JP2004091492A - アミロイドベータタンパク質(球状アッセンブリーおよびその使用) - Google Patents
アミロイドベータタンパク質(球状アッセンブリーおよびその使用) Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】 少なくとも3〜12個のアミロイドβタンパク質を含んで成り、神経毒性を示す、単離された可溶性の球状非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体。
【選択図】 なし
Description
1984年に、Glenner とWongは、アルツハイマー病に関連した脳血管性アミロイドの単離および同定に成功した(Glenner et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 120, 885-890,1984a)。その後、アミロイドβとして現在知られている同じ39−43残基ペプチドが、アルツハイマー病神経炎性プラークの主要タンパク質成分として同定された( Glenner et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 122, 1131-1135,1984b; Masters et al., EMBO J., 4.2757-2764, 1985a; Masters et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 82, 4245-4249, 1985b)。これが、それまでは神経解剖学的および神経病理学的説明によってのみ特性化されていた疾患であるアルツハイマー病に、別々の分子が結びつけられた最初である。
アミロイドβは総タンパク質の70%以上を構成する、プラークの主要タンパク質成分である。しかしながら、α1−アンチキモトリプシン(ACT)、ヘパリンスルフェートプロテオグリカン(HSPG)、アポリポタンパク質EおよびJ、ブチリルコリンエステラーゼ(BChE)、S−100Bおよびいくつかの補体成分を含めた種々のその他の成分も存在する。アルツハイマー病の開始および進行におけるこれらの成分の重要性は確定されていないがしかし、本疾患におけるアポEアイソフォームの関与は、Roses と同僚(Strittmatter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90, 1977-81,1993 )の遺伝学的研究により確定されており、彼等は、アポリポタンパク質E遺伝子、即ちアポE4の多形性が、大きい一組の後期開始家族性アルツハイマー病症例におけるアルツハイマー病の早期開始と相関する、ということを発見した。
アルツハイマー病の特質であるプラークおよびもつれ(tangle)以外に、ニューロンと随伴するグリア細胞の両方において、一連の細胞性反応が誘発されていたことは明らかである。生化学的レベルでは、タウプロテインの高リン酸化は明白で、それはキナーゼ/ホスファターゼ平衡と同様に起因する。転写レベルでは、種々の遺伝子が活性化されて、脳には通常は存在しないか、または低レベルでのみ存在するある範囲のタンパク質を産生する。炎症過程が活性化された、という有意の証拠も存在する。
アミロイドβ 1−42がアルツハイマー病を引き起こすメカニズムは明らかにされていないが、しかし文献には200以上ものアミロイドβ神経毒性が含まれており、その多くが近年総説されている(例えば、Yankner et al., Neuron, 16, 921-32, 1996; Iversen et al., Biochemical Journal, 311, 1-16, 1995)。合意された見解は、アミロイドβが毒性であるために、それは原繊維構造に集合するに違いない、というものである(Pike et al., J.Neurosci., 13, 1676-87, 1993 )。単量体アミロイドのみを含有する溶液は、培養中のニューロンに有害な影響を及ぼさないことが繰り返し実証されてきた。
(a)単量体アミロイドβタンパク質の溶液を生成し;
(b)タンパク質溶液を適切な培地中に希釈し;
(c)約4℃で工程(b)から得られた培地をインキュベートし;
(d)約4℃で約14,000gで培地を遠心分離し;
(e)アミロイドβタンパク質アッセンブリーを含有する場合は遠心分離から得られた上清を回収する;
工程を含んで成る。
(a)試験物質との接触の存在下または非存在下で、ニューロン細胞の別々の培養物をタンパク質アッセンブリーと接触させ;
(b)タンパク質アッセンブリーと結合する、蛍光性である試薬を付加し;
(c)蛍光標示式細胞分類により別々の細胞培養物を分析し;
(d)培養物の蛍光を比較し、被験化合物の非存在下でタンパク質アッセンブリーと接触させた対応する培養と比較して、タンパク質アッセンブリーの受容体結合を阻止する化合物を培養の蛍光低減を引き起こすものと同定し、そして受容体結合を促進する化合物を培養の蛍光増大を引き起こすものとして同定する。
(a)被験化合物と混合された、またはされていないアミロイドβの別々の試料を調製し;
(b)別々の試料中にタンパク質アッセンブリーを形成し;
(c)ニューロン細胞の別々の培養を別々の試料と接触させ;
(d)タンパク質アッセンブリーと結合する、蛍光性である試薬を付加し;
(e)蛍光標示式細胞分類により別々の細胞培養を分析し;
(f)培養物の蛍光を比較し、被験化合物の非存在下でタンパク質アッセンブリーと接触させた対応する培養と比較して、タンパク質アッセンブリーの形成または受容体結合を阻止する化合物を培養の蛍光低減を引き起こすものと同定し、そしてタンパク質アッセンブリーの形成または受容体結合を促進する化合物を培養の蛍光増大を引き起こすものとして同定される。
(a)アミロイドβタンパク質からタンパク質アッセンブリーを形成し;
(b)ニューロン細胞の培養物をタンパク質アッセンブリーと接触させて;
(c)前記のタンパク質アッセンブリーと結合する(複合体形成成分(例えばビオチンまたはその他の適切な薬剤)を含めた)抗体(例えば6E10)を付加し;
(d)非結合抗体を洗い落とし:
(e)前記の複合体形成成分により、前記のタンパク質アッセンブリーに結合される前記の抗体に酵素(例えば西洋ワサビペルオキシダーゼ)を結合せしめ;
(f)前記の酵素により切断される無色基質(例えばABTS)を付加して変色を生じさせ;そして
(g)前記のタンパク質アッセンブリーの受容体結合の測定と同様に、前記の変色(例えば分光測光的に)または変色の速度を確定する。
(a)動物の海馬にタンパク質アッセンブリーを投与し;
(b)電気的刺激を適用し;そして
(c)長期増強反応を確定するために長期間にわたり、細胞体スパイク振幅を測定する。動物の長期増強反応を同一様式で、但し電気的刺激の適用前にタンパク質アッセンブリーの代わりに食塩水を投与して、処置した別の動物の長期増強反応と比較する方法を、任意に実行する。この方法はさらに、例えばADDLを単独で、または被験化合物と一緒に投与した動物におけるLTP反応を比較することにより、ADDLの作用を調節する(即ち増大または低減する)化合物を同定するために用い得る。
(a)動物の海馬に食塩水または被験化合物を投与し;
(b)電気的刺激を適用し;
(c)長期増強反応を確定するために長期間、細胞体スパイク振幅を測定し;そして
(d)食塩水を投与した動物の長期増強反応を、被験化合物を投与した動物の長期増強反応と比較する。本方法はさらに、食塩水または被験化合物の投与の前に、一緒に、または後に、海馬にタンパク質アッセンブリーを投与することを任意に包含する。
(a)被験化合物との接触の存在下または非存在下で、ニューロン細胞の別々の培養物をタンパク質アッセンブリーと接触させ;
(b)各培養物中の成育可能な細胞の割合を測定し;そして
(c)各培養物中の増殖可能細胞の割合を比較する。タンパク質アッセンブリーの神経毒性を阻止する化合物は、例えば、被験化合物の非存在下でタンパク質アッセンブリーと接触させた対応する培養物と比較した場合の培養中の増殖可能細胞の割合の増大を引き起こす場合に、同定される。タンパク質アッセンブリーの神経毒性を増大する化合物は、例えば、被験化合物の存在下でタンパク質アッセンブリーと接触させた対応する培養と比較した場合の培養中の成育可能細胞の割合の低減を引き起こす場合に、同定される。
(a)被験物質を抗体(例えば、6E10抗体又は別の抗体)と接触させ;そして
(b)抗体のタンパク質アッセンブリーとの結合を検出する。
同様に、以下の方法が、望ましくは用いられる:
(a)被験物質を血清飢餓化神経芽細胞腫細胞(例えば、B103神経芽細胞腫細胞)と接触させ;そして
(b)被験物質と接触されなかった神経芽細胞腫細胞に対する細胞の形態学的知見と比較することにより、細胞における形態学的変化を測定する。
(a)被験物質を脳薄片培養物と接触させ;そして
(b)被験物質と接触されなかった脳薄片培養物に対して比較することにより、脳細胞死を測定する。さらに望ましくは、以下の方法も実施し得る:
(a)被験物質を神経芽細胞腫細胞(例えば、B103神経芽細胞腫細胞)と接触させ;そして
(b)被験物質と接触されなかった神経芽細胞腫細胞におけるfynキナーゼ活性に対して細胞中のfynキナーゼ活性を比較することにより、fynキナーゼ活性の増大を測定する。特に、Fyn活性は、市販のキット(例えば、Oncogene Research Products,Cambridge, MAからのKit #QIA-28 )を使用して、またはBorowski et al., J. Biochem.(Tokyo ), 115, 825-829,1994 に記載されているのと類似の検定を用いて、比較し得る。
(a)被験物質を一次星状膠細胞の培養物と接触させ;そして
(b)被験物質と接触されなかった一次星状膠細胞の培養物と比較した場合の星状膠細胞の活性化を確定する。この方法の変法では、任意に以下の工程が包含される:
(a)被験物質を一次星状膠細胞と接触させ;そして
(b)被験物質と接触されなかった一次星状膠細胞の培養物中のmRNAレベルを比較することにより、インターロイキン−1、誘導性酸化一酸化窒素シンターゼ、ApoE、ApoJおよびα1−アンチキモトリプシンから成る群から選択されるタンパク質に対するmRNAの増大を星状膠細胞で測定する。特に本明細書中の開示の点から見て当業者に明らかになるその他の検定方法も、そしてさらに、前記の方法の変法ももちろんある。
本発明にしたがって、44μLの無水DMSO中に1mgの固体アミロイドβ 1−42(例えばLambert et al., J. Neurosci. Res.,39, 377-395,1994に記載されたように合成した)を溶解して、ADDLを調製した。次にこの5mM溶液を冷(4℃)F12培地(Gibco BRL, Life Technologies)中に希釈して、総容量を2.20mL(50倍希釈液)とし、約30秒間攪拌した。混合物を約0℃〜約8℃で約24時間インキュベートさせた後、14,000gで、4℃で約10分間、遠心分離した。
グルタルアルデヒドは、種々の生化学系に首尾よく用いられている。グルタルアルデヒドは、非特異的反応に対照するものとして、高濃度の単量体タンパク質と直接接触するタンパク質を架橋する傾向がある。本実施例では、アミロイドβのグルタルアルデヒド指令架橋を調べた。
本実施例は、実施例1と同様に生成されたADDLの、種々の方法(例えば、ネイティブゲル電気泳動、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動、AFM、フィールドフロー分別および免疫識別)を用いたサイズ特性決定を記載する。
の安定性を確証する。
原繊維構造はAβの毒性形態を表すと提案されている(Lorenzo et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 12243-12247, 1994; Howlett et al., Neurodegen. 4, 23-32, 1995 )けれども、沈降性原繊維として行動しない新規の神経毒素は、Aβ 1−42を低用量の「アポJ」としても知られているクラステリンとともにインキュベートした場合に生成する(Oda et al., Exper. Neurol., 136, 22-31, 1995; Oda et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 204, 1131-1136, 1994)。これらの徐々に沈降する毒素が依然として小さなまたは発生期の原繊維を含有し得るか否かを試験するために、クラステリン処理Aβ調製物を原子間力顕微鏡により調べた。
実施例4の毒性部分は、オリゴマーAβおよびクラステリンを含有するまれな構造を包含し得る。 Oda等( Exper. Neurol., 136, 22-31, 1995 )はクラステリンがAβ 1−42溶液の毒性を増大することが判明したと報告したが、一方他の人達は、化学量論的レベルのクラステリンがAβ 1−40毒性に対して防護することを見出した(Boggs et al.,J. Neurochem. 67, 1324-1327, 1997)。したがって、クラステリンの非存在下でのADDL生成を、本実施例でさらに特性化した。
これらの結果は、ADDLが生成し、生理学的条件下で安定であることを確証し、そしてそれらがin vivo で同様に生成し、安定であり得ることを示唆する。
ADDLがクラステリン、低温または低Aβ濃度のいずれにより誘発されても、生成する安定オリゴマーは強力な神経毒素であった。成熟CNSに関する生理学的関連モデルを提供する、器官型マウス脳薄片培養で毒性を調べた。対照における高生存能力を保持するために、濾過により大気−培地界面で脳組織を支持した。
本実施例は、アミロイドβオリゴマーに対する早期毒性変化を検出するために用い得る検定を記載する。
これらの実験のために、PC12細胞を96ウエル培養プレート上で4x104 細胞/ウエルで継代接種し、DMEM+10%ウシ胎仔血清+1%S/P/F(ストレプトマイシン、ペニシリンおよびフンギゾン)中で24時間増殖させた。プレートを200μg/mLのポリ−1−リシンで処理した後に、細胞を平板培養し、細胞付着を増強した。1組の6ウエルは未処理のままで置き、新鮮な培地を供給し、一方別の組のウエルはビヒクル対照(10% 0.01N HClを含有するPBS、RTで熟成0/n)で処理した。
本実施例は、ADDL媒介性細胞変化のさらに別の検定を記載する。即ち、前記実施例に示したMTT酸化ストレス毒性検定を、PC12細胞の代わりにHN2細胞を用いて実施し得る。その他の適切な細胞も、同様に用い得る。
本実施例は、位相差顕微鏡による細胞形態のADDL媒介性細胞変化検定のさらに別の検定を記載する。
本検定のために、培養を低密度(50〜60%交会)に増殖させた。実験を開始するために、F12培地中で1時間、細胞を血清飢餓させた。次に細胞を、実施例1と同様に調製したアミロイドβオリゴマーとともに3時間インキュベートし、阻害化合物を用いてそして用いずに、化合物を細胞に24時間付加した。3時間後、形態学的差に関して細胞を検査し、免疫蛍光標識化のために固定した。MetaMorph 画像分析系およびMRIビデオカメラ(Universal Imaging, Inc. )を用いて試料を検査した。
細胞表面受容体は、近年、慣用的に調製されたAβに関してグリア細胞上で同定されており(Yan et al., Nature, 382, 685-691, 1996; El Khoury et al., Natue, 382, 716-719, 1996 )、低ADDL用量でのニューロン死がシグナリングメカニズムの考え得る関与を示唆したために、ニューロン上の特異的細胞表面結合部位がADDLに関して存在するか否かを確定するために、実験を実施した。
本実施例は、ADDL生成が、例えばゴシポールを用いて抑制され得る方法を記載する。
これらの実験のために、実施例1と同様に、ADDLを調製した。ゴシポール(Aldrich )を、ADDLを生成するためのAβタンパク質のインキュベーション中に100μMの濃度に付加した。その結果生じた調製物を、前記のようなLIVE/DEAD 検定キットを用いて、神経毒性に関して査定した。ゴシポール/ADDL調製物に24時間曝露後に起きた細胞死の量は、5%未満であった。これは、対応するDMSO対照調製物(即ち、6%)、またはいかなるADDLも含有しないゴシポール対照調製物(即ち、4%)に関して得られた毒性のレベルに匹敵する。
したがって、これらの結果は、ゴシポールのような化合物はADDL生成を抑制するために用い得る、ということを確証する。
B103細胞トリプシン処理はその後のADDL結合を阻止することが判明したため、本実施例に記載したように実験を実施して、細胞表面から放出されたトリプシン断片がADDL結合活性を遅延させるか否かを試験した。
本実施例は、細胞表面とのADDL結合が飽和可能か否かを確定するための用量反応実験を記載する。このような飽和可能性は、ADDLが実際に特定の細胞表面受容体と相互作用する場合に予測され得る。
したがって、これらの結果は、ADDL結合が飽和可能性であることを確証する。ADDL結合のこのような飽和可能性は、特にトリプシンペプチドの結果とともに考えた場合に、特定の細胞表面受容体を介してADDLが作用していることを確認する。
本実施例は、ADDL結合活性を査定するために用い得る細胞ベースの検定、特に細胞ベースの酵素結合イムノソルベント検定(ELISA)を記載する。
ADDL毒性におけるシグナル伝達の強力な関与をさらに調べるために、本実施例の実験を、同系fyn−/−およびfyn+/+動物からの脳薄片に及ぼすADDLの影響と比較した。Fynは、Src族のタンパク質トリプシンキナーゼに属し、これは中枢から多数の細胞へのシグナルおよび応答である(Clarke et al., Science, 268, 233-238)。Fynは、AD−罹患ニューロンにおいて上向き調節されるため、特に興味深い(Shirazi et al.,Neuroreport, 4, 435-437,1993 )。その後、AFMによりADDLを含有することが明らかにされた従来のAβ調製物(Zhang et al., Neurosci. Letts., 211, 187-190,1996 )によってもそれは活性化されると思われる。さらに、Fynノックアウトマウスは、発症中の海馬のアポトーシスを低減した(Grant et al., Science, 258, 1903-1910, 1992 )。
)は、影響を受けなかった(示されていない)。Tukey 多重比較を用いる分析(ANOVA)は、他のすべての条件に比して、ADDL fyn+/=+データに関してP<0.001の値を示した。
ADDL毒性におけるシグナル伝達の強力な関与をさらに調べるために、本実施例の実験を、星状膠細胞の活性化に及ぼすADDLの影響と比較した。
24時間インキュベーション後、細胞をPBSで2回洗浄して血清を除去し、培養をN2サプリメントを含有するα−MEM中でさらに24時間インキュベート後、Aβペプチドまたは対照緩衝液(即ち希釈剤を含有する緩衝液)を付加した。
長期増強(LTP)は、シナプス可塑性に関する古典的範例であり、記憶および学習に関するモデルであって、即ち、初期段階ADにおいて選択的に損失される機能である。本実施例は、LTP、特に医学的穿孔経路−顆粒細胞LTPに及ぼすADDLの作用を調べるために実施した実験を記載する。
Research, 689, 85-92, 1995)。
本実施例は、in vivo でのADDLの初期効果を記載し、このような初期効果の知識における方法が取り扱われる。
アルツハイマー病の主な症状は学習および記憶の欠損を包含する。しかしながら、行動的欠損と凝集アミロイド沈着物とのつながりは、確定するのが難しかった。トランスジェニックマウスでは、血小板由来増殖因子プロモーターの制御下での過剰発現突然変異体APPが多量のアミロイドの沈着を引き起こした(Games et al., Nature, 373, 523-527, 1995)。これに対照するものとして、この系を用いて、行動的欠損は報告されていない。
本発明の好ましい実施態様の重点を説明してきたが、本発明は個々に記載された以外の方法でも実施し得るものとする。したがって、以下の請求の範囲により限定されるような本発明の精神および範囲内に包含されるすべての修正を、本発明は含み得る。
(1)一般情報:
(i)出願人:
(A)名称:ノースウエスタン ユニバーシティ他
(ii)発明の名称:アミロイドβタンパク質(球状アッセンブリーおよびその使用)
(iii)配列の数:4
(2)配列番号:1の情報
(i)配列の特徴
(A)長さ:20塩基対
(B)型:核酸
(C)鎖の数:一本鎖
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)分子型:他の核酸
(xi)配列の記載:配列番号:1:
GCACCTTCTT TCCCTTCATC 20
(2)配列番号:2の情報
(i)配列の特徴
(A)長さ:20塩基対
(B)型:核酸
(C)鎖の数:一本鎖
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)分子型:他の核酸
(xi)配列の記載:配列番号:2:
TGCTGATGTA CCAGTTGGGG 20
(2)配列番号:3の情報
(i)配列の特徴
(A)長さ:19塩基対
(B)型:核酸
(C)鎖の数:一本鎖
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)分子型:他の核酸
(xi)配列の記載:配列番号:3:
CAGTCCTTGA CCTGCGACC 19
(2)配列番号:4の情報
(i)配列の特徴
(A)長さ:19塩基対
(B)型:核酸
(C)鎖の数:一本鎖
(D)トポロジー:直鎖状
(ii)分子型:他の核酸
(xi)配列の記載:配列番号:4:
GCCTCACATC ACATCCTTG 19
Claims (51)
- 少なくとも3〜12個のアミロイドβタンパク質を含んで成り、神経毒性を示す、単離された可溶性の球状非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体。
- 前記オリゴマー構造体が三量体、四量体、五量体および六量体から成る群から選択されるオリゴマー形態を含んで成る請求項1に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 非変性ゲル電気泳動により測定した場合に、前記オリゴマー構造体が約26kD〜約28kDの分子量を有する請求項1または2に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 15%SDS−ポリアクリルアミドゲル上での電気泳動により測定した場合に、前記オリゴマー構造体が約22kD〜約24kD、または約18kD〜約19kDの分子量を有する請求項1〜3のいずれか1項に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 原子間力顕微鏡により測定した場合に、前記オリゴマー構造体が約4.7nm〜約6.2nmの寸法の球状体を含んで成る請求項1〜4のいずれか1項に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 原子間力顕微鏡により測定した場合に、前記オリゴマー構造体が約4.9nm〜約5.4nmの寸法の球状体を含んで成る請求項1〜5のいずれか1項に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 原子間力顕微鏡により測定した場合に、前記オリゴマー構造体が約5.7nm〜約6.2nmの寸法の球状体を含んで成る請求項1〜5のいずれか1項に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 原子間力顕微鏡により測定した場合に、前記オリゴマー構造体の約40%〜約75%が、約4.9nm〜約5.4nm、及び約5.7nm〜約6.2nmの寸法の球状体を含んで成る請求項1〜5のいずれか1項に記載の単離されたオリゴマー構造体。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果の検定方法において、
(a)動物の海馬に前記オリゴマー構造体を投与し;
(b)電気的刺激を適用し;そして
(c)細胞体スパイク振幅を経時的に測定することにより、長期増強反応を測定する;
工程を含んで成る方法。 - 前記動物の長期増強反応が、電気的刺激の適用に先立ってオリゴマー構造体の代りに食塩水を投与する点を除き同様にして処置された別の動物の長期増強反応と比較される、請求項9に記載の方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による学習または記憶の低減から動物を保護するための方法であって、前記オリゴマー構造体の生成を阻止する化合物を投与することを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による学習または記憶の低減から動物を保護するための方法であって、学習または記憶の低減を導く前記オリゴマー構造体の活性を阻止する化合物を投与することを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による学習または記憶の低減を動物において逆転させる方法であって、前記オリゴマー構造体の生成を阻止する化合物を投与することを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による学習または記憶の低減を動物において逆転させる方法であって、学習または記憶の低減を導く前記オリゴマー構造体の活性を阻止する化合物を投与することを含んで成る方法。
- アルツハイマー病、成人性ダウン症候群および老人性痴呆症から成る群から選択された疾患、障害または症状の治療に適用される請求項11〜14のいずれか1項に記載の方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による長期増強の低減に対して神経細胞を保護するための方法であって、前記オリゴマー構造体の生成を阻止する化合物に前記細胞を接触させることを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による長期増強の低減に対して神経細胞を保護するための方法であって、長期増強の低減を導く前記オリゴマー構造体の活性を阻止する化合物に前記細胞を接触させることを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による長期増強の低減を神経細胞において逆転させるための方法であって、前記オリゴマー構造体の生成を阻止する化合物に前記細胞を接触させることを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果による長期増強の低減を神経細胞において逆転させるための方法であって、長期増強の低減を導く前記オリゴマー構造体の活性を阻止する化合物に前記細胞を接触させることを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を6E10抗体と接触させ;そして
(b)前記抗体の前記オリゴマー構造体との結合を検出する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を血清飢餓化神経芽細胞腫細胞と接触させ;そして
(b)前記被験物質と接触されなかった神経芽細胞腫細胞に対する前記細胞の形態学的知見を比較することにより、前記接触された細胞における形態学的変化を測定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を脳薄片培養物と接触させ;そして
(b)前記被験物質と接触されなかった脳薄片培養物に対して比較した場合の脳細胞死を測定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を神経芽細胞腫細胞と接触させ;そして
(b)前記被験物質と接触されなかった神経芽細胞腫細胞におけるFynキナーゼ活性に対して前記接触された細胞中のFynキナーゼ活性を比較することにより、Fynキナーゼ活性の増大を測定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を一次星状膠細胞の培養物と接触させ;そして
(b)前記被験物質と接触されなかった一次星状膠細胞の培養と比較した場合の前記接触された星状膠細胞の活性化を測定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を一次星状膠細胞と接触させ;そして
(b)前記被験物質と接触されなかった一次星状膠細胞の培養中の対応するmRNAレベルに対して前記接触された星状膠細胞中の前記mRNAレベルを比較することにより、インターロイキン−1、誘導性酸化一酸化窒素シンターゼ、ApoE、ApoJおよびα1−アンチキモトリプシンから成る群から選択されるタンパク質に対するmRNAの増大を前記星状膠細胞で測定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の作用を調節する化合物の同定方法において、
(a)動物の海馬に食塩水または被験化合物を投与し;
(b)電気的刺激を適用し;
(c)細胞体スパイク振幅を経時的に測定することにより長期増強反応を測定し;そして
(d)食塩水を投与された動物の長期増強反応を、被験化合物を投与された動物の長期増強反応と比較する;
工程を含んで成る方法。 - 前記食塩水または被験化合物の投与の前に、同時に、またはその後に、前記海馬にオリゴマー構造体を投与することをさらに含んで成る請求項26に記載の方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の神経毒性を阻止する化合物の同定方法であって、
(a)前記被験化合物との接触の存在下または非存在下で、ニューロン細胞の別々の培養物を前記オリゴマー構造体と接触させ;
(b)各培養物中の生存細胞の割合を測定し;そして
(c)各培養物中の生存細胞の割合を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物中の生存細胞と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた前記培養物中の生存細胞の割合が増大した場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の神経毒性を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物の同定方法において、
(a)前記被験物質との接触の存在下または非存在下で、ニューロン細胞の別々の培養物を前記オリゴマー構造体と接触させ;
(b)前記オリゴマー構造体と結合する蛍光性の試薬を添加し;
(c)蛍光標示式細胞分類法により前記別々の細胞培養物を分析し;そして
(d)培養物の蛍光を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 請求項1〜8のいずれかに記載のオリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物の同定方法において、
(a)蛍光試薬と結合し得る結合成分を含んで成る標識されたオリゴマー構造体を、アミロイドβタンパク質から生成せしめ;
(b)前記被験化合物との接触の存在下または非存在下で、ニューロン細胞の別々の培養物を前記標識されたオリゴマー構造体と接触させ;
(c)前記オリゴマー構造体と結合し得る蛍光試薬を添加し;
(d)蛍光標示式細胞分類法により前記別々の細胞培養物を分析し;そして
(e)培養物の蛍光を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物を、オリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の生成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物の同定方法において、
(a)前記被験化合物と混合されているかまたはされていないアミロイドβタンパク質の別々の試料を調製し;
(b)前記別々の試料中に前記オリゴマー構造体を形成し;
(c)ニューロン細胞の別々の培養物を前記別々の試料と接触させ;
(d)前記オリゴマー構造体と結合する蛍光性の試薬を添加し;
(e)蛍光標示式細胞分類法により前記別々の細胞培養物を分析し;そして
(f)培養の蛍光を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物を、オリゴマー構造体の形成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の生成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物の同定方法において、
(a)前記被験化合物と混合されているかまたはされていないアミロイドβタンパク質の別々の試料を調製し;
(b)前記別々の各試料中に、該別々の試料のそれぞれにおいて蛍光試薬と結合し得る結合成分を含んで成る標識されたオリゴマー構造体を形成し;
(c)ニューロン細胞の別々の培養物を前記別々の試料と接触させ;
(d)前記オリゴマー構造体と結合し得る蛍光試薬を添加し;
(e)蛍光標示式細胞分類法により前記別々の細胞培養物を分析し;そして
(f)培養物の蛍光を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物を、オリゴマー構造体の形成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 前記培養物の蛍光がさらに、オリゴマー構造体の形成に先立って前記被験化合物を添加するかまたは添加しない代わりに、オリゴマー構造体の形成後に前記被験化合物を添加するかまたは添加しない点を除き同様にして処理された培養物の蛍光と比較され、
前記オリゴマー構造体の生成に先立って前記化合物が添加される場合にのみ、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の生成を阻止する化合物として同定し、
オリゴマー構造体の生成の前又は後に前記化合物が添加される場合に、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養の蛍光と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定する、請求項31または32に記載の方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合の検出方法において、
(a)アミロイドβタンパク質から前記オリゴマー構造体を形成し;
(b)ニューロン細胞の培養物を前記オリゴマー構造体と接触させて;
(c)前記オリゴマー構造体と結合する抗体であって結合成分を含有するものを添加し;
(d)非結合抗体を洗い落とし:
(f)前記結合成分により、前記オリゴマー構造体に結合される前記抗体に酵素を結合せしめ;
(g)前記酵素により切断されて変色を生じさせる無色基質を付加し;そして
(h)前記オリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合の測定として前記の変色確定する;
工程を含んで成る方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の生成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物の同定方法において、
(a)前記被験化合物と混合されているまたはされていないアミロイドβタンパク質の別々の試料を調製し;
(b)前記別々の試料中に、前記オリゴマー構造体を形成し;
(c)ニューロン細胞の別々の培養物を前記別々の試料と接触させ;
(d)前記オリゴマー構造体と結合する抗体であって結合成分を含有するものを添加し;
(e)非結合抗体を洗い落とし:
(f)前記結合成分により、前記オリゴマー構造体に結合される前記抗体に酵素を結合せしめ;
(g)前記酵素により切断されて変色を生じさせる無色基質を付加し;そして
(h)前記別々の試料の各々により生成される変色を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の蛍光が低減する場合に、その被験化合物を、オリゴマー構造体の形成または細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 前記培養物により生成された変色がさらに、オリゴマー構造体の形成に先立って前記被験化合物を添加するかまたは付加しない代わりに、オリゴマー構造体の形成後に前記被験化合物を添加するかまたは添加しない点を除き同様にして処理された培養物により生成された変色と比較され、
前記オリゴマー構造体の生成に先立って前記化合物が添加される場合にのみ、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触した培養物の変色と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の変色が低減する場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の生成を阻止する化合物として同定し、
オリゴマー構造体の生成の前又は後に前記化合物が添加される場合に、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養の変色と比較して、被験化合物の存在下でオリゴマー構造体と接触させた培養物の変色が低減する場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する化合物として同定する、請求項35に記載の方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の生成を阻止する化合物の同定方法において、
(a)前記被験化合物と混合されているかまたはされていないアミロイドβタンパク質の別々の試料を調製し;
(b)前記別々の試料中に前記オリゴマー構造体を形成し;
(c)電気泳動、免疫認識および原子間力顕微鏡から成る群から選択される方法を用いて、オリゴマー構造体が前記別々の試料中に形成されたか否かを測定し;そして
(d)前記別々の試料中の前記オリゴマー構造体の形成を比較する;
工程を含んで成り、被験化合物の非存在下でオリゴマー構造体が形成される試料と比較して、試料中で被験化合物の存在下でオリゴマー構造体の生成が低減される場合に、その被験化合物をオリゴマー構造体の形成を阻止する化合物として同定することを特徴とする方法。 - 請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された可溶性の球状の非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の製造方法において、
(a)前記オリゴマー構造体を形成し得る単量体アミロイドβタンパク質の溶液を生成し;
(b)前記タンパク質溶液を適切な培地中に希釈して約5nM〜約500μMの最終濃度とし;
(c)約4℃で工程(b)から得られた培地を約4℃にて約2〜約48時間インキュベートし;
(d)約4℃で約14,000gで前記溶液を遠心分離し;
(e)前記アミロイドβオリゴマー構造体を含有するものとして、前記遠心分離から得られた上清を回収する;
工程を含んで成る方法。 - 工程(b)からの培地を約4℃にてクルステリンの存在下でインキュベートする、請求項38に記載の方法。
- 請求項38または39により調製された単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体。
- 神経細胞の長期増強反応を変えるための請求項1〜8のいずれかの単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記細胞を前記オリゴマー構造体と接触させることを含んで成る使用。
- 動物の学習または記憶を変えるための請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記オリゴマー構造体を前記動物に投与することを含んで成る使用。
- 神経細胞の形態学的変化を引き起こすための請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記細胞を前記オリゴマー構造体と接触させることを含んで成る使用。
- 前記形態学的変化が殺細胞、Fynキナーゼ活性変化、Fynキナーゼ細胞下局在化の変化並びにインターロイキン−1,誘導性酸化一酸化窒素シンターゼ、ApoE、ApoJおよびα1−アンチキモトリプシンを含めたタンパク質に関するmRNAレベルの変化からから成る群から選択される作用を含む請求項43に記載の使用。
- 星状膠細胞活性化を引き起こす請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記星状膠細胞を前記オリゴマー構造体と接触させることを含んで成る使用。
- オリゴヌクレオチド構造体の神経毒性を阻止する被験化合物を同定するための請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、神経細胞を前記オリゴマー構造体および前記被験化合物と接触させることを含んで成る使用。
- オリゴマー構造体の細胞表面タンパク質への結合を阻止する被験化合物を同定するための請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、神経細胞を前記オリゴマー構造体および前記被験化合物と接触させることを含んで成る使用。
- オリゴマー構造体の生成を阻止する被験化合物を同定するための請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記オリゴマー構造体を生成するためのインキュベーション中に、アミロイドβタンパク質を前記被験化合物と接触させることを含んで成る使用。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の効果によるADDL誘発性異常ニューロンシグナリングから神経細胞を防護するための方法であって、前記細胞を前記オリゴマー構造体の活性を阻止する化合物と接触させることを含んで成る方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載のオリゴマー構造体の被験物質中での検出方法において、
(a)前記被験物質を神経細胞と接触させ;そして
(b)前記細胞がADDL誘発性異常ニューロンシグナリングを示すか否かを決定する;
工程を含んで成る方法。 - 神経細胞のADDL誘発性異常ニューロンシグナリングを引き起こす請求項1〜8のいずれか1項に記載の単離された、球状の可溶性非原繊維性アミロイドβオリゴマー構造体の使用であって、前記細胞を前記オリゴマー構造体と接触させることを含んで成る使用。
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Cited By (1)
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JP2008531635A (ja) * | 2005-03-05 | 2008-08-14 | アボット ゲーエムベーハー ウント カンパニー カーゲー | スクリーニング方法、非拡散性aベータオリゴマーの精製方法、前記非拡散性aベータオリゴマーに対する選択的抗体および前記抗体の製造方法 |
Families Citing this family (93)
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US20030068316A1 (en) * | 1997-02-05 | 2003-04-10 | Klein William L. | Anti-ADDL antibodies and uses thereof |
US20060178302A1 (en) * | 1997-02-05 | 2006-08-10 | Northwestern University & The University Of Southern California | Amyloid beta protein (globular assembly and uses thereof) |
US7790856B2 (en) * | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
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US6761888B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US7179892B2 (en) * | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US20080050367A1 (en) * | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US6787523B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
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AU6524500A (en) * | 1999-08-04 | 2001-03-05 | Northwestern University | Amyloid beta protein (globular assembly and uses thereof) |
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AU4178601A (en) * | 2000-02-24 | 2001-09-03 | Univ Washington | Humanized antibodies that sequester abeta peptide |
CA2414772C (en) * | 2000-07-07 | 2011-06-28 | Jan Naslund | Prevention and treatment of alzheimer's disease |
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TWI255272B (en) * | 2000-12-06 | 2006-05-21 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6815175B2 (en) * | 2001-03-16 | 2004-11-09 | Cornell Research Foundation, Inc. | Anti-amyloid peptide antibody based diagnosis and treatment of a neurological disease or disorder |
ES2391905T3 (es) * | 2001-08-17 | 2012-11-30 | Washington University | Método de ensayo para la enfermedad de alzheimer |
MY139983A (en) * | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
AU2003279728B2 (en) * | 2002-10-01 | 2007-09-27 | Northwestern University | Amyloid beta-derived diffusible ligands (addls), addl-surrogates, addl-binding molecules, and uses thereof |
DE10303974A1 (de) * | 2003-01-31 | 2004-08-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
KR20050118669A (ko) * | 2003-02-01 | 2005-12-19 | 뉴랄랩 리미티드 | 가용성 a-베타에 대한 항체를 생성하기 위한 능동 면역화 |
WO2004071408A2 (en) | 2003-02-10 | 2004-08-26 | Applied Molecular Evolution, Inc. | Aβ BINDING MOLECULES |
US7521481B2 (en) | 2003-02-27 | 2009-04-21 | Mclaurin Joanne | Methods of preventing, treating and diagnosing disorders of protein aggregation |
TWI306458B (en) | 2003-05-30 | 2009-02-21 | Elan Pharma Int Ltd | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US8250823B2 (en) | 2003-08-26 | 2012-08-28 | Ejot Gmbh & Co. Kg | Dowels and methods for the assembly of insulating panels |
EP1755644A2 (en) * | 2004-05-14 | 2007-02-28 | Northwestern University | Compositions comprising addl receptor syngap |
SE0401601D0 (sv) | 2004-06-21 | 2004-06-21 | Bioarctic Neuroscience Ab | Protofibril specific antibodies and uses thereof |
US20080044356A1 (en) * | 2004-10-22 | 2008-02-21 | Regents Of The University Of Minnesota | Assemblies of Oligomeric Amyloid Beta Protein and Uses Thereof |
WO2006055178A2 (en) * | 2004-10-25 | 2006-05-26 | Merck & Co., Inc. | Anti-addl antibodies and uses thereof |
TW200636066A (en) * | 2004-12-15 | 2006-10-16 | Elan Pharm Inc | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
AR051800A1 (es) * | 2004-12-15 | 2007-02-07 | Wyeth Corp | Anticuerpos a beta usados en mejorar la cognicion |
WO2006066089A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
US8420093B2 (en) | 2005-02-14 | 2013-04-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Anti-ADDL monoclonal antibody and use thereof |
US7731962B2 (en) * | 2005-02-14 | 2010-06-08 | Merck & Co., Inc. | Anti-ADDL monoclonal antibody and use thereof |
EP2204381A1 (en) * | 2005-03-05 | 2010-07-07 | Abbott GmbH & Co. KG | Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies |
DE102005014936A1 (de) | 2005-03-24 | 2006-12-14 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Substituierte Oxindol-Derivate, diese enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung |
WO2007016357A1 (en) * | 2005-07-29 | 2007-02-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Amyloid beta receptor and uses thereof |
US20080014596A1 (en) * | 2005-11-16 | 2008-01-17 | Jasna Jerecic | ADDL Binding to Hippocampal Neurons |
CA2637472A1 (en) | 2005-11-30 | 2007-06-07 | Abbott Laboratories | Methods of preparation of recombinant forms of human beta-amyloid protein and uses of these proteins |
PT1976877E (pt) * | 2005-11-30 | 2014-04-29 | Abbvie Inc | Anticorpos monoclonais contra proteína beta-amilóide e suas utilizações |
EP1954718B1 (en) * | 2005-11-30 | 2014-09-03 | AbbVie Inc. | Anti-a globulomer antibodies, antigen-binding moieties thereof, corresponding hybridomas, nucleic acids, vectors, host cells, methods of producing said antibodies, compositions comprising said antibodies, uses of said antibodies and methods of using said antibodies |
CA2632822C (en) * | 2005-12-12 | 2018-08-28 | Ruth Greferath | A beta 1-42 specific monoclonal antibodies with therapeutic properties |
EP2325209A3 (en) | 2006-03-23 | 2011-08-03 | BioArtic Neuroscience AB | Improved protofibril selective antibodies and the use thereof |
US8784810B2 (en) * | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
JP4876224B2 (ja) * | 2006-06-05 | 2012-02-15 | 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 | アミロイドβオリゴマー並びにその製造方法及び使用方法 |
WO2008011348A2 (en) * | 2006-07-14 | 2008-01-24 | Ac Immune S.A. | Humanized antibody against amyloid beta |
ATE426174T1 (de) * | 2006-07-28 | 2009-04-15 | Vista Ventures Gmbh | Verfahren zum nachweis der amyloid-beta oligomere in kírperflussigkeiten |
US8455626B2 (en) * | 2006-11-30 | 2013-06-04 | Abbott Laboratories | Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies |
KR101160385B1 (ko) * | 2007-01-18 | 2012-07-10 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | 페길화된 Aβ FAB |
US20100311767A1 (en) | 2007-02-27 | 2010-12-09 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Method for the treatment of amyloidoses |
US8003097B2 (en) * | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
KR20100016661A (ko) * | 2007-04-18 | 2010-02-12 | 얀센 알츠하이머 이뮤노테라피 | 대뇌 아밀로이드 혈관병증의 예방 및 치료 |
CN101820911B (zh) * | 2007-06-12 | 2015-05-06 | Ac免疫有限公司 | β淀粉样蛋白的人源化抗体 |
US8048420B2 (en) | 2007-06-12 | 2011-11-01 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
US8613923B2 (en) | 2007-06-12 | 2013-12-24 | Ac Immune S.A. | Monoclonal antibody |
US9006283B2 (en) * | 2007-07-12 | 2015-04-14 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying amyloid β oligomers using non-peptidic compounds |
MX2010000368A (es) | 2007-07-12 | 2010-07-02 | Acumen Pharmaceuticals Inc | Metodos para modificar los oligomeros beta-amiloides usando compuestos no peptidicos. |
US8962677B2 (en) * | 2007-07-12 | 2015-02-24 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Methods of restoring cognitive ability using non-peptidic compounds |
US20110098309A1 (en) * | 2007-07-12 | 2011-04-28 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Methods of inhibiting the formation of amyloid-beta diffusable ligands using acylhydrazide compounds |
EP2182983B1 (en) | 2007-07-27 | 2014-05-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases with humanised anti-abeta antibodies |
US8932558B2 (en) * | 2007-10-05 | 2015-01-13 | Plaxgen Inc | Multi-subunit biological complexes for treatment of plaque-associated diseases |
SG178809A1 (en) * | 2007-10-05 | 2012-03-29 | Genentech Inc | Use of anti-amyloid beta antibody in ocular diseases |
WO2009048539A2 (en) * | 2007-10-05 | 2009-04-16 | Genentech, Inc. | Monoclonal antibody |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
AU2008312802A1 (en) * | 2007-10-19 | 2009-04-23 | Immunas Pharma, Inc. | Antibody capable of specifically binding to abeta oligomer, and use thereof |
US20100291071A1 (en) * | 2008-08-01 | 2010-11-18 | Immunas Pharma, Inc. | Antibody Specific Binding to A-Beta Oligomer and the Use |
US8993714B2 (en) * | 2007-10-26 | 2015-03-31 | Imiplex Llc | Streptavidin macromolecular adaptor and complexes thereof |
CA2707309A1 (en) * | 2007-12-18 | 2009-06-25 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Novel addl receptor polypeptides, polynucleotides and host cells for recombinant production |
AU2009211635B2 (en) | 2008-02-08 | 2014-06-26 | Immunas Pharma, Inc. | Antibody capable of binding specifically to Abeta-oligomer, and use thereof |
US9085614B2 (en) | 2008-08-01 | 2015-07-21 | Immunas Pharma, Inc. | Antibodies that specifically bind to Aβ oligomers and uses thereof |
US9102526B2 (en) | 2008-08-12 | 2015-08-11 | Imiplex Llc | Node polypeptides for nanostructure assembly |
US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
DK2419447T3 (en) | 2009-04-17 | 2017-09-25 | Immunas Pharma Inc | ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BIND TO A BETA OLIGOMER AND USE THEREOF |
WO2010132363A1 (en) | 2009-05-11 | 2010-11-18 | Imiplex Llc | Method of protein nanostructure fabrication |
ES2624835T3 (es) | 2009-08-06 | 2017-07-17 | Immunas Pharma, Inc. | Anticuerpos que se unen específicamente a los oligómeros A beta y uso de los mismos |
ES2614949T3 (es) | 2009-08-06 | 2017-06-02 | Immunas Pharma, Inc. | Anticuerpos que se unen específicamente a oligómeros beta A y uso de los mismos |
ES2661601T3 (es) | 2009-08-07 | 2018-04-02 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Anticuerpo humanizado antioligómero de amiloide-beta |
WO2011016568A1 (ja) | 2009-08-07 | 2011-02-10 | 協和発酵キリン株式会社 | 抗アミロイドβオリゴマーヒト化抗体 |
EP2368558A1 (en) | 2010-03-23 | 2011-09-28 | Mdc Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin Berlin - Buch | Azo compounds reducing formation and toxicity of amyloid beta aggregation intermediates |
JP2013523182A (ja) | 2010-04-15 | 2013-06-17 | アボット・ラボラトリーズ | アミロイドベータ結合タンパク質 |
CA2805414C (en) | 2010-07-14 | 2020-07-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Anti-addl monoclonal antibody and uses thereof |
US9176151B2 (en) | 2010-07-14 | 2015-11-03 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies, kit and method for detecting amyloid beta oligomers |
RU2607368C2 (ru) | 2010-07-30 | 2017-01-10 | Ац Иммуне С.А. | Безопасные и функциональные гуманизированные антитела |
EP2603524A1 (en) | 2010-08-14 | 2013-06-19 | AbbVie Inc. | Amyloid-beta binding proteins |
WO2013009703A2 (en) | 2011-07-13 | 2013-01-17 | Acumen Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies, kit and method for detecting amyloid beta oligomers |
WO2013164763A2 (en) | 2012-04-30 | 2013-11-07 | Innovative Health Diagnostics | A biological complex specific for alzheimer's disease detection in vitro and use thereof |
US9796672B2 (en) | 2014-01-31 | 2017-10-24 | Cognition Therapeutics, Inc. | Isoindoline compositions and methods for treating neurodegenerative disease |
SI3166970T1 (sl) | 2014-07-10 | 2021-09-30 | Bioarctic Ab | Izboljšana A-beta protofibril vezavna protitelesa |
WO2024071361A1 (ja) * | 2022-09-27 | 2024-04-04 | 株式会社カネカ | 凝集性タンパク質に対する凝集抑制活性又は凝集促進活性を評価する方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1298436B1 (en) | 1992-10-26 | 2010-07-14 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Methods for the identification of Beta-amyloid peptide (BAP) release inhibitor compounds |
US6218506B1 (en) | 1997-02-05 | 2001-04-17 | Northwestern University | Amyloid β protein (globular assembly and uses thereof) |
-
1997
- 1997-02-05 US US08/796,089 patent/US6218506B1/en not_active Expired - Lifetime
-
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-
2003
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-
2005
- 2005-05-16 US US11/130,566 patent/US7638283B2/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008531635A (ja) * | 2005-03-05 | 2008-08-14 | アボット ゲーエムベーハー ウント カンパニー カーゲー | スクリーニング方法、非拡散性aベータオリゴマーの精製方法、前記非拡散性aベータオリゴマーに対する選択的抗体および前記抗体の製造方法 |
Also Published As
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