JP2003512046A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項１】 （ａ） 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド、または
（ｂ）（ｉ）配列番号１の１から１５０３のヌクレオチドとして示される核酸配列の相補鎖、または
（ｉｉ）少なくとも１００のヌクレオチドの（ｉ）の部分配列と
高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされるポリペプチド、
から成る群から選択されるグルカノトランスフェラーゼ活性を有する単離されたポリペプチド。
【請求項２】 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を有する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項３】 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列を含んでいる請求項１記載のポリペプチド。
【請求項４】 前記ポリペプチドは、大腸菌（Escherichia coli）DSM 13049に存在するプラスミドにクローン化されたＤＮＡ配列のグルカノトランスフェラーゼをコードする部分でコードされたポリペプチドと、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項５】 上記ポリペプチドは、１つまたは複数のアミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含んでいる、配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドの変異体である請求項１記載のポリペプチド。
【請求項６】 ２０ｍＭのリン酸緩衝液中でｐＨ７．０、６５℃、１０分間インキュウベートした後のポリペプチドの活性に対して、２０ｍＭのリン酸緩衝液中で、ｐＨ７．０、１０分間、６７℃でインキュウベートした後、少なくとも７５％の活性を保持する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項７】 αグルカンを基質として、分子内トランスグリコシル化反応によって、環状グルカンを生成することができる請求項１記載のポリペプチド。
【請求項８】 サーマス属から誘導される請求項７記載のポリペプチド。
【請求項９】 サーマス・ルーベンス(Thermus rubens)種から誘導される請求項７または８記載のポリペプチド。
【請求項１０】 サーマス・ルーベンス(Thermus rubens)ATCC31556から誘導される請求項７から９のいずれか１項記載のポリペプチド。
【請求項１１】 請求項１から１０のいずれか１項に記載のポリペプチドに対しコードする核酸配列を含んでいる単離された核酸配列。
【請求項１２】 適当な発現宿主内にポリペプチドの発現を指令できる１つまたは複数の制御配列に作用可能に結合される請求項１１の核酸配列を含んでいる核酸構成物。
【請求項１３】 請求項１２記載の核酸構成物、プロモータ、および転写および翻訳終止信号（stop signals）を含んでいる組換え発現ベクター。
【請求項１４】 請求項１２記載の核酸構成物を含んでいる組換え宿主細胞。
【請求項１５】 （ａ）ポリペプチドの製造を支援する条件下で請求項１４記載の組換え宿主細胞を培養するステップ、および
（ｂ）ポリペプチドを回収するステップを
含んでいる方法であり、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリペプチドを製造するための方法。
【請求項１６】 宿主細胞は、サーマス(Thermus)属からから選択される請求項１５記載の方法。
【請求項１７】 食品を製造するための請求項１から１０のいずれか１項記載のポリペプチドの使用。
【請求項１８】 請求項１から１０のいずれか１項に記載のポリペプチド含んでいる清浄剤組成物または洗剤組成物。
【請求項１】 （ａ） 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド、または
（ｂ）（ｉ）配列番号１の１から１５０３のヌクレオチドとして示される核酸配列の相補鎖、または
（ｉｉ）少なくとも１００のヌクレオチドの（ｉ）の部分配列と
高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされるポリペプチド、
から成る群から選択されるグルカノトランスフェラーゼ活性を有する単離されたポリペプチド。
【請求項２】 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を有する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項３】 配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列を含んでいる請求項１記載のポリペプチド。
【請求項４】 前記ポリペプチドは、大腸菌（Escherichia coli）DSM 13049に存在するプラスミドにクローン化されたＤＮＡ配列のグルカノトランスフェラーゼをコードする部分でコードされたポリペプチドと、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項５】 上記ポリペプチドは、１つまたは複数のアミノ酸の置換、欠失、および／または挿入を含んでいる、配列番号２の１から５０１のアミノ酸として示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドの変異体である請求項１記載のポリペプチド。
【請求項６】 ２０ｍＭのリン酸緩衝液中でｐＨ７．０、６５℃、１０分間インキュウベートした後のポリペプチドの活性に対して、２０ｍＭのリン酸緩衝液中で、ｐＨ７．０、１０分間、６７℃でインキュウベートした後、少なくとも７５％の活性を保持する請求項１記載のポリペプチド。
【請求項７】 αグルカンを基質として、分子内トランスグリコシル化反応によって、環状グルカンを生成することができる請求項１記載のポリペプチド。
【請求項８】 サーマス属から誘導される請求項７記載のポリペプチド。
【請求項９】 サーマス・ルーベンス(Thermus rubens)種から誘導される請求項７または８記載のポリペプチド。
【請求項１０】 サーマス・ルーベンス(Thermus rubens)ATCC31556から誘導される請求項７から９のいずれか１項記載のポリペプチド。
【請求項１１】 請求項１から１０のいずれか１項に記載のポリペプチドに対しコードする核酸配列を含んでいる単離された核酸配列。
【請求項１２】 適当な発現宿主内にポリペプチドの発現を指令できる１つまたは複数の制御配列に作用可能に結合される請求項１１の核酸配列を含んでいる核酸構成物。
【請求項１３】 請求項１２記載の核酸構成物、プロモータ、および転写および翻訳終止信号（stop signals）を含んでいる組換え発現ベクター。
【請求項１４】 請求項１２記載の核酸構成物を含んでいる組換え宿主細胞。
【請求項１５】 （ａ）ポリペプチドの製造を支援する条件下で請求項１４記載の組換え宿主細胞を培養するステップ、および
（ｂ）ポリペプチドを回収するステップを
含んでいる方法であり、請求項１から１０のいずれか１項記載のポリペプチドを製造するための方法。
【請求項１６】 宿主細胞は、サーマス(Thermus)属からから選択される請求項１５記載の方法。
【請求項１７】 食品を製造するための請求項１から１０のいずれか１項記載のポリペプチドの使用。
【請求項１８】 請求項１から１０のいずれか１項に記載のポリペプチド含んでいる清浄剤組成物または洗剤組成物。
本発明はまた、（ｉ）配列番号１の１から１５０３のヌクレオチドとして示される核酸配列の相補鎖、または（ｉｉ）少なくとも１００ヌクレオチドの（ｉ）の部分配列を、低ストリンジェンシー条件下、好ましくは中位ストリンジェンシー条件下、より好ましくは高ストリンジェンシー条件下、ハイブリダイズする、本発明のポリペプチドをコードする単離された核酸配列に関する。本発明はまた、（ｉ）および（ｉｉ）の相補鎖にも関する。
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