JP2005213221A - 二糖類分解酵素阻害物質の製造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 エンサイを20ないし100容量%の低級アルコールを含む低級アルコール−水混液で抽出後、この抽出液を芳香族系合成吸着剤に吸着させ、次いで、当該芳香族系合成吸着剤からの20ないし40%低級アルコール−水混液による溶出成分を採取することを特徴とする二糖分解酵素阻害物質の製造方法並びに上記方法で得られる溶出成分を更に逆相高速液体クロマトグラフィーに付して精製することを特徴とする二糖分解酵素阻害物質の製造方法。
【選択図】 図1
Description
A1 ; サンプル添加時のグルコース生成量
A2 ; 対照生成グルコース量
(1)エンサイ乾燥条件の検討:
抽出・精製工程の前処理として、エンサイを部位に分け、その乾燥条件を検討した。
乾燥温度を50℃、60℃および80℃に設定し、3時間ごとに重量を測定した。また24時間乾燥後における粉末の色合いについても検討した。乾燥終了後、高速溶媒抽出機にて抽出溶媒として50%エタノール水溶液、抽出温度80℃、抽出時間10minで2回抽出を行なった。得られた、抽出液を遠心濃縮にて乾燥後、濃度を50mg/mlに調整して二糖類分解酵素阻害活性を測定した。
(2-a)抽出溶媒の検討;
抽出溶媒は0%〜100%のエタノール水溶液(以下、「EtOH」ということがある)で抽出を行ない、抽出溶媒を検討した。抽出液を乾固後、25mg/mlの濃度に調整して二糖類分解酵素阻害活性を測定した。この結果を表1に示す。
溶媒として50%EtOHを使用し、30℃〜80℃の温度で、3時間ごとにサンプリングを行ない、抽出液の二糖類分解酵素阻害活性を測定し、適切な抽出時間および抽出温度を検討した。この結果を表2に示す。
二糖類分解酵素阻害物質画分の取得:
50℃で乾燥したエンサイを粉砕した後、50%EtOHを溶媒とし、60℃の温度で3時間抽出を行った。
ODS−A(250×20mm ID S−5μm)(溶出液:MeOH25%〜60%、1%酢酸(40分)、流量:10ml/min:図1のB)を用いて、活性成分の分離を行った。そのクロマトグラムを図2に示す。
構造解析:
上記各化合物について、化合物UV、NMR、MS測定を行い、得られたスペクトルについて文献値との照合などの解析を行なった結果、化合物1がイソクロロゲン酸c、化合物2がイソクロロゲン酸a、化合物4がイソクロロゲン酸bであることが明らかとなった。これらのイソクロロゲン酸類とクロロゲン酸についてIC50値を比較したところ、イソクロロゲン酸cが他の化合物の5倍以上の阻害活性を示すことが明らかとなった(表8)。
Claims (14)
- エンサイを20ないし100容量%の低級アルコールを含む低級アルコール−水混液で抽出後、この抽出液を芳香族系合成吸着剤に吸着させ、次いで、当該芳香族系合成吸着剤からの20ないし40%低級アルコール−水混液による溶出成分を採取することを特徴とする二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 低級アルコールがエタノールである請求項第1項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 低級アルコール−水混液での抽出に先立ち、エンサイを細断後50ないし80℃で、9ないし48時間乾熱乾燥させる請求項第1項または第2項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 芳香族系合成吸着剤への吸着に先立ち、エンサイの低級アルコール−水混液抽出物を水で希釈する請求項第1項ないし第3項記載の何れかの項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- エンサイを20ないし100容量%の低級アルコールを含む低級アルコール−水混液で抽出後、この抽出液を芳香族系合成吸着剤に吸着させ、次いで、当該芳香族系合成吸着剤からの20ないし40%低級アルコール−水混液による溶出成分を採取し、更にこれを逆相高速液体クロマトグラフィーに付して精製することを特徴とする二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 低級アルコールがエタノールである請求項第5項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 低級アルコール−水混液での抽出に先立ち、エンサイを細断後50ないし80℃で、9ないし48時間乾熱乾燥させる請求項第5項または第6項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 芳香族系合成吸着剤への吸着に先立ち、エンサイの低級アルコール−水混液抽出物を水で希釈する請求項第5項ないし第7項記載の何れかの項記載の二糖類分解酵素阻害物質の製造方法。
- 請求項第1項ないし第8項のいずれかに記載の方法により得られる二糖類分解酵素阻害物質を含有する飲食物。
- 請求項第1項ないし第8項のいずれかに記載の方法により得られる二糖類分解酵素阻害物質を含有する医薬。
- 飲食物添加用である請求項10記載の二糖類分解酵素阻害物質を含有する医薬。
- 糖尿病治療・予防剤である請求項第12項記載の二糖類分解酵素阻害剤。
- 抗肥満剤である請求項第12項記載の二糖類分解酵素阻害剤。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR101328107B1 (ko) | 2012-09-24 | 2013-11-11 | 세종대학교산학협력단 | 공심채 추출물을 포함하는 중금속 체외 배출 및 중금속으로 말미암은 산화적 손상 억제용 식품 조성물 |
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2004
- 2004-01-30 JP JP2004023594A patent/JP2005213221A/ja active Pending
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