JP2003512388A - 免疫治療で使用される修飾ペプチドおよびペプチド模倣体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−ＧＩｙ−ＯＨ（式Ｉ）に由来し、一般式（ＩＩ）：Ｑ−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ９−Ａ１０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ｚを有する修飾されたペプチドに関する。一般式（ＩＩ）において、Ａ１〜Ａ１３は式Ｉのアミノ酸に一致し、ＱはＨに一致し、かつＺはＯＨに一致する。本発明による修飾は下記から選択される：ａ）非天然アミノ酸またはβアミノ酸によるＡ１〜Ａ１３における１個〜６個（好ましくは１個〜４個）のアミノ酸の置換；ｂ）還元型アミド結合またはエチレン等電子配置体による１つまたは複数のアミド結合の置換；ｃ）Ｑおよび／またはＺにおける置換からなる群ａ、群ｂまたは群ｃの１つまたは複数、そして場合により、ｄ）修飾が合計で６個までの天然アミノ酸による置換。本発明のペプチドは、自己免疫疾患に罹患している患者における寛容性誘導を誘導させるために使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）に基づく修飾ペプチド、そのよ
うなペプチドを含む薬学的組成物、ならびに自己免疫疾患に罹患している患者に
おける寛容性誘導を誘導するためのこれらのペプチドの使用に関する。

【０００２】 免疫系は、自己抗原に対して組み込まれている寛容性によって達成される、異
物抗原（非自己抗原）と自己抗原（個体自身の身体に由来する自身の抗原）との
識別という原理に基づいて確立される。

【０００３】 免疫系は、Ｔリンパ球およびＢリンパ球などの特定の細胞を活性化し、そして
インターロイキン、抗体および補体因子のような可溶性因子を産生することによ
って個体を異物抗原から保護し、かつ異物抗原の曝露に対して応答する。免疫系
が応答する抗原は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）によって分解され、そして抗原のフ
ラグメントが、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩ糖タンパク質を伴っ
て細胞表面に発現する。ＭＨＣ糖タンパク質−抗原フラグメントの複合体がＴ細
胞に提示され、Ｔ細胞は、そのＴ細胞受容体によって、その抗原フラグメントを
、抗原フラグメントが結合するＭＨＣクラスＩＩタンパク質と一緒に認識する。
Ｔ細胞が活性化し、すなわち、増殖し、かつ／またはインターロイキンを産生し
て、攻撃中の抗原に向かう活性化リンパ球の増殖をもたらす（Ｇｒｅｙ他、Ｓｃ
ｉ．Ａｍ．、２６１：３８〜４６、１９８９）。

【０００４】 自己抗原はまた、一連のプロセシングを受けて、ＭＨＣ糖タンパク質による抗
原フラグメントとしてＴ細胞に提示される（Ｊａｒｄｅｔｓｋｙ他、Ｎａｔｕｒ
ｅ、３５３：３２６〜３２９、１９９１）。従って、自己認識は免疫系に固有で
ある。正常な状況のもとでは、免疫系は自己抗原に対して寛容であり、これらの
自己抗原による免疫応答の活性化が回避されている。

【０００５】 自己抗原に対する寛容性が失われた場合、免疫系は１つまたは複数の自己抗原
に対して活性化し、その結果、自己反応性Ｔ細胞の活性化および自己抗体の産生
がもたらされる。この現象は、自己免疫性と呼ばれている。免疫応答は一般に破
壊的であり、すなわち、侵入した異物抗原を破壊することが意味されるので、自
己免疫応答は身体自身の組織の破壊を引き起こし得る。

【０００６】 自己免疫疾患に対するＴ細胞の寄与がいくつかの研究で明らかにされている。
マウスでは、実験的な自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）が、ＭＨＣクラスＩＩ分子
に対して複合体を形成するミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の１つのエピト
ープに対するその特異性によって関係づけられるＴ細胞の非常に限定された一群
により媒介されている。様々な自己免疫疾患に対して大きな感受性を有する種で
あるルイスラットでは、疾患がＴ細胞によって媒介されることが示されている。
ヒトにおいてもまた、自己免疫疾患は自己攻撃的なＴ細胞の発達と関係している
ことが考えられている。

【０００７】 破壊的な自己免疫応答が、非常に多くの活性化されたリンパ球およびＭＨＣク
ラスＩＩ発現細胞が存在することにより生じる慢性的な炎症プロセスによって関
節軟骨の一体性が破壊される慢性関節リウマチ（ＲＡ）などの様々な疾患に関係
している。軟骨の存在は、局所的な炎症応答を持続させるために必要であるにす
ぎないと考えられる：軟骨の分解が、ＲＡにおける軟骨応答性の自己反応性Ｔ細
胞の活性と関連することが示唆されている（Ｓｉｇａｌｌ他、Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ
．Ｒｈｅｕｍａｔ．６：５９、１９８８；Ｇｌａｎｔ他、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．Ｔｒａｎｓ．１８：７９６、１９９０；Ｂｕｒｍｅｓｔｅｒ他、Ｒｈｅｕｍ
ａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、Ｓｍｏｌｅｎ、Ｋａｌｄｅｎ，Ｍａｉｎｉ（
編）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ
、１９９２）。さらに、軟骨をＲＡ患者から手術により除くことによって、炎症
プロセスが低下することが示された（Ｒ．Ｓ．Ｌａｓｋｉｎ、Ｊ．Ｂｏｎｅ Ｊ
ｏｉｎｔ Ｓｕｒｇｅｒｙ（Ａｍ）、７２：５２９、１９９０）。従って、軟骨
タンパク質は、Ｔ細胞を刺激する能力を有する標的自己抗原であると見なされて
いる。これらの自己反応性Ｔ細胞の活性化により、自己免疫疾患の発症がもたら
される。しかし、慢性関節リウマチの開始において役割を果たす自己抗原性成分
の同定は、これまで要領を得ないままであった。

【０００８】 軟骨の破壊をもたらす炎症応答は、例えば、ステロイド薬などのいくつかの薬
物によって処置することができる。しかし、これらの薬物は、多くの場合、毒性
副作用を有する非特異的な免疫抑制薬である。非特異的な免疫抑制の欠点のため
に、これは非常に好ましくない治療になっている。

【０００９】 抗原に対して特異的な非毒性の免疫抑制治療は、非特異的な免疫抑制に代わる
非常に注目される代替法を提供する。この抗原特異的な治療は、標的自己抗原を
用いて、または標的自己抗原に由来する合成されたＴ細胞反応性ペプチドを用い
て患者を処置することを伴う。これらの合成ペプチドは、自己抗原のＴ細胞エピ
トープに対応しており、自身および自己抗原の両方に対する特異的なＴ細胞の寛
容性を誘導するために使用することができる。免疫系の脱感作または免疫学的寛
容性は、抗原またはエピトープが与えられているか、あるいは抗原またはエピト
ープを吸入している動物が、その抗原またはエピトープが全身的な経路で導入さ
れたときに、そのような抗原またはエピトープに対する全身的な免疫応答の発達
をより小さくし得るという長期間の観測で認められる現象に基づく。

【００１０】 慢性関節リウマチは、ＨＬＡ−ＤＲ４陽性者においてより高頻度で発生する自
己免疫疾患である。疾患との関連性により、ＤＲ４分子が自己抗原をＴ細胞に提
示していることが示される場合がある。この自己免疫疾患の標的は、マトリック
ス内で組織化される産物を産生する特徴的な細胞タイプが関節の軟骨細胞により
示される関節である。ＲＡにおいて見られるような関節の破壊は軟骨特異的な自
己反応性Ｔ細胞によって媒介されていると考えられる。軟骨由来タンパク質のヒ
ト軟骨ｇｐ−３９（ＨＣｇｐ−３９）が、最近、ＲＡにおける候補の自己抗原と
して同定された。２６３〜２７５の配列を含むペプチドであるＨＣｇｐ−３９タ
ンパク質の最も有力なエピトープが、ＲＡ患者において優先的に認識された。こ
のことは、このエピトープが慢性関節リウマチにおける自己免疫攻撃の標的であ
ることを示唆している。１８名のＲＡ患者の内の８名がこのペプチドに応答し、
そして健康なドナー群では応答者は見出されなかった（Ｖｅｒｈｅｉｊｄｅｎ他
、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．４０：１１１５、１９９７）。従って、こ
のデータは、このペプチドまたはＨＣｇｐ−３９タンパク質が関節における免疫
認識の標的であることを強く示唆している。

【００１１】 関節疾患に対するＨＣｇｐ−３９の重要性が、Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるそ
の関節炎生成性によってさらに明らかにされた。ＩＦＡと混合されたμｇ量のタ
ンパク質を胸部領域に１回注射することによって、ＲＡを思わせる慢性的な関節
の炎症が誘導された。

【００１２】 ＨＣｇｐ−３９ペプチド２６３−２７５に対する応答が、ＨＣｇｐ−３９によ
る免疫化を行った後のＤＲＢ１^＊０４０１トランスジェニックマウスから１組の
ＤＲＢ１^＊０４０１拘束されるペプチド特異的なＴ−Ｔハイブリドーマを作製す
ることによってさらに調べられた。ＤＲ４（ＤＢ１^＊０４０１）に関連してペプ
チド２６３−２７５に特異的なハイブリドーマの細かい特異性が明らかにされ、
そして比較された。その結果、ＤＲＢ１^＊０４０１によりコードされる分子によ
って提示される２６３−２７５エピトープのそれらの認識が異なる３つのハイブ
リドーマが同定された。（使用された３つのハイブリドーマの間におけるエピト
ープ認識の違いを、２６３−２７５の配列内でのＮ端短縮ペプチドおよびＣ端短
縮ペプチドがこれらの異なるハイブリドーマを刺激するために使用されたときに
認めることができた）。５Ｇ１１ハイブリドーマが２６３−２７５の配列に対し
て最適に応答することが見出された。これに対して、８Ｂ１２ハイブリドーマに
よる認識は２６４−２７４の配列付近に集中していたが、１４Ｇ１１ハイブリド
ーマは２６４−２７５に対して最適な応答性を有していた。

【００１３】 ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）に反応し得るＴ細胞の寛容化はＲＡ患者に
とって有益であり得る。本発明は、免疫応答を誘導するその能力において、そし
てその寛容化能において優れている、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）配列に
基づく修飾ペプチド誘導体を規定している。

【００１４】 驚くべきことに、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）に基づく特定のペプチド
修飾が、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）ペプチドに特異的な１組のＴ細胞ハ
イブリドーマに対してアゴニスト的であり、そして２６３−２７５エピトープ配
列を含むペプチドで刺激された後で作製された２つのヒトＴ細胞クローンの刺激
に優れていることが見出された。さらに、これらの修飾ペプチドは、インビボで
優れた寛容化能を示した。

【００１５】 従って、本発明の１つの局面により、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−
Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−ＧＩｙ−
ＯＨ（式Ｉ；配列番号１）に由来し、一般式Ｑ−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５
−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ９−Ａ１０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ｚ（式ＩＩ）を
有する修飾されたペプチドが提供される。一般式ＩＩにおいて、Ａ１〜Ａ１３は
式Ｉのアミノ酸に一致し、ＱはＨに一致し、かつＺはＯＨに一致する。本発明に
よる修飾は、 ａ）非天然アミノ酸またはβアミノ酸によるＡ１〜Ａ１３における１個〜６個
（好ましくは１個〜４個）のアミノ酸の置換 ｂ）還元型アミド結合またはエチレン等電子配置体による１つまたは複数のア
ミド結合の置換 ｃ）Ｑおよび／またはＺにおける置換 からなる群から選択される。これらの群の１つまたは複数から選択され得る修飾
の数は１〜６である。さらに、これらのアミノ酸は他の天然アミノ酸によって置
換され得るが、置換の総数は６の数を超えない。

【００１６】 式Ｉ（ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５））に基づく修飾ペプチドは、エキソ
ペプチダーゼにより触媒される加水分解を低下させるＣ末端修飾および／または
Ｎ末端修飾によって安定化され得る。そのような修飾には、Ｎ末端のアシル化（
例えば、アシル化＝Ａｃ−ペプチド）、Ｃ末端へのアミド導入（例えば、ペプチ
ド−ＮＨ_２）、アシル化およびアミド導入の組合せ（例えば、Ａｃ−ペプチド−
ＮＨ_２）、そして、例えば、Ｌ−アミノ酸の代わりにＤ−アミノ酸の導入が含ま
れ得る。他の修飾は、エンドペプチダーゼによる加水分解の防止に集中している
。

【００１７】

【表１】

【００１８】 これらの修飾の例には、Ｌ−アミノ酸の代わりにＤ−アミノ酸の導入、修飾ア
ミノ酸、ペプチド内での環化、修飾型ペプチド結合（例えば、還元型ペプチド結
合Ψ［ＣＨ_２ＨＮ］の導入）およびペプトイド（Ｎ−アルキル化グリシン誘導体
）が挙げられる。

【００１９】 他のペプチドアナログは式Ｉまたは一般式ＩＩのペプチドに関連し得るが、従
来の−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ペプチド結合の代わりに、表１に示される結合またはそ
の任意の組合せが、個々の−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−結合の代わりに使用され得る。Ｎ
末端のアミノ基が除かれている場合（例えば、式ＩＩにおいてＡ１＝デスアミノ
アルギニンである場合）、式ＩＩのＱは、原子が存在しないことに対応する。

【００２０】 本発明による好ましいペプチドは、Ｑが、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、ホルミ
ル、（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニル、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ _１〜６ ）アルキルオキシカルボニル、（Ｃ_２〜６）アルケニルオキシカルボニル
、（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜６）アルキル；（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ _１〜４ ）アルキルオキシカルボニル、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−
Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは１〜１０である）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ _２ −（式中、ｍは３〜４である）；１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル
、１−メチル−ピリジニウム−４−カルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいは
Ａ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜
５である）である場合、Ｑは存在せず； ＺがＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_２〜６）アルケニル、
（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキル、（Ｃ_６〜１４）（Ｃ_４〜１３）
ヘテロアリール（Ｃ_１〜６）アルキルまたはＮＲ_１Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２ は独立して、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキルまたは（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_{１〜 ６} ）アルキルから選択される）である）であり； そして場合により、ＱおよびＺは、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに位置
する合計で１０個までのアミノ酸をさらに含むペプチドである。Ａ１〜Ａ１３に
おける１つまたは複数の他の天然アミノ酸による置換は、好ましくは４つ以下の
位置において行われ、より好ましくは２つ以下の位置において行われる。

【００２１】 本発明によるペプチドでは、一般式ＩＩにおける下記の置換が好ましい： Ｑは、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、ホルミル、（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニル
、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキルオキシカルボニル、
（Ｃ_２〜６）アルケニルオキシカルボニル、（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜６ ）アルキル；（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキルオキシカルボニル、
ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは１〜１０であ
る）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ_２−（式中、ｍは３〜４である）；１
−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル、１−メチル−ピリジニウム−４−カ
ルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（
ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である場合、Ｑは存在しな
い。より好ましくは、Ｑが、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキル
カルボニル、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキルオキシカ
ルボニル、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは１
〜１０である）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ_２−（式中、ｍは３〜４で
ある）；１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル、１−メチル−ピリジニウ
ム−４−カルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ
）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である場合、Ｑ
が存在しない修飾である。さらにより好ましくは、Ｑが、Ｈ、メチル；アセチル
；カルボキシメチレン、メトキシカルボニル；ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−Ｏ
ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−、Ｄ−１−グルシチル、１−メチル−ピリジニウム−３−カ
ルボニルまたは１−メチル−ピリジニウム−４−カルボニルであるか、あるいは
Ａ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｑが
存在しないペプチドである。

【００２２】 Ａ１は、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ
−Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは
２〜５である）、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜７である
）、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−
ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（式中、ｎは２〜５である）、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−
ＣＨ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（
式中、ｎは２〜５である）、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−
ＮＨ_２］ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である。好ましくは、Ａ
１は、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（Ｃ
Ｈ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ
（Ｏ）−（式中、ｎは２〜７である）、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ _２ ）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（式中、ｎは２
〜５である）、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］ＣＨ _２ Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である。より好ましくは、Ａ１は、Ｌ
−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_４ −Ｃ（Ｏ）−、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは５〜７である）
、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−Ｃ
Ｈ_２−Ｃ（Ｏ）−｝、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２ ］ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−である。

【００２３】 Ａ２は、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−
ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である。好ましくは、
Ａ２は、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、または−Ｎ［（ＣＨ_２ ）_ｎ−ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である。より好
ましくは、Ａ２は、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_２ＯＨ］
−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−である。

【００２４】 Ａ３は、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）、Ｄ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式
中、Ｘは独立して、１つまたは複数の（Ｃ_１〜４）アルキル、ヒドロキシ、ハロ
、（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニルアミノ、アミノまたはニトロから選択される
）、Ｌ−Ｈｆｅ、Ｄ−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｄ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ、Ｄ−Ｃｈ
ａ、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｄ−Ｐａｌ（３）、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｄ−１−Ｎａｌ、
Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｄ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）、Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ
）、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝または（Ｓ）−
｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝または（Ｒ）−｛−ＮＨ−Ｃ
Ｈ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−
アリール）−ＣＨ_２−｝である。好ましくは、Ａ３は、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ
、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）またはＤ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式中、Ｘは、ハロまたはニトロで
ある）、Ｌ−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｌ−１−Ｎ
ａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ
（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝である。より好ましくは、Ａ３は、Ｌ−Ｐｈ
ｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式中、Ｘはハロまたはニトロである）、Ｌ
−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−
２−Ｎａｌ、またはＬ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）である。

【００２５】 Ａ４は、Ｌ−Ｔｈｒ、Ｄ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｓｅｒ−、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ
、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである、好ましくは、Ａ
４はＬ−ＴｈｒまたはＬ−Ａｌａである。

【００２６】 Ａ５は、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｉｌｅ、Ｌ−Ｖａｌ、Ｄ
−Ｖａｌ−、Ｌ−Ｎｖａ、Ｄ−Ｎｖａ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、（Ｒ
）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２−｝、または（Ｓ）
−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−｝である。好ましくは、Ａ５
は、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ａｌａ、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−ＣＨ（
ＣＨ_３）_２）−｝である。

【００２７】 Ａ６は、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである。好ましくは、Ａ６はＬ
−ＡｌａまたはＧｌｙである。

【００２８】 Ａ７は、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである。好ましくは、Ａ７
はＬ−ＳｅｒまたはＬ−Ａｌａである。

【００２９】 Ａ８は、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである。好ましくは、Ａ８
はＬ−ＳｅｒまたはＬ−Ａｌａである。

【００３０】 Ａ９は、Ｌ−Ｇｌｕ、Ｄ−Ｇｌｕ、Ｌ−Ａｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ
−ＡｌａまたはＧｌｙである。好ましくは、Ａ９はＬ−ＧｌｕまたはＬ−Ａｌａ
である。

【００３１】 Ａ１０は、Ｌ−Ｔｈｒ、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ
、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙである。好ましくは、Ａ
１０はＬ−ＴｈｒまたはＬ−Ａｌａである。

【００３２】 Ａ１１は、Ｇｌｙ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａまたは−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−
である。好ましくは、Ａ１１は、Ｇｌｙ、Ｌ−Ａｌａまたは−ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ
Ｈ_２−である。

【００３３】 Ａ１２は、Ｌ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｎｖａ、Ｄ−Ｎｖａ、Ｌ−Ｌｅｕ、
Ｄ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｉｌｅ、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ_３ ）_２］−ＣＨ_２−｝、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２−
｝、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（Ｓ）−｛
−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［
ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２］−ＣＨ_２−）、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ
（ＣＨ_３）_２］−ＣＨ_２−｝、（ＲＲ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２（ＣＨ（ＣＨ _３ ）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（ＲＳ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２（ＣＨ
（ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（ＳＲ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ （ＣＨ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−、または（ＳＳ）−｛−ＮＨ−Ｃ
Ｈ［ＣＨ_２（ＣＨ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝である。好ましくは
、Ａ１２はＬ−Ｖａｌまたは（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ_３）_２］−Ｃ
Ｈ_２−｝である。

【００３４】 Ａ１３は、Ｇｌｙ、Ｌ−ＡｌａまたはＤ−Ａｌａである。好ましくは、Ａ１３
はＧｌｙまたはＬ−Ａｌａである。

【００３５】 さらに、本発明によるペプチドにおいて、ＺはＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、（Ｃ_{１ 〜６} ）アルキル、（Ｃ_２〜６）アルケニル、（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４ ）アルキル、（Ｃ_４〜１３）ヘテロアリール（Ｃ_１〜６）アルキルまたはＮＲ_１ Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２は独立して、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキルまたは（Ｃ _６〜１４ ）アリール（Ｃ_１〜６）アルキルから選択される）である）である。好
ましくは、ＺはＯＲ（式中、ＲはＨまたはＮＲ_１Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２は
独立して、Ｈまたは（Ｃ_１〜６）アルキルから選択される）である）である。よ
り好ましくは、Ｚは、ＯＨ、ＮＨ_２またはＮＨＥｔである。

【００３６】 本発明によるペプチドは、場合により、Ｎ末端およびＣ末端において、すなわ
ち、Ａ１および／またはＡ１３の隣りに数個のアミノ酸を伸長させることができ
る。好ましくは、本発明によるペプチドは、１０個までのアミノ酸を伸長させる
ことができる。従って、ＱおよびＺは、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに
位置する合計で１０個までのアミノ酸をさらに含むことができる。

【００３７】 これらのペプチドは、いくつかの位置において一般式Ｉとは異なり得るが、好
ましくは１個〜４個の位置で修飾され、より好ましくは２個〜３個の位置で修飾
される。

【００３８】 本明細書中で使用されている用語（Ｃ_１〜６）アルキルは、１個〜６個の炭素
原子を有する分枝状または非分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メチル、エ
チル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルお
よびヘキシルを意味する。１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基が最も好ま
しい。

【００３９】 用語（Ｃ_１〜４）アルキルは、１個〜４個の炭素原子を有する分枝状または非
分枝状のアルキル基を意味する。

【００４０】 用語（Ｃ_２〜６）アルケニルは、エテニル、２−ブテニルなどの、２個〜６個
の炭素原子を有する分枝状または非分枝状のアルケニル基を意味する。（Ｃ_{１〜 ４} ）アルケニル基が好ましく、（Ｃ_１〜３）アルケニル基が最も好ましい。

【００４１】 用語（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニルは、カルボニル基に結合した、１個〜６
個の炭素原子を有する分枝状または非分枝状のアルキル基を意味し、例えば、ア
セチル基を意味する。１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基が最も好ましい
。

【００４２】 用語カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキルは、１個〜６個の炭素原子を有する分枝
状または非分枝状のアルキル基に結合したカルボキシ基を意味する。１個〜４個
の炭素原子を有するアルキル基が最も好ましい。

【００４３】 用語（Ｃ_１〜６）アルキルオキシカルボニルは、オキシカルボニル基に結合し
た分枝状または非分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メトキシカルボニル−
基またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−（Ｂｏｃ−）基を意味する。１個
〜４個の炭素原子を有するアルキル基が最も好ましい。

【００４４】 用語（Ｃ_２〜６）アルケニルオキシカルボニルは、オキシカルボニル基に結合
した、前記に定義されているように２個〜６個の炭素原子を有する分枝状または
非分枝状のアルケニル基を意味し、例えば、アリルオキシカルボニル基を意味す
る。（Ｃ_１〜４）アルケニル基が好ましく、（Ｃ_１〜３）アルケニル基が最も好
ましい。

【００４５】 用語（Ｃ_１〜６）（ジ）アルキルアミノは、１個〜６個の炭素原子を有し、す
なわち、前記に定義されているのと同じ意味を有するアルキル成分を有する（ジ
）アルキルアミノ基を意味する。１個〜４個の炭素原子を有するアルキル基が好
ましい。

【００４６】 用語アミノ（Ｃ_１〜６）アシルは、アミノ基で官能基化されている、１個〜６
個の炭素原子を有するアシル基を意味する。１個〜４個の炭素原子を有するアシ
ル基が好ましい。

【００４７】 用語（Ｃ_６〜１４）アリールは、６個〜１４個の炭素原子を有する芳香族炭化
水素基を意味し、例えば、ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、シアノ、アミノ（（
Ｃ_１〜６）アシル）または（ジ）（Ｃ_１〜６）アルキルアミノ、前記に定義され
ているのと同じ意味を有するアシル成分およびアルキル成分などの１つまたは複
数の置換基によりオルト位および／またはメタ位が場合により置換され得るフェ
ニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インデニル、アントラシルなどを意味
する。（Ｃ_６〜１０）アリール基が好ましく、フェニルが最も好ましい。

【００４８】 用語（Ｃ_４〜１３）ヘテロアリール（Ｃ_１〜６）アルキルは、４個〜１３個の
炭素原子（好ましくは、４個〜９個の炭素原子）を有し、Ｎ、Ｏおよび／または
Ｓから選択される１個のヘテロ原子を少なくとも含み、１個〜６個の炭素原子を
有する分枝状または非分枝状のアルキル基に結合した置換芳香族または非置換芳
香族基を意味する。ヘテロアリール基上の置換基は、アリール基について示され
た置換基の群から選択され得る。窒素を含有するヘテロアリール基は、炭素原子
または窒素原子のいずれかを介してアルキル基に結合し得る。アルキル基の中で
、１個〜４個の炭素原子を含有する基が好ましい。

【００４９】 用語（Ｃ_１〜６）アルキル（Ｃ_６〜１４）アリールは、前記に定義されたアリ
ール基に結合した、前記に定義された分枝状または非分枝状のアルキル基を意味
する。（Ｃ_６〜１０）アリール基が好ましく、フェニルが最も好ましい。アルキ
ル基の中で、１個〜４個の炭素原子を含有する基が好ましい。

【００５０】 用語（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜６）アルキルは、アルキル基が、前記に
定義された（Ｃ_１〜６）アルキル基であり、かつアリール基が、前記に定義され
た（Ｃ_６〜１４）アリールであるアリールアルキル基を意味し、例えば、ベンジ
ル−（Ｂｚｌ）基またはトリフェニルメチル−（Ｔｒｔ）基を意味する。（Ｃ_{６ 〜１０} ）アリール基が好ましく、フェニルが最も好ましい。アルキル基の中で、
１個〜４個の炭素原子を含有する基が好ましい。

【００５１】 用語（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニルアミノは、そのアルキル基が１個〜６個
の炭素原子を有し、かつ前記に定義されているのと同じ意味を有するアルキルカ
ルボニルアミノ基を意味する。１個〜４個の炭素原子を含有するアルキル基が好
ましい。

【００５２】 用語（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキルオキシカルボニルは、アル
キル基が（Ｃ_１〜４）アルキル基であり、かつアリール基が前記のように定義さ
れる、アルキルオキシカルボニル基に結合した（Ｃ_６〜１４）アリール基を意味
し、例えば、ベンジルオキシカルボニル−（Ｚ）基またはフルオレニルメトキシ
カルボニル−（Ｆｍｏｃ）基を意味する。（Ｃ_６〜１０）アリール基が好ましく
、フェニルが最も好ましい。

【００５３】 用語ハロは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味する。

【００５４】 天然に存在するアミノ酸は、下記のその略号（３文字コード）を使用して示さ
れる：アラニン（Ａｌａ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、
アスパラギン酸（Ａｓｐ）、システイン（Ｃｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、グ
ルタミン酸（Ｇｌｕ）、グリシン（Ｇｌｙ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、セリン（
Ｓｅｒ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、リシン（Ｌｙｓ）、
メチオニン（Ｍｅｔ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、ト
レオニン（Ｔｈｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、チロシン（Ｔｙｒ）およびバ
リン（Ｖａｌ）。これらのすべてのアミノ酸の立体化学はＬ−として定義される
。

【００５５】 非天然アミノ酸は、天然アミノ酸の化学構造と同一でない化学構造を有する、
場合によりＮα置換されたα−アミノ酸である。非天然アミノ酸としては、例え
ば、Ｐｈｅ（Ｘ）（Ｘは、Ｐｈｅのフェニル環のパラ位に存在する置換基である
）、ｈＳｅｒ（２−アミノ−４−ヒドロキシブタン酸）、ノルロイシン（Ｎｌｅ
、２−アミノヘキサン酸）、ノルバリン（Ｎｖａ、２−アミノペンタン酸）、Ｌ
−Ｈｆｅ（Ｌ−α−ホモフェニルアラニン）、Ｄ−Ｈｆｅ（Ｄ−α−ホモフェニ
ルアラニン）、Ｌ−Ｔｈｉ（β−チエニル−Ｌ−アラニン）、Ｄ−Ｔｈｉ（β−
チエニル−Ｄ−アラニン）、Ｌ−Ｃｈａ（β−シクロヘキシル−Ｌ−アラニン）
、Ｄ−Ｃｈａ（β−シクロヘキシル−Ｄ−アラニン）、Ｌ−Ｐａｌ（３）（β−
３−ピリジル−Ｌ−アラニン）、Ｄ−Ｐａｌ（３）（β−３−ピリジル−Ｄ−ア
ラニン）、Ｌ−１−Ｎａｌ（β−１−ナフチル−Ｌ−アラニン）、Ｄ−１−Ｎａ
ｌ（β−１−ナフチル−Ｄ−アラニン）、Ｌ−２−Ｎａｌ（β−２−ナフチル−
Ｌ−アラニン）、Ｄ−２−Ｎａｌ（β−２−ナフチル−Ｄ−アラニン）、Ｌ−Ｓ
ｅｒ（Ｂｚｌ）（Ｏ−ベンジル−Ｌ−セリン）、Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）（Ｏ−ベ
ンジル−Ｄ−セリン）、ならびにＮＶａｌ（Ｎ−イソプロピルグリシン）、ＮＡ
ｒｇ（Ｎ−（３−グアニジノプロピル）グリシン）およびＮｈＳｅｒ（Ｎ−（２
−ヒドロキシエチル）グリシン）などのＮ−アルキルグリシン誘導体が挙げられ
る。この群のアミノ酸には、その立体化学がＤ−として定義される天然に存在す
るアミノ酸もまた含まれる。

【００５６】 還元型アミド結合を含むペプチドにおいては、アミノ酸の元のカルボニル基が
メチレン基によって置換されていることを理解しなければならない。エチレン等
電子配置体を含むペプチドにおいては、元のカルボキサミソ官能基（−Ｃ（Ｏ）
−ＮＲ−）はエチレン基（−ＣＨ＝ＣＲ−）によって置換されている。

【００５７】 配列内の２つのアミノ酸残基の間における用語Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］は、それらの
アミノ酸残基間の元のアミド結合（−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）が還元型アミド結合（
−ＣＨ_２ＮＨ−）によって置換されていることを意味する。

【００５８】 式Ｉに示されるアミノ酸のいくつかは、一般式２における対応する位置におい
て固定されることが好ましい。従って、本発明の好ましい実施形態は、一般式Ｑ
−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈ
ｒ−Ａ１１−Ａ１２−Ｇｌｙ−Ｚ（式ＩＩＩ）（式中、Ｑ、Ａ１、Ａ２、Ａ３、
Ａ１１、Ａ１２およびＺは前記に定義されている通りである）を有する修飾され
たペプチドである。一般式ＩＩＩにおける最も好ましい置換は、Ａ１については
、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−Ｃ（Ｏ
）−、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは５〜７である）であり、
Ａ２については、Ｌ−Ｓｅｒまたは−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（
Ｏ）−であり、Ａ３については、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式中、Ｘはハ
ロである）、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）、Ｌ−Ｔ
ｈｉ、Ｌ−ＣｈａまたはＬ−Ｐａｌ（３）である。

【００５９】 より好ましいものは、一般式ＩＶ：Ｑ−Ａｒｇ−Ａ２−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａ１２−Ｇｌｙ−Ｚ（
式中、Ｑ、Ａ２、Ａ１２およびＺは前記に定義されている通りである）をもたら
す、Ａ１がＡｒｇであり、Ａ３がＰｈｅであり、そしてＡ１１がＧｌｙである一
般式ＩＩＩによるペプチドである。

【００６０】 最も好ましいペプチドは、デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ
−ＮＨ_２、デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＣＨ_３−
（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ
−ＮＨ_２、Ｄ−１−グルシチル−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａ
ｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＣＨ _３ Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅ
ｒ−Ｐｈｅ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−
Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐ
ｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ
−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−
Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−
Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−ＯＨ
］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇ
ｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎ［（ＣＨ_２ ）_２−ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ 、Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ（Ｃｌ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２） _５ −Ｃ（Ｏ）−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇ
ｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_６−Ｃ（Ｏ
）−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈ
ｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、（Ｎ−メチル−ニコチノイル）^＋−Ａｒｇ
−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ
−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨを含む群から選択される。

【００６１】 Ｎ末端の修飾を有する修飾されたＨＣｇｐ３９（２６３−２７５）ペプチドを
合成するための好適な方法論は、式Ｖに示されているように式ＶＩの誘導体を用
いて開始される。修飾されたペプチドは、一般に使用されている固相ペプチド合
成（ＳＰＰＳ）法（Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、固相ペプチド合成、Ｐｅｐｔｉ
ｄｅｓ、１９９５、９３〜１６９、編者：Ｂ．Ｇｕｔｔｅ、Ａｃａｄｅｍｉｃ、
Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、米国；Ｐ．Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌ
ｉａｍｓ、Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ、Ｅ．Ｇｉｒａｌｔ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏ
ｎ、４９：１１０６５〜１１１３３、１９９３）によって合成される。使用され
るリンカータイプに依存して、ペプチド鎖が、エステル結合（ＰＡＣリンカー）
またはアミド結合（ＰＡＬリンカー）のいずれかを介して支持体に結合される。

【００６２】

【化１】

【００６３】 Ｆｍｏｃ−Ｃ末端アミノ酸の固体支持体への固定（ｍ＝１、Ａ−Ｂ＝Ｆｍｏｃ
）を、例えば、カップリング剤のＨＡＴＵ（Ｌ．Ｃａｒｐｉｎｏ、Ａ．Ｅｌ−Ｆ
ａｈａｍ、Ｃ．Ａ．Ｍｉｎｏｒ、Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．２０１〜２０３、１９９４）またはＰｙＢＯＰ（Ｊ．
Ｃｏｓｔａ、Ｄ．Ｌｅ−Ｎｇｕｙｅｎ、Ｂ．Ｃａｓｔｒｏ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ Ｌｅｔｔ．３１：２０５〜２０８、１９９０）およびＤｉＰＥＡを使用し
て行った後、鎖は、自動化されたペプチド合成機を使用して、適切に保護された
Ｆｍｏｃ−アミノ酸誘導体との連続的なアシル化、その後のピペリジン媒介によ
るＦｍｏｃ保護基の除去（Ａ−Ｂ＝Ｈ）によって伸長される（ｍ＝２〜１２）。
あるいは、ペンタフルオロフェニル（Ｐｆｐ）アミノ酸活性エステル（Ａ．Ｄｒ
ｙｌａｎｄ、Ｒ．Ｃ．Ｓｈｅｐｐａｒｄ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、４４：８５
９〜８７６、１９９８）を使用して、縮合を行うことができる。続いて、Ｎ末端
のアミノ酸Ｂが、同じプロトコルを使用して導入され、そしてＦｍｏｃ基が除か
れる。このようにして得られた１３量体ペプチド誘導体（Ａ＝Ｈ、Ｂ＝Ｎ−末端
アミノ酸、ｍ＝１２）は、その後、Ｎ末端の官能基化を容易に行うことができる
。Ｎ末端におけるさらなるアミド結合の導入（Ａ＝アルキルカルボニル）を、所
望する酸（Ｘ−ＯＨ）との別のＨＡＴＵ媒介縮合またはＰｙＢＯＰ媒介縮合を行
うことによって、あるいはピリジン存在下でアシル塩化物（Ｘ−Ｃｌ）とカップ
リングすることによって達成することができる。荷電を有する１−メチルピリジ
ウム−４−カルボニルユニットまたは１−メチルピリジウム−３−カルボニルユ
ニットは、樹脂からの切断（下記参照）を行った後（すなわち、式Ｖ、Ａ＝Ｈ、
Ｂ＝Ｎ末端アミノ酸、Ｚ＝ＯＲ（ただし、Ｒ＝Ｈ、アルキル）またはＺ＝ＮＲ^１ Ｒ^２（ただし、Ｒ^１、Ｒ^２＝Ｈまたはアルキル））、完全に脱保護されたペプチ
ドの自由なＮ末端とＮ−メチル（イソ）ニコチニウムヒドロキシスクシンイミド
活性エステルとの水性媒体中におけるＤｉＰＥＡ媒介反応（Ｍ．Ｌ．Ｔｅｄｊａ
ｍｕｌｉａ、Ｐ．Ｃ．Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ、Ｆ．Ｆ．Ｋｎａｐｐ、Ｊ．Ｍｅｄ
．Ｃｈｅｍ．、２８：１５７４〜１５８０、１９８５）によって導入することが
できる（式ＶにおけるＡ＝ＨからＡ＝Ｎ−メチル（イソ）ニコチニウムへの変換
を参照のこと）。

【００６４】 Ｎ−アルキル化を、ＤＭＦ／ＨＯＡｃ（９９／１、ｖ／ｖ）中におけるＮａＢ
Ｈ（ＯＡｃ）_３の存在下、固定化ペプチドを適切なアルデヒドで処理することに
よる還元的アミン化によって行うことができる（式ＶＩ、Ａ＝ＨからＡ＝アルキ
ルへの変換）。あるいは、ＤｉＰＥＡの存在下で固定化ペプチド（Ａ＝Ｈ）をハ
ロゲン化アルキルと反応することによってもまた、Ｎ−アルキル化ペプチドが得
られる（例えば、ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチルとの反応）。自由なＮＨ_２（式Ｖ
ＩにおいてＡ＝Ｈ）はまた、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＤｉＰＥＡ中における対応する塩化
カルバモイルとの反応によってカルバモイル基（例えば、メトキシカルバモイル
）で官能基化することができる（式ＶＩにおけるＡ＝ＨからＡ＝アルコキシカル
ボニルへの変換）。ＴＦＡ／Ｅｔ３ＳｉＨ／アニソール／ＲＯＨ（Ｒ＝Ｈ、アル
キル）を使用して、酸に不安定な保護基を同時に除きながらペプチドを固体支持
体から切断した後、一般式Ｖ（Ｚ＝ＯＲ）を有するペプチドはＲＰ−ＨＰＬＣに
よって精製される。あるいは、Ｃ末端には、樹脂からの切断中にアミド官能基（
Ｚ＝ＮＲ^１Ｒ^２、式中、Ｒ^１およびＲ^２＝Ｈまたはアルキル）を取り付けること
ができる。その場合、異なるリンカー（ＰＡＬ：Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｐ
ｅｐｔｉｄｅｓ、９３〜１６９、１９９５）がペプチド鎖（式ＶＩ）とＰＥＧ−
ＰＳ固体支持体との間に使用される。ＰＡＬリンカーの自由なアミノ基がアルキ
ル化され、その後に最初の（Ｃ末端）アミノ酸を結合させる場合、ポリマー支持
体から切断された後に、Ｃ末端のアルキルアミドが形成される。

【００６５】 同じＦｍｏｃ−ＳＰＰＳ法を使用して、非天然型であるが、市販のアミノ酸（
例えば、Ｄ−アミノ酸または置換されたフェニルアラニン誘導体）を含有するペ
プチドを得ることができる。これとは別に、Ｎ−アルキルグリシン誘導体（ペプ
トイドモノマー、式Ｖおよび式ＶＩにおいて、Ｒ_ｎ ^１＝アミノ酸側鎖、Ｒ_ｎ ^２＝
Ｈ）が、文献の手順（Ｊ．Ａ．Ｋｒｕｉｊｔｚｅｒ、Ｌ．Ｊ．Ｆ．Ｈｏｆｍｅｙ
ｅｒ、Ｗ．Ｈｅｅｒｍａ、Ｃ．Ｖｅｒｓｌｕｉｓ、Ｒ．Ｍ．Ｊ．Ｌｉｓｋａｍｐ
、Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．４：１５７０〜１５８０、１９９８）を使用して溶液
で最初に合成される。修飾されたＮ末端アミノ酸のβ−ホモ−Ｌ−アルギニン［
Ｂ＝ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ−ＣＨ（＝ＮＨ）ＮＨ_２）−ＣＨ_２−
Ｃ（Ｏ）］もまた、知られている手順（Ｈ．Ｍ．Ｍ．Ｂａｓｔｉａａｎｓ、Ａ．
Ｅ．Ａｌｅｗｉｊｎｓｅ、Ｊ．Ｌ．ｖａｎ ｄｅｒ Ｂａａｎ、Ｈ．Ｃ．Ｊ．Ｏ
ｔｔｅｎｈｅｉｊｍ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．３５：７６５９〜７
６６０、１９９４）に従って、ＳＰＰＳに先立って溶液で調製された。このよう
にして得られたモノマーアミノ酸における自由なＮＨ_２基をＦｍｏｃ保護基で保
護した後、ＳＰＰＳプロトコルを使用して、これらの化合物を伸長中のペプチド
（式ＶＩ）に取り込むことができる。

【００６６】 修飾されたペプチドの最後の種類には、１つまたは複数の還元型アミド結合（
式ＶにおいてＲ_ｎ ^３＝Ｈ_２）を含有するペプチドが含まれる。このような誘導体
は、改変されたＳＰＰＳプロトコルによって得ることができる（Ｊ．Ｊ．Ｗｅｎ
、Ａ．Ｒ．Ｓｐａｔｏｌａ、Ｊ．Ｐｅｔ．Ｒｅｓ．、４９：３〜１４、１９９７
）。この場合、成長中の鎖（式ＶＩにおいて１＜ｍ＜１２）の自由なＮ末端アミ
ノ酸は、還元的条件（ＮａＢＨ_３ＣＮ、ＤＭＦ／ＨＯＡｃ、９９／１、ｖ／ｖ）
のもと、取り込まれるアミノ酸アルデヒドを用いてアルキル化される。必要なＮ
−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸アルデヒドは市販されているか、または文献の方法（Ｊ
．Ｊ．Ｗｅｎ、Ｃ．Ｍ．Ｃｒｅｗｓ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍｅｔ
ｒｙ、９：１８５５〜１８５８、１９９８）によって得ることができる。このよ
うにして伸長された鎖（Ａ−Ｂ＝Ｆｍｏｃ、Ｒ_ｎ ^１＝Ｈ、Ｒ_ｎ ^２＝アミノ酸側鎖
、Ｒ_ｎ ^３＝Ｈ_２）は、続いてＢｏｃ基で保護される二級アミノ官能基（Ｒ_ｎ＋１ ^１ ＝Ｈ）を含有する。Ｆｍｏｃ保護基を除いた後、ペプチド鎖は、ＳＰＰＳプロ
トコルを使用してさらに伸長させることができる。

【００６７】

【化２】

【００６８】 あるいは、一般式ＶＩＩを有するダイマー構造を、ＳＰＰＳに先立って溶液で
合成することができる。従って、適切なアミノ酸ベンジルエステル（Ｈ_２Ｎ−Ｃ
Ｈ（Ｒ_ｎ＋１ ^２）−ＣＯ_２Ｂｚｌ）が、ダイマー状の二級アミンを得るために、
Ｆｍｏｃで保護されたアミノ酸アルデヒド（Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ_ｎ ^２）−
Ｃ（Ｏ）Ｈ）を用いて還元的にアルキル化される（ＮａＢＨ_３ＣＮ、ＤＭＦ／Ｈ
ＯＡｃ、９９／１、ｖ／ｖ）。Ｂｏｃ基によるアミノ基の保護（Ｒ_ｎ＋１ ^１＝Ｂ
ｏｃ）およびその後のベンジルエステルの水素化分解を行った後に、式ＶＩＩの
化合物が得られる。これは、ＳＰＰＳプロトコルを使用して成長中の鎖に取り込
むことができる。

【００６９】 本発明によるペプチドは、治療物質として使用することができる。より詳細に
は、本発明によるペプチドは、自己免疫疾患障害（より詳細には関節炎）に罹患
している患者における自己抗原に対する特異的なＴ細胞の寛容性を誘導させるた
めに使用することができる。

【００７０】 増強されたインビトロでの刺激活性および増強されたインビボでの活性を有す
る、ＭＨＣクラスＩＩ拘束されるＴ細胞のエピトープ構造に基づく修飾されたペ
プチドを、知られている技術を使用して選択することができる。

【００７１】 所与のＴ細胞エピトープのアゴニスト的性質を維持するためには、関連するＭ
ＨＣ分子への結合に関与している残基との競合をあまり大きくさせないか、また
は関連するＴ細胞のＴＣＲとの関わりに関与する残基に対する影響をあまり大き
くさせないことが不可欠であると考えられる。従って、アゴニスト的な修飾ペプ
チドの選択には、下記が伴う： １）関連するＭＨＣ分子に結合することに対する修飾ペプチドの親和性を明ら
かにし、野性型の非修飾ペプチドのエピトープの親和性と比較すること ２）修飾ペプチドの刺激活性を明らかにし、そしてインビトロアッセイ（ペプ
チド抗原および特異的Ｔ細胞と同時にインキュベーションされた放射線照射の抗
原提示細胞）を使用して野性型の非修飾ペプチドの活性と比較すること。好まし
くは、種々のＴＣＲクローンタイプを有するが、同じＭＨＣクラスＩＩ分子に関
連して同じエピトープと反応し得る、エピトープ特異的な、ＭＨＣクラスＩＩ拘
束されるＴ細胞の広範囲のパネルが評価されるはずである。この目的のために、
特異的なＴ細胞ハイブリドーマまたは特異的なＴ細胞株／クローンのパネルを用
いることができる。ヒトに適用される修飾されたエピトープの選択には、ヒトＴ
細胞の認識に関して選択された修飾エピトープの関連性を保護するヒトＴ細胞株
／クローンを使用することが好ましくは必要である。

【００７２】 ３）（必要な場合には）インビボでの修飾ペプチドの活性を明らかにすること
。この目的のために、種々の実験機構を使用することができる。

【００７３】 ａ）遅延型過敏性試験 ｂ）インビボで抗原を（アジュバントの存在下または非存在下で）投与した後
のエクスビボでのＴ細胞活性化アッセイ ｃ）修飾ペプチド抗原を投与することによる自己免疫疾患の実験モデルにおけ
る疾患の調節 好ましくは、野性型ペプチドと比較して、増強したインビトロでのアゴニスト活
性を有するか、または増強したインビボ作用を有する化合物が選択され得る。

【００７４】 マウスにおいて認識されつつある個々のＨＣｇｐ−３９由来ペプチドは、鼻腔
処置後にこれらのペプチドに対する活性を下方調節（ｄｏｗｎｍｏｄｕｌａｔｅ
）することが予想される。そのような活性は、問題としているペプチドを動物に
抗原接種して、ＤＴＨ応答の結果としての脚の腫れを定量することによって測定
することができる。Ｂａｌｂ／ｃマウスにおけるペプチドでの免疫化により、Ｈ
Ｃｇｐ−３９ペプチド２６３−２７５に対する免疫学的応答がもたらされる。従
って、ＨＣｇｐ−３９で免疫化されたマウスは、ＤＴＨ応答を検出するために、
ＨＣｇｐ−３９ ２６３−２７５を抗原接種することができる。インビボでの修
飾ペプチドの寛容原性を明らかにするために、マウスは、様々な濃度のＨＣｇｐ
−３９ ２６３−２７５またはペプチド誘導体を用いて鼻穴から処置することが
できる。寛容性の誘導に関して優れたプロフィルを有する修飾されたペプチド誘
導体は、元のペプチドよりも低い濃度でこのインビボアッセイにおいて活性であ
ることが予想される。天然ペプチド対修飾ペプチド誘導体に関して寛容性誘導の
効果を定量的に検出できるようにするために、様々な適用スキームおよび投薬量
を試験することができる。最後に、ＨＣｇｐ−３９ ２６３−２７５の様々な修
飾された形態が、ＨＣｇｐ−３９ ２６３−２７５により誘導されるＤＴＨ応答
をこのモデルで下方調節させることにおいて、天然の２６３−２７５ペプチドよ
りも効果的であるかどうかを調べることができる。

【００７５】 寛容性は、高用量または低用量の寛容原または本発明によるペプチドを投与す
ることによって獲得され得る。寛容原またはペプチドの量は、投与経路、投与時
期、患者の年齢、ならびに全身的な健康状態および食事に依存する。

【００７６】 一般には、体重１ｋｇあたり、０．０１μｇ〜１０００μｇのペプチドまたは
タンパク質（好ましくは０．０５μｇ〜５００μｇ、より好ましくは０．１μｇ
〜１００μｇのペプチドまたはタンパク質）の投薬量が使用され得る。

【００７７】 本発明の別の局面は、１つまたは２つ以上の本発明によるペプチドと、薬学的
に受容可能なキャリアとを含む薬学的組成物にある。

【００７８】 薬学的に受容可能なキャリアは、当業者には十分に知られており、例えば、滅
菌された生理食塩水、スクロース、リン酸カルシウム、ゼラチン、デキストリン
、寒天、ペクチン、ピーナッツ油、オリーブ油、ゴマ油および水を含む。他のキ
ャリアとして、例えば、必要な場合にはリポソームに包み込まれたＭＨＣクラス
ＩＩ分子を挙げることができる。

【００７９】 さらに、本発明による薬学的組成物は、１つまたは２つ以上のアジュバントを
含むことができる。好適なアジュバントには、特に、水酸化アルミニウム、リン
酸アルミニウム、アンフィゲン、トコフェノール類、モノホスフェニルリピドＡ
、ムラミルジペプチド、およびキル（Ｑｕｉｌｌ）Ａなどのサポニン類が含まれ
る。アジュバントの量は、アジュバント自体の性質に依存している。

【００８０】 さらに、本発明による薬学的組成物は、例えば、ソルビトール、マンニトール
、デンプン、スクロース、デキストリンおよびグルコースを含む炭水化物、アル
ブミンまたはカゼインなどのタンパク質、ならびにリン酸アルカリなどの緩衝剤
などの安定化剤を１つまたは２つ以上含むことができる。

【００８１】 好適な投与経路は、筋肉内注射、皮下注射、静脈内注射または腹腔内注射、経
口投与および鼻内投与である。経口投与および鼻内投与が好ましい投与経路であ
る。特に、抗原に対して特異的なモジュレーター細胞を、粘膜（例えば、鼻粘膜
）を介して抗原を適用することによって生じさせることができる。抗原の粘膜投
与は、そのような抗原に対する免疫学的寛容性を誘導することが示されている。

【００８２】 本発明によるペプチドはまた、関節軟骨の慢性的な炎症に関与する活性化され
た自己反応性Ｔ細胞の存在を検出するための診断方法における使用に非常に適し
ている。

【００８３】 本発明による診断方法は下記の工程を含む： ａ）個体の血液サンプルから末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離すること、 ｂ）前記のＰＢＭＣを好適な条件のもとで培養すること、 ｃ）前記のＰＢＭＣ培養物を、自己抗原あるいは１つまたは２つ以上の本発明
によるその誘導されたペプチドの存在下でインキュベーションすること、および ｄ）個体における活性化された自己反応性Ｔ細胞の存在を示す、Ｔ細胞の応答
（例えば、増殖応答）を検出すること。

【００８４】 自己反応性Ｔ細胞の増殖応答を測定することによって応答を検出する場合、例
えば、３Ｈ−チミジンなどの放射性同位体の取り込みが増殖の尺度になる。ＰＢ
ＭＣに存在する自己反応性Ｔ細胞の応答はまた、サイトカインに特異的なＥＬＩ
ＳＡを用いてサイトカインの放出を測定することによって、または^５１クロムの
放出による細胞毒性を測定することによって検出することができる。別の検出方
法は、ＦＡＣＳ分析による活性化マーカーの発現、例えば、Ｉｌ−２Ａ発現の測
定である。従って、１つまたは２つ以上の本発明によるペプチドおよび好適な検
出剤を含む診断組成物は本発明の一部を形成する。検出タイプに依存して、検出
剤は、放射性同位体、酵素、あるいは細胞表面マーカーまたは活性化マーカーに
特異的な抗体であり得る。

【００８５】 本発明の範囲には、１つまたは２つ以上の本発明によるペプチドを含む試験キ
ットもまた含まれる。このような試験キットは、本発明による診断方法における
使用に適している。

【００８６】 従って、本発明により、ＨＣｇｐ−３９に由来する修飾ペプチドは、自己免疫
疾患を下方調節するために使用することができる。

【００８７】 下記の実施例は、本発明を例示するものであり、本発明の範囲を限定するもの
として決して解釈してはならない。

【００８８】 （図面の簡単な説明） 図１は、リードペプチド、または放射線照射された自己のＰＢＭＣをＡＰＣと
して使用して選択された修飾ペプチドで刺激した後のクローン２３５の増殖を実
施例１５に記載されているように測定した。ペプチドを、０μｇ／ｍｌ、０．４
μｇ／ｍｌ、２μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌの濃度でその
刺激活性について試験した。リードペプチドＡ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈ
ｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌ
ｙ−ＯＨによる刺激（黒丸）、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ
］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２による刺激（黒四角）、Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ
−Ｇｌｙ−ＮＨ_２による刺激（白丸）、またはＡｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈ
ｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２による刺激（白四角）の後における２３
５クローンの応答が示されている。

【００８９】 表２：ハイブリドーマアッセイ（第１段階目の試験）：＋＝化合物は、非修飾
の２６３−２７５ペプチドと匹敵するか、またはそれよりも優れた様式で３つの
すべてのハイブリドーマを刺激する。＋^＊＝３つすべてではなく、１つまたは２
つのハイブリドーマについて明らかにされたアゴニスト活性。効力（アナログの
刺激活性／リードペプチド（例えば、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５））の刺
激活性）におけるヒトクローンの反応性（クローン２３５およびクローン２４３
の増殖）。−＝０．６未満の効力、＋＝０．６〜１２の効力、＋＋＝１２よりも
大きく、１００までの効力、＋＋＋＝１００よりも大きい効力。Ａｃ−Ａｒｇ−
ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈ
ｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［Ｃ
Ｈ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ｄ−１−グルシチル−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−
Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−ＯＨ、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅ
ｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌ
ｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、およびＨ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ（４Ｃｌ）−
Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−ＯＨを、ＨＬＡ−ＤＲＢ１^＊０４０１に結合するそれらの親和性につい
て試験して、リードペプチド（Ａ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−
Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ）の
親和性と比較した。最も活性な化合物（Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−ＮＨ_２およびＡｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−
Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ
−ＮＨ_２）は、元のペプチドの親和性に匹敵し得るＨＬＡ−ＤＲＢ１^＊０４０１
に対する相対的な結合親和性を示した。

【００９０】 （実施例） 実施例１ Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ（４Ｃｌ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１） ミリポア社の９０５０ＰｅｐＳｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒの反応容器に０．５ｇの
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ（ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙ
ｓｔｅｍｓから購入可能、０．２０ｍｍｏｌ／ｇ）樹脂を仕込み、Ｎ−メチルピ
ロリジノン（ＮＭＰ）で事前に膨潤させた。各カップリングサイクルにおけるＦ
ｍｏｃ基の除去を、ピペリジン／ＤＭＦ（１：４、ｖ／ｖ）を用いて行った。カ
ップリング効率を、各伸長工程の後、Ｆｍｏｃ切断の分光法的分析によって求め
た。各カップリング工程では、適切な、酸に不安定な側鎖保護Ｆｍｏｃアミノ酸
の４当量を使用した。合成機の二重シリンジモードを使用した。この場合、一方
のシリンジは０．５０ＭのＨＡＴＵ／ＤＭＦｐ．ａ．を含有し、もう一方のシリ
ンジは１．０ＭのＤＩＰＥＡ／ＤＭＦｐ．ａ．を含有する。主洗浄液は、０．１
％ＨＯＢＴを含むＮ−メチルピロリジノンを含有した。アナログ合成プロトコル
を使用した。最後のＦｍｏｃ基を除いた後、固定化ペプチドを有する樹脂を反応
容器から取り出して、ＤＭＦ（２０ｍＬ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）、ジエチ
ルエーテル（２０ｍＬ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）、ジエチルエーテル（２０
ｍＬ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）およびジエチルエーテル（２０ｍＬ）で順次
洗浄した。固定化ペプチドを真空下で一晩乾燥した。その後、ペプチドを、１０
ｍＬのＴＦＡ／（ｉＰｒ）_３ＳｉＨ／アニソール／Ｈ_２Ｏ混合物（８８／５／５
／２、ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）を用いて３時間切り離し処理した。この工程において、
酸に不安定な側鎖保護基もまたすべて除かれた。溶媒を蒸発させた後、ペプチド
を２００ｍＬのジエチルエーテルで沈殿させた。エーテル層をデカンテーション
により除き、ペプチドをさらなる量（２ｘ２００ｍＬ）のエーテルで洗浄した。
その後、粗ペプチドを窒素流で乾燥して、凍結乾燥した。ペプチドの精製をＰｒ
ｅＰａｃｋカートリッジ４０〜１００ｎｍ Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ^ＴＭＣ１８（１
５μｍ、１００Ａ）逆相カラムでのＨＰＬＣクロマトグラフィーによって行った
。移動相は、下記の分析に示されているように、２０％リン酸塩緩衝液（ｐＨ２
．１）と、アセトニトリルおよび水のグラジエントとの混合物からなった。ペプ
チドを、４‰酢酸水溶液を使用してＨＰＬＣで脱塩した。精製された生成物を凍
結乾燥した。 移動相： Ａ：０．５ｍｏｌ／Ｌ ＮａＨ_２ＰＯ_４＋Ｈ_３ＰＯ_４、ｐＨ＝２
．１ Ｂ：Ｈ_２Ｏ Ｃ：ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏ＝３／２（ｖ／ｖ） グラジエント：Ａ：２０％、Ｂ：８０％−＞２０％；Ｃ：０％−＞６０％、４０
分間 収量：６８ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９０．１％；ＭＳ：ＭＷ＝１３４６（これは
、分子式Ｃ_５５Ｈ_８９ＣｌＮ_１６Ｏ_２１と一致する）；アミノ酸分析：すべての
アミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：７４．８％；イオンクロマ
トグラフィー：リン酸塩：０．６％、酢酸塩：０．６％、塩化物：３．４％（ｗ
／ｗ）。

【００９１】 実施例２ Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_５−Ｃ（Ｏ）−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（２） このペプチドを、化合物１の合成（上記参照）において報告されているように
固相ペプチド化学を使用して合成した。この場合、市販のＦｍｏｃ−アミノ酸ペ
ンタフルオロフェニル（Ｐｆｐ）活性エステルを、自由なＦｍｏｃ−アミノ酸お
よびＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡの代わりに使用した。この化合物は、文献の手順（Ａ
．Ｍａｒｓｔｏｎ、Ｅ．Ｈｅｃｋｅｒ、Ｚ．Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ．Ｂ Ａｎ
ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、３８：１０１５〜１０２１、１９８３
）と同様にして６−アミノヘキサン酸から得られた６−Ｆｍｏｃ−アミノヘキサ
ン酸をＮ末端アミノ酸として使用して調製された。支持体はＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−
ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ（０．７５ｇ、０．１７０ｍｍｏｌ／ｇ）であり、３当量
の適切なＰｆｐエステルを使用した。６−Ｆｍｏｃ−アミノヘキサン酸をカップ
リングさせるために、ＰｙＢＯＰをカップリング剤として加えた（１９９ｍｇ）
。標準的な手順（実施例１）で報告されているような処理により、１６８ｍｇの
粗生成物が得られた。これをＨＰＬＣによって精製した（リン酸塩システムｐＨ
＝２．１、ＣＨ_３ＣＮ−Ｈ_２Ｏグラジエント）。生成物を、５‰酢酸水溶液を使
用してＨＰＬＣで脱塩し、凍結乾燥して、３４ｍｇの目的とするペプチドが得ら
れた。

【００９２】 ＨＰＬＣ純度：９９．６％；ＭＳ：ＭＷ＝１２６８（これは、分子式Ｃ_５５Ｈ _８９ Ｎ_１３Ｏ_２１と一致する）；アミノ酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で
見出された；ペプチド含有量：６７．３％；イオンクロマトグラフィー：リン酸
塩：１０％（ｗ／ｗ）。

【００９３】 実施例３ Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_６−Ｃ（Ｏ）−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３） ペプチド３を、７−Ｆｍｏｃ−アミノヘプタン酸（３ａ、化合物２ａと同様に
して調製：Ａ．Ｍａｒｓｔｏｎ、Ｅ．Ｈｅｃｋｅｒ、Ｚ．Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃ
ｈ．Ｂ Ａｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、３８：１０１５〜１０２
１、１９８３）をＮ末端アミノ酸として使用してそのＮ末端ホモログ２と同一の
様式で調製した。支持体はＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ（１．０ｇ
、０．１７ｍｍｏｌ／ｇ）であった。標準的な手順（実施例１）で報告されてい
るような処理、ＨＰＬＣ精製および脱塩により、４５ｍｇの目的とするペプチド
が得られた。

【００９４】 ＨＰＬＣ純度：９５．０％；ＭＳ：ＭＷ＝１２８２（これは、分子式Ｃ_５６Ｈ _９１ Ｎ_１３Ｏ_２１と一致する）；アミノ酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で
見出された；ペプチド含有量：８７．４％；イオンクロマトグラフィー：酢酸塩
：０．２％（ｗ／ｗ）。

【００９５】 実施例４ （Ｎ−メチルニコチノイル）^＋−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−
Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（４
） ペプチド４を調製する前に、出発物質のＮ−スクシンイミジル（１−メチル−
３−ピリジニオ）ホルマートヨージド（４ａ）を文献の手順（Ｍ．Ｌ．Ｔｅｄｊ
ａｍｕｌｉａ、Ｐ．Ｃ．Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ、Ｆ．Ｆ．Ｋｎａｐｐ；Ｊ．Ｍｅ
ｄ．Ｃｈｅｍ．２８：１５７４〜１５８０、１９８５）によって合成した。化合
物４の合成を溶液で行った。実施例１によるＳＰＰＳ法により調製されたペプチ
ドＨ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇ
ｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（４ａ、２６ｍｇ、０．０２ｍｏ
ｌ）をＤＭＦ／Ｈ_２Ｏ（１／９９、ｖ／ｖ、１０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＰＥＡ／
ＤＭＦ（１／１、ｖ／ｖ）を加えて、ｐＨ＝９にした。その後、Ｎ−スクシンイ
ミジル（１−メチル−３−ピリジニオ）ホルマートヨージド（４ａ、０．０５６
ｇ、０．１５ｍｏｌ）を２回に分けて加えた。数滴のＤＩＰＥＡ／ＤＭＦ（１／
１、ｖ／ｖ）を添加することによって、ｐＨをｐＨ＝９で保った。混合物を室温
で４時間攪拌し、その後、１０ｍＬのＨ_２Ｏおよび５ｍＬのリン酸塩緩衝液（ｐ
Ｈ＝２．１）で希釈した。生成物を、前記（実施例１）に示されているように、
リン酸塩緩衝液システムを用いてＨＰＬＣによって直ちに精製した。５‰酢酸水
溶液による脱塩および凍結乾燥により、１４ｍｇの目的とするペプチド４が得ら
れた。

【００９６】 ＨＰＬＣ純度：９８．１％；ＭＳ：ＭＷ＝１４３０；アミノ酸分析：すべての
アミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：５６．３％；イオンクロマ
トグラフィー：塩化物：１．４％、リン酸塩：１．０％、トリフルオロ酢酸塩：
０．８％、酢酸塩：０．３％（ｗ／ｗ）。

【００９７】 実施例５ デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ
−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（５） ペプチド５を、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸、ＨＡＴＵ、ＤＩＰＥＡおよび１．０ｇ
のＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂（支持負荷量０．１７ｍｍｏｌ
／ｇ）を使用して、化合物１に関して前記に記載された手順に従って合成した。
最終工程において、デスアミノ−Ａｒｇ（Ａｄｏｃ）_２−ＯＨ（５ａ）を固定化
ペプチド鎖にカップリングした。カルボン酸５ａを知られている手順（Ｒ．Ｐｒ
ｅｓｅｎｔｉｎｉ、Ｇ．Ａｎｔｏｎｉｏ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉ
ｎ Ｒｅｓ．、２７：１２３〜１２６、１９８６）に従って調製した。処理条件
および精製条件はペプチド１の条件と同一であった。

【００９８】 収量：５８ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９１．１％；ＭＳ：ＭＷ＝１２９６；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：７６．２
％；イオンクロマトグラフィー：リン酸塩：０．４％、トリフルオロ酢酸塩：０
．６％、酢酸塩：０．２％（ｗ／ｗ）。

【００９９】 実施例６ デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ
−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（６） ペプチド６の合成を、固体支持体としてＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳの代わりにＰＡ
Ｌ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂（０．１７ｍｍｏｌ／ｇ）を使用して、前記に記載された
ペプチド５の様式に類似する様式で行った。この場合、Ｆｍｏｃ基を市販（Ｐｅ
ｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）のＦｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ
樹脂から除き、得られたＨ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ支持体をＨＡＴＵ／ＤＩＰＥ
Ａの存在下でＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨと縮合した。ペプチド鎖の伸長およびその
後の樹脂からの切断を実施例１に記載されるのと同じ条件のもとで行った後、目
的とするカルボキサミドＣ末端を得た。処理条件および精製条件はペプチド１の
条件と同一であった。

【０１００】 収量：４３ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９１．３％；ＭＳ：ＭＷ＝１２９５；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：７６．５
％；イオンクロマトグラフィー：塩化物：０．５％、酢酸塩：４．０％（ｗ／ｗ
）。

【０１０１】 実施例７ ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ
−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（７） ペプチド７を合成するために、出発物質のＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣ
Ｈ_２−ＣＯ_２Ｈ（７ａ）を文献の手順（Ａ．Ｈ．Ｈａｉｎｅｓ、Ｐ．Ｋａｒｎｔ
ｉａｎｇ、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．、７８：２０５〜２１１、１９８０）
に従って最初に調製した。保護された固定化ペプチドＨ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｓ
ｅｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ
）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（７ｂ）の合成を、アミノ酸Ｐｆｐエステル
を使用して実施例２に示されているように行った。樹脂上のペプチド（７ｂ）を
ＮＭＰで事前に膨潤させて、１４２ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）のＣＨ_３（ＯＣＨ _２ ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２−ＣＯ_２Ｈ（７ａ）を１６９ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）
のカップリング剤ＴＦＦＨ（テトラメチルフルオロホルマミジニウム・ヘキサフ
ロオロホスファート）とともに加えた。一緒にした試薬をＰｅｐｓｙｎｔｈｅｓ
ｉｚｅｒで６０分間循環させた。樹脂からの切断および処理を実施例５に記載さ
れているように行った。その後、粗ペプチドを、実施例１に示されているシステ
ムおよび溶媒を用いてＨＰＬＣによって精製した。生成物を、２．５‰のＡｃＯ
Ｈを使用してＨＰＬＣカラムで脱塩した。

【０１０２】 収量：１２０ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：７８％；ＭＳ：ＭＷ＝１５１５；イオンク
ロマトグラフィー：塩化物：０．１％、リン酸塩：０．３％、トリフルオロ酢酸
塩：４．０％、酢酸塩：０．３％（ｗ／ｗ）。

【０１０３】 実施例８ Ｄ−１−グルシチル−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓ
ｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（８） Ｎ末端が修飾されたペプチド８を合成する前に、ペプチド７ｂと同じ配列を有
するが、異なるリンカータイプ（ＰＡＬの代わりにＰＡＣ）を有するペプチドＨ
−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−
Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（
ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ（８ａ）を実施例１
に従って調製した。還元的アミン化を、還元剤としてＮａＢＨ（Ｏａｃ）_３（２
１２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を使用して６−Ｏ−トリチル−α／β−Ｄ−グルコ
ピラノース（８ｂ、４２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、Ｔ．Ｕｔａｍｕｒａ、Ｋ．Ｋ
ｕｒｏｍａｔｓｕ、Ｋ．Ｓｕｗａ、Ｋ．Ｋｏｉｚｕｍｉ、Ｉ．Ｓｈｉｎｇｕ，Ｔ
ｅｔｓｕｒｏ；Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３４：２３４１〜２３５３、
１９８６）を固定化ペプチド８ａ（５００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ／ｇ）とＤＭＦ
／ＨＯＡｃ（９９／１、ｖ／ｖ、１０ｍＬ）中で一晩処理することによって行っ
た。得られた完全に保護された誘導体（６−Ｏ−トリチル−Ｄ−１−グルシチル
）−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ
（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳの樹脂からのその
後の切断を、実施例１に記載される条件を使用して、トリチル基およびすべての
アミノ酸保護基を同時に除きながら行うことによって、３８ｍｇの目的ペプチド
８が、調製用ＨＰＬＣによる精製および５‰ＨＯＡｃ水溶液による脱塩の後に得
られた。

【０１０４】 ＨＰＬＣ純度：８４．７％；ＭＳ：ＭＷ＝１４７５；アミノ酸分析：すべての
アミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：６１．０％；イオンクロマ
トグラフィー：塩化物：０．１％、酢酸塩：１．７％（ｗ／ｗ）。

【０１０５】 実施例９ ＭｅＯ−Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅ
ｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（９） ペプチド９の合成を、固定化ペプチドＨ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ
）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（
ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−
ＰＡＣ−ＰＥＧ−ＰＳ（８ａ）をジオキサンに懸濁して、０℃に冷却することに
よって開始した。この懸濁物に、１００μｌの４Ｎ ＮａＯＨ水溶液および１０
０μｌのクロロギ酸メチルを加えた。反応混合物を１６時間攪拌し、続いて、樹
脂を、ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ、ＣＨ_２Ｃｌ_２およびエーテルで洗浄した。
真空下で乾燥した後、生成物を樹脂から切断して、前記のペプチド合成（実施例
１）に記載されているように精製した。最後に、ペプチドを、５‰酢酸水溶液を
使用してＨＰＬＣで脱塩し、その後、凍結乾燥して、ペプチド９を得た。

【０１０６】 収量：１１ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９６．８％；ＭＳ：ＭＷ＝１３６８；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：６０．５
％；イオンクロマトグラフィー：塩化物：２．０％、リン酸塩：０．２％、酢酸
塩：０．４％（ｗ／ｗ）。

【０１０７】 実施例１０ Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（１０） ペプチド１０を合成する前に、必要なアミノ酸アルデヒド構成要素のＦｍｏｃ
−Ｌｅｕ−Ｈ（１０ａ）を知られている手順（Ｊ．−Ｐ．Ｍｅｙｅｒ、Ｐ．Ｄａ
ｖｉｓ、Ｋ．Ｂ．Ｌｅｅ、Ｆ．Ｐｏｒｒｅｃａ、Ｈ．Ｉ．Ｙａｍａｍｕｒａ、Ｖ
．Ｈｒｕｂｙ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８：３４６２〜３４６８、１９９５）
によって調製した。化合物１０ａをさらに精製することなく使用した。実施例１
に記載される方法に従って、樹脂を８−アミノ酸ペプチド鎖で官能基化して、Ｈ
−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ
（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１０ｂ）を得た
。後者の固定化されている誘導体（１ｇ、０．２ｍｍｏｌ／ｇ）を５ｍＬの１％
酢酸／ＤＭＦに懸濁した。２つの溶液を調製した：１４８ｍｇのＦｍｏｃ−Ｌｅ
ｕ−Ｈ（１０ａ）を含む２．５ｍＬのＤＭＦ、および３０ｍｇのＮａＣＮＢＨ_３ を含む２．５ｍＬのＤＭＦ。両方の溶液を一緒にして、ペプチド１０の懸濁物に
加えた。混合物を室温で一晩攪拌した。続いて、このようにして得られた中間体
のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（
ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−
ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１０ｃ）を、新たに導入された二級アミン官能基におい
てＢｏｃ_２Ｏおよびピリジンを用いて保護した。樹脂に結合しているペプチド１
０ｃを１０ｍＬの乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２に懸濁して、３５ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）
のＢｏｃ_２Ｏと１３μｌ（０．１６ｍｍｏｌ）のピリジンとを加えた。ｐＨをピ
リジンでｐＨ＝８で保ち、混合物を一晩攪拌した。処理には、ＣＨ_２Ｃｌ_２、Ｅ
ｔＯＨ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、エーテルで樹脂を洗浄すること、および真空下で乾燥す
ることが含まれた。合成を、Ｆｍｏｃアミノ酸、および溶媒としてＮＭＰを用い
るＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡプロトコル（実施例１）を使用してＳＰＰＳによって続
けた。最終工程には、４−ニトロフェニルアセタートとのカップリングによりＮ
末端アセチル基を導入することが含まれた。実施例１に記載されているように処
理した後、粗ペプチドをＨＰＬＣによって精製し、５‰酢酸水溶液により脱塩し
、凍結乾燥して、目的ペプチド１０を得た。

【０１０８】 収量：２８ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：７６．３％；ＭＳ：ＭＷ＝１３３９；イオン
クロマトグラフィー：トリフルオロ酢酸塩：１．２％、酢酸塩：２．０％（ｗ／
ｗ）。

【０１０９】 実施例１１ Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（１１） １１の合成には、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−Ｈ（１１ａ、Ｊ．−Ｐ．Ｍｅｙｅｒ、Ｐ
．Ｄａｖｉｓ、Ｋ．Ｂ．Ｌｅｅ、Ｆ．Ｐｏｒｒｅｃａ、Ｈ．Ｉ．Ｙａｍａｍｕｒ
ａ、Ｖ．Ｈｒｕｂｙ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８：３４６２〜３４６８、１９
９５）を、実施例１に記載されるＳＰＰＳプロトコルで得られた樹脂結合の保護
ペプチドＨ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（
ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−
ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１１ｂ）に還元的カップリングすることが含まれた。ペ
プチド１１ｂ（１．０ｇ、０．２ｍｍｏｌ／ｇ）およびアルデヒド１１ａ（２０
０ｍｇ）を５ｍＬの１％酢酸／ＤＭＦに懸濁し、そして５ｍＬのＤＭＦに溶解し
た３０ｍｇ（０．４８ｍｍｏｌ）のＮａＣＮＢＨ_３を直ちに加えた。混合物を１
６時間攪拌して、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌ
ｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔ
ｈｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳを生成させた
。その後、ペプチド鎖を、実施例８に記載されているようにＨＡＴＵ／ＤＩＰＥ
ＡのＳＰＰＳプロトコルを使用して、適切なＦｍｏｃ−アミノ酸およびＮ末端ア
セチル化剤を用いて伸長させた。処理、ＨＰＬＣ精製および脱塩を実施例１に記
載されているように行った。

【０１１０】 収量：５２ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９７．９％；ＭＳ：ＭＷ＝１３３８；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：９２．４
％；イオンクロマトグラフィー：酢酸塩：２．５％（ｗ／ｗ）。

【０１１１】 実施例１２ Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−
Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（１２） この化合物を合成するために、樹脂上でＦｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｈによる還元的ア
ルキル化を行うことは不可能であった。従って、ジペプチドアナログのＦｍｏｃ
−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＯＨ（１２ｄ）を、樹脂への固定化に先
立って溶液で調製した。

【０１１２】 Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−Ｏｂｚｌ（１２ｃ） Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ｈ（１２ａ、３．１６ｇ、１０ｍｍｏｌ、Ｔ．Ｍｏｒｉｋ
ａｗａ、Ｓ．−Ｉ．Ｈａｍａｎｏ、Ｓ．Ｓａｉｔｏ、Ｓ．Ｔｏｒｉｉ、Ｓ．Ｋａ
ｓｈｉｎｏ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５４：４１１４〜４１２０、１９８９に
従って調製）をＥｔＯＨ／ＨＯＡｃ（８０ｍＬ、９９／１、ｖ／ｖ）に溶解して
、ＨＣｌ．Ｈ−Ｇｌｙ−Ｏｂｚｌ（１２ｂ、２．０２ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え
、その後、ＮａＣＮＢＨ_３（０．９４ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物
を室温で一晩攪拌した。続いて、５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（２０ｍＬ）を加えて
、反応混合物を中和した。その後、混合物を真空下で濃縮して、残渣をＣＨ_２Ｃ
ｌ_２で抽出した。有機層を一緒にして、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ_２Ｓ
Ｏ_４で素早く乾燥して、ろ過した。溶媒を蒸発させて、黄色オイルを得た。シリ
カゲルクロマトグラフィー（溶出液：０〜４％メタノール／ＣＨ_２Ｃｌ_２）によ
って精製した後、化合物１２ｃが白色固体として単離された。収量：１．８５ｇ
（３９％）。分析：ＴＬＣ：（シリカ、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９８／２）Ｒ
ｆ＝０．４５、ＭＳ：ＭＷ＝４７２。

【０１１３】 Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ−Ｏｂｚｌ（１２ｄ） Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−Ｏｂｚｌ（１２ｃ、０．９１
０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ_２Ｏ（０．４２０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）お
よびＤＩＰＥＡ（０．３３６ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）を乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０
ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡを添加することによってｐＨを塩基性に保ち、混
合物を室温で一晩攪拌した。その後、反応混合物を、１０％ＫＨＳＯ_４を加える
ことによって酸性化した。水を加え、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層を
一緒にして飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で素早く乾燥し、溶媒を蒸
発させて、０．９６ｇ（９７％）の１２ｄが得られた。分析：ＴＬＣ：（シリカ
、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ、９８／２）Ｒｆ＝０．５５、ＭＳ：ＭＷ＝５７２。

【０１１４】 Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ−ＯＨ（１２ｅ） Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ−Ｏｂｚｌ（１２ｄ、
０．９７ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃの混合物（１／１、ｖ
／ｖ、１００ｍＬ）に溶解して、１０％Ｐｄ／Ｃを用いて常圧下で２時間水素化
した。パラジウム触媒をろ過して除き、ろ液を濃縮して、カルボン酸１２ｅが淡
黄色オイルとして得られた。収量：０．６６１ｇ（８１％）。分析：ＴＬＣ：（
シリカ、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ／ＡＣＯＨ、９０／９／１）Ｒｆ＝０．４２、
ＭＳ：ＭＷ＝４８２。

【０１１５】 ＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡ二重シリンジモードを用い、そしてＨＡＴＵ／ＤＩＰＥ
Ａによる二重カップリングを用いたペプチド合成機を使用して、化合物Ｆｍｏｃ
−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ−ＯＨ（１２ｅ、０．６６１ｇ、
１．３７ｍｍｏｌ）をＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ樹脂（１．５ｇ、０．１５ｍｍｏｌ
／ｇ、０．２２５ｍｍｏｌ）に負荷した。置換レベルを標準的なＦｍｏｃ切断手
順で決定し、置換レベルは０．１３ｍｍｏｌ／ｇ負荷樹脂であった（収率：８７
％）。得られたペプチドＦｍｏｃ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ
−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１２ｆ）を、各Ｆｍｏｃ−アミノ酸について６０分の
二重縮合工程を用いたＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡのＳＰＰＳプロトコル（実施例１）
を使用してさらに伸長させた。ペプチド９およびペプチド１１と同様に、Ｎ末端
アセチル基を、４−ニトロフェニルアセタートを使用して導入した。処理、精製
および脱塩を実施例１に記載されるように行った。

【０１１６】 収量：１７ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：８０．１％；ＭＳ：ＭＷ＝１３３８；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要な量で見出された；ペプチド含有量：６３．７
％；イオンクロマトグラフィー：塩化物：１．０％、リン酸塩：０．２％、酢酸
塩：０．２％（ｗ／ｗ）。

【０１１７】 実施例１３ Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅ
ｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（１３） ペプチド１３を合成するために、必要なペプトイドモノマーのＦｍｏｃ−Ｎｈ
Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１３ｅ）を最初に調製した。

【０１１８】 Ｚ−２−アミノエチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１３ａ） ３．２５ｇのＭｇＳＯ_４（２７ｍｍｏｌ）を８０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２（乾燥）
に懸濁した。Ｎ_２下、１．５ｍＬの濃Ｈ_２ＳＯ_４を加えた（手順：Ｓ．Ｗ．Ｗｒ
ｉｇｈｔ、Ｄ．Ｌ．Ｈａｇｅｍａｎ、Ａ．Ａ．Ｗｒｉｇｈｔ、Ｌ．ＭｃＣｌｕｒ
ｅ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、３８：７３４５〜７３４８、１９９
７）。混合物を１５分間攪拌し、その後、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＨ（１２．９ｍＬ）
および市販のＺ−２−アミノエタノール（５．２８ｇ、２７ｍｍｏｌ）を、ＣＨ _２ Ｃｌ_２（２０ｍＬ）に溶解して加えた。５日間攪拌した後、２００ｍＬの５％
ＮａＨＣＯ_３水溶液を反応混合物に加えて、すべてのＭｇＳＯ_４が溶解するまで
攪拌した。層を分離して、ＣＨ_２Ｃｌ_２層をブラインで洗浄した。有機層をＭｇ
ＳＯ_４で乾燥し、ろ過した。溶媒を蒸発させて、５．６ｇの粗生成物１３ａが得
られた。生成物をカラムクロマトグラフィー（溶出液：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、
３：１、ｖ／ｖ）によって精製した。収量：５．００ｇ（７８％）。^１Ｈ−ＮＭ
Ｒ（ＣＤＣｌ_３）δ：１．１５（ｓ、９Ｈ、ｔＢｕ）、３．３〜３．５（ｄｔ、
４Ｈ、２ｘＣＨ_２）、５．１（ｂｓ、２Ｈ、ＣＨ_２Ｂｚｌ）、７．４（ｍ、５Ｈ
、Ａｒ）。

【０１１９】 ２−アミノエチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル．ＨＣｌ（１３ｂ） ５．００ｇのベンジルエステル１３ａを含む酢酸エチル（１５０ｍＬ）の溶液
に、２２５ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加え、Ｈ_２を２時間吹き込んだ。結晶をろ過
して除き、１５ｍＬの１Ｍ ＨＣｌ水溶液を加えた。溶媒を蒸発させ、少量のエ
ーテルを加えた。沈殿した生成物１３ｂをろ過して除き、真空中で乾燥した。収
量：２．３５ｇ（７７％）。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：１．２０（ｓ、９Ｈ、ｔ
Ｂｕ）、３．１５（ｔ、２Ｈ、ＣＨ_２）、３．６５（ｔ、２Ｈ、ＣＨ_２）、８．
１〜８．４（ｂｓ、２Ｈ、ＮＨ_２）。

【０１２０】 Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシエチル）グリシン（Ｈ−ＮｈＳｅｒ（ｔＢｕ）
−ＯＨ）（１３ｃ） １３ｂ（２．３０ｇ、１５ｍｍｏｌ）を含む２５ｍＬのＨ_２Ｏの溶液に、１．
４０ｇ（１５．２ｍｍｏｌ）のグリオキシル酸．Ｈ_２Ｏを加えた。ｐＨを１．０
ＭのＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝６に調節した。この溶液に２３０ｍｇのＰｄ／Ｃを
加えて、反応混合物を４５ｐｓｉのＨ_２圧力で一晩攪拌した。結晶をろ過して除
き、５ｍＬのＨ_２Ｏで洗浄した。１３ｃを含有するろ液を、さらに精製すること
なく次の工程で使用した。

【０１２１】 Ｆｍｏｃ−ＮｈＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１３ｄ） 反応生成物１３ｃを、Ｈ_２Ｏに溶解したまま、１ＮのＮａＯＨでｐＨ＝９．５
にした。この塩基性溶液を２５ｍＬのアセトンで希釈し、そして５．４０ｇ（１
６ｍｍｏｌ）のＦｍｏｃ−Ｏｓｕを２５ｍＬのアセトンに溶解して滴下した。ｐ
Ｈを１ＮのＮａＯＨでｐＨ＝９．５で保った。一晩攪拌した後、反応混合物を１
５０ｍｌに濃縮して、５０ｍＬのエーテル／ヘプタン（１／１、ｖ／ｖ）で２回
洗浄した。Ｈ_２Ｏ層を２０％クエン酸でｐＨ＝２．５に酸性化して、１００ｍＬ
の酢酸エチルで３回抽出した。有機層を一緒にしてＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶
媒を蒸発させて、生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、ＣＨ_２Ｃｌ_２／
ＭｅＯＨ、５／１、ｖ／ｖ）によって精製し、凍結乾燥した。

【０１２２】 収量：５．４４ｇ（９１％）。^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：１．２０（ｓ
、９Ｈ、ｔＢｕ）、３．２（ｄｔ、２Ｈ、ＣＨ_２）、３．６〜３．７（ｄｔ、２
Ｈ、ＣＨ_２）、４．０５（ｓ、２Ｈ、ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈ）、４．２（ｂ、１Ｈ、Ｆ
ｍｏｃ）、４．４〜４．６（２Ｈ、２ｘｄ、Ｆｍｏｃ）、７．３〜７．８（ｍ、
８Ｈ、ＡｒＨ、Ｆｍｏｃ）。

【０１２３】 ペプチド１３の合成を、前記（実施例１）に記載されているように二重シリン
ジ技術を使用してＰｅｐｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで行った。支持体は、ＮＭＰを
溶媒として用いたＦｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１．０ｇ、０．１５ｍｍｏ
ｌ）であった。二重カップリング（カップリング時間：６０分）を、Ｆｍｏｃ−
ＮｈＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１３ｄ）を含むすべてのアミノ酸について使用し
た。Ｎ末端アセチル基を、４−ニトロフェニルアセタートを使用して導入した。
処理ならびに樹脂および保護基の切断を標準的な方法（実施例１）で行った。粗
ペプチドをＨＰＬＣによって精製し、５‰酢酸水溶液により脱塩した。

【０１２４】 収量：５０ｍｇ；ＨＰＬＣ純度：９８．６％；ＭＳ：ＭＷ＝１３６６；アミノ
酸分析：すべてのアミノ酸が必要とされる量で見出された；ペプチド含有量：８
２．１％；イオンクロマトグラフィー：塩化物：０．３％、酢酸塩：１．３％（
ｗ／ｗ）。

【０１２５】 実施例１４ Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅ
ｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２（１
４） 合成を、ＰｅｐｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒでのＨＡＴＵ／ＤＩＰＥＡプロトコル
（実施例１）を使用して行った。前記に記載される官能基化された樹脂Ｈ−Ｖａ
ｌ−Ψ［ＣＨ_２Ｎ（Ｂｏｃ）］−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ（１２ｆ）およ
び保護ペプトイドＦｍｏｃ−ＮｈＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１３ｄ）を構成要素
として使用した。前記に記載されているように、二重シリンジ技術およびカップ
リングあたり６０分の二重カップリングを使用した。合成機におけるペプチド鎖
の伸長を、Ｆｍｏｃ−ＮｈＳｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（１３ｄ）をカップリングす
る前に停止させた。このアミノ酸を超音波処理によりＤＭＳＯに溶解し、その後
、固定化されているペプチド鎖（Ｈ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ａｌ
ａ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢ
ｕ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＰＡＬ−ＰＥＧ−ＰＳ）に
カップリングした。合成を、残る（Ａｒｇ）アミノ酸を縮合し、そして４−ニト
ロフェニルアセタートを使用してアシル化することによって終えた。ペプチドの
処理、精製および脱塩は、実施例１に概略されているように標準的であった。凍
結乾燥によって、４７ｍｇのペプチド１４が得られた。

【０１２６】 ＨＰＬＣ純度：７２．９％；ＭＳ：ＭＷ＝１３５２；イオンクロマトグラフィ
ー：トリフルオロ酢酸塩：５．５％（ｗ／ｗ）。

【０１２７】 実施例１５ 抗原特異的なＴ細胞ハイブリドーマを使用するアゴニストペプチドの予備選択
（第１段階目の試験） 修飾ペプチドのアゴニスト活性を試験するために、ＨＣｇｐ−３９（２６３−
２７５）に特異的な３つの異なるハイブリドーマ細胞株を使用した（５Ｇ１１、
８Ｂ１２および１４Ｇ１１）。５ｘ１０^４個のハイブリドーマ細胞と、ＤＲＢ１ ^＊ ０４０１の特異性を有する放射線照射（１２０００ＲＡＤ）されたＥＢＶ形質
転換Ｂ細胞の２ｘ１０^５個とを丸底マイクロタイタープレートのウエル内で１５
０μｌの容量においてインキュベーションした。ペプチド抗原（ＨＣｇｐ−３９
（２６３−２７５）および修飾ペプチド）を５０μｌの容量で二連のウエルに加
えた。４８時間後に、１００μｌの培養上清を、マウスＩＬ−２に特異的なＰｈ
ａｒｍｉｎｇｅｎ抗体を用いたサンドイッチＥＬＩＳＡを使用して抗原特異的な
ＩＬ−２産生についてアッセイした。

【０１２８】 抗原特異的なＴ細胞クローンを使用するアゴニストペプチドの選択（第２段階
目の試験） Ｔ細胞クローン２４３を、ペプチド２６３−２７５に対するＲＡ応答者（ＲＡ
患者２４３）から得られたペプチド特異的なＴ細胞株から単離した。様々なクロ
ーンが、ＤＲＢ１^＊０４０１と一致するＰＢＭＣの存在下でＨＣｇｐ−３９（２
６３−２７５）ペプチドによる４回の反復的な刺激を行った後に得られた。Ｈ２
３５のＴ細胞クローンが、ＨＬＡ−ＤＲＢ１^＊０４０１陽性ドナーから得られた
ペプチド刺激のＴ細胞株から単離された。ＤＲＢ１^＊０４０１と一致するＰＢＭ
Ｃの存在下でペプチドＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）による２回の刺激を行
ったときに、様々なクローンがＰＨＡクローニングによって得られた。クローン
２４３およびクローン２３５の両方が、ペプチド抗原の認識においてＨＬＡ−Ｄ
ＲＢ１^＊０４０１拘束されることが見出された。細胞を、それぞれの実験におい
て刺激した１０日後〜１４日後に使用した。

【０１２９】 クローン２４３またはクローン２３５の増殖応答を、平底マイクロタイタープ
レートにおいて１０％正常ヒトプール血清（ＮＨＳ、ＣＬＢ、Ａｍｓｔｅｒｄａ
ｍ、オランダ）を含む１５０μｌ容量の培地中で２ｘ１０^４個のＴ細胞および１
０^５個のＤＲＢ１^＊０４０１一致の（３，０００Ｒａｄが照射された）ＰＢＭＣ
をインキュベーションすることによって測定した。５０μｌの抗原溶液（２６３
−２７５配列または示された修飾体を含む）を三連ウエルで分配した。^３Ｈ−チ
ミジンをインキュベーションの２日目または３日目に加えた。細胞をガラス繊維
フィルター上に集めて、取り込まれた放射能を測定した。

【０１３０】 結果 表２に示される大部分の修飾ペプチドは、リードペプチドのＨ−Ａｒｇ−Ｓｅ
ｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌ
ｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｏと匹敵し得る様式で３つのすべてのＴ細胞ハイブリドー
マを刺激することができた。しかし、一部のペプチドは３つのすべてのハイブリ
ドーマを刺激しなかった。このことは、使用されたハイブリドーマの特異性が異
なることを例示している。

【０１３１】 ２つのヒトＴ細胞クローンを刺激するその能力についてこれらのアゴニストが
試験されたときに、試験された化合物の能力における明瞭な違いが明らかになっ
た（表２）。大部分の修飾ペプチドはクローン２３５およびクローン２４３の応
答を誘導した。１つの化合物（Ａｃ−Ｎａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ ）はいずれのクローンの増殖応答を誘導しなかった。３つの化合物（Ｈ−βホ
モアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−
Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈ
ｅ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔ
ｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、およびＡｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈ
ｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２）は一方のクローンのみ（クローン２４３
またはクローン２３５の一方）で活性であった。３つの化合物（Ｈ−Ａｒｇ−Ｓ
ｅｒ−Ｐｈｅ（４Ｃｌ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｈ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔ
ｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−ＯＨ、およびＣＨ_３ＯＣ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ
）は両クローンにおける増殖応答を誘導した。この増殖応答は、リードペプチド
のＨ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇ
ｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨにより誘導される応答と同じ程度
の大きさであった。７個の化合物（Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌ
ｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｈ、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ
−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ｄ−１−グルシチル−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌ
ｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｈ、（Ｎ−メチル−ニコチノイル）^＋−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ
、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−
Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−
Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌ
ｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、およびＡｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅ
ｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌ
ｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２）は、一方のクローンまたは両
クローンの増殖応答を誘導することにおいて優れていた。同定された非常に強力
な化合物は、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ
−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓ
ｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇ
ｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ
−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、およびＡｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［Ｃ
Ｈ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２であった（表２および図１）。

【０１３２】 実施例１６ 約８週齢〜１０週齢のメスＢａｌｂ／ｃマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ
ＧｅｒｍａｎｙまたはＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｆｒａｎｃｅ）を、１０
０μｌの抗原調製物（５０μｇのＨＣｇｐ−３９ ２６３−２７５）を含む不完
全フロイントアジュバント（ＩＦＡ；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｓｔ．
Ｌｏｕｉｓ、米国）を用いて０日目に免疫化した。抗原をマウスの胸部領域に２
回に分けて皮下投与した。７日目に、マウスには、０．９％ＮａＣｌ（ＮＰＢＩ
、Ｅｍｍｅｒ Ｃｏｍｐａｓｃｕｕｍ、オランダ）で希釈された抗原調製物（Ｈ
Ｃｇｐ−３９（２６３−２７５））を１ｍｇ／ｍｌのミョウバン（Ｐｈａｒｍａ
ｃｙ Ｄｏｎｋｅｒｓ−Ｐｅｔｅｒｓｅ、Ｏｓｓ、オランダ）において５０μｌ
の容量で、片側だけに、肉趾（左脚）に抗原接種した。反対側（右側）の肉趾に
は、コントロールとして、０．９％ＮａＣｌにおけるミョウバン溶液の５０μｌ
を注射した。遅延型過敏性応答（特異的腫大の平均％）を、自社で設計したマイ
クロメーターを使用して、右後脚の肉趾と比較して左後脚の肉趾の肉趾厚さの増
大を比較することによって８日目に測定した（左側の腫大（ｍｍ）−右側の腫大
（ｍｍ）／右側の腫大（ｍｍ）ｘ１００％）。

【０１３３】 ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）または修飾ペプチド誘導体の抗原調製物（
５０μｇ、１０μｇ、２μｇまたは０．４μｇ（またはそれ以下の濃度）の鼻腔
適用を、イソフルラン（Ｆｏｒｅｎｅ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ ＢＶ、Ａｍ
ｓｔｅｒｄａｍ、オランダ）麻酔下で１回（５日目に）行い、その後、ＩＦＡに
５０μｇのＨＣｇｐ−３９ ２６３−２７５を含有する抗原調製物の１００μｌ
による０日目の免疫化を行った。これらの実験において、マウスはＨＣｇｐ−３
９ ２６３−２７５で免疫化および抗原接種され、そしてＤＴＨ応答が上記に記
載されているように測定された。

【０１３４】 ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）を含むＩＦＡで免疫化されたＢａｌｂ／ｃ
マウスがＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）に対して応答する上記に記載された
アッセイシステムを使用して、修飾ペプチド誘導体の寛容性誘導効果と比較して
、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）の鼻腔適用による寛容性誘導の潜在的な効
果を調べることが可能になった。ＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）による前処
置はＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）に特異的なＤＴＨ応答を下方調節した。
この効果は、前処置手順に含まれるペプチドの用量に依存していた。比較的大き
なペプチド濃度（５０μｇ／マウス）を使用した場合、ＨＣｇｐ−３９（２６３
−２７５）の１用量の鼻腔適用により、ＤＴＨ反応が完全に妨げられたが、２μ
ｇ／マウスの用量は効果的ではなかった。従って、ＨＣｇｐ−３９（２６３−２
７５）に特異的なＤＴＨアッセイシステムにおけるペプチドの効果的（寛容原性
）用量と効果的でない用量とを識別するプロトコルが確立された。ＨＣｇｐ−３
９（２６３−２７５）に基づく修飾ペプチド誘導体が元のペプチドよりも低い濃
度で活性であり得ると仮定すれば、そのようなペプチドは、比較的低いペプチド
濃度で寛容性を誘導することが予想される。この仮定に従って、一連の修飾ペプ
チドをこの寛容性誘導プロトコルにおいて試験した。この実験（この場合、２μ
ｇではなく、５０μｇのＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）による前処置によっ
て下方調節され得る確かなＨＣｇｐ−３９（２６３−２７５）の応答が誘導され
る）において、ペプチドの特定の修飾は寛容性の誘導において非常に活性であり
、これに対して、他の修飾は活性でないことが示された（表３を参照のこと）。

【０１３５】

【表２】

【０１３６】

【表３】

【配列表】

【図面の簡単な説明】

【図１】 リードペプチド、または放射線照射された自己のＰＢＭＣをＡＰＣとして使用
して選択された修飾ペプチドで刺激した後のクローン２３５の増殖を実施例１５
に記載されているように測定した。ペプチドを、０μｇ／ｍｌ、０．４μｇ／ｍ
ｌ、２μｇ／ｍｌ、１０μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌの濃度でその刺激活性
について試験した。リードペプチドＡ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ
による刺激（黒丸）、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌ
ｙ−ＮＨ_２による刺激（黒四角）、Ａｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ
−ＮＨ_２による刺激（白丸）、またはＡｃ−Ａｒｇ−ＮｈＳｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈ
ｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ［
ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２による刺激（白四角）の後における２３５クロー
ンの応答が示されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ， ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，Ｃ Ｚ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＧＤ，ＧＥ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，Ｍ Ｚ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ， ＺＡ (72)発明者 ハレン・フアン，フイリツプス・ヨハネ ス・マリー オランダ国、エヌ・エル−5346・ウエー・ エル・オツス、ハルナス・43 (72)発明者 クネフテル，ルナルドス・マルセリウス・ アルフオンス イギリス国、アビンダン、オツクスフオー ドシヤー・オー・エツクス・14・５・エ ヌ・ダブリユ、アンダージイ・ウエイ・92 (72)発明者 ボーツ，アンナ・マリア・ヘレナ オランダ国、エヌ・エル−5366・アー・フ エー・メーヘン、フエルレングト・トーレ ンストラート・10 (72)発明者 ミルテンブルフ，アンドレアス・マルチヌ ス・マリア オランダ国、エヌ・エル−5346・フエー・ ハー・オツス、スターケンボルフ・19 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA03 AA07 BA01 BA02 BA18 BA22 BA32 BA34 NA14 ZB082 ZB112 4H045 AA10 AA20 AA30 BA16 CA40 EA20 FA33 GA25

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 Ｈ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓ
   ｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−ＧＩｙ−ＯＨ（式Ｉ）に由来
   し、一般式Ｑ−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ａ６−Ａ７−Ａ８−Ａ９−Ａ１
   ０−Ａ１１−Ａ１２−Ａ１３−Ｚ（式ＩＩ）（式中、Ａ１〜Ａ１３は式Ｉのアミ
   ノ酸に一致し、ＱはＨに一致し、かつＺはＯＨに一致する）を有する修飾された
   ペプチドであって、１個〜６個の修飾が、 ａ）非天然アミノ酸またはβアミノ酸によるＡ１〜Ａ１３における１個〜６個
   （好ましくは１個〜４個）のアミノ酸の置換 ｂ）還元型アミド結合またはエチレン等電子配置体による１つまたは複数のア
   ミド結合の置換 ｃ）Ｑおよび／またはＺにおける置換 からなる群ａ、群ｂまたは群ｃの１つまたは複数、更に場合により、 ｄ）修飾が合計で６個までの天然アミノ酸による置換 から選択される修飾されたペプチド。
2. 【請求項２】 Ｑが、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、ホルミル、（Ｃ_１〜６）
   アルキルカルボニル、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキル
   オキシカルボニル、（Ｃ_２〜６）アルケニルオキシカルボニル、（Ｃ_６〜１４）
   アリール（Ｃ_１〜６）アルキル；（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキル
   オキシカルボニル、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中
   、ｎは１〜１０である）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ_２−（式中、ｍは
   ３〜４である）；１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル、１−メチル−ピ
   リジニウム−４−カルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ
   （＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である
   場合、Ｑは存在せず； ＺがＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_２〜６）アルケニル
   、アリール（Ｃ_１〜４）アルキル、（Ｃ_４〜１３）ヘテロアリール（Ｃ_１〜６）
   アルキルまたはＮＲ_１Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２は独立して、Ｈ、（Ｃ_１〜６ ）アルキルまたは（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜６）アルキルから選択される
   ）であり； ＱおよびＺは、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに位置する合計で１０個
   までのアミノ酸をさらに含んでもよい、請求項１に記載のペプチド。
3. 【請求項３】 Ａ１〜Ａ１３における天然アミノ酸による置換が４個以下の
   位置に存在し、好ましくは２個以下の位置に存在する、請求項１または２に記載
   のペプチド。
4. 【請求項４】 Ｑが、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、ホルミル、（Ｃ_１〜６）
   アルキルカルボニル、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキル
   オキシカルボニル、（Ｃ_２〜６）アルケニルオキシカルボニル、アリール（Ｃ_{１ 〜６} ）アルキル；（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキルオキシカルボニ
   ル、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは１〜１０
   である）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ_２−（式中、ｍは３〜４である）
   ；１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル、１−メチル−ピリジニウム−４
   −カルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ
   −（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である場合、Ｑは存在
   せず； Ａ１が、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ
   −Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは
   ２〜５である）、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜７である
   ）、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−
   ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（式中、ｎは２〜５である）、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−
   ＣＨ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（
   式中、ｎは２〜５である）、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−
   ＮＨ_２］ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）であり； Ａ２が、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
   、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−
   ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）であり； Ａ３が、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）、Ｄ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式
   中、Ｘは独立して、１つまたは複数の（Ｃ_１〜４）アルキル、ヒドロキシ、ハロ
   、（Ｃ_１〜６）アルキルカルボニルアミノ、アミノまたはニトロから選択される
   ）、Ｌ−Ｈｆｅ、Ｄ−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｄ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ、Ｄ−Ｃｈ
   ａ、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｄ−Ｐａｌ（３）、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｄ−１−Ｎａｌ、
   Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｄ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）、Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ
   ）、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝または（Ｓ）−
   ｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝、または（Ｒ）−｛−ＮＨ−
   ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２ −アリール）−ＣＨ_２−｝であり； Ａ４が、Ｌ−Ｔｈｒ、Ｄ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｓｅｒ−、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ
   、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ５が、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｉｌｅ、Ｌ−Ｖａｌ、Ｄ
   −Ｖａｌ−、Ｌ−Ｎｖａ、Ｄ−Ｎｖａ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、（Ｒ
   ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２−｝または（Ｓ）−
   ｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２−｝であり； Ａ６が、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ７が、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
   、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ８が、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ｔｈｒ
   、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ９が、Ｌ−Ｇｌｕ、Ｄ−Ｇｌｕ、Ｌ−Ａｓｐ、Ｄ−Ａｓｐ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ
   −ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ１０が、Ｌ−Ｔｈｒ、Ｄ−Ｔｈｒ、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｄ−Ｓｅｒ、Ｌ−ｈＳｅｒ
   、Ｄ−ｈＳｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ１１が、Ｇｌｙ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａまたは−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−
   であり； Ａ１２が、Ｌ−Ｖａｌ、Ｄ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｎｖａ、Ｄ−Ｎｖａ、Ｌ−Ｌｅｕ、
   Ｄ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｉｌｅ、Ｄ−Ｉｌｅ、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ_３ ）_２］−ＣＨ_２−｝、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ_３）_２］−ＣＨ_２−
   ｝、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（Ｓ）−｛
   −ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（Ｒ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［
   ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２］−ＣＨ_２−｝、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ＣＨ
   （ＣＨ_３）_２］−ＣＨ_２−｝、（ＲＲ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２（ＣＨ（ＣＨ _３ ）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（ＲＳ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２（ＣＨ
   （ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝、（ＳＲ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ_２ （ＣＨ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−、または（ＳＳ）−｛−ＮＨ−Ｃ
   Ｈ［ＣＨ_２（ＣＨ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２ＣＨ_３］−ＣＨ_２−｝であり； Ａ１３が、Ｇｌｙ、Ｌ−ＡｌａまたはＤ−Ａｌａであり、そして ＺがＯＲ（式中、Ｒは、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_２〜６）アルケニル
   、（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜４）アルキル、（Ｃ_４〜１３）ヘテロアリー
   ル（Ｃ_１〜６）アルキルまたはＮＲ_１Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２は独立して、
   Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキルまたは（Ｃ_６〜１４）アリール（Ｃ_１〜６）アルキル
   から選択される）であり、 ＱおよびＺが、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに位置する合計で１０個
   までのアミノ酸をさらに含んでもよい、請求項１〜３に記載のペプチド。
5. 【請求項５】 Ｑが、Ｈ、（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキルカ
   ルボニル、カルボキシ（Ｃ_１〜６）アルキル、（Ｃ_１〜６）アルキルオキシカル
   ボニル、ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎ−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは１〜
   １０である）、ＨＯＣＨ_２−（ＣＨＯＨ）_ｍ−ＣＨ_２−（式中、ｍは３〜４であ
   る）；１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニル、１−メチル−ピリジニウム
   −４−カルボニルまたはＬｙｓであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）
   ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）である場合、Ｑは
   存在せず； Ａ１が、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−
   （ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ −Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜７である）、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ_２ ）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝（式中、ｎは２〜
   ５である）、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_ｎ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２］ＣＨ_２ Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）であり； Ａ２が、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａ、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、または−Ｎ［（ＣＨ _２ ）_ｎ−ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは２〜５である）であり； Ａ３が、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）またはＤ−Ｐｈｅ（Ｘ）
   （式中、Ｘはハロまたはニトロである）、Ｌ−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ
   、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｌ−１−Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）
   または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−アリール）−ＣＨ_２−｝であり； Ａ４がＬ−ＴｈｒまたはＬ−Ａｌａであり； Ａ５が、Ｌ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ａｌａ、または（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ_２−
   ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２−｝であり； Ａ６がＬ−ＡｌａまたはＧｌｙであり； Ａ７がＬ−ＳｅｒまたはＬ−Ａｌａであり； Ａ８がＬ−ＳｅｒまたはＬ−Ａｌａであり； Ａ９がＬ−ＧｌｕまたはＬ−Ａｌａであり； Ａ１０がＬ−ＴｈｒまたはＬ−Ａｌａであり； Ａ１１が、Ｇｌｙ、Ｌ−Ａｌａまたは−ＮＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−であり； Ａ１２がＬ−Ｖａｌまたは（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ_３）_２］−Ｃ
   Ｈ_２−｝であり； Ａ１３がＧｌｙまたはＬ−Ａｌａであり、そして ＺがＯＲ（式中、ＲはＨまたはＮＲ_１Ｒ_２（式中、Ｒ_１およびＲ_２は独立して
   、Ｈまたは（Ｃ_１〜６）アルキルから選択される）であり、 ＱおよびＺは、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに位置する合計で１０個
   までのアミノ酸をさらに含んでもよい、請求項１〜４に記載のペプチド。
6. 【請求項６】 Ｑが、Ｈ、メチル；アセチル；カルボキシメチレン、メトキ
   シカルボニル；ＣＨ_３（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−、Ｄ−１−
   グルシチル、１−メチル−ピリジニウム−３−カルボニルまたは１−メチル−ピ
   リジニウム−４−カルボニルであるか、あるいはＡ１がＨ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）Ｎ
   Ｈ−（ＣＨ_２）_４−Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｑは存在せず； Ａ１が、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｌａ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ−
   （ＣＨ_２）_４−Ｃ（Ｏ）−、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、ｎは５
   〜７である）、（Ｓ）−｛−ＮＨ−ＣＨ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−
   ＮＨ_２］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−｝または−Ｎ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ
   ）−ＮＨ_２］ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−であり； Ａ２が、Ｌ−Ｓｅｒ、Ｌ−Ａｌａまたは−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−ＯＨ］−ＣＨ_２ −Ｃ（Ｏ）−であり； Ａ３が、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式中、Ｘはハロまたは
   ニトロである）、Ｌ−Ｈｆｅ、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａ、Ｌ−Ｐａｌ（３）、Ｌ
   −１−Ｎａｌ、Ｌ−２−ＮａｌまたはＬ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）であり；そして Ｚが、ＯＨ、ＮＨ_２またはＮＨＥｔであり、 ＱおよびＺは、Ａ１位および／またはＡ１３位の隣りに位置する合計で１０個
   までのアミノ酸をさらに含んでもよい、請求項１〜５に記載のペプチド。
7. 【請求項７】 一般式がＱ−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−
   Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ａ１１−Ａ１２−Ｇｌｙ−Ｚ（式ＩＩＩ）で
   ある、請求項１〜６に記載のペプチド。
8. 【請求項８】 １個〜４個の修飾を有する請求項１〜７に記載のペプチド。
9. 【請求項９】 ２個〜３個の修飾を有する請求項８に記載のペプチド。
10. 【請求項１０】 Ａ１が、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、Ｈ_２Ｎ−Ｃ（＝ＮＨ）
    ＮＨ−（ＣＨ_２）_４−Ｃ（Ｏ）−、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−（式中、
    ｎは５〜７である）、または−Ｎ［（ＣＨ_２）_３−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ_２ ］ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−であり； Ａ２がＬ−Ｓｅｒまたは−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−で
    あり； Ａ３が、Ｌ−Ｐｈｅ、Ｌ−Ｐｈｅ（Ｘ）（式中、Ｘはハロである）、Ｌ−１−
    Ｎａｌ、Ｌ−２−Ｎａｌ、Ｌ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）、Ｌ−Ｔｈｉ、Ｌ−Ｃｈａまた
    はＬ−Ｐａｌ（３）である、請求項７に記載のペプチド。
11. 【請求項１１】 一般式がＱ−Ａｒｇ−Ａ２−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａ
    ｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａ１２−Ｇｌｙ−Ｚ（式ＩＶ
    ）である、請求項９または１０に記載のペプチド。
12. 【請求項１２】 デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
    ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ 、デスアミノアルギニニル−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅ
    ｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＣＨ_３−（ＯＣ
    Ｈ_２ＣＨ_２）_３−ＯＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅ
    ｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ 、Ｄ−１−グルシチル−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−
    Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＣＨ_３Ｏ−
    Ｃ（Ｏ）−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ
    −Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐ
    ｈｅ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ
    −Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−
    Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈ
    ｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
    −Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ−［
    ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−ＯＨ］−Ｃ
    Ｈ_２−Ｃ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−
    Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｎ［（ＣＨ_２）_２−
    ＯＨ］−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ
    −Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ψ−［ＣＨ_２ＮＨ］−Ｇｌｙ−ＮＨ_２、Ｈ
    −Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ（Ｃｌ）−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ
    −Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_５−Ｃ
    （Ｏ）−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−
    Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｈ_２Ｎ−（ＣＨ_２）_６−Ｃ（Ｏ）−Ｓ
    ｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇ
    ｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ、（Ｎ−メチル−ニコチノイル）^＋−Ａｒｇ−Ｓｅ
    ｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌ
    ｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨを含む群から選択されるペプチド。
13. 【請求項１３】 治療的物質として使用される、請求項１〜１２のいずれか
    に記載のペプチド。
14. 【請求項１４】 請求項１〜１２に記載される１つまたは２つ以上のペプチ
    ドおよび、薬学的に受容可能なキャリアとを含む薬学的組成物。
15. 【請求項１５】 自己免疫疾患（より詳細には関節炎）に罹患している患者
    における自己抗原に対する特異的なＴ細胞の寛容性を誘導する薬学的調製物を製
    造するための、請求項１〜１２に記載される１つまたは２つ以上のペプチドの使
    用。
16. 【請求項１６】 請求項１〜１２のいずれかに記載される１つまたは２つ以
    上のペプチドおよび、検出剤を含む診断用組成物。