JP2003070463A - 微生物による多環芳香族化合物分解方法および多環芳香族化合物処理剤 - Google Patents
微生物による多環芳香族化合物分解方法および多環芳香族化合物処理剤Info
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】石油汚染等において、分解処理が困難であった
ピレン等の多環芳香族化合物を分解処理する手段を提供
する。 【解決手段】アルカリゲネス属に属し、ピレンばかりで
なく、その誘導体、ナフタレン及びその誘導体、アント
ラセン及びその誘導体、フェナントレン及びその誘導
体、ビフェニル及びその誘導体等の多環芳香族化合物の
分解能を有する、土壌から分離された細菌を用いて、環
境汚染の原因となる多環芳香族化合物を分解処理する。
ピレン等の多環芳香族化合物を分解処理する手段を提供
する。 【解決手段】アルカリゲネス属に属し、ピレンばかりで
なく、その誘導体、ナフタレン及びその誘導体、アント
ラセン及びその誘導体、フェナントレン及びその誘導
体、ビフェニル及びその誘導体等の多環芳香族化合物の
分解能を有する、土壌から分離された細菌を用いて、環
境汚染の原因となる多環芳香族化合物を分解処理する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、微生物を用いる多
環芳香族化合物の分解方法および該分解処理剤に関す
る。さらに詳しく言えば、多環芳香族化合物の中でも最
も分解されにくいとされているピレンの分解性を指標と
して選抜されるアルカリゲネス属細菌を用いる多環芳香
族化合物の分解方法及び該処理剤に関する。
環芳香族化合物の分解方法および該分解処理剤に関す
る。さらに詳しく言えば、多環芳香族化合物の中でも最
も分解されにくいとされているピレンの分解性を指標と
して選抜されるアルカリゲネス属細菌を用いる多環芳香
族化合物の分解方法及び該処理剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】多環芳香族化合物は、石油類及び原油の
成分のうち自然界においても分解を受けにくいとされて
おり、石油汚染、原油汚染等がおこった場合、長期間に
わたり環境中に残留し環境汚染の代表的な物質とされて
いる。特に芳香環が４個より構成されるピレンは人間の
健康にとっても毒性が高いのに対して、最も微生物分解
を受けにくい物質とされており、環境汚染事故がおこっ
た後に、微生物で分解して無毒化するのに十分に満足す
るものは従来技術ではなかった。
成分のうち自然界においても分解を受けにくいとされて
おり、石油汚染、原油汚染等がおこった場合、長期間に
わたり環境中に残留し環境汚染の代表的な物質とされて
いる。特に芳香環が４個より構成されるピレンは人間の
健康にとっても毒性が高いのに対して、最も微生物分解
を受けにくい物質とされており、環境汚染事故がおこっ
た後に、微生物で分解して無毒化するのに十分に満足す
るものは従来技術ではなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、多環
芳香族化合物、特にピレンを分解し得る微生物を見い出
し、その微生物を利用した多環芳香族化合物の分解方法
およびその分解処理剤を提供することにある。
芳香族化合物、特にピレンを分解し得る微生物を見い出
し、その微生物を利用した多環芳香族化合物の分解方法
およびその分解処理剤を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、多環芳香
族化合物の中でも毒性が高くかつ微生物分解を受けにく
いとされているピレンを唯一炭素源かつエネルギー源と
した場合において生育可能であることを指標として、多
環芳香族化合物特にピレンを分解し得る能力を有する微
生物を種々探索した結果、アルカリゲネスに属する特定
の菌株が、多環芳香族化合物、特にピレンを効率的に分
解することを見いだし、本発明を完成させるに至った。
族化合物の中でも毒性が高くかつ微生物分解を受けにく
いとされているピレンを唯一炭素源かつエネルギー源と
した場合において生育可能であることを指標として、多
環芳香族化合物特にピレンを分解し得る能力を有する微
生物を種々探索した結果、アルカリゲネスに属する特定
の菌株が、多環芳香族化合物、特にピレンを効率的に分
解することを見いだし、本発明を完成させるに至った。
【０００５】すなわち本発明は、以下の（１）〜（６）
に係るものであり、これら発明により、上記課題を解決
できたものである。 （１） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌を用いることにより、多環芳香族化
合物を分解処理することを特徴とする多環芳香族化合物
の分解方法。 （２） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌が、アルカリゲネス・ピコディー
（Alcaligenes piechaudii）に属する細菌である請求項
１の多環芳香族化合物の分解方法。 （３） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌がアルカリゲネス・ピコディー WU-
JH2000株（Alcaligenes piechaudii WU-JH2000;FERM
P− １８３５２ ）である請求項１又は２に記載の多環
芳香族化合物の分解方法。 （４） 多環芳香族化合物の分解能を有する細菌が、芳
香環が４個よりなるピレンを唯一炭素源かつエネルギー
源とした場合に生育可能であることを指標として選抜さ
れるものである請求項１乃至３いずれか１項記載の多環
芳香族化合物の分解方法。 （５） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌の培養物、菌体あるいは菌体処理物
を含有することを特徴とする多環芳香族化合物の分解処
理剤。 （６） アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes
piechaudii）WU-JH2000（ FERM P−１８３５２ ）
株。
に係るものであり、これら発明により、上記課題を解決
できたものである。 （１） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌を用いることにより、多環芳香族化
合物を分解処理することを特徴とする多環芳香族化合物
の分解方法。 （２） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌が、アルカリゲネス・ピコディー
（Alcaligenes piechaudii）に属する細菌である請求項
１の多環芳香族化合物の分解方法。 （３） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌がアルカリゲネス・ピコディー WU-
JH2000株（Alcaligenes piechaudii WU-JH2000;FERM
P− １８３５２ ）である請求項１又は２に記載の多環
芳香族化合物の分解方法。 （４） 多環芳香族化合物の分解能を有する細菌が、芳
香環が４個よりなるピレンを唯一炭素源かつエネルギー
源とした場合に生育可能であることを指標として選抜さ
れるものである請求項１乃至３いずれか１項記載の多環
芳香族化合物の分解方法。 （５） アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化合物の
分解能を有する細菌の培養物、菌体あるいは菌体処理物
を含有することを特徴とする多環芳香族化合物の分解処
理剤。 （６） アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes
piechaudii）WU-JH2000（ FERM P−１８３５２ ）
株。
【０００６】以下、本発明についてさらに詳述する。本
発明者らは、土壌等より採取した多数の微生物につい
て、芳香環が、４環より構成されるピレンを唯一炭素源
かつエネルギー源として生育することを指標として、微
生物を選抜した。上記菌体生育の指標としては、O.D.
660の変化を測定した。すなわち、具体的には500ml容の
坂口フラスコに以下の表１に示す組成を有するPY培地 2
00ml、ピレン100mg（初発ピレン濃度として水溶液当た
り500mg/l）をそれぞれ分取し、30℃、120rpmにて所定
時間振とう培養を行った。なお、ＰＹ培地は従来微生物
による多環芳香族化合物の分解のため使用されている培
地である。また、ピレンは水に不溶性であるため、培養
に際してはジメチルホルムアミド（DMF）を濃度0.2％
（v/v）で培地に添加し、ピレンを培地中に分散させ
た。この培地に、各種細菌試料を加え３０℃、１２０日
間培養し、Ｏ．Ｄ．６６０が当初と比較した増大した株
を選抜した。
発明者らは、土壌等より採取した多数の微生物につい
て、芳香環が、４環より構成されるピレンを唯一炭素源
かつエネルギー源として生育することを指標として、微
生物を選抜した。上記菌体生育の指標としては、O.D.
660の変化を測定した。すなわち、具体的には500ml容の
坂口フラスコに以下の表１に示す組成を有するPY培地 2
00ml、ピレン100mg（初発ピレン濃度として水溶液当た
り500mg/l）をそれぞれ分取し、30℃、120rpmにて所定
時間振とう培養を行った。なお、ＰＹ培地は従来微生物
による多環芳香族化合物の分解のため使用されている培
地である。また、ピレンは水に不溶性であるため、培養
に際してはジメチルホルムアミド（DMF）を濃度0.2％
（v/v）で培地に添加し、ピレンを培地中に分散させ
た。この培地に、各種細菌試料を加え３０℃、１２０日
間培養し、Ｏ．Ｄ．６６０が当初と比較した増大した株
を選抜した。
【表１】
【０００７】さらに、ピレン分解性の評価として、上記
培養した菌体を遠心分離により集菌し、リン酸カリウム
緩衝液（pH7.0）にて洗浄し、再度遠心分離を行った。
得られた菌体を同緩衝液に再懸濁し、ピレンを除去して
菌体懸濁液を調整した。この菌体懸濁液にピレン及びＤ
ＭＦを添加してピレン分解能の有無を調べた。その結
果、アルカリゲネスに属する特定の菌株が、ピレンを有
効に分解し、さらにその他の多環芳香族化合物に対して
も広く効率的に分解し得ることを見いだした。該菌株
は、アルカリゲネス・ピコディー に属するが、ピレン
分解能を有する点で、アルカリゲネス・ピコディー （A
lcaligenes piechaudii）に属する他の菌株とは異な
り、アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piec
haudii）WU-JH2000株と命名した。該菌株は、独立行政
法人産業技術総合研究所、特許生物寄託センターにFERM
P-１８３５２として寄託されている。
培養した菌体を遠心分離により集菌し、リン酸カリウム
緩衝液（pH7.0）にて洗浄し、再度遠心分離を行った。
得られた菌体を同緩衝液に再懸濁し、ピレンを除去して
菌体懸濁液を調整した。この菌体懸濁液にピレン及びＤ
ＭＦを添加してピレン分解能の有無を調べた。その結
果、アルカリゲネスに属する特定の菌株が、ピレンを有
効に分解し、さらにその他の多環芳香族化合物に対して
も広く効率的に分解し得ることを見いだした。該菌株
は、アルカリゲネス・ピコディー に属するが、ピレン
分解能を有する点で、アルカリゲネス・ピコディー （A
lcaligenes piechaudii）に属する他の菌株とは異な
り、アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piec
haudii）WU-JH2000株と命名した。該菌株は、独立行政
法人産業技術総合研究所、特許生物寄託センターにFERM
P-１８３５２として寄託されている。
【０００８】アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligen
es piechaudii）WU-JH2000株の培養においては、唯一
の炭素源およびエネルギー源としてピレンを含む基本培
地を使用する。これには、例えば、以下の表２に示す組
成を有するＢＳ培地あるいは前記ＰＹ培地にピレンを添
加したもの等を使用し得るが、ＢＳ培地が特に好まし
い。
es piechaudii）WU-JH2000株の培養においては、唯一
の炭素源およびエネルギー源としてピレンを含む基本培
地を使用する。これには、例えば、以下の表２に示す組
成を有するＢＳ培地あるいは前記ＰＹ培地にピレンを添
加したもの等を使用し得るが、ＢＳ培地が特に好まし
い。
【表２】
【０００９】また、本発明の上記菌株のピレン分解代謝
は誘導的な要素が強いので、多環芳香族化合物を分解す
る際には、ピレン分解の中間代謝物を添加した培地を用
いて前培養することが好ましい。使用する中間代謝物と
しては、例えば、プロトカテク酸を挙げることができ
る。本発明の菌株は、ピレンばかりでなく、ピレンの誘
導体、ナフタレン及びその誘導体、アントラセン及びそ
の誘導体、フェナントレン及びその誘導体、並びにフル
オレン及びその誘導体、ビフェニルおよびその誘導体等
の広範囲の多環芳香族化合物を分解能を有し、最終的に
はＣＯ２まで分解することができ、バイオレメディエー
ション等の環境浄化技術に極めて有用なものである。本
発明の菌株は、例えば、その培養物自体、該培養物から
分離した菌体自体あるいはその菌体懸濁液、該菌体破砕
物等の菌体処理物等の種々の形態で用いることができ、
これらを含むものであれば、粉末、液体等を問わず分解
処理剤として、ピレン等の多環芳香族化合物あるいはこ
れらを含有する環境汚染物等に対して使用し得る。以
下、本発明の実施例を示すが、本発明は特にこれら実施
例により限定されるものではない。
は誘導的な要素が強いので、多環芳香族化合物を分解す
る際には、ピレン分解の中間代謝物を添加した培地を用
いて前培養することが好ましい。使用する中間代謝物と
しては、例えば、プロトカテク酸を挙げることができ
る。本発明の菌株は、ピレンばかりでなく、ピレンの誘
導体、ナフタレン及びその誘導体、アントラセン及びそ
の誘導体、フェナントレン及びその誘導体、並びにフル
オレン及びその誘導体、ビフェニルおよびその誘導体等
の広範囲の多環芳香族化合物を分解能を有し、最終的に
はＣＯ２まで分解することができ、バイオレメディエー
ション等の環境浄化技術に極めて有用なものである。本
発明の菌株は、例えば、その培養物自体、該培養物から
分離した菌体自体あるいはその菌体懸濁液、該菌体破砕
物等の菌体処理物等の種々の形態で用いることができ、
これらを含むものであれば、粉末、液体等を問わず分解
処理剤として、ピレン等の多環芳香族化合物あるいはこ
れらを含有する環境汚染物等に対して使用し得る。以
下、本発明の実施例を示すが、本発明は特にこれら実施
例により限定されるものではない。
【００１０】実施例１
上記ＢＳ培地（ただしピレン及びジメチルホルムアミド
非含有のもの）及びＰＹ培地、各２００ｍｌを、５００
ｍｌ容坂口フラスコに各々分取し、ピレンをジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）溶液として終濃度５００ｍｇ／ｌ
となるように添加し、これにアルカリゲネス・ピコディ
ー （Alcaligenes piechaudii）WU-JH2000株を加えて
３０℃、１２０ｒｐｍで振とう培養した。その結果を表
３に示す。両培地において、アルカリゲネス・ピコディ
ー （Alcaligenes piechaudii）WU-JH2000株によるピ
レンの分解がなされたが、ＢＳ培地を使用した場合に
は、培養５日目にしてすでに８０％以上のピレン分解率
を示しており、より好適であった。
非含有のもの）及びＰＹ培地、各２００ｍｌを、５００
ｍｌ容坂口フラスコに各々分取し、ピレンをジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）溶液として終濃度５００ｍｇ／ｌ
となるように添加し、これにアルカリゲネス・ピコディ
ー （Alcaligenes piechaudii）WU-JH2000株を加えて
３０℃、１２０ｒｐｍで振とう培養した。その結果を表
３に示す。両培地において、アルカリゲネス・ピコディ
ー （Alcaligenes piechaudii）WU-JH2000株によるピ
レンの分解がなされたが、ＢＳ培地を使用した場合に
は、培養５日目にしてすでに８０％以上のピレン分解率
を示しており、より好適であった。
【表３】
【００１１】実施例２
アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piechaud
ii）WU-JH2000株を、ピレン５００ｍｇ／ｌを添加した
ＰＹ培地、ピレン５００ｍｇ／ｌ及びプロトカテク酸５
００ｍｇ／ｌを添加したＰＹ培地、ピレン５００ｍｇ／
ｌを添加したＬＢ培地、及びピレン５００ｍｇ／ｌを添
加した栄養（Nutrient）ブロスの各培地において前培養
し、この前培養した各培地から菌体を遠心分離により集
菌し、５０ｍＭリン酸カリウム懸濁液（ｐＨ７．０）で
洗浄し、再度遠心分離を行った。得られた菌体を上記緩
衝液に再懸濁させ、ガラスフィルター（SIBATA 17G P10
0）を通して懸濁液中に残存するピレンを除去した後、
Ｏ．Ｄ．６６０を４．０に調製し、各５ｍｌをネジ付き
スクリュー管に分注した。各スクリュー管にピレン５０
０ｍｇ／ｌ、及びジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を濃
度０．２％（ｖ／ｖ）になるよう添加した後、３０℃に
おいて５日間振とうし、ピレンの分解率を測定した。結
果を表４に示す。表４に示すように、LB培地やNutrient
Brothで培養した菌体についてはピレン分解能力が低下
したが、ピレン分解の中間代謝産物と一般に考えられて
いるプロトカテク酸を添加して前培養を行った場合はピ
レン分解能力が高く維持されていた。また、前培養にお
いて、通常のPY mediumにおける培養系よりも菌体の増
殖速度の向上が認められた。なお、プロトカテク酸は、
ピレン分解の中間代謝産物と一般に考えられているた
め、アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piec
haudii）WU-JH2000株のピレン分解代謝は、構造的であ
るというよりも誘導的である要素が強いと思われる。
ii）WU-JH2000株を、ピレン５００ｍｇ／ｌを添加した
ＰＹ培地、ピレン５００ｍｇ／ｌ及びプロトカテク酸５
００ｍｇ／ｌを添加したＰＹ培地、ピレン５００ｍｇ／
ｌを添加したＬＢ培地、及びピレン５００ｍｇ／ｌを添
加した栄養（Nutrient）ブロスの各培地において前培養
し、この前培養した各培地から菌体を遠心分離により集
菌し、５０ｍＭリン酸カリウム懸濁液（ｐＨ７．０）で
洗浄し、再度遠心分離を行った。得られた菌体を上記緩
衝液に再懸濁させ、ガラスフィルター（SIBATA 17G P10
0）を通して懸濁液中に残存するピレンを除去した後、
Ｏ．Ｄ．６６０を４．０に調製し、各５ｍｌをネジ付き
スクリュー管に分注した。各スクリュー管にピレン５０
０ｍｇ／ｌ、及びジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を濃
度０．２％（ｖ／ｖ）になるよう添加した後、３０℃に
おいて５日間振とうし、ピレンの分解率を測定した。結
果を表４に示す。表４に示すように、LB培地やNutrient
Brothで培養した菌体についてはピレン分解能力が低下
したが、ピレン分解の中間代謝産物と一般に考えられて
いるプロトカテク酸を添加して前培養を行った場合はピ
レン分解能力が高く維持されていた。また、前培養にお
いて、通常のPY mediumにおける培養系よりも菌体の増
殖速度の向上が認められた。なお、プロトカテク酸は、
ピレン分解の中間代謝産物と一般に考えられているた
め、アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piec
haudii）WU-JH2000株のピレン分解代謝は、構造的であ
るというよりも誘導的である要素が強いと思われる。
【表４】
【００１２】実施例３
アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piechaud
ii）WU-JH2000株をピレン含有ＢＳ培地（表１）で３０
℃５日間培養し、培地から菌体を遠心分離により集菌
し、５０ｍＭリン酸カリウム懸濁液（ｐＨ７．０）で洗
浄し、再度遠心分離を行った。得られた菌体を上記緩衝
液に再懸濁させ、ガラスフィルター（SIBATA 17G P10
0）を通して懸濁液中に残存するピレンを除去した後、
Ｏ．Ｄ．６６ ０を４．０に調製して菌体懸濁液を得た。
ii）WU-JH2000株をピレン含有ＢＳ培地（表１）で３０
℃５日間培養し、培地から菌体を遠心分離により集菌
し、５０ｍＭリン酸カリウム懸濁液（ｐＨ７．０）で洗
浄し、再度遠心分離を行った。得られた菌体を上記緩衝
液に再懸濁させ、ガラスフィルター（SIBATA 17G P10
0）を通して懸濁液中に残存するピレンを除去した後、
Ｏ．Ｄ．６６ ０を４．０に調製して菌体懸濁液を得た。
【００１３】この菌体懸濁液中の有機化合物を酢酸エチ
ルによって抽出し、エバポレーターによる濃縮を行い、
分析用試料とした。液体高速クロマトグラム（ＨＰＬ
Ｃ）で分析したところピレンの分解代謝産物と思われる
ピークが検出されたが、ガスクロマトグラム−マススペ
クトルではピレン以外の主要ピークは検出されなかっ
た。原因は、ピレン分解代謝産物がカルボン酸あるいは
−ＯＨ基を有する化合物であるのではないかと推測し
た。そこで、ピレン代謝産物のこれら置換基のメチル化
を行った。メチル化は、分析試料を酢酸エチルを再びエ
バポレーターにより蒸発させ、残存した有機物成分をメ
タノールトルエン（1:4, v/v）溶液に再度溶解した。こ
の溶液3.5mlをスクリュー管に分注し、ドラフト内で室
温にて撹拌しながらトリシリルジアゾメタン10μlを添
加して反応させることにより行った。反応後の試料をガ
スクロマトグラム、ガスクロマトグラム−マススペクト
ルにより分析した。結果を図１および２に示す。
ルによって抽出し、エバポレーターによる濃縮を行い、
分析用試料とした。液体高速クロマトグラム（ＨＰＬ
Ｃ）で分析したところピレンの分解代謝産物と思われる
ピークが検出されたが、ガスクロマトグラム−マススペ
クトルではピレン以外の主要ピークは検出されなかっ
た。原因は、ピレン分解代謝産物がカルボン酸あるいは
−ＯＨ基を有する化合物であるのではないかと推測し
た。そこで、ピレン代謝産物のこれら置換基のメチル化
を行った。メチル化は、分析試料を酢酸エチルを再びエ
バポレーターにより蒸発させ、残存した有機物成分をメ
タノールトルエン（1:4, v/v）溶液に再度溶解した。こ
の溶液3.5mlをスクリュー管に分注し、ドラフト内で室
温にて撹拌しながらトリシリルジアゾメタン10μlを添
加して反応させることにより行った。反応後の試料をガ
スクロマトグラム、ガスクロマトグラム−マススペクト
ルにより分析した。結果を図１および２に示す。
【００１４】 図１はガスクロマトグラム分析の結果を
示し、ピレン以外のピークが検出された。これらのピー
クの相当する化合物のマススペクトルを分析したとこ
ろ、図１のピークIは、4-Phenantoic acidであり、ピー
クIIは4,5-Phenantoic acidのメチル化誘導体とそれぞ
れ同定された（図２）。これらの化合物は、既に報告さ
れている他のピレン分解微生物の代謝経路上の化合物で
あり、そのマススペクトルは関連文献のそれとも一致し
た。
示し、ピレン以外のピークが検出された。これらのピー
クの相当する化合物のマススペクトルを分析したとこ
ろ、図１のピークIは、4-Phenantoic acidであり、ピー
クIIは4,5-Phenantoic acidのメチル化誘導体とそれぞ
れ同定された（図２）。これらの化合物は、既に報告さ
れている他のピレン分解微生物の代謝経路上の化合物で
あり、そのマススペクトルは関連文献のそれとも一致し
た。
【００１５】実施例４
実施例３と同様な方法により、菌体懸濁液を得た。該菌
体懸濁液５ｍｌをネジ付きスクリュー管に分注した後、
ナフタレン、フェナントレン、アントラセンおよびフル
オレンの各多環芳香族化合物５００ｍｇ／ｌ、およびジ
メチルホルムアミド（ＤＭＦ）を濃度０．２％（ｖ／
ｖ）になるように、各スクリュー管に添加し、これら各
多環芳香族化合物の分解能を試験した。分解能の判定
は、反応前後で各多環芳香族化合物量が減少しているか
否かで行った。結果を表５に示す。表５に示すように、
アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piechaud
ii）WU-JH2000株はナフタレン、フェナントレン、アン
トラセンおよびフルオレンのいずれに対しても分解能を
有することを示した。
体懸濁液５ｍｌをネジ付きスクリュー管に分注した後、
ナフタレン、フェナントレン、アントラセンおよびフル
オレンの各多環芳香族化合物５００ｍｇ／ｌ、およびジ
メチルホルムアミド（ＤＭＦ）を濃度０．２％（ｖ／
ｖ）になるように、各スクリュー管に添加し、これら各
多環芳香族化合物の分解能を試験した。分解能の判定
は、反応前後で各多環芳香族化合物量が減少しているか
否かで行った。結果を表５に示す。表５に示すように、
アルカリゲネス・ピコディー （Alcaligenes piechaud
ii）WU-JH2000株はナフタレン、フェナントレン、アン
トラセンおよびフルオレンのいずれに対しても分解能を
有することを示した。
【表５】
【００１６】
【００１５】 以上、述べたように、本発明の細菌は、
石油汚染の際、もっとも長期間残存する環境汚染の代表
的物質とされるピレンの分解能において優れ、又これば
かりではなく、ナフタレン、フェナントレン、アントラ
センおよびフルオレン等の多環芳香族化合物に対して広
く分解する能力を有している。このため、本願発明はバ
イオレメディエーション等の微生物を用いた環境浄化技
術に極めて有用である。
石油汚染の際、もっとも長期間残存する環境汚染の代表
的物質とされるピレンの分解能において優れ、又これば
かりではなく、ナフタレン、フェナントレン、アントラ
センおよびフルオレン等の多環芳香族化合物に対して広
く分解する能力を有している。このため、本願発明はバ
イオレメディエーション等の微生物を用いた環境浄化技
術に極めて有用である。
図１は、ピレン分解後の試料のメチル化物をガスクロマ
トグラムにより分析した結果を示す。図２は 図１のピ
ーク１及び２に対応する化合物のマススペクトルを示
す。
トグラムにより分析した結果を示す。図２は 図１のピ
ーク１及び２に対応する化合物のマススペクトルを示
す。
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Ｆターム(参考） 4B065 AA12X BA22 BB04 BD25
CA56
4D004 AA41 AB05 CA18 CC07
Claims (6)
- 【請求項１】 アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化
合物の分解能を有する細菌を用いることにより、多環芳
香族化合物を分解処理することを特徴とする多環芳香族
化合物の分解方法。 - 【請求項２】 アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化
合物の分解能を有する細菌が、アルカリゲネス・ピコデ
ィー（Alcaligenes piechaudii）に属する細菌である請
求項１の多環芳香族化合物の分解方法。 - 【請求項３】 アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化
合物の分解能を有する細菌がアルカリゲネス・ピコディ
ー WU-JH2000株（Alcaligenes piechaudii WU-JH2000;
FERM P- １８３５２ ）である請求項１又は２に記載の
多環芳香族化合物の分解方法。 - 【請求項４】 多環芳香族化合物の分解能を有する細菌
が、芳香環が４個よりなるピレンを唯一炭素源かつエネ
ルギー源とした場合に生育可能であることを指標として
選抜されるものである請求項１乃至３いずれか１項記載
の多環芳香族化合物の分解方法。 - 【請求項５】 アルカリゲネス属に属し、多環芳香族化
合物の分解能を有する細菌の菌体、培養物あるいは菌体
処理物を含有することを特徴とする多環芳香族化合物の
分解処理剤。 - 【請求項６】 アルカリゲネス・ピコディー （Alcalig
enes piechaudii）WU-JH2000（FERM P-１８３５２ ）
株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001269915A JP2003070463A (ja) | 2001-09-06 | 2001-09-06 | 微生物による多環芳香族化合物分解方法および多環芳香族化合物処理剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001269915A JP2003070463A (ja) | 2001-09-06 | 2001-09-06 | 微生物による多環芳香族化合物分解方法および多環芳香族化合物処理剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003070463A true JP2003070463A (ja) | 2003-03-11 |
Family
ID=19095647
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001269915A Pending JP2003070463A (ja) | 2001-09-06 | 2001-09-06 | 微生物による多環芳香族化合物分解方法および多環芳香族化合物処理剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003070463A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011067199A (ja) * | 2009-08-27 | 2011-04-07 | Ehime Univ | 石油分解能を有する新規微生物 |
| CN103056159A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-04-24 | 新疆大学 | 一种菲污染土壤修复效果的评价方法 |
| WO2017099209A1 (ja) | 2015-12-11 | 2017-06-15 | 東レ株式会社 | ３－オキソアジピン酸の製造方法 |
-
2001
- 2001-09-06 JP JP2001269915A patent/JP2003070463A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN103056159A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-04-24 | 新疆大学 | 一种菲污染土壤修复效果的评价方法 |
| WO2017099209A1 (ja) | 2015-12-11 | 2017-06-15 | 東レ株式会社 | ３－オキソアジピン酸の製造方法 |
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