JP2005187440A - 糖鎖構築用新規リンカー - Google Patents

Abstract

【課題】 本発明の課題は固相コンビナトリアル合成を用いる糖鎖ライブラリーの構築において，固相上で脱ベンジルを行ない，その後糖鎖を回収するためのリンカーを提供することにある。
【解決手段】 上記課題解決の手段として，モノアセチルアルカンジオールを出発原料として一端がテトラヒドロピラニル基，他端のカルボキシル基はＮ−ヒドロキシスクシイミドで活性エステル体とした新規なリンカーを合成した。
【選択図】 なし

Description

本発明は新規リンカーに関するものであり，有機合成およびその他の分野において要求されている固相合成に供するものである。

糖鎖はタンパク質や核酸についで第３の生命鎖と呼ばれ，近年糖鎖工学は急激な発展を遂げている。糖鎖が細胞社会における発生，分化，老化，免疫，癌化などの多面的な生命現象に深く関与している事が明らかになりつつあり，この糖鎖の機能解明，機能と構造の関係の解明を始めとする様々の研究が活発に行なわれている。糖鎖の機能と構造の関係を解明するための一つのアプローチとして構造の明確な糖鎖を合成し，その機能を評価することが行なわれている。系統だてた機能解明のためには一群の構造の明確な糖鎖が必要である。近年，一群の化合物を同時に合成するコンビナトリアル合成法が開発され，糖鎖合成にも応用されつつある。糖鎖の合成は保護，グリコシル化，脱保護をグリコシド結合の数だけ繰り返し行なわれなければならず，コンビナトリアル合成の最も一般的な固相合成法では樹脂への担持，切り出し操作が加わる。糖鎖合成における最も広く利用されている保護基としてベンジル基があり，糖鎖のコンビナトリアル合成においてもこのベンジル基が多用されている。しかしながら，脱ベンジルの最も一般的なパラジウム触媒による水素添加反応では，脱ベンジル化と共に糖鎖が切り出されてしまい，パラジウム触媒による水素添加反応は使用出来ないことが知られている。樹脂に担持させたまま脱ベンジルする手法が求められており，盛んに研究されている。

こうした中，保護糖鎖をリンカーを介して固相と結び，脱保護を行った後，樹脂より切り離し，脱保護糖を得るという試みがなされている。最近蟹江らは，ベンジル基で保護した単糖担持固相体を，触媒としてパラジウム微粒子を用いて接触水素化を行ない，その後，切り出してリンカー付きの脱保護糖を得ている［Ｋａｎｉｅ，Ｏ．；Ｇｒｏｔｅｎｂｒｅｇ，Ｇ．；Ｗｏｎｇ，Ｈ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，３９，４５４５（２０００）］。しかしながら，反応時間が６０時間と長く，満足出来るものではない。また，Ｉａｄｏｎｉｓｉらは，固相担体としてＣＰＧ（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｐｏｒｅ ｇｒａｓｓ）樹脂を用い，ＮａＢｒＯ_３／Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_４を用いた水−酢酸エチル２相系の反応により，グルコースに導入されたベンジル基を固相上で脱ベンジルさせている［Ａｄｉｎｏｌｆｉ，Ｍ．；Ｂａｒｏｎｅ，Ｇ．；Ｉａｄｏｎｉｓｉ，Ａ．；ｃｈｉａｔｔａｒｅｌｌａ，Ｍ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ，４２，５９７１，（２００１）］。しかしながら，処理量は極端に少なく，また，ポリスチレンタイプの樹脂を用いた場合，ベンジル位のブロモ化が副反応として起こってしまうという課題が残っている。これらの研究は固相反応による糖鎖ライブラリー構築の進展を示唆する事例であるが，必ずしも満足出来るものではない。保護糖鎖と固相担体をそれぞれ導入出来る反応点を二つ持ち，脱保護の際の還元条件に耐えられ，脱保護糖を壊す事なく，温和な条件で切り出しが出来るようなリンカーの出現が望まれている。そこで，発明者らは鋭意研究を重ね，本発明を完成するに至った。

すなわち，本発明は下記構造式

（式中Ｒ^１，Ｒ^２はそれぞれ独立に直鎖または分枝アルキレン基，ポリオキシアルキレン基から選択され，Ｘはヒドロキシスクシンイミド基や他の活性エステル，ｍ，ｎはそれぞれ独立に０または１から選択される。）で示される新規リンカーで，糖鎖の固相合成に供するものである。

本発明の代表例として下記構造式（１）

で示される化合物を取り上げ，本発明の有用性を明らかにする。

構造式（１）で示される化合物は文献未載の新規化合物であり，下記反応式に従って合成される。これは例示であり，本発明を制限するものではない。本発明に係る化合物（１）は下記反応式に従って３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシアルデヒドから５工程で得ることが出来る。

上記反応式において，第Ｉ工程で使用し得る還元剤として水素化アルミニウムリチウム，水素化アルミニウムナトリウム，水素化トリエトキシアルミニウムナトリウム，水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム等が挙げられ，好ましくは水素化アルミニウムリチウムである。使用しうる溶媒の例として，第Ｉ工程はテトラヒドロフラン，エーテル，ジオキサン等，あるいはこれらの混合溶媒が挙げられる。第ＩＩ工程はＤＭＦ，テトラヒドロフラン，エーテル，トルエン，ベンゼン，ジオキサン等が挙げられ，第ＩＩＩ工程はトルエン，キシレン，ベンゼン，ヘキサン，ヘプタン等と水との混合溶媒が挙げられ，好ましくはトルエン−水系である。第ＩＶ工程は塩化メチレン，クロロホルム，トルエン，ベンゼン等，あるいはこれらの混合溶媒が挙げられる。第Ｖ工程はトルエン，テトラヒドロフラン，酢酸エチル，エーテル等が挙げられる。反応温度は各工程それぞれ通常−１００〜１００℃の範囲内で行なうことが出来るが，好ましくは第Ｉ工程が０℃付近，第ＩＩ工程が−２０℃付近，第ＩＩＩ工程が１００℃付近，第ＩＶ工程，第Ｖ工程は０℃〜室温である。反応に要する時間は使用する溶媒，塩基，反応温度により異なる。第Ｉ工程，第ＩＩ工程，第ＩＶ工程は１〜５時間の範囲内で適宜選択される。第ＩＩＩ工程，第Ｖ工程は通常６〜４８時間の範囲内であるが，好ましくは第ＩＩＩ工程は２０〜２６時間，第Ｖ工程は９〜１３時間の範囲内で適宜選択される。反応混合物からの目的物の単離，精製は，常法に従って容易に行なうことが出来る。例えば，ろ過，あるいはエーテル，ベンゼン，トルエン，塩化メチレン，酢酸エチルのごとき有機溶媒による抽出，またはシリカゲル，活性アルミナあるいはスチレン，アクリル酸エステルの多孔質重合体等を用いた各種クロマトグラフィーを行なうことにより，単離，精製することが出来る。

本発明化合物（１）は容易に保護糖担持固相体を生成し，容易に脱保護し，その後切り出しが可能である。下記反応式に内容を示し，本発明の有用性を明らかにする。

本発明化合物（１）のビニルエーテル部位は，ベンジル基を有した保護グルコース（２）の６位水酸基を容易に補足し，固定化前駆体（３）を生成する。固相担体として，ポリスチレン−ジビニルベンゼンにより高度に架橋され，反応点が表出しているＡｒｇｏ−Ｐｏｒｅ樹脂を用いると，固定化前駆体（３）は固相担体に容易に担持して保護単糖担持固相体（４）を生成する。（４）の脱ベンジルはＢｉｒｃｈ還元によりスムーズに進行し，脱保護糖を担持した固相単体（５）が得られる。固相担体（５）は，１０％ＴＦＡ−塩化メチレンを用いて切り出した後，一部生成したトリフルオロアセチル体を塩基のポリスチレン樹脂ＮＭＭに作用させ，完全に脱保護したグルコース（６）を収率良く得る事が出来る。

次に二糖を用いた固相合成を下記反応式に例示する。

本発明化合物（１）のビニルエーテル部位は，保護基としてベンジル基，ｐ−トルオイル基およびフタロイル基を有した二糖（７）の１級水酸基を容易に補足して，固定化前駆体を生成する。続いて固定化前駆体はＡｒｇｏ−ｐｏｆｅ樹脂と反応して二糖担持固相体（８）を生成する。（８）にヒドラジンを反応させて脱フタロイル化，脱ｐ−トルオイル化を行うと固相体（９）が生成する。（９）に無水酢酸−ピリジンを反応させ，アセチル化体（１０）が生成する。（１０）の脱ベンジルはＢｉｒｃｈ還元で進行し，脱保護化された固相体（１１）が生成する。最後に（１１）の切り出しを行い，脱保護糖（１２）が得られる。三糖についても同様の手法で応用出来る。このように本発明化合物（１）を使用して合成した糖担持固相体は，固相合成における諸反応に耐えられる事が明らかになった。以下に参考例として本発明化合物（１）を使った固相合成を示すが，これは例示の目的であり，この参考例に限定されるものではない。

参考例１
メチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）−ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（３）の合成
メチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−グルコピラノシド（２）０．５４ｇ（１．１６ｍｍｏｌ）と塩化メチレン５．８ｍｌの溶液に触媒量の（＋）−１０−カンファースルホン酸を加え，０℃でリンカー（１）０．９４０ｇ（２．３７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を滴下後室温で１２時間攪拌し，後内容物を飽和重曹水中に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶媒層を重曹水，飽和食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を得た。残留物を塩化メチレン−メタノール（９８．５：１５）系でシリカゲルクロマトグラフにかけ，メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（３）０．９ｇ（１．０５ｍｍｏｌ）を得た。収率９０％。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３７−７．２５（ｍ，１５Ｈ），５．７５（ｂｒｓ，１Ｈ），５．００−４．５５（ｍ，７Ｈ），４．０２−３．２７（ｍ，１５Ｈ）３．２１（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ），２．７９（ｓ，４Ｈ），２．５４（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．３３（ｍ，１２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６９．７，１６９．０，１６８．２，１３８．８，１３８．５，１３８．４，１３８．２，１２８．５，１２８．４，１２８．１ｘ２，１２８．０ｘ２，１２７．９，１２７．８，１２７．７，１２７．６ｘ２，９８．０，９７．９，９７．７，８２．２ｘ２，８０．１，７８．０，７７．９，７７．６，７５．８，７５．０，７４．９，７４．１ｘ２，７３．３ｘ２，７１．３ｘ２，７０．２，６９．９，６８．１，６７．８，６５．７，６５．５，５５．１，５５．０，３９．７，３０．９，２９．５ｘ２，２９．３，２９．２，２７．４，２７．０，２５．６，２３．５，１７．８，１７．７；ＩＲ（ｎｅａｔ）３３３４，２９３８，１８１５，１７８６，１７４０，１６６８，１５４２，１４５５，１３６１，１２０５，１０７０，７３５，６９９

メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（３）の固相担持
メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（３）４９．７ｍｇ（０．０５８ｍｍｏｌ）とＤＭＦ３．２ｍｌの溶液に樹脂としてＡｒｇｏ−Ｐｏｒｅ６０７ｍｇ（０．１７ｍｍｏｌ）を加え，触媒量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加え室温で１６時間振とうした。反応混合物をろ過し，それぞれ３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回洗浄し，固相担体を真空乾燥して単糖担持固相体（４）を得た。固相担持体の一部４７．８ｍｇをＴＦＡ０．２ｍｌと塩化メチレン２ｍｌの溶液で室温下２時間処理後，ろ過し，３ｍｌのメタノールで２回処理し濃縮した。残留物はアセトニトリルで３回共沸留去し，塩基のポリスチレン樹脂（Ｎ−メチルモルホリン）を作用させ，グルコース（２）２．０ｍｇを得た。付加量０．０９ｍｍｏｌ／ｇ，収率８０％。

固相担持体（４）のＢｉｒｃｈ還元と切り出しによるα−Ｄ−グルコピラノシド（６）の合成
単糖担持固相体（４）を３ｍｌの乾燥ＴＨＦと共に室温で３０分間攪拌後，−７８℃に冷却し液体アンモニアとリチウム顆粒５０ｍｇを加え，同温度で１５時間攪拌した。後−３０℃で１．５時間かけて液体アンモニアを留去後，反応混合物を少量のメタノールを加えた後ろ過し，固相体をそれぞれ３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回洗浄し，真空乾燥して脱保護された固相体（５）を得た。固相体（５）はＴＦＡ０．２ｍｌと塩化メチレン２ｍｌの溶液で室温下２時間処理後，ろ過し，３ｍｌのメタノールで２回処理し濃縮する。残留物はアセトニトリルで３回共沸留去し，塩基のポリスチレン樹脂（Ｎ−メチルモルホリン）を作用させ，完全脱保護したα−Ｄ−グルコピラノシド（６）を収率７５％で得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）δ４．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８４Ｈｚ），３．８０（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４１，１１．６Ｈｚ），３．６６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．８２，１２．１Ｈｚ），３．６０（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１８，９．６６Ｈｚ），３．５１（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８８，９．６６Ｈｚ），３．２７（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１８，１０．２Ｈｚ）

参考例２
メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシドの合成
メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（７）０．１００ｇ（０．１０４ｍｍｏｌ）と塩化メチレン０．６ｍｌの溶液に触媒量の（＋）−１０−カンファースルホン酸を加え，０℃にて合成したリンカー（１）０．０８２４ｇ（０．２０８ｍｍｏｌ）と塩化メチレン０．６ｍｌの溶液を滴下する。後室温で１２時間攪拌し，後内容物を飽和重曹水中に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶媒層を重曹水，飽和食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を得た。残留物を塩化メチレン−メタノール（９８．５：１．５）系でシリカゲルクロマトグラフにかけ，メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシド０．１０４ｇ（０．０８２４ｍｍｏｌ）を得た。収率７９％。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）δ７．８１−７．０３（ｍ，２７Ｈ），６．１８（ｄ ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．６６，１０．６Ｈｚ），５．８５（ｂｒ，１Ｈ），５．５９（ｄ，１Ｈ，ｊ＝８．７１Ｈｚ），５．４９（ｄ ｄ，１Ｈ，ｊ＝９．６６，９．７０Ｈｚ），４．８７−３．２３（ｍ，２５Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７，２４Ｈｚ），２．８１（ｓ，４Ｈ），２．５２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２４Ｈｚ），２．３４（ｓ，３Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），１．７６−１．２５（ｍ，１２Ｈ）

メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシドの固相への担持
メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−６−Ｏ−［２−［５−（Ｎ−スクシンアミド酸−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）ペンチルオキシメチル］テトラヒドロピラニル］−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシド３８．０ｍｇ（０．０３０１ｍｍｏｌ）と乾燥ＴＨＦの溶液に樹脂Ａｒｇｏ−Ｐｏｒｅ３００ｍｇ（０．０８４ｍｍｏｌ）と触媒量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを加え，室温で１６時間振とうする。反応混合物をろ過し，それぞれ３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回洗浄し，固相担体を真空乾燥して二糖担持固相体（８）を得た。この固相体４５．ｍを参考例１と同様の処理を行って二糖３．４ｍｇを得た。付加量０．０７８ｍｍｏｌ／ｇ，収率６２％。

メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４−ジ−Ｏ−（ｐ−トルオイル）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−α−Ｄ−グルコピラノシド（８）の固相上におけるフタルイミド基脱保護化
二糖担持固相体２３５ｍｇにヒドラジン一水和物０．７ｍｌとエタノール３５ｍｌの溶液を加え，１００℃で２４時間煮沸する。後反応混合物をろ過し，それぞれ３ｍｌのエタノールで２回，３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回洗浄した後，３ｍｌのエーテルで２回すすいだ。固相担体を真空乾燥してメチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド担持固相体（９）を得た。固相体（９）は参考例１と同様の処理を行ってメチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシドを得た。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）Ｆｏｕｎｄ：６２６．３７（Ｍ＋Ｈ）Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ：６２６．３０（Ｍ＋Ｈ）純度９０％。

メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−アミノ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド担持固相体のアセチル化
固相担持体（９）に無水酢酸１．３９ｍｌ（１４．７ｍｍｏｌ），ピリジン４．８２ｍｌ（５９．６ｍｍｏｌ）を加え室温で１２時間攪拌する。反応混合物をろ過し，それぞれ３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回洗浄し，固相担体を真空乾燥して２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−（２−デオキシ−２−Ｎ−アセチル−３，４−ジ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド担持固相体（１０）を得た。固相体（１０）の一部を参考例１と同様の処理を行いメチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−Ｎ−アセチル−３，４−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシドを得た。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）モノ−Ｏ−アセチル Ｆｏｕｎｄ：７１０．４１（Ｍ＋Ｈ）Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ：７１０．３２（Ｍ＋Ｈ）ジ−Ｏ−アセチルＦｏｕｎｄ：７５２．４２（Ｍ＋Ｈ）Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ：７５２．３３（Ｍ＋Ｈ）純度６３％。

メチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２）の合成
メチル２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−（２−デオキシ−２−Ｎ−アセチル−３，４−ジ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド担持固相体（１０）１４５ｍｇを乾燥ＴＨＦ３ｍｌと共に室温で１５分攪拌後−７８℃に冷却し，液体アンモニアとリチウム顆粒５０ｍｇを加えて同温度で１．５時間反応した。後−３０℃で１．５時間かけて液体アンモニアを留去後，反応混合物を少量のメタノールを加えた後ろ過し，固相体をそれぞれ３ｍｌのＤＭＦで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回，３ｍｌのメタノールで２回，３ｍｌの塩化メチレンで２回洗浄し，真空乾燥して脱保護された固相体（１１）を得た。固相体の切り出しは参考例１と同様の処理を行いメチル ２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−デオキシ−２−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２）を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ−ＴＯＦ）Ｆｏｕｎｄ：３９８．２１（Ｍ＋Ｈ）Ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ：３９８．１７（Ｍ＋Ｈ）。

発明の効果

以上のように本発明化合物を使用することにより，糖鎖の固相合成が極めて容易になった。
本発明に係るリンカーは反応性の異なる反応点を両末端に有しており，一方は糖の水酸基と，他方は固相担体のアミノ基と反応結合する。これら結合は種々の保護基の導入条件や脱保護条件に安定である。そして，トリフルオロ酢酸酸性下で糖部分を固相担体から回収することが出来る。ことに従来困難であった脱ベンジル条件下でも安定である。本発明化合物を使った糖鎖の固相合成により，糖鎖ライブラリー構築が飛躍的に向上し，糖鎖の構造と物性の相関を分子レベルで理解する研究にも威力を発揮するものと期待出来る。

以下に本発明に係る実施例を記載するが，これは例示の目的であり，本発明を制限するものではない。本発明の範囲内では変形が可能な事は当業者には明らかであろう。
実施例１
１−アジド−５−メタンスルホニルペンタンの合成
塩化メチレン８２．２ｍｌと１−アセチル−１，５−ペンタンジオール６．０ｇ（４１．１ｍｍｏｌ）の溶液にピリジン１６．５ｍｌ（２０５ｍｍｏｌ），触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを加え０℃でメタンスルホニルクロライド３．１８ｍｌ（２０５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で２時間攪拌後，内容物を氷水中に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶媒層を１Ｎ塩酸で洗浄，次いで重曹水，飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を得た。残留物とＤＭＦ８２．２ｍｌの溶液に５０℃でアジ化ソーダ４．０１ｇ（６１．６ｍｍｏｌ）を加え，同温度で１０時間攪拌した後水に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶剤層は水，次いで飽和重曹水，飽和食塩水の順で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶剤を留去し残留物を得，これは次工程にそのまま使用した。この残留物６．０５ｇとメタノール７０．８ｍｌの溶液にナトリウム０．０８１４ｇ（３．５４ｍｏｌ）を加え，室温で３０分攪拌後温度を０℃とし，アセチルクロライドで中和後，内容物を水に注ぎ，酢酸エチルで２回抽出した。溶媒層は飽和重曹水，飽和食塩水で洗浄後無水硫酸マグネシウムで乾燥し溶剤を留去，残留物を得た。この残留物３．５１ｇと塩化メチレン５４．４ｍｌの溶液にピリジン１１．０ｍｌ，触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを加え，０℃にてメタンスルホニルクロライド２．１１ｍｌ（２７．２ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で２時間攪拌後，内容物を氷水中に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶媒層を１Ｎ塩酸で洗浄，次いで重曹水，飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を得た。残留物を酢酸エチル−ヘキサン（１：４）系でシリカゲルクロマトグラフにかけ，１−アジド−５−メタンスルホニルペンタン４．１６ｇ（２０．１ｍｍｏｌ）を得た。収率４９％。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）：δ４．１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．２８），３．２６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．７７Ｈｚ），２．９７（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｍ，２Ｈ）；
^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）：δ６９．６，５１．０，３７．２，２８．６，２８．２，２２．８；ＩＲ（ｎｅａｔ）２９４４，２８７１，２１００，１４５８，１３５３，１１７４，９５２，９１９，８３１，５２９（ｃｍ^−１）

実施例２
２−（５−アジドペンチルオキシメチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランの合成
乾燥ＴＨＦ２０ｍｌとリチウムアルミニウムハイドライド０．５４１ｇ（１４．６ｍｍｏｌ）の混合物中に０℃で３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシアルデヒド１．４９ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）とＴＨＦ２０．０ｍｌの溶液を滴下する。０℃で２．５時間攪拌後，反応混合物をエーテルで希釈し，０℃で飽和食塩水中にゆっくり加えた。溶剤層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を得る。水素化ナトリウム０．７９９ｇ（１８．３ｍｍｏｌ）を２ｍｌのヘキサンで２回洗浄後，−２０℃に冷却し，先の残留物１．５６ｇと乾燥ＤＭＦ３０ｍｌの溶液を滴下した。同温度で３０分間攪拌した後，この混合物に１−アジド−５−メタンスルホニルペンタン４．１６ｇ（２０．１ｍｍｏｌ）と乾燥ＴＨＦ２０ｍｌの溶液を滴下した。室温で２時間攪拌後内容物に塩化アンモニウム水溶液を加え，エーテル抽出する。溶媒層を飽和重曹水，飽和食塩水で洗浄し，無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を留去，残留物を酢酸エチル−ヘキサン（１：９）系でシリカゲルクロマトグラフにかけ２−（５−アジドペンチルオキシメチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン２．２０ｇを得た。収率７４％。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）δ６．３８（ｄ，Ｊ＝１．９３Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），３．５７−３．４５（ｍ，４Ｈ），３．２６（ｔ，Ｊ＝６．７７Ｈｚ，２Ｈ），２．０９（ｍ，１Ｈ），１．９７（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｍ，１Ｈ），１．７１−１．５８（ｍ，５Ｈ），１．４４（ｍ，２Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ３）δ１４３．７，１００．５，７４．１，７３．５，７１．４，５１．４，２９．２，２８．７，２４．７，２３．４，１９．４；ＩＲ（ｎｅａｔ）２９３８，２８６６，１６５１，１４５５，１２４２，１１２８，１０７１，７２９（ｃｍ^−１）

実施例３
Ｎ−［５−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメトキシ）ペンチル］スクシンアミド酸 ２，５−ジオキソピロリジン１−イルの合成
実施例２で得たピラン２．１１ｇ（８．８９ｍｍｏｌ），トルエン５９．３ｍｌ，水２９．７ｍｌの混合物にトリフェニルホスフィン２３．３ｇ（８８．９ｍｍｏｌ）を加え１００℃で２４時間反応後，内容物を水に注ぎ，酢酸エチルで２回抽出した。溶剤層を飽和食塩水で洗浄後無水硫酸マグネシウムで乾燥し後溶媒を留去，残留物を得た。残留物と塩化メチレン４５ｍｌの溶液に，０℃でピリジン３．６０ｍｌ（４４．４ｍｍｏｌ），触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン，無水コハク酸２．６６ｇ（２６．６ｍｍｏｌ）を加え，後室温で３時間攪拌反応した。内容物は塩化アンモニウム水溶液に加え，酢酸エチルで２回抽出した。溶剤層を飽和食塩水で洗浄後無水硫酸マグネシウムで乾燥し後溶媒を留去，残留物を得た。残留物とトルエン４５ｍｌの溶液中にＮ−ヒドロキシスクシンイミド１．５３ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）と１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド２．７４ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）を加え，室温で１１時間反応した。後内容物を飽和重曹水中に注ぎ酢酸エチルで２回抽出した。溶剤層は重曹水次いで飽和食塩水で洗浄後，無水硫酸マグネシウムで乾燥し後溶媒を留去，残留物を得た。残留物を塩化メチレン−メタノール（９８．５：１．５）系でシリカゲルクロマトグラフにかけＮ−［５−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメトキシ）ペンチル］スクシンアミド酸 ２，５−ジオキンピロリジン １−イル２．７７ｇ（６．９９ｍｍｏｌ）を得た。収率７９％。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）δ６．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２８Ｈｚ），５．８４（ｂｒｓ，１Ｈ），４．６６（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），３．４８（ｍ，４Ｈ），３．２３（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ），２．８１（ｓ，４Ｈ），２．５５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２５Ｈｚ），２．０７（ｍ，１Ｈ），１．９５（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．５５（ｍ，３Ｈ），１．５０（ｍ，２Ｈ），１．３５（ｍ，２Ｈ）^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，．ＣＤＣｌ_３）δ１６９．８，１６９．１，１６８．２，１４３．６，１００．５，７４．１，７３．４，７１．５，３９．７，３０．９，２９．２，２９．１，２７．０，２５．６，２４．６，２３．５，１９．４；ＩＲ（ｎｅａｔ）３３１９，２９３９，２８６５，１８１６，１７８６，１７３９，１６５２，１５５１，１３７０，１２０６，１０４８，７５２，６４８（ｃｍ^−１）

Claims (2)

1. 下記構造式
   

   

   （式中Ｒ^１，Ｒ^２はそれぞれ独立に直鎖または分枝アルキレン基，ポリオキシアルキレン基から選択され，Ｘはヒドロキシスクシンイミド基や他の活性エステル，ｍ，ｎはそれぞれ独立に０または１から選択される）で示される新基リンカー。
2. Ｒ^１が１，５−ペンタメチレン基，Ｒ^２がエチレン基，Ｘがヒドロキシスクシンイミド基，ｍが１，ｎが１である請求項１記載の新規リンカー。