかった。

試験５で使用されたリンカーにより連結された吸着材は、ＭＶの除去に対して優れた能力を示し、ｆＨｂ除去用樹脂と共にスケールアップ実験において使用された（実施例１も参照されたい）。

Claims (21)

1. 血液又は血液成分から物質を除去する濾過装置（８）であって、該濾過装置（８）が、
   注入口及び注出口を有するハウジングと、
   少なくとも前記ハウジング内に設置された第１のリガンドによって連結された第１の吸着材と、
   少なくとも前記ハウジング内に設置された第２のリガンドによって連結された第２の吸着材と、
   を備え、
   前記第１の吸着材と前記第２の吸着材とがビーズであり、
   前記注入口から前記注出口へと前記濾過装置（８）を通過する前記血液又は血液成分から、前記第１のリガンドが遊離ヘモグロビン（ｆＨｂ）を除去するものであり、前記第２のリガンドが微小胞（ＭＶ）を除去するものであり、
   前記第２のリガンドが、少なくとも１つのＲ−ＮＨ _２ 基（式中、Ｒは（−ＣＨ _２ −） _ｎ であり、ｎは１〜５である）を含み、
   前記第１のリガンド及び前記第２のリガンドが互いに異なり、
   前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材が互いに同一又は異なる、濾過装置。
2. 請求項１に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材が前記第２のリガンドによって連結されておらず、前記第２の吸着材が前記第１のリガンドによって連結されていない、請求項１に記載の濾過装置。
3. 請求項１又は２に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材及び／又は前記第２の吸着材がポリマーを含み、前記ポリマーがポリメタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリスチレン−ジビニルベンゼン、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーを含む、請求項１又は２に記載の濾過装置。
4. 請求項１〜３のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記ｆＨｂを除去する第１のリガンドが、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、又はそれらの組合せ若しくはそれらのコポリマーを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の濾過装置。
5. 請求項１〜４のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材が結合反応によって少なくとも前記第１のリガンドに連結され、及び／又は、前記第２の吸着材が結合反応によって少なくとも前記第２のリガンドに連結される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の濾過装置。
6. 請求項１〜５のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材及び／又は前記第２の吸着材が、ビーズ及び繊維からなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の濾過装置。
7. 請求項６に記載の濾過装置（８）であって、
   前記ビーズが約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、及び／又は、
   前記ビーズが孔を備え、前記孔が約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有するか、若しくは約５０ｎｍ〜１００ｎｍの孔径を有する、請求項６に記載の濾過装置。
8. 請求項１〜７のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、該濾過装置（８）が約１００μｍ〜約２００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えるビーズである第１の吸着材を含み、及び／又は、
   前記濾過装置（８）が約１００μｍ〜約４００μｍの粒径を有し、約５０ｎｍ〜約１００ｎｍの孔径を有する孔を備えるビーズである第２の吸着材を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の濾過装置。
9. 請求項１〜８のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材が、約０．５〜約２の比率（体積：体積）で前記ハウジング内に設けられる、請求項１〜８のいずれか一項に記載の濾過装置。
10. 請求項１〜９のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材が前記ハウジング内に少なくとも１つの層を形成し、前記第２の吸着材が前記ハウジング内に少なくとも１つの層を形成し、前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材によって形成された前記層が積み重ねられるか、又は前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材が実質的に前記ハウジング内に均等に分散される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の濾過装置。
11. 請求項１〜１０のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、
    前記濾過装置（８）が輸血システムへの統合に対して適合され、及び／又は、
    前記濾過装置（８）が血液若しくは血液成分を含む容器に接続可能である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の濾過装置。
12. 請求項１〜１１のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記ハウジングが長さ及び直径を有し、長さ：直径の比率が約２〜約４であり、前記ハウジングがカラムであるか、又はカートリッジである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の濾過装置。
13. 請求項１〜１２のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記ハウジング内に設置されたネットを更に備え、前記ネットが前記第１の吸着材及び／又は前記第２の吸着材を収容し、前記ネットが前記ハウジングからの前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材の捕捉及び／又は除去に対して適合される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の濾過装置。
14. 請求項１〜１３のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記血液成分が赤血球を含み、前記血液成分が赤血球濃厚液（ＲＣＣ）である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の濾過装置。
15. 請求項１〜１４のいずれか一項に記載の濾過装置（８）を少なくとも１つ備えた、輸血システム。
16. 血液又は血液成分からｅｘ ｖｉｖｏで物質を除去する方法であって、
    （ａ）請求項１〜１４のいずれか一項に記載の濾過装置（８）又は請求項１５に記載の輸血システムを準備する工程と、
    （ｂ）注入口から注出口へ、前記濾過装置（８）に濾過に先立って保存されている血液又は血液成分を通過させる工程と、
    を含む、方法。
17. 前記血液成分が赤血球を含み、前記血液成分が赤血球濃厚液（ＲＣＣ）である、請求項１６に記載の方法。
18. 注入口及び注出口を有するハウジングと、前記ハウジング内に設置された少なくとも第１の吸着材とを備える、血液又は血液成分から物質を除去する第１の濾過装置（８）であって、
    前記注入口から前記注出口へと前記第１の濾過装置（８）を通過する血液又は血液成分からｆＨｂを除去する少なくとも第１のリガンドによって前記第１の吸着材が連結される、第１の濾過装置と、
    注入口及び注出口を有するハウジングと、前記ハウジング内に設置された少なくとも第２の吸着材とを備える、血液又は血液成分から物質を除去する第２の濾過装置（８）であって、
    前記注入口から前記注出口へと前記第２の濾過装置（８）を通過する血液又は血液成分からＭＶを除去する少なくとも第２のリガンドによって前記第２の吸着材が連結される、第２の濾過装置と、
    を備えるキットであって、
    前記第２のリガンドが、少なくとも１つのＲ−ＮＨ _２ 基（式中、Ｒは（−ＣＨ _２ −） _ｎ であり、ｎは１〜５である）を含み、
    前記第１のリガンド及び前記第２のリガンドが互いに異なり、
    前記第１の吸着材と前記第２の吸着材とがビーズであり、
    前記第１の吸着材及び前記第２の吸着材が互いに同一又は異なり、
    任意に前記第１の吸着材が前記第２のリガンドに連結されておらず、前記第２の吸着材が前記第１のリガンドに連結されていない、キット。
19. 前記第１の濾過装置（８）及び／又は前記第２の濾過装置（８）が輸血システムへの統合に対して適合され、及び／又は、
    前記第１の濾過装置（８）及び／又は前記第２の濾過装置（８）が血液若しくは血液成分を含む容器に接続可能である、請求項１８に記載のキット。
20. 前記第１の濾過装置（８）及び前記第２の濾過装置（８）が輸血システムへ統合され、血液又は血液成分を含む容器に接続可能である、請求項１８に記載のキット。
21. 請求項１〜１４のいずれか一項に記載の濾過装置（８）であって、前記第１の吸着材及び／又は前記第２の吸着材がビーズであり、更に前記ビーズが焼結又は凝集によって固定化される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の濾過装置。
    
    

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