JP2005225863A

JP2005225863A - リパーゼ阻害剤

Info

Publication number: JP2005225863A
Application number: JP2004341343A
Authority: JP
Inventors: Toshiharu Arishima; 俊治有島; Nobuhiko Tachibana; 伸彦橘
Original assignee: Fuji Oil Co Ltd
Current assignee: Fuji Oil Co Ltd
Priority date: 2004-01-16
Filing date: 2004-11-26
Publication date: 2005-08-25

Abstract

【課題】本発明の目的は、脂肪の過剰摂取による肥満や肥満が原因で発生する疾病の予防や治療に寄与し得て、且つあらゆる油脂に添加し得る油溶性のリパーゼ阻害剤を提供することにある。
【解決手段】本発明は、ＳＬＳ型トリアシルグリセロール（Ｓは炭素数２〜６の短鎖脂肪酸、Ｌは炭素数１６〜２２の長鎖脂肪酸より構成される対称型トリアシルグリセロール）を有効成分とするリパーゼ阻害剤であり、脂質吸収阻害剤であり、抗肥満剤であり、または高脂血症改善剤であって、これらの剤を含有する食品であり、これらの剤を含有する医薬である。
【選択図】なし

Description

本発明は、リパーゼ阻害剤及びそれを含有する食品に関する。さらに詳しくは、生体内での脂質の消化吸収をにない、肥満症、高脂血症の鍵となる膵臓リパーゼを有効に阻害してこれらの疾病の抑制や予防に寄与し得る安全性の高い油溶性のリパーゼ阻害剤に関する。

近年、食事からの脂肪摂取の過剰による肥満と糖尿病・高脂血症・循環器疾患といった生活習慣病の関係が取り上げられ、問題とされている。これを改善する方法として、１．食品中の油脂含量の低下、２．油脂そのものの低カロリー化、３．油脂代替物での置換、４．代謝の促進、５．リパーゼ阻害剤などが提案されている。５．のリパーゼ阻害剤については、脂肪の膵臓リパーゼによる分解を阻害して肥満を抑制、予防する薬剤の開発が試みられている。
例えば、特許文献１では、紅景天、イワベンケイ、サボンソウ、ボルド、パスチャカ、トルメンチラ、エルカンプリ、ウコンイソマツ、チュチュウアシ、キャッツクロー、シナモン、山椒、センダングサ、ウコギ、ストロベリー、モージェ、バラ、柿、セイヨウオトギリソウ、杜仲及び白茶からなる植物の群より選ばれる少なくとも１種を含有するリパーゼ阻害剤が提案されている。

また、特許文献２では、ユッカ、高麗人参、ジャスミン茶、山査子、黄杞茶、ルイボス茶、大豆胚芽、生姜、および杜仲茶よりなる群から選択される少なくとも1種以上の素材からの抽出エキスを有効成分とするリパーゼ阻害剤が提案されている。
しかしながら、抽出物が殆ど水溶性のものであり油脂に混ぜることが出来なかったり、喫食時に服用させるしか方法がなく煩雑であったり、また抽出物の効果が不充分であったりしてその殆どが市場に出ていない。
一方、油脂に溶解できる油溶性の物質としては、特許文献３において、テトラヒドロリプスタチンを胃腸リパーゼ阻害剤として使用することが提案されている。この阻害剤はリパーゼそのものと直接共有結合して失活させるといわれており、その効果はかなり強力で一部には下痢症状も観られ、食品としては安全性の面での懸念が残り、よりマイルドに効果を発揮するような油溶性のリパーゼ阻害剤が望まれている。

特開２００２−１７９５８６号公報特開２００２−２７５０７７号公報米国特許第４５９８０８９号明細書

本発明の目的は、脂肪の過剰摂取による肥満や肥満が原因で発生する疾病の予防や治療に寄与し得て、且つあらゆる油脂に添加し得る油溶性のリパーゼ阻害剤を提供することにある。

本発明者らは、上記の問題を解決するため鋭意研究をおこなった結果、グリセロールの１,３位が短鎖の脂肪酸、２位が長鎖の脂肪酸より構成される対称型トリアシルグリセロールが膵臓リパーゼの活性を阻害することを発見し、この対称型トリアシルグリセロールをベース油脂中に少量含むことにより油脂全体の分解速度が緩和されることを見出したのである。
即ち本発明の第１は、ＳＬＳ型トリアシルグリセロール（Ｓは炭素数２〜６の短鎖脂肪酸、Ｌは炭素数１６〜２２の長鎖脂肪酸より構成される対称型トリアシルグリセロール）を有効成分とするリパーゼ阻害剤である。第２は、第１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする脂質吸収阻害剤である。第３は、第１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする抗肥満剤である。第４は、第１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする高脂血症改善剤である。第５は、第１乃至第４何れか1に記載の剤を含有する食品である。第６は、第１乃至第４何れか1に記載の剤を含有する医薬である。

本発明のＳＬＳ型トリアシルグリセロールはリパーゼ活性を緩やかに阻害し、かつ油溶性でありあらゆる油脂に添加でき、脂肪の過剰摂取による肥満や肥満が原因で発生する疾病の予防や治療に有効である。

本発明における、リパーゼによる加水分解を遅延させる油溶性物質ＳＬＳ型トリアシルグリセロールは、そのグリセロールの１,３位に結合する脂肪酸が炭素数２の酢酸から炭素数６のカプロン酸までのものであり好ましくは炭素数２の酢酸であり、２位が炭素数１６のパルミチン酸、パルミトオレイン酸から炭素数２２のベヘン酸、あるいはエルシン酸までの脂肪酸で構成されるもので、長鎖脂肪酸は飽和酸・不飽和酸の何れでも良いがモノ不飽和脂肪酸が好ましい。一部例をあげると２P２（１，３位が酢酸、２位がパルミチン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２O２（１，３位が酢酸、２位がオレイン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２Li２（１，３位が酢酸、２位がリノール酸よりなるトリアシルグリセロール）、２S２（１,３位が酢酸、２位がステアリン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２A２（１，３位が酢酸、２位がアラキジン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２B２（１，３位が酢酸、２位がベヘン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２E２（１，３位が酢酸、２位がエルシン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４P４（１，３位が酪酸、２位がパルミチン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４O４（１，３位が酪酸、２位がオレイン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４S４（１，３位が酪酸、２位がステアリン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４A４（１，３位が酪酸、２位がアラキジン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４B４（１，３位が酪酸、２位がベヘン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４E４（１，３位が酪酸、２位がエルシン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６P６（１，３位がカプロン酸、２位がパルミチン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６O６（１，３位がカプロン酸、２位がオレイン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６S６（１，３位がカプロン酸、２位がステアリン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６A６（１，３位がカプロン酸、２位がアラキジン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６B６（１，３位がカプロン酸、２位がベヘン酸よりなるトリアシルグリセロール）、６E６（１，３位がカプロン酸、２位がエルシン酸よりなるトリアシルグリセロール）、２P４（１位が酢酸，２位がパルミチン酸、３位が酪酸よりなるトリアシルグリセロール）、２O６（１位が酪酸、２位がオレイン酸、３位がカプロン酸よりなるトリアシルグリセロール）、４S６（１位が酪酸、２位がステアリン酸、３位がカプロン酸よりなるトリアシルグリセロール）などが例示でき、これらの中では２O２（１，３位が酢酸、２位がオレイン酸よりなるトリアシルグリセロール）が好ましい。

このＳＬＳ型の油脂は１，３位が短鎖脂肪酸であるため、リパーゼによる加水分解を受け難い性質を有し、このＳＬＳ型トリアシルグリセロールを油脂中に０．５〜３５重量％、好ましくは０．５〜２０重量％、更に好ましくは１〜１０重量％含むことで、油脂に対するリパーゼによる加水分解が緩和・遅延されるというものである。
油脂に対するリパーゼ阻害剤による加水分解の緩和・遅延程度としては、マイルドな阻害効果が好ましく、具体的には摂取油脂の1〜３割程度、好ましくは１〜２割程度が分解されにくい状態を理想とする。
このＳＬＳ型トリアシルグリセロールの油脂中に含む量が下限未満の場合は、期待する効果が得にくくなり、上限を超える場合は、風味が悪くなり、効果が強くなりすぎる。

本発明のＳＬＳ型トリアシルグリセロールは、一般的には動物・植物・魚由来の油脂と短鎖脂肪酸あるいはその低級アルコールエステル類、例えばエチルエステル類とを任意の配合で混合した後、１，３位特異性のあるリパーゼを使用して公知の方法でエステル交換させることで得られる。植物油脂としては例えば、大豆油、菜種油、パーム油、綿実油、ヒマワリ油、コーン油、キャノーラ油などが挙げられ、動物油脂としては牛脂、豚脂、魚油などが挙げられる。また、非選択的エステル交換、例えばナトリウムメチラートなどのアルカリ系触媒を用いてつくることも可能ではあるが、位置異性体であるＳＳＬ型トリアシルグリセロールがＳＬＳ型トリアシルグリセロールの倍量できるため、効果が薄くなりあまり実用的ではない。かくして得られたＳＬＳ型トリアシルグリセロールはその後、蒸留・分別及び要すれば硬化などの通常の加工処理を施し、例えば７０％以上の純度品を得ることが出来る。

本発明のＳＬＳ型トリアシルグリセロールはそのまま使用してもよいし、また任意に他の油脂と混合して使用してもよい。混合される比率は期待する効果や使用する系によって異なるが、混合される油脂は食用の動・植物油脂であればなんら制限はない。

本発明のＳＬＳ型トリアシルグリセロールは、通常油脂を含有する食品に広く使用することができる。例えばクリーム・マーガリン・マヨネーズ・ドレッシング・乳製品といった乳化食品、チョコレートに代表される菓子類、パン類、ハム・ソーセージ等の食肉加工品、かまぼこ・ちくわ等の水産加工食品などに添加して風味・食感を損なうことなく使用できる。ＳＬＳ型トリアシルグリセロール中の短鎖脂肪酸が高温での安定性においてやや弱いが、調理用やフライ用にももちろん使用は可能である。また、油脂を含まなくても上記食品と同時に摂取するような水、果汁、牛乳、お茶、清涼飲料に添加して使用することもできる。

本発明のリパーゼ阻害剤、脂質吸収阻害剤、抗肥満剤、高脂血症改善剤及びこれらを含有する医薬の投与方法は、経口投与または非経口投与のどちらでよい。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射などの投与方法に適した固体または液体の医薬用担体と混合して、製剤の形態で投与することができる。

以下に本発明の実施例を示し本発明をより詳細に説明するが、本発明の精神は以下の実施例に限定されるものではない。なお、例中、％及び部は、いずれも重量基準を意味する。

製造例１
沃素価８４のハイオレイックヒマワリ油５０部と純度９９．５%の酢酸エチル５０部を混合し、１，３位特異性のリパーゼ（Novozaymes, Lipozyme RM-IM）を用いてエステル交換を行うことにより、反応油を得、２２０℃での蒸留によりエステル類を除去した後、さらに昇温して２５０℃で純度８３％の２O２画分１０部を得た。

薬理試験１
この得られた２O２画分を大豆油中１部（２O２純度約０．８％），５部（２O２純度約４．２％），１０部（２O２純度約８．３％），５０部（２O２純度約４１．５％）それぞれ置換した系や２O２画分そのもの（２O２純度８３％）の系で、以下のリパーゼ活性測定を行った。各油脂８０mgをサンプリングし、ホスファチジルコリン（Sigma社）８０mg、タウロコール酸Na（和光純薬工業）5mg、０．１M NaClを含む０．１MTES緩衝液９ml（PH ７）を各加えた後、超音波発振子で１分間乳化したものを基質した。基質３００μlを採取し、ブタ膵臓リパーゼ（Sigma社）を５μl（5U）加え、３７℃で１時間反応後、３mlの抽出溶媒（クロロホルム／ヘプタン／メタノール＝４９部／４９部／２部で混合したもの）を加え良く攪拌した後、２５００rpmで５分間遠心分離を行い、上層を除去し、下層に銅試薬（トリエタノールアミン２．９８ｇ、硝酸銅２．４２ｇ、NaOH０．４８gを水２００ｍｌに溶解し、さらにNaClを６６ｇ加えたもの）を１ml加え、１０分間攪拌し、２５００rpmで１０分遠心分離し、上層１．５mlを採取し、発色試薬（バソクプロイン０．２g、ブチルヒドロキシアニソール０．１gをクロロホルム２００mlに溶解したもの）１．５mlを加えて遊離した脂肪酸をOD４８０での吸光度にて定量した。表１に大豆油そのものの系に対する相対活性を示した。表１に示されるように２O２で１部を置換した系で約２０％、５部を置換した系で約３５％活性が阻害されることが判明した。

比較製造例１
純度９８％のトリアセチン５０部と純度９８％のオレイン酸エチル50部を混合し、１，３位特異性のリパーゼ（Novozaymes Lipozyme RM-IM）を用いてエステル交換を行うことにより、反応油を得、２２０℃での蒸留によりエステル類を除去した後、さらに昇温して２５０℃で純度８２％の２２O画分５０部を得た。

比較薬理試験１
この得られた２２O画分を大豆油中１部（２２O純度約０．８％），５部（２２O純度約４．１％），１０部（２２O純度約８．２％），５０部（２２O純度約４１％）それぞれ置換した系、及び２２O画分そのものの系（２２O純度８２％）で先述の試験例と同様のリパーゼ活性測定を行った。表１に示されるように２２Oの置換量に関係なく、リパーゼの加水分解抑制の効果は無いと判断された。

比較製造例２
沃素価８４のハイオレイックヒマワリ油５５部と純度９８％のトリアセチン４５部を混合してソディウムメチラートを用いたランダムエステル交換を行い、中和・水洗後、約６０部の反応油を得た。この反応油を２５０℃で蒸留して純度８７％の22O/2O2混合画分（２２O純度約５７％、２O２純度約３０％）を４２部得た。

比較薬理試験２
この得られた22O/2O2混合画分を大豆油中１部（２２O純度約０．６％、２O２純度約０．３％），５部（２２O純度約２．９％、２O２純度約１．５％），１０部（２２O純度約５．７％、２O２純度約３．０％），５０部（２２O純度約２８．５％、２O２純度約１５％）それぞれ置換した系、及び22O/2O2混合画分そのものの系（２２O純度５７％、２O２純度３０％）で先述の試験例と同様のリパーゼ活性測定を行った。表１に示されるように、22O/2O2の置換量が増えても、顕著なリパーゼの加水分解抑制効果は認められなかった。

製造例２
沃素価８４のハイオレイックヒマワリ油５０部と純度９８%のヘキサン酸エチル５０部を混合し、１，３位特異性のリパーゼ（Novozaymes, Lipozyme RM-IM）を用いてエステル交換を行うことにより、反応油を得、２２０℃での蒸留によりエステル類を除去した後、さらに昇温して２５８℃で純度７８％の６O６画分１５部を得た。

薬理試験２
この得られた６O６画分を大豆油中１部（６O６純度約０．８％），５部（６O６純度約３．９％），１０部（６O６純度約７．８％），５０部（６O６純度約３９％）それぞれ置換した系、及び６O６画分そのものの系（６O６純度７８％）で先述の試験例と同様のリパーゼ活性測定を行った。表１に示されるように６O６を１部を置換した系で約１５％、１０部を置換した系で約２５％活性が阻害されることが判明した。

マウスでの消化吸収試験
製造例１で得られた２O２画分を使用して約２ヶ月間のマウスでの消化吸収試験を行った。使用したマウスはＣ５７ＢＬ／６Ｊで７週齢から１週間予備飼育後、食餌組成はＡＩＮ−９３Ｇ組成を一部改良した表２の配合飼料にて大豆油群をコントロールにして各群６匹で約２ヶ月間飼育し、体重変化・飼料効率・体脂肪率の測定を行った。体脂肪率の測定は、実験マウス専用エックス線骨密度測定装置、ＰＩＸＩｍｕｓ２（ＧＥＭｅｄｉｃａｌＳｙｓｔｅｍｓ）を使用した。マウスでの５６日間の消化吸収試験の結果、２O２画分を使用した群では体重で約１０％、飼料効率で１７％の低下が認められ、また体脂肪率では約１４％の低下が観られ、脂肪の過剰摂取による肥満に２O２の微量添加が効果的であることが示唆された。これらの結果を表３に纏めた。

本発明により、リパーゼ活性を緩やかに阻害し、かつ油溶性であり、あらゆる食用油脂に添加でき、脂肪の過剰摂取による肥満や肥満が原因で発生する疾病の予防や治療に有効であるリパーゼ阻害剤、およびそれを含む油脂組成物を得ることが可能となったのである。

Claims

ＳＬＳ型トリアシルグリセロール（Ｓは炭素数２〜６の短鎖脂肪酸、Ｌは炭素数１６〜２２の長鎖脂肪酸より構成される対称型トリアシルグリセロール）を有効成分とするリパーゼ阻害剤。
請求項１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする脂質吸収阻害剤。
請求項１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする抗肥満剤。
請求項１記載のＳＬＳ型トリアシルグリセロールを有効成分とする高脂血症改善剤。
請求項１乃至請求項４何れか1項記載の剤を含有する食品。
請求項１乃至請求項４何れか1項記載の剤を含有する医薬。