JP2002511925A - 血液の凝集計量アッセイ - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.結合成分が結合する粒子(粒子は光を赤外部で吸収する)および該粒子の凝 集に必要な追加の試薬を含有する凝集システムを用いて、サンプルの特性を測定 する方法であって、該方法は: サンプルを該凝集システムに結合してアッセイ混合物を形成し; 該アッセイ混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは該サンプルの特性に関連する)ことを含む。 2.該サンプルが全血であり、該アッセイ混合物が該血液サンプルの約5倍以下 の希釈を有する、請求項1の方法。 3.該全血が、該サンプルの成分の内在活性を干渉しない抗凝固剤を含有する、 請求項2の方法。 4.赤外光が約800nmにある、請求項2の方法。 5.該照射工程が、該アッセイ混合物の2成分の等吸収点が同じである波長で行 われる、請求項1の方法。 6.該粒子の直径が0.1から50μの範囲にある、請求項1の方法。 7.該粒子が、アミノ酸配列RGDまたはKGDを含有するタンパク質またはペ プチドで被覆されている、請求項1の方法。 8.該タンパク質がフィブリノーゲンまたはフォンヴィルブランド因子である、 請求項7の方法。 9.該粒子が炭素粒子である、請求項1の方法。 10.該粒子が少なくとも1種の赤外吸収染料を含む、請求項1の方法。 11.赤外部で光を吸収し、フィブリノーゲンが結合する粒子および追加の試薬 を含有する凝集システムを用いて、サンプル中の血小板接着能を測定する方法で あって、該方法は: 血小板含有の血液サンプルを該凝集システムに結合してアッセイ混合物を形成 し; 該アッセイ混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは該サンプルの特性に関連する)ことを含む。 12.該凝集システムが血小板活性化合物を含有する、請求項11の方法。 13.コントロール値のための追加の工程: (1)トロンビン含有の組成物、(2)非被覆粒子、(3)赤外部で光を吸収 するフィブリノーゲン被覆粒子(被覆粒子の濃度は該アッセイ混合物中の濃度 に匹敵する)を結合し、それにより該被覆粒子の凝集が起こり; 該コントロール混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは血小板の関与のない起点値を表す)ことを含む、請求項11の方 法。 14.トロンビン含有の該組成物がアミノ酸配列Gly−Pro−Arg−Pr oを有するオリゴペプチドを含む、請求項13の方法。 15.コントロール値のための追加の工程: (1)血小板血漿膜または抗フィブリノーゲン抗体で被覆された粒子、(2) 非被覆粒子、(3)赤外部で光を吸収するフィブリノーゲン被覆粒子(被覆粒 子の濃度は該アッセイ混合物中の濃度に匹敵する)を結合し、それにより該被 覆粒子の凝集が起こり; 該コントロール混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは血小板の関与のない起点値を表す)ことを含む、請求項11の方 法。 16.該抗フィブリノーゲン抗体が4A5である、請求項15の方法。 17.結合成分が結合する粒子(粒子は光を赤外部で吸収する)および該粒子の 凝集に必要な追加の試薬を含有する凝集システムを用いて、対象のリガンド(該 リガンドは該結合成分から得られる該粒子の凝集を調節する)の存在を測定する 方法であって、該方法は: サンプルを該凝集システムに結合してアッセイ混合物を形成し; 該アッセイ混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは該サンプル中の対象の該リガンドの存在に関連する)ことを含む 。 18.該リガンドが5kD以下の分子である、請求項17の方法。 19.該リガンドが10kD以上の分子である、請求項17の方法。 20.該粒子のサイズが0.1から50μの範囲にある、請求項17の方法。 21.該粒子のサイズが2から8μの範囲にある、請求項20の方法。 22.該サンプルが5倍以下に希釈された全血であり、該赤外光線が800±1 0nmである、請求項17の方法。 23.赤外部で光を吸収し、結合成分が結合する粒子、および触媒阻害剤により 阻害された該触媒の基質(該結合成分に関する該基質、または該基質の触媒産物 は該粒子の凝集を調節する)上での触媒作用の結果としての該粒子の凝集に必要 な追加の試薬を含有する凝集システムを用いて、触媒阻害剤の存在を測定する方 法であって、該方法は: 該触媒を含有するサンプルを該凝集システムに結合してアッセイ混合物を形成 し; 該アッセイ混合物を赤外部の光で照射し; 該アッセイ混合物からの赤外光の透過を測定する; (透過レベルは該サンプル中の触媒阻害剤に関連する)ことを含む。 24.請求項1の方法に使用するためのキットであって、該キットが0.1から 50μの範囲のサイズの粒子(粒子は赤外部で光を吸収し、結合成分が結合して いる)および少なくとも1種の追加構成成分を含み、この構成成分は: 少なくとも1種のGPIIb/IIIa阻害剤に対する抗体; 血小板アクチベーター; 凝血を阻害する量の抗凝固剤を含有するヴァキュテイナー; トロンビンと粒子(粒子は、サイズが0.1から50μの範囲にあり、赤外域 で光を吸収する)との混合物;および/または、 混合内容物を有するアッセイ混合物ホルダーである。 25.該結合成分がフィブリノーゲン、またはアミノ酸配列RGDまたはKGD を含有するペプチドである、請求項24のキット 26.該結合成分がフィブリノーゲンである、請求項24のキット。 27.結合成分が結合する該粒子が炭素粒子である、請求項24のキット。 28.該血小板アクチベーターがTRAP、イソ−TRAP、ADP、コラーゲ ン、アラキドン酸およびリストセチンからなる群より選ばれる、請求項24のキ ット。 29.該抗凝固剤がクエン酸塩である、請求項24のキット。 30.赤外部で光を吸収し、結合成分が結合する、サイズが0.1から50μの 範囲にある粒子を含有する組成物。 31.該サイズが2から8μの範囲にある、請求項30の組成物。 32.該結合成分が、フィブリノーゲンまたはアミノ酸配列RGDまたはKGD を含有するペプチドである、請求項30の組成物。 33.該吸収光が800±10nmである、請求項30の組成物。 34.該粒子が炭素粒子である、請求項30の組成物。 35.該粒子が赤外部で光を吸収する染料を含有する、請求項30の組成物。 36.サイズが0.1から50μの範囲にある高分子粒子をトロンビンと併せて 含有する組成物。
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