JP2004026802A - 人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法 - Google Patents
人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2004026802A JP2004026802A JP2003081417A JP2003081417A JP2004026802A JP 2004026802 A JP2004026802 A JP 2004026802A JP 2003081417 A JP2003081417 A JP 2003081417A JP 2003081417 A JP2003081417 A JP 2003081417A JP 2004026802 A JP2004026802 A JP 2004026802A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- tumor
- human
- animal body
- drug
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 74
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 24
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims abstract 4
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims abstract 4
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 claims abstract 4
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims abstract 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 claims description 19
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 16
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 13
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 13
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 claims description 13
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 7
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 4
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 claims description 2
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 claims description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 135
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 19
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 9
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 8
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 5
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 5
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 210000003771 C cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-BJUDXGSMSA-N Chromium-51 Chemical compound [51Cr] VYZAMTAEIAYCRO-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 201000009365 Thymic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012966 insertion method Methods 0.000 description 1
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000031942 natural killer cell mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000008732 thymoma Diseases 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5152—Tumor cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55533—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
【課題】人体あるいは動物を治療するための細胞組成物。
【解決手段】人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）を製造する方法であって、前記方法は、細胞が一つあるいは複数の生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）を体内で分泌可能にする遺伝子を発現する細胞を含む組成物を準備するステップを含み、前記生物学的活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれ、前記細胞は、治療される生体に対して少なくとも部分的に同種異系（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）あるいは異種（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）であり薬学的に許容できるキャリアと協働する。
【選択図】 図１
【解決手段】人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）を製造する方法であって、前記方法は、細胞が一つあるいは複数の生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）を体内で分泌可能にする遺伝子を発現する細胞を含む組成物を準備するステップを含み、前記生物学的活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれ、前記細胞は、治療される生体に対して少なくとも部分的に同種異系（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）あるいは異種（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）であり薬学的に許容できるキャリアと協働する。
【選択図】 図１
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は人体あるいは動物を治療するための細胞組成物を対象とするものである。
【０００２】
【従来の技術】
最近、腫瘍にかかった器官へのインターロイキンを分泌する遺伝子組成が同一の腫瘍細胞の局所注射がその有機体によるこれらの腫瘍の拒絶を引き起こすことが、いろいろな科学チームによって確認された。
このことはブベニック等によってインターロイキン−２に関して実証され（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔｅｒｓ， １９ ２７９−２８２ （１９８８）、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，２３ ２８７−２９２ （１９８９））、特にフェアロン等（Ｃｅｌｌ．，６５ ３９７−４０３ （１９９０））およびレイ等（Ｅｕｒ．Ｊ．ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ２１ ８５１−８５４（１９９１）、Ｒｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４１ ８５５−８６５ （１９９０））によって確認された。
【０００３】
これらの論文の著者等は拒絶には記憶化が伴っていると述べている。したがって、動物の場合、ワクチンを接種されると、同じタイプの腫瘍が別の場所に組織移植されても、その腫瘍が成長しないようになる。
【０００４】
ゴルムベック（サイエンス誌、２５４ ７１３−７１８（１９９１））およびテッパー等（細胞．，５７ ５０３−５１２ （１９８９））が報告しているように、インターロイキン−４をつくりだす遺伝子組成が同一の細胞のテストでも同一の結果が得られており、さらに、ブランケンシュテイン等（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７３ １０４７−１９５２ （１９９１））が述べているような腫瘍壊死要素を分泌する細胞においても同様である。
【０００５】
【特許文献１】
フランス特許Ｎｏ．８０．０９．０４１号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、これらの刊行物に述べられている方式はヒトの治療に適用された場合、欠陥を持っている。
【０００７】
これらの出版物のすべてにおいて、実際、インターロイキンを分泌する細胞はインターロイキンを表現するように修正された、当該者あるいは遺伝子組成が同一の人の細胞である。
【０００８】
ヒトの治療において、この方法の主要な欠陥は、インターロイキンを分泌し、有機体に注入される細胞が、その腫瘍が拒絶された後でも成長を続ける傾向を持っているという事実に起因するものである。
【０００９】
従来の技術に基づく方法の二番目の欠陥は、多くの場合ウィルスそして特にレトロウィルス・ベクターの使用に基づくところの、インターロイキンをコード表現するＤＮＡ挿入方法に関係している。
【００１０】
これらの方法はＤＮＡ伝達において高い有効性を示すが、ウィルスおよび特にレトロウィルスの使用はヒトの治療との関連において重大な欠陥をもたらす場合がある。
【００１１】
また、これらの方法は長い時間をかけてトランスフェクタントを厳密に選択することを必要とする場合が往々にしてあり、したがって、特にヒトの治療に本格的に用いるのは困難である。
【００１２】
本出願人の知る限り、上に述べたような理由から、先行技術においては、利用が簡単で、ヒトの健康の必要条件を満たし、インターロイキンを合成する細胞によって腫瘍、あるいは癌の治療に役立つ信頼できる技術は存在していない。
【００１３】
主要な問題は治療された有機体において注入されたインターロイキンをコード表現する細胞や、ベクターとして用いられたウィルスから誘導されたウィルスが生き残り、あるいは成長する可能性があることと関連している。
【００１４】
したがって、出願者達は上に述べたような欠陥を示さずに、生物活性物質によって一時的にヒトあるいはヒトの有機体の治療に役立つ組成物の使用に関心を持っている。
【００１５】
彼らは遺伝子組成が同一でない細胞系、特に該器官を治療するために生物活性物質を分泌する同種異系細胞を用いることができることを非常に明確に実証した。したがって、彼らは特に、遺伝子組成が同一でない細胞を用いることによって該有機体でインターロイキンを一時的に分泌させることが可能であることを実証したのである。
【００１６】
したがって、本発明はヒトあるいは動物の諸有機体を治療を目的とし、それらがイン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造する方法の提供を目的とする。
【００１７】
これらの生物活性物質は、特に腫瘍や癌にかかった有機体を一時的に治療するために用いることができ、その場合、該物質がインターロイキンであってもよい。これらの細胞は、したがって、腫瘍や癌が消失した後、あるいは退行期間中に除去されるように選択される。
【００１８】
これらの物質は、たとえば、フランス特許Ｎｏ．８０．０９．０４１に述べられている抗体ＨｂＳなどの体液性または細胞タイプの免疫反応を誘発できる分子、ＨＩＶウイルスやウィルスまたは細菌由来の他のいずれかの抗原のエンベロープからのグリコプロテインの断片、あるいは、たとえば腫瘍固有抗原など、病理学的、あるいは自己免疫性疾患との関連で正常な抗原、または変異原、さらには抗体や抗体の誘導体であってもよい。ワクチン化あるいは免疫療法の分野での利用に加えて、これらの細胞はホルモン、成長要素まるいはそれらの断片など、他の活性物質を一時的に提供するのにも役立つ。
【００１９】
細胞は治療された有機体がそれらの除去を可能にする免疫システムを有するように選択される。したがって、これらの細胞は完全に遺伝子組成が同一なのではなく、少なくとも部分的には同種異系である。「細胞が少なくとも同種異系である」という意味は、少なくともひとつのＨＬＡ決定子によってその受容体宿主有機体から区別される細胞を意味している。
【００２０】
これらの細胞は異種であってもよいが、このタイプの細胞はより短期間のうちに拒絶され、分泌する物質が少ないという欠陥を示す場合がある。
【００２１】
しかし、ヒト細胞、たとえば、クラスＩまたはクラスＩＩ ＨＬＡ抗原の抗原特性を表現させる、そして、それらに宿主の特徴的な免疫応答に対して一時的に刺激を与えるようにするために同一遺伝子組成特性を付与するように同種異系または異種細胞を修正することも可能である。
【００２２】
特に適した細胞系はサルの一種からのＶＥＲＯ株である。実際、これらの細胞はいくつかのチームによってデザインされ使用されたという利点を有している（特に、『ＶＥＲＯ細胞、起源、性質および生物医学的応用』清水文七および寺島豐三 千葉大学医学部微生物学科刊 参照）。したがって、それらの細胞の遺伝的特質はかなりよく知られており、内因性ウィルスあるいはレトロウィルスによる感染の危険を減らすことが可能である。このことはヒトの治療において特に有利である。
【００２３】
本発明による組成を有する細胞も薬剤に対して影響を受けやすく、そうした薬剤を有機体に導入することによって、簡単に除去できる。こうした薬剤のひとつはガンチクロヴィルで、ヘルペス・ウィルスのチミジン・キナーゼ遺伝子を持っている細胞はこの薬剤の影響を受ける。
【００２４】
こうした免疫修飾物質としては特にＩＬ−２、ＩＬ−４、ＴＮＦ（腫瘍壊死因子）、ガンマ・インターフェロン、および／またはＧＭ−ＣＳＦ（粒状単球コロニー刺激因子）などがある。
【００２５】
これらの細胞はこれらの物質を単独、あるいは組み合わされた形で分泌する。これらの物質は好ましくは相乗作用的な量でつくりだされる。都合の良いことにこうした組成物はＩＬ−２およびＩＬ−４を相乗効果的な量で分泌する。
【００２６】
さらに、この組成を有する細胞は識別しやすい色素マーカーを持つことができる。このマーカーは、例えば、ルシフェラーゼあるいはβ−ガラクトシダーゼをコード表現する遺伝子などである。
【００２７】
治療される有機体内で生物活性物質、特に免疫修飾物質を表現する一過性的特質を強化するために、細胞にこれらの物質を分泌させる遺伝子をトランスフェクション、そして特に後で安定したトランスフェクタントを選別することをしないトランスフェクションによって細胞内に導入することができる。ＤＮＡによりトランスフェクトされ、そのＤＮＡが融合されていない細胞で主に構成された細胞のプールが得られる。この方法で、遺伝子、特にインターロイキンをコード表現する遺伝子が表現されるが、それらの対応ＤＮＡは分裂サイクル中に急速に除去されてしまう。これは治療される有機体内でそれらの物質を表現する一過性的特質を強化するのに役立つ。
【００２８】
トランスフェクションではｎｕ ＤＮＡを細胞に導入される。との技術自体は公知であり、特にマニアティス等（『分子クローニング、実験室マニュアル』コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー、１９８２）の技術マニュアルに述べられている。
【００２９】
リン酸カルシウムによる沈降、電気泳動（ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ ）、および場合によっては市販されている製剤（ベテスダ・リサーチ・ラボラトリーズ、ライフ・テクノロジーズ社）などのリポゾーム製剤を利用することができる。
【００３０】
免疫修飾物質を保持している遺伝子は、特に細胞ＤＮＡからのクローニング、あるいは合成によって得ることができる。特にＩＬ−２およびＩＬ−４の場合、烏山等（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１８９７（１９８８））で述べられているＤＮＡ製剤を用いることができる。
【００３１】
さらに、本発明による方法によって製造される組成物において用いられる細胞は、それらの細胞に、治療される腫瘍あるいは癌の特殊な抗原を分泌させて、これらの抗原に対する有機体の反応を強化させる遺伝子を有することができる。
【００３２】
さらに、化学的に合成された抗原をインターロイキンを分泌する細胞に付加することによって、大量の腫瘍抗原を導入することができる。
【００３３】
本発明による方法によって製造される組成物はそれぞれひとつの免疫修飾物質を表現する複数の細胞タイプで構成され、あるいはひとつまたは複数の免疫修飾物質を分泌する単一の細胞タイプで構成される。本発明はまた、活性を有する物質を少なくとも部分的に同種異系、あるいは異種である操作細胞系により有用に、イン・ビボで一時的に提供することができるような治療とも関連している。
【００３４】
使いやすくするために、単一のインターロイキンだけを表現する細胞系を調製するのも興味深い。しかしながら、同じ細胞がインターロイキンの組み合わせを分泌するのも有利であろう。
【００３５】
さらに、本発明は特に細胞の使用に関連しており、したがって、腫瘍や癌によって感染されたヒトあるいは動物有機体を治療するための薬品、あるいはそうした細胞を含んでいる製品やワクチンの製造のためのものである。
【００３６】
さらに、これらの組成物は好ましくは局所注射の形態で用いられるが、全身的に投与することもできる。注射による投与を反復することもできるが、免疫システムによって拒絶が加速されるので、その有効性は注射回数が増える度に低下する。
【００３７】
これらの細胞によってつくりだされるインターロイキンの量は腫瘍のタイプによって調製することが必要である。例えば、４０００国際単位程度のＩＬ−２／ｍｌ・１０６細胞の表現は以下のケースで有効である。
【００３８】
しかしながら、ゆっくり成長する腫瘍に対しては、より少ない投与量でも効果を発揮する。
【００３９】
本発明による方法によって製造される組成物は好ましくは固形腫瘍の治療に用いられるが、他のタイプの腫瘍や癌の治療においても用いることができる。
【００４０】
【課題を解決するための手段】
そこで、この発明は、上述不都合を除去するために、人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）を製造する方法であって、前記方法は、細胞が一つあるいは複数の生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）を体内で分泌可能にする遺伝子を発現する細胞を含む組成物を準備するステップを含み、前記生物学的活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれ、前記細胞は、治療される生体に対して少なくとも部分的に同種異系（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）あるいは異種（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）であり薬学的に許容できるキャリアと協働する、ことを特徴とする。
【００４１】
【発明の実施の形態】
上述の如く発明したことにより、イン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造する。
【００４２】
【実施例】
以下に使用例を挙げて本発明を説明するが、本発明の範囲はこれらの使用例に限定されるものではない。
【００４３】
例１
ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の使用
ＩＬ−２およびいわゆるＩＬＩ（ＩＬ−２）を表現するＨ−２Ｋハプロタイプの形質変換されたＬ細胞を分離した。
【００４４】
マウスのＬＭＩ細胞系はＩＣＡＭ−１付着分子を表現し、フランス特許Ｎｏ．８０．９０．０４１に述べられているＬ細胞から誘導される。
【００４５】
ＩＬＩはクリスチャン・ジャウリンが述べている（『クラス１組織適合性抗原の組織および機能に関する分析』、パリ大学博士論文、１９９１）。
【００４６】
Ｈ−２ｄハプロタイプのＤＢＡ／２マウスは５・１０５Ｐ８１５細胞と１０６あるいは５・１０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞の混合物と共に注射される。
【００４７】
図１−５は得られた結果を示す。
【００４８】
これらの図は、ＩＬ−２を表現する同種異系ＬＭＩ細胞はＩＬ−２を表現しないＩＬＩ細胞より、共接種されたＰ８１５の成長に対するより高い防御性を発揮することを示している。
【００４９】
図１−５の操作条件は以下の通りである。
＊ 図１、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６Ｌ細胞
＊ 図２、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６Ｌ細胞
＊ 図３、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ ５・１０６Ｌ細胞
＊ 図４、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞
＊ 図５、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ ５・１０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞
【００５０】
図４に対応する五匹のマウスのうち、二匹は完全に防御され、一匹は非常に遅い時期に腫瘍を形成し、残りの二匹は早い時期に腫瘍を形成した。
【００５１】
図５の操作条件において、一匹のマウスは短期間に腫瘍を形成したが、残りの四匹は完全に保護された。
【００５２】
図１−５において、ｘ軸は注射後の日数を示し、ｙ軸はｃｍ３あたりの腫瘍の量を示している。
【００５３】
例２
ルイス腫瘍に対するインターロイキン分泌細胞の効果
いろいろな量のＰ８１５（ＩＬ−２）あるいはＰ８１５（ＩＬ−４）と混合した移植したばかりのルイス腫瘍（Ｈ−２ｂハプロタイプ）の分離細胞５・１０５個をＣ５７Ｂ１／６マウス（Ｈ−２ｂハプロタイプ）に注射した。
Ｐ８１５細胞はＨ−２ｂハプロタイプである。
【００５４】
図６−１４は以下の条件で得られたものである。
＊ 図６、５・１０５ルイス細胞
＊ 図７、５・１０５ルイス細胞 ＋ ５・１０５Ｐ８１５細胞
＊ 図８、５・１０５ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５細胞
＊ 図９、５・１０６ ルイス細胞 ＋ ２・１０６ Ｐ８１５細胞
＊ 図１０、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ５・１０５ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１１、５・１０５ ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１２、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ２・１０６ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１３、５・１０５ ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞
＊ 図１４、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ５・１０５ （ＩＬ−２）細胞 ＋５・１０５ Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞
【００５５】
これらの図において、ｘ軸は治療後の日数を示し、ｙ軸はｍｍ３ あたりに表現される腫瘍の量を示している。
【００５６】
これらの結果はＰ８１５（ＩＬ−２）が高い、そして再現可能な防御性を与えるのに対して、トランスフェクトされないＰ８１５細胞はこの種の防御性を付与しないこと裏づけている。
【００５７】
Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞（図２Ｈ）も防御性を付与するが、Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞が付与するものよりは低い。
【００５８】
しかしながら、Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞とＰ８１５（ＩＬ−４）細胞（図２Ｉ）との間に相乗作用は認められないず、むしろ、対立的効果が認められる。
【００５９】
例３
インターロイキン−２を分泌する腫瘍細胞により誘発されるＣ５７Ｂ１／６内でのルイス腫瘍の拒絶
ラット（ｒＭＴＣ）の胸腺髄質癌はカルチトニンを分泌する胸腺内Ｃ細胞から誘発される自発性組織異常増殖である。これらの細胞（ｒＭＴＣ６．２３）から得られる特殊な細胞系についてはすでに説明が与えられている（ゼイティノウル等、内分泌学、１０７ ５０９ （１９８０））。
【００６０】
大量のインターロイキン−２（２４時間あたり５０００ＵＩ／ｍｌ・１０６ 細胞）を分泌するこの細胞株の異種宿主における抗腫瘍免疫防御を誘発させる能力についてのテストが行われている。Ｃ５７Ｂ１／６マウスに対して２．５／１０５ ルイス腫瘍細胞のみ、あるいはこれらの細胞と１０６ ｒＭＴＣ（ＩＬ−２）ラット細胞との組み合わせで接種が行われた。
【００６１】
インターロイキン−２を分泌する異種細胞は図３に示されているように、かなりの防御性を誘発する。
【００６２】
図１５は六匹のＣ５７Ｂ１／６マウスに対して２．５・１０６ ルイス腫瘍細胞のみを皮下接種した場合の結果を示している。
【００６３】
図１６および３Ｃはそれぞれ２．５・１０５ ルイス細胞の１０６ 非トランスフェクトｒＭＴＣ細胞との組み合わせ（図１６）、あるいはインターロイキンでトランスフェクトされたｒＭＴＣ細胞１０６ 個との組み合わせ（図１７）を示している。
【００６４】
注射後６日目の時点で腫瘍を発生していないすべての個体は６０日後にも腫瘍を形成しなかった。
【００６５】
しかしながら、かなりの防御性が示されたにもかかわらず、同じ条件で同系異種細胞より四倍も多くの、インターロイキン−２を分泌する異種細胞を加える必要がある。
【００６６】
例４
腫瘍拒絶に対するＮＫ−１．１細胞存在の影響
ルイス腫瘍細胞および同系異種Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞を同時に接種したＣ５７Ｂ１／６マウスでの腫瘍の拒絶に関するナチュラル・キラー細胞のイン・ビボでの選択的除去の影響についてのテストが行われた。
【００６７】
これらの抗体によるイン・ビボでの除去は、腫瘍細胞を注射してから一日後から始めて三日間に精製ＮＫ固有モノクローナル抗体１００μｇを腹腔内注射することによって行われた。
【００６８】
ＮＫ細胞除去の効果はクー等（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３７ ３７４２ （１９８６））が述べているような方法で、ＹＡＣＩ標的細胞（キースリング等、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，５ １１２ （１９７５））を用いるクロミウム５１選別テストによって評価が行われた。
【００６９】
内因性およびＹＡＣＩ細胞系によって誘発された、治療された動物の脾臓内でのナチュラル・キラー活性に対して、この治療が効果的であることが確認された。
【００７０】
テスト結果を表１に示す。
【００７１】
治療を受けない動物と比較して、抗ＮＫ抗体を注射したマウスにおいては、腫瘍がより急速に成長した。さらに、腫瘍防御の評価結果は、抗体治療によってＮＫ−１．１細胞が除去されたマウスはルイス細胞の腫瘍成長を抑制できないことを示している（表１）。
それにもかかわらず、これら治療された動物へのリンフォカインを分泌する同系異種細胞の接種が腫瘍の出現の時期を遅らせたこと、そしてそれら腫瘍の平均的量の減少をもたらしたことに留意しなければならない。
【００７２】
例５
以前同じタイプの腫瘍細胞を拒絶したマウスによるルイス腫瘍細胞拒絶の研究Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞と共に接種されたルイス腫瘍細胞の拒絶に関する実験がすでに行われた三つのグループのＣ５７Ｂ１／６マウスについてのテストがルイス腫瘍細胞（５／１０５ 個）を使って最初に拒絶した時期から六週間後に行われた。
【００７３】
これらのマウスはいずれも注射後生きのびることはできなかった。しかしながら、腫瘍の成長は、前にルイス腫瘍細胞およびＰ８１５（ＩＬ−２）細胞で治療を受けなかったコントロール用動物の場合と比較して、やや遅れたことが観察された。
【００７４】
結論として、これらの結果全体は以下のことを示している。
＊ インターロイキン遺伝子を表現する細胞による治療は、従来述べられているように化学的に誘発された腫瘍に対してばかりでなく、自然発生の腫瘍に対しても適用可能であること。
＊ 同系異種細胞の利用が可能であり、腫瘍の拒絶を可能にすること、
＊ 生物学的活性を有する物質を一過性的に表現させることは可能であること、
＊ 同系異種細胞、あるいは部分的な同系異種細胞を、腫瘍あるいは細胞性タイプの免疫反応を誘発することができる宿主への伝播体として用いることが可能であること。
＊ 同系異種細胞によって表現されたＩＩＬ−２による防御においてナチュラル・キラー細胞が関与していること。
【００７５】
【表１】
【００７６】
【発明の効果】
以上詳細に説明した如くこの本発明によれば、イン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】同種異系細胞が不在の場合の腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図２】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図３】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図４】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図５】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図６】インターロイキンを分泌する細胞の移植されたばかりのルイス腫瘍の拒絶に対する影響を示し、いずれの同種異系細胞の注射されないコントロールを示す図である。
【図７】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図８】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図９】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図１０】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１１】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１２】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１３】それぞれ合成ＩＬ−４およびＩＬ−２とＩＬ−４を合成する細胞の組み合わせを注射した場合を示す図である。
【図１４】それぞれ合成ＩＬ−４およびＩＬ−２とＩＬ−４を合成する細胞の組み合わせを注射した場合を示す図である。
【図１５】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、それぞれルイス腫瘍細胞だけを接種した場合を示す図である。
【図１６】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、非感染ｒＭＴＣの存在下でルイス腫瘍を接種した場合を示す図である。
【図１７】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、ＩＬ−２をトランスフェクトしたｒＭＴＣを接種した場合を示す図である。
【発明の属する技術分野】
本発明は人体あるいは動物を治療するための細胞組成物を対象とするものである。
【０００２】
【従来の技術】
最近、腫瘍にかかった器官へのインターロイキンを分泌する遺伝子組成が同一の腫瘍細胞の局所注射がその有機体によるこれらの腫瘍の拒絶を引き起こすことが、いろいろな科学チームによって確認された。
このことはブベニック等によってインターロイキン−２に関して実証され（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔｅｒｓ， １９ ２７９−２８２ （１９８８）、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔｅｒｓ，２３ ２８７−２９２ （１９８９））、特にフェアロン等（Ｃｅｌｌ．，６５ ３９７−４０３ （１９９０））およびレイ等（Ｅｕｒ．Ｊ．ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．， ２１ ８５１−８５４（１９９１）、Ｒｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４１ ８５５−８６５ （１９９０））によって確認された。
【０００３】
これらの論文の著者等は拒絶には記憶化が伴っていると述べている。したがって、動物の場合、ワクチンを接種されると、同じタイプの腫瘍が別の場所に組織移植されても、その腫瘍が成長しないようになる。
【０００４】
ゴルムベック（サイエンス誌、２５４ ７１３−７１８（１９９１））およびテッパー等（細胞．，５７ ５０３−５１２ （１９８９））が報告しているように、インターロイキン−４をつくりだす遺伝子組成が同一の細胞のテストでも同一の結果が得られており、さらに、ブランケンシュテイン等（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７３ １０４７−１９５２ （１９９１））が述べているような腫瘍壊死要素を分泌する細胞においても同様である。
【０００５】
【特許文献１】
フランス特許Ｎｏ．８０．０９．０４１号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、これらの刊行物に述べられている方式はヒトの治療に適用された場合、欠陥を持っている。
【０００７】
これらの出版物のすべてにおいて、実際、インターロイキンを分泌する細胞はインターロイキンを表現するように修正された、当該者あるいは遺伝子組成が同一の人の細胞である。
【０００８】
ヒトの治療において、この方法の主要な欠陥は、インターロイキンを分泌し、有機体に注入される細胞が、その腫瘍が拒絶された後でも成長を続ける傾向を持っているという事実に起因するものである。
【０００９】
従来の技術に基づく方法の二番目の欠陥は、多くの場合ウィルスそして特にレトロウィルス・ベクターの使用に基づくところの、インターロイキンをコード表現するＤＮＡ挿入方法に関係している。
【００１０】
これらの方法はＤＮＡ伝達において高い有効性を示すが、ウィルスおよび特にレトロウィルスの使用はヒトの治療との関連において重大な欠陥をもたらす場合がある。
【００１１】
また、これらの方法は長い時間をかけてトランスフェクタントを厳密に選択することを必要とする場合が往々にしてあり、したがって、特にヒトの治療に本格的に用いるのは困難である。
【００１２】
本出願人の知る限り、上に述べたような理由から、先行技術においては、利用が簡単で、ヒトの健康の必要条件を満たし、インターロイキンを合成する細胞によって腫瘍、あるいは癌の治療に役立つ信頼できる技術は存在していない。
【００１３】
主要な問題は治療された有機体において注入されたインターロイキンをコード表現する細胞や、ベクターとして用いられたウィルスから誘導されたウィルスが生き残り、あるいは成長する可能性があることと関連している。
【００１４】
したがって、出願者達は上に述べたような欠陥を示さずに、生物活性物質によって一時的にヒトあるいはヒトの有機体の治療に役立つ組成物の使用に関心を持っている。
【００１５】
彼らは遺伝子組成が同一でない細胞系、特に該器官を治療するために生物活性物質を分泌する同種異系細胞を用いることができることを非常に明確に実証した。したがって、彼らは特に、遺伝子組成が同一でない細胞を用いることによって該有機体でインターロイキンを一時的に分泌させることが可能であることを実証したのである。
【００１６】
したがって、本発明はヒトあるいは動物の諸有機体を治療を目的とし、それらがイン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造する方法の提供を目的とする。
【００１７】
これらの生物活性物質は、特に腫瘍や癌にかかった有機体を一時的に治療するために用いることができ、その場合、該物質がインターロイキンであってもよい。これらの細胞は、したがって、腫瘍や癌が消失した後、あるいは退行期間中に除去されるように選択される。
【００１８】
これらの物質は、たとえば、フランス特許Ｎｏ．８０．０９．０４１に述べられている抗体ＨｂＳなどの体液性または細胞タイプの免疫反応を誘発できる分子、ＨＩＶウイルスやウィルスまたは細菌由来の他のいずれかの抗原のエンベロープからのグリコプロテインの断片、あるいは、たとえば腫瘍固有抗原など、病理学的、あるいは自己免疫性疾患との関連で正常な抗原、または変異原、さらには抗体や抗体の誘導体であってもよい。ワクチン化あるいは免疫療法の分野での利用に加えて、これらの細胞はホルモン、成長要素まるいはそれらの断片など、他の活性物質を一時的に提供するのにも役立つ。
【００１９】
細胞は治療された有機体がそれらの除去を可能にする免疫システムを有するように選択される。したがって、これらの細胞は完全に遺伝子組成が同一なのではなく、少なくとも部分的には同種異系である。「細胞が少なくとも同種異系である」という意味は、少なくともひとつのＨＬＡ決定子によってその受容体宿主有機体から区別される細胞を意味している。
【００２０】
これらの細胞は異種であってもよいが、このタイプの細胞はより短期間のうちに拒絶され、分泌する物質が少ないという欠陥を示す場合がある。
【００２１】
しかし、ヒト細胞、たとえば、クラスＩまたはクラスＩＩ ＨＬＡ抗原の抗原特性を表現させる、そして、それらに宿主の特徴的な免疫応答に対して一時的に刺激を与えるようにするために同一遺伝子組成特性を付与するように同種異系または異種細胞を修正することも可能である。
【００２２】
特に適した細胞系はサルの一種からのＶＥＲＯ株である。実際、これらの細胞はいくつかのチームによってデザインされ使用されたという利点を有している（特に、『ＶＥＲＯ細胞、起源、性質および生物医学的応用』清水文七および寺島豐三 千葉大学医学部微生物学科刊 参照）。したがって、それらの細胞の遺伝的特質はかなりよく知られており、内因性ウィルスあるいはレトロウィルスによる感染の危険を減らすことが可能である。このことはヒトの治療において特に有利である。
【００２３】
本発明による組成を有する細胞も薬剤に対して影響を受けやすく、そうした薬剤を有機体に導入することによって、簡単に除去できる。こうした薬剤のひとつはガンチクロヴィルで、ヘルペス・ウィルスのチミジン・キナーゼ遺伝子を持っている細胞はこの薬剤の影響を受ける。
【００２４】
こうした免疫修飾物質としては特にＩＬ−２、ＩＬ−４、ＴＮＦ（腫瘍壊死因子）、ガンマ・インターフェロン、および／またはＧＭ−ＣＳＦ（粒状単球コロニー刺激因子）などがある。
【００２５】
これらの細胞はこれらの物質を単独、あるいは組み合わされた形で分泌する。これらの物質は好ましくは相乗作用的な量でつくりだされる。都合の良いことにこうした組成物はＩＬ−２およびＩＬ−４を相乗効果的な量で分泌する。
【００２６】
さらに、この組成を有する細胞は識別しやすい色素マーカーを持つことができる。このマーカーは、例えば、ルシフェラーゼあるいはβ−ガラクトシダーゼをコード表現する遺伝子などである。
【００２７】
治療される有機体内で生物活性物質、特に免疫修飾物質を表現する一過性的特質を強化するために、細胞にこれらの物質を分泌させる遺伝子をトランスフェクション、そして特に後で安定したトランスフェクタントを選別することをしないトランスフェクションによって細胞内に導入することができる。ＤＮＡによりトランスフェクトされ、そのＤＮＡが融合されていない細胞で主に構成された細胞のプールが得られる。この方法で、遺伝子、特にインターロイキンをコード表現する遺伝子が表現されるが、それらの対応ＤＮＡは分裂サイクル中に急速に除去されてしまう。これは治療される有機体内でそれらの物質を表現する一過性的特質を強化するのに役立つ。
【００２８】
トランスフェクションではｎｕ ＤＮＡを細胞に導入される。との技術自体は公知であり、特にマニアティス等（『分子クローニング、実験室マニュアル』コールド・スプリング・ハーバー・ラボラトリー、１９８２）の技術マニュアルに述べられている。
【００２９】
リン酸カルシウムによる沈降、電気泳動（ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ ）、および場合によっては市販されている製剤（ベテスダ・リサーチ・ラボラトリーズ、ライフ・テクノロジーズ社）などのリポゾーム製剤を利用することができる。
【００３０】
免疫修飾物質を保持している遺伝子は、特に細胞ＤＮＡからのクローニング、あるいは合成によって得ることができる。特にＩＬ−２およびＩＬ−４の場合、烏山等（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１８９７（１９８８））で述べられているＤＮＡ製剤を用いることができる。
【００３１】
さらに、本発明による方法によって製造される組成物において用いられる細胞は、それらの細胞に、治療される腫瘍あるいは癌の特殊な抗原を分泌させて、これらの抗原に対する有機体の反応を強化させる遺伝子を有することができる。
【００３２】
さらに、化学的に合成された抗原をインターロイキンを分泌する細胞に付加することによって、大量の腫瘍抗原を導入することができる。
【００３３】
本発明による方法によって製造される組成物はそれぞれひとつの免疫修飾物質を表現する複数の細胞タイプで構成され、あるいはひとつまたは複数の免疫修飾物質を分泌する単一の細胞タイプで構成される。本発明はまた、活性を有する物質を少なくとも部分的に同種異系、あるいは異種である操作細胞系により有用に、イン・ビボで一時的に提供することができるような治療とも関連している。
【００３４】
使いやすくするために、単一のインターロイキンだけを表現する細胞系を調製するのも興味深い。しかしながら、同じ細胞がインターロイキンの組み合わせを分泌するのも有利であろう。
【００３５】
さらに、本発明は特に細胞の使用に関連しており、したがって、腫瘍や癌によって感染されたヒトあるいは動物有機体を治療するための薬品、あるいはそうした細胞を含んでいる製品やワクチンの製造のためのものである。
【００３６】
さらに、これらの組成物は好ましくは局所注射の形態で用いられるが、全身的に投与することもできる。注射による投与を反復することもできるが、免疫システムによって拒絶が加速されるので、その有効性は注射回数が増える度に低下する。
【００３７】
これらの細胞によってつくりだされるインターロイキンの量は腫瘍のタイプによって調製することが必要である。例えば、４０００国際単位程度のＩＬ−２／ｍｌ・１０６細胞の表現は以下のケースで有効である。
【００３８】
しかしながら、ゆっくり成長する腫瘍に対しては、より少ない投与量でも効果を発揮する。
【００３９】
本発明による方法によって製造される組成物は好ましくは固形腫瘍の治療に用いられるが、他のタイプの腫瘍や癌の治療においても用いることができる。
【００４０】
【課題を解決するための手段】
そこで、この発明は、上述不都合を除去するために、人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）を製造する方法であって、前記方法は、細胞が一つあるいは複数の生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）を体内で分泌可能にする遺伝子を発現する細胞を含む組成物を準備するステップを含み、前記生物学的活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれ、前記細胞は、治療される生体に対して少なくとも部分的に同種異系（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）あるいは異種（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）であり薬学的に許容できるキャリアと協働する、ことを特徴とする。
【００４１】
【発明の実施の形態】
上述の如く発明したことにより、イン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造する。
【００４２】
【実施例】
以下に使用例を挙げて本発明を説明するが、本発明の範囲はこれらの使用例に限定されるものではない。
【００４３】
例１
ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の使用
ＩＬ−２およびいわゆるＩＬＩ（ＩＬ−２）を表現するＨ−２Ｋハプロタイプの形質変換されたＬ細胞を分離した。
【００４４】
マウスのＬＭＩ細胞系はＩＣＡＭ−１付着分子を表現し、フランス特許Ｎｏ．８０．９０．０４１に述べられているＬ細胞から誘導される。
【００４５】
ＩＬＩはクリスチャン・ジャウリンが述べている（『クラス１組織適合性抗原の組織および機能に関する分析』、パリ大学博士論文、１９９１）。
【００４６】
Ｈ−２ｄハプロタイプのＤＢＡ／２マウスは５・１０５Ｐ８１５細胞と１０６あるいは５・１０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞の混合物と共に注射される。
【００４７】
図１−５は得られた結果を示す。
【００４８】
これらの図は、ＩＬ−２を表現する同種異系ＬＭＩ細胞はＩＬ−２を表現しないＩＬＩ細胞より、共接種されたＰ８１５の成長に対するより高い防御性を発揮することを示している。
【００４９】
図１−５の操作条件は以下の通りである。
＊ 図１、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６Ｌ細胞
＊ 図２、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６Ｌ細胞
＊ 図３、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ ５・１０６Ｌ細胞
＊ 図４、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ １０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞
＊ 図５、５・１０５Ｐ８１５細胞 ＋ ５・１０６ＬＭＩ（ＩＬ−２）細胞
【００５０】
図４に対応する五匹のマウスのうち、二匹は完全に防御され、一匹は非常に遅い時期に腫瘍を形成し、残りの二匹は早い時期に腫瘍を形成した。
【００５１】
図５の操作条件において、一匹のマウスは短期間に腫瘍を形成したが、残りの四匹は完全に保護された。
【００５２】
図１−５において、ｘ軸は注射後の日数を示し、ｙ軸はｃｍ３あたりの腫瘍の量を示している。
【００５３】
例２
ルイス腫瘍に対するインターロイキン分泌細胞の効果
いろいろな量のＰ８１５（ＩＬ−２）あるいはＰ８１５（ＩＬ−４）と混合した移植したばかりのルイス腫瘍（Ｈ−２ｂハプロタイプ）の分離細胞５・１０５個をＣ５７Ｂ１／６マウス（Ｈ−２ｂハプロタイプ）に注射した。
Ｐ８１５細胞はＨ−２ｂハプロタイプである。
【００５４】
図６−１４は以下の条件で得られたものである。
＊ 図６、５・１０５ルイス細胞
＊ 図７、５・１０５ルイス細胞 ＋ ５・１０５Ｐ８１５細胞
＊ 図８、５・１０５ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５細胞
＊ 図９、５・１０６ ルイス細胞 ＋ ２・１０６ Ｐ８１５細胞
＊ 図１０、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ５・１０５ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１１、５・１０５ ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１２、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ２・１０６ Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞
＊ 図１３、５・１０５ ルイス細胞 ＋ １０６ Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞
＊ 図１４、５・１０５ ルイス細胞 ＋ ５・１０５ （ＩＬ−２）細胞 ＋５・１０５ Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞
【００５５】
これらの図において、ｘ軸は治療後の日数を示し、ｙ軸はｍｍ３ あたりに表現される腫瘍の量を示している。
【００５６】
これらの結果はＰ８１５（ＩＬ−２）が高い、そして再現可能な防御性を与えるのに対して、トランスフェクトされないＰ８１５細胞はこの種の防御性を付与しないこと裏づけている。
【００５７】
Ｐ８１５（ＩＬ−４）細胞（図２Ｈ）も防御性を付与するが、Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞が付与するものよりは低い。
【００５８】
しかしながら、Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞とＰ８１５（ＩＬ−４）細胞（図２Ｉ）との間に相乗作用は認められないず、むしろ、対立的効果が認められる。
【００５９】
例３
インターロイキン−２を分泌する腫瘍細胞により誘発されるＣ５７Ｂ１／６内でのルイス腫瘍の拒絶
ラット（ｒＭＴＣ）の胸腺髄質癌はカルチトニンを分泌する胸腺内Ｃ細胞から誘発される自発性組織異常増殖である。これらの細胞（ｒＭＴＣ６．２３）から得られる特殊な細胞系についてはすでに説明が与えられている（ゼイティノウル等、内分泌学、１０７ ５０９ （１９８０））。
【００６０】
大量のインターロイキン−２（２４時間あたり５０００ＵＩ／ｍｌ・１０６ 細胞）を分泌するこの細胞株の異種宿主における抗腫瘍免疫防御を誘発させる能力についてのテストが行われている。Ｃ５７Ｂ１／６マウスに対して２．５／１０５ ルイス腫瘍細胞のみ、あるいはこれらの細胞と１０６ ｒＭＴＣ（ＩＬ−２）ラット細胞との組み合わせで接種が行われた。
【００６１】
インターロイキン−２を分泌する異種細胞は図３に示されているように、かなりの防御性を誘発する。
【００６２】
図１５は六匹のＣ５７Ｂ１／６マウスに対して２．５・１０６ ルイス腫瘍細胞のみを皮下接種した場合の結果を示している。
【００６３】
図１６および３Ｃはそれぞれ２．５・１０５ ルイス細胞の１０６ 非トランスフェクトｒＭＴＣ細胞との組み合わせ（図１６）、あるいはインターロイキンでトランスフェクトされたｒＭＴＣ細胞１０６ 個との組み合わせ（図１７）を示している。
【００６４】
注射後６日目の時点で腫瘍を発生していないすべての個体は６０日後にも腫瘍を形成しなかった。
【００６５】
しかしながら、かなりの防御性が示されたにもかかわらず、同じ条件で同系異種細胞より四倍も多くの、インターロイキン−２を分泌する異種細胞を加える必要がある。
【００６６】
例４
腫瘍拒絶に対するＮＫ−１．１細胞存在の影響
ルイス腫瘍細胞および同系異種Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞を同時に接種したＣ５７Ｂ１／６マウスでの腫瘍の拒絶に関するナチュラル・キラー細胞のイン・ビボでの選択的除去の影響についてのテストが行われた。
【００６７】
これらの抗体によるイン・ビボでの除去は、腫瘍細胞を注射してから一日後から始めて三日間に精製ＮＫ固有モノクローナル抗体１００μｇを腹腔内注射することによって行われた。
【００６８】
ＮＫ細胞除去の効果はクー等（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３７ ３７４２ （１９８６））が述べているような方法で、ＹＡＣＩ標的細胞（キースリング等、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，５ １１２ （１９７５））を用いるクロミウム５１選別テストによって評価が行われた。
【００６９】
内因性およびＹＡＣＩ細胞系によって誘発された、治療された動物の脾臓内でのナチュラル・キラー活性に対して、この治療が効果的であることが確認された。
【００７０】
テスト結果を表１に示す。
【００７１】
治療を受けない動物と比較して、抗ＮＫ抗体を注射したマウスにおいては、腫瘍がより急速に成長した。さらに、腫瘍防御の評価結果は、抗体治療によってＮＫ−１．１細胞が除去されたマウスはルイス細胞の腫瘍成長を抑制できないことを示している（表１）。
それにもかかわらず、これら治療された動物へのリンフォカインを分泌する同系異種細胞の接種が腫瘍の出現の時期を遅らせたこと、そしてそれら腫瘍の平均的量の減少をもたらしたことに留意しなければならない。
【００７２】
例５
以前同じタイプの腫瘍細胞を拒絶したマウスによるルイス腫瘍細胞拒絶の研究Ｐ８１５（ＩＬ−２）細胞と共に接種されたルイス腫瘍細胞の拒絶に関する実験がすでに行われた三つのグループのＣ５７Ｂ１／６マウスについてのテストがルイス腫瘍細胞（５／１０５ 個）を使って最初に拒絶した時期から六週間後に行われた。
【００７３】
これらのマウスはいずれも注射後生きのびることはできなかった。しかしながら、腫瘍の成長は、前にルイス腫瘍細胞およびＰ８１５（ＩＬ−２）細胞で治療を受けなかったコントロール用動物の場合と比較して、やや遅れたことが観察された。
【００７４】
結論として、これらの結果全体は以下のことを示している。
＊ インターロイキン遺伝子を表現する細胞による治療は、従来述べられているように化学的に誘発された腫瘍に対してばかりでなく、自然発生の腫瘍に対しても適用可能であること。
＊ 同系異種細胞の利用が可能であり、腫瘍の拒絶を可能にすること、
＊ 生物学的活性を有する物質を一過性的に表現させることは可能であること、
＊ 同系異種細胞、あるいは部分的な同系異種細胞を、腫瘍あるいは細胞性タイプの免疫反応を誘発することができる宿主への伝播体として用いることが可能であること。
＊ 同系異種細胞によって表現されたＩＩＬ−２による防御においてナチュラル・キラー細胞が関与していること。
【００７５】
【表１】
【発明の効果】
以上詳細に説明した如くこの本発明によれば、イン・ビボ（生体内）でひとつ、あるいは複数の生物活性物質を分泌し、治療された有機体内において安定して成長するのを防ぎ、その有機体から人為的、あるいは自然に排除されやすくするような遺伝子特性を示す細胞で構成された組成物を製造することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】同種異系細胞が不在の場合の腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図２】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図３】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図４】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図５】ＩＬ−２を分泌する同種異系細胞の存在下での腫瘍細胞の存在下での腫瘍細胞の成長を示す曲線である。
【図６】インターロイキンを分泌する細胞の移植されたばかりのルイス腫瘍の拒絶に対する影響を示し、いずれの同種異系細胞の注射されないコントロールを示す図である。
【図７】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図８】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図９】Ｐ８１５非感染細胞にすこしづつ投与量を増やした場合を示す図である。
【図１０】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１１】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１２】ＩＬ−２を分泌するＰ８１５細胞を注射した場合を示す図である。
【図１３】それぞれ合成ＩＬ−４およびＩＬ−２とＩＬ−４を合成する細胞の組み合わせを注射した場合を示す図である。
【図１４】それぞれ合成ＩＬ−４およびＩＬ−２とＩＬ−４を合成する細胞の組み合わせを注射した場合を示す図である。
【図１５】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、それぞれルイス腫瘍細胞だけを接種した場合を示す図である。
【図１６】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、非感染ｒＭＴＣの存在下でルイス腫瘍を接種した場合を示す図である。
【図１７】Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおけるルイス腫瘍の成長度（ｙ軸）と注射後の日数（ｘ軸）との関係を示しており、ＩＬ−２をトランスフェクトしたｒＭＴＣを接種した場合を示す図である。
Claims (11)
- 人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物（ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ）を製造する方法であって、前記方法は、細胞が一つあるいは複数の生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ）を体内で分泌可能にする遺伝子を発現する細胞を含む組成物を準備するステップを含み、前記生物学的活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれ、前記細胞は、治療される生体に対して少なくとも部分的に同種異系（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ）あるいは異種（ｘｅｎｏｇｅｎｉｃ）であり薬学的に許容できるキャリアと協働する、ことを特徴とする人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、インターロイキンからなる群から選ばれる一つ以上の生物学的活性物質を分泌する、請求項１に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、およびＧＭ−ＣＳＦからなる群から選ばれる一つ以上の生物学的活性物質を分泌する、請求項１に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記インターロイキンは、ＩＬ−２およびＩＬ−４からなる群から選ばれる請求項２に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、ヘルペスウイルスのチミジンキナーゼ遺伝子を発現するとともに、ガンシクロヴィル薬品の影響を受けやすい（ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ）請求項２〜４に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、相乗的な量でＩＬ−２およびＩＬ−４を分泌する請求項４に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は色素マーカーを備えている請求項１〜６のいずれかに記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記遺伝子は、トランスフェクションによって前記細胞に導入される請求項１〜７のいずれかに記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、治療される癌あるいは腫瘍に対して特異性（ｓｐｅｃｉｆｉｃ）のある抗原を分泌させる遺伝子も備えている請求項１〜８のいずれかに記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記細胞は、それぞれ一つ以上の生物学的活性物質を分泌するいくつかの細胞型で構成されており、前記生物活性物質は、インターロイキン、ＴＮＦ、ガンマインターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦ、および／または治療される腫瘍に対する特異性のある抗原からなる群から選ばれる請求項１〜９のいずれかに記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
- 前記生物学的活性物質は、腫瘍に対して特異性のある抗原、自己免疫疾病に関する抗原、抗体、あるいは抗体の誘導体である請求項１に記載の人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9114119A FR2683725B1 (fr) | 1991-11-15 | 1991-11-15 | Composition cellulaire pour le traitement des organismes humains ou animaux. |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6509032A Division JPH08501889A (ja) | 1992-09-30 | 1993-08-18 | 閉鎖されたハウジング内のプリンタ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2004026802A true JP2004026802A (ja) | 2004-01-29 |
Family
ID=9418997
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5509032A Pending JPH06504450A (ja) | 1991-11-15 | 1992-11-13 | ヒトあるいは動物有機体を措置するための細胞組成物 |
| JP2003081417A Pending JP2004026802A (ja) | 1991-11-15 | 2003-03-24 | 人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5509032A Pending JPH06504450A (ja) | 1991-11-15 | 1992-11-13 | ヒトあるいは動物有機体を措置するための細胞組成物 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6074637A (ja) |
| EP (1) | EP0579791B1 (ja) |
| JP (2) | JPH06504450A (ja) |
| AT (1) | ATE193323T1 (ja) |
| AU (1) | AU671090B2 (ja) |
| CA (1) | CA2098720C (ja) |
| DE (1) | DE69231093T2 (ja) |
| DK (1) | DK0579791T3 (ja) |
| ES (1) | ES2146226T3 (ja) |
| FR (1) | FR2683725B1 (ja) |
| GR (1) | GR3034192T3 (ja) |
| SG (1) | SG48066A1 (ja) |
| WO (1) | WO1993010219A1 (ja) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5662896A (en) * | 1988-03-21 | 1997-09-02 | Chiron Viagene, Inc. | Compositions and methods for cancer immunotherapy |
| DE4303751C1 (de) * | 1993-02-09 | 1994-09-08 | Intracon Sarl | Verfahren zur Wiederverwertung von Filterstäuben |
| AU693435B2 (en) * | 1993-02-17 | 1998-07-02 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Allogeneic vaccine and method to synthesize same |
| US20050169900A1 (en) * | 1993-02-17 | 2005-08-04 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Allogeneic vaccine and methods to synthesize same |
| FR2709309B1 (fr) * | 1993-08-25 | 1995-11-10 | Centre Nat Rech Scient | Compositions cellulaires, préparation et utilisations thérapeutiques. |
| AUPM543894A0 (en) * | 1994-05-04 | 1994-05-26 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | An adjuvant |
| US6730512B2 (en) | 1997-04-09 | 2004-05-04 | Amdl, Inc. | Combination immunogene therapy |
| WO1998044788A2 (en) * | 1997-04-09 | 1998-10-15 | Chang Lung Ji | Animal model for evaluation of vaccines |
| DE69916581T2 (de) * | 1998-02-02 | 2004-09-16 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Eine universelle immunmodulatorische cytokin-expressierende zelllinie in wartestelling. entsprechende zusammensetzungen und methoden ihrer herstellung und verwendungen |
| WO2003047684A2 (en) * | 2001-12-04 | 2003-06-12 | University Of Southern California | Method for intracellular modifications within living cells using pulsed electric fields |
| TWI776276B (zh) * | 2019-11-13 | 2022-09-01 | 中國醫藥大學 | 異種組織細胞組合物治療癌症之用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4783407A (en) * | 1985-09-30 | 1988-11-08 | Merck & Co., Inc. | Growth of hepatitus A virus in vero cells |
| US5219740A (en) * | 1987-02-13 | 1993-06-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy |
| JPH04507041A (ja) * | 1988-12-13 | 1992-12-10 | アメリカ合衆国 | 遺伝工学により修飾された内皮細胞およびその利用方法 |
| DE69114299T3 (de) * | 1990-09-14 | 2005-09-15 | The Johns Hopkins University | Verfahren und zusammensetzungen für gentherapie und stärkung des immunsystems. |
| US5358866A (en) * | 1991-07-03 | 1994-10-25 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Cytosine deaminase negative selection system for gene transfer techniques and therapies |
| ATE194494T1 (de) * | 1991-10-21 | 2000-07-15 | Cell Genesys Inc | Kombinierte zelluläre und immunsuppressive therapien |
-
1991
- 1991-11-15 FR FR9114119A patent/FR2683725B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-11-13 AT AT93900251T patent/ATE193323T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-11-13 DE DE69231093T patent/DE69231093T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-13 EP EP93900251A patent/EP0579791B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-13 WO PCT/FR1992/001061 patent/WO1993010219A1/fr active IP Right Grant
- 1992-11-13 JP JP5509032A patent/JPH06504450A/ja active Pending
- 1992-11-13 DK DK93900251T patent/DK0579791T3/da active
- 1992-11-13 ES ES93900251T patent/ES2146226T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-13 CA CA002098720A patent/CA2098720C/fr not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-13 AU AU31631/93A patent/AU671090B2/en not_active Ceased
- 1992-11-13 SG SG1996006817A patent/SG48066A1/en unknown
-
1995
- 1995-06-07 US US08/485,160 patent/US6074637A/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-08-14 GR GR20000401886T patent/GR3034192T3/el not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-03-24 JP JP2003081417A patent/JP2004026802A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06504450A (ja) | 1994-05-26 |
| CA2098720C (fr) | 2003-01-21 |
| WO1993010219A1 (fr) | 1993-05-27 |
| EP0579791A1 (fr) | 1994-01-26 |
| DK0579791T3 (da) | 2000-10-30 |
| FR2683725A1 (fr) | 1993-05-21 |
| AU3163193A (en) | 1993-06-15 |
| ATE193323T1 (de) | 2000-06-15 |
| US6074637A (en) | 2000-06-13 |
| GR3034192T3 (en) | 2000-11-30 |
| ES2146226T3 (es) | 2000-08-01 |
| CA2098720A1 (fr) | 1993-05-16 |
| FR2683725B1 (fr) | 1995-07-07 |
| EP0579791B1 (fr) | 2000-05-24 |
| DE69231093D1 (de) | 2000-06-29 |
| AU671090B2 (en) | 1996-08-15 |
| SG48066A1 (en) | 1998-04-17 |
| DE69231093T2 (de) | 2001-02-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7264820B2 (en) | Cancer immunotherapy using autologous tumor cells combined with cells expressing a membrane cytokline | |
| AU704012B2 (en) | Gene therapy for effector cell regulation | |
| US9814682B2 (en) | Vaccination with immuno-isolated cells producing an immunomodulator | |
| JP2002511846A (ja) | Ｈｓｖアンプリコンベクターによる自家腫瘍ワクチンの迅速な産生 | |
| Yamanaka et al. | Induction of an antitumor immunological response by an intratumoral injection of dendritic cells pulsed with genetically engineered Semliki Forest virus to produce interleukin-18 combined with the systemic administration of interleukin-12 | |
| JPH07503455A (ja) | 癌のリンホカイン遺伝子療法 | |
| US7247310B1 (en) | Tumor vaccines | |
| AU2005314271B2 (en) | Alpha thymosin peptides as cancer vaccine adjuvants | |
| JP2004026802A (ja) | 人間あるいは動物体内の癌あるいは腫瘍を治療する薬物を製造する方法 | |
| JPH07504662A (ja) | 免疫無防備状態の宿主における治療用途のための免疫促進剤 | |
| AT412145B (de) | Verfahren zur herstellung eines zellulären immuntherapeutikums auf basis von il-12-freisetzenden dendritischen zellen | |
| Schirrmacher et al. | Specific eradication of micrometastases by transfer of tumour-immune T cells from major-histocompatibility-complex congenic mice | |
| JP2001010961A (ja) | 腫瘍ワクチン | |
| JP2005247861A (ja) | 免疫増強特性を有するムチンペプチド | |
| Ishikawa et al. | Secondary in vitro generation of CTL specific for MM antigen by stimulation with somatic tumor hybrid, but not with parental tumor cells. | |
| Couty et al. | Delivery of mengovirus-derived RNA replicons into tumoural liver enhances the anti-tumour efficacy of a peripheral peptide-based vaccine | |
| Lattime et al. | In Situ Gene Insertion for Immunotherapy Using Vaccinia Virus Vectors | |
| AU729199B2 (en) | Composition for use in the treatment of tumours and the immunization of humans and animals | |
| EP1152767B1 (de) | Verfahren zur herstellung antitumoraler th1-zellen | |
| CN118086212A (zh) | 新冠病毒表位多肽致敏的树突状细胞及其应用 | |
| SCHREIBER | Genetically Engineered Vaccines | |
| EP0805207A1 (en) | Polycistronic expression plasmid for tumor rejection |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060721 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20061020 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20061025 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20070313 |