JP2003137886A - ピリミド［４，５−ｂ］インドール - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】薬学的製剤の活性成分として有用なピリミド
［４，５−ｂ］インドールの提供。 【解決手段】本発明のピリミド［４，５−ｂ］インドー
ルは、ＭＫＫ７およびＭＫＫ４阻害活性を有し、そし
て、ＭＫＫ７およびＭＫＫ４活性に関連した疾患の予防
および治療に使用することができる。そのような疾患
は、喘息、アトピー性皮膚炎、鼻炎、アレルギー性鼻
炎、アレルギー性疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰ
Ｄ）、敗血症性ショック、関節炎、関節病および心筋障
害、ならびに慢性関節リウマチ、甲状腺機能亢進症、お
よびアテローム性動脈硬化症のような自己免疫性疾患等
の炎症性および免疫調節性疾患を含む。本発明の化合物
は、虚血症、心筋障害、肺動脈高血圧症、腎不全症、ハ
ンチントン舞踏病および心臓肥大症、ならびにパーキン
ソン病、アルツハイマー病および局所性虚血症等の神経
変性疾患の治療にも有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、薬学的製剤の活性
成分として有用なピリミド［４，５−ｂ］インドールに
関する。本発明のピリミド［４，５−ｂ］インドール
は、ＭＫＫ７およびＭＫＫ４（ＭＡＰＫ（マイトジェン
アクティベーテッドプロテインキナーゼ）キナーゼ７お
よび４）阻害活性を有し、そして、ＭＫＫ７およびＭＫ
Ｋ４活性に関連した疾患の予防および治療に使用するこ
とができる。

【０００２】より具体的には、本発明のピリミド［４，
５−ｂ］インドール誘導体は、喘息、アトピー性皮膚
炎、鼻炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性疾患、慢性
閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、敗血症性ショック、関節
炎、関節病および心筋障害、ならびに慢性関節リウマ
チ、甲状腺機能亢進症、およびアテローム性動脈硬化症
のような自己免疫性疾患等の炎症性および免疫調節性疾
患の治療と予防に有用である。

【０００３】本発明の化合物は、虚血症、心筋障害、肺
動脈高血圧症、腎不全症、ハンチントン舞踏病および心
臓肥大症、ならびにパーキンソン病、アルツハイマー病
および局所性虚血症等の神経変性疾患の治療にも有用で
ある。これらの疾患もＭＫＫ７および／またはＭＫＫ４
に関連するからである。

【０００４】

【従来の技術】マイトジェンアクティベーテッドプロテ
インキナーゼ類（ＭＡＰＫｓ）は、セリン／トレオニン
キナーゼファミリーの一つであり、リポ多糖類（ＬＰ
Ｓ）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、インターロイキ
ン、ＣＤ４０およびその他様々なタイプの刺激に反応し
て起こる細胞膜から核へのシグナルの伝達に関係してい
る。それらのキナーゼは、細胞の成長、分化、活性化、
アポプトーシス、ストレス反応、および形質転換等の細
胞における事象をコントロールする幅広い種類のシグナ
リングカスケードに関与している。近年、ＭＡＰＫのサ
ブグループとして、細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫ）、ｐ
−３８ ＭＡＰＫ、およびストレスアクティベーテッド
／ｃ−ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＳＡＰＫ／ＪＮＫ）の
３つが知られている(Pouyssegur J. An arresting star
t for MAPK. Science, 290: 1515-1518, 2000 )。ＳＡ
ＰＫ／ＪＮＫｓは、オスモル濃度または代謝作用の変
化、虚血症、熱ショック、ずれ応力、セラミドまたは炎
症性サイトカイン（ＴＮＦ−α、ＩＬ−１）等の、細胞
の「ストレス」に応答して活性化される。いったん活性
化されると、ＪＮＫｓは、ｃ−ｊｕｎ、ＪｕｎＤ、活性
化Ｔ細胞の核因子（ＮＦＡＴ）４またはＥｌｋ−１を含
む多様な転写因子のリン酸化を通じて遺伝子活性をコン
トロールする。前記転写因子のすべては、免疫細胞の内
部に存在し、炎症反応の間の多くの遺伝子の転写を調節
することが知られている。このように、プロ炎症性サイ
トカインとＴｈ１／Ｔｈ２分化誘発等の機能の中で、と
りわけＳＡＰＫ／ＪＮＫｓは、ＴおよびＢリンパ球の活
性化および増殖と、マスト細胞の活性化を調節する[Sas
aki T., Wada T., Kishimoto, H., Irie-Sasaki J., Ma
tsumoto G., Goto T., Yao Z. et al., The stress ki
nase mitogen-activated protein kinase kinase (MKK)
7 is a negative regulator of antigen receptor andg
rowth factor receptor-induced proliferation in hem
atopoietic cells. J.Exp Med, 194:1-14, 2001]。

【０００５】活性化されるためには、ＭＡＰＫｓ自体
が、そのＴｈｒ−Ｘ−Ｔｙｒモチーフと呼ばれる部分に
おいて、トレオニンおよびチロシンの両方のリン酸化が
必要であり、そのリン酸化は、上流のレギュレータであ
るＭＡＰＫキナーゼ類（ＭＫＫｓ）によって行われる。
ＭＫＫ１〜ＭＫＫ７（ＭＥＫ１、ＭＥＫ２、ＭＫＫ３、
ＭＫＫ４、ＭＥＫ５、ＭＫＫ６およびＭＫＫ７）が現在
までに知られており、ＭＫＫ７が一番最近に同定された
（(Tournier C., Whitmarsh J., Cavanagh J., Barrett
T., Davis RJ. Mitogen-activated protein kinase ki
nase 7 is an activator of the c-Jun NH₂-terminal k
inase. Proc Natl Acad Sci USA, 94: 7337-7342, 199
7), (Moriguchi T., Toyoshima F., Masuyama N., Hana
fusa H., Gotoh Y., Nishida E. A novel SAPK/JNK kin
ase, MKK7, stimulated by TNF( andcellular stresse
s. EMBO J, 16: 7045-7053, 197)および(Lu X., Nemoto
S.,Lin A. Identification of c-Jun NH2-terminal pr
otein kinase (JNK)-activating kinase 2 as an activ
ator of JNK but not p38. J Biol Chem, 272: 24751-2
4754, 1997)）。これらキナーゼファミリーの中で、Ｍ
ＫＫ４およびＭＫＫ７のみが、ＳＡＰＫ／ＪＮＫｓをリ
ン酸化することができる。これらのＭＫＫｓの優勢ネガ
ティブ型の過剰発現と、ＭＫＫ４またはＭＫＫ７が欠失
したマウス由来の細胞の使用とから、これらが多くの炎
症反応の調節に関係していることが明確に示された。Ｍ
ＫＫ７は専らＳＡＰＫ／ＪＮＫｓを基質として使用する
と信じられているが、ＭＫＫ４もまたｐ−３８ＭＡＰキ
ナーゼをリン酸化することができる。ｐ−３８キナーゼ
もまた炎症性遺伝子発現のコントロールに関係してお
り、特に、リポ多糖およびサイトカインによる細胞への
刺激後において関与している（(Han J., Lee JD., Jian
g Y., Li Z., Feng L., Ulevitch RJ. A MAP kinasetar
geted by endotoxin in mammalian cells. Science, 26
5: 808-811, 1994.),(Lee JC., Laydon JT., McDonnell
PC., Gallagher TF., Kumar S., Green D.,McNulty
D., Blumenthal MJ., Heys JR., Landvatter SW., Stri
ckler JE., McLaughlin MM., Siemens IR., Fisher S
M., Livi GP., White JR., Adams JL., Young PR. A pr
otein kinase involved in the regulation of inflamm
atory cytokine synthesis. Nature, 372: 739-746, 19
94)）。Ｔ細胞中では、ｐ３８は、ＩＬ−１２およびＩ
ＦＮγの遊離をコントロールし、そして、Ｂ細胞中で
は、ＣＤ４０架橋は、急速なｐ３８活性化につながり、
したがって、増殖および接着分子発現をコントロールす
る。さらに、ｐ３８ ＭＡＰＫは、酸素不足により活性
化され、そして、転写因子ＡＴＦ２を活性化することに
より、ニューロンの発達および生存における役割を果た
す(Lee JC., Kumar S., Griswold DE., Underwood DC.,
Votta BJ., Adams JL. Inhibition of p38 MAP kinase
as a therapeutic strategy. Immunopharmacology, 4
7: 185-201, 2000)。

【０００６】ＭＫＫ７および／またはＭＫＫ４特異性イ
ンヒビターは、プロ炎症性サイトカインの合成および様
々な免疫細胞の活性化をブロックするものと期待されて
おり、幅広い抗炎症特性とともに、炎症性および自己免
疫性疾患の治療に対する可能性を有していると考えられ
る。前記炎症性および自己免疫性疾患は、喘息、鼻炎、
アレルギー性疾患、敗血症性ショック、関節病および心
筋障害、ならびに慢性関節リウマチ、甲状腺機能亢進
症、およびアテローム性動脈硬化症等の自己免疫性疾患
を含む。

【０００７】このようなインヒビターは、アポプトーシ
ス経路を妨害することにより、腎不全症、ハンチントン
舞踏病、心臓肥大症、ならびにパーキンソン病、アルツ
ハイマー病および局所性虚血症等の神経変性疾患を治療
できる(Xia XG., Harding T., Weller M., Bieneman
A., Uney JB., Schulz JB. Gene transfer of the JNKi
nteracting protein-1 protects dopaminergic neurons
in the MPTP model ofParkinson's disease. Proc Nat
l Acad Sci USA, 98: 10433-10438, 2001)。

【０００８】ＷＯ ９８４２７０８は、下記の一般式で
表される抗喘息剤を開示している。

【化２】 式中、Ｒ^1-1a、Ｒ^1-2a、Ｒ^2-1a、Ｒ^2-2a、Ｒ^3-1a、およ
びＲ^3-2aは、前記出願において定義されている。

【０００９】ＷＯ ９６２６９４１は、下記の一般式で
表される薬剤を開示している。

【化３】 式中、Ｒ^2-1b、Ｒ^2-2b、Ｒ^4-1b、Ｒ^4-2b、および Ｒ^7b
は、前記出願において定義されている。

【００１０】ＷＯ ９５１９９７０は、下記式で表され
る上皮成長因子インヒビターを開示している。

【化４】 式中、Ｒ^1c、Ｒ^2c、Ｒ^3c、Ｒ^4c、Ｒ^5cおよびＲ^6cは、前
記明細書において定義されている。

【００１１】ＷＯ ９３２００７８は、下記式で表され
る薬学的に活性な化合物を開示している。

【化５】 式中、Ｒ^2-1d、Ｒ^2-2d、Ｒ^4-1d、Ｒ^4-2d、Ｒ^56-1d、Ｒ
^56-2d、Ｒ^56-3d、Ｒ^{56- 4d}およびＲ^7dは、前記出願にお
いて定義されている。

【００１２】インド特許第１５７２８０号明細書は、下
記式で表される抗高血圧剤の調製方法を開示している。

【化６】 式中、Ｒ^1e、Ｒ^2e、Ｒ^3e、Ｒ^4e、およびＲ^5eは、前記明
細書において定義されている。

【００１３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前記文
献およびその他の文献のいずれも、ＭＫＫ７および／ま
たはＭＫＫ４阻害活性を有するピリミド［４，５−ｂ］
インドール誘導体を開示していない。

【００１４】効果的なＭＫＫ７および／またはＭＫＫ４
阻害活性を有し、ＭＫＫ７および／またはＭＫＫ４活性
に関係する疾患の予防および治療に使用することができ
る化合物の開発が望まれてきた。

【００１５】

【課題を解決するための手段】ピリミド［４，５−ｂ］
インドール誘導体の化学修飾に対する広範な研究の結
果、本発明者らは、本発明に関係した構造を有する化合
物が、予期しないほど優れたＭＫＫ７および／またはＭ
ＫＫ４阻害活性を有することを見出した。本発明は、そ
れらの発見に基づいて成し遂げられた。

【００１６】本発明は、下記式（Ｉ）で表される新規な
ピリミド［４，５−ｂ］インドール誘導体、その互変異
体もしくは立体異性体、またはそれらの塩を提供する。

【化７】 式中、Ｒ¹は水素またはアミノであり、Ｒ²は５〜７員環
のシクロアルキルまたは直鎖もしくは分枝Ｃ_1-6アルキ
ルであり、そのＣ_1-6アルキルは任意にフェニルで置換
されているかまたは任意に飽和の５〜７員環で置換され
ており、前記飽和の５〜７員環は、ＮおよびＯからなる
群から選択される０から３個のヘテロ原子を有し、Ｒ³
は、水素、５〜７員環のシクロアルキル、または直鎖も
しくは分枝Ｃ_1-6アルキルであり、そのＣ_1-6アルキルは
任意にフェニルで置換されているかまたは任意に飽和の
５〜７員環で置換されており、前記飽和の５〜７員環
は、ＮおよびＯからなる群から選択される０から３個の
ヘテロ原子を有するか、または、Ｒ²およびＲ³は、共同
して、それらが付加している窒素原子とともに飽和の５
〜７員環を形成し、その環は、任意にＮＨまたはＯで中
断されており、ここで、前記飽和の環は任意にベンゼン
環に縮合しているか、または、前記飽和の環は、任意
に、Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、フェニル置換されたＣ
_1-6アルキル、カルボキシ、Ｃ_1-6アルコキシカルボニ
ル、もしくは０から３個のＮ原子を有する飽和の５〜７
員環で置換されているか、または、前記飽和の環は、０
から３個のＮもしくはＯ原子を有する飽和の５〜７員環
とともにヘテロサイクリックなスピロ環を形成してお
り、Ｒ⁴は、ヒドロキシ、Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、ま
たはＣ_1-6アルコキシであり、そして、Ｒ⁵は水素または
Ｃ_1-6アルコキシである。

【００１７】本発明の化合物は、非常に優れたＭＫＫ７
および／またはＭＫＫ４阻害活性を示す。したがって、
それらは、ＭＫＫおよび／またはＭＫＫ４関連疾患の治
療に有用な医薬または医療用組成物の生産に好適であ
る。

【００１８】より具体的には、本発明のピリミド［４，
５−ｂ］インドール誘導体はＭＫＫ７および／またはＭ
ＫＫ４に拮抗するので、それらは、下記のような疾患の
治療および予防に有用である。その疾患とは、すなわ
ち、喘息、アトピー性皮膚炎、鼻炎、アレルギー性鼻
炎、アレルギー性疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰ
Ｄ）、敗血症性ショック、関節炎、関節病および心筋障
害、ならびに慢性関節リウマチ、甲状腺機能亢進症、お
よびアテローム性動脈硬化症のような自己免疫性疾患等
の炎症性または免疫調節性疾患である。

【００１９】したがって、ＭＫＫ７および／またはＭＫ
Ｋ４は重要なターゲットであり、ＭＫＫ７および／また
はＭＫＫ４に対する拮抗作用は、このような炎症性およ
び免疫調節性疾患の治療に有効であると思われる。

【００２０】本発明の化合物は、さらに、虚血症、心筋
障害、肺動脈高血圧症、腎不全症、ハンチントン舞踏病
および心臓肥大症、ならびにパーキンソン病、アルツハ
イマー病および局所性虚血症等の神経変性疾患の治療に
有用である。これらの疾患もまたＭＫＫ７および／また
はＭＫＫ４に関連するからである。

【００２１】式（Ｉ）における好ましい化合物は、式
中、Ｒ¹は水素またはアミノであり、Ｒ²は、ピロリジノ
Ｃ_1-6アルキル、シクロヘキシル、ベンジル、またはＣ
_2-6アルキルであり、Ｒ³は水素またはベンジルである
か、または、Ｒ²およびＲ³は、共同して、それらが付加
している窒素原子とともに飽和のヘテロ環を形成し、そ
のヘテロ環は、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ
［４，５］デカン、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジ
ノ、ホモピペリジノ、およびモルホリノからなる群から
選択され、そして、前記ヘテロ環は、任意に、ベンジ
ル、ブロモ、メチル、カルボキシ、もしくはピロリジノ
で置換されているか、または、前記ヘテロ環は、任意に
ベンゼンに縮合しており、Ｒ⁴は、ヒドロキシ、メチ
ル、クロロ、またはメトキシであり、そして、Ｒ⁵は水
素またはメトキシである。

【００２２】式（Ｉ）におけるその他の好ましい化合物
は、Ｒ⁴がヒドロキシであり、かつＲ⁵が水素である。

【００２３】本発明の好ましい化合物は、下記の通りで
ある。２−アミノ−４−（１−ホモピペリジノ）−６−
ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インド
ール、２−アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−ピロリ
ジノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドー
ル、２−アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−モルホリ
ノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、
２−アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−ピペリジノ）
−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、２−
アミノ−４−ベンジルアミノ−６−ヒドロキシ−（９
Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、２−アミノ
−４−（４−ブロモ−１−ピペリジノ）−６−ヒドロキ
シ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、６
−ヒドロキシ−４−（１−ピペリジノ）−（９Ｈ）−ピ
リミド［４，５−ｂ］インドール、２−アミノ−４−シ
クロヘキシルアミノ−６−ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピリ
ミド［４，５−ｂ］インドール、ならびにそれらの互変
異体および立体異性体、ならびにそれらの塩。

【００２４】

【発明の実施の形態】本発明の前記式（Ｉ）の化合物
は、特に限定されないが、種々の公知の方法を組み合せ
て調製することができる。いくつかの実施形態では、出
発原料または中間体として使用される化合物におけるア
ミノ基、カルボキシル基およびヒドロキシル基等の一以
上の置換基は、当業者に公知の保護基で保護することが
有利である。前記保護基の例は、Greene and Wutsの"Pr
otective Groups in Organic Synthesis (2^nd Editio
n)"に記述されている。

【００２５】本発明の前記式（Ｉ）の化合物は、下記の
方法［Ａ］によって調製することができる。ただし、こ
の方法に限定されない。

【００２６】［Ａ］ 化合物（Ｉ）

【化８】 またはその塩は、下記の一般式（II）で表される化合物
またはその塩を、下記の一般式（III）で表される化合
物またはその塩と反応させることにより得ることができ
る。

【化９】 式中、Ｌは、例えば塩素、臭素またはヨウ素原子等のハ
ロゲン原子、例えばベンゼンスルホニルオキシまたはｐ
−トルエンスルホニルオキシ等のＣ_6-10アリールスルホ
ニルオキシ基、および、例えばトリフルオロメタンスル
ホニルオキシ、メタンスルホニルオキシ等のＣ_1-4アル
キルスルホニルオキシ基のような脱離基を表す。

【００２７】この反応は、溶媒の非存在下で、または溶
媒中で行うことができる。前記溶媒としては、例えば、
メタノールおよびエタノール等のアルコール類や、ジオ
キサン、ジエチルエーテルおよびテトラヒドロフラン
（ＴＨＦ）等のエーテル類や、ベンゼン、トルエンおよ
びキシレン等の芳香族炭化水素や、アセトニトリル等の
ニトリル類や、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）および
ジメチルアセトアミド等のアミド類や、ジメチルスルホ
キシド等のスルホキシド類や、その他の溶媒を含む。

【００２８】この反応で使用する、前記式（II）で表さ
れる化合物またはその塩１モルに対する前記式（III）
で表される化合物またはその塩の量は、通常は１／５か
ら５モルであり、好ましくは、約１／２から２モルであ
る。

【００２９】反応温度は、反応させる化合物に応じて任
意に設定することができる。前記反応温度は、特に限定
されないが、通常約１０℃から２００℃であり、好まし
くは約２０℃から１００℃である。前記反応は、通常３
０分から４８時間行われ、そして、好ましくは１から２
４時間行われる。

【００３０】前記反応は、塩基の存在下で行うことが有
利である。前記塩基の例としては、水素化ナトリウムま
たは水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物、ナトリ
ウムメトキシドまたはナトリウムエトキシド等のアルカ
リ金属アルコキシド、水酸化ナトリウムまたは水酸化カ
リウム等のアルカリ金属水酸化物、炭酸ナトリウムまた
は炭酸カリウム等の炭酸塩、ならびに、炭酸水素ナトリ
ウムおよび炭酸水素カリウム等の炭酸水素塩、トリエチ
ルアミン等の有機アミンを含む。

【００３１】もし必要であれば、Ｒ¹、Ｒ⁴、およびＲ⁵
は、反応中に任意に保護し、そしてその後に脱保護する
ことができる。

【００３２】［Ｂ］ 化合物（IIａ）

【化１０】 （式中、Ｌ、Ｒ⁴およびＲ⁵は上記で定義した通りであ
る）は、例えば、下記の工程によって得ることができ
る。

【化１１】

【００３３】化合物１（式中、Ｌ’は、例えば塩素、臭
素またはヨウ素原子等のハロゲン原子、例えばベンゼン
スルホニルオキシまたはｐ−トルエンスルホニルオキシ
等のＣ_6-10アリールスルホニルオキシ基、および、例え
ばトリフルオロメタンスルホニルオキシ、メタンスルホ
ニルオキシ等のＣ_1-4アルキルスルホニルオキシ基のよ
うな脱離基であり、Ｒ⁴およびＲ⁵は上記で定義した通り
である）は、市販されているか、または、一般的な化学
試薬から通常の方法によって合成することができる。Ｒ
⁴および／またはＲ⁵は、反応中、任意に保護しても良
い。

【００３４】化合物２は、例えばＮａＨ等の塩基により
活性化されたＮＣ−ＣＨ₂ＣＯＯＥｔの、化合物１の
Ｌ’に対する求核攻撃により調製することができる。こ
の反応は、例えば、メタノールおよびエタノール等のア
ルコール類や、ジオキサン、ジエチルエーテルおよびテ
トラヒドロフラン（ＴＨＦ）等のエーテル類や、ベンゼ
ン、トルエンおよびキシレン等の芳香族炭化水素や、ア
セトニトリル等のニトリル類や、ジメチルホルムアミド
（ＤＭＦ）およびジメチルアセトアミド等のアミド類
や、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類や、その
他の溶媒を含む溶媒中で行うことができる。この反応
は、通常、室温から１００℃で一夜行うことができる。

【００３５】化合物３は、化合物２のＮＯ₂を、還元剤
の存在下、溶媒中で加熱して調製することができる。前
記還元剤としては、例えば、Ｚｎ−ＡｃＯＨ、Ｚｎ−Ｈ
Ｃｌ、Ｆｅ−ＡｃＯＨ、およびＦｅ−ＨＣｌがある。前
記溶媒としては、例えば、ベンゼン、トルエンおよびキ
シレン等の芳香族炭化水素や、アセトニトリル等のニト
リルや、その他の溶媒を含む。この反応は、通常、室温
から１００℃で３０分から一夜行うことができる。

【００３６】化合物４は、化合物３をシアナミドと反応
させて調製することができる。この反応は、例えば、メ
タノールおよびエタノール等のアルコールや、ジオキサ
ン、ジエチルエーテルおよびテトラヒドロフラン（ＴＨ
Ｆ）等のエーテルや、ベンゼン、トルエンおよびキシレ
ン等の芳香族炭化水素や、アセトニトリル等のニトリル
や、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびジメチルア
セトアミド等のアミドや、ジメチルスルホキシド等のス
ルホキシドや、その他の溶媒を含む溶媒中で行うことが
できる。この反応は、通常、一夜または二夜の還流によ
り行うことができる。

【００３７】化合物５は、化合物４をＮａＯＨ水溶液等
のアルカリ溶液で処理することにより調製することがで
きる。この反応は、通常、３０分から一夜の還流により
行うことができる。

【００３８】化合物（IIａ）は、通常の方法により化合
物５に脱離基を導入して調製することができる。

【００３９】その他の手段として、［Ｃ］ 化合物（II
ｂ）

【化１２】 （式中、Ｌ、Ｒ⁴およびＲ⁵は上記で定義した通りであ
る）は、例えば、下記の工程によって得ることができ
る。

【化１３】

【００４０】化合物５’は、化合物３をホルムアミドで
処理し、続いてＮａＯＨ水溶液等のアルカリ溶液で処理
して調製することができる。この反応は、通常、３０分
から一夜の還流により行うことができる。

【００４１】化合物（IIｂ）は、通常の方法により化合
物５’に脱離基を導入して調製することができる。

【００４２】前記式（Ｉ）で示した化合物またはその塩
が、互変異性体および／または立体異性体（例：幾何異
性体および配座異性体）を有するときは、それらの分離
した各異性体および混合物もまた本発明の範囲に含まれ
る。

【００４３】前記式（Ｉ）で示した化合物またはその塩
が、その構造に不斉炭素を有するときは、それらの光学
活性体およびラセミ混合物もまた本発明の範囲に含まれ
る。

【００４４】式（Ｉ）で示される化合物の代表的な塩に
は、本発明の化合物と鉱酸もしくは有機酸、または有機
塩基もしくは無機塩基との反応によって製造される塩を
含む。そのような塩は酸付加塩および塩基付加塩とし
て、それぞれ知られている。

【００４５】塩を形成する酸は、特に限定されないが、
硫酸、リン酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸等の無
機酸、および、特に限定されないが、ｐ−トルエンスル
ホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモベン
ゼンスルホン酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸
等の有機酸を含む。

【００４６】塩基付加塩は、特に限定されないが、水酸
化アンモニウム、アルカリ金属水酸化物、アルカリ土類
金属水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩等の無機塩基、およ
び、特に限定されないが、エタノールアミン、トリエチ
ルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン等
の有機塩基から誘導される塩を含む。無機塩基の例とし
ては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウ
ム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カ
リウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム等を含む。

【００４７】本発明の化合物またはその塩は、その置換
基次第で、低級アルキルエステルまたは公知の他のエス
テル、および／または水和物もしくは別の溶媒和物を形
成するように修飾しても良い。それらのエステル、水和
物、および溶媒和物は本発明の範囲に含まれる。

【００４８】本発明の化合物は、特に限定されないが、
通常のおよび腸溶性錠剤、カプセル、ピル、散剤、顆粒
剤、エリキシル剤、チンキ剤、溶剤、懸濁剤、シロッ
プ、固体もしくは液体エアロゾル、および乳濁液等の経
口剤の形で投与して良い。また、本発明の化合物は、特
に限定されないが、静脈内投与、腹腔内投与、皮下投
与、筋肉内投与のような薬学の分野の当業者によく知ら
れている形態等により非経口投与しても良い。本発明の
化合物は、当業者によく知られている適切な経鼻用ビヒ
クルの局所的使用を介した鼻腔内投与形態または経皮配
送システムを用いた経皮ルートを介した投与形態で投与
されうる。

【００４９】本発明の化合物の使用に関する投与計画
は、特に限定されないが、年齢、体重、性別、患者の医
学的状態、病状、投与経路、患者の代謝・排泄機能のレ
ベル、使用される剤形、投与される特定の化合物および
その塩を含む、種々の要素を考慮して、当業者によって
選定される。

【００５０】本発明の化合物は、投与に先立ち、１種以
上の薬学的に許容可能な添加物と共に製剤されるのが好
ましい。その添加物は、特に限定されないが、担体、希
釈剤、香料、甘味料、滑沢剤、溶解剤、懸濁剤、結合
剤、錠剤崩壊剤、およびカプセル化材等の不活性物質で
ある。

【００５１】本発明のさらに他の実施形態は、本発明の
化合物と、１種以上の薬学的に許容可能な添加物であっ
て、製剤の他の成分と共存でき、患者に有害でない添加
物を含む薬学的製剤である。本発明の薬学的製剤は、本
発明の化合物の治療的有効量と１種以上の薬学的に許容
される添加物を混ぜて調製される。本発明の組成物を作
製するには、活性成分を希釈剤と混合しても担体に封入
しても良く、その担体は、カプセル、小袋、紙または他
の容器の形でも良い。前記担体は希釈剤を兼ねてもよ
く、固体、半固体、ビヒクルとして作用する液体でもよ
く、または、例えば活性化合物を重量で１０％まで含有
する錠剤、ピル、散剤、ローゼンジ、エリキシル、懸濁
液、乳濁液、溶液、シロップ、エアロゾル、軟膏、軟・
硬ゼラチンカプセル、坐薬、滅菌注射用液および包装滅
菌散剤の形になりうる。

【００５２】経口投与のために、活性成分は、経口用で
非毒性の薬学的に許容される担体（特に限定されない
が、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、
炭酸ナトリウム、マンニトール、ソルビトール、炭酸カ
ルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、メチル
セルロース等）と、そして必要に応じ、崩壊剤（特に限
定されないが、トウモロコシ粉、デンプン、メチルセル
ロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム、アルギ
ン酸等）と、そして必要に応じ、結合剤（特に限定され
ないが、例えば、ゼラチン、天然糖、ベータラクトー
ス、トウモロコシ甘味料、天然および合成ゴム、アラビ
アゴム、トラガカントゴム、アルギン酸ナトリウム、カ
ルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、
ワックス等）と、そして必要に応じ、滑沢剤（特に限定
されないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸
ナトリウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、安
息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、食塩、タルク等）
と共に混合してもよい。

【００５３】散剤では、担体は、細かく砕いた活性成分
と混合される細かく砕いた固体でもよい。活性成分は、
結合力を有する担体と適切な割合で混合し、所望の形と
大きさに圧縮し、錠剤にしてもよい。前記散剤および錠
剤は、好ましくは、本発明の新規組成物である活性成分
を約１〜約９９重量％含んでいる。好適な固体担体は、
カルボキシメチルセルロースマグネシウム、低融点ワッ
クスおよびカカオ脂である。

【００５４】滅菌溶液製剤は、懸濁液、乳濁液、シロッ
プ、およびエリキシル剤を含む。活性成分は、薬学的に
許容される担体、例えば滅菌水、滅菌有機溶媒またはそ
れらの混合物に溶解または懸濁することができる。

【００５５】活性成分はまた、適切な有機溶媒、例えば
プロピレングリコール水溶液に溶かすこともできる。他
の組成物は、細かく砕いた活性成分をデンプン水溶液、
ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）ナトリウム溶液
または適切なオイルに分散させて作製できる。

【００５６】製剤は、単位用量形態、すなわちヒトまた
は他の哺乳類への投与に適した単位用量を含む物理的に
分割した単位でも良い。単位用量形態は１個のカプセル
もしくは錠剤、または多数のカプセルもしくは錠剤で良
い。「単位用量」とは、所望の治療効果を生みだすため
に計算された、１種以上の添加物と混合された本発明の
活性化合物の予め決められた量である。単位用量中の活
性成分の量は、関係する特定の処置に応じて、約０．１
から約１０００ｍｇまたはそれ以上に変化または調整す
ることができる。

【００５７】本発明の典型的経口投与量は、指示された
効果のために使用するときは、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／
日から約１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１ｍｇ
／ｋｇ／日から３０ｍｇ／ｋｇ／日、そして最も好まし
くは約０．５ｍｇ／ｋｇ／日から約１０ｍｇ／ｋｇ／日
である。非経口投与の場合、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／
日から１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１ｍｇ
／ｋｇ／日から１ｍｇ／ｋｇ／日の量を投与することが
一般的に有利であることが証明されている。本発明の化
合物は、一日一回のみ投与しても良く、または、１日の
全用量を、１日２回、３回またはそれ以上に分割して投
与しても良い。勿論、経皮形態を経由するときは、投与
は継続的である。

【００５８】

【実施例】本発明を以下に実施例の形態で記述するが、
これらは本発明の境界を何ら限定するように解釈される
べきではない。以下の実施例において、全ての量に関す
る値は、他に述べない限り、重量％である。融点は未補
正値である。液体クロマトグラフィーマススペクトル(L
iquid Chromatography - Mass spectroscopy, LC-MS)デ
ータは、Shimadzu Phenomenex ＯＤＳカラム（４．６ｍ
ｍφ×３０ｍｍ）を装備したMicromass Platform LCを
用い、アセトニトリルと水の混合溶媒（９：１から１：
９）を１ｍｌ／ｍｉｎの流速で流して記録した。ＴＬＣ
は、プレコートされたシリカゲルプレート(Merck silic
a gel 60 F-254)を用いて行った。全てのカラムクロマ
トグラフィー分離には、シリカゲル(WAKO-gel C-200
（７５〜１５０μｍ）)を用いた。全ての化学物質は、
試薬級であり、Sigma-Aldrich、和光純薬化学工業株式
会社、東京化成工業株式会社、Arch corporationから購
入した。

【００５９】本発明の化合物の効果は、以下のアッセイ
および薬理学テストで試験した。

【００６０】［ＭＫＫ７キナーゼ活性の測定］ （１） ＭＫＫ７タンパク質の調製 ヒトＭＫＫ７オープンリーディングフレームを含むプラ
スミドを、ＴＡベクター（Invitrogen、カリフォルニア
州サンディエゴ）にクローニングし、そしてさらにｐＧ
ＥＸ−２Ｔベクター（Pharmacia）にクローニングし
て、ヒトＧＳＴ（グルタチオン−Ｓ−トランスフェラー
ゼ、Glutathione-S-transferase）−ＭＫＫ７融合タン
パク質を構築した。この構築物は、大腸菌(BL21(DE3)pL
ysS)中で、ヒトＭＥＫＫｃ（プラスミドｐＢＢ１３１上
におけるＭＥＫＫ（ＭＥＫ（マップキナーゼ キナー
ゼ）キナーゼ）の触媒領域）と共に共発現させた。得ら
れたＧＳＴ−ＭＫＫ７を、グルタチオンカラム（Amersh
am Pharmacia Biotech AB, Uppsala, スウェーデン）を
使用し、その取扱説明書にしたがって精製した。そのタ
ンパク質の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、９０％以
上と確認された。

【００６１】（２） ＭＫＫ７の基質であるラットＧＳ
Ｔ−ＫＮ−ＳＡＰＫα（ＧＳＴ＋キナーゼ陰性ラットＳ
ＡＰＫα２）を含む構築物を、ｐＧＥＸ−ＳＡＰプラス
ミド（Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, スウ
ェーデン）中に挿入し、大腸菌BL21(DE3)pLysS 中で形
質転換させた。この発現系を使用し、ＧＳＴ−ＫＮ−Ｓ
ＡＰＫαを、グルタチオンカラム（Amersham Pharmacia
Biotech AB, Uppsala,スウェーデン）を使用し、その
取扱説明書にしたがって精製した。そのタンパク質の純
度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、９０％以上と確認され
た。基質タンパク質のビオチン化処理は、スルホ−ＮＨ
Ｓ−ＬＣビオチン（Pierce，ロックフォード、米国）を
使用し、その取扱説明書にしたがって行った。

【００６２】（３） ＭＫＫ７キナーゼ活性の測定 種々の濃度（１％ ＤＭＳＯ中）を有する試験化合物
（２．５μｌ）の全てを、０．５μｇ／ｍｌのＧＳＴ−
ＭＫＫ７および０．８μＭのＳＡＰＫα（ビオチン化処
理したＧＳＴ−ＫＮ−ＳＡＰＫα融合タンパク質）を含
む１５μｌの反応用緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、
０．１Ｍ ＮａＣｌ、０．１ｍＭ Ｎａ₃ＶＯ₄、１０ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂、１ｍＭ ＤＴＴ、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳ
Ａ、ｐＨ ７．５））中に添加した。キナーゼ反応は、
１２．５μｌの１２μＭ ＡＴＰを加えることにより開
始させた。室温で１時間のインキュベーション期間後、
４０μｌの停止用溶液（０．１Ｍ ＥＤＴＡ、ｐＨ
８．０）を添加し、反応を停止させた。この反応混合物
６０μｌを、ストレプトアビジンでコートした検出用プ
レート（SA-plate, Steffens: 08114E14.FWD）のウェル
に移し、４０μｌのトリス緩衝生理食塩水（ＴＢＳ、５
０ｍＭ トリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、２０ｍＭ Ｅ
ＤＴＡ、１％ ＢＳＡ、１Ｍ ＮａＣｌ、０．０５％
ｔｗｅｅｎ２０）を加えた。この混合物を３０分間イン
キュベートし、０．０５％のｔｗｅｅｎ２０を含む（Ｔ
ＢＳ）で３回洗浄し、そして、Ｅｕで標識した抗ホスホ
トレオニン−プロリン抗体（LANCE）を１００μｌ加え
た。３０分間のインキュベーション後、プレートを再び
ＴＢＳで３回洗浄し、エンハンス用溶液（Amersham Pha
rmacia Biotech）を１００μｌ加えた。１時間後、時間
分解蛍光を測定した。その測定は、マルチラベルカウン
ター（ARVO, Wallac Oy, フィンランド）を使用し、励
起波長３４０ｎｍ、発光測定波長６１５ｎｍ、遅延時間
４００ｍｓ、測定時間４００ｍｓで行った。

【００６３】［ＭＫＫ４キナーゼ活性の測定］ （１） ＭＫＫ４タンパク質の調製 ヒトＭＫＫ４オープンリーディングフレームを含むプラ
スミドをｐＧＥＸ−２Ｔベクター（Pharmacia）にクロ
ーニングして、ヒトＧＳＴ（グルタチオン−Ｓ−トラン
スフェラーゼ、Glutathione-S-transferase）−ＭＫＫ
４融合タンパク質を構築した。この構築物は、大腸菌(B
L21(DE3)pLysS)中で、ヒトＭＥＫＫｃ（プラスミドｐＢ
Ｂ１３１上におけるＭＥＫＫの触媒領域）と共に共発現
させた。得られたＧＳＴ−ＭＫＫ４を、グルタチオンカ
ラム（Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, スウ
ェーデン）を使用し、その取扱説明書にしたがって精製
した。そのタンパク質の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによ
り、９０％以上と確認された。

【００６４】（２） ＭＫＫ４の基質であるラットＧＳ
Ｔ−ＫＮ−ＳＡＰＫα（ＧＳＴ＋キナーゼ陰性ラットＳ
ＡＰＫα２）を含む構築物を、ｐＧＥＸ−ＳＡＰプラス
ミド（Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, スウ
ェーデン）中に挿入し、大腸菌BL21(DE3)pLysS 中で形
質転換させた。この発現系を使用し、ＧＳＴ−ＫＮ−Ｓ
ＡＰＫαを、グルタチオンカラム（Amersham Pharmacia
Biotech AB, Uppsala,スウェーデン）を使用し、その
取扱説明書にしたがって精製した。そのタンパク質の純
度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにより、９０％以上と確認され
た。基質タンパク質のビオチン化処理は、スルホ−ＮＨ
Ｓ−ＬＣビオチン（Pierce，ロックフォード、米国）を
使用し、その取扱説明書にしたがって行った。

【００６５】（３） ＭＫＫ４キナーゼ活性の測定 種々の濃度（１％ ＤＭＳＯ中）を有する試験化合物
（５μｌ）の全てを、０．５μｇ／ｍｌのＧＳＴ−ＭＫ
Ｋ４および６μＭのＡＴＰを含む３０μｌの反応用緩衝
液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．１Ｍ ＮａＣｌ、０．
１ｍＭ Ｎａ₃ＶＯ₄、１０ｍＭ ＭｇＣｌ₂、１ｍＭ
ＤＴＴ、１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、ｐＨ ７．５））中に
添加した。キナーゼ反応は、０．４８μＭのＳＡＰＫα
（ビオチン化処理したＧＳＴ−ＫＮ−ＳＡＰＫα融合タ
ンパク質）を含む２５μｌのアッセイ用緩衝液を加える
ことにより開始させた。室温で２時間のインキュベーシ
ョン期間後、８０μｌの停止用溶液（０．１Ｍ ＥＤＴ
Ａ、ｐＨ ８．０）を添加し、反応を停止させた。この
反応混合物１２０μｌを、ストレプトアビジンでコート
した検出用プレート（SA-plate, Steffens: 08114E14.F
WD）のウェルに移し、４０μｌのトリス緩衝生理食塩水
（ＴＢＳ、５０ｍＭ トリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、
２０ｍＭＥＤＴＡ、１％ ＢＳＡ、１Ｍ ＮａＣｌ、
０．０５％ ｔｗｅｅｎ２０）を加えた。この混合物を
３０分間インキュベートし、０．０５％のｔｗｅｅｎ２
０を含む（ＴＢＳ）で３回洗浄し、そして、Ｅｕで標識
した抗ホスホチロシン抗体（５ｎｇ／ウェル；4G10, Up
state Biotechnology, Lake Placid, ニューヨーク州、
米国）を１００μｌ加えた。３０分間のインキュベーシ
ョン後、プレートを再びＴＢＳで３回洗浄し、エンハン
ス用溶液（Amersham Pharmacia Biotech）を１００μｌ
加えた。１時間後、時間分解蛍光を測定した。その測定
は、マルチラベルカウンター（ARVO, Wallac Oy, フィ
ンランド）を使用し、励起波長３４０ｎｍ、発光測定波
長６１５ｎｍ、遅延時間４００ｍｓ、測定時間４００ｍ
ｓで行った。

【００６６】［細胞に基づくアッセイ］ ヒトＰＢＭＣにおけるＩＬ−２およびＩＦＮ−γの放
出：モノポリ分解培養液（大日本製薬、大阪、日本）を
用いて単離したヒト末梢血単核細胞（human peripheral
blood mononucleated cells, huPBMC）を、試験化合物
（０．１％ ＤＭＳＯ中、種々の濃度）と共に、ＣＯ₂
インキュベーター中、３７℃で１時間インキュベートし
た。次に、細胞を、１００μｌの抗ＣＤ３抗体（ＮＵ−
Ｔ３：ニチレイ、４μｇ／ｍｌ）で３時間プレコートし
たかまたはコーティングしていない（無刺激対照）９６
ウェルプレート上で培養した（各ウェル当たり２００μ
ｌのＲＰＭＩ １６４０細胞培地中、１×１０⁵個細
胞）。溶液を除去し、プレートを２００μｌ／ウェルの
リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄した。抗Ｃ
Ｄ２８抗体（ＫＯＬＴ−２：ニチレイ、東京、日本）お
よびヤギ抗マウスカッパ抗体（Bethyl Laboratories
社、テキサス州モントゴメリー、米国）を、ウェルに、
それぞれ１．５μｇ／ｍｌおよび２μｇ／ｍｌの最終濃
度で加えた。プレートを、インキュベーター中で２０時
間インキュベートした。上澄みを除去し、そして、次に
使用する時まで、等量に分けてマイナス３０℃で保存し
た。ヒトＰＢＭＣから遊離したインターロイキン２（Ｉ
Ｌ−２）およびインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）の量
は、市販のＥＬＩＳＡ（Genzyme Tech.,ミネアポリス、
米国）を使用し、その取扱説明書にしたがって決定し
た。

【００６７】ヒトＰＢＭＣおよびヒト樹枝状細胞におけ
るＴＮＦ−αとＩＬ−１２の放出：モノポリ分解培養液
を用いて単離したヒト末梢血単核細胞（human peripher
alblood mononucleated cells, huPBMC）を、直接実験
に使用する（各ウェル当たり２００μｌの培養液中、１
×１０⁵個細胞）か、または、ＧＭ−ＳＣＦ（PeproTec
h., ニュージャージー、米国、２５ｎｇ／ｍｌ）および
ＩＬ−４（Pepro Tech., ニュージャージー、米国、１
０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で７日間、樹枝状細胞（dendri
tic cells, DC）へと分化させ、次に、採集し、計数
し、そして各ウェル当たり２００μｌ中２×１０⁴個細
胞の密度で培養した。細胞は、試験化合物（０．１％
ＤＭＳＯ中、種々の濃度）と共に、ＣＯ₂インキュベー
ター中、３７℃で１時間インキュベートし、そして次
に、９６ウェルプレート上で培養した（各ウェル当たり
２００μｌのＲＰＭＩ １６４０細胞培地中、１×１０
⁵個細胞）。ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１２の誘導は、Ｌ
ＰＳ（B8, Sigma, ミズーリ州、米国、１０ｎｇ／ｍ
ｌ）での刺激により行った。２０時間後、上澄みを除去
し、次に使用する時まで、等量に分けてマイナス３０℃
で保存した。細胞培養物から遊離したＴＮＦ−αおよび
ＩＬ−１２の量は、市販のＥＬＩＳＡ（GenzymeTech.,
ミネアポリス、米国）を使用し、その取扱説明書にした
がって決定した。

【００６８】［マウスにおける全身性炎症反応症候群］
オスのＢａｌｂ／ｃマウス（体重２０〜２５ｇ）に化合
物を投与（静脈注射、濃度１０％）し、５分後、拮抗性
抗ＣＤ３抗体（Pharmingen, サンディエゴ、米国；１０
μｇ／マウス； clone 145-2C11）を静脈注射した。チ
ャレンジから２時間後、マウスを殺し、血清サイトカイ
ンＩＬ−２、ＩＬ−４およびＩＦＮ−γを定量した。そ
の定量は、ＥＬＩＳＡ（Genzyme Tech., ミネアポリ
ス、米国）を使用し、その取扱説明書にしたがって行っ
た。データは、それぞれ５〜６匹の動物による（平均値
±標準偏差）を表す。ビヒクル対照（Ｖ）に対し^*ｐ＜
０．０５、^**ｐ＜０．０１である。グループ間の差を検
出するに際しては、Dunnettのテストを用いた。統計
は、片側分散分析を用いるか、または、可能であればSt
udentのｔ−テストを適用して行った。

【００６９】ＭＫＫ７キナーゼアッセイ（ＭＫＫ７）お
よびＭＫＫ４キナーゼアッセイ（ＭＫＫ４）の結果を、
以下の実施例および実施例の表に示す。データは、固相
合成法により得られ、したがって純度レベルが約４０か
ら９０％である化合物に対応する。実用上の理由から、
前記化合物は、以下の３クラスの活性に分類した。 ＩＣ₅₀＝Ａ≦１μΜ＜Ｂ≦１０μΜ＜Ｃ

【００７０】本発明の化合物は、in vivoアッセイにお
いても優れた選択性および強力な活性を示す。

【００７１】（実施例１−１）

【化１４】 （１） ３−フルオロ−４−ニトロフェノール（５０．
００ｇ、３１８．２６ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（５
７．１６ｇ、３３４．１８ｍｍｏｌ）およびＫ₂ＣＯ
₃（８７．９７ｇ、６３６．５３ｍｍｏｌ）の混合物
を、アセトン（７５０ｍＬ）中で１８時間還流させた。
この混合物を室温に冷却後、フィルターを通し、濾液を
減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶かし、５％
ＮａＨＣＯ₃で洗浄した。有機相を分離し、食塩水（ブ
ライン）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮
した。残渣をヘキサン中で粉砕し、濾過し、風乾して、
無色固体の４−ベンジルオキシ−２−フルオロニトロベ
ンゼンを得た（７４．６５ｇ、９４．９％）。

【００７２】

【化１５】 （２） ６０％ 水素化ナトリウム（９．７１ｇ、２４
２．６９ｍｍｏｌ）の３００ｍｌ Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）懸濁液に、０℃で、シアノ酢酸エ
チル（１５．１０ｇ、１３３．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ
（４０ｍＬ）溶液および４−ベンジルオキシ−２−フル
オロニトロベンゼン（２０．０ｇ、８０．９ｍｍｏｌ）
を順番に加えた。この混合物を７０℃で４時間攪拌し、
そして室温に冷却した。得られた懸濁液を１０％ ＫＯ
Ｈ中に注ぎ、エーテルで洗浄した。水層に１０％ ＨＣ
ｌを加えて酸性にし、エーテルで抽出した。抽出液を食
塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去し、
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサ
ン：ＡｃＯＥｔ＝５：１）で精製して、淡褐色油状の５
−ベンジルオキシ−２−ニトロフェニルシアノ酢酸エチ
ルを得た（２３．６ｇ、８４．９％）。

【００７３】

【化１６】 （３） 酢酸（１９０ｍＬ）およびトルエン（３８０ｍ
Ｌ）の混合物に、５−ベンジルオキシ−２−ニトロフェ
ニルシアノ酢酸エチル（６３．９９ｇ、１８８．０２ｍ
ｍｏｌ）を加えた。この混合物を８０℃で攪拌して、透
明な溶液を得た。外部の熱源を取り外し、亜鉛粉末（９
８．３３ｇ、１５０４．１４ｍｍｏｌ）を、何回かに分
割してゆっくりと加えた。この反応混合物を８０℃で３
時間攪拌し、溶液が熱いうちにフィルターを通し、そし
て、採集した固体をトルエンで洗浄した。濾液を減圧下
でエバポレーションし、そして、残渣をエーテル中で粉
砕して、紫色固体の２−アミノ−５−ベンジルオキシ−
３−エトキシカルボニル−（１Ｈ）−インドールを得た
（２８．８９ｇ、収率４９．５％）。

【００７４】

【化１７】 （４） ２−アミノ−５−ベンジルオキシ−３−エトキ
シカルボニル−（１Ｈ）−インドール（１１．３６ｇ、
３６．６０ｍｍｏｌ）、シアナミド（２．４６ｇ、５
８．５５ｍｍｏｌ）、および３６％ ＨＣｌ（３ｍｌ）
の１，４−ジオキサン（３００ｍｌ）懸濁液を２日間還
流させた。この反応混合物を室温に冷却し、そして、析
出した固体を濾過により採集し、無水エーテルで洗浄し
て、５−ベンジルオキシ−３−エトキシカルボニル−２
−グアニジル−（１Ｈ）−インドール塩酸塩を得た
（２．９９ｇ、２１％）。この生成物は、さらに精製す
ることなく次の反応に使用した。

【００７５】

【化１８】 （５） ５−ベンジルオキシ−３−エトキシカルボニル
−２−グアニジル−（１Ｈ）−インドール塩酸塩（４．
５４ｇ、１１．６７ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム
（４．６７ｇ、１１６．７２ｍｍｏｌ）の混合物を、水
（５０ｍＬ）中で６時間還流させた。室温に冷却後、沈
殿を濾過により採集し、風乾して、２−アミノ−６−ベ
ンジルオキシ−４−ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピリミド
［４，５−ｂ］インドールを粗生成物として得た。この
生成物は、さらに精製することなく次の反応に使用し
た。

【００７６】

【化１９】 （６） ステップ（５）で得られた２−アミノ−６−ベ
ンジルオキシ−４−ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピリミド
［４，５−ｂ］インドール（１．００ｇ、３．２６ｍｍ
ｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアニリン（１．１９ｇ、
９．７９ｍｍｏｌ）の混合物を、オキシ塩化リン（３．
０ｇ）中で２時間還流させた。この反応混合物を減圧下
で濃縮し、生じたシロップ状の残渣を氷水で処理した。
得られた固体を濾過により採集し、エタノールおよびエ
ーテルで洗浄して、淡緑色固体の２−アミノ−６−ベン
ジルオキシ−４−クロロ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５
−ｂ］インドール塩酸塩を得た。この生成物は、さらに
精製することなく次の反応に使用した。

【００７７】

【化２０】 （７） ステップ（６）で得られた２−アミノ−６−ベ
ンジルオキシ−４−クロロ−（９Ｈ）−ピリミド［４，
５−ｂ］インドール塩酸塩（０．７８ｇ、２．１６ｍｍ
ｏｌ）およびピペリジン（７．３４ｇ、８６．２１ｍｍ
ｏｌ）の混合物を、１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中
で１８時間還流させ、室温に冷却した。溶媒を減圧下で
除去し、残渣をクロロホルムに溶解させ、水で洗浄し
た。このクロロホルム溶液をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、減
圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ＝５０：１）で精製し
て、２−アミノ−６−ベンジルオキシ−４−（１−ピペ
リジノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドー
ルを得た（０．３８ｇ、４７．２％）。

【００７８】

【化２１】 （８） ２−アミノ−６−ベンジルオキシ−４−（１−
ピペリジノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］イン
ドール（０．５０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のメタノール
（２５ｍＬ）中混合物に、酢酸（０．０８ｇ、１．３５
ｍｍｏｌ）および三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体
（０．３８ｇ、２．７０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合
物に１０％ Ｐｄ−Ｃ（１０ｍｇ）を加え、水素雰囲気
（３ａｔｍ）下、室温で２時間攪拌した。生じた混合物
をセライトフィルターに通し、濾液を減圧下で濃縮し
た。残渣をエーテル中で粉砕し、シリカゲルカラムクロ
マトグラフィー（ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ＝５０：１）で
精製して、無色固体の２−アミノ−６−ヒドロキシ−４
−（１−ピペリジノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−
ｂ］インドールを得た（０．３０ｇ、７８．７％）。 融点２６０℃； ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：保持時間３．２６分、［Ｍ＋
Ｈ］⁺計算値２８４、実測値２８４． 分子量：２８３．３４ ＭＫＫ７による活性評価：Ａ ＭＫＫ４による活性評価：Ａ

【００７９】上記実施例１−１の記述と同様の方法によ
り、実施例１−２から１−２３までの化合物を合成し
た。

【００８０】表１（化２２〜化３１）

【化２２】

【００８１】

【化２３】

【００８２】

【化２４】

【００８３】

【化２５】

【００８４】

【化２６】

【００８５】

【化２７】

【００８６】

【化２８】

【００８７】

【化２９】

【００８８】

【化３０】

【００８９】

【化３１】

【００９０】（実施例２）

【化３２】 （１） Ｎａ（６０ｍｇ）および無水ＭｅＯＨ（２ｍ
Ｌ）から調製した乾燥ＮａＯＭｅに、実施例１−１のス
テップ（３）で得られた２−アミノ−５−ベンジルオキ
シ−３−エトキシカルボニル−（１Ｈ）−インドール
（０．５０ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）のホルムアミド（１
５ｍＬ）溶液を加えた。この混合物を１８時間還流さ
せ、室温に冷却した。その反応混合物を、水（１００ｍ
Ｌ）中に注ぎ、そして、生じた沈殿を濾過により採集
し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣ
ｌ₃：ＭｅＯＨ＝５０：１）で精製して、６−ベンジル
オキシ−４−ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５
−ｂ］インドールを得た（０．１３７ｇ、２９．２
％）。

【００９１】

【化３３】 （２） ６−ベンジルオキシ−４−ヒドロキシ−（９
Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール（０．０６ｍ
ｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアニ
リン（０．０８ｇ、０．６３８ｍｍｏｌ）の混合物をオ
キシ塩化リン（１ｇ）中で５時間還流させた。その反応
混合物をエバポレーションし、生じたシロップ状の残渣
を氷水で処理した。析出した固体を濾過により採集し、
エーテルで洗浄して、褐色固体の６−ベンジルオキシ−
４−クロロ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インド
ール塩酸塩を得た（０．０３９ｇ、５２．９％）。

【００９２】

【化３４】 （３） 実施例１−１のステップ（７）に記載の方法に
従い、１，４−ジオキサン（５．０ｍＬ）中で６−ベン
ジルオキシ−４−クロロ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５
−ｂ］インドール塩酸塩（０．１２ｇ、０．３５５ｍｍ
ｏｌ）をピペリジン（１．５ｍＬ）と反応させ、淡燈色
固体の６−ベンジルオキシ−４−（１−ピペリジノ）−
（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドールを得た
（０．０２４ｇ、１８．８％）。

【００９３】

【化３５】 （４） 実施例１−１のステップ（８）に記載の方法に
従い、６−ベンジルオキシ−４−（１−ピペリジノ）−
（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール（０．０
２ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を水素化して６−ベンジルオ
キシ基を脱保護し、無色固体の６−ヒドロキシ−４−
（１−ピペリジノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−
ｂ］インドールを得た（０．０１ｇ、７４．２％）。 融点２７０℃； ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：保持時間３．２４分、［Ｍ＋
Ｈ］⁺計算値２６９、実測値２６９． 分子量：２６８．３２ ＭＫＫ７による活性評価：Ａ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 9/10 Ａ６１Ｐ 9/10 11/00 11/00 11/02 11/02 11/06 11/06 13/12 13/12 17/00 17/00 19/02 19/02 25/14 25/14 25/16 25/16 25/28 25/28 29/00 29/00 １０１ １０１ 31/04 31/04 37/02 37/02 37/08 37/08 Ｃ０７Ｄ 519/00 ３０１ Ｃ０７Ｄ 519/00 ３０１ (72)発明者 山本 理 京都府相楽郡精華町光台５−２−９ (72)発明者 沖上 裕美 京都府相楽郡木津町相楽台７−１−１−８ −204 (72)発明者 佐藤 浩樹 奈良県奈良市藤ノ木台１−８−28−307 (72)発明者 ベーコン、ケビン ビー. 兵庫県神戸市東灘区向洋町中５−15−912 (72)発明者 ローウィンジャー、ティモシー ビー. 兵庫県西宮市千歳町５−７−203 Ｆターム(参考） 4C050 AA01 AA08 BB04 CC08 EE03 FF01 GG03 GG04 HH04 4C072 MM02 UU01 4C086 AA01 AA02 AA03 CB05 CB22 MA01 MA04 NA14 ZA02 ZA16 ZA34 ZA36 ZA45 ZA59 ZA81 ZA89 ZA96 ZB02 ZB11 ZB13 ZB15 ZB35 ZC06

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式（Ｉ）のピリミド［４，５−ｂ］
   インドール誘導体、その互変異体もしくは立体異性体、
   またはそれらの塩。 【化１】 式中、Ｒ¹は水素またはアミノであり、Ｒ²は５〜７員環
   のシクロアルキルまたは直鎖もしくは分枝Ｃ_1-6アルキ
   ルであり、そのＣ_1-6アルキルは任意にフェニルで置換
   されているかまたは任意に飽和の５〜７員環で置換され
   ており、前記飽和の５〜７員環は、ＮおよびＯからなる
   群から選択される０から３個のヘテロ原子を有し、Ｒ³
   は、水素、５〜７員環のシクロアルキル、または直鎖も
   しくは分枝Ｃ_1-6アルキルであり、そのＣ_1-6アルキルは
   任意にフェニルで置換されているかまたは任意に飽和の
   ５〜７員環で置換されており、前記飽和の５〜７員環
   は、ＮおよびＯからなる群から選択される０から３個の
   ヘテロ原子を有するか、または、Ｒ²およびＲ³は、共同
   して、それらが付加している窒素原子とともに飽和の５
   〜７員環を形成し、その環は、任意にＮＨまたはＯで中
   断されており、ここで、前記飽和の環は任意にベンゼン
   環に縮合しているか、または、前記飽和の環は、任意
   に、Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、フェニル置換されたＣ
   _1-6アルキル、カルボキシ、Ｃ_1-6アルコキシカルボニ
   ル、もしくは０から３個のＮ原子を有する飽和の５〜７
   員環で置換されているか、または、前記飽和の環は、０
   から３個のＮもしくはＯ原子を有する飽和の５〜７員環
   とともにヘテロサイクリックなスピロ環を形成してお
   り、Ｒ⁴は、ヒドロキシ、Ｃ_1-6アルキル、ハロゲン、ま
   たはＣ_1-6アルコキシであり、そして、Ｒ⁵は水素または
   Ｃ_1-6アルコキシである。
2. 【請求項２】 下記の条件を満たす請求項１に記載のピ
   リミド［４，５−ｂ］インドール誘導体、その互変異体
   もしくは立体異性体、またはそれらの塩。式中、Ｒ¹は
   水素またはアミノであり、Ｒ²は、ピロリジノＣ_1-6アル
   キル、シクロヘキシル、ベンジル、またはＣ_2-6アルキ
   ルであり、Ｒ³は水素またはベンジルであるか、また
   は、Ｒ²およびＲ³は、共同して、それらが付加している
   窒素原子とともに飽和のヘテロ環を形成し、そのヘテロ
   環は、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４，５］
   デカン、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、ホモピ
   ペリジノ、およびモルホリノからなる群から選択され、
   そして、前記ヘテロ環は、任意に、ベンジル、ブロモ、
   メチル、カルボキシ、もしくはピロリジノで置換されて
   いるか、または、前記ヘテロ環は、任意にベンゼンに縮
   合しており、Ｒ⁴は、ヒドロキシ、メチル、クロロ、ま
   たはメトキシであり、そして、Ｒ⁵は水素またはメトキ
   シである。
3. 【請求項３】 Ｒ⁴がヒドロキシであり、かつＲ⁵が水素
   である請求項１または２に記載のピリミド［４，５−
   ｂ］インドール誘導体、その互変異体もしくは立体異性
   体、またはそれらの塩。
4. 【請求項４】 前記ピリミド［４，５−ｂ］インドール
   誘導体が下記の化合物からなる群から選択される、請求
   項１に記載のピリミド［４，５−ｂ］インドール誘導
   体、その互変異体もしくは立体異性体、またはそれらの
   塩。２−アミノ−４−（１−ホモピペリジノ）−６−ヒ
   ドロキシ−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドー
   ル、２−アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−ピロリジ
   ノ）−（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、
   ２−アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−モルホリノ）
   −（９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、２−
   アミノ−６−ヒドロキシ−４−（１−ピペリジノ）−
   （９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、２−ア
   ミノ−４−ベンジルアミノ−６−ヒドロキシ−（９Ｈ）
   −ピリミド［４，５−ｂ］インドール、２−アミノ−４
   −（４−ブロモ−１−ピペリジノ）−６−ヒドロキシ−
   （９Ｈ）−ピリミド［４，５−ｂ］インドール、６−ヒ
   ドロキシ−４−（１−ピペリジノ）−（９Ｈ）−ピリミ
   ド［４，５−ｂ］インドール、および２−アミノ−４−
   シクロヘキシルアミノ−６−ヒドロキシ−（９Ｈ）−ピ
   リミド［４，５−ｂ］インドール。
5. 【請求項５】 請求項１に記載のピリミド［４，５−
   ｂ］インドール誘導体、その互変異体もしくは立体異性
   体、または生理学的に許容可能なそれらの塩を活性成分
   として含む医薬品。
6. 【請求項６】 一以上の薬学的に許容可能な添加物をさ
   らに含む請求項５に記載の医薬。
7. 【請求項７】 前記ピリミド［４，５−ｂ］インドール
   誘導体、その互変異体もしくは立体異性体、または生理
   学的に許容可能なそれらの塩がＭＫＫ７インヒビターで
   ある請求項５に記載の医薬。
8. 【請求項８】 前記ピリミド［４，５−ｂ］インドール
   誘導体、その互変異体もしくは立体異性体、または生理
   学的に許容可能なそれらの塩がＭＫＫ４インヒビターで
   ある請求項５に記載の医薬。
9. 【請求項９】 喘息、アトピー性皮膚炎、鼻炎、アレル
   ギー性鼻炎、アレルギー性疾患、慢性閉塞性肺疾患（Ｃ
   ＯＰＤ）、敗血症性ショック、関節炎、関節病および心
   筋障害、ならびに慢性関節リウマチ、甲状腺機能亢進
   症、およびアテローム性動脈硬化症のような自己免疫性
   疾患等の炎症性または免疫調節性疾患を治療または予防
   するための薬剤であり、請求項１に記載のピリミド
   ［４，５−ｂ］インドール誘導体、その互変異体もしく
   は立体異性体、または生理学的に許容可能なそれらの塩
   を活性成分として含む薬剤。
10. 【請求項１０】 パーキンソン病、アルツハイマー病お
    よび局所性虚血症等の神経変性疾患を治療するための薬
    剤であり、請求項１に記載のピリミド［４，５−ｂ］イ
    ンドール誘導体、その互変異体もしくは立体異性体、ま
    たは生理学的に許容可能なそれらの塩を活性成分として
    含む薬剤。
11. 【請求項１１】 虚血症、心筋障害、肺動脈高血圧症、
    腎不全症、ハンチントン舞踏病および心臓肥大症からな
    る群から選択される疾患を治療するための薬剤であり、
    請求項１に記載のピリミド［４，５−ｂ］インドール誘
    導体、その互変異体もしくは立体異性体、または生理学
    的に許容可能なそれらの塩を活性成分として含む薬剤。