JP2003512623A - モノフッ素化多環式芳香族化合物および物理的、化学的および生物学的過程における多環式芳香族化合物の随伴物質としてのその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 物理的、化学的および生物学的過程における多環式芳香族化合物（ＰＡ）の随伴物質として、外標準としてまたはモデル化合物としてのモノフッ素化多環式芳香族化合物（ＭＦ−ＰＡ）の使用ならびに化合物ＰＡの定性および定量分析のため、化合物ＰＡの分析方法の校正のためおよび少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡの使用下に実施される化合物ＰＡの生化学反応の分析のための方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、物理的、化学的および生物学的過程において多環式芳香族化合物（
ＰＡ）の随伴物質として、外標準としてまたはモデル化合物としてのモノフッ素
化多環式芳香族化合物（ＭＦ−ＰＡ）の新規使用に関する。さらに、本発明は化
合物ＰＡの定性分析および定量分析のため、化合物ＰＡの分析方法の校正のため
および少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡの使用下に実施される化合物ＰＡの生
化学的反応の分析のための新規方法に関する。

【０００２】 化合物ＰＡは、純多環式芳香族炭化水素だけでなく、酸素、硫黄および／また
は窒素を含有する誘導体のような複素環式類似体をも包含する。これらは、たと
えば不完全に経過する熱分解過程において生じる。

【０００３】 その起源は、森林火災または噴火もしくは火山の噴気のような自然のものまた
は工業的燃焼過程、自動車交通または家屋の火災のような人間に由来するもので
あってもよい。発生論的に、化合物ＰＡはフミン酸から縮合反応によりおよび微
生物、菌類、植物および動物中でアミノ酸からイソプレン代謝を経て閉環により
生じる。多種多様の放出源は、ＮＩＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ ｏｆ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；米国国立標準
技術研究所）のＳＲＭｓ（Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｍａｔｅｒ
ｉａｌｓ；認証標準物質）も証明するように、異なるマトリックス中に遍在性の
発生をもたらす。これを説明するために幾つかのＳＲＭｓが挙げられる：ＳＲＭ
１６４８：ペテロジェニック化合物（ｐｅｔｒｏｇｅｎｅｎ Ｖｅｒｂｉｎｄ
ｕｎｇｅｎ）ＰＡを有する油試料；ＳＲＭ １６４９：浮遊粒子状物質；ＳＲＭ
１９５０：ディーゼル排気微粒子；ＳＲＭ １９４１：港湾からの海洋沈積物
；ＳＲＭ １９７４：ムラサキイガイの貝組織；またはＳＲＭ ８６９：テトラ
ベンゾナフタリン、フェナントロ［３，４−ｃ］フェナントレンおよびベンゾ［
ａ］ピレン。タール系添加物のため、化粧品およびシャンプーは同様に化合物Ｐ
Ａを含有しうる。さらに、化合物ＰＡは地球上だけでなく、星間空間中、銀河系
星雲中および活動銀河中にも存在する。

【０００４】 化合物ＰＡは、僅かな極性および水溶性を特徴とする。僅かな水溶性および有
機および無機材料への強い吸着により制約されて、土壌中で僅かな移動性が生じ
る。特殊な土壌層中での運搬および蓄積は、鉱油、洗剤および溶剤のような有機
物の蓄積と並行して行われる。化学圏および生物圏中での化合物ＰＡの分解は、
非生物学的に光分解およびオゾン分解によりならびに生物学的に嫌気性菌および
好気性菌の活動により行われる。

【０００５】 化合物ＰＡは、その毒性作用および発癌性作用が非常に異なり、このため環境
試料中のすべての化合物ＰＡの定性が非常に重要である。化合物ＰＡの吸収は、
一方ではその表面に化合物ＰＡが吸着結合している微粒子により吸入的に行われ
、他方では該化合物は脂肪組織中に蓄積されるので食物連鎖により吸収および濃
縮される。

【０００６】 同じことは、必要な変更を加えて、ポリハロゲン化化合物ＰＡ、殊にダイオキ
シンおよびフランのようなポリハロゲン化酸素含有化合物（そのうち幾つかは超
毒素（Ｓｕｐｅｒｇｉｆｔ）に数えられる）について当てはまる。

【０００７】 環境分析のための化合物ＰＡの重要性は、これらの部類の物質による人間の多
種多様の暴露に基づいている。他の部類の物質は、高い割合の癌形成物質を有し
ない。既に１８世紀に、英国人医師が煙突掃除夫における皮膚癌の顕著に高い出
現に関し報告しており、これは今日では煤による不断の暴露に帰因されうる。

【０００８】 若干の化合物ＰＡ、殊に縮合多環式芳香族化合物（ｃＰＡＣ）ナフタリン、ア
セナフチレン、アセナフテン、フェナントレン、フルオレン、アントラセン、ク
リセン、ピレン、フルオランテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベンゾ［ｋ］フ
ルオランテン、ベンゾ［ｂ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ［
ａ：ｈ］アントラセン、ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびインデノ［１，２
，３−ｃ：ｄ］ピレン（これらは簡約するとＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｒ
ｏｔｅｃｔｉｏｎ ＡｇｅｎｃｙのＥＰＡ−ｃＰＡＣと呼称される）については
、皮下試験においてマウスにおける発癌能力が立証され、定量化された。たとえ
ば、ベンゾ［ａ］ピレンはミリグラム用量で、暴露したマウスの集団の３３％以
上において癌を惹起した。この点で、化粧品およびシャンプーにおける化合物Ｐ
Ａを含有する止痒性および殺菌性のタール系添加物の使用はとくに問題である。
たとえば、５０ｍｇ／ｋｇのベンゾ［ａ］ピレンの含量を有するシャンプーが相
変わらず市場で入手できる。

【０００９】 化合物ＰＡは、ほ乳動物においてシトクロムＰ−４５０により開始されるジオ
キシゲナーゼのような該化合物を分解する酵素の合成を誘発する。分解生成物の
排出は尿により行われる。化合物ＰＡによる悪性腫瘍生成の発癌性作用機構は、
ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）との直接反応により行われる。その原因は、２つの
求電子性中心が互いから２８０ｐｍの距離に存在する分子範囲（ベイ領域）であ
る。これは、ＤＮＡ中の塩基対の距離に相当し、これにより代謝性エポキシド形
成を経て付加物が形成するに至る。

【００１０】 これらすべての理由から、化合物ＰＡの定性分析および定量分析が最大重要で
あり、多数の相当する物理的、物理化学的および化学的方法が存在するけれども
、正に痕跡領域内で確実に証明されるために、発展しなければならない。

【００１１】 この目的のために、分析物（Ａｎａｌｙｔｅｎ）の類似体、同族体、異性体、
鏡像異性体または同位体でマーキングした類似体が使用される。殊に、重水素化
化合物ＰＡが内標準として使用される（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ、５６巻、２２５ページ以降におけるＷ．Ｅ．ＭａｙおよびＳ．Ａ．Ｗｉｓ
ｅの記事、１９８４年参照）。さらに、メチル化化合物ＰＡが適用され、その際
多数の環境試料は既にメチル化化合物ＰＡを含有することに留意すべきである。
さらに、これらのメチル化化合物ＰＡは、その性質が屡々母体化合物と強く異な
るので、根本においては内標準として問題外である。

【００１２】 たとえばＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ａ、６５９
巻（１９９４年）、１５１から１６１ページにおける、Ｊ．Ｔ．Ａｎｄｅｒｓｏ
ｎおよびＵ．Ｗｅｉｓの記事、“Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｄ
ｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｃｙｌｉｃ ａｒｏｍａｔｉｃ ｃ
ｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ ａｎａｌｏｇｕｅｓ
ａｓ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄｓ”、中に記載されるような、分析
物に対する内標準としてのフッ素化化合物ＰＡの添加がここで特定の進歩を提供
する。

【００１３】 しかしながら、ここには、どのようにして内標準を擬似同一挙動（ｐｓｅｕｄ
ｏｉｄｅｎｔｉｓｃｈｅ Ｖｅｒｈａｌｔｅｎ）の意味で分析物中に含有された
化合物ＰＡに適合させるべきであるかを教示しない。さらに、どのような基準に
よりフッ素化化合物ＰＡを物理的、化学的および／または生物学的過程を校正す
るための外標準として選択することができるかのなんの教示も与えられない。と
りわけ、どのフッ素化化合物ＰＡを化学的および／または生物学的過程において
化合物ＰＡのモデル化合物として使用することができるかに関する指示も欠けて
いる。

【００１４】 本発明の課題は、物理的、化学的および生物学的過程の範囲で、先行技術の欠
点をもはや有しない、多環式芳香族化合物ＰＡに対する新規随伴物質または内標
準、新規外標準および新規モデル化合物を提供することである。殊に、新規随伴
物質または内標準は擬似同一挙動の意味で化合物ＰＡと一緒に物理的、化学的お
よび／または生物学的過程を通過し、引き続きこれらと一緒にまたはこれとは別
個に検出および／または分析されるべきである。さらに、新規外標準は擬似同一
挙動の意味で物理的、化学的および／または生物学的過程をその校正の目的のた
めに通過し、化合物ＰＡとは別個に分析および／または検出されるべきである。
とりわけ、新規モデル化合物は同様に化合物ＰＡの代わりに擬似同一挙動の意味
で反応機構の解明の目的のために化学的および／または生物学的過程を通過し、
その後その反応生成物が一緒に検出および／または分析されるべきである。

【００１５】 それにより、物理的、化学的および生物学的過程において多環式芳香族化合物
（ＰＡ）の随伴物質としてまたは内標準として、外標準としてまたはモデル化合
物としてモノフッ素化多環式芳香族化合物（ＭＦ−ＰＡ）の新規使用が見出され
た。

【００１６】 次に、モノフッ素化多環式芳香族化合物（ＭＦ−ＰＡ）の新規使用を、“本発
明による使用”と呼称する。

【００１７】 さらに、Ｉ）少なくとも１種の分析物ＰＡおよび／またはそれが含有されてい
る試料の調製、ならびに ＩＩ）分離および ＩＩＩ）分析物ＰＡの検出および／または分析 により化合物ＰＡ（分析物）を定性分析および定量分析するため、工程Ｉ、ＩＩ
および／またはＩＩＩにおいて少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡを随伴物質と
して公知濃度で内標準として添加する新規方法が見出され、該方法を次に“本発
明による方法１”と呼称する。

【００１８】 さらに、外標準を異なる濃度で分析し、生じる測定値から少なくとも１つの校
正曲線を形成し、外標準として少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡを使用するこ
とによって、校正すべき分析法を用いる少なくとも１種の外標準の定量分析によ
り化合物ＰＡの分析方法を校正する新規方法が見出され、該方法を次に“本発明
による方法２”と呼称する。

【００１９】 とりわけ、生物体の代謝中に少なくとも１種のモデル化合物を導入し、モデル
化合物を代謝しならびに代謝産物を単離、分離および同定することにより生物体
中での化合物ＰＡの生化学反応を分析するため、モデル化合物として、化合物Ｐ
Ａと同じ基本構造を有する化合物ＭＦ−ＰＡを使用する新規方法が見出され、該
方法を次に“本発明による方法３”と呼称する。

【００２０】 先行技術に関して、本発明の基礎になっている極めて複雑な課題を本発明によ
る使用を用いて解決することができたことは、驚異的でありおよび当業者にとり
予見できなかった。殊に、本発明により使用すべきＭＦ−ＰＡがこのような多数
の複雑な化学的、物理的およびそれどころか生物学的系の範囲内で適用でき、そ
の際その都度の母体化合物に関し擬似同一挙動を示すことは驚異的であった。そ
の際、本発明により使用すべき化合物ＭＦ−ＰＡはなお、その都度の母体化合物
ＰＡと並んで簡単に分析および／または検出することができるという全く特別な
利点を提供する。さらに、化合物ＭＦ−ＰＡは簡単におよび高い収率で製造する
ことができる。

【００２１】 本発明による使用および本発明による方法１〜３の範囲内で付加的で驚異的な
特別の利点として、本発明により使用すべき化合物ＭＦ−ＰＡおよびその後続生
成物、殊にその代謝産物の容易な同定可能性が生じる。

【００２２】 本発明の範囲内で、化合物ＭＦ−ＰＡが物理的、化学的および／または生化学
的（試験管内および生体内）過程において調べるべき特徴に関して当該母体化合
物ＰＡと類似の、殆ど全く同じかまたは同じ挙動をとる場合、化合物ＭＦ−ＰＡ
の擬似同一性挙動について述べる。随伴物質または内標準としての本発明による
使用の際に、化合物ＭＦ−ＰＡが当該母体化合物ＰＡと殆ど全く同じ挙動をとる
場合、本発明により有利である、それというのもこの場合これら２つの化合物の
間で良好に差別することができるからである。外標準としての本発明による使用
の際に、化合物ＭＦ−ＰＡが当該母体化合物ＰＡと殆ど全く同じかまたは全く同
じ挙動をとる場合、本発明により有利である、それというのもこれにより過程の
とくに正確な校正が可能であるからである。

【００２３】 本発明により化合物ＰＡは、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＰＡＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｐ
ＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
ＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
ＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＯＳＣ） 多環式芳香族炭化水素である。

【００２４】 これらの化合物ＰＡは、合成によるかまたは天然起源物であってもよい。

【００２５】 化合物ＰＡＣの例は、ビフェニル、トリフェニレン、ポリフェニレンおよび縮
合多環式芳香族化合物（ｃＰＡＣ）である。

【００２６】 トリフェニレンＰＡＣの例は、１，２−、１，３−または１，４−ジフェニル
ベンゼン（テルフェニル）である。

【００２７】 ポリフェニレンＰＡＣの例は、クアテルフェニルまたは１，３，５−トリフェ
ニルベンゼンである。

【００２８】 化合物ｃＰＡＣの例は、環境分析的および医学的にとくに重要な、Ｅｎｖｉｒ
ｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ＡｇｅｎｃｙのＥＰＡ−ｃＰＡＣ、
ナフタリン、アセナフチレン、アセナフテン、フェナントレン、フルオレン、ア
ントラセン、クリセン、ピレン、フルオランテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、
ベンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［ｂ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレ
ン、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびイ
ンデノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレンまたはＮＩＳＴのＳＲＭ ８６９−ｃＰＡ
Ｃ、テトラベンゾナフタリンまたはフェナントロ［３，４−ｃ］フェナントレン
である。

【００２９】 化合物ＰＡＯＣの例は、殊にジベンゾジオキシンまたはジベンゾフランである
。

【００３０】 化合物ＰＡＳＣの例は、ベンゾ［ｂ］チオフェン、ジベンゾジチイン（チアン
トレン）、ジベンゾチオフェンまたはナフト［２，３−ｂ］チオフェン、殊にジ
ベンゾジチインまたはジベンゾチオフェンである。

【００３１】 化合物ＰＡＮＣの例は、キノリン、イソキノリン、ベンゾ［ｈ］イソキノリン
、アクリジン、カルバゾール、ナフチリジン、フェナントロリン、フェナントリ
ジンまたはピラジノ［２，３−ａ］アクリジンである。

【００３２】 化合物ＰＡＯＳＣの例は、フェノキサチインまたはチエノ［２，３−ｂ］フラ
ン、殊にフェノキサチインである。

【００３３】 化合物ＰＡＯＮＣの例は、フェノキサジンである。

【００３４】 化合物ＰＡＮＳＣの例は、フェノチアジンまたはイミダゾ［２，１−ｂ］チア
ゾールである。

【００３５】 化合物ＰＡＮＯＳＣの例は、チエノ［２，３−ｂ］オキサゾールである。

【００３６】 上記に記載した化合物ＰＡは、少なくとも１個の塩素原子、臭素原子および／
または沃素原子で置換されていてもよい。殊に、ポリ塩素化、ポリ臭素化ならび
にポリ塩素化およびポリ臭素化化合物ＰＡが、環境分析的および医学的に重要で
ある。これらのうち、たとえば変圧器油またはプラスチックの防火剤として使用
されるような、ポリ塩素化された、ポリ臭素化されたならびにポリ塩素化されか
つポリ臭素化されたビフェニル、テルフェニルまたはクアテルフェニルＰＡＣが
再びとくに重要である。さらに、超毒素またはセベソ毒（Ｓｅｖｅｓｏ−Ｇｉｆ
ｔｅ）としても呼称されるポリ塩素化された、ポリ臭素化されたならびにポリ塩
素化されかつポリ臭素化されたジベンゾジオキシンおよびジベンゾフランＰＡＯ
Ｃが全くとくに重要である。殊に、これらは上述した変圧器油または防火剤から
熱分解過程により生成しうる。

【００３７】 本発明により使用すべきモノフッ素化多環式芳香族化合物ＭＦ−ＰＡの母体化
合物として、原則的に自然界に存在するかまたは合成のすべての化合物ＰＡが考
慮される。とくに、上記に記載したすべての化合物ＰＡが母体化合物として適用
される。

【００３８】 それ故に、本発明により使用すべき有利なモノフッ素化多環式芳香族化合物Ｍ
Ｆ−ＰＡは、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＭＦ−ＰＡＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｍ
Ｆ−ＰＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
Ｆ−ＰＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
Ｆ−ＰＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＯＳＣ） モノフッ素化多環式芳香族炭化水素である。

【００３９】 本発明により使用すべき適当な化合物ＭＦ−ＰＡＣの例は、モノフッ素化ビフ
ェニル、トリフェニレン、ポリフェニレンおよびモノフッ素化縮合多環式芳香族
化合物（ＭＦ−ｃＰＡＣ）である。

【００４０】 本発明により使用すべき好適なトリフェニレンＭＦ−ＰＡＣの例は、位置異性
のモノフッ素化１，２−，１，３−または１，４−ジフェニルベンゼン（テルフ
ェニル）である。

【００４１】 本発明により使用すべき好適なポリフェニレンＭＦ−ＰＡＣの例は、位置異性
のモノフッ素化クアテルフェニルまたは１，３，５−トリフェニルベンゼンであ
る。

【００４２】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ｃＰＡＣの例は、位置異性のモノ
フッ素化されたナフタリン、アセナフチレン、アセナフテン、フェナントレン、
フルオレン、アントラセン、クリセン、ピレン、フルオランテン、ベンゾ［ａ］
アントラセン、ベンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［ｂ］フルオランテン、ベ
ンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペ
リレンおよびインデノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレン、テトラベンゾナフタリン
またはフェナントロ［３，４−ｃ］フェナントレンである。

【００４３】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＯＣの例は、位置異性のモノ
フッ素化されたジベンゾジオキシンまたはジベンゾフランである。

【００４４】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＳＣの例は、位置異性のモノ
フッ素化されたベンゾ［ｂ］チオフェン、ジベンゾジチイン（チアントレン）、
ジベンゾチオフェンまたはナフト［２，３−ｂ］チオフェン、殊にジベンゾジチ
インまたはジベンゾチオフェンである。

【００４５】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＮＣの例は、位置異性のモノ
フッ素化されたキノリン、イソキノリン、ベンゾ［ｈ］イソキノリン、アクリジ
ン、カルバゾール、ナフチリジン、フェナントロリン、フェナントリジンまたは
ピラジノ［２，３−ａ］アクリジンである。

【００４６】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＯＳＣの例は、位置異性のモ
ノフッ素化されたフェノキサチインまたはチエノ［２，３−ｂ］フラン、殊にフ
ェノキサチインである。

【００４７】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＯＮＣの例は、位置異性のモ
ノフッ素化フェノキサジンである。

【００４８】 本発明により使用すべき好適な化合物ＰＡＮＳＣの例は、位置異性のモノフッ
素化されたフェノチアジンまたはイミダゾ［２，１−ｂ］チアゾールである。

【００４９】 本発明により使用すべき好適な化合物ＭＦ−ＰＡＮＯＳＣの例は、位置異性の
モノフッ素化チエノ［２，３−ｂ］オキサゾールである。

【００５０】 適当な化合物ＭＦ−ＰＡの他の例は、少なくとも１個の塩素原子、臭素原子お
よび／または沃素原子で置換されている、上記に記載した化合物ＭＦ−ＰＡであ
る。

【００５１】 この種の好適な化合物ＭＦ−ＰＡの例は、位置異性のポリ塩素化、ポリ臭素化
ならびにポリ塩素化およびポリ臭素化化合物ＭＦ−ＰＡである。これらのうち、
ポリ塩素化された、ポリ臭素化されたならびにポリ塩素化されかつポリ臭素化さ
れた位置異性のモノフッ素化されたビフェニル、テルフェニルまたはクアテルフ
ェニルＭＦ−ＰＡＣまたはポリ塩素化された、ポリ臭素化されたならびにポリ塩
素化されかつポリ臭素化された位置異性のモノフッ素化されたジベンゾジオキシ
ンおよびジベンゾフランＭＦ−ＰＡＯＣが再びとくに好適である。

【００５２】 本発明により使用すべき全くとくに好適な化合物ＭＦ−ＰＡの例は、１−フル
オロナフタリン、１−フルオロフェナントレン、１−フルオロクリセン、１−フ
ルオロピレン、２−フルオロフルオレン、１−フルオロフルオランテン、１−フ
ルオロアセナフチレンまたは９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテンである。

【００５３】 本発明により使用すべき化合物ＭＦ−ＰＡの製造は、方法論的な特殊性を有し
ないで、有機フッ素化学の通常の公知方法により元素状のフッ素または二フッ化
キセノンのような適当なフッ素化剤を用いる母体化合物ＰＡの直接ハロゲン化に
よるかまたは適当なフッ素含有出発化合物の反応により行われる。

【００５４】 たとえば１−フルオロフェナントレンまたは１−フルオロクリセンは、適当な
出発化合物の酸化的光環化により、１−フルオロナフタリン、１−フルオフルオ
ランテン、１−フルオロピレンまたは２−フルオロフルオレンは相応するジアゾ
ニウムテトラフルオロボレートからシーマン反応（Ｓｃｈｉｅｍａｎｎｒｅａｋ
ｔｉｏｎ）により、９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテンは適当な出発化合
物の［４＋２］付加環化によりならびに１−フルオロアセナフチレンはＦＶＴ（
ｆｌａｓｈ ｖａｃｕｕｍ ｔｈｅｒｍｏｌｙｓｉｓ；フラッシュ真空熱分解）
により製造できる。

【００５５】 本発明により、化合物ＭＦ−ＰＡは − 化合物ＰＡと一緒に物理的、化学的および／または生物学的過程を通過し、
引き続きこれらと一緒にまたはこれらと別個に検出および／または分析される内
標準として、 − 化合物ＰＡの代わりに物理的、化学的および／または生物学的過程を、これ
ら過程の校正の目的のために通過し、化合物ＰＡと別個に分析および／または検
出される外標準として、および／または − 化合物ＰＡの代わりに化学的および／または生物学的過程を、反応機構の解
明の目的のために通過し、その反応生成物が検出および／または分析されるモデ
ル化合物として、 使用される。

【００５６】 化合物ＭＦ−ＰＡが本発明により有利に適用される物理的過程の例は、少なく
とも１種の化合物ＰＡおよび少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡまたは物質混合
物（たとえばこれらの化合物を含有する環境試料）の、蒸発、凝縮、凍結、溶融
、昇華、溶解、分散、乳化、（再）結晶、沈殿、破砕、凝集、混合、少なくとも
２つの異なる物質相間での分配および／または音波、電磁線（γ線、ｘ線、ＵＶ
光線、可視光、近赤外線（ＮＩＲ）、赤外線またはマイクロ波のような）、粒子
線（陽子線、中性子線または電子線のような）および／または電場および／また
は磁場での相互作用である。

【００５７】 化合物ＭＦ−ＰＡが本発明により有利に適用される生物学的過程の例は、生体
内または試験管内で経過する生化学的または分子生物学的過程である。

【００５８】 随伴物質または内標準、外標準および／またはモデル化合物ＭＦ−ＰＡまたは
少なくとも１種の随伴物質または少なくとも１種の内標準および／または少なく
とも１種の外標準および／または少なくとも１種のモデル化合物ＭＦ−ＰＡが、
化合物ＰＡまたは少なくとも１種の化合物ＰＡ（分析物）と同じ基本構造を有す
る場合、本発明による使用に対し特別な利点が生じる。

【００５９】 本発明により、化合物ＭＦ−ＰＡは本発明による方法１において適用される。

【００６０】 本発明による方法１は、工程（Ｉ）において少なくとも１種の分析物ＰＡおよ
び／またはこれが含有されている試料の調製から出発する。この場合、上記に記
載した物理的過程が適用される。

【００６１】 その後、本発明により調製（Ｉ）により生じる物質混合物のその成分への分離
が続く。この場合でも、上記に記載した物理的過程が適用される。適当な分離法
（ＩＩ）の例は、ソックスレー抽出、ＡＳＥ（ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｓｏｌ
ｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；促進液体抽出）、ＳＦＥ（ｓｕｐｅｒｃｒｉ
ｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；超臨界液体抽出）、マイクロ
波で照射下の抽出、ＬＬＥ（ｌｉｑｕｉｄ−ｌｉｑｕｉｄ−ｅｘｔｒａｃｔｉｏ
ｎ；液液抽出）、ＳＰＥ（ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；固
相抽出）またはエムポーア・デスク（Ｅｍｐｏｒｅ Ｄｉｓｋ）である。適当な
分離法（ＩＩ）のこれらおよび他の例は、たとえばメジャー（Ｒ．Ｅ．Ｍａｊｏ
ｒ）により記事“Ｓａｍｐｌｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｈａｎｄｌ
ｉｎｇ ｆｏｒ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ａｎａｌｙｓｉｓ”、ＬＣ−ＧＣ、１３巻、７号（１９９５年）、５４２〜５
５５ページ、ロルド（Ｈ．Ｌ．Ｌｏｒｄ）およびパウリスツイニン（Ｊ．Ｐａｗ
ｌｉｓｚｙｎｉｎ）により記事“Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｓｏ
ｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ Ｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ”、ＬＣ−ＧＣ Ｉｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、１９９８年１２月、７７６〜７８５ページ、またはバー
カー（Ｓ．ａ．Ｂａｒｋｅｒ）により記事“Ｍａｔｒｉｘ Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａ
ｓｅ Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ”、ＬＣ−ＧＣ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、１
９９８年１１月、７１９〜７２４ページに記載される。

【００６２】 本発明により、工程（ＩＩＩ）において分析物ＰＡの検出および／または分析
が行われる。この場合、ＵＶ光線、ダイオード検出器（ＤＡＤ／ＵＶ；ｄｉｏｄ
ｅ ａｒｒａｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒ）、蛍光、質量分析測定を用いる検出または
これら方法の組合せのような通常の公知検出法を適用することができる。

【００６３】 その際、随伴物質または内標準ＭＦ−ＰＡは、本発明により工程（Ｉ）、（Ｉ
Ｉ）および／または（ＩＩＩ）、とくに工程（Ｉ）において、公知濃度で添加さ
れる。その際、化合物ＭＦ−ＰＡは固体または溶液としてまたは分析法の工程前
または工程において添加される。または該化合物は、マトリックス中、たとえば
吸収剤または固相中に含有されている。

【００６４】 本発明による方法１における化合物ＭＦ−ＰＡの本発明による使用により、分
析法の個々の工程の有効性および再現性を簡単に定量的に正確に把握することが
可能であり、これは本発明による使用および本発明による方法１の全く特別な利
点である。

【００６５】 本発明により、化合物ＭＦ−ＰＡは本発明による方法２において適用される。

【００６６】 本発明による方法２は、校正すべき分析法を用いる少なくとも１つの外標準の
定量分析による化合物ＰＡの分析法の校正に使用され、その際少なくとも１種の
化合物ＭＦ−ＰＡは異なる濃度で分析され、生じる測定値から少なくとも１つの
校正曲線が形成される。ここでも、化合物ＭＦ−ＰＡが定量的に決定すべきＰＡ
と同じ基本構造を有する場合、特別な利点が生じる。検出のためには、たとえば
上記に記載した方法が適用されることができる。

【００６７】 本発明による方法２により有利に校正することのできる分析法の例は、ＬＣ（
ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；液体クロマトグラフィー）、Ｇ
Ｃ（ガスクロマトグラフィー）、ＳＦＣ（ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕ
ｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；超臨界液相クロマトグラフィー）、ＣＥ
（ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ；キャピラリー電気泳
動）またはスポルスキー（Ｓｈｐｏｌ′ｓｋｉｉ）分光法、同期蛍光分光法、Ｄ
ＡＤまたは質量分析のような直接検出技術である。

【００６８】 その際、これにより分析法を相応する母体化合物ＰＡに関してだけでなく、た
とえば相応する代謝産物、たとえばヒドロキシ誘導体、硫酸塩または配糖体のよ
うな相応する物質群に関しても校正することができることが、本発明による方法
２の他の特別な利点であることが判明する。

【００６９】 本発明により、化合物ＭＦ−ＰＡは本発明による方法３において適用される。

【００７０】 本発明による方法３は、生体内または試験管内、とくに生体内で経過する化合
物の生化学反応の機構の解明に役立つ。本発明による使用において、モデル化合
物ＭＦ−ＰＡは重水素化または放射性マーキングした化合物を代替する。

【００７１】 本発明による方法３は、生物体の代謝中に少なくとも１種のモデル化合物ＭＦ
−ＰＡを、たとえば直接注入、食物摂取、皮膚吸収および／または呼吸吸収によ
り導入することを包含する。その後、生物体中でモデル化合物ＭＦ−ＰＡが相応
する母体化合物ＰＡの代わりに代謝される。その後、代謝産物の単離、分離およ
び同定が行われる。その際、代謝産物およびモデル化合物ＭＦ−ＰＡはそれの異
性体分配において代謝の解明のために利用される。この場合、フッ素含有代謝産
物は簡単にＡＥＤ（ａｔｏｍｉｃ ｅｍｍｉｓｓｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；
原子発光検出）または質量分析により同定することができることは特別の利点で
あることが判明する。

【００７２】 とりわけ、上記に記載した化合物ＭＦ−ＰＡは規格化され、包装された形でい
わゆる“キット”として存在しうる。これらのキット中には、化合物ＭＦ−ＰＡ
がその都度の適用目的、たとえば本発明による方法１、２または３に適合した組
成、量および適用形で、たとえば溶液として、粉末状固体としてまたは担体材料
に吸着されて、存在する。包装物自体は、その都度の適用目的に適合した任意の
形、たとえば小袋、アンプル、中空球またはマイクロカプセルであってよくおよ
び任意の材料、殊にガラスまたはプラスチックからなっていてもよい。さらに、
開口装置、たとえば予定破壊個所または予定引裂個所が存在していてもよい。Ｍ
Ｆ−ＰＡを規格化され包装された形でいわゆる“キット”として使用する可能性
は、本発明による使用の他の特別な利点である。

【００７３】 例 例１ カレイ目の魚（Ｆｌｕｎｄｅｒｎ；Ｐｌａｔｉｃｈｔｙｓ ｆｌｅｓｕｓ）に
おけるピレンの代謝の調査のための１−フルオロピレンの使用 ２００〜４００グラムの質量の成長しきったカレイ目の魚を、ジメチルスルホ
キシド中の体重１ｋｇあたりその都度１−フルオロピレンおよびピレンの質量比
１：１の混合物の溶液を濃度２００μｇ／ｍｌで腹壁中へ注入した。暴露時間は
７日であった。その後、カレイ目の魚から胆のうを取出し、胆汁をメタノールで
希釈し、直接高圧液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）中に注入した。ＨＰＬＣカラ
ムの固定相として、Ｃ−１８ポリマー ビダック（Ｖｙｄａｃｋ^（Ｒ））を使用
した。第１表は、勾配経過に関する概観を与える。溶離化合物を、ＤＡＤ（ダイ
オードアレー検出器）を用い３３９ｎｍの波長で検出した。

【００７４】 第１表： 高圧液体クロマトグラフィーにおける勾配の経過 時間 アセトニトリル 水 （ｍｉｎ） （％） （％） −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− ０ ５ ９５ ４０ ９０ １０ ５０ ９０ １０ ６０ ５ ９５ 第２表は、溶離した化合物およびクロマトグラム中でのその溶離の順序に関す
る概観を与える。

【００７５】 第２表： 溶離した化合物およびクロマトグラム中でのその溶離の順序 ピーク番号 化合物 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− １ 注入ピーク ２ １−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ２′ １−フルオロ−８−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ２″ １−フルオロ−６−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ３ １−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ３′ １−フルオロ−８−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ３″ １−フルオロ−６−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ４ 代謝ではなくマトリックスに由来する未知物質 試料中に、ピレン、１−フルオロピレン、１−ヒドロキシピレン（一次代謝産
物）ならびに１−フルオロ−６−ヒドロキシド−ピレンおよび１−フルオロ−８
−ヒドロキシ−ピレン（一次代謝産物）が含有されていた。しかしこれらは、そ
の低すぎる濃度のため直接そのスペクトルによってではなく、保持時間につき証
明することができるにすぎない。

【００７６】 保持挙動に関しては、非置換化合物およびフッ素化化合物が遅れてＣ−１８相
上に溶離した、それというのもフッ素化化合物は置換化合物よりも親油性であっ
たからである。１，６−置換パターンを有する化合物は、１，８−置換パターン
を有する化合物よりも無極性であり、それ故後者はより短い保持時間を有してい
た。ＨＰＬＣクロマトグラムの他の比較は、ピレンならびに１−フルオロピレン
およびその一次および二次の代謝産物は同時に定性的および定量的に検出するこ
とができることを示した。

【００７７】 １，６−異性体の形成は、１，８−異性体の形成に比べてエネルギー的に好ま
しい。これは、調査した代謝の場合にも反映する。これに関与する酵素は、その
基質挙動が顕著に位置特異的でなく、むしろエネルギー特異的である。それにも
拘わらず、基質−酵素の機構は位置特異的であって、フッ素化された環には置換
は起きなかった。

【００７８】 例２ 等脚類の動物（Ｓｅｍｉｐｏｄｅｎ；Ｐｏｒｃｅｌｌｉｏ ｓｃａｂｅｒ）に
おけるピレンの代謝の調査のための２−フルオロピレンの使用 １歳の成体の等脚類の動物は、１−フルオロピレンおよびピレンを食物により
摂取した。このため、食物フォルソミア カンジダ（Ｆｏｌｓｏｍｉａ ｃａｎ
ｄｉｄａ）を該化合物で汚染した。このため、アセトン中の１−フルオロピレン
およびピレンの１：１の割合の溶液（濃度：５０ｍｇ／ｍｌ）を使用し、それに
食物を含浸した。暴露時間は１日であった。

【００７９】 その後、等脚類の動物の肝膵臓を頭から分離し、エタノール／水（体積比１：
１）中でプロテアーゼＫと一緒にした。試料をエッペンドルフ管（Ｅｐｐｅｎｄ
ｏｒｆｈｕｅｔｃｈｅｎ）中で３０℃で３０分間撹拌し、次に超音波で処理した
。生じる溶液を、直接に高圧液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）中に注入した。測
定のため、例１に記載した条件を適用した。

【００８０】 第３表は、溶離した化合物およびクロマトグラム中でのその溶離の順序に関す
る概観を与える。

【００８１】 第３表： 溶離した化合物およびクロマトグラム中でのその溶離の順序 ピークの番号 化合物 −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− ４ 未知構造のマトリックスからの極性成分 ６′ 質量２６６を有する１−フルオロ−６−ヒドロキシ−ピレンの
未知接合体 ６″ 質量２６６を有する１−フルオロ−８−ヒドロキシ−ピレンの
未知接合体 ６′″ 質量２６６を有する１−フルオロ−３−ヒドロキシ−ピレンの
未知接合体 ７′ １−フルオロ−６−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ７〃 １−フルオロ−８−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ７′″ １−フルオロ−３−スルファート−ピレン（二次代謝産物） ８′ １−フルオロ−６−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ８″ １−フルオロ−８−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ８′″ １−フルオロ−３−グルクロン酸−ピレン（二次代謝産物） ９′ １−フルオロ−６−ヒドロキシ−ピレン（一次代謝産物） ９″ １−フルオロ−８−ヒドロキシ−ピレン（一次代謝産物） ９′″ １−フルオロ−３−ヒドロキシ−ピレン（一次代謝産物） １０ 未知成分 １，６−および１，８−異性体の溶離挙動に関しては、例１において述べたこ
とがあてはまる。１，３−異性体は、１，８−異性体よりも若干極性であり、そ
のために該異性体は部分的に後者と同時溶離された。接合体の異性体の長さ／幅
の比は比較可能であり、それでこの比は保持挙動に対して何の影響も及ぼさなか
った。クロマトグラムの他の比較は、ピレンならびに１−フルオロピレンおよび
その一次および二次の代謝産物は同時に定性的および定量的に検出することがで
きた。

【００８２】 １，６−および１，８−異性体に関しては、例１において述べたことがあては
まる。それにも拘わらず、一方でＰｌａｔｉｃｈｔｈｙｓ Ｆｌｅｓｕｓおよび
他方でＰｏｒｃｅｌｌｉｏ ｓｃａｂｅｒの関与した酵素の比較は、等脚類の動
物の酵素はカレイ目の魚の酵素のように位置特異的でなかったことが明らかにな
った。これは、１，３−異性体の形成につき判明する。異性体の分配は、ほぼ１
−フルオロピレンのモノニトロ化の分配に相当した。

【００８３】 例３ ＧＣ−ＭＳ連結の校正のための化合物ＭＦ−ＰＡの使用 ＧＣ−ＭＳをＨｅｗｌｅｔｔ−ＰａｃｋａｒｄのガスクロマトグラフＨＰ６８
９０および質量分析の検出器ＨＰ７９７２Ａを用いて実施した。ガスクロマトグ
ラフは、ＨＰ７６７３（Ｇ１５２３Ａ）自動試料採取器を備えていた。分離毛管
中へのその都度１μｌの注入を、自動試料採取器−微量注射器を用い注射針で０
．３２ｍｍの分離毛管中へ実施した。ジフェニルポリシロキサン５％−ジメチル
ポリシロキサン９５％からなる３０ｍ×２５０μｍ×０．２５μｍ厚さのフィル
ムを使用した。キャリヤガスは、圧力９２ｋＰａでヘリウム５．０（純度：９９
．９９９％）であった。質量分析の検出器ＨＰ７９７２Ａは、５０〜３５０のｍ
／ｚ範囲内で毎秒９スキャンの走査率で運転した。オーブン温度は、６０℃（３
．５分）から２９０℃（４．５分）まで毎分６．５７℃のステップで３５分間変
化させた。接続導管は２９０℃の温度に保持した。

【００８４】 適用される化合物ＭＦ−ＰＡ １−フルオロナフタリン、１−フルオロフェナ
ントレン、１−フルオロクリセン、１−フルオロピレン、２−フルオロフルオレ
ン、１−フルオロフルオランテンおよび９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテ
ン、ならびに１６個のＥＰＡ−ＰＡ ナフタリン、アセナフチレン、アセナフテ
ン、フェナントレン、フルオレン、アントラセン、クリセン、ピレン、フルオラ
ンテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［ｂ
］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、ベ
ンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびインデノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレンの濃
度は、４ｎｇ／μｌであった。各試料は１２回注入した。溶剤として、酢酸メチ
ルを使用した。

【００８５】 化合物ＭＦ−ＰＡのフラグメント化（Ｆｒａｇｍｅｔｉｅｒｕｎｇ）に特徴的
なのは、ｍ／ｚ＝［Ｍ］^{＋ ・}、［Ｍ＋１］^{＋ ・}、［Ｍ−ＨＦ］^{＋ ・}、［Ｍ］^{＋＋ ・} および［ＨＦ］^{＋ ・}である。第４表は、相応するｍ／ｚ値に関する概観を与え
る。

【００８６】 第４表： 使用した化合物ＭＦ−ＰＡのｍ／ｚ値

【００８７】

【表１】

【００８８】 ＥＰＡ−ＰＡに関するＧＣ−ＭＳ測定の標準偏差を確かめた。これは、１８〜
２０％であった。

【００８９】 それに反して、与えられたＥＰＡ−ＰＡの相応する化合物ＭＦ−ＰＡ（１−フ
ルオロナフタリン、１−フルオロフェナントレン、１ーフルオロクリセン、１−
フルオロピレン、２−フルオロフルオレン、１−フルオロフルオランテンまたは
９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテン）を標準として使用した場合、とくに
小さい標準偏差が生じた。

【００９０】 与えられたＥＰＡ−ＰＡ（それには相応する化合物ＭＦ−ＰＡが自由に使用で
きなかった）の標準偏差は、既に標準として１−フルオロフェナントレンの使用
により顕著に改善することができた。

【００９１】 他の顕著な改善は、３種の化合物ＭＦ−ＰＡ １−フルオロナフタリン、１−
フルオロフェナントレンおよび９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテンの使用
から生じ、これらの化合物は記載した順序で溶離しおよびそのピークはクロマト
グラムの始端、中央および終端に出現した。

【００９２】 これに反して、すべて７種の化合物ＭＦ−ＰＡの使用は、さらに重要な改善を
もはやもたらさなかった。換言すれば：３つの標準の使用は完全に十分であった
。

【００９３】 第５表は、算出された標準偏差に関する概観を与える。ＥＰＡ−ＰＡは、記載
された順序で溶離した。相応する化合物ＭＦ−ＰＡは、直接その都度の母体化合
物と一緒に溶離した。

【００９４】 第５表： １６個のＥＰＡ−ＰＡの算出された標準偏差（％）

【００９５】

【表２】

【００９６】

【表３】

【００９７】 調査は、化合物ＭＦ−ＰＡが優れて化合物ＰＡの分析法の校正のために適当で
あることを確証した。

【００９８】 例４ 高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）における随伴物質としての化合物Ｍ
Ｆ−ＰＡの使用 ＨＰＬＣカラムの固定相として、Ｃ−１８ポリマー ビダック（Ｖｙｄａｃｋ ^（Ｒ） ）を使用した。第６表は、勾配経過に関する概観を与える。溶離した化合
物は、ＵＶ−ＤＡＤ（ｄｉｏｄｅ ａｒｒａｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒ；ダイオード
アレー検出器）を用いて検出した。第７表は、波長プログラムに関する概観を与
える。

【００９９】 第６表： 高圧液体クロマトグラフィーにおける勾配経過 時間 アセトニトリル 水 （ｍｉｎ） （％） （％） −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− ０ ５０ ５０ ５ ６０ ４０ ２０ １００ ０ ２５ １００ ０ ３０ ５０ ５０ 第７表： 波長プログラムＵＶ−ＤＡＤ 時間（ｍｉｎ） 波長（ｎｍ） −−−−−−−−−−−−−−−− ０．０ ２２５ ７．０ ２１０ １０．５ ２０５ １１．８ ２５０ １３．０ ２３５ １８．０ ２６５ ２１．０ ２４０ １−フルオロナフタリン、１−フルオロアセナフチレン、１−フルオロフェナ
ントレン、１−フルオロクリセン、１−フルオロピレン、２−フルオロフルオレ
ン、１−フルオロフルオランテンおよび９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテ
ンならびに相応する母体化合物ＰＡからなる混合物を分析した。化合物は次の順
序で溶離した： １． ナフタリン ２． １−フルオロナフタリン ３． アセナフチレン ４． １−フルオロアセナフチレン ５． フルオレン ６． １−フルオロフルオレン ７． ピレン ８． １−フルオロピレン ９． フルオランテン １０． フェナントレン １１． １−フルオロフルオランテン １２． １−フルオロフェナントレン １３． クリセン １４． １−フルオロクリセン １６． ベンゾ［ｋ］フルオランテン １７． ９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテン。

【０１００】 調査は、化合物ＭＦ−ＰＡが相応するその母体化合物ＰＡのための随伴物質な
いしは内標準として優れていたことを確証した。

【０１０１】 例５ 固相抽出（ＳＰＥ；ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）におけ
る随伴物質ないしは内標準としての化合物ＭＦ−ＰＡの使用 １−フルオロナフタリンおよびナフタリン、１−フルオロアセナフチレンおよ
びアセナフチレン、１−フルオロフェナントレンおよびフェナントレン、１−フ
ルオロクリセンおよびクリセン、１−フルオロピレンおよびピレン、２−フルオ
ロフルオレンおよびフルオレン、１−フルオロフルオランテンおよびフルオラン
テンならびに９−フルオロベンゾ［ｋ］フルオランテンおよびベンゾ［ｋ］フル
オランテンの混合物をＳＰＥにかけ、ＨＰＬＣにより分析および検出した。

【０１０２】 その際、次の条件を適用した： 条件１： 相： Ｃ８−ポリマー 漏出体積： １００ｍｌ 流量： ０．５ｍｌ／ｍｉｎ 条件２： 相： スチレン−ジビニルベンゼンの共重合体 漏出体積： １００ｍｌ 流量： ０．５ｍｌ／ｍｉｎ 条件２下では、必要な溶離体積におけるベンゾ［ｋ］フルオランテンの希釈は
、化合物がもはや検出することができない程度に高かった。

【０１０３】 他の場合には、与えられた化合物ＭＦ−ＰＡおよびその相応する母体化合物Ｐ
Ａはすべての場合に大体において同一の溶離挙動を示した。

【０１０４】 条件１下での装入物のその都度３つの相を用いるＳＰＥによる個々の化合物Ｍ
Ｆ−ＰＡおよびＰＡの調査は、相の相互の偏差が分析物ＰＡおよび内標準ＭＦ−
ＰＡの間よりも顕著に大きいことを示した。これは、化合物ＭＦ−ＰＡが優れて
内標準ないしは随伴物質として適当であることを強調する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ， ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，Ｃ Ａ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ， ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，Ｋ Ｅ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，Ｒ Ｕ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ， ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ

Claims (36)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 物理的、化学的および生物学的過程における多環式芳香族化
   合物（ＰＡ）の随伴物質または内標準として、外標準としてまたはモデル化合物
   としてのモノフッ素化多環式芳香族化合物（ＭＦ−ＰＡ）の使用。
2. 【請求項２】 多環式芳香族化合物ＰＡが、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＰＡＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｐ
   ＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
   ＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
   ＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
   個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＯＳＣ） 多環式芳香族炭化水素であることを特徴とする請求項１記載の使用。
3. 【請求項３】 化合物ＰＡＣがビフェニル、トリフェニレン、ポリフェニレ
   ンおよび縮合多環式芳香族化合物（ｃＰＡＣ）であることを特徴とする請求項２
   記載の使用。
4. 【請求項４】 化合物ｃＰＡＣがナフタリン、アセナフチレン、アセナフテ
   ン、フェナントレン、フルオレン、アントラセン、クリセン、ピレン、フルオラ
   ンテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［ｂ
   ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、ベ
   ンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびインデノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレン（簡
   約すると：ＥＰＡ−ｃＰＡＣ）ならびにテトラベンゾナフタリンまたはフェナン
   トロ［３，４−ｃ］フェナントレン（簡約すると：ＳＲＭ８６９−ｃＰＡＣ）で
   あることを特徴とする請求項４記載の使用。
5. 【請求項５】 化合物 − ＰＡＯＣがジベンゾジオキシンおよびジベンゾフランであり、 − ＰＡＳＣがジベンゾジチインおよびジベンゾチオフェンでありかつ − ＰＡＯＳＣがフェノキサチインであることを特徴とする請求項２記載の使用
   。
6. 【請求項６】 化合物ＰＡが、少なくとも１個の塩素原子、臭素原子および
   ／または沃素原子で置換されていることを特徴とする請求項１から５までのいず
   れか１項記載の使用。
7. 【請求項７】 化合物ＰＡがポリ塩素化されたか、ポリ臭素化されたかまた
   はポリ塩素化されかつポリ臭素化されたビフェニル、テルフェニルまたはクアテ
   ルフェニルＰＡＣまたはジベンゾジオキシンまたはジベンゾフランＰＡＯＣであ
   ることを特徴とする請求項６記載の使用。
8. 【請求項８】 化合物ＭＦ−ＰＡが、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＭＦ−ＰＡＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｍ
   Ｆ−ＰＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
   Ｆ−ＰＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
   Ｆ−ＰＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
   個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＯＳＣ）、 モノフッ素化多環式芳香族炭化水素であることを特徴とする請求項１から７まで
   のいずれか１項記載の使用。
9. 【請求項９】 化合物ＭＦ−ＰＡＣが位置異性のモノフッ素化されたビフェ
   ニル、トリフェニレン、ポリフェニレンおよび位置異性のモノフッ素化された縮
   合多環式芳香族化合物（ＭＦ−ｃＰＡＣ）であることを特徴とする請求項８記載
   の使用。
10. 【請求項１０】 化合物ＭＦ−ｃＰＡＣが位置異性のモノフッ素化されたナ
    フタリン、アセナフチレン、アセナフテン、フェナントレン、フルオレン、アン
    トラセン、クリセン、ピレン、フルオランテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベ
    ンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［ｂ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン
    、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびイン
    デノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレンならびにテトラベンゾナフタリンまたはフェ
    ナントロ［３，４−ｃ］フェナントレンであることを特徴とする請求項９記載の
    使用。
11. 【請求項１１】 化合物 − ＭＦ−ＰＡＯＣが位置異性のモノフッ素化されたジベンゾジオキシンおよび
    ジベンゾフランであり、 − ＭＦ−ＰＡＳＣが位置異性のモノフッ素化されたジベンゾジチインおよびジ
    ベンゾチオフェンでありかつ − ＭＦ−ＰＡＯＳＣが位置異性のモノフッ素化されたフェノキサチインである
    ことを特徴とする請求項８記載の使用。
12. 【請求項１２】 化合物ＭＦ−ＰＡは少なくとも１個の塩素原子、臭素原子
    および／または沃素原子で置換されていることを特徴とする請求項８から１１ま
    でのいずれか１項記載の使用。
13. 【請求項１３】 化合物ＭＦ−ＰＡがポリ塩素化されたか、ポリ臭素化され
    たかまたはポリ塩素化されかつポリ臭素化された位置異性のモノフッ素化された
    ビフェニル、テルフェニルまたはクアテルフェニルＭＦ−ＰＡＣまたはジベンゾ
    ジオキシンまたはジベンゾフランＭＦ−ＰＡＯＣであることを特徴とする請求項
    ８記載の使用。
14. 【請求項１４】 化合物ＭＦ−ＰＡを、 − 化合物ＰＡと一緒に物理的、化学的および／または生物学的過程を通り、引
    き続きこれらと一緒にまたはこれらと別個に検出および／または分析される内標
    準として、 − 化合物ＰＡの代わりに、物理的、化学的および／または生物学的過程をこれ
    ら過程の校正の目的のために通り、かつ化合物ＰＡと別個に分析および／または
    検出される外標準として、および／または − 化合物ＰＡの代わりに、化学的および／または生物学的過程を反応機構の解
    明の目的のために通り、かつその反応生成物が検出および／または分析されるモ
    デル化合物として 使用することを特徴とする請求項１から１３までのいずれか１項記載の使用。
15. 【請求項１５】 物理的過程が少なくとも１種の化合物ＰＡおよび少なくと
    も１種の化合物ＭＦ−ＰＡまたはこれらの化合物を含有する物質混合物の、蒸発
    、凝縮、凍結、融解、昇華、溶解、分散、乳化、（再）結晶、沈殿、破砕、凝集
    、混合、少なくとも２つの異なる物質相間の分配、および／または音波、電磁線
    、粒子線および／または電場および／または磁場での相互作用であることを特徴
    とする請求項１から１４までのいずれか１項記載の使用。
16. 【請求項１６】 生物学的過程が生化学的過程または分子生物学的過程であ
    ることを特徴とする請求項１から１５までのいずれか１項記載の使用。
17. 【請求項１７】 随伴物質、外標準および／またはモデル化合物ＭＦ−ＰＡ
    が化合物ＰＡと同じ基本構造を有することを特徴とする請求項１から１６までの
    いずれか１項記載の使用。
18. 【請求項１８】 Ｉ） 少なくとも１種の分析物ＰＡおよび／またはこれが
    含有されている試料の調製、ならびに ＩＩ） 分離および ＩＩＩ） 分析物ＰＡの検出および／または分析により化合物ＰＡ（分析物）の
    定性分析および定量分析する方法において、少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡ
    を工程（Ｉ）、（ＩＩ）および／または（ＩＩＩ）において随伴物質として公知
    濃度で内標準として添加することを特徴とする化合物ＰＡ（分析物）の定性分析
    および定量分析する方法。
19. 【請求項１９】 少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡを工程Ｉにおいて添加
    することを特徴とする請求項１８記載の方法。
20. 【請求項２０】 外標準を種々の濃度で分析し、生じる測定値から少なくと
    も１つの校正曲線を形成することによって、校正すべき分析方法を用いる少なく
    とも１つの外標準の定量分析による化合物ＰＡの分析方法を校正する方法におい
    て、外標準として少なくとも１種の化合物ＭＦ−ＰＡを使用することを特徴とす
    る化合物ＰＡの分析方法の校正方法。
21. 【請求項２１】 生物体の代謝中に少なくとも１種のモデル化合物を導入し
    、モデル化合物を代謝しならびに代謝産物を単離し、分離しおよび同定すること
    により生物体中での化合物ＰＡの生化学反応を分析する方法において、その際モ
    デル化合物として、化合物ＰＡと同じ基本構造を有する化合物ＭＦ−ＰＡを使用
    することを特徴とする生物体中での化合物ＰＡの生化学反応の分析方法。
22. 【請求項２２】 化合物ＰＡが、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＰＡＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｐ
    ＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
    ＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｐ
    ＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
    個の窒素原子を含有する（ＰＡＮＯＳＣ） 多環式芳香族炭化水素であることを特徴とする請求項１８または１９記載の方法
    、請求項２０記載の方法または請求項２１記載の方法。
23. 【請求項２３】 化合物ＰＡＣがビフェニル、トリフェニレン、ポリフェニ
    レンおよび縮合多環式芳香族化合物ｃＰＡＣであることを特徴とする請求項１８
    、１９または２２記載の方法、請求項２０または２２記載の方法または請求項２
    １または２２記載の方法。
24. 【請求項２４】 化合物ｃＰＡＣがナフタリン、アセナフチレン、アセナフ
    テン、フェナントレン、フルオレン、アントラセン、クリセン、ピレン、フルオ
    ランテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベンゾ［ｋ］フルオランテン、ベンゾ［
    ｂ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ［ａ：ｈ］アントラセン、
    ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびインデノ［１，２，３−ｃ：ｄ］ピレン（
    簡約すると：ＥＰＡ−ｃＰＡＣ）ならびにテトラベンゾナフタリンまたはフェナ
    ントロ［３，４−ｃ］フェナントレン（簡約すると：ＳＲＭ８６９−ｃＰＡＣ）
    であることを特徴とする請求項１８、１９、２２または２３記載の方法、請求項
    ２０、２２または２３記載の方法または請求項２１から２３までのいずれか１項
    記載の方法。
25. 【請求項２５】 化合物 − ＰＡＯＣがジベンゾジオキシンおよびジベンゾフランであり、 − ＰＡＳＣがジベンゾジチインおよびジベンゾチオフェンでありかつ − ＰＡＯＳＣがフェノキサチインであることを特徴とする請求項１８、１９ま
    たは２２から２４までのいずれか１項記載の方法、請求項２０または２２から２
    ４までのいずれか１項記載の方法または請求項２１から２４までのいずれか１項
    記載の方法。
26. 【請求項２６】 化合物ＰＡは少なくとも１個の塩素原子、臭素原子および
    ／または沃素原子で置換されていることを特徴とする請求項１８、１９または２
    ２から２５までのいずれか１項記載の方法または請求項２０または２０から２５
    までのいずれか１項記載の方法または請求項２１から２５までのいずれか１項記
    載の方法。
27. 【請求項２７】 化合物ＰＡがポリ塩素化されたか、ポリ臭素化されたかま
    たはポリ塩素化されかつポリ臭素化されたビフェニル、テルフェニルまたはクア
    テルフェニルＰＡＣまたはジベンゾジオキシンまたはジベンゾフランＰＡＯＣで
    あることを特徴とする請求項２６記載の方法。
28. 【請求項２８】 化合物ＭＦ−ＰＡが、その環系中に − ヘテロ原子不含である（ＭＦ−ＰＡＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＯＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＳＣ）か、 − 少なくとも１個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の硫黄原子を含有する（Ｍ
    Ｆ−ＰＡＯＳＣ）か、 − 少なくとも１個の酸素原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
    Ｆ−ＰＡＯＮＣ）か、 − 少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１個の窒素原子を含有する（Ｍ
    Ｆ−ＰＡＮＳＣ）かまたは − 少なくとも１個の酸素原子、少なくとも１個の硫黄原子および少なくとも１
    個の窒素原子を含有する（ＭＦ−ＰＡＮＯＳＣ） モノフッ素化多環式芳香族炭化水素であることを特徴とする請求項１８、１９ま
    たは２２から２７までのいずれか１項記載の方法、請求項２０または２２から２
    ７までのいずれか１項記載の方法または請求項２１から２７までのいずれか１項
    記載の方法。
29. 【請求項２９】 化合物ＭＦ−ＰＡＣがモノフッ素化されたビフェニル、ト
    リフェニレン、ポリフェニレンおよび縮合多環式芳香族化合物（ＭＦ−ｃＰＡＣ
    ）であることを特徴とする請求項２８記載の方法。
30. 【請求項３０】 化合物ＭＦ−ｃＰＡＣがモノフッ素化されたナフタリン、
    アセナフチレン、アセナフテン、フェナントレン、フルオレン、アントラセン、
    クリセン、ピレン、フルオランテン、ベンゾ［ａ］アントラセン、ベンゾ［ｋ］
    フルオランテン、ベンゾ［ｂ］フルオランテン、ベンゾ［ａ］ピレン、ジベンゾ
    ［ａ：ｈ］アントラセン、ベンゾ［ｇ：ｈ．ｉ］ペリレンおよびインデノ［１，
    ２，３−ｃ：ｄ］ピレンならびにテトラベンゾナフタリンまたはフェナントロ［
    ３，４−ｃ］フェナントレンであることを特徴とする請求項２９記載の方法。
31. 【請求項３１】 化合物 − ＭＦ−ＰＡＯＣがモノフッ素化されたジベンゾジオキシンおよびジベンゾフ
    ランであり、 − ＭＦ−ＰＡＳＣがモノフッ素化されたジベンゾジチインおよびジベンゾチオ
    フェンでありかつ − ＭＦ−ＰＡＯＳＣがモノフッ素化フェノキサチインであることを特徴とする
    請求項２８記載の方法。
32. 【請求項３２】 化合物ＭＦ−ＰＡは少なくとも１個の塩素原子、臭素原子
    および／または沃素原子で置換されていることを特徴とする請求項１８、１９ま
    たは２２から３１までのいずれか１項記載の方法、請求項２０または２２から３
    １までのいずれか１項記載の方法または請求項２１から３１までのいずれか１項
    記載の方法。
33. 【請求項３３】 化合物ＭＦ−ＰＡがポリ塩素化されたか、ポリ臭素化され
    たかまたはポリ塩素化されかつポリ臭素化されたビフェニル、テルフェニルまた
    はクアテルフェニルＭＦ−ＰＡＣまたはジベンゾジオキシンまたはジベンゾフラ
    ンＭＦ−ＰＡＯＣであることを特徴とする請求項３２記載の方法。
34. 【請求項３４】 随伴物質または内標準が少なくとも１種の分析物ＰＡと同
    じ基本構造を有することを特徴とする請求項１８、１９または２２から３３のい
    ずれか１項記載の方法。
35. 【請求項３５】 外標準が少なくとも１種の分析物ＰＡと同じ基本構造を有
    することを特徴とする請求項２０または２２から３３までのいずれか１項記載の
    方法。
36. 【請求項３６】 請求項１８から３５までのいずれか１項記載の方法におい
    て使用するためのモノフッ素化多環式芳香族炭化水素ＭＦ−ＰＡを含有する包装
    物（“キット”）。