JP2003052358A - 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法 - Google Patents
低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法Info
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- JP2003052358A JP2003052358A JP2001242415A JP2001242415A JP2003052358A JP 2003052358 A JP2003052358 A JP 2003052358A JP 2001242415 A JP2001242415 A JP 2001242415A JP 2001242415 A JP2001242415 A JP 2001242415A JP 2003052358 A JP2003052358 A JP 2003052358A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌
株、および低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造方法の
提供。 【解決手段】ストレプトマイセス・ラベンデュラエ（St
reptomyces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）
およびその変異株、およびそれら菌株を培養する。
株、および低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造方法の
提供。 【解決手段】ストレプトマイセス・ラベンデュラエ（St
reptomyces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）
およびその変異株、およびそれら菌株を培養する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度
ε−ポリ−Ｌ−リジンを著量生産する低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンの製造法に関する。
−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度
ε−ポリ−Ｌ−リジンを著量生産する低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンの製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ε−ポリ−Ｌ−リジンは、Ｌ−リジンの
ε位のアミノ基が、隣り合うＬ−リジンのカルボン酸基
とアミド結合で結合した高分子化合物である。ε−ポリ
−Ｌ−リジンは、必須アミノ酸であるＬ−リジンのポリ
マーであるため、安全性が高く、また、カチオン含量が
高いので特異な物性を有する。したがってトイレタリー
用品、化粧品、飼料添加物、医薬、農薬、食品添加物、
電子材料等への利用が期待できる。特に、食品添加物の
分野では、天然物系の添加物として注目されている。
ε位のアミノ基が、隣り合うＬ−リジンのカルボン酸基
とアミド結合で結合した高分子化合物である。ε−ポリ
−Ｌ−リジンは、必須アミノ酸であるＬ−リジンのポリ
マーであるため、安全性が高く、また、カチオン含量が
高いので特異な物性を有する。したがってトイレタリー
用品、化粧品、飼料添加物、医薬、農薬、食品添加物、
電子材料等への利用が期待できる。特に、食品添加物の
分野では、天然物系の添加物として注目されている。
【０００３】ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法としては、
ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株を培地にて培養
し、得られた培養物からε−ポリ−Ｌ−リジンを採取す
る方法が知られている。このような方法に使用される菌
株としては、ストレプトマイセス・アルブラス・サブス
ピーシズ・リジノポリメラス(Streptomyces albulus su
bsp. lysinopolymerus) No.346-D株（微工研菌寄第3834
号、特公昭59-20359号公報、以下「No.346-D株」とい
う。）、No.346-D株のＳ−アミノエチル−Ｌ−システイ
ン耐性変異株である11011A-1株（微工研条寄第1109号、
特公平3-42070号公報）、
ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株を培地にて培養
し、得られた培養物からε−ポリ−Ｌ−リジンを採取す
る方法が知られている。このような方法に使用される菌
株としては、ストレプトマイセス・アルブラス・サブス
ピーシズ・リジノポリメラス(Streptomyces albulus su
bsp. lysinopolymerus) No.346-D株（微工研菌寄第3834
号、特公昭59-20359号公報、以下「No.346-D株」とい
う。）、No.346-D株のＳ−アミノエチル−Ｌ−システイ
ン耐性変異株である11011A-1株（微工研条寄第1109号、
特公平3-42070号公報）、
【０００４】No.346-D株のプラスミド増幅変異株である
50833株（微工研条寄第1110号、特公平3-42075号公報、
特公平6-75501号公報）、高濃度のＳ−アミノエチル−
Ｌ−システインに対して耐性を有する、11011A-1株の変
異株であるB21021株（FERM BP-5926、特開平9-173057号
公報）、ストレプトマイセス・ノールセイ(Streptomyce
s noursei)に属する菌株（FERM P-9797、特開平1-18709
0号公報）ストレプトマイセスsp.SP-72株（FERM P-1681
0、特開2000-069988号公報）およびストレプトマイセス
sp.SP-66株（FERM P-17223、特開2001-017159号公報）
などが知られている。
50833株（微工研条寄第1110号、特公平3-42075号公報、
特公平6-75501号公報）、高濃度のＳ−アミノエチル−
Ｌ−システインに対して耐性を有する、11011A-1株の変
異株であるB21021株（FERM BP-5926、特開平9-173057号
公報）、ストレプトマイセス・ノールセイ(Streptomyce
s noursei)に属する菌株（FERM P-9797、特開平1-18709
0号公報）ストレプトマイセスsp.SP-72株（FERM P-1681
0、特開2000-069988号公報）およびストレプトマイセス
sp.SP-66株（FERM P-17223、特開2001-017159号公報）
などが知られている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前述の
菌株を用いて生産したε−ポリ−Ｌ−リジンを食品添加
物として使用する際、使用量に応じて苦みが増す傾向が
あった。苦みを低減する方法としては、重合度が８〜２
０の範囲であるＬ−リジンの重合体を高い割合で含有す
る低重合度のε−ポリ−Ｌ−リジンを使用することが好
ましく、とりわけ重合度が１０〜１９の範囲であるＬ−
リジンの重合体を高い割合で含有する低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンの使用は、苦みの低減に有効であることか
ら、該低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産す
る菌株、並びに該低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造
方法が望まれていた。
菌株を用いて生産したε−ポリ−Ｌ−リジンを食品添加
物として使用する際、使用量に応じて苦みが増す傾向が
あった。苦みを低減する方法としては、重合度が８〜２
０の範囲であるＬ−リジンの重合体を高い割合で含有す
る低重合度のε−ポリ−Ｌ−リジンを使用することが好
ましく、とりわけ重合度が１０〜１９の範囲であるＬ−
リジンの重合体を高い割合で含有する低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンの使用は、苦みの低減に有効であることか
ら、該低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産す
る菌株、並びに該低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造
方法が望まれていた。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は前述の従来技
術の問題点に鑑み、鋭意研究を重ねた。その結果、スト
レプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces laven
dulae） USE-53株（FERM P-18305）およびその変異株
は、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産する
ことを見出し、この知見に基づいて本発明を完成させ
た。
術の問題点に鑑み、鋭意研究を重ねた。その結果、スト
レプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces laven
dulae） USE-53株（FERM P-18305）およびその変異株
は、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産する
ことを見出し、この知見に基づいて本発明を完成させ
た。
【０００７】以上の記述から明らかなように本発明の目
的は、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産す
る新規な菌株、および該菌株を用いた発酵法による該低
重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法を提供することで
ある。
的は、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく生産す
る新規な菌株、および該菌株を用いた発酵法による該低
重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法を提供することで
ある。
【０００８】以上の記述から明らかなように、本発明は
下記の（１）〜（３）の構成を有する。 （１）低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産するストレ
プトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendu
lae） USE-53株（FERM P-18305）。
下記の（１）〜（３）の構成を有する。 （１）低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産するストレ
プトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendu
lae） USE-53株（FERM P-18305）。
【０００９】（２）低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生
産するストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）の変異
株。
産するストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）の変異
株。
【００１０】（３）低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生
産するストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）または
その変異株を液体培地中で培養し、該液体培地中に生成
蓄積した低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを採取すること
を特徴とする低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法。
産するストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）または
その変異株を液体培地中で培養し、該液体培地中に生成
蓄積した低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを採取すること
を特徴とする低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法。
【００１１】
【発明の実施の形態】＜１＞本発明菌株
本発明菌株は、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産す
る菌株である。本発明で云う低重合度ε−ポリ−Ｌ−リ
ジンとは、具体的には、No.346-D株を生産培地（2.0％
グリセロール、2.0％クエン酸・H2O（pH 4.5）、1.0％
(NH4)2SO4、0.2％L-リジン・HCl）を用い、３０℃で培
養してえられたε−ポリ−Ｌ−リジンの重合度（２０数
量体から３０数量体程度）より低い重合度（８〜２０量
体程度）を有し、且つ平均分子量が１０００以上のε−
ポリ−Ｌ−リジンのことである。
る菌株である。本発明で云う低重合度ε−ポリ−Ｌ−リ
ジンとは、具体的には、No.346-D株を生産培地（2.0％
グリセロール、2.0％クエン酸・H2O（pH 4.5）、1.0％
(NH4)2SO4、0.2％L-リジン・HCl）を用い、３０℃で培
養してえられたε−ポリ−Ｌ−リジンの重合度（２０数
量体から３０数量体程度）より低い重合度（８〜２０量
体程度）を有し、且つ平均分子量が１０００以上のε−
ポリ−Ｌ−リジンのことである。
【００１２】液体培地中の低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジ
ン量は、後述の実施例(1)(c)に記載した方法により測定
することができる。
ン量は、後述の実施例(1)(c)に記載した方法により測定
することができる。
【００１３】本発明菌株であるストレプトマイセス・ラ
ベンデュラエ USE-53株（以下、USE-53株という）は、
後述の実施例に示すスクリーニングによって低分子ε−
ポリ−Ｌ−リジンの生産性を指標として土壌から単離さ
れたものである。
ベンデュラエ USE-53株（以下、USE-53株という）は、
後述の実施例に示すスクリーニングによって低分子ε−
ポリ−Ｌ−リジンの生産性を指標として土壌から単離さ
れたものである。
【００１４】USE-53株の菌学的性質は以下の通りであ
る。 （１）形態学的性質 酵母エキス・麦芽エキス寒天培地（ISP培地 2）上で２
８℃、１〜２週間生育したUSE-53株の気菌糸および基生
菌糸を顕微鏡で観察した結果を次に示す。 胞子形成菌糸の分枝法および形態：直状(spiral)。 胞子のつながり：いくつもの細長い胞子がチェーン状
をなしている。
る。 （１）形態学的性質 酵母エキス・麦芽エキス寒天培地（ISP培地 2）上で２
８℃、１〜２週間生育したUSE-53株の気菌糸および基生
菌糸を顕微鏡で観察した結果を次に示す。 胞子形成菌糸の分枝法および形態：直状(spiral)。 胞子のつながり：いくつもの細長い胞子がチェーン状
をなしている。
【００１５】（２）各種培地における生育状態
下記表１に示す各種培地における２８℃で２週間培養後
の観察結果である。また、いずれの培地においても溶解
性色素の産出は見られない。
の観察結果である。また、いずれの培地においても溶解
性色素の産出は見られない。
【００１６】
【表１】
【００１７】使用した培地組成は下記の通りである。
トリプトン・イースト寒天(ISP 1)
0.5% バクト・トリプトン（Bacto Tryptone ディ
フコ(Difco)社製) 0.3% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
フコ(Difco)社製) 0.3% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
【００１８】イースト・麦芽寒天(ISP 2)
1.0% バクト・麦芽エキス（Bacto Malt Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.4% バクト・酵母エキスBacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.4% グルコース（Glucose） 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
ディフコ(Difco)社製) 0.4% バクト・酵母エキスBacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.4% グルコース（Glucose） 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
【００１９】オートミール寒天(ISP 3)
2.4% バクト・オートミールアガー、脱水品（Bact
o Oatmeal Agar,Dehydrated ディフコ(Difco)社製) 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 1.4% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 6.0ア0.2
o Oatmeal Agar,Dehydrated ディフコ(Difco)社製) 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 1.4% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 6.0ア0.2
【００２０】スターチ・無機塩寒天(ISP 4)
1.0% バクト・可溶性澱粉（Bacto Soluble Starch
ディフコ(Difco)社製) 0.2% CaCO3 0.2% (NH4)2SO4 0.1% K2HPO4 0.1% MgSO4・7H2O 0.1% NaCl 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 0.0001% ZnSO4・7H2O 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
ディフコ(Difco)社製) 0.2% CaCO3 0.2% (NH4)2SO4 0.1% K2HPO4 0.1% MgSO4・7H2O 0.1% NaCl 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 0.0001% ZnSO4・7H2O 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.0
【００２１】グリセリン・アスパラギン寒天(ISP 5)
1.0% グリセロール（Glycerol）
0.114% Ｌ−アスパラギン・H2O（L-Asparagine ・H2
O） 0.1% K2HPO4 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 0.0001% ZnSO4・7H2O 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
O） 0.1% K2HPO4 0.0001% FeSO4・7H2O 0.0001% MnCl2・4H2O 0.0001% ZnSO4・7H2O 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００２２】ペプトン・イースト鉄寒天(ISP 6)
1.5% バクト・ペプトン（Bacto Peptone ディフコ
(Difco)社製) 0.5% バクト・プロテオーゼ・ペプトン（Bacto Pro
teose Peptone ディフコ(Difco)社製) 0.1% K2HPO4 0.1% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.05% クエン酸アンモニウム鉄(III)−褐色（Ammoni
um Iron(III)Citrate,Brown） 0.0126% Na2S2O3・5H2O 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Difc
o)社製) pH 7.2
(Difco)社製) 0.5% バクト・プロテオーゼ・ペプトン（Bacto Pro
teose Peptone ディフコ(Difco)社製) 0.1% K2HPO4 0.1% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.05% クエン酸アンモニウム鉄(III)−褐色（Ammoni
um Iron(III)Citrate,Brown） 0.0126% Na2S2O3・5H2O 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Difc
o)社製) pH 7.2
【００２３】チロシン寒天(ISP 7)
1.5% グリセロール（Glycerol）
0.05% Ｌ−チロシン（L-Tyrosine）
0.114% Ｌ−アスパラギン・H2O（L-asparagine・H2
O） 0.05% K2HPO4 0.05% MgSO4・H20 0.05% NaCl 0.001136% FeSO4・7H2O 0.000285% H3BO3 0.00018% MnCl2・4H2O 0.00021% (+)−酒石酸ナトリウム２水和物（Sodium
(+)-tartrate・2H2O） 0.000004% CoCl2・6H2O 0.0000027% CuCl2・2H2O 0.0000025% Na2Mo4O4・2H2O 0.000002% ZnCl2 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Di
fco)社製) pH 7.2
O） 0.05% K2HPO4 0.05% MgSO4・H20 0.05% NaCl 0.001136% FeSO4・7H2O 0.000285% H3BO3 0.00018% MnCl2・4H2O 0.00021% (+)−酒石酸ナトリウム２水和物（Sodium
(+)-tartrate・2H2O） 0.000004% CoCl2・6H2O 0.0000027% CuCl2・2H2O 0.0000025% Na2Mo4O4・2H2O 0.000002% ZnCl2 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Di
fco)社製) pH 7.2
【００２４】硝酸寒天(ISP 8)
0.5% バクト・ペプトン（Bacto Peptone ディフ
コ(Difco)社製) 0.3% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% KNO3 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
コ(Difco)社製) 0.3% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% KNO3 2.0% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００２５】ベネッツ寒天
1.0% グルコース（Glucose）
0.2% カゼイン（酵素加水分解物）（Casein,Enzym
atic Hydrolysate nacalai社製) 0.1% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% バクト・酵母エキス（Bacto East Extract
ディフコ(Difco)社製) 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
atic Hydrolysate nacalai社製) 0.1% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% バクト・酵母エキス（Bacto East Extract
ディフコ(Difco)社製) 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００２６】クザペック・ドックス寒天
3.0% シュークロース（Sucrose）
0.3% NaNO3
0.1% K2HPO4
0.05% MgSO4・7H2O
0.05% KCl
0.001% FeSO4・7H2O
1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
co)社製) pH 7.2
【００２７】グルコース・アスパラギン寒天
1.0% グルコース（Glucose）
0.0568% Ｌ−アスパラギン・H2O（L-Asparagine ・H2
O） 0.05% K2HPO4 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
O） 0.05% K2HPO4 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００２８】栄養寒天
0.5% バクト・ペプトン（Bacto Peptone ディフ
コ(Difco)社製) 0.5% NaCl 0.2% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
コ(Difco)社製) 0.5% NaCl 0.2% バクト・酵母エキス（Bacto Yeast Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.1% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 1.5% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００２９】ワックスマン・グルコース寒天
1.5% グルコース（Glucose）
0.5% バクト・ペプトン（Bacto Peptone ディフ
コ(Difco)社製) 0.5% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.5% NaCl 1.25% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
コ(Difco)社製) 0.5% バクト・ビーフエキス（Bacto Beef Extract
ディフコ(Difco)社製) 0.5% NaCl 1.25% バクト・アガー（Bacto Agar ディフコ(Dif
co)社製) pH 7.2
【００３０】（３）生理的性質
細胞壁組成：細胞壁組成成分中のジアミノピメリン酸
の型についてスタネック(Staneck)らの方法(アプライド
・マイクロバイオロジー（Applied Microbiology）第28
巻第226頁(1974年)参照)により分析した結果、Ｌ，Ｌ型
であった。
の型についてスタネック(Staneck)らの方法(アプライド
・マイクロバイオロジー（Applied Microbiology）第28
巻第226頁(1974年)参照)により分析した結果、Ｌ，Ｌ型
であった。
【００３１】各種炭素源の同化性（プリドハム・ゴト
リーブ寒天培地上）を表２に示した。
リーブ寒天培地上）を表２に示した。
【００３２】
【表２】
注）＋：同化する、−：同化しない。
【００３３】メラニン様色素の生成（チロシン寒天培
地：あり、ペプトン・鉄：なし。）
地：あり、ペプトン・鉄：なし。）
【００３４】（４）酸の生産性
炭素源として下記表３の炭水化物を用いた場合の酸生産
の有無を示す。
の有無を示す。
【００３５】
【表３】
注）＋：生酸する、−：生酸しない
【００３６】上記の菌学的性質、特に形態学的性質およ
び細胞壁のジアミノピメリン酸の型等から、該USE-53株
はストレプトマイセス属に属すると判定される。Ｅ.キ
ュスター(E.Kuster)のインターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマティック・バクテリオロジー(Intern.
J. Syst. Bacteriol.)第22巻第139頁-148頁(1972年)並
びにP.ケムファー(P.Kampher)らのジャーナル・オブ・
ゼネラル・マイクロバイオロジー(J.Gen.Microbiol.)第
137巻第1831頁−第1891頁(1991年)を参照して類縁菌種
を検索し、更にバージェイズ・マニュアル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー(Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology)第2476頁並びにＥ．Ｂ．シー
リング(E. B. Shirling)及びＤ．ゴットリーブ(D. Gott
lieb)のインターナショナル・ジャーナル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー(Intern. J. Syst. Ba
cteriol.)第22巻第271頁-第273頁(1972年)を参照して類
縁菌種を検索したところ、本発明菌株はストレプトマイ
セス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendulae ）と
同定され、ストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Stre
ptomyces lavendulae） USE-53株と命名した。このス
トレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lav
endulae） USE-53株は、独立行政法人 産業技術総合
研究所に２００１年４月１７日に寄託され、受託番号FE
RM P-18305が付与されている。
び細胞壁のジアミノピメリン酸の型等から、該USE-53株
はストレプトマイセス属に属すると判定される。Ｅ.キ
ュスター(E.Kuster)のインターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマティック・バクテリオロジー(Intern.
J. Syst. Bacteriol.)第22巻第139頁-148頁(1972年)並
びにP.ケムファー(P.Kampher)らのジャーナル・オブ・
ゼネラル・マイクロバイオロジー(J.Gen.Microbiol.)第
137巻第1831頁−第1891頁(1991年)を参照して類縁菌種
を検索し、更にバージェイズ・マニュアル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー(Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology)第2476頁並びにＥ．Ｂ．シー
リング(E. B. Shirling)及びＤ．ゴットリーブ(D. Gott
lieb)のインターナショナル・ジャーナル・オブ・シス
テマティック・バクテリオロジー(Intern. J. Syst. Ba
cteriol.)第22巻第271頁-第273頁(1972年)を参照して類
縁菌種を検索したところ、本発明菌株はストレプトマイ
セス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendulae ）と
同定され、ストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Stre
ptomyces lavendulae） USE-53株と命名した。このス
トレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lav
endulae） USE-53株は、独立行政法人 産業技術総合
研究所に２００１年４月１７日に寄託され、受託番号FE
RM P-18305が付与されている。
【００３７】また、本発明菌株には、低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンを生産する性質（好ましくは本発明菌株の
上記の好ましい性質）を有する限り、USE-53株の変異株
も包含される。該変異株の中でも、USE-53株と同等以上
に低重合度ε−Ｌ−ポリリジンを生産する性質を有する
変異株は好ましい。
−Ｌ−リジンを生産する性質（好ましくは本発明菌株の
上記の好ましい性質）を有する限り、USE-53株の変異株
も包含される。該変異株の中でも、USE-53株と同等以上
に低重合度ε−Ｌ−ポリリジンを生産する性質を有する
変異株は好ましい。
【００３８】USE-53株の変異株は、USE-53株の細胞を変
異誘発処理することによって得られる変異株やUSE-53株
の自然突然変異株を、ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する
性質などを指標としてスクリーニングすることによって
得られる。変異誘発処理としては、紫外線照射やＮ−メ
チル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンなどの変
異誘発物質による処理が挙げられる。ε−ポリ−Ｌ−リ
ジンを生産する性質などを指標とするスクリーニングと
しては、具体的には、後述の実施例に示した方法を挙げ
ることができる。
異誘発処理することによって得られる変異株やUSE-53株
の自然突然変異株を、ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する
性質などを指標としてスクリーニングすることによって
得られる。変異誘発処理としては、紫外線照射やＮ−メ
チル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンなどの変
異誘発物質による処理が挙げられる。ε−ポリ−Ｌ−リ
ジンを生産する性質などを指標とするスクリーニングと
しては、具体的には、後述の実施例に示した方法を挙げ
ることができる。
【００３９】＜２＞本発明製造法
本発明の製造方法に使用する菌株は、ストレプトマイセ
ス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendulae） USE
-53株（FERM P-18305）およびその変異株であり、好ま
しくはストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株である。
ス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendulae） USE
-53株（FERM P-18305）およびその変異株であり、好ま
しくはストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptom
yces lavendulae） USE-53株である。
【００４０】本発明に使用する液体培地は、炭素源、窒
素源、無機塩及びその他の栄養物が含まれていれば、い
かなるものでもよい。炭素源としては、グルコース、フ
ラクトース、グリセロール、スターチ等が挙げられ、そ
の含有割合は液体培地に対して０．１〜１０％（ｗ／
ｖ）の範囲であることが好ましい。窒素源としては、酵
母エキス、ペプトン、カゼイン加水分解物、アミノ酸等
の有機化合物や、硫酸アンモニウムなどの無機アンモニ
ウム塩等が挙げられ、その含有割合は液体培地に対して
０．１〜５％（ｗ／ｖ）の範囲であることが好ましい。
素源、無機塩及びその他の栄養物が含まれていれば、い
かなるものでもよい。炭素源としては、グルコース、フ
ラクトース、グリセロール、スターチ等が挙げられ、そ
の含有割合は液体培地に対して０．１〜１０％（ｗ／
ｖ）の範囲であることが好ましい。窒素源としては、酵
母エキス、ペプトン、カゼイン加水分解物、アミノ酸等
の有機化合物や、硫酸アンモニウムなどの無機アンモニ
ウム塩等が挙げられ、その含有割合は液体培地に対して
０．１〜５％（ｗ／ｖ）の範囲であることが好ましい。
【００４１】本発明に好ましく使用することができる液
体培地は、炭素源としてブドウ糖またはグリセロールを
含み、窒素源として硫酸アンモニウムまたは酵母エキス
もしくはペプトンを含むものである。
体培地は、炭素源としてブドウ糖またはグリセロールを
含み、窒素源として硫酸アンモニウムまたは酵母エキス
もしくはペプトンを含むものである。
【００４２】また、無機塩としては、リン酸イオン、カ
リウムイオン、ナトリウムイオン、マグネシウムイオ
ン、亜鉛イオン、鉄イオン、マンガンイオン、ニッケル
イオン、硫酸イオン等を挙げることができる。
リウムイオン、ナトリウムイオン、マグネシウムイオ
ン、亜鉛イオン、鉄イオン、マンガンイオン、ニッケル
イオン、硫酸イオン等を挙げることができる。
【００４３】該液体培地での本発明菌株の培養は、好気
的条件下で振盪培養、攪拌培養等により行うことが好ま
しい。培養温度は２０〜４０℃の範囲、培地のｐＨは３
〜９の範囲であることが好ましい。培養期間は、通常は
１〜１０日であるが、本発明菌株では、それ以上の期間
培養を続けることができる。また、培養途中で、炭素
源、窒素源を逐次添加してもよい。
的条件下で振盪培養、攪拌培養等により行うことが好ま
しい。培養温度は２０〜４０℃の範囲、培地のｐＨは３
〜９の範囲であることが好ましい。培養期間は、通常は
１〜１０日であるが、本発明菌株では、それ以上の期間
培養を続けることができる。また、培養途中で、炭素
源、窒素源を逐次添加してもよい。
【００４４】さらに、本発明においては、該液体培地に
Ｌ−リジンを添加することが好ましく、その添加割合は
該液体培地に対して０．１〜２％（ｗ／ｖ）の範囲であ
ることが好ましい。該液体培地へのＬ−リジンの添加に
より、該液体培地中における低重合度ポリリジンの生成
蓄積が容易になる。
Ｌ−リジンを添加することが好ましく、その添加割合は
該液体培地に対して０．１〜２％（ｗ／ｖ）の範囲であ
ることが好ましい。該液体培地へのＬ−リジンの添加に
より、該液体培地中における低重合度ポリリジンの生成
蓄積が容易になる。
【００４５】該液体培地中に生成蓄積した低重合度ε−
ポリ−Ｌ−リジンの採取は、該液体培地から遠心分離や
フィルター濾過などの方法によって菌体を取り除き、菌
体除去後の液体培地から公知の方法により、低重合度ε
−ポリ−Ｌ−リジンを単離することによって行うことが
できる。具体的には、例えば、菌体除去後の液体培地を
アニオン交換樹脂のカラムに通して不純物の大部分を除
き、さらにカチオン交換樹脂のカラムを通して精製し濃
縮する。次いで、得られた濃縮液からアセトン、エタノ
ール等の有機溶媒を用いて晶析を行うことにより低重合
度ε−ポリ−Ｌ−リジンを得ることができる。
ポリ−Ｌ−リジンの採取は、該液体培地から遠心分離や
フィルター濾過などの方法によって菌体を取り除き、菌
体除去後の液体培地から公知の方法により、低重合度ε
−ポリ−Ｌ−リジンを単離することによって行うことが
できる。具体的には、例えば、菌体除去後の液体培地を
アニオン交換樹脂のカラムに通して不純物の大部分を除
き、さらにカチオン交換樹脂のカラムを通して精製し濃
縮する。次いで、得られた濃縮液からアセトン、エタノ
ール等の有機溶媒を用いて晶析を行うことにより低重合
度ε−ポリ−Ｌ−リジンを得ることができる。
【００４６】
【実施例】以下、実施例にて本発明を具体的に説明す
る。 実施例：低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジン生産菌の取得 (1)ポリリジン生産菌のスクリーニング (a)土壌からの分離方法 土壌１ｇ（湿重量）を滅菌した生理食塩水（10ml）に懸
濁し、30℃で振とう（200rpmで10分間）、静置（30分
間）後、上澄液を生理食塩水で希釈し、この希釈液を放
線菌分離用培地（培地１）に塗布した。これを28℃で２
週間程度培養し、生育した放線菌のコロニーを酵母エキ
ス−麦芽エキス寒天培地（培地２）に植継ぎ、分離・取
得した。
る。 実施例：低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジン生産菌の取得 (1)ポリリジン生産菌のスクリーニング (a)土壌からの分離方法 土壌１ｇ（湿重量）を滅菌した生理食塩水（10ml）に懸
濁し、30℃で振とう（200rpmで10分間）、静置（30分
間）後、上澄液を生理食塩水で希釈し、この希釈液を放
線菌分離用培地（培地１）に塗布した。これを28℃で２
週間程度培養し、生育した放線菌のコロニーを酵母エキ
ス−麦芽エキス寒天培地（培地２）に植継ぎ、分離・取
得した。
【００４７】(b)取得放線菌の培養
分離・取得した放線菌について、まず生育培地（培地
３）で菌体を十分に生育させた（30℃、１日）後、遠心
分離で無菌的に培地を除き菌体を回収した。次に、回収
した菌体を液体培地（培地４）に懸濁し、30℃で４日間
振とう培養した。
３）で菌体を十分に生育させた（30℃、１日）後、遠心
分離で無菌的に培地を除き菌体を回収した。次に、回収
した菌体を液体培地（培地４）に懸濁し、30℃で４日間
振とう培養した。
【００４８】(c)ポリリジンの検出・測定
培養終了後、該液体培地を遠心分離して菌体を除いた上
澄液について、ポリリジンの検出・測定を行った。ポリ
リジンの検出はイツアキ(Itzhaki)（アナリティカル・
バイオケミストリー(Analytical Biochemistry)第50巻
第569頁）の方法によった。すなわち、培養上澄液0.5 m
lと１mMメチルオレンジ及び50 mM NaH2PO 4-Na2HPO4(pH
7.0)の水溶液２mlとを混合し、室温で30分間放置後、生
じたポリリジン−メチルオレンジコンプレックスを遠心
分離により除き、その上澄水の吸光度（470nm）を測定
して、既知濃度のε−ポリ−Ｌ−リジン溶液を用いて作
成した標準曲線より培養液中のポリリジン量を求めた。
澄液について、ポリリジンの検出・測定を行った。ポリ
リジンの検出はイツアキ(Itzhaki)（アナリティカル・
バイオケミストリー(Analytical Biochemistry)第50巻
第569頁）の方法によった。すなわち、培養上澄液0.5 m
lと１mMメチルオレンジ及び50 mM NaH2PO 4-Na2HPO4(pH
7.0)の水溶液２mlとを混合し、室温で30分間放置後、生
じたポリリジン−メチルオレンジコンプレックスを遠心
分離により除き、その上澄水の吸光度（470nm）を測定
して、既知濃度のε−ポリ−Ｌ−リジン溶液を用いて作
成した標準曲線より培養液中のポリリジン量を求めた。
【００４９】上記培地１〜４の組成を下記に示す。なお
「％」は、％（ｗ／ｖ）である。 培地１ 放線菌分離用培地（Glycerol-Czapek培地） グリセロール 0.3％ NaNO3 0.2％ K2HPO4（pH 7.0） 0.1％ KCl 0.05％ MgSO4・7H2O 0.05％ FeSO4・7H2O 0.001％ 寒天 1.5％ シクロヘキシミド 50μg/ml ナイスタチン 50μg/ml
「％」は、％（ｗ／ｖ）である。 培地１ 放線菌分離用培地（Glycerol-Czapek培地） グリセロール 0.3％ NaNO3 0.2％ K2HPO4（pH 7.0） 0.1％ KCl 0.05％ MgSO4・7H2O 0.05％ FeSO4・7H2O 0.001％ 寒天 1.5％ シクロヘキシミド 50μg/ml ナイスタチン 50μg/ml
【００５０】培地２ 酵母エキス−麦芽エキス寒天培地
（ISP 2） 酵母エキス 0.4％ 麦芽エキス 1.0％ グルコース 0.4％ 寒天 1.5％ ｐＨ 7.2
（ISP 2） 酵母エキス 0.4％ 麦芽エキス 1.0％ グルコース 0.4％ 寒天 1.5％ ｐＨ 7.2
【００５１】培地３ 生育培地
グリセロール 2.0％
酵母エキス 0.5％
MgSO4・7H2O 0.05％
KH2PO4-Na2HPO4（pH 6.8） 1/50Ｍ
【００５２】培地４ 液体培地
グリセロール 2.0％
クエン酸・H2O（pH 4.5） 2.0％
（NH4)2SO4 1.0％
L-リジン・HCl 0.2％
【００５３】上記の検出方法によりポリリジン生産菌を
土壌よりスクリーニングした結果、和歌山県那智山地の
土壌よりUSE-53株を得た。
土壌よりスクリーニングした結果、和歌山県那智山地の
土壌よりUSE-53株を得た。
【００５４】(2)取得株（USE-53株）の菌学的性質
取得株USE-53株の形態学的性質、各種培地上における生
育状態および生理的性質を調べたところ、前述のような
性質が認められた。USE-53株は、形態学的特徴や細胞壁
のジアミノピメリン酸タイプ等からストレプトマイセス
属と判定された。また、類縁菌種を検索したところ本発
明菌株はストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Strept
omyces lavendulae）と同定した。本菌株は、ストレプ
トマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendula
e）USE-53株と命名され、独立行政法人 産業技術総合
研究所に２００１年４月１７日に寄託され、受託番号
FERM P-18305が付与されている。
育状態および生理的性質を調べたところ、前述のような
性質が認められた。USE-53株は、形態学的特徴や細胞壁
のジアミノピメリン酸タイプ等からストレプトマイセス
属と判定された。また、類縁菌種を検索したところ本発
明菌株はストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Strept
omyces lavendulae）と同定した。本菌株は、ストレプ
トマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces lavendula
e）USE-53株と命名され、独立行政法人 産業技術総合
研究所に２００１年４月１７日に寄託され、受託番号
FERM P-18305が付与されている。
【００５５】(3)USE-53株の生産物の確認
USE-53株を液体培地（培地４）を用い、３０℃で４日間
培養した培養液に、メタノールとアセトンとの混合液
（メタノール／アセトン＝３／１ 体積比）を添加
し、沈殿を生成させ回収した（４０〜６７％画分）。次
に、回収した沈殿画分を陽イオン交換カラム（TSKgel
CM-5PW）を用いて精製し、精製物は電気泳動的に均一に
なることを確認した。次に、この精製物を6M塩酸で加水
分解し、加水分解物についてアミノ酸分析を行った。ア
ミノ酸分析の方法は、加水分解物のアミノ基を前もって
ジメチルアミノアゾベンゼンスルフォニル（dimethylam
inoazobenzenesulfonyl-、DABS）化し、液体クロマトグ
ラフィー（アミノクロームアミノ酸分析システム）を用
いて分析を行った。
培養した培養液に、メタノールとアセトンとの混合液
（メタノール／アセトン＝３／１ 体積比）を添加
し、沈殿を生成させ回収した（４０〜６７％画分）。次
に、回収した沈殿画分を陽イオン交換カラム（TSKgel
CM-5PW）を用いて精製し、精製物は電気泳動的に均一に
なることを確認した。次に、この精製物を6M塩酸で加水
分解し、加水分解物についてアミノ酸分析を行った。ア
ミノ酸分析の方法は、加水分解物のアミノ基を前もって
ジメチルアミノアゾベンゼンスルフォニル（dimethylam
inoazobenzenesulfonyl-、DABS）化し、液体クロマトグ
ラフィー（アミノクロームアミノ酸分析システム）を用
いて分析を行った。
【００５６】アミノ酸分析の結果、USE-53株の生産物は
リジンを唯一の構成アミノ酸とするポリペプチドすなわ
ちポリリジンであることが確認された。また、USE-53株
が生産したポリリジンの重合度を、高性能液体クロマト
グラフィー（HPLC）のイオン会合クロマトグラフィー法
により、逆相カラム（TSKgel ODS-80Ts）を用いて、非
水溶媒としてアセトニトリルを用いてグラジエントをか
けながら測定した。その結果、１０〜１９量体の範囲で
あるポリリジンを高い分率で含有する低重合度ポリリジ
ンであった。No. 346-D株の生産するポリリジンよりも
低重合度のポリリジンを生産するストレプトマイセスs
p.SP-66株（FERM P-17223）（特開2001-017159号公報）
の結果をあわせて図１に示す。
リジンを唯一の構成アミノ酸とするポリペプチドすなわ
ちポリリジンであることが確認された。また、USE-53株
が生産したポリリジンの重合度を、高性能液体クロマト
グラフィー（HPLC）のイオン会合クロマトグラフィー法
により、逆相カラム（TSKgel ODS-80Ts）を用いて、非
水溶媒としてアセトニトリルを用いてグラジエントをか
けながら測定した。その結果、１０〜１９量体の範囲で
あるポリリジンを高い分率で含有する低重合度ポリリジ
ンであった。No. 346-D株の生産するポリリジンよりも
低重合度のポリリジンを生産するストレプトマイセスs
p.SP-66株（FERM P-17223）（特開2001-017159号公報）
の結果をあわせて図１に示す。
【００５７】さらに、USE-53株が生産した低重合度ポリ
リジンは、ε−ポリ−Ｌ−リジンを加水分解するタンパ
ク質分解酵素（Aspergillus oryzae由来のプロテアーゼ
Ａ；天野製薬）により分解された。一方、該低重合度ポ
リリジンは、α−ポリアミド結合したα−ポリ−Ｌ−リ
ジンを加水分解する酵素トリプシンでは加水分解されな
かった。以上のことから、USE-53株が生産した低重合度
ポリリジンは、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンであるこ
とが判明した。
リジンは、ε−ポリ−Ｌ−リジンを加水分解するタンパ
ク質分解酵素（Aspergillus oryzae由来のプロテアーゼ
Ａ；天野製薬）により分解された。一方、該低重合度ポ
リリジンは、α−ポリアミド結合したα−ポリ−Ｌ−リ
ジンを加水分解する酵素トリプシンでは加水分解されな
かった。以上のことから、USE-53株が生産した低重合度
ポリリジンは、低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンであるこ
とが判明した。
【００５８】(4) USE-53株が生産するε−ポリ−Ｌ−リ
ジンの抗菌活性 USE-53株の生産する低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの抗
菌活性をペーパーディスク法で調べたところ、グラム陽
性細菌であるバチルス・ブレビス（Bacillus brevis I
FO 3331)及びグラム陰性細菌であるエスケリチア・コリ
・Ｋ−１２（Escherichia coli K-12 IFO 3301）に対
してストレプトマイセス・アルブラス（Streptomyces a
lbulus） No.346-D株やsp-66株由来のポリリジンと同程
度の抗菌活性を有していた。
ジンの抗菌活性 USE-53株の生産する低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの抗
菌活性をペーパーディスク法で調べたところ、グラム陽
性細菌であるバチルス・ブレビス（Bacillus brevis I
FO 3331)及びグラム陰性細菌であるエスケリチア・コリ
・Ｋ−１２（Escherichia coli K-12 IFO 3301）に対
してストレプトマイセス・アルブラス（Streptomyces a
lbulus） No.346-D株やsp-66株由来のポリリジンと同程
度の抗菌活性を有していた。
【００５９】(5)USE-53株のε−ポリ−Ｌ−リジン生産
能力 生育培地（培地３）１００ｍｌを入れ滅菌した５００ｍ
ｌ容量の坂口フラスコに、USE-53株を接種し、３０℃で
２４時間培養した後、該液体培地を遠心分離にかけ、該
液体培地中の菌体を回収した。回収した菌体を生理的食
塩水で１回洗浄後、液体培地（培地４）１００ｍｌを入
れ滅菌した５００ｍｌ容量の坂口フラスコに移し、３０
℃で６日間培養した。この培養中に採取した培養上澄液
の低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジン濃度を、前述の「(c)
ポリリジンの検出・測定」に記載の方法により測定し
た。６日間の培養でUSE-53株は、１リットルあたり180m
gのε−ポリ−Ｌ−リジンを生産した。
能力 生育培地（培地３）１００ｍｌを入れ滅菌した５００ｍ
ｌ容量の坂口フラスコに、USE-53株を接種し、３０℃で
２４時間培養した後、該液体培地を遠心分離にかけ、該
液体培地中の菌体を回収した。回収した菌体を生理的食
塩水で１回洗浄後、液体培地（培地４）１００ｍｌを入
れ滅菌した５００ｍｌ容量の坂口フラスコに移し、３０
℃で６日間培養した。この培養中に採取した培養上澄液
の低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジン濃度を、前述の「(c)
ポリリジンの検出・測定」に記載の方法により測定し
た。６日間の培養でUSE-53株は、１リットルあたり180m
gのε−ポリ−Ｌ−リジンを生産した。
【００６０】
【発明の効果】本発明の菌株は、は、低重合度ε−ポリ
−Ｌ−リジンを効率よく生産する。また、本発明の低重
合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの生産方法であれば、低重合
度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく得ることができる。
−Ｌ−リジンを効率よく生産する。また、本発明の低重
合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの生産方法であれば、低重合
度ε−ポリ−Ｌ−リジンを効率よく得ることができる。
【図１】USE-53株による低重合度ポリリジンのイオン会
合クロマトグラムの結果を示すチャート。
合クロマトグラムの結果を示すチャート。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 竹原 宗範
滋賀県彦根市八坂町2500 滋賀県立大学工
学部内
Ｆターム(参考） 4B064 AG01 CA04 CB30 DA16
4B065 AA50X AC14 BA16 BC01
CA24 CA41 CA44 CA47 CA54
CA60
Claims (3)
- 【請求項１】 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産す
るストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces
lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）。 - 【請求項２】 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産す
るストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces
lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）の変異株。 - 【請求項３】 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産す
るストレプトマイセス・ラベンデュラエ（Streptomyces
lavendulae） USE-53株（FERM P-18305）またはその
変異株を液体培地中で培養し、該液体培地中に生成蓄積
した低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを採取することを特
徴とする低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001242415A JP2003052358A (ja) | 2001-08-09 | 2001-08-09 | 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001242415A JP2003052358A (ja) | 2001-08-09 | 2001-08-09 | 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003052358A true JP2003052358A (ja) | 2003-02-25 |
Family
ID=19072688
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001242415A Pending JP2003052358A (ja) | 2001-08-09 | 2001-08-09 | 低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンを生産する菌株及びそれを用いた低重合度ε−ポリ−Ｌ−リジンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003052358A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019039544A1 (ja) | 2017-08-23 | 2019-02-28 | 公立大学法人福井県立大学 | クリック官能基をもつε－ポリ－Ｌ－リジン誘導体、その製法、及びその用途 |
-
2001
- 2001-08-09 JP JP2001242415A patent/JP2003052358A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019039544A1 (ja) | 2017-08-23 | 2019-02-28 | 公立大学法人福井県立大学 | クリック官能基をもつε－ポリ－Ｌ－リジン誘導体、その製法、及びその用途 |
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