JP2004123557A

JP2004123557A - アリールオキシメチルオキサジアゾール誘導体

Info

Publication number: JP2004123557A
Application number: JP2002285858A
Authority: JP
Inventors: Minoru Taguchi; 稔田口; Kengo Wataya; 憲吾綿谷
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2002-09-30
Filing date: 2002-09-30
Publication date: 2004-04-22
Anticipated expiration: 2022-09-30
Also published as: JP4240978B2

Abstract

【課題】ＦＫＢＰ１２と結合する新規な化合物を提供すること。
【解決手段】下記式
【化２８】

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、Ｒ^１がＣ_３−８シクロヘキシル基のときＲ^２は水素原子であるか、又は隣接する炭素原子と一緒になってメチル基の１〜４個で置換されたＣ_３−８シクロヘキシル基若しくはＣ_３−８シクロヘキシル基を形成する基であり、Ｒ^３は、水素原子又は水酸基であり、Ｒ^４は、フェニル基、ピリジル基、ナフチル基、５，６，７，８−テトラヒドロナフチル基、メチレンジオキシフェニル基、２−アセチルベンゾフラニル基、インダニル基等である。）で表されるアリールオキシメチルオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩。
【選択図】　なし

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ＦＫＢＰ１２と結合することにより各種医薬として有用な新規アリールオキシメチルオキサジアゾール誘導体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、免疫抑制剤のＦＫ５０６（タクロリムス）がＰＣ１２細胞等で強力な神経突起伸長作用を有すること、及びＦＫ５０６やシクロスポリンＡ等の結合タンパク質であるイムノフィリン類が免疫系よりも神経系に多く発現すること等から、イムノフィリンリガンドの神経栄養因子としての作用が注目されている。
ＦＫ５０６の結合タンパク質（以下ＦＫＢＰと略す）では、分子量１２ｋＤａのＦＫＢＰ１２が非常に高濃度に細胞質に偏在する主要なＦＫＢＰである。ＦＫ５０６は二つのドメイン（エフェクタードメインとＦＫＢＰ結合ドメイン）を有し、ＦＫＢＰ結合ドメインを介してＦＫＢＰ１２に結合した後、それぞれ異なる機構により免疫抑制作用と神経栄養活性を示す。免疫細胞では、ＦＫ５０６−ＦＫＢＰ１２複合体はエフェクタードメインを介してカルシニューリンに結合し免疫抑制作用を発現する。一方、神経細胞系ではＦＫ５０６はＦＫＢＰ１２に結合するがカルシニューリンを介することなく神経栄養活性を発現する。事実、ＦＫＢＰ結合ドメインよりデザインされた低分子のＦＫＢＰ１２リガンドは、カルシニューリンを阻害することなく神経栄養活性を示す。したがって、このような低分子ＦＫＢＰ１２リガンドはカルシニューリン阻害による免疫抑制を介する副作用を示すことのない各種神経変性疾患治療剤として有用である。
【０００３】
ＦＫＢＰ結合ドメインよりデザインされたＦＫＢＰ１２リガンドが、ＷＯ９２１９５９３、ＷＯ９６４０６３３、ＷＯ９９４５００６、ＷＯ９９６２５１１等に開示されているが、いずれも本発明の化合物と化学構造が異なる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ＦＫＢＰ１２と結合する新規な化合物を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明の化合物は、下記式
【０００６】
【化２】

【０００７】
（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、Ｒ^１がＣ_３−８シクロヘキシル基のときＲ^２は水素原子であるか、又は隣接する炭素原子と一緒になってメチル基の１〜４個で置換されたＣ_３−８シクロヘキシル基若しくはＣ_３−８シクロヘキシル基を形成する基であり、Ｒ^３は、水素原子又は水酸基であり、Ｒ^４は、フェニル基、ピリジル基、ナフチル基、５，６，７，８−テトラヒドロナフチル基、メチレンジオキシフェニル基、２−アセチルベンゾフラニル基、インダニル基、又は「Ｃ_１−５アルコキシ基、シアノ基、カルボキシメチル基、Ｃ_２−６アルコキシカルボニルメチル基、Ｃ_２−６アルコキシカルボニル基、ヒドロキシメチル基、Ｃ_１−５アルコキシＣ_１−５アルキル基、Ｃ_２−６アルカノイルオキシメチル基、ピロリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、Ｃ_２−６アルカノイルアミノ基、トリフルオロメチル基、Ｃ_１−６アルキル基、ニトロ基、フェニル基、フェノキシ基、ウレア基、トリフルオロメトキシ基、Ｃ_１−５アルキルスルホニル基、Ｃ_２−６アルカノイル基及びハロゲン原子」から選ばれる１〜３個で置換されたフェニル基である。）で表されるアリールオキシメチルオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明において、Ｃ_ｘ−ｙとは炭素原子数がｘ〜ｙ個有することを意味する。
従って、Ｃ_１−６アルキル基とは炭素原子数１〜６の直鎖状、分岐鎖状又は環状のアルキル基を含むアルキル基を意味し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、シクロプロピルメチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロブチルメチル基、１−エチルプロピル基などが挙げられる。Ｃ_３−８シクロアルキル基とは炭素原子数３〜８のシクロアルキル基を意味し、例えばシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基などが挙げられる。Ｃ_１−５アルコキシ基とは炭素原子数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、１，１−ジメチルプロピル基、１−エチルプロポキシ基などが挙げられる。Ｃ_２−６アルコキシカルボニル基とは炭素原子数２〜６の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシカルボニル基を意味し、例えばメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、１−エチルプロポキシカルボニル基などが挙げられる。Ｃ_１−５アルコキシＣ_１−５アルキル基とは炭素原子数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基と炭素原子数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基が結合した基を意味し、例えばメトキシメチル基、エトキシメチル基、エトキシエチル基、プロポキシメチル基、イソプロポキシメチル基、ブトキシメチル基、ペンチルオキシメチル基、イソペンチルオキシ基などが挙げられる。Ｃ_２−６アルカノイル基とは炭素原子数２〜６の直鎖状又は分岐鎖状のアルカノイル基を意味し、例えばアセチル基、プロパノイル基、ブチリル基、ペンタノイル基などが挙げられる。ハロゲン原子とは、フッ素、塩素、臭素又はよう素である。
【０００９】
また、本発明において医薬上許容される塩としては、例えば硫酸、塩酸、燐酸などの鉱酸との塩、酢酸、シュウ酸、乳酸、酒石酸、フマール酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などの有機酸との塩、トリメチルアミン、メチルアミンなどのアミンとの塩、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオンなどの金属イオンとの塩などが挙げられる。
本発明の化合物は単一の光学活性体であっても、あるいは立体異性体の混合物であってもよい。
【００１０】
本発明の化合物は、例えば下記に示す方法に従って製造することができる。
【００１１】
以下、本明細書中では、Ｂｏｃはｔ−ブトキシカルボニル基、ＤＭＡＰは４−ジメチルアミノピリジン、ＷＳＣ・ＨＣｌは１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、ＨＯＢｔは１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、ＤＥＡＤはジエチルアゾジカルボキシレートをそれぞれ表わす。
【００１２】
本発明の化合物（１）は、式１に示したようにオキサジアゾイルピロリジン誘導体（２）とジフルオロ酢酸誘導体（３）を縮合することにより合成できる。
【００１３】
【化３】

【００１４】
この縮合では、ＷＳＣ・ＨＣｌなどの縮合剤を用いるか、あるいは酸クロライドを経由する方法を用いることができる。
【００１５】
また、オキサジアゾイルピロリジン誘導体（２）は、式２に示した方法により合成することができる。
【００１６】
【化４】

【００１７】
すなわち、（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−シアノピロリジン（４）を炭酸ナトリウムなどのアルカリ存在下、ヒドロキシルアミンと反応させ、（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］ピロリジン（５）へ変換した後、対応するカルボン酸クロライドと縮合しエステル体（６）を得た。エステル体（６）を、トルエン、キシレンあるいはピリジンなどの溶媒中加熱することによりオキサジアゾールを閉環した後、水酸化ナトリウムあるいは炭酸カリウムなどのアルカリ存在下加水分解しアルコール体（７）を得た。次いで、光延反応によりエーテル化した後、Ｂｏｃ基を脱保護することにより目的のオキサジアゾイルピロリジン（２）を得た。また、Ｒ^４が４−メトキシメチルフェニル基である化合物は下記式３に示した方法でも合成することができる。
【００１８】
【化５】

【００１９】
すなわち、前記で得た（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ（ヒドロキシイミノ）メチル］ピロリジン（５）を４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢酸とＷＳＣ・ＨＣｌなどの縮合剤存在下反応させエステル体（８）とした後、前記と同様にオキサジアゾールを閉環しアルコール体（９）を得た。次いで、水素化ナトリウムなどのアルカリ存在下水酸基をメチル化した後、Ｂｏｃ基を脱保護することにより目的のオキサジアゾイルピロリジン（２−９）を得た。
【００２０】
Ｒ^４が４−アセトキシメチルフェニル基である化合物は下記式４に示した方法でも合成することができる。
【００２１】
【化６】

【００２２】
すなわち、前記で得たアルコール体（９）を、ピリジンなどの塩基存在下無水酢酸と反応させアセチル化した後、Ｂｏｃ基を脱保護することにより目的のオキサジアゾイルピロリジン（２−１０）を得た。
【００２３】
さらに、前記で得られた化合物（１−１３，１４，１５）を下記式５に示されるように加水分解することにより、Ｒ^４が４−ヒドロキシメチルフェニル基である化合物を合成することができる。
【００２４】
【化７】

【００２５】
一方、ジフルオロ酢酸誘導体（３−１〜３−４）は、下記式６で示されるように、対応するケトンあるいはアルデヒドと亜鉛存在下ブロモジフルオロ酢酸エチルとレホマツスキー反応を行った後、エステルを加水分解することにより合成することができる（式中、Ｒ^５及びＲ^６は、Ｒ^５がシクロヘキシル基のときＲ^６は水素原子であるか、又は隣接する炭素原子と一緒になってメチル基の１〜４個で置換されたシクロヘキサノン又はシクロヘキサノンを形成する基を示す。）。
【００２６】
【化８】

【００２７】
さらに、（シクロヘキシル）ジフルオロ酢酸（３−５）は、下記式７で示されるように、３−ブロモシクロヘキセンへ亜鉛及びシアン化銅存在下ブロモジフルオロ酢酸エチルと反応させた後、加水分解し水素添加することにより得ることができる。
【００２８】
【化９】

【００２９】
以上の反応での試薬、時間、温度及び溶媒等の反応条件は、通常用いられる条件で行うことができる。
【００３０】
【実施例】
以下、実施例及び試験例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
参考例１
（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−シアノピロリジン（化合物４；８２．８ｇ，４２０ｍｍｏｌ）の水及びメタノール（各３５０ｍｌ）の混合溶液に塩酸ヒドロキシルアミン（５８．８ｇ，８４０ｍｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム（８９．７ｇ，８４０ｍｍｏｌ）を加え、９時間加熱還流した。反応後溶媒を減圧留去し、酢酸エチルを加え水及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し、残留物を酢酸エチルより再結晶し、下記に構造を示した（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ−（ヒドロキシイミノ）メチル］ピロリジン（化合物５）の無色結晶（７８．５ｇ）を得た。
【００３１】
【化１０】

【００３２】
参考例２
参考例１で得られた化合物５（１３．１ｇ，５７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（９．５ｍｌ，６９ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．３５ｇ，２．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１３０ｍｌ）溶液に、氷冷下アセトキシ酢酸クロライド（６．２ｍｌ，５７ｍｍｏｌ）を滴下した。室温下一晩攪拌後、酢酸エチルを加え水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（８０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ−［（アセトキシ）アセトキシイミノ］メチル］ピロリジン（化合物６）の黄色油状物（１７．９ｇ）を得た。
【００３３】
【化１１】

【００３４】
参考例３
参考例２で得られた化合物６（１６．９ｇ，５１ｍｍｏｌ）のキシレン（８５ｍｌ）溶液を１５時間加熱還流した。反応後、減圧下溶媒留去し（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−アセトキシメチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの褐色油状物（１１．８ｇ）を得た。
ここで得られた（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−アセトキシメチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（０．８１ｇ，２．６ｍｍｏｌ）のメタノール（７ｍｌ）及び水（１ｍｌ）溶液に炭酸カリウム（０．４３ｇ）を加え、室温下２時間攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え水及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し下記に構造を示した（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−ヒドロキシメチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（化合物７）の黄色油状物（０．６３ｇ）を得た。
【００３５】
【化１２】

【００３６】
参考例４
参考例３で得られた化合物７（１．２９ｇ，４．８ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（１．８９ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１６ｍｌ）溶液に３，４−ジメトキシフェノール（１．１１ｇ，７．２ｍｍｏｌ）を加えた。更にジ−ｔ−ブチル　アゾジカルボキシレート（１．６６ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８ｍｌ）溶液を加え、室温下一晩攪拌した。反応後酢酸エチルを加え１０％水酸化ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−（３，４−ジメトキシフェノキシメチル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの褐色油状物（１．５０ｇ）を得た。
【００３７】
ここで得られた化合物（１．３８ｇ）のジクロロメタン（８ｍｌ）溶液にトリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、メタノールを加え、反応溶液をＳＣＸ樹脂（バリアン社製）を用いて精製し、下記に構造を示した２−［５−（３，４−ジメトキシフェノキシメチル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（化合物２−１）の赤色油状物（０．３１ｇ）を得た。
【００３８】
【化１３】

【００３９】
同様の方法により以下の化合物を得た。
【００４０】
【化１４】

【００４１】
参考例５
参考例１で得られた化合物５（５．０ｇ，２２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液に、４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ酢酸（４．７７ｇ，２６ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．２７ｇ，２．２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（２．９ｍｌ，２６ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（５．０３ｇ，２６ｍｍｏｌ）を順次加え、室温下３日間攪拌した。反応後、減圧下溶媒留去し酢酸エチルを加え、１Ｍクエン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（７０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（Ｚ）−（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［アミノ−［［４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ］アセトキシイミノ］メチル］ピロリジン（化合物８）の無色アモルファス（４．１１ｇ）を得た。
【００４２】
【化１５】

【００４３】
参考例６
参考例５で得られた化合物８（１３．２ｇ，３４ｍｍｏｌ）のキシレン（１００ｍｌ）溶液を２０時間加熱還流した。反応溶液を、シリカゲルクロマトグラフィー（７０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−［４−（ヒドロキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（化合物９）の黄色油状物（１１．９ｇ）を得た。
【００４４】
【化１６】

【００４５】
参考例７
６０％油性水素化ナトリウム（０．３４ｇ，８．８ｍｍｏｌ）をヘキサン（２ｍｌ）で洗浄後、ジメチルホルムアミド（８ｍｌ）を加え、氷冷下参考例６で得られた化合物９（３．０ｇ，８．０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（８ｍｌ）溶液を滴下した。室温下３０分攪拌後、氷冷下よう化メチル（０．６２ｍｌ，１０ｍｍｏｌ）を加え室温にて一晩攪拌した。反応後、水を加え酢酸エチルで抽出し飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（４５％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−［４−（メトキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの褐色油状物（１．２２ｇ）を得た。
【００４６】
ここで得られた化合物（１．１７ｇ，３．０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２ｍｌ）溶液に４Ｎ塩化水素−酢酸エチル（５ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、水を加え酢酸エチルで洗浄し、水層に１０％水酸化ナトリウム水溶液を加え中和した。酢酸エチルで抽出後、飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、下記に構造を示した（２Ｓ）−２−［５−［４−（メトキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（化合物２−９）の褐色油状物（０．６５ｇ）を得た。
【００４７】
【化１７】

【００４８】
参考例８
参考例６で得られた化合物９（３．０ｇ，８．０ｍｍｏｌ）のピリジン（１５ｍｌ）溶液に、無水酢酸（１．１ｍｌ，１２ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。水を加え、室温下１時間攪拌後、酢酸エチルで抽出した。有機層を１０％塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（４０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、（２Ｓ）−１−ｔ−ブトキシカルボニル−２−［５−［４−（アセトキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（２．４４ｇ）を得た。
ここで得られた化合物（２．３５ｇ，５．６ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（５ｍｌ）溶液に４Ｎ塩化水素−酢酸エチル（１０ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、析出した結晶をろ過し、下記に構造を示した（２Ｓ）−２−［５−［４−（アセトキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン塩酸塩（化合物２−１０）の無色結晶（１．５８ｇ）を得た。
【００４９】
【化１８】

【００５０】
参考例９
窒素置換下、亜鉛末（１．７０ｇ，２６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に１，２−ジブロモエタン及びトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え、数分間加熱還流し活性化した。次いで加熱還流下、３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキサノン（３．０９ｇ，２０ｍｍｏｌ）及びブロモジフルオロ酢酸エチル（４．４７ｇ，２２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を５分間で滴下し、１時間加熱還流した。反応後、酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、（１−ヒドロキシ−３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキシル）−ジフルオロ酢酸エチルの黄色油状物（５．７８ｇ）を得た。
【００５１】
ここで得られた化合物（５．７８ｇ）のメタノール（２０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をエーテル−ヘキサンより再結晶し、下記に構造を示した（１−ヒドロキシ−３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキシル）−ジフルオロ酢酸（化合物３−１）の無色結晶（３．５６ｇ）を得た。
【００５２】
【化１９】

【００５３】
^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：
０．９７（６Ｈ，ｓ），１．０８−１．７３（６Ｈ，ｍ），１．２３（６Ｈ，ｓ），４．６３−５．１５（１Ｈ，ｂｒ）
【００５４】
同様の方法により以下の化合物を得た。
【００５５】
【化２０】

【００５６】
参考例１０
窒素置換下、亜鉛末（２．７５ｇ，４２．０ｍｍｏｌ）のトリグリム（トリエチレングリコールジメチルエーテル）（２０ｍｌ）溶液にトリメチルシリルクロライド（各数滴）を加え活性化させた。次いでブロモジフルオロ酢酸エチル（１０．２ｇ，５０．４ｍｍｏｌ）のトリグリム（２０ｍｌ）溶液を加え、室温下３０分間攪拌した。シアン化銅（Ｉ）（３．７６ｇ，４２．０ｍｍｏｌ）を加えた後、更に室温で３０分間攪拌した。ここで３−ブロモシクロヘキセン（４．８３ｇ，３０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）溶液を加え、室温下一晩攪拌した。反応後、ジエチルエーテルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、多量の飽和食塩水で更に洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸エチルの無色油状物（４．２８ｇ）を得た。
【００５７】
ここで得られた化合物（４．２８ｇ）のメタノール（２０ｍｌ）溶液に１０％水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応溶液をヘキサンで洗浄後、水層に１Ｎ塩酸を加え中和し酢酸エチルで抽出、飽和食塩水で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去し、（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸の橙色油状物（３．４９ｇ）を得た。
【００５８】
次いで、（２−シクロヘキセニル）ジフルオロ酢酸（２．００ｇ，１１．３５ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（２０ｍｌ）に１０％パラジウム−活性炭素（１．０ｇ，０．９４ｍｍｏｌ）を加え、水素置換下室温にて一晩攪拌した。反応溶液をセライトろ過後、減圧下溶媒留去し（シクロヘキシル）ジフルオロ酢酸（化合物３−５）の橙色油状物（１．３８ｇ）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：
１．９７−１．６３（５Ｈ，ｍ），１．６３−２．２９（６Ｈ，ｍ），７．０７−７．５３（１Ｈ，ｂｒ）
【００５９】
実施例１
参考例４で得られた化合物２−１（０．３１ｇ，１．０ｍｍｏｌ）、参考例９で得られた化合物３−１（０．２６ｇ，１．０５ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．１８９ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（４．０ｍｌ）溶液に、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．２７ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）を加え、室温下一晩攪拌した。反応後酢酸エチルを加え飽和塩化アンモニウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒留去後、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−［ジフルオロ（１−ヒドロキシ−３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキシル）アセチル］−２−［５−（３，４−ジメトキシフェノキシメチル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの黄色油状物（０．１０ｇ）を得た。
【００６０】
【化２１】

【００６１】
同様の方法により実施例２〜１００の化合物を得た。
【００６２】
【化２２】

【００６３】
【化２３】

【００６４】
【化２４】

【００６５】
【化２５】

【００６６】
実施例１０１
実施例１３で得られた（２Ｓ）−１−（３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオニル）−２−［５−［４−（アセトキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジン（０．７０ｇ，１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（８ｍｌ）及び水（２ｍｌ）の混合溶液に、炭酸カリウム（０．２９ｇ，２．１ｍｍｏｌ）を加え、室温下３日間攪拌した。反応後、酢酸エチルを加え水及び飽和食塩水で順次洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒留去し残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（６０％酢酸エチル−ヘキサン）で精製し、下記に構造を示した（２Ｓ）−１−（３−シクロヘキシル−２，２−ジフルオロ−３−ヒドロキシプロピオニル）−２−［５−［４−（ヒドロキシメチル）フェノキシメチル］−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］ピロリジンの無色アモルファス（０．４９ｇ）を得た。
【００６７】
【化２６】

【００６８】
同様の方法により実施例１０２、１０３の化合物を得た。
【００６９】
【化２７】

【００７０】
試験例「ＦＫＢＰ１２のロータマーゼ活性に対する阻害試験」
（酵素源）
ＦＫ−ＢＩＮＤＩＮＧ　ＰＲＯＴＥＩＮ（Ｈｕｍａｎ，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　Ｅ．ｃｏｌｉ）、ＳＩＧＭＡ社、Ｆ−５３９８をＦＫＢＰ−１２として使用した。
（反応基質）
Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡ（ＢＡＣＨＥＭ社、Ｌ−１６０５）を０．５Ｍ　ＬｉＣｌ／トリフルオロエタノール溶液として用いた。本ペプチドはこの溶液中でシス型とトランス型の平衡状態をとる。
（試験方法）
ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．８、１ｍｌ、氷温）に４４ｎＭ　ＦＫＢＰ−１２と０．４ｍｇ／ｍｌ　α−キモトリプシン、もしくは０．４ｍｇ／ｍｌα−キモトリプシンのみを添加した後、２４ｍＭ　Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡ溶液を２μｌ添加して反応を開始させる。その後速やかに反応液を分光光度計のセル内へ移し、反応液の吸光度（３９０ｎｍ）の経時変化を測定した。
【００７１】
測定された吸光度の増加速度は、トランス型のＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡからα−キモトリプシンによって遊離するｐ−ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｎｅの増加速度を示し、本系のようにα−キモトリプシン活性が十分高い条件ではトランス型のＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−ｐＮＡの生成速度、すなわちこのペプチドの異性化速度に比例する。この異性化は自発的に起こるため、ＦＫＢＰ１２を添加した場合の吸光度増加速度からＦＫＢＰ１２を添加しない場合の吸光度増加速度を引いた値をＦＫＢＰ１２が有するロータマーゼ活性（異性化促進活性）として評価した。
【００７２】
本活性に対する検体の作用を調べるためには、１μｌのＤＭＳＯ溶液として反応液中に添加（ＤＭＳＯの最終濃度は０．１％）して評価を行った。
【００７３】
その結果を表に示す。
【００７４】
【表１】

【００７５】
【発明の効果】
本発明の化合物は、ＦＫＢＰ１２と結合することにより神経栄養活性を発現することから、臨床上有用である。

Claims

下記式

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、Ｒ^１がＣ_３−８シクロヘキシル基のときＲ^２は水素原子であるか、又は隣接する炭素原子と一緒になってメチル基の１〜４個で置換されたＣ_３−８シクロヘキシル基若しくはＣ_３−８シクロヘキシル基を形成する基であり、Ｒ^３は、水素原子又は水酸基であり、Ｒ^４は、フェニル基、ピリジル基、ナフチル基、５，６，７，８−テトラヒドロナフチル基、メチレンジオキシフェニル基、２−アセチルベンゾフラニル基、インダニル基、又は「Ｃ_１−５アルコキシ基、シアノ基、カルボキシメチル基、Ｃ_２−６アルコキシカルボニルメチル基、Ｃ_２−６アルコキシカルボニル基、ヒドロキシメチル基、Ｃ_１−５アルコキシＣ_１−５アルキル基、Ｃ_２−６アルカノイルオキシメチル基、ピロリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、Ｃ_２−６アルカノイルアミノ基、トリフルオロメチル基、Ｃ_１−６アルキル基、ニトロ基、フェニル基、フェノキシ基、ウレア基、トリフルオロメトキシ基、Ｃ_１−５アルキルスルホニル基、Ｃ_２−６アルカノイル基及びハロゲン原子」から選ばれる１〜３個で置換されたフェニル基である。）で表されるアリールオキシメチルオキサジアゾール誘導体又はその医薬上許容される塩。