CN110041377B

CN110041377B - 一种o-甘露聚糖核心结构的合成方法

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Publication number: CN110041377B
Application number: CN201910309945.4A
Authority: CN
Inventors: 彭鹏; 崔瞳晓; 李天路; 李彤; 孙雅静
Original assignee: Shandong University
Current assignee: Shandong University
Priority date: 2019-04-17
Filing date: 2019-04-17
Publication date: 2021-05-25
Anticipated expiration: 2039-04-17
Also published as: CN110041377A

Abstract

本公开属于糖类物质合成领域，具体涉及一种O‑甘露聚糖核心结构的合成方法。现有研究表明，α‑DG O‑甘露聚糖与肌营养不良、前列腺癌、乳腺癌等疾病的机制相关，合成α‑DG的核心结构对于肌营养不良相关病理机制的研究及诊治有重要的意义。本公开提供了一种O‑甘露聚糖核心结构的合成方法，以式(IV)、式(V)、式(VI)、式(VII)、式(VIII)及式(IX)所示化合物作为合成的中间体，采用针对性的选择保护策略，采用简单、价廉的单糖原料实现复杂的糖链合成，成功合成了肌营养不良量相关蛋白聚糖的三个核心结构，克服了现有技术中寡糖化合物合成操作复杂，效率低下，分离纯化困难等弊端。

Description

一种O-甘露聚糖核心结构的合成方法

技术领域

本公开属于糖类物质合成领域，特别是涉及一种肌营养不良相关蛋白聚糖三个分支核心结构(Core M1，Core M2，Core M3)的寡糖合成方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

在整个生物学中，对细胞外碳水化合物及聚糖的蛋白质翻译后修饰是一种重要过程。涉及蛋白质稳定性及质量控住。聚糖调节蛋白质和脂质的生理特征，并在细胞相互作用中发挥突出作用。O-甘露糖基化是大脑和肌肉发育过程中重要的蛋白质翻译后修饰，通过甘露糖与丝氨酸或苏氨酸残基的羟基氧的共价在多种生理及病理过程中起着至关重要的作用。近年来已证明O-甘露聚糖在基于细胞相互作用的病理学中起关键作用，包括如先天肌营养不良、病毒感染、癌症、肿瘤的转移等。特别是O-甘露糖在生物合成中的缺陷经常会导致α-肌营养不良相关蛋白(α-dystroglycan,α-DG)的低糖基化表达，会导致导致各类先天性肌营养不良症(CMDs)。

α-肌营养不良聚糖(α-dystroglycan,α-DG)是肌肉和脑组织中发现的一种高度糖基化的蛋白，是肌营养不良相关蛋白复合物的关键部分，其将细胞外基质与细胞内细胞骨架连接起来，这种连接取决于α-DG的“功能性糖基化”，若O-甘露聚糖生物合成途径异常而导致糖链低表达，将直接破坏DGC的功能并严重影响肌肉组织的正常结构和功能，引起不同类型的CMDs。此外，α-DG O-甘露聚糖的合成异常还会促进前列腺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的转移，介导多种病毒对细胞的入侵，在神经系统生长、发育、修复、信号传递等方面发挥重要作用。基于O-甘露聚糖的多样性和复杂性，为了方便组织和讨论，2012年Campbell实验室根据O-甘露糖GlcNAc残基的延伸提出了一套核心O-甘露糖结构理论体系，该结构最终经扩展成为α-DG功能糖基化唯一已知的正常生理受体。研究表明O-甘露聚糖主要由三种核心结构组成(Core M1，Core M2，Core M3)。Core M1含有β1-2连接的GlcNAc，Core M2含有β1-2和β1-6连接的GlcNAc残基，Core M3含有β1-4连接的GlcNAc残基。

对此，发明人认为设计、合成α-DG的核心结构类型对于肌营养不良相关病理机制的研究及诊治，对于糖类药物的研发提供了有效的解决办法。鉴于以上情况大量合成α-DG核心结构类型，发掘其潜在的糖链化合物库，发展以其为先导化合物的抗癌、抗肿瘤新型药物及发展新型早期诊断试剂具有重大意义。目前，已有文献报道用化学法、酶法以及化学酶法对肌营养不良相关蛋白聚糖的结构合成进行研究。但对整体结构的合成尚未有报道。

由于生物体内环境十分复杂，以提取的方式从生物体内获得大量结构单一的O-甘露聚糖用于生物学、药学研究的可能性微乎其微且异常困难。对于化学合成而言，由于糖链本身固有的活性相似的多羟基结构，在合成过程中需要反复的保护以及脱保护操作来保证区域、立体选择性，导致其反应步骤多、总体收率低。酶法合成往往受限于表达量低，纯化困难，底物适用性窄等弊端。

发明内容

针对上述研究现状，发明人认为寻求能够大量制备肌营养不良蛋白聚糖核心结构的方法具有重要意义，能够为肌营养不良相关病理机制、相关恶性肿瘤转移机制及其它生理功能的研究提供研究模型和依据。为了实现上述技术效果，本公开提供一种快速、高效的合成方法来合成肌营养不良蛋白聚糖三个分支核心结构(Core M1，Core M2，Core M3)，采用共用核心中间体策略合成目标糖链，为系统研究肌营养不良蛋白聚糖、抗肿瘤药物方面的应用奠定基础。

本公开提供以下技术方法：

本公开文件中，对于环状结构的碳原子编号方式如下式所示，：

第一方面，本公开提供式(IV)、式(V)、式(VI)、式(VII)、式(VIII)或式(IX)所示结构的化合物作为O-甘露聚糖合成中间体的应用，所述式(IV)、式(V)、式(VI)、式(VII)、式(VIII)或式(IX)所示化合物结构如下：

所示结构如下：

第二方面，本公开提供一种式(VI)所示结构化合物的合成方法，所述合成方法包括通过氰基效应对式(IV)结构C2位点的羟基进行保护得到式(V)结构；再引入苄基对C3位点羟基进行保护。

所述式(IV)、式(V)、式(VI)所示结构如下：

优选的，所述C2位点羟基的保护通过加入苯甲酰氰实现氰基效应。

优选的，所述C3位点羟基的保护通过Ag₂O、BnBr在中性条件下实现。

本公开研究表明，采用苯甲酰氰对式(IV)所示化合物C2位点的羟基具有选择性的保护作用。利用苯甲酰氰中的氰根离子与两个羟基形成双氢键作用，增强了相应氧原子的亲核性，因此可以区别保护不同位置的羟基。由于氰化物能够进行各种氢键键合，即使在空间位阻较大的位置也可以在低温下进行区域选择性O-酰化，从而形成动力学控制的产物。

第三方面，提供一种式(I)所示化合物的合成方法，所述合成方法为：将氨基酸通过羟基与式(XIII)所示化合物偶联。

优选的，所述式(XIII)所示化合物由式(X)所示化合物脱保护基得到。

进一步优选的，所述式(X)所示化合物通过全保护的葡萄糖胺糖基供体15偶联至式(VII)所示化合物C2位获得。

更进一步优选的，所述式(VII)所示化合物通过对式(VI)所示化合物脱除苯甲酰基得到。

第四方面，提供一种式(II)所示化合物的合成方法，所述合成方法为：将氨基酸通过羟基与式(IXV)所示化合物偶联。

优选的，所述式(IXV)所示化合物由式(XI)所示化合物脱保护基得到。

进一步优选的，所述式(XI)所示化合物通过全保护的葡萄糖胺糖基供体15偶联至式(VIII)所示化合物C2和C6位获得。

更进一步的，式(VIII)所示化合物通过对式(VII)所示化合物开环获得。

第五方面，提供一种式(III)所示化合物的合成方法，所述合成方法为：将氨基酸通过羟基与式(XV)所示化合物偶联。

优选的，所述式(XV)所示化合物由式(XII)所示化合物脱保护基得到。

进一步优选的，所述式(XII)所示化合物通过全保护的葡萄糖胺糖基供体15偶联至式(IX)结构的C4位获得。

更进一步的，所述式(IX)所示结构化合物通过式(VI)所示化合物开环获得。

上述第三、四、五方面中，所述化合物式(I)，式(II)、式(III)、式(X)、式(XI)、式(XII)、式(XIII)、式(IXV)、式(XV)结构如下：

上述第三、四、五方面中，所述葡萄糖胺糖基供体15合成路线如下：

与现有技术相比，本公开的有益效果是：

1.本公开提供了一种共用中间体法合成肌营养不良量相关蛋白聚糖的核心结构合成策略，实现了一物多用的合成策略，将化学合成所具有的高区域选择性和高效性结合到一起，可以实现从简单、价廉的单糖原料出发高效的实现复杂糖链的合成，避免使用价格昂贵且来源困难的化学试剂，因保护基的合理选择大大简化了实验步骤，效率高，成本低，可实现大量制备。本公开方法合成了肌营养不良量相关蛋白聚糖的三个核心结构，成功克服了现有报道的寡糖化合物的化学合成中需要对单糖砌块进行反复的保护基操作，合成步骤繁多，反应效率低，分离纯化困难等弊端。

2.本公开发展的高效共用中间体合成策略，为相关糖结构和生物学功能研究所需的糖链及其缀合物样品的获得提供了有效的、可行性极高的途径，还可在分子水平上深入研究这些糖链与病毒，癌症等受体的相互作用机制及构效关系，为相关疾病病理学机制的阐明和糖类药物的开发奠定了基础。

附图说明

构成本公开的一部分的说明书附图用来提供对本公开的进一步理解，本公开的示意性实施例及其说明用于解释本公开，并不构成对本公开的不当限定。

图1：式I所示化合物Core M1寡糖结构；

图2：式II所示化合物Core M2寡糖结构；

图3：式III所示化合物Core M3寡糖结构；

图4：实施例1中式VI所示化合物中间体的化学合成过程示意图；

图5：实施例1-3中对中间体选择性脱保护合成三个糖基受体合成过程示意图；

图6：实施例1中选择性保护的葡萄糖胺糖基供体化学合成过程示意图；

图7：实施例1中选择性保护的氨基酸合成过程示意图；

图8：实施例1中化学法合成式X所示化合物全保护Core M1的反应方程式；

图9：实施例2中化学法合成式XI所示化合物全保护Core M2的反应方程式；

图10：实施例3中化学法合成式XII所示化合物全保护Core M3的反应方程式；

图11：实施例1中式XIII所示化合物保护基统一的Core M1化学合成过程示意图；

图12：实施例2中式IXV所示化合物保护基统一的Core M2化学合成过程示意图；

图13：实施例3中式IXV所示化合物保护基统一的Core M3化学合成过程示意图；

图14：实施例1中合成式I所示化合物的反应方程式；

图15：实施例2中合成式II所示化合物的反应方程式；

图16：实施例3中合成式III所示化合物的反应方程式。

具体实施方式

应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

正如背景技术所介绍的，现有技术中针对O-甘露聚糖结构多样，已经报道的合成方法还存在诸多弊端，为了解决如上的技术问题，本公开提供了一种快速、高效的合成方法来合成肌营养不良蛋白聚糖核心糖链结构。

本公开提供以下技术方案，

在以下实施例中，对于环状结构的碳原子编号方式如下式所示：

第二方面，本公开提供一种式(VI)所示结构的化合物的合成方法，所述合成方法包括通过氰基效应对式(IV)结构C2位点的羟基进行保护得到式(V)结构；再引入苄基对C3位点羟基进行保护。

所述式(IV)、式(V)、式(VI)所示结构如下：

在一些实施例中，所述苯甲酰氰保护的具体反应条件是在氩气保护下，将化合物溶于二氯甲烷与N,N-二甲基甲酰胺(DCM:DMF＝3:1)的混合溶液中，-80～-70℃搅拌下加入BzCN和DMAP维持此温度搅拌3～5小时，反应完全后加入饱和氯化铵淬灭反应。

在一些实施例中，所述脱保护基的方法如下，序号(1)-(4)不对保护基脱除顺序进行限定：

(1)对式(X)结构上C4、C6位苄亚甲基保护基脱除；进一步的，所述脱除条件为：70～90％醋酸，在85～95℃下进行脱除；

(2)对式(X)结构上2,2,2-三氯乙氧羰基酰基脱除；进一步的，所述脱除条件为：35～45℃时，向反应体系中加入利用锌粉醋酸搅拌过夜；

(3)对式(X)结构上苄基脱除；进一步的，所述脱除条件为：钯碳/氢气条件下进行脱除；

(4)对式(X)结构上对甲氧基苯基脱除合成式(XIII)所示的结构；进一步的，所述脱除条件为：在硝酸铈铵条件下进行脱除。

在一些实施例中，所述偶联反应在-80～-70℃、三氟甲磺酸催化条件下进行。

在一些实施例中，所述苯甲酰基脱除反应的条件为：在甲醇/甲醇钠条件下，碱性环境(pH＝9～10)中进行。

在一些实施例中，所述脱保护基反应可采用第三方面所述脱保护基反应的步骤进行。

进一步优选的，所述式(XI)所示化合物通过全保护的葡萄糖胺糖基供体15偶联至式(VIII)结构的C2和C6位获得。

在一些实施例中，所述偶联反应可在第三方面所述偶联反应的条件下进行。

更进一步的，式(VIII)所示结构化合物通过式(VII)所示化合物开环获得。

在一些实施例中，所述开环反应的条件为：在三氟甲磺酸二丁硼和三氟化硼乙醚条件下进行。

在该系列实施例中，上述开环反应为C6位点的选择性开环反应。

进一步优选的，所述式(XII)所示化合物通过全保护的葡萄糖胺糖基供体15偶联至式(IX)所示化合物C4位获得。

在一些实施例中，所述偶联反应的条件为：在-80～-70℃、三氟甲磺酸及三氟化硼乙醚催化条件下进行。

更进一步的，所述式(XI)所示化合物通过对式(VI)所示化合物开环获得。

在一些实施例中，所述开环反应的条件为：在三乙基硅氢和三氟乙酸条件下进行。

在该系列的实施例中，上述开环反应为C4位点的选择性开环。

为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本公开的技术方案。

下述实施例中所提及的化合物24、30、36、7分别对应于通式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、IV的化合物。

实施例1：肌营养不良相关蛋白聚糖Core M1的合成

(1)化学法合成选择性保护的葡萄糖胺糖基供体15

将化合物11(10.0g,46.4mmol,1.0eq)和碳酸氢钠(11.7g,0.14mol,3.0eq)溶于200ml水中，冰浴下搅拌，缓慢滴加氯甲酸2,2,2-三氯乙酯(TrocCl)(12.8ml,92.8mmol,2.0eq)，白色固体溶解，溶液变澄清，自然升至室温，反应搅拌3小时后有大量白色固体析出。抽滤，滤饼用水洗涤后干燥过夜，几乎定量得到化合物12。化合物12直接用于下一步合成。

将化合物12(15.0g,42.3mmol,1eq)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(1.6g,12.7mmol,0.3eq)溶于150ml干燥的吡啶溶液中，室温搅拌2小时，TLC监测反应进程，反应完成后，加乙酸乙酯稀释，饱和碳酸氢钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤除去干燥剂，蒸干滤液，几乎定量得到化合物13。化合物13可直接用于下一步合成。

将化合物13(15g,29.7mmol,1.0eq)和乙酸铵(COONH₄)(9.2g,0.12mol,4.0eq)溶于100mL四氢呋喃(THF)和甲醇(MeOH)的混合溶液中，室温搅拌6小时，TLC检测反应完成后，蒸干溶剂，柱层析纯化(PE:EA＝1:1)得无色糖浆14(12.5g,产率88％)

在氮气保护下，将化合物14(12g,25.0mmol,1.0eq)溶于100mL干燥的二氯甲烷中冰浴下搅拌10分钟，向该体系中依次加入三氯乙腈(20.2mL，0.2mol，8eq)和DBU(1.1mL,7.5mmoL,0.3eq)，自然升至室温，搅拌0.5小时，TLC检测反应完成，蒸干经柱层析分离(PE:EA＝1:1)得无色泡状物15(14.5g，产率93％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.81(s,1H,NH)6.43(d,J＝3.6Hz,1H,NH),5.36(t,J＝10.2Hz,1H),5.25(t,J＝10.0Hz,1H),5.19(d,J＝9.3Hz,1H),4.80-4.63(m,2H),4.29(ddd,J＝12.7,7.4,3.6Hz,2H),4.18-4.07(m,2H),2.08(s,3H,OAc),2.06(s,6H,OAc).

化合物15的合成路线如图6所示。

(2)化学法合成选择性保护的氨基酸化合物17

将化合物16(2g,6.1mmol,1.0eq)和碳酸氢钾(KHCO₃)(1.8g,18.3mmol,3.0eq)溶于50mL干燥的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，室温下搅拌，加入四丁基碘化铵(TBAI)(3.4g,9.2mmol,1.5eq)，缓慢滴加4-甲氧基苄氯(PMBCl)(994.1μL，7.3mmol,1.2eq)，室温搅拌2小时，TLC检测原料反应完全，蒸干溶剂，残留物搅50二氯甲烷溶解，依次用50mL 1N盐酸溶液，50mL饱和碳酸氢钠溶液，50mL水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤除去干燥剂，滤液浓缩后经柱层析分离(EA：PE＝1:1)得白色固体17(2.7g,产率97％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.76(d,J＝7.5Hz,2H),7.59(d,J＝7.5Hz,2H),7.40(t,J＝7.5Hz,2H),7.30(dd,J＝14.2,7.6Hz,4H),6.87(d,J＝8.3Hz,2H),5.70(d,J＝7.3HZ,1H),5.16(s,2H),4.43(dt,J＝15.9,5.6Hz,3H),4.21(t,J＝7.0Hz,1H),4.07-3.83(m,2H),3.79(s,3H,OMe),2.04(d,J＝6.0Hz,1H).

化合物17的合成路线如图7所示。

(3)化学法合成式(VI)所示核心中间体7

向500mL圆底烧瓶中加入甘露糖1(20g,0.11mol)、醋酐(100mL)和醋酸钠(16.0g)，在120℃反应条件下回流搅拌2小时。薄层色谱检测(PE:EA＝1:1)反应完全后，将反应液倒入饱和碳酸氢钠冰水浴中，之后分离有机相，再用无水硫酸钠干燥有机相，旋蒸浓缩，快速硅胶柱分离纯化，获得淡黄色糖浆状化合物2(41.6g,96％)。

向250mL圆底烧瓶中加入化合物2(10.0g,25.62mmol)、二氯甲烷(50.0mL)、对甲氧基苯酚(3.8g,30.8mmol)和三氟化硼乙醚(6.5mL，51.3mmol)，0℃搅拌6小时，按照相同的反应条件，薄层色谱检测(PE:EA＝1:1)反应完全后，旋蒸浓缩，快速硅胶柱分离纯化，获得淡黄色固体化合物3(10.7g,92％)。

向250mL圆底烧瓶中加入化合物3(10.0g,22.0mmol)、甲醇/甲醇钠，调节PH＝9～10，室温搅拌4小时，薄层色谱检测(DCM:MeOH＝4:1)反应完全后，加入阳离子交换树脂调PH至中性，过滤除去阳离子交换树脂，再用无水硫酸钠干燥有机相，旋蒸浓缩，快速硅胶柱分离纯化，获得白色固体化合物4(1.93g,90％)。

在氩气保护下，向100mL的圆底烧瓶中加入化合物4(3g,10.5mmol,1eq)，20mL干燥的二氯甲烷、六甲基二硅胺烷(HMDS)(5ml,25.2mmol,2.4eq)，溶液变澄清，加入TMSOTf(0.2ml,1.0mmol,0.1eq)，室温下搅拌0.5小时，TLC检测反应完成，加环己烷稀释用水洗，水相用乙酸乙酯洗，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液浓缩后得无色糖浆，加入20mL干燥的二氯甲烷溶解，氮气保护下降温至-78℃，加入苯甲醛(1.1ml,10.5mmol,1eq)，TMSOTf(0.2ml,1.0mmol,0.1eq)，维持此温度搅拌0.5小时，TLC检测反应完成后，加入四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液5ml，自然升至室温过夜，TLC检测反应完全，蒸干溶剂后经柱层析分离(PE：EA＝1:2)得白色固体5(3.4g,产率87％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.49(dd,J＝6.4,2.8Hz,2H),7.37(dd,J＝5.2,1.9Hz,3H),6.99(d,J＝8.8Hz,2H),6.84(d,J＝9.2Hz,2H),5.58(s,1H,PhCH),5.50(d,J＝1.4Hz,1H),4.30-4.27(m,1H),4.25(q,J＝1.7Hz,1H),4.21(dd,J＝10.3,3.9Hz,1H),4.00-3.96(m,2H),3.83(d,J＝10.0Hz,1H),3.78(s,3H,OMe).

在氩气保护下，将化合物5(4g,10.7mol,1.0eq)溶于40mL二氯甲烷与N,N-二甲基甲酰胺(DCM:DMF＝3:1)的混合溶液中，-78℃下搅拌0.5小时，缓慢地加入BzCN(1.4g,10.7mmol,1.0eq)和DMAP(0.4g,3.2mmol,0.3eq)，维持此温度搅拌4小时，TLC检测原料反应完全后加入饱和氯化铵淬灭反应，硅藻土滤去分子筛，滤液用饱和氯化铵洗涤，有机相加无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液浓缩经柱层析分离(PE：EA＝2:1)得白色泡状物6(4.8g,产率93％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17-8.08(m,2H),7.66-7.59(m,1H),7.50(dd,J＝8.9,6.4Hz,4H),7.38(dd,J＝5.3,1.9Hz,3H),7.02(d,J＝8.9Hz,2H),6.84(d,J＝9.1Hz,2H),5.67(d,J＝3.3Hz,2H),5.56(d,J＝1.6Hz,1H,H-1),4.62-4.52(m,1H),4.28(dd,J＝10.3,3.6Hz,1H),4.17-4.08(m,2H),3.88(td,J＝8.4,7.1,3.6Hz,1H),3.78(s,3H,OMe),2.41(d,J＝4.2Hz,1H,OH).

在氩气保护避光条件下，将化合物6(3g,6.3mmol,1eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中，缓慢加入溴化苄(BnBr)(0.9ml,7.5mmol,1.2eq),氧化银(Ag₂O)(0.8g,3.1mmol,0.5eq),室温下搅拌0.5小时，TLC检测反应完全，滤去氧化银，滤液浓缩经柱层析分离((PE：EA＝3:1)得无色泡状物7(3.5g,产率98％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17-8.10(m,2H),7.64-7.57(m,1H),7.52(s,1H),7.52-7.46(m,3H),7.42-7.33(m,5H),7.26(d,J＝7.6Hz,3H),6.99(dd,J＝9.0,2.0Hz,2H),6.88-6.80(m,2H),5.78(dt,J＝3.2,1.7Hz,1H,H-2),5.70(s,1H,PhCH),5.55(d,J＝1.9Hz,1H,H-1),4.86-4.72(m,2H,PhCH₂),4.32(dd,J＝9.9,3.2Hz,1H,H-3),4.26(dd,J＝11.6,6.5Hz,2H),4.10(td,J＝9.6,4.6Hz,1H,H-4),3.89(t,J＝10.2Hz,1H),3.77(s,1H,OMe).

中间体7的合成路线如图4所示。

(4)化学法合成式(VII)所示Core M1受体8

将化合物7(4.0g)置于20mL甲醇中，加入甲醇钠的甲醇溶液调至PH＝9～10，搅拌4小时，TLC显示反应完全，加入阳离子树脂调至pH＝7，滤去阳离子树脂，滤液浓缩蒸干经柱层析分离((PE：EA＝3:1)得白色泡状物8(3.1g,产率95％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.49(dd,J＝7.3,2.2Hz,2H),7.42-7.34(m,7H),7.31(dd,J＝12.5,5.6Hz,1H),7.02-6.89(m,2H),6.83(d,J＝9.1Hz,2H),5.63(s,1H,PhCH),5.49(d,J＝1.5Hz,1H,H-1),4.92(d,J＝11.8Hz,1H,PhCH₂),4.78(d,J＝11.8Hz,1H,PhCH₂),4.24(dt,J＝3.2,1.5Hz,1H,H-2),4.22-4.14(m,2H),4.11(dd,J＝9.6,3.4Hz,1H,H-3),3..99(td,J＝9.7,4.8Hz,1H,H-4),3.83(t,J＝10.2Hz,1H),3.77(s,3H,OMe),2.81(d,J＝1.4Hz,1H,OH).

化合物8的合成路线如图5所示。

(5)化学法合成选择性式(X)所示保护的Core M1化合物18

在氩气保护下，将化合物8(1.5g,3.2mmol,1eq)和化合物15(2.4g,3.9mmol,1.2eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷中，加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5小时，降温至-40℃，向反应体系中加入三氟甲磺酸(TfOH)(0.4ml,3.9mmol,0.15eq),维持此温度下搅拌1.5小时，TLC检测反应完全，加入三乙胺淬灭反应，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱层析分离((PE：EA＝1:1)得白色泡状物18(2.5g,产率85％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.52-7.48(m,2H),7.45-7.40(m,2H),7.40-7.34(m,3H),7.33(d,J＝7.3Hz,2H),7.31-7.28(m,1H),6.94(d,J＝9.1Hz,2H),6.83(d,J＝9.0Hz,2H),5.64(s,1H,PhCH),5.55(dd,J＝10.7,9.3Hz,1H),5.38(d,J＝1.7Hz,1H,H-1),5.32(d,J＝7.6Hz,1H),5.12(d,J＝8.4Hz,1H),5.03(t,J＝9.3Hz,1H),4.90(d,J＝11.4Hz,1H),4.77(dd,J＝11.7,5.5Hz,2H),4.54(d,J＝12.0Hz 1H),4.35(t,J＝2.3Hz,1H),4.29-4.08(m,5H),3.93(td,J＝9.3,8.6,4.5Hz,1H),3.78(s,3H,OMe),3.72(d,J＝10.2Hz,1H),3.44(dt,J＝10.8,7.9Hz,1H),2.02(s,3H,OAc),2.00(s.3H,OAc),1.98(s,3H,OAc).

化合物18的合成路线如图8所示。

(6)化学法合成式(XIII)所示保护基统一的的Core M1化合物22

将化合物18(1.3g,1.4mmol,1.0eq)溶于10mL 80％乙酸溶液中，缓慢升温至90℃，维持此温度搅拌0.5小时，TLC检测反应完成后，蒸干溶剂经柱层析分离(PE：EA＝1:1)得白色泡状物19(1.1g,产率94％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.42(d,2H,J＝6.5Hz),7.36(t,2H,J＝7.0Hz),7.33-7.28(m,1H),6.90(d,2H,J＝8.9Hz),6.829(d,2H,J＝9.0Hz),5.79(d,1H,J＝7.5Hz),5.48(t,1H,J＝10.0Hz),5.41(s,1H),5.06(t,1H,J＝9.6Hz),4.98(d,1H,J＝8.3Hz),4.84(d,1H,J＝11.5Hz),4.75(d,1H,J＝11.9Hz),4.63(t,2H,J＝12.0Hz),4.29(s,2H),4.21(s,2H),3.94(dd,1H,J＝9.6,3.0Hz),3.78(s,3H,OMe),3.75-3.65(m,3H),3.61(dt,1H,J＝10.9,8.2Hz),3.04(s,1H,OH),2.40(d,1H,J＝9.3Hz,OH),2.04(s,3H,OAc),2.01(s,3H,OAc),1.99(s,3H,OAc).

将化合物19(1.6g,1.9mmol,1.0eq)溶于10mL乙酸中，加入锌粉(1.5g,22.9mmol,12eq)在升温至60℃搅拌6小时，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去锌粉，蒸干溶剂，残留物用甲苯带水(x 3)，依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(70mg,0.6mmol,0.3eq)，室温搅拌1小时，TLC检测反应完成，蒸干溶剂，柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色泡状物20(1.4g,产率90％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.37-7.30(m,5H),6.97(d,2H,J＝9.1Hz),6.81(d,2H,J＝9.1Hz),5.93(dd,1H,J＝7.5,2.7Hz),5.72(dd,1H,J＝10.6,9.2Hz),5.43(d,1H,J＝2.1Hz),5.36(d,1H,J＝8.4),5.27(t,1H,J＝9.6Hz),5.01(t,1H,J＝9.7Hz),4.77(d,1H,J＝11.6Hz,PhCH₂),4.57(d,1H,J＝11.7Hz,PhCH₂),4.35(t,1H,J＝2.8Hz),4.3-4.09(m,3H),4.10-3.98(m,2H),3.95(ddd,1H,J＝9.2,6.3,2.4Hz),3.77(s,3H,OMe),3.41(dt,1H,J＝10.5,7.9Hz),2.06(s,3H,OAc),2.01(s,3H,OAc),2.00-1.95(m,9H),1.87(s,3H,OAc).

将化合物20(1.3g,1.6mmol,1.0eq)与Pd/C(10％)(0.4g,0.4mmol,0.3eq)置于100mL圆底烧瓶中，加入20mL干燥的乙酸乙酯，在氢气保护下剧烈搅拌24h，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去Pd/C，蒸干溶剂，依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(60.4mg,0.5mmol,0.3eq)，在室温下搅拌1h，蒸干溶剂，柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色泡状物21(1.1g,产率90％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.00(d,2H,J＝9.0Hz),6.83(d,2H,J＝9.1Hz),5.70(d,1H,J＝7.8Hz),5.53(dd,1H,J＝10.6,9.2Hz),5.31(d,1H,J＝1.9Hz),5.30-5.27(m,1H),5.07(d,1H,J＝8.3Hz),5.01(t,1H,J＝9.6Hz),4.39(dd,1H,J＝3.2,1.9Hz),4.27(dd,1H,J＝12.3,5.2Hz),4.20(dd,1H,J＝12.2,6.1Hz),4.03(ddd,3H,J＝12.1,5.9,2.3Hz),3.78(s,3H,OMe),3.71(ddd,1H,J＝10.1,5.2,2.2Hz),3.55(dt,1H,J＝10.7,8.0Hz),2.08(s,3H,OAc),2.06(s,6H,OAc),2.02-2.00(m,9H,OAc),1.96(s,3H,OAc).

将化合物21(1.0g，1.3mmol,1.0eq)溶于10mL乙腈和水(4:1)的混合溶液中，冰浴下剧烈搅拌10分钟，加入硝酸铈铵(CAN)(3.0g,5.4mmol,4.0eq)，维持该温度搅拌30分钟，自然升至室温并持续搅拌2小时，TLC检测反应完全，向体系中加入乙酸乙酯稀释，用水洗，有机相用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液浓缩得淡黄色固体22(770.0g，产率90％)。

化合物22的合成路线如图11所示。

(7)式I所示化合物24

在氮气保护下，将化合物22(1.0g，1.6mmol，1eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷中冰浴下搅拌10分钟，向该体系中依次加入三氯乙腈(0.4mL，3.9mmoL，8eq)和DBU(21.9μL,0.15mmoL,0.3eq)，自然升至室温，搅拌0.5小时，TLC检测反应完成，蒸干经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得淡黄色固体23(1.2g，产率86％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.70(s,1H,NH),6.18(d,1H,J＝1.9Hz),6.05(d,1H,J＝8.4Hz),5.47-5.41(m,1H),5.39(t,1H,J＝8.8Hz),5.12(dd,1H,J＝10.2,3.5Hz),5.06(t,1H,J＝9.7Hz),4.95(d,1H,J＝8.4Hz),4.43(dd,1H,J＝3.6,2.0Hz),4.26(ddd,2H,J＝19.0,12.5,5.1Hz),4.14(m,2H),4.03(dd,1H,J＝12.3,2.2Hz),3.74(ddd,1H,J＝10.2,4.9,2.2),2.1(s,3H,OAc),2.07(d,6H,J＝4.0,OAc),2.04(d,3H,J＝1.7Hz,OAc),2.01(d,6H,J＝4.8Hz,OAc),1.98(s,3H,OAc).

在氩气保护下，将化合物23(1.0g,1.3mmol,1eq)和化合物17(689.6mg,1.5mmol,1.2eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5h，冰浴下加入三氟甲磺酸(TfOH)(17.1μL,0.2mmol,0.15eq)，维持此温度搅拌15分钟TLC显示反应完全，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色固体24(1.2g,产率89％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.76(d,J＝7.5Hz,2H),7.62(d,J＝7.5Hz,2H),7.40(t,J＝7.5Hz,2H),7.32(dd.J＝8.0,3.3Hz,4H),6.89(d,J＝8.2Hz,2H),5.94(d,J＝8.2Hz,1H),5.62(d,J＝7.8Hz,1H),5.50(t,J＝9.9Hz,1H),5.31-5.20(m,1H),5.17(dd,J＝15.7,10.9Hz,2H),5.04-4.89(m,3H),4.64(s,1H),4.59(dt,J＝7.5,3.3Hz,1H),4.38(dd,J＝7.4,3.4Hz,2H),4.25(dt,J＝14.3,7.1Hz,2H),4.16-4.08(m,2H),4.07-4.00(m,2H),3.95(dd,J＝10.7,3.3Hz,1H),3.88-3.82(m,2H),3.80(s,3H,OMe),3.67(ddd,J＝10.1,5.0,2.2Hz,1H),3.47(dt,J＝10.7,8.0Hz,1H),2.08(s,3H,OAc),2.05(s,3H,OAc),2.02(d,J＝4.4Hz,12H,OAc),1.86(s,3H,OAc)。

式I所示化合物24的合成路线如图14所示。

实施例2：肌营养不良相关蛋白聚糖Core M2的合成

(1)化学法合成式(VIII)所示Core M2受体9

在氩气保护下，将化合物8(2.0g,4.3mmol,1eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5小时，冰浴下向反应体系中依次加入硼烷的四氢呋喃溶液(BH₃.THF)(64.6ml,64.6mmol,15eq)，三氟甲磺酸二丁硼(Bu₂OTf)(4.3ml,4.3mmol,1eq)，维持此温度下搅拌15分钟，TLC检测反应完全后，依次加入甲醇和三乙胺分别淬灭BH₃.THF和Bu₂OTf，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱色谱分离(EA:PE＝1:1)得无色糖浆9(2.0g，产率99％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.37(d,J＝7.3Hz,2H),7.28(d,J＝8.0Hz,8H),6.87(d,J＝8.5Hz,2H),6.71(d,J＝8.7Hz,2H),5.48(s,1H,H-1),4.84(d,J＝10.9Hz,1H,PhCH₂),4.70(dt,J＝24.1,11.4Hz,3H,PhCH2),4.24-4.15(m,1H),4.08(d,J＝7.4Hz,2H),3.83(d,J＝3.1Hz,1H),3.78(d,J＝7.6Hz,2H),3.62(s,3H,OMe),3.25(dd,J＝8.5,3.5Hz,1H).

化合物9的合成路线如图5所示。

(2)化学法合成选择性式(XI)所示保护的Core M2化合物25

在氩气保护下，将化合物9(1.2g,2.6mmol,1eq)和化合物15(4.0g,6.4mmol,2.5eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中，加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5h，降温至-60℃，加入三氟化硼乙醚(BF₃.Et₂O)(126.2μL,0.5mmol,0.2eq)，维持此温度下搅拌0.5小时，TLC显示原料反应完全，加入三氟甲磺酸(TfOH)(34.1μL,0.4mmol,0.15eq)，缓慢升温至-40℃，维持此温度下搅拌0.5小时，TLC显示反应完全，加入三乙胺淬灭反应，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯＝1:1,v:v)得白色泡状物25(2.8g,产率83％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.48-7.28(m,10H),6.93(d,2H,J＝9.1Hz),6.83(d,2H,J＝9.0Hz),6.45(d,1H,J＝7.3Hz),5.69(t,1H,J＝10.0Hz),5.53-5.52(m,1H),5.28(d,1H,J＝8.4Hz),5.05(t,1H,J＝9.6Hz),4.95(dt,2H,J＝16.9,9.8Hz),4.89-4.82(m,2H),4.82-4.73(m,2H),4.68(dd,2H,J＝12.2,6.6Hz),4.60-4.51(m,2H),4.34(t,1H,J＝2.7Hz),4.23(ddd,3H,J＝12.4,10.2,3.5Hz),4.12(dd,1H,J＝8.9,3.2Hz),4.04(dd,1H,J＝(12.3,2.3Hz),3.94-3.81(m,3H),3.78(s,3H,OMe),3.75-3.65(m,2H),3.63-3.53(m,1H),3.52-3.44(m,1H),3.25(dt,1H,J＝10.7,7.8Hz),2.08(s,3H,OAc),2.06(s,3H,OAc),2.03(s,3H,OAc),2.01(d,6H,J＝1.9Hz,OAc),1.99(s,3H,OAc)；

化合物25的合成路线如图9所示。

(3)化学法合成式(IXV)所示保护基统一的的Core M2化合物28

将化合物25(1.5g,1.2mmol,1.0eq)溶于乙酸中，加入锌粉(1.7g,26.5mmol,22.9eq)在60℃下搅拌6小时，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去锌粉，蒸干溶剂，残留物用甲苯带水(x 3)，依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(42.5mg,0.3mmol,0.3eq)，在室温下搅拌1h，蒸干溶剂，柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色泡状固体26(1.1g,产率85％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.67(d,J＝7.5Hz,1H,NH),7.48-7.38(m,5H),7.32(dq,J＝7.2,4.6,2.8Hz,5H),6.88(d,J＝9.0Hz,2H),6.80(d,J＝8.9Hz,2H),5.88(t,J＝10.0Hz,1H),5.50(d,J＝1.8Hz,1H),5.46(d,J＝8.4Hz,1H),5.08(d,J＝11.3Hz,1H),5.03(d,J＝9.6Hz,1H),4.97(t,J＝9.6Hz,1H),4.92(d,J＝2.9Hz,1H),4.89(d,J＝1.9Hz,1H),4.70(d,J＝11.9Hz,1H,PhCH₂),4.53(d,J＝10.9Hz,1H,PhCH₂),4.42-4.31(m,1H),4.23(ddd,J＝12.9,8.5,4.9Hz,2H),4.18-4.11(m,2H),4.08(dd,J＝10.9,2.2Hz,1H),4.04(q,J＝3.6Hz,1H),3.95-3.79(m,4H),3.76(s,3H,OMe),3.62(d,J＝9.9Hz,1H),3.60-3.53(m,2H),3.34(q,J＝9.9Hz,1H),2.04(s,3H,OAc),2.02(s,3H,OAc),2.01-1.94(m,15H,OAc),1.88(s,3H,OAc).

将化合物26(1.3g,1.2mmol,1.0eq)与Pd/C(0.4g,0.3mmol,0.3eq)置于100mL圆底烧瓶中，加入20mL干燥的乙酸乙酯，在氢气保护下剧烈搅拌24h，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去Pd/C，蒸干溶剂，然后依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(42.4mg,0.3mmol,0.3eq)，在室温下搅拌1h，蒸干溶剂，TLC显示反应完全，柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色泡状固体27(1.1g,产率93％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.30(d,1H,J＝6.9Hz,NH),6.97(d,J＝9.1Hz,2H),6.81(d,J＝8.9Hz,2H),6.49(d,J＝10.0Hz,1H),5.89(dd,J＝10.8,9.1Hz,1H),5.52(d,J＝1.9Hz,1H,H-1),5.51-5.46(m,1H),5.43(d,J＝9.9Hz,1H),5.30(dd,J＝10.1,3.6Hz,1H),5.11-5.03(m,2H),4.91(t,J＝9.6Hz,1H),4.35(dd,J＝3.7,1.9Hz,1H,H-2),4.26(ddd,J＝17.5,11.9,5.3Hz,3H),4.16-4.05(m,3H),3.97(dd,J＝12.1,2.2Hz,1H),3.77(s,3H,OMe),3.76-3.71(m,2H),3.65(dt,J＝8.9,3.2Hz,1H),3.11(d,J＝11.5Hz,1H),2.97(dt,J＝10.6,7.6Hz,1H),2.12(d,J＝4.7Hz,6H OAc),2.08(s,3H,OAc),2.05(s,9H,OAc),2.01(dd,J＝4.4,3.0Hz,12H,OAc).

将化合物27(1.1g,1.1mmol，1.0eq)溶于乙腈和水(4:1)的混合溶液中，冰浴下剧烈搅拌10分钟，然后加入CAN(2.3g,4.3mmol,4eq)，维持该温度30分钟，自然升至室温并持续搅拌，TLC检测显示原料反应完全，向体系中加入乙酸乙酯稀释，并用碳酸氢钠洗，有机相用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液浓缩得淡黄色固体28(930.0mg,产率94％)。

化合物22的合成路线如图12所示。

(4)式II所示化合物30

将化合物28(1.0g,1.1mmol,1.0eq)溶于10mL二氯甲烷中冰浴下搅拌10分钟，向该体系中依次加入三氯乙腈(875.3μL,8.7mmoL,8eq)和DBU(48.6μL,0.3mmoL,0.3eq)，自然升至室温，TLC检测反应完全，蒸干经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色固体29(971.4mg,产率86％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.7(s,1H,NH),6.42(d,J＝9.9Hz,1H),6.26(d,J＝1.9Hz,1H,H-1),5.92(dd,J＝10.8,9.1Hz,1H),5.58-5.51(m,1H),5.49(d,J＝10.0Hz,1H),5.14(dd,J＝10.4,3.6Hz,1H),5.10-5.04(m,2H),4.94(t,J＝9.6Hz,1H),4.41(t,J＝2.6Hz,1H),4.25(ddd,J＝24.4,11.8,5.1Hz,4H),4.16-4.09(m,2H),4.00(dd,J＝12.2,2.3Hz,1H),3.91(d,J＝9.9Hz,1H),3.84-3.73(m,1H),3.65(s,1H),3.15(d,J＝11.5Hz,1H),2.99(q,J＝8.6Hz,1H),2.13(s,3H,OAc),2.10(s,3H,OAc),2.06(s,9H,OAc),2.02(d,J＝3.8Hz,3H,OAc),1.99(d,J＝5.2Hz,6H OAc),1.60(s,6H,OAc).

在氩气保护下，将化合物29(1.1g,1.0mmol,1eq)和化合物17(553.1mg,1.2mmol,1.2eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5h，冰浴下加入三氟甲磺酸(TfOH)(13.7μL,0.2mmol,0.15eq)，维持此温度搅拌30分钟TLC显示反应完全，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色固体30(1.2g,产率89％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.76(d,J＝7.5Hz,2H),7.60(t,J＝6.3Hz,2H),7.40(t,J＝7.5Hz,2H),7.30(t,J＝7.8Hz,4H),6.90(d,J＝7.8Hz,2H),6.42(d,J＝9.9Hz,1H)5.96-5.79(m,2H),5.43-5.29(m,2H),5.26(d,J＝11.9Hz,1H),5.16(d,J＝12.0Hz,1H),5.00(dq,J＝13.3,8.2,7.0Hz,3H),4.90(t,J＝9.6Hz,1H),4.78(s,1H),4.61-4.49(m,1H),4.43(dd,J＝10.4,7.1Hz,1H),4.27(dd,J＝11.3,5.2Hz,2H),4.21(dd,J＝14.1,7.9Hz,2H),4.13(d,J＝3.3Hz,1H),4.08(d,J＝8.8Hz,1H),4.04(d,J＝3.8Hz,1H),4.02-3.92(m,3H),3.80(s,3H,OMe),3.69(q,J＝13.6,8.0Hz,1H),3.59(s,1H),3.10(d,J＝11.6Hz,1H),2.93(dt,J＝10.7,7.6Hz,1H),2.08(s,3H,OAc),2.05(d,J＝2.3Hz,12H,OAc),2.01(d,J＝5.1Hz,6H,OAc),1.96(d,J＝6.2Hz,6H,OAc),1.92(s,3H,OAc).

式II所示化合物30的合成路线如图15所示。

实施例3：肌营养不良相关蛋白聚糖Core M3的合成

(1)化学法合成式(IX)所示Core M3受体10

在氩气保护下，将化合物7(1.5g,2.6mmol,1eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中加入到活化的

分子筛中，冰浴下搅拌0.5小时，向体系中加入Et₃SiH(2.1ml,13.2mmol,5eq)，TFA(1.0ml,13.2mmol,5eq)，维持该温度下搅拌15分钟，TLC检测反应完全，加入三乙胺淬灭反应，蒸干溶剂经柱色谱分离(PE：EA＝3:1)得白色泡状物10(1.5g,产率98％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.10-8.03(m,2H),7.57(t,J＝7.4Hz,1H),7.40(t,J＝7.7Hz,2H),7.36-7.26(m,10H),7.05(d,J＝9.1Hz,2H),6.81(d,J＝9.1Hz,2H),5.77(t,J＝2.4Hz,1H,H-2),5.58(d,J＝1.8Hz,1H,H-1),4.86(d,J＝11.2Hz,1H,PhCH₂),4.66(d,J＝11.8Hz,1H,PhCH₂),4.57(t,J＝＝12.0Hz,2H,PhCH₂),4.25(t,J＝9.6Hz,1H),4.11(dd,J＝9.4,3.6Hz,1H),4.02(td,J＝9.7,3.7Hz,1H),3.87(dd,J＝10.8,4.5Hz,1H),3.81(dd,J＝10.8,3.0Hz,1H),3.77(s,3H,OMe)；

化合物10的合成路线如图5所示。

(2)化学法合成选择性式(XII)所示保护的Core M3化合物31

在氩气保护下，将化合物10(1.6g,3.4mmol,1eq)和化合物15(2.6g,4.1mmol,1.2eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中，加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5小时，降温至-40℃，加入三氟甲磺酸(TfOH)(0.3ml,0.3mmol,0.1eq),维持此温度搅拌0.5小时，TLC检测反应完全，加入三乙胺淬灭反应，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱层析分离(EA：PE＝1:1)得白色泡状物31(2.8g，产率96％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.20-7.95(m,2H),7.59(t,1H,J＝7.4),7.49-7.33(m,7H),7.29(d,J＝8.0Hz,4H),7.25-7.20(m,1H),6.99(d,J＝9.0Hz,2H),6.81(d,J＝9.0Hz,2H),5.68(s,1H,H-2),5.55(d,J＝1.9Hz,1H,H-1),4.94(d,J＝8.9Hz,1H),4.91-4.83(m,1H),4.81(d,J＝11.9Hz,1H),4.72(d,J＝11.9Hz,1H),4.67(d,J＝12.0Hz,1H),4.54(d,J＝12.1Hz,1H),4.50(d,J＝8.4Hz,1H),4.45(d,J＝12.0Hz,1),4.32(t,J＝8.9Hz,2H),4.19(dd,J＝9.2,3.3Hz,1H),4.02(dd,J＝12.2,4.6Hz,1H),3.92(d,J＝9.8Hz,1H),3.84-379(m,2H),3.78(s,3H,OMe),3.66-3.53(m,2H),3.42-3.35(m,1H),1.98(d,J＝4.1Hz,OAc),1.81(s,3H,OAc),1.56(s,3H,OAc)；

化合物31的合成路线如图10所示。

(3)化学法合成式(XV)所示保护基统一的的Core M3化合物34

将化合物31(1.5g，1.5mmol，1.0eq)溶于乙酸中，加入锌粉(1.1g，17.5mmol,12eq)在60℃下搅拌6小时，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去锌粉，蒸干溶剂，残留物用甲苯带水(x 3)，依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(53.3mg，0.4mmol，0.3eq)，在室温下搅拌1h，蒸干溶剂，柱层析分离(EA：DCM＝4:1)得白色泡状固体32(1.2g，产率92％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.15-8.00(m,2H),7.68-7.49(m,1H),7.51-7.34(m,7H),7.31-7.17(m,5H),7.01(d,2H,J＝9.0Hz),6.81(d,2H,J＝9.0Hz),5.70(dd,1H,J＝3.2,2.0Hz),5.56(d,1H,J＝1.9Hz),5.50-4.91(m,3H),4.86(dd,2H,J＝14.1,11.9Hz),4.71(d,1H,J＝11.8Hz),4.66(d,1H,J＝8.4Hz),4.48(d,1H,J＝11.9Hz),4.34(q,1H,J＝8.6,7.8Hz),4.25(dd,1H,J＝9.2,3.3Hz),4.01(dd,1H,J＝12.4,4.5Hz),3.96-3.89(m,1H),3.87-3.79(m,2H),3.77(s,3H,OMe),3.62(dd,1H,J＝11.4,1.9Hz),3.37(ddd,1H,J＝9.6,4.5,2.4Hz),1.98(d,6H,J＝3.2Hz,OAc),1.84(s,3H,OAc),1.73(s,3H,OAc).

将化合物32(1.1g，1.2mmol，1.0eq)与Pd/C(0.4g，0.4mmol，0.3eq)置于100mL圆底烧瓶中，加入20mL干燥的乙酸乙酯，在氢气保护下剧烈搅拌24h，TLC显示原料反应完全，硅藻土滤去Pd/C，蒸干溶剂，然后依次加入吡啶(5mL)，醋酸酐(5mL)和DMAP(44.8mg，0.4mmol，0.3eq)，在室温下搅拌1h，蒸干溶剂，TLC显示反应完全，柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色泡状固体33(0.9g，产率92％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.07(d,2H,J＝6.9Hz),7.76-7.55(m,1H),7.49(t,2H,J＝7.7Hz),7.04(d,2H,J＝9.0Hz),6.82(d,2H,J＝9.1Hz),5.86(d,1H,J＝8.6Hz),5.69-5.63(m,2H),5.49(d,1H,J＝1.5Hz,H-1),5.31(dd,1H,J＝10.5,9.3Hz),5.02(t,1H,J＝9.7Hz),4.78(d,1H,J＝8.3Hz),4.44-4.33(m,2H),4.28(dd,1H,J＝12.3,4.9Hz),4.14(ddd,1H,J＝10.4,4.2,2.4Hz),4.10-4.02(m,1H),3.98(dd,1H,J＝12.3,2.3Hz),3.77(s,3H,OMe),3.68(ddd,1H,J＝10.0,4.9,2.3Hz),2.13(s,3H,OAc),2.03-1.98(m,9H,OAc),1.93(s,3H,OAc),1.90(s,3H,OAc).

将化合物33(1g，1.2mmol，1.0eq)溶于乙腈和水(4:1)的混合溶液中，冰浴下剧烈搅拌10分钟，然后加入CAN(2.7g，5.0mmol，4eq)，维持该温度30分钟，自然升至室温并持续搅拌，TLC检测显示原料反应完全，向体系中加入乙酸乙酯稀释水洗，有机相用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液浓缩得淡黄色固体34(0.8g,产率91％)。

化合物34的合成路线如图13所示。

(5)式III所示化合物36

将化合物34(1.1g,1.6mmol,1.0eq)溶于10mL二氯甲烷中冰浴下搅拌10分钟，向该体系中依次加入三氯乙腈(1.3mL,12.6mmoL,8eq)和DBU(70.8μL,0.5mmoL,0.3eq)，自然升至室温，TLC检测反应完全，蒸干经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得淡黄色固体35(1.2g,产率94％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.79(s,1H,NH),8.10-8.05(m,2H),7.67-7.60(m,1H),7.49(t,2H,J＝7.7Hz),6.36(d,1H,J＝2.1Hz,H-1),5.96(d,1H,J＝8.6Hz),5.70(t,1H,J＝2.8Hz),5.54(dd,1H,J＝9.2,3.4Hz),5.33(dd,1H,J＝10.5,9.3Hz),5.02(t,1H,J＝9.6Hz),4.83(d,1H,J＝8.3Hz),4.44(dd,1H,J＝12.1,2.2Hz,H-2),4.38(dd,1H,J＝12.1,4.3Hz),4.27(dd,1H,J＝12.3,4.7Hz),4.20(ddd,1H,J＝10.2,4.3,2.2Hz),4.09(t,1H,J＝9.6Hz),3.97(dd,1H,J＝(12.3,2.3Hz),3.81-3.71(m,1H),3.68(ddd,1H,J＝10.1,4.8,2.5Hz),2.16(s,3H,OAc),2.02(s,3H,OAc),2.00(d,6H,J＝2.4Hz),1.95(d,3H,J＝3.4Hz,OAc),1.91(s,3H,OAc).

在氩气保护下，将化合物35(1.0g,1.2mmol,1eq)和化合物17(637.3mg,1.4mmol,1.2eq)溶于10mL干燥的二氯甲烷溶液中加入到活化的

分子筛中，室温下搅拌0.5h，冰浴下加入三氟甲磺酸(TfOH)(15.8μL,0.2mmol,0.15eq)，维持此温度搅拌15分钟TLC显示反应完全，硅藻土滤去

分子筛，滤液浓缩经柱层析分离(EA:DCM＝4:1)得白色固体36(990.6mg,产率74％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.09-8.02(m,2H),7.75(d,J＝7.5Hz,2H)7.70-7.58(m,3H),7.49(t,J＝7.6Hz,2H),7.38(dt,J＝12.6,6.1Hz,2H),7.31(dd,J＝10.6,7.7Hz,4H),6.87(d,J＝8.3Hz,2H),5.99(d,J＝8.3Hz,1H),5.53(d,J＝8.3Hz,1H),5.39(s,2H),5.36(d,J＝10.1Hz,1H),5.26(d,J＝11.9Hz,1H,PhCH₂),5.13(d,J＝11.8Hz,1H,PhCH₂),4.98(t,J＝9.6Hz,1H),4.84(d,J＝8.3Hz,1H),4.80(s,1H),4.60(d,J＝8.3Hz,1H),4.51-4.41(m,2H),4.38-4.15(m,3H),4.11-4.03(m,1H),4.00(d,J＝9.5Hz,1H),3.95(dd,J＝8.7,3.5Hz,2H),3.74(s,3H,OMe),3.68-3.62(m,1H),2.12(s,3H,OAc),2.02(s,3H,OAc),1.99(d,(d,J＝3.3Hz,6H,OAc),1.90(s,3H,OAc),1.81(s,3H,OAc)；

式III所示化合物36的合成路线如图16所示。

以上所述仅为本公开的优选实施例而已，并不用于限制本公开，对于本领域的技术人员来说，本公开可以有各种更改和变化。凡在本公开的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本公开的保护范围之内。

Claims

1.一种化合物24的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

化合物5在BzCN和DMAP作用下，经羟基保护得到化合物6；化合物6在Ag₂O和BnBr的作用下，经羟基保护得到化合物7；化合物7在甲醇钠的甲醇溶液作用下经脱保护得到化合物8；化合物8和化合物15在TfOH作用下得到化合物18；化合物18在80％乙酸作用、回流条件下得到化合物19；化合物19在锌粉和乙酸作用下、反应完全后，加入醋酸酐、吡啶作用后，得到化合物20；化合物20在Pd/C-H₂条件下还原后，经醋酸酐、吡啶作用后，得到化合物21；化合物21在乙腈和水的混合溶剂中，经硝酸铈铵脱保护得到化合物22；化合物22在三氯甲烷和DBU的作用下得到化合物23，化合物23与化合物17在TfOH作用下得到最终化合物24。