JP2002507209A

JP2002507209A - カルボン酸類及びその誘導体並びにそれらを含有する医薬組成物

Info

Publication number: JP2002507209A
Application number: JP50539899A
Authority: JP
Inventors: バル−タナ，ヤコブ
Original assignee: イスム・リサーチ・ディベロップメント・カンパニー・オブ・ザ・ヒーブルー・ユニバーシティ・オブ・エルサレム
Priority date: 1997-06-26
Filing date: 1998-06-23
Publication date: 2002-03-05
Also published as: CN1261274A; IL121165A0; US6303653B1; EP1001755B1; ATE508739T1; IL133540A; EP1001755A2; AU7783998A; WO1999000116A2; CA2294232A1; WO1999000116A3; CN101129349A; RU2239427C2

Abstract

(57)【要約】本発明に従い、医療上有効量の式Ｒ−ＣＯＯＨの化合物、但し、式中Ｒは、炭素原子１０−２４の飽和または不飽和のアルキル鎖を意味し、該炭素原子の一つまたはそれ以上がヘテロ原子で置換されていてもよく、所望により該炭素またはヘテロ原子鎖メンバーの一つまたはそれ以上が環の一部を構成しており、所望により該鎖はヒドロカルビル基、ヘテロシクリル基、低級アルコキシ、ヒドロキシル置換低級アルキル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、フェニルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル−または低級アルキニル）−置換フェニル、Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル−または低級アルキニル）−置換Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルで置換されており、該両親媒性カルボキシレートは、それぞれの補酵素Ａチオエステルに生体内で転換され得るものである、を調製する。

Description

【発明の詳細な説明】カルボン酸類及びその誘導体並びにそれらを含有する医薬組成物発明の技術分野本発明は、医療上有用な化合物、およびそれらの化合物を使用するある種の疾病／症状の処置法に関する。上記刊行物、特許および特許出願の開示は、それらの全部があたかも各刊行物、特許および特許出願に記述どおりそのまま本書中に含まれているのと同じように、それぞれ個別にまた特異的に引用して本書の一部とする。背景技術肝臓実質細胞核因子−４α¹（ＨＮＦ−４α）（文献２中で総説）は、核受容体の超ファミリー中では稀少メンバーである。ＨＮＦ−４αは、成人の胚性肝臓、腎臓、腸および膵臓中で発現し、相同組換えによるネズミＨＮＦ−４αの破壊は胚の死ををもたらす。この超ファミリー中の他のメンバーと同様に、ＨＮＦ− ４α受容体は、非親水性のＣ−末端配位子結合ドメインと中心領域を介して結合している、良く保存されたＮ−末端結合ドメインを含むＤＮＡモジュラー構造から成つている。２種のＨＮＦ−４α異性体が、クローン化されており、Ｃ−末端ドメイン中に１０アミノ酸挿入を有する切り継ぎ変異体としてＨＮＦ−４α１とＨＮＦ−４α２：と特定されている。ＨＮＦ−４αは、遺伝子発現の活性化因子である。ＨＮＦ−４αによる転写活性化は、それが標的遺伝子の感応性ＤＲ−１プロモーター配列へのホモ二量体として結合し、転写開始錯体の活性化を生じて進められる。ＨＮＦ−４αにより活性化された遺伝子（文献２中で総説）は、各種の酵素やたんぱく質をコードしており、それらは、リポたんぱく質、コレステロールおよびトリグリセリド代謝（アポリポたんぱく質ＡＩ、ＡII、ＡIV、Ｂ、ＣIII、ミクロソマルトリグリセリド転移たんぱく質、コレステロール７αヒドロキシラーゼ）、脂質代謝（ミトコンドリア性中間鎖脂肪族アシル−ＣｏＡデヒドロゲナーゼ、ペルオキシソマル脂肪族アシル−ＣｏＡオキシダーゼ、脂肪族アシルω−酸化やステロイドの水酸化に関与するチトクロームＰ−４５０イソ酵素、脂肪酸結合たんぱく質、細胞性レチノール結合たんぱく質II、トランスサイレチン）、グルコース代謝（ホスフオエノールピルベートカルボキシキナーゼ、ピルベートキナーゼ、アルドラーゼ、 glut2）、アミノ酸代謝（チロシンアミノトランスフェラーゼ、オルニチントランスカルバミラーゼ）、血液凝固（ファクターVII、IX、Ｘ）、鉄代謝（トランスフェリン、エリスロポエチン）およびマクロファージ活性化（肝臓実質細胞成長因子様たんぱく質／マクロファージ刺激性たんぱく質、ヘパティティスＢコアおよびＸたんぱく質、ヒト−ＨＩＶ−１の長末端反復、α−１アンチトリプシン）に関与するものである。ＨＮＦ−４αにより活性化された数種の遺伝子は、アテローム発生、癌、自己免疫、その他数種の疾患³のオンセットおよび進行に有力な役割を果たしている。従って、アポリポたんぱく質Ｂ、ＡIVおよびＣIIIを過度に発現させると、ミクロソマルトリグリセリド転移たんぱく質の場合と同様に、非常に低密度のリポたんぱく質（ＶＬＤＬ）の生成増加に基く（高トリグリセリド症および高コレステロール症と合併した）異リポ蛋白症になることがあり、また、血漿清浄化の減少に伴うカイロミクロンを生じることもある。同様に、ＨＮＦ−４α／ＨＮＦ− １−誘起過剰発現／膵臓インシュリンの過剰分泌を生じる、膵臓の解糖速度の増強により、インシュリン抵抗性となる高インシュリン血症となることがある。実際、ＨＮＦ−４αおよびＨＮＦ−１の変異が、近年、若い（ＭＯＤＹ）⁴の初期糖尿病の成熟を説明するものであることが示された。肝臓ホスフォエノールピルベートカルボキシキナーゼのＨＮＦ−４α−誘発過剰発現に伴うインシュリン抵抗性、および、肝臓におけるグルコース生成の増加は、減弱化したグルコース耐性（ＩＧＴ）を生じ、最終的に非インシュリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）を導くことがある。さらに、今日では、高インシュリン血症が本態性高血圧症のオンセットと進行の病理学的に主要な要因となっていることが分かっており、そしてそれ故に、ＨＮＦ−４αに制御される遺伝子の過剰発現がさらなる高血圧症を導くことがある。さらに、恐らくは血液フィブリノリシスの阻害因子（例えば、プラスミノーゲン活性化阻害因子−１）の過剰発現と併発する、血液凝固因子のＨＮＦ−４α−誘発過剰発現は、随伴するアテローム性動脈硬化症伏臥プロセスの悪化に伴う血栓形成の増加と繊維素溶解の減少を来すことがある。異リポ蛋白血症、肥満症、ＩＧＴ／ＮＩＤＤＭ、高血圧症、および凝固／繊維素溶解欠乏が、近年、一様化した症状（症状−Ｘ、代謝性症状、インシュリン抵抗性）に関連していることが分かっている。ＨＮＦ−４α−制御遺伝子の過剰発現を来すこととなるＨＮＦ−４αの高転写活性は、実際、症状−Ｘカテゴリーの病理学的連関を説明するものであるかもしれない。症状−Ｘカテゴリーおよび全般症状は、今日、西洋社会におけるアテローム性心臓動脈硬化症の主要なリスク要因であり、従って、ＨＮＦ−４αがアテローム発生を開始させ促進させることと関連していることが分かっている。さらに、胸部、結腸及び前立腺癌が、症状 −Ｘが生じている個体中に発生し促進させられることから、ＨＮＦ−４α制御遺伝子が、これらの悪性疾患のオンセットおよび進行に関連していると思われる。症状−Ｘ関連遺伝子の発現に際してＨＮＦ−４αが果す役割に加えて、ＨＮＦ −４αは、自己免疫反応の過程を調節することに関係するたんぱく質をコードする遺伝子の発現も活性化する。従って、ＨＮＦ−４αが誘発するマクロファージ刺激性たんぱく質の過剰発現は、マクロファージを自己抗原および交叉反応抗原に対して感受性とし、そのために、自己免疫疾患経過、例えば、リュウマチ様関節炎、多発性硬化症および乾癬、の開始および劇症化を来すこととなり得る。さらに、Ｂ型肝炎コアおよびＸたんぱく質の転写がヒトＨＩＶ−１の長期間反復と同様にＨＮＦ−４αにより制御されていることから、ＨＮＦ−４αはこれらのウイルス疾患剤により開始された感染経過の調節に係っているものと思われる。ＨＮＦ−４α−誘発遺伝子の過剰発現が、異リポ蛋白血症、ＩＧＴ／ＮＩＤＤＭ、高血圧症、血液凝固能および繊維素溶解の低下、アテローム血症、癌、炎症、免疫力低下症、及びその他の疾患を生じ得るため、ＨＮＦ−４α転写活性の阻害は、ＨＮＦ−４α−制御病理学の改善をもたらし得るものと期待される。しかしながら、ＨＮＦ−４α転写活性阻害因子設計の基礎となり得る、ＨＮＦ−４α に対する配位子はまだ同定されるに至っていない。本発明は、ＨＮＦ−４α−誘発転写調節因子として、従って、ＨＮＦ−４α−制御遺伝子に誘発されるかまたは関連する病理学の処置において有力な薬剤として作用するように設計した、低分子量のＨＮＦ−４α配位子に関する。発明の概要本発明によれば、式Ｒ−ＣＯＯＨの両親媒性カルボキシレート、または該化合物の塩、またはエステル、またはアミドを含む、医療上有効な化合物が提供される。但し、Ｒは、炭素原子１０−２４の飽和または不飽和のアルキル鎖を意味し、該炭素原子の一つまたはそれ以上がヘテロ原子で置換されていてもよく、所望により該炭素またはヘテロ原子鎖メンバーの一つまたはそれ以上が環の一部を構成しており、所望により該鎖はヒドロカルビル基、ヘテロシクリル基、低級アルコキシ、ヒドロキシル置換低級アルキル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、フェニルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル−または低級アルキニル）−置換フェニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル −または低級アルキニル）−置換Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルで置換されており、該両親媒性カルボキシレートは、それぞれの補酵素Ａチオエステルに生体内で転換され得るものである。好ましい実施態様においては、該両親媒性カルボキシレートは、異種生物性（ xenobiotic）両親媒性カルボキシレートである。より好ましい実施態様においては、該異種生物性両親媒性カルボキシレートは、長鎖ジカルボン酸、ω−ＯＨカルボン酸、ω−Ｂ(ＯＨ)₂カルボン酸、クロフィブリン酸の類似体または非ステロイド性坑炎症剤であり得る。最も好ましい実施態様においては、両親媒性カルボキシレートは、ステアロイル(18:0)-ＣｏＡ、オレイル(18:1)-ＣｏＡ、リノレノイル(18:2)-ＣｏＡ、リノレノイル(18:3)-ＣｏＡ、アイコサペンタエノイル(2 0:5)-ＣｏＡ、ドコサヘキサエノイル(22:6)-ＣｏＡ、1、16−ヘキサデカンジオイック酸、1、18−オクタデカンジオイック酸、2、2、15、15−テトラメチルヘキサンデカン−1、16−ジオイック酸、2，2，17，17−テトラメチルオクタデカン−1、18−ジオイック酸、3、3、14、14−テトラメチルヘキサデカン−1、16− ジオイック酸、3、3、16、16−テトラメチルオクタデカン−1、18−ジオイック酸、4、4、13、13−テトラメチルヘキサデカン−1、16−ジオイック酸、4、4、1 5、15−テトラメチルオクタデカン−1、18−ジオイック酸、16−Ｂ(ＯＨ)２−ヘキサデカン酸、18−Ｂ(ＯＨ)２−オクタデカン酸、16−Ｂ(ＯＨ)２−2，2−ジメチル−ヘキサデカン酸、18−Ｂ(ＯＨ)２−2，2−ジメチル−オクタデカン酸、 16−Ｂ(ＯＨ)２−3，3−ジメチル−ヘキサデカン酸、18−Ｂ(ＯＨ)２−3，3−ジメチル−オクタデカン酸、16−Ｂ(ＯＨ)２−4、4−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−Ｂ(ＯＨ)２−4、4−ジメチル−オクタデカン酸、16−ヒドロキシ−ヘキサデカン酸、18−ヒドロキシ−オクタデカン酸、16−ヒドロキシ−2，2−ジメチル− ヘキサデカン酸、18−ヒドロキシ−2，2−ジメチル−オクタデカン酸、16−ヒドロキシ−3、3−ジメチル−ヘキサデカン酸、18−ヒドロキシ−3、3−ジメチル− オクタデカン酸 16−ヒドロキシ−4、4−ジメチル−ヘキサデカン酸、および、1 8−ヒドロキシ−4、4−ジメチル−オクタデカン酸から成る群から選ばれる。本発明の他の態様では、医療的に有効量の両親媒性カルボキシレートを投与することを含む、症状−Ｘの処置法を提供する。好ましい実施態様では、症状−Ｘを含む各疾患を個別に処置する。本発明の他の態様では、ＨＮＦ−４α活性の調節方法を提供する。さらに他の態様では、医療的に有効量の両親媒性カルボキシレートを投与することを含む、疾患あるいは症状の処置法を提供する。各種疾患、例えば、胸部癌、結腸癌、前立腺癌を、この発明的方法を用いて処置することｔができる。図面の簡単な説明図１は、長鎖アシル−ＣｏＡが、ＨＮＦ−４αに対する配位子であることを示す。このＧＳＴ−ＨＮＦ−４α（ＬＢＤ）縮合たんぱく質（１）は、グルタチオン−Ｓトランスフェラーゼに縮合したＨＮＦ−４α（ＬＢＤ）からなる。このＨｉｓ−ＨＮＦ−４α（ｎ）は、６ヒスチジンが付加した完全長のＨＮＦ−４αからなる。ａ．パルミトイル(16:0)-ＣｏＡに対する飽和結合曲線。各組替え体たんぱく質を、［³Ｈ］パルミトイル(16:0)-ＣｏＡ（0.05μＣｉ）と平衡に達するまで、かつ、非標識化パルミトイル(16:0)-ＣｏＡを図示のように増加させながら、インキュベートした。2.6μＭの解離恒数（Ｋｄ）、および、１モルのパルミトイル( 16:0)-ＣｏＡ／ＨＮＦ−４αモルの最大結合は、Scatchard分析により測定した。ｂ．ミリストイル(14:0)-ＣｏＡによる競合。各組替え体たんぱく質を、８ｎＭの［³Ｈ］パルミトイル(16:0)-ＣｏＡ（60Ci/mmol）と、非標識化ミリストイル (14:0)-ＣｏＡを図示どおり増加させながらインキュベートした。結合百分率は、結合フラクション中の放射線標識化［³Ｈ］パルミトイル(16:0)-ＣｏＡを表す。0.3pmolの［³Ｈ］パルミトイル(16:0)-ＣｏＡへの100％結合量。ＥＣ₅₀（50％特異的競合）は、ミリストイル(14:0)-ＣｏＡの1.4μＭ（1.2−1.5μＭにわたる）と測定された。他の脂肪族アシル-ＣｏＡおよび異種生物性アシル-ＣｏＡのＥＣ₅₀は下記の通りである。ドデカノイル(12:0)ＣｏＡ２.３μＭ(範囲２.１-２.４μＭ); パルミトイル(16:0)-ＣｏＡ２.６μＭ(範囲１.３-３.４μＭ); ステアロイル(18:0)-ＣｏＡ２.７μＭ(範囲２.１-３.３μＭ); オレオイル(18:1)-ＣｏＡ１.４μＭ(範囲１.０-１.８μＭ); リノレオイル(18:2)-ＣｏＡ１.９μＭ(範囲１.５-２.３μＭ); リノレノイル(18:3)-ＣｏＡ２.９μＭ(範囲２.９-３.８μＭ); エイコサペンタエノイル(20:5)-ＣｏＡ０.６μＭ(範囲０.５-０.７μＭ); ドコサヘキサエノイル(22:6)-ＣｏＡ１.６μＭ(範囲０.６-２.７μＭ)． 3,3,16,16-テトラメチル-オクタデカン８μＭ（範囲５-15μＭ）ジオール酸 3,3,14,14-テトラメチル−ヘキサデカン８μＭ（範囲５-15μＭ）ジオール酸 3,3,12,12-テトラメチル−テトラデカン４０μＭジオール酸ベザフィブラート９０μＭナフェノピン９０μＭイブプロフェン４０μＭ図２．ＨＮＦ−４αの脂肪族アシル-ＣｏＡ配位子が、その同種ＤＮＡエンハンサーへの結合を調節することを示す。ａ．無添加（レーン１）、または、ミリストイル(14:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン２）またはパルミトイル(16:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン３）における、Ｃ３ＰへのHis-HNF-4α（14ng）の結合。ｂ．無添加（レーン１）、または、ステアロイル(18:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン２）またはリノレノイル(18:3、w-3)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン３）における、Ｃ３ＰへのHis-HNF-4α（20ng）の結合。ｃ．ミリストイル(14:0)-ＣｏＡの濃度を増加させることによる、Ｃ３Ｐへ結合しているHis-HNF-4α（14ng）の活性化。His-HNF-4α（14ng）の二量体に結合している放射線標識化Ｃ３Ｐを含有するゲル部分を示す。図３．長鎖脂肪族アシル−ＣｏＡによる、インビトロでのＨＮＦ−４α転写活性の調節を示す。ａ．図示どおりHis-HNF-4αの濃度を増加させながら、かつ、無添加（レーン１ −３，７−９）、または、パルミトイル(16:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン４−６）またはステアロイル(18:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（レーン10、11）の試験テンプレート、のインビトロでの転写を示す代表的実験。試験および対照テｂ．無添加（空白バー）での、またはパルミトイル(16:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（塗潰しバー）、またはステアロイル(18:0)-ＣｏＡの10μＭ存在下（斜線バー）下での、各ＨＮＦ−４α−誘発インビトロ転写。折り返し転写は、対照テンプレートからの転写物に対する試験テンプレートにより得られた特異的転写物の比率が、ＨＮＦ−４αが存在しない場合に観察される比率まで正常化したことを示している。図は、各アシル-ＣｏＡについての独立５実験を要約したものである。^*−各添加配位子が存在しないときの値と比較しての意味。図４．一時的形質転換アッセイにおける、長鎖脂肪酸と異種生物性両親媒性カルボキシレートとによる、ＨＮＦ−４α活性の調節を示す。ａ．長鎖脂肪酸によるＨＮＦ−４α調節。形質転換したＨＮＦ−４αによるＣＡＴ活性の折返し誘導を、ｐＳＧ５プラスミドと比較して、並びに、図示した培地に添加した各脂肪酸の関数として、ｐＳＧ５−ＨＮＦ−４α存在下のＣＡＴ活性を評価することにより測定した。図は、各脂肪酸に対し３−４の独立実験を要約したものである。平均±S.E．ｂ．異種生物性両親媒性カルボン酸によるＨＮＦ−４αサプレッション。折返し誘導は、添加プロリガンド不存在下にインキュベートしたときの細胞中での活性まで正常化した、3、3、12、12、−テトラメチル−テトラデカンジオイック酸（●）、3、3、14、14−テトラメチル−ヘキサデカンジオイック酸（■）および 3、3、16、16−テトラメチル−オクタデカンジオイック酸（▲）プロリガンド類と一緒にインキュベートした細胞中のＣＡＴ活性を意味する。上記及び他の異種生物リガンド類のＥＣ₅₀は以下のとおりである。 3,3,12,12-テトラメチル-テトラデカンジオール酸＞３００μＭ 3,3,14,14-テトラメチル-ヘキサデカンジオール酸１５５μＭ 3,3,16,16-テトラメチル-オクタデカンジオール酸１５０μＭ 2,2,13,13-テトラメチル-テトラデカンジオール酸２３０μＭ 2,2,15,15-テトラメチル-ヘキサデカンジオール酸１５０μＭ 2,2,17,17-テトラメチル-オクタデカンジオール酸１５０μＭ 4,4,13,13-テトラメチル-ヘキサデカンジオール酸１５０μＭ 4,4,15,15-テトラメチル-オクタデカンジオール酸１５０μＭベザフィブラート２６０μＭナフェノピン１６０μＭイブプロフェン１３０μＭ発明の詳細な説明長鎖脂肪酸が、ＨＮＦ−４α配位子が結合しているドメインに各脂肪族アシル −ＣｏＡチオエステルを結合させることにより、ＨＮＦ−４αの転写活性を直接調節することが、本書中に示されている。ＨＮＦ−４α作動性または拮抗性アシル−ＣｏＡ配位子による転写調節は、二種の明らかに独立した配位子−誘発効果、即ち、ＨＮＦ−４αオリゴマー性−二量体平衡がシフトすること、あるいは、ＨＮＦ−４α二量体の固有結合親和力がその同族エンハンサーに影響すること、に由来するものであり得る。本書中では、以下の用語は下記意味を有するものとする。用語“両親媒性カルボキシレート”は、疎水性主鎖とカルボキシル官能基を有する化合物を意味する。用語“異種生物性”は、哺乳動物の中間代謝に異種のものである化合物を意味する。用語“症状Ｘ”とは、下記疾患−１）異リポ蛋白血症（高コレステロール血症 −高トリグリセリド血症、低ＨＤＬ−コレステロール症と合併した）、２）肥満（殊に、上体肥満）、３）非インシュリン−依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）を起こすグルコース耐性（ＩＧＴ）不全、４）本態性高血圧、および５）血栓形成／繊維素溶解不全性疾患、の幾つかあるいは全てを含む症状を意味する。用語“調節する”とは、ＨＮＦ−４α活性を明白に増加または減少させることのいずれかを意味する。ＨＮＦ−４αの調節は、直接、即ちＨＮＦ−４αとの結合、または間接、即ち、例えば、キナーゼ活性のような他の経路を介しての結合を指すものであり得る。ＨＮＦ−４αに結合する本発明の化合物は、鎖長および／または飽和の程度の機能として、その同族性エンハンサーへの結合を活性化もしくは阻害するもののいずれかであり得る。症状Ｘを処置する方法は、本発明によって企図されるものである。それらの方法は、天然のまたは異種生物性両親媒性カルボキシレートを投与することを含むものである。ＨＮＦ−４α転写活性の阻害方法としては、さらい、アンチセンスによる抑制、抗体による抑制、または、ＨＮＦ−４αの余分な活性を減少させる他の如何なる方法も企図される。実施方法ＨＮＦ-４α組換え体タンパク質ラットＨＮＦ−４α1ｃＤＮＡ(ｐＬＥＮ４Ｓ)¹を、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ(ＧＳＴ)をコードするｐＧＥＸ-２Ｔプラスミド(Pharmacia)中にサブクローン化し、得られたプラスミドをsmalおよびAcclで開裂させ、再ライゲートさせてＧＳＴ-ＨＮＦ-４α(ＬＢＤ)融合プラスミドを得た。この融合プラスミドを、E.coli ＢＬ２１(ＤＥ３)株中で、0.2mM ＩＰＴＧ誘導で６０分間発現させ、生成物を、グルタチオン-アガロースビーズ(Sigma)を使用するアフィニティークロマトグラフィーで精製し、ＧＳＴと融合した野生型ＨＮＦ-４αのアミノ酸９６-４５５からなるＧＳＴ-ＨＮＦ-４α(ＬＢＤ)融合タンパク質を得た。6Ｈｉｓ-ｐＥＴ１１ｄベクター中に全長クローン化したＨＮＦ-４α1ｃＤＮＡを、 E.coli ＢＬ２１(ＤＥ３)plyS中で発現させた。リガンド(配位子)結合アッセイ組換え体ＧＳＴ-ＨＮＦ-４α(ＬＢＤ)(100pmol)またはＨｉｓ-ＨＮＦ-４α(10 0pmol)を、[³H]パルミトイル(16:0)-CoA(American RadiolabeledChemicals)を含む１０mMホスフェート緩衝液（pH7.4）１００μl中で、２２℃で６０分間インキュベートした。拮抗体リガンドまたは溶媒担体を指示どおりに加えた。遊離およびＨＮＦ-４αに結合した³[H]パルミトイル(16:0)-ＣｏＡを、Ｄｏｗｅｘ被覆チャーコールで分離し、結合したリガンドを液体シンチレーションカウントで定量した。関連のないタンパク質として、[３Ｈ]パルミトイル(16:0)-ＣｏＡの非特定結合を、ＧＳＴ部分または炭酸脱水酵素への結合で測定した。ゲル移動性シフトアッセイＨｉｓ-ＨＮＦ-４αおよびアシル-ＣｏＡ(上述)を、50mM ＫＣｌ、１mMジチオトレイトール、2.5mM ＭｇＣｌ₂、10%グリセロール、１μgポリ(ｄｌ-ｄＣ)を含む１１mM Ｈｅｐｅｓ(pH7.9)(全量２０μl)中で、２２℃、３０分間、プレインキュベートした。ヒトＣ３ＰアポＣIIIプロモーター配列(-87/-66)⁶からなる³² Ｐ標識化オリゴヌクレオチド(0.1ng)を加え、さらに１５分間インキュベーションを続けた。タンパク質-ＤＮＡ錯体を、0.6×ＴＢＥ中、５%非変性ポリアシルアミドゲルに再溶解し、蛍光イメージ分析で定量した。インビトロ転写アッセイ反応混合物に、20mM Ｈｅｐｅｓ-ＫＯＨ(pH7.9)、５mM ＭｇＣｌ₂、60mM ＫＣＬ、8%グリセロール、２mM ＤＴＴ、１mM 3'-0-メチル-ＧＴＰ、Ｔ1リボヌクレアーゼ１０単位、RNasin ２０単位、超音波処理したサケ精子ＤＮＡ０．５ugおよびＨｉｓ-ＨＮＦ-４αおよび指示したとおり試験リガンドを加えた。この混合物はさらに２２℃で３０分間、プレインキュベートし、次いで２００塩基対Ｇ欠損カセットとリンクしたアデノウイルス主後方プロモーター（-400/+10）からなるｐＡｄＭＬ200対照テンプレート１０ng、および、３７７塩基対Ｇ欠損カセット前方の合成卵白アルブミンTATA boxプロモーター上流のアポＣIIIプロモーター配列(-87/66)の３つのＣ3Pコピーからなる試験テンプレート２００ngを加え、混合物を更に２２℃で１０分間プレインキュベートし、次いでさらにHeLa 核抽出物４０μgを加え、さらに３０℃で３０分間、プレインキュベーションした。０.５mM ＡＴＰ、０.５mM ＣＴＰ、２５μM ＵＴＰ、および[α-³²Ｐ]ＵＴＰ１０μCi(s.a．８００Ci/mol、Amersham)を加え、最終容量２５μl中で、反応混合物を、３０℃で４５分間、インキュベートした。反応物に、停止混合物（０.１M酢酸ナトリウム(pH5.2)、１０mM ＥＤＴＡ、０.１% ＳＤＳ、２００μg/m l ｔＲＮＡ）１７５plを加えて反応を終了させ、次いでフェノール抽出およびエタノール析出を行なった。80%ホルムアミドおよび10mM Tris-ＨＣＬ(pH7.4)を含む試験緩衝液中にＲＮＡを再懸濁させ、ＴＢＥ中に７M尿素を含む５%ポリアクリルアミドゲル上で分離した。正確に開始させた転写物を、蛍光イメージ分析で定量した。テンプレートとして(Ｃ3Ｐ)３ＴＫ-ＣＡＴプラスミドを使用して調製し、5'および3'末端にそれぞれECoR1およびSSTI部位を有するアポＣIIIプロモーター配列(-87/-66)のＣ3Ｐ成分の3つのコピーからなる、ＰＣＲ−増幅オリゴヌクレオチドを、ｐＣ₂ＡＴ１９プラスミド中に挿入して、試験ＤＮＡテンプレートを構成させた。得られたプラスミドをsphlおよびsaclで開裂させ、ＨＳＶチミジンキナーゼプロモーター(-41/-29)およびニワトリ卵白アルブミンプロモーター( -33/-21)の(5'-CGAGGTCCACTTCGCTATATATTCCCCGAGCT-3')を含有する合成オリゴヌクレオチドにライゲートさせた。形質移入アッセイ (Ｃ３Ｐ)₃-TK-CATレポータープラスミド(５μg)および、ｐＳＧ５-ＨＮＦ-４ α発現プラスミド(０.０２５μg)またはｐＳＧ５プラスミド(０.０２５μg)のどちらかで、６時間、同時形質移入させ、カルシウムホスフェート沈殿を加えたＣＯＳ-7細胞を、(モル比６:１でアルブミンと錯体化した)脂肪酸を加えた無血清培地で、指示どおり培養した。各沈殿に加えたβ-ガラクトシダーゼ発現ベクターｐＲＳＧＡＬ(1μg)を、形質移入の内部対照とした。(Ｃ３Ｐ)₃-TK-CAT構成は、ｐＢＬＣＡＴ２⁴⁷中のＨｉｎｄIII制限部位に隣接した(-87/-66)アポＣIIIプロモーター配列(5'-GCAGGTGACCTTTGCCCAGCGCC-3')を包囲する合成オリゴヌクレオチドを、-１０５塩基対チミジンキナーゼプロモーターの上流に挿入して調製した。直列配位の合成オリゴヌクレオチドの３つのコピーを含む構成を選択し、配列確認した。脂肪族アシル-ＣｏＡ類乾燥アセトニトリル中に溶かした遊離酸を1,1'-カルボジイミダゾールと反応させて、脂肪族アシルＣｏＡ類を調製した。この反応混合物を蒸発乾固させ、各アシルイミダゾール複合物を、1:1 ＴＨＦ:Ｈ₂Ｏに溶かした１当量の還元ＣｏＡと反応させた。反応は、シリカ６０Ｈプレート(Merck)（ブタノール:酢酸:Ｈ₂Ｏ５:２:３)を使用したＴＬＣで追跡した。このアシル-ＣｏＡ誘導体を０.１M ＨＣｌで沈殿させ、この沈殿を０.１M ＨＣｌで３回、パーオキシドを含まないエーテルで３回、アセトンで３回洗浄した。このアシル-ＣｏＡを、分光光度法で２６０/２３２nm比により測定した。実施例さらに本発明およびその利点を例示説明するために、以下に特定の実施例を示すが、それらは例示説明のみを意図したものであり、いかなる意味においても限定するものでない。実施例１長鎖アシル-ＣｏＡ類はＨＮＦ-４αのリガンドである様々な鎖長および飽和度のアシル-ＣｏＡがＨＮＦ-４αに特異的に結合することが分かった。この結合は、グルタチオン-s-トランスフェラーゼ(ＧＳＴ-ＨＮＦ-４α(ＬＢＤ))または６ヒスチジンで標識化したＨＮＦ-４α全長タンパク質( Ｈｉｓ-ＨＮＦ-４α)と融合したＨＮＦ-４αのどちらかのリガンド結合領域で、例証した。リガンド結合領域またはＨＮＦ-４α全長タンパク質とのパルミトイル(16:0)-ＣｏＡ結合は、２.６μMのＫｄまで飽和でき、ＨＮＦ-４αの脂肪族アシルＣｏＡ/モル１モルの割合の飽和まで近づけた(図．1A)。結合は、遊離脂肪酸または遊離ＣｏＡが不活性であるアシル-ＣｏＡに特異的であった。様々な鎖長および飽和度のアシル-ＣｏＡの結合は、組換え体ＧＳＴ-ＨＮＦ４α(ＬＢＤ) またはＨｉｓ-ＨＮＦ-４αと結合した放射性標識化パルミトイル(16:0)-ＣｏＡと競合させて、実証した(図１Ｂ)。Ｃ１２より短い鎖長の飽和脂肪族アシルＣｏＡでは、結合を検出できなかった。しかし、長鎖脂肪族アシルＣｏＡのＨＮＦ- ４αに対する結合親和性は、実質上、０.５〜３.０μMの範囲では、目的リガンドの鎖長または飽和度に影響されない。さらに、長鎖脂肪族アシルＣｏＡのＨＮＦ-４αへの結合特異性は、パルミトイル(16:0)-ＣｏＡの組換え体ヒスチジン標識化ペルオキシソーム増殖ファクター活性化レセプターα(Ｈｉｓ-ＰＰＡＲα) への推定結合で分析して実証した。ＨＮＦ-４αと異なり、長鎖脂肪族アシルＣｏＡは、ＰＰＡＲαまたはレチノイン酸Ｘレセプターα(ＲＸＲα)によって結合されなかった。これらの結果は、天然長鎖脂肪族アシルＣｏＡは、ＨＮＦ-４α のリガンド結合領域と結合し、このタンパク質の特異的リガンドとして働き得ることを示す。アシル-ＣｏＡのＨＮＦ-４αへの結合は、例示した天然脂肪族アシルＣｏＡに限られるものではない。従って、異種生物性アシル-ＣｏＡ(ＲＣＯＳＣｏＡ)とでも結合を観察し得る。但し、Ｒは、炭素原子１０−２４の飽和または不飽和アルキル鎖からなる基であり、該炭素原子の一つまたはそれ以上がヘテロ原子で置換されていてもよく、該炭素またはヘテロ原子鎖メンバーの一つまたはそれ以上が、所望により環の一部を構成しており、該鎖は所望により置換されていてもよい。(図１Ｂ)。実施例２長鎖アシル-ＣｏＡ類によるＨＮＦ-４α活性の調節アポＣIIIプロモーター配列(-87/-66)⁶同種Ｃ３Ｐ要素へのＨＮＦ-４αの結合を、様々な鎖長、飽和度、置換度のアシル-ＣｏＡを添加して、または添加せずに研究することにより、長鎖アシル-ＣｏＡ結合の機能としてのＨＮＦ-４α活性を評価する。結合は、ゲル移動性シフトアッセイを使用して実証した。図２に示したように、ＨＮＦ-４αへのＣ３Ｐ結合は、Ｈｉｓ-ＨＮＦ-４α濃度の増加にともなって増加し、Ｃ１２−Ｃ１６の鎖長の天然飽和脂肪族アシルＣｏＡによって活性化された。活性化は濃度依存性であり、ＨＮＦ-４αへの結合で必要な濃度範囲内で、ミリストイル(１４:０)-ＣｏＡを加えたときが最大であった。さらに、異種生物体のアシル-ＣｏＡと同様に、数種の脂肪族アシルＣｏＡも、ＨＮＦ-４αの真正アンタゴニストとして働くこと、即ち、同種のエンハンサーへの本質的な結合を阻害することがわかった。従って、ＨＮＦ-４αを、ステアロイル(１８:０)-ＣｏＡまたはα-リノレノイル(１８:３)-ＣｏＡの存在下でインキュベートすると、Ｃ３Ｐオリゴヌクレオチドへの結合の強力な阻害を生じた(図２)。同様に、様々な異種生物体アシル-ＣｏＡの存在下でＨＮＦ-４α をインキュベートすると、同種のＣ３Ｐオリゴヌクレオチドへの結合の阻害を生じた。故に、ＨＮＦ-４αと結合する天然または異種生物体のアシル-ＣｏＡは、アンタゴニスト、部分的アンタゴニスト、または鎖長、飽和度および置換度の機能としての転写活性アンタゴニストとして働き得る。実施例３ＨＮＦ-４αアゴニストおよびアンタゴニストによるＨＮＦ-４α誘導転写の調節作動性および拮抗性ＨＮＦ-４α-配位子の効果を、インビトロでの転写速度、それは添加したＨｅＬａ核抽出物で触媒されるものであり、またＨＳＶチミジンキナーゼ配列およびニワトリ卵白アルブミンプロモーター配列によって促進されアポＣIII遺伝子プロモーターの３つのＣ３Ｐコピーで増強された３７７塩基対Ｇ欠損カセット、からなる試験テンプレートの組換え体ＨＮＦ４αによって誘発されるものである、の分析により評価した。ＨＮＦ-４αによる転写活性化は、典型的な長鎖脂肪族アシルＣｏＡを添加してまたは添加しないで評価した。アデノウイルス主要遅延(ＡｄＭＬ)プロモーター由来の２００塩基対Ｇ欠損カセットからなり、ＨＮＦ-４αエンハンサーを含まないテンプレートの転写を、内部対照テンプレートとして使用した。図３に示すとおり、試験テンプレートのインビトロ転写は、ＨＮＦ-４αの関数として増加し、２００ngのＨＮＦ-４α濃度における飽和まで到達した。転写によって誘発されたＨＮＦ-４αは、パルミトイル( １６:０)-ＣｏＡの添加で活性化され、ステアロイル(１８:０)-ＣｏＡの添加で阻害された。それはゲル移動性シフトアッセイでＨＮＦ-４αアゴニストおよびアンタゴニストにより示される効果に従った。故に、ＨＮＦ-４αと結合するアシル-ＣｏＡは、細胞不存在系で、その転写活性を直接調節することができる。ＨＮＦ-４α媒介転写におけるＨＮＦ-４αリガンドの細胞内効果は、ＨＮＦ- ４αの発現ベクター、およびチミジンキナーゼプロモーターによって誘導されアポＣIII遺伝子プロモーターの１ないし３のＣ３Ｐコピーで増強されるＣＡＴレセプタープラスミドで同時形質移入した。ＣＯＳ-7細胞中で評価した。作動性または拮抗性ＨＮＦ-４αプロリガンドを代表する遊離脂肪酸および異種生物体の両親媒性カルボキシレートの存在下で、形質移入細胞をインキュベートした。図４ａに示すとおり、Ｃ3Ｐ-増強レセプタープラスミドの発現は、培地に脂肪酸を添加しないとき、ＨＮＦ-４αで７倍活性化された。形質移入したＨＮＦ-４αによる転写活性化は、非リガンド結合ＨＮＦ-４αダイマーの本質的な転写活性を示し得、または内因活性化性アシル-ＣｏＡのＨＮＦ-４αへの結合によってもたらされ得た。ミリスチン(１４:０)またはパルミチン(１６:０)酸を培地に加えると、ＨＮＦ-４α依存性転写の用量依存性活性化をもたらしたが、ステアリン(１８:０)、α-リノレン(１８:３)またはエイコサペンタエン(２０:５)酸は、ゲル移動性シフトアッセイ(図２)の、それぞれの脂肪族アシルＣｏＡの作動的または拮抗的活性に従って抑制的であり、細胞不存在転写アッセイ(図３)も同様であった。形質移入アッセイにおけるＨＮＦ-４α転写活性の阻害は、培地へ異種生物体両親媒性カルボキシレート(ＲＣＯＯＨ)が添加されているとき(図４ｂ)と同様に観察できる。但し、Ｒは、炭素原子１０−２４の飽和または不飽和アルキル鎖からなる基であり、該炭素原子の一つまたはそれ以上がヘテロ原子で置換されていてもよく、該炭素またはヘテロ原子鎖メンバーの一つまたはそれ以上が所望により環の一部を形成しており、該鎖は所望により、ヒドロカルビル基、ヘテロ環状基、低級アルキル、ヒドロキシル-置換低級アルキル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、フェニル、置換フェニル、Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルまたは置換Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルで置換されていてもよい。故に、細胞内ＨＮＦ-４α- 媒介発現は、異種生物体両親媒性カルボキシレートにより可能なそれらの各ＣｏＡチオエステル(ＲＣＯＳＣｏＡ)への内因性的変換と同様に、天然長鎖脂肪酸によって調節ざれ得る。高度に効果的な阻害性化合物は、以下の、Ｒがω−カルボキシルで置換されている：2,2,15,15-テトラメチル-ヘキサデカン-1,16-ジオール酸、2,2 ,17,17-テトラメチル-オクタデカン1,18-ジオール酸、3,3,14,14-テトラメチル- ヘキサデカン-1,16-ジオール酸、3,3,16,16-テトラメチル-オクタデカン-1,18- ジオール酸、4,4,13,13-テトラメチル-ヘキサデカン-1,16-ジオール酸、4,4,15, 15-テトラメチル-オクタデカン-1,18-ジオール酸である。効果的な化合物の他の群は、Ｒがω-ヒドロキシルで置換されている:16-ヒドロキシ-ヘキサデカン酸、 18-ヒドロキシ-オクタデカン酸、16-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-ヘキサデカン酸、18-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-オクタデカン酸、16-ヒドロキシ-3,3-ジメチル- ヘキサデカン酸、18-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-オクタデカン酸、16-ヒドロキシ -4,4-ジメチル-ヘキサデカン酸、18-ヒドロキシ4,4-ジメチル-オクタデカン酸である。さらに、やや効果の劣る化合物の他の群は、クロフィブリン酸の類縁体からなる化合物(フィブレート化合物)または非ステロイド性抗炎症薬からなる。全体的に発揮される効果は、核アシル-ＣｏＡの優勢な組成と、それぞれがＨＮＦ- ４αに結合したときに発揮する作動性/拮抗性効果とを反映する。実施例４生理学的適応性それぞれのＣｏＡチオエステルに内因性的に変換し得る天然または異種生物体の両親媒性カルボキシレートによる、ＨＮＦ-４α転写活性の阻害は、ＨＮＦ-４ α支配遺伝子の過発現によって開始および/または促進される疾患を処置する治療方法を提供するものである。ＨＮＦ-４αの転写活性阻害因子としての両親媒性カルボキシレートに関する作用は、最初の段階では、ＨＮＦ４αアンタゴニストとして作用する、それぞれのＣｏＡチオエステルの本質的な能力に依存する。現時点では、それぞれのＣｏＡチオエステルに内因性的に変換することができる両親媒性カルボキシレートが真のＨＮＦ-４αアンタゴニストであることの証明を予測することは不可能である。従って、ミリストイル(１４:０)-ＣｏＡまたはパルミトイル(１６:０)-ＣｏＡは、ＨＮＦ-４α転写活性のアクチベーターの活性化物質として証明されているが、そのシリーズの次の相同物、すなわちステアロイル(１８:０)-ＣｏＡは真のアンタゴニストとして証明されている。しかし、内因性ＨＮＦ-４αの強カアゴニストと置換するか、またはＨＮＦ-４αと結合するより生産性のアゴニストと競合するときは、部分的アゴニストもＨＮＦ４α活性の明瞭な阻害を誘発することが指摘される。両親媒性カルボキシレートのＨＮＦ-４α転写活性インヒビターとしてのインビボにおける全体的能力は、ＨＮＦ-４αアンタゴニストとして作用するそれぞれのＣｏＡチオエステルの本質的な能力を反映するだけでなく、さらに特定の細胞タイプおよび、優勢な核脂肪族アシルＣｏＡ化合物にも依存する。この組成は、各酸の食用性/薬理学的有効性プロファイルに影響され、また各ＣｏＡ-チオエステル化の有効性、アシル-ＣｏＡヒドロラーゼによる加水分解、脂質へのエステル化、生成物への酸化、伸長、不飽和化、または他のアシル-ＣｏＡ結合タンパク質への結合での各アシルＣｏＡの有効性によっても、同様に影響される。さらに、脂肪酸以外の、両親媒性カルボキシレートＣｏＡ-チオエステル化によて生じた内因性アシル-ＣｏＡ(例えば、レチノイン酸、プロスタグランジン、ロイコトリエン等)は、ＨＮＦ-４αと結合して、アゴニストまたはアンタゴニストとしての活性を調節し得た。さらに、生じる効果は、ＨＮＦ-４αのオリゴマー/ダイマー平衡に影響する核ファクターの添加、同種のエンハンサーへのＨＮＦ-４ α結合アフィニティー、またはＨＮＦ-４αと転写開始錯体タンパク質との間の相互作用にも依存し得る。特に、ＨＮＦ-４αとペルオキシソーム活性化物質活性化レセプター(ＰＰＡＲ)とは、同種のＤＲ-１配列を有するので、またＰＰＲＡは、それぞれのＣｏＡチオエステルよりもむしろ長鎖遊離脂肪酸によって活性化されるので、あるアシル-ＣｏＡにより発揮され、ＨＮＦ-４α媒介される効果は、それぞれの遊離酸によって活性化されたＰＰＡＲと類似するかまたはそれにより阻害ざれ得る。上記の不明があるにもかかわらず、本明細書中に例示したＨＮＦ-４αのアシル-ＣｏＡリガンドの作動性/拮抗性プロファイルは、インビボで食用性脂肪酸によって発揮され、ＨＮＦ-４αによって制御される数種の遺伝子と関係する効果のある分子実現の助けとなろう。食用性脂肪を構成する長鎖脂肪族アシルは、西洋食物におけるカロリー摂取量の３０−４０％を構成する。ほとんどがエネルギーを産出するために酸化されるか、または脂肪性脂質および細胞膜を産出するためにトリグリセリドおよびリン脂質をにエステル化する、それらの栄養的役割に加えて、脂肪酸の数種は、ガン⁷、アテローム発生⁸、異常リポタンパク質血症⁹ 、インシュリン抵抗^10,11、高血圧¹²、血液凝固および繊維欠損¹³、炎症、免疫欠損およびそのほかの疾患、の開始および進行の栄養学的調節物質として長年認識されている。これらの説明できなかった効果は、今や上記の病理学における、開始および進行に関与する遺伝子発現の調節をもたらすＨＮＦ-４α転写活性への各アシル-ＣｏＡによって発揮される効果によって説明できるものと理解できる。血液脂質および血液凝固で発揮される、食用性長鎖脂肪酸によるこの特異的の効果は、リポタンパク質代謝(アポリポたんぱく質ＡＩ、ＡII、ＡIV、Ｂ、ＣI II、ミクロソマルトリグリセリド転移たんぱく質)および血液凝固(ファクターIV 、IX、Ｘ)をコードする遺伝子へのＨＮＦ-４αによって発揮されるものとよく知られた効果であるという意味で価値がある。事実、一般的なＣ１２−Ｃ１６の食用性飽和脂肪酸による、および特にミリスチン酸によって引き起こされる血漿中のＶＬＤＬ−、ＬＤＬ−およびＨＤＬ−コレステロールのよく知られた増加は、各飽和アシル-ＣｏＡによって誘発され、Ｃ１２より短い脂肪族アシルＣｏＡによって発揮される効果の不在化により誘発され、ＨＮＦ-４α活性化に沿うものである。飽和ステアリン(１８:０)酸による血中脂質の驚くべき低下は、同様に、ＨＮＦ-４α活性でステアロイル(１８:０)-ＣｏＡによって発揮される拮抗的効果で説明されよう。同様に、飽和食用性脂肪酸の置換による、モノおよびポリ不飽和脂肪酸の脂質低下効果⁹は、飽和脂肪族アシルＣｏＡと比較して、モノまたはポリ不飽和体の活性に従い、リノレン(１８:３)-ＣｏＡ、エイコサペンタエン(２０:５)-ＣｏＡまたはドコサヘキサエノイル(２２:６)-ＣｏＡによるＨＮＦ -４αの直接阻害によって補われる。また、Ｃ１２−Ｃ１６の飽和食用性脂肪酸が誘発し、ファクターVIIの各増加と相関する血液凝固能の増加、並びにファクターVII含量および、食用性ステアリン(１８:０)酸によって特異的に誘発される血液凝固能の驚くべき各低下と同様に、ポリ不飽和食用性脂肪酸によって誘導された凝固能の減少も、同様に、ビタミンＫ依存性凝固ファクターをコードするＨＮＦ-４α-制御遺伝子の発現の調節をもたらす、ＨＮＦ-４α活性でそれぞれの脂肪族アシルＣｏＡ活性発揮される効果のためであり得る。さらに、内因性的に各ＣｏＡチオエステルにエステル化し得、ＨＮＦ-４αアンタゴニストまたはアゴニストとして働き得る、異種生物体両親媒性カルボキシレートによる、ＨＮＦ-４α-制御遺伝子の転写調節は、ＨＮＦ-４α-制御遺伝子の過発現により開始または促進される疾患の薬理学的治療方法を提供し得る。異種生物体置換両親媒性ジカルボキシレートにより提供される実施態様は、実験動物^14-17中で異常リポタンパク質血症、肥満、インシュリン抵抗およびアテローム性動脈硬化、すなわちこれらは、ＨＮＦ-４α-制御遺伝子の過発現に関する疾患であるが、進行を変化させる薬理学的作用に関する情報を蓄積させるという意味で価値がある。本発明の治療的効果は、本明細書中に例示したように、ＨＮＦ -４α転写活性の阻害により説明され得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/231 Ａ６１Ｋ 31/231 31/232 31/232 Ａ６１Ｐ 3/06 Ａ６１Ｐ 3/06 3/10 3/10 7/02 7/02 9/10 9/10 9/12 9/12 17/06 17/06 19/02 19/02 25/00 25/00 29/00 １０１ 29/00 １０１ 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．医療上有効量の式Ｒ−ＣＯＯＨの化合物、但し、式中Ｒは、炭素原子１０ −２４の飽和または不飽和のアルキル鎖を意味し、該炭素原子の一つまたはそれ以上がヘテロ原子で置換されていてもよく、所望により該炭素またはヘテロ原子鎖メンバーの一つまたはそれ以上が環の一部を構成しており、所望により該鎖はヒドロカルビル基、ヘテロシクリル基、低級アルコキシ、ヒドロキシル置換低級アルキル、ヒドロキシル、カルボキシル、ハロゲン、フェニルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル−または低級アルキニル）−置換フェニル、Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルまたは（ヒドロキシ−、低級アルキル−、低級アルコキシ−、低級アルケニル−または低級アルキニル）−置換Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキルで置換されており、該化合物は、それぞれの補酵素Ａチオエステル、ＲＣＯＳＣｏＡ、に生体内で転換され得るものである、または、該化合物の塩、エステルまたはアミドを含んでなる、医薬組成物。２．Ｒが、ω−カルボキシル、ω−ヒドロキシルボロン、およびω−ヒドロキシル鎖からなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の組成物。３．ＲＣＯＯＨが、クロフィブリン酸またはフィブリン酸、またはそれらの塩、エステル、アミド、または誘導体のいずれかである、請求項１に記載の組成物。４．ＲＣＯＯＨが、非ステロイド性坑炎症薬（ＮＳＡＩＤ）である、請求項１に記載の組成物。５．ＲＣＯＯＨが、長鎖脂肪酸である、請求項１に記載の組成物。６．脂肪酸が、ステアリン（18:0）酸オレイン（18：1）酸リノレイン（18：2）酸リノレイン（18:3）酸アイコサペンタエン（20：5）酸ドコサヘキサン（22：6）酸から選ばれるものである、請求項５に記載の組成物。７．有効性化合物が下記化合物、但し、式中Ｒがω−カルボキシルであり、そして、ＲＣＯＯＨが、 1、16−ヘキサデカンジオイック酸、 1、18−オクタデカンジオイック酸、 2、2、15、15−テトラメチル−ヘキサンデカン−1、16−ジオイック酸、 2，2，17，17−テトラメチル−オクタデカン−1、18−ジオイック酸、 3、3、14、14−テトラメチル−ヘキサデカン−1、16−ジオイック酸、 3、3、16、16−テトラメチル−オクタデカン−1、18−ジオイック酸、 4、4、13、13−テトラメチル−ヘキサデカン−1、16−ジオイック酸、および 4、4、15、15−テトラメチル−オクタデカン−1、18−ジオイック酸、からなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の組成物。８．Ｒがω−ヒドロキシボロンであり、そして、ＲＣＯＯＨが、 16−Ｂ(ＯＨ)２−ヘキサデカン酸、 18−Ｂ(ＯＨ)２−オクタデカン酸、 16−Ｂ(ＯＨ)２−2，2−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−Ｂ(ＯＨ)２−2，2−ジメチル−オクタデカン酸、 16−Ｂ(ＯＨ)２−3，3−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−Ｂ(ＯＨ)２−3，3−ジメチル−オクタデカン酸、 16−Ｂ(ＯＨ)２−4、4−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−Ｂ(ＯＨ)２−4、4−ジメチル−オクタデカン酸、からなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の組成物。９．Ｒがω−ヒドロキシであり、そして、ＲＣＯＯＨが、 16−ヒドロキシ−ヘキサデカン酸、 18−ヒドロキシ−オクタデカン酸、 16−ヒドロキシ−2，2−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−ヒドロキシ−2，2−ジメチル−オクタデカン酸、 16−ヒドロキシ−3、3−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−ヒドロキシ−3、3−ジメチル−オクタデカン酸、 16−ヒドロキシ−4、4−ジメチル−ヘキサデカン酸、 18−ヒドロキシ−4、4−ジメチル−オクタデカン酸、からなる群から選ばれるものである、請求項１に記載の組成物。 10．異リポ蛋白血症（高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、低ＨＤＬ−コレステロール症）処置用の、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 11．インシュリン抵抗性、グルコース耐性不全症、およびＮＩＤＤＭ処置用の、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 12．本態性高血圧症処置用の、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 13．血液凝固能低下用、または血液繊維素溶解増加用の、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 14．代謝性症状（症状−Ｘ）の処置用、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 15．アテローム性冠状または末梢動脈硬化症の処置用、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 16．リューマチ様関節炎、多発性硬化症、腸性乾癬または炎症の処置用、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 17．胸部癌、結腸癌、または、前立腺癌の処置用、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 18．局所使用用、請求項１ないし９のいずれかに記載の組成物。 19．ＨＮＦ−４制御転写を阻害する化合物を医療上有効量投与することを含んで成る、症状−Ｘ処置方法。 20．該化合物が、それぞれのＣｏＡチオエステルに転換され得る両親媒性カルボキシレートである、請求項19に記載の方法。 21．該両親媒性カルボキシレートが、異種生物性両親媒性カルボキシレートである、請求項20に記載の方法。 22．該化合物が、二量体−オリゴマー平衡をオリゴマーに有利な方向にシフトさせるものである、請求項19に記載の方法。 23．該化合物が、標的遺伝子に対するＨＮＦ−４二量体の結合親和性を減少させるものである、請求項19または28に記載の方法。 24．長鎖脂肪酸を医療上有効量投与することを含むものである、請求項19に記載の方法。 25．該両親媒性カルボキシレートが、不飽和脂肪酸である、請求項20に記載の方法。 26．該両親媒性カルボキシレートが、ポリ不飽和脂肪酸である、請求項20に記載の方法。 27．該両親媒性カルボキシレートが、炭素原子約１２−２４の脂肪酸である、請求項20に記載の方法。 28．両親媒性カルボキシレートを医療上有効量投与することを含んでなる、ＨＮＦ−４α転写活性の調節方法。 29．該調節が、ＨＮＦ−４活性の阻害である、請求項28に記載の方法。 30．該調節が、ＨＮＦ−４活性の活性化である、請求項28に記載の方法。 31．該両親媒性カルボキシレートが、Ｃ１８：３脂肪酸である、請求項20または28に記載の方法。 32．該両親媒性カルボキシレートが、Ｃ２０：５脂肪酸である、請求項20または28に記載の方法。 33．該両親媒性カルボキシレートが、それぞれのＣｏＡチオエステルに転換され得る脂肪酸である、請求項20または28に記載の方法。 34．アテローム性冠状または末梢動脈硬化症処置のための、請求項28に記載の方法。 35．リューマチ様関節炎、多発性硬化症、腸性乾癬または炎症処置のための、請求項28に記載の方法。 36．胸部癌、結腸癌、または、前立腺癌の処置処置のための、請求項28に記載の方法。