JP2002500648A

JP2002500648A - 反適応性の免疫応答、特に移植片拒絶を防ぐためのｃｄ４０：ｃｄ１５４結合妨害剤の使用

Info

Publication number: JP2002500648A
Application number: JP55047798A
Authority: JP
Inventors: カーク，アラン，デー; ハーラン，ディビッド，エム; トーマス，ディビッド; カウフマン，マイケル; バークリー，リンダ
Original assignee: バイオジェンインコーポレイテッド; ザユナイテッドステーツオブアメリカアズリプリゼンテッドバイザセクレタリーオブザネービーチーフオブナバルリサーチ
Priority date: 1997-05-17
Filing date: 1998-05-15
Publication date: 2002-01-08
Also published as: PL192521B1; HUP0003392A2; PL336994A1; US20070244053A1; AU735592B2; SK156099A3; EA199901046A1; BG64841B1; TR199902817T2; WO1998052606A1; EA002549B1; BR9809641A; EE9900528A; US20020119150A1; IS5247A; KR20010012671A; CN1261284A; NO995617L; CA2291156A1; NO995617D0

Abstract

(57)【要約】本明細書中に開示される組成物および方法は、組織移植片の拒絶が、CD40:CD154結合妨害剤を、単独で、または別の免疫調節剤もしくは免疫抑制剤と組合わせてのいずれかで使用して、阻害され得るという発見を利用する。有利な、相乗的な組合わせとしては、CD40:CD154結合妨害剤およびCD28シグナル伝達妨害剤が挙げられる。例示的なCD40:CD154結合妨害剤は、5c8モノクローナル抗体の抗原特異的結合特徴を有する抗体のような、抗CD154モノクローナル抗体である。例示的なCD28シグナル伝達妨害剤は、CTLA4-Ig融合タンパク質である。開示される組成物および方法は、予期されなかったことに、受容者宿主において移植された組織の生存を延長するために、急性の移植片拒絶を逆転するために、および移植された組織の不全の免疫学的結果を減弱するために、使用され得る。

Description

【発明の詳細な説明】反適応性の免疫応答、特に移植片拒絶を防ぐための CD40:CD154結合妨害剤の使用関連出願本出願は、1997年５月17日に出願された先行の米国仮特許出願第60/046,791号および1997年６月11日に出願された先行の米国仮特許出願第60/049,389号の一部係属出願として、1998年５月12日に出願された米国仮特許出願（Docket No.A053 P；Express Mail Label No．EM046582947US）の一部係属出願である。全ての３つのより早くに出願された仮特許出願の教示は、本明細書中に参考として援用される。発明の分野本発明は、概して、望ましくない免疫応答の抑制に関し、詳細には、反適応性のＴリンパ球媒介性の免疫応答に関する。本発明は、特に、受容者宿主における移植された組織または移植された器官の、免疫系駆動性の拒絶の防止、処置、抑制、または逆転に関する。発明の背景遺伝的に同一でない個体間の器官移植は、拒絶プロセスが、Ｔ細胞機能を抑制する薬物を投与することによって抑制されない限り、Ｔ細胞依存性の機構を介する器官の免疫学的拒絶を必ず生じる。いくつかの米国特許は、移植片拒絶を阻害するためのこのような免疫抑制薬物の使用を開示し、米国特許第5,104,858号；同第5,008,246号；および同第5,068,323号を含む。他の従来の薬剤は、Suthanth iranら（1994）、331 New Eng ．Med．J．365-376において記載される。カルシニュリンホスファターゼインヒビターおよびグルココルチコステロイドの両方は、臨床学的に使用され、ならびに両方は、活性化サイトカイン（特に、IL-2）のＴ細胞媒介性の放出を防止する。しかし、これらのタイプの従来の薬剤での処置は、不完全なままである。両方のタイプは、Ｔ細胞抗原レセプター（TCR）、Ｔ細胞抗原特異性の唯一のメディエーターを介するシグナル伝達を損なうことによって作用し、および全てのＴ細胞に対して無差別に作用する。さらに、これらの薬物の効果は、永続せず、処置の休止は一般に、移植片喪失を生じる。従って、移植片の生存可能な、機能的な取込みを維持するために、移植片受容者は、長期の、非特異的な免疫抑制の結果を受けなくてはならない。これらの結果は、完全および悪性腫瘍の増加された危険性、ならびにかなりの出費および毒性を含む。従って、移植片受容者についての、改善されたより有効な免疫抑制または免疫調節の処置についての必要性が存在する。特に、pan-Ｔ細胞免疫抑制を必要としない処置（すなわち、受容者を悪性腫瘍または日和見感染に脆弱なままにしない処置）についての必要性が存在する。より明白に、現在利用可能な治療学的薬剤よりも少ない毒性を有する処置についての必要性がある。同様に、移植片の機能的な取込み（すなわち、処置の過程の終了を超えて存続する取込み）を促進する処置についての必要性がある。発明の要旨本発明の目的は、pan-Ｔ細胞免疫抑制についての必要性を伴わずに、反適応性のＴ細胞応答を軽減する免疫調節剤を提供することである。別の目的は、受容者宿主における組織移植片の機能的な取込みを促進する免疫調節剤を提供することである。別の目的は、移植片組織の免疫学的拒絶を阻害する免疫調節剤を提供することである。さらなる目的は、活性化Ｔ細胞の同時刺激性のシグナルの送達を妨げる免疫調節剤を提供することである。特定の目的は、治療における使用のための、特に、移植された組織の免疫学的拒絶を軽減または遅延するための治療における使用のための、CD40:CD154結合妨害剤を提供することである。別の特定の目的は、別の免疫抑制剤または免疫調節剤と組合わせたCD40:CD154結合妨害剤の使用に基づく、反適応性のＴ細胞媒介性の免疫応答を軽減するための、治療学的組成物および処置レジメを提供することである。従って、本発明の特定の目的は、CD28を介する同時刺激をブロックする薬剤と組合わせたCD40:CD154結合妨害剤の使用に基づく、治療学的組成物および処置レジメを提供することである。本発明のより一般的な目的は、移植された組織の不全または急性の拒絶を、阻害する、軽減する、減弱する、遅延する、または逆転するための治療学的組成物および処置レジメを提供することである。本発明の別の一般的な目的は、受容者宿主への同種または異種組織の機能的な取込みを許容する免疫調節組成物を提供することによって、組織移植片の利用能を改善することである。なおさらなる一般的な目的は、反適応性の免疫応答（Ｔリンパ球媒介性の自己免疫疾病（例えば、インスリン依存性糖尿病、多発性硬化症など）を含む）およびアレルギー性疾病を含む反適応性の免疫応答から生じる疾患の状態を、防止、軽減、減弱、または処置することである。本発明は、CD40:CD154結合妨害剤の、単独でのまたは他の免疫調節剤と組合わせての使用が、受容者の免疫系のpan-抑制についての必要を伴うことなく、受容者宿主における移植された組織の反適応性の免疫応答拒絶を、減弱、抑制、防止、遅延、または逆転するという発見に向けられる。従って、本発明は、移植された組織の受容者についての免疫調節治療のための方法および組成物を提供する。第１の方法は、CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤で移植片受容者を処置することによって、移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害する。本発明の結合妨害剤は、対応のまたは同族のレセプター（ここでは、CD40）への、同時刺激性因子（ここでは、CD40リガンド、また、5c8抗原として本明細書中で言及される；CD40L、CD154およびまた、gp39として当該分野において言及される）の結合を妨げる任意の薬剤である。好ましくは、結合妨害剤は、抗CD40L化合物であり、これによって、CD40L（CD154）に結合し、それによって、CD40に結合するCD40Lの能力を、ブロックするか、妨げるか、または中断する化合物が意味される。例示的な抗CD40L化合物は、モノクローナル抗体、特に、米国特許第5,474,771号（この教示は、本明細書中に参考として援用される）において開示される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有する抗体である。第２の方法は、CD40:CD154結合妨害剤で、好ましくは、抗CD40Lモノクローナル抗体で、移植片受容者を処置することによって、移植片受容者における組織移植片の生存を延長する。第３の方法は、CD40:CD154結合妨害剤で、好ましくは、抗CD40Lモノクローナル抗体で、移植片受容者を処置することによって、移植された組織の不全の免疫学的な合併症を低減する。すなわち、方法は、このような免疫学的な合併症を、阻害、陽性、軽減、または検出可能に減少する。特に、方法は、間質性線維症、慢性移植片アテローム性動脈硬化症、脈管炎のような合併症を回避または軽減する。従って、上述の方法は、移植された組織の急性および／または慢性の拒絶の処置のために効果的であり、ならびに術後の処置のために、または受容者の生存期間の任意の時間で、移植片拒絶を逆転または抑制するために、予防的に使用され得る。例示的な方法は、術後２、４、６、８、12、16、および28日目での、CD40 :CD154結合妨害剤の投与を包含する。より一般的には、本明細書中に記載される方法は、少なくとも２または３週間にわたって所望の間隔（毎日、週２回、週１回、２週間に１回）での結合妨害剤の投与を包含する。投与スケジュールは、反適応性免疫応答の徴候（特に、移植片拒絶の徴候）の検出可能な減少を生成するために必要とされるように調整される。本発明の処置レジメは、移植片拒絶のその後の発症の事象において反復され得る。結合妨害剤が抗CD40Lモノクローナル抗体である実施態様において、妨害剤は、約５mg/kg体重と約20mg/kg体重との間の用量で、投与される。処置のために、CD40:CD154結合妨害剤は、薬学的に受容可能なキャリア中に分散される結合妨害剤の治療学的に有効な量を含む治療学的組成物中に処方され得る。いくつかの実施態様において、治療学的組成物はまた、別の免疫抑制または免疫調節の化合物（CD28を介するＴ細胞同時刺激性のシグナル伝達を妨げる薬剤（例えば、CTLA4Ig）；カルシニュリンシグナル伝達を妨げる薬剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス（以前は、FK506として知られた）のようなマクロライド；コルチコステロイド；または抗増殖剤（例えば、アザチオプリン）を含むがこれらに制限されない）の治療学的に有効な量を含む。本発明のCD40:CD154 結合妨害剤との使用のために適切な他の治療学的に有効な化合物としては、シロリムス（sirolimus）（以前は、ラパマイシンとして知られた）、ミコフェノレートモフェチル（mycophenolate mofetil）（MMF）、ミゾリビン（mizoribine）、デオキシスペルグアリン、ブレキナーナトリウム、レフルノミド、およびアザスピランなどが挙げられる。本発明の方法および組成物は、移植手順の全てのタイプでの使用に適切である。従って、本発明は、移植片受容者（受容者宿主）が、哺乳動物、好ましくは霊長類、最も好ましくはヒトである場合の使用に適切である。移植片ドナーは、移植片受容者と同じ系統学的な種の非同系メンバー（すなわち、同種ドナー、同種移植片組織を提供する）、または異なる系統学的な種のメンバー（すなわち、異種ドナー、異種移植片組織を提供する）であり得る。異種ドナーが、移植片組織の供給源として使用される場合、好ましくは、ドナーは、受容者宿主と比較的MHC- 適合性であり；例えば、ヒヒまたはチンパンジーは、ヒトに組織を移植するためのドナーとして好ましい。本発明は、ドナー（移植片）組織が完全な器官、器官もしくは組織の切片もしくは部分、または単離された細胞であるかに関わらず１任意の体組織または器官型の移植を促進するために使用され得る。適切な組織の制限されない例としては、腎臓、肝臓、心臓、膵臓（例えば、島）、皮膚、脈管、神経、骨、および軟骨などの哺乳動物体組織が挙げられる。本明細書中に開示されるように、本発明の原理は、関連の前臨床のモデルにおいて試験することによって確証された。例示的なCD40:CD154結合妨害剤（抗CD40 Lモノクローナル抗体5c8）は、単独で、または他の例示的な免疫調節剤（CD28結合妨害剤CTLA4-Ig；ミコフェノレートモフェチル；コルチコステロイド；タクロリムス）と組合わせて、インビトロでアカゲザルの抹消血白血球に対して、および主に血管新生化された腎臓同種移植片で移植されたアカゲザルにおいて、試験された。本発明の上述のおよび他の目的、特徴、および利点、ならびに本発明自体は、好ましい実施態様の以下の記載からより十分に理解される。発明の詳細な説明Ｔ細胞活性が、TCR媒介性のシグナルおよび同時に送達される同時刺激性のシグナルの両方を必要とするということを確立するデーターが、過去20年間にわたって蓄積されてきた。例えば、タンパク質抗原に応答してＢリンパ球によって産生される抗体は、Ｔリンパ球との特異的な、同時刺激性の相互作用を必要とする。このＢ細胞／Ｔ細胞相互作用は、TCRの従事に加えて、いくつかのレセプター- リガンド結合事象を介して媒介される。これらのさらなる結合事象は、Ｔ細胞におけるCD154（CD40L）への、Ｂ細胞におけるCD40の結合を含む。ヒトCD40は、成熟Ｂ細胞、ならびにマクロファージおよび活性化された上皮細胞において発現される、50kDの細胞表面タンパク質である。CD40は、プログラム細胞死に関与するレセプター（Fas/CD95および腫瘍壊死因子（TNF）αレセプターを含む）のクラスに属する。ヒトCD154（CD40L）は、32kD II型膜糖タンパク質であり、活性化Ｔ細胞において主に一過的に発現されるTNFαに相同性を示す。CD40:CD154結合は、全てのＴ細胞依存性抗体応答に必要とされることが示された。特に、CD40:CD1 54結合は、抗アポトーシスおよび／またはリンホカイン刺激シグナルを提供する。別の重要な同時刺激性のシグナルは、Ｔ細胞におけるCD28が、抗原提示細胞（ APC）におけるおよびおそらく実質細胞におけるその対応レセプターCD80（B7-1 ）またはCD86（B7-2）に結合することによって生成される。重要なことに、CD80 および／またはCD86の発現は、CD154へのCD40の結合において開始されるシグナルによってアップレギュレートされる。さらなる研究は、Ｔ細胞分子CTLA4（CD1 52）が、CD80/CD86についてCD28と競合することによって、およびTCRシグナル伝達複合体に対して独特のネガティブなシグナル伝達を送達することによって、少なくとも部分的に、同時刺激およびTCR媒介性の活性化のダウンレギュレートするようであることを示した。Ｔ細胞依存性の生物学的応答を促進するにおけるCD40:CD154結合の重要性は、機能的なCD154を欠陥するヒトにおけるＸ連鎖型過剰IgM症候群（X-HIGM）の発症によって強調された。これらの個体は、正常なまたは高いIgMレベルを有するが、IgG、IgA、またはIgE抗体を生成できない。罹患された個体は、再発性の、いくつかの場合重篤な、細菌感染（最も共通には、Streptococcus pneumoniaeおよびHemophikus influenzae）、およびある異常な寄生虫感染、ならびにリンパ腫および腹腔ガンの増加される発生率を被る。疾患のこれらの臨床学的徴候は、静脈内免疫グロブリン置換療法を介して管理される。 X-HIGMの効果は、CD154をコードする遺伝子について未接合状態にされた動物（ノックアウト動物）において模擬される。未接合状態での研究は、Ｂ細胞は、 CD40:CD154結合の不在下でIgMを産生し得るが、それらはアイソタイプ切替を受けることはできないか、または親和性成熟後、通常生存できないことを確認した。機能的なCD40:CD154相互作用の不在下で、リンパ節胚中心は、正確に発生せず、および免疫記憶Ｂ細胞の発達が損なわれる。これらの欠陥は、二次（成熟）抗体応答の重篤な減少または不在に寄与する。 X-HIGMおよびCD154未接合状態を伴う個体はまた、細胞性免疫における欠陥を有する。これらの欠陥は、Pneumocystis carinii、Histoplasma capsulatum、Cr yprococcus neoformans感染、およびGiardia lambli感染の増加される徴候によって現れる。マウス未接合状態は、リーシュマニア感染を闘うそれらの能力が不全である。これらの細胞媒介性欠陥の多くは、IL-12またはIFN-γの投与によって逆転可能である。これらのデータは、CD40:CD154結合が、I型Ｔヘルパー細胞応答の発達を促進するという見解を実証する。さらなる支持は、マクロファージ活性化が、CD154不全の設定において欠陥性であるという、およびマウスに対する、抗CD40Lの投与が、ニューモシスティス（Pneumocystis）感染を浄化するそれらの能力を減少したという観察に由来する。CD40:CD154結合のブロックは、マクロファージが、マクロファージの炎症後の活性の多くを媒介する一酸化窒素を生成する能力を減少するようである。しかし、機能的なCD154を欠損する哺乳動物（ヒトを含む）は、ウイルス感染または敗血症の有意な発症を発達しないことを注目するべきである。多くの前臨床研究は、CD40:CD154結合を妨げ得る薬剤が、免疫調節剤として見込みがあることを確立した。マウス系において、CD154に対する抗体は、インビトロおよびインビボの両方で、外因性抗原に対する一次および二次免疫応答をブロックする。CD154に対する抗体は、マウスおよびサルにおいて胚中心の減少を引き起こし、CD154免疫不全症におけるデータと一致する。３月齢の狼瘡傾向のマウスへの抗CD154抗体の３用量の投与は、２本鎖化DNAおよびヌクレオソームに対する力価を実質的に減少し、重篤な腎炎の発症を遅延し、および死亡率を減少した。さらに、重篤な腎炎を伴う５〜７月齢のマウスへの、抗CD154抗体の投与は、腎疾患を安定化し、さらに逆転することを示した。小量の残存する同種リンパ球と同時に与えられた抗CD154抗体は、マウス膵臓島局所移植片（autgraft）の制限のない生存を許容した。他の動物モデルにおいて、CD40:CD154結合の妨害は、自己免疫病（例えば、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、炎症性の腸疾患）、移植片拒絶（心臓同種移植片、移植片対宿主病）、および昇水誘導性の糸球体腎炎（これは、体液性および細胞性の両方の事象によって媒介される）の症状を減少することが実証された。げっ歯類におけるさらなる研究は、CD80/CD86が、そのＴ細胞対応レセプターであるCD28およびCTLA4に結合することを妨げることによって、Ｔ細胞活性化がブロックされ得ること、およびげっ歯類同種移植片の生存が延長され得ることを示した。これらの研究は、CD28シグナル伝達妨害剤として、CD80／CD86特異的融合タンパク質のCTLA4-Igの使用を含む。他の研究は、CD80/CD86アップレギュレーションが、CD40:CD154結合妨害剤（例えば、モノクローナル抗体MRI）の使用によって防止され得ることを実証した。免疫調節剤の両方のクラスは、それらの有効性に対するTCR従事に依存するようである。従って、このような薬剤は、pan Ｔ細胞免疫抑制に依存するよりも、Ｔ細胞依存性の生物学的プロセスの特異性を調節する能力を提供する。移植片拒絶のげっ歯類モデルにおける、インビボでのこのような薬剤の使用を含む研究は、完全に非適合性の皮膚移植片の受容をふくむ劇的な結果（現在利用可能な免疫抑制では得ることができない結果）を生じた。しかし、げっ歯類における長期の移植片生存の以前に報告された研究は、失敗たか、または他の哺乳動物（特に霊長類）において試験された場合、受容できない毒性を伴ったことに注目すべきである。本発明の開示された原理の証明の研究は、対照的に、CD40:CD154結合妨害剤の、単独でのまたは他の免疫調節剤もしくは免疫抑制剤（例えば、CD28シグナル伝達結合妨害剤）と組合わせての使用は、霊長類受容者への、異種の（MHC-非適合性の）ドナー組織の長期の、拒絶のない取込みを促進することを確立する。本明細書中に開示される治療は、顕著に単純であり、標準的な抹消静脈内カテーテルを介する治療剤の投与を包含し、および受容者によって顕著に十分に寛容されたことが、奨励される。これは、霊長類において存続する移植片受容を達成するために使用される他のレジメ（電離放射線、ドナー由来の骨髄の投与、およびかなりの術中の免疫抑制を必要とする）に、明確に対照的である。本明細書中に記載される研究において処置された動物は、CD3で指向される抗体での処置後に典型的に観察されるＴ細胞活性化およびサイトカイン放出の証拠を何ら示さず、ならびに延長された生存は、日和見感染に関して実証される費用を伴って行われなかった。さらに、抹消血の血液学的なパラメーターにおける変化は、これらの研究の間に示されなかった。長期の生存が、任意の白血球サブセットにおけるみかけの清浄および全体の減少を伴うことなく、およびインビトロＴ細胞応答性の喪失を伴うことなく、達成された。それゆえ、観察された効果は、抗体または融合タンパク質オプソニン化後のＴ細胞破壊に起因しないようである。結果は、著しい。非近交系アカゲザルにおける成功は、本発明のまたは等価な治療学的アプローチを使用して、同種移植片（またはさらに異種移植片）の取込みは、ヒトにおいて達成可能な目標であることを示唆する。以下に記載される至適な組合せ治療における各薬剤の機構および関連の寄与は、明らかでないままである。CD40:CD154妨害物単独の成功は、任意の基底の同時刺激性のシグナル伝達は、CD80/CD86アップレギュレーションよりも、拒絶応答を維持するにおいて重要でないことを示唆する。実際、抗CD154抗体投与は、単独で使用された場合、印象的な拒絶のない生存を生じたが、CD28結合妨害剤（CT LA4-Ig）の効果はより一過的であった。CD154が、脈管内皮および平滑筋を含む非骨髄系細胞において発現されること、ならびにCD80が、線維芽細胞および肝細胞において誘導されることを考慮すると、非Ｔ細胞事象が、ドナー組織に対する反応性を確立するにおいて重要であり得る。有意な実質癒着への免疫系の接近および移植時での同時刺激性のシグナルを否定することによって、移植片認識および破壊が防止され得る。ドナー実質によって誘導される活性化およびリンパ球細胞によって誘導される活性化の差異は、正常な移植片機能にもかかわらずドナーリンパ球に対するインビトロ反応性の観察される保存、およびMLR反応性と臨床学的移植片結果との間の一般的に不十分な相関を説明する。それのも関わらず、例示的な同時刺激妨害剤の、CTLA4-Igおよびヒト化5c8（抗ヒトCD154）の効果は、インビトロおよびインビボの両方で相乗的であることが示された。おそらく、 CTLA4-Igは、ヒト化5c8によって、CD40:CD154結合妨害の効果を免れるCD80/CD86 発現に対する保険を提供する。この例において、かなりの時間が、最初の妨害剤を免れるいくつかの細胞での有効な急性の拒絶を生じるのに必要とされるようである。このストラテジーは、確立されたバイオプシーで証明された拒絶を逆転するにおいて首尾良いため、拒絶プロセスは、一旦開始されると、エフェクター細胞が、TCRシグナル伝達を排除するか、またはTCRシグナル伝達できなくしない限り進行するプロセスではなく、連続的な同時刺激によって維持されなくてはならないようである。目的論的に、身体は、容易に制御される炎症によって、最も良好に作用される。従って、攻撃に対する方向の不在下で、再処置は暗黙の注文であり得る。このことは、ダウンレギュレートする免疫系の天然の性向の開発が、pan- 免疫抑制よりも有利であるべきであるという見解を支持する。以下の考察は、本発明が実施され得る、多様な情況および状況を説明および例示し、ならびに本発明の特定の実施態様を含む原理の証明の研究を提供する。受容者宿主本発明は、組織移植片の任意の哺乳動物受容者、または組織移植の必要性がある任意の哺乳動物の処置または予防のために使用され得る。好ましくは、受容者（本明細書中でまた、受容者宿主、または単に宿主として言及される）は、霊長類であり、より好ましくは高等霊長類であり、最も好ましくはヒトである。他の実施態様において、受容者は、組織移植を必要とする別の度乳動物、特に商業的に重要な哺乳動物、または愛玩動物もしくは他の価値のある動物（例えば、絶滅の危機にある種のメンバー）であり得る。従って、受容者宿主としてはまた、ヒツジ、ウマ、ウシ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、ハムスター、スナネズミ、ラット、およびマウスが挙げられるが、これらに制限されない。ドナーまたは移植片組織本発明は、任意のタイプの組織移植または移植手順、特にドナー（移植される）組織が、受容者宿主の免疫系による不全または拒絶により罹患されるか、またはその危険性がある手順とともに、使用され得る。特に、本発明は、ドナー組織が受容者宿主と組織適合性でない任意の情況において、使用され得る。従って、自己または同系のドナー組織に加えて、本発明は、同種またはさらに異種のドナー組織とともに使用され得る。ドナー組織は、従来の手段によって、ボランティアもしくは他の生存するドナーに、または屍体のドナーに由来し得る。好ましくは、ドナーは、受容者宿主と実施可能であるように組織適合性である。従って、受容者宿主がヒトである場合、自己および同種ドナー組織が好ましい。しかし、ドナー組織は、非ヒト霊長類（例えば、チンパンジーもしくはヒヒ）、または別の比較的適合性の哺乳動物（例えば、ブタ）のような異種の種（異種移植片として言及される場合において）から得ることができる。いくつかの実施態様において、ドナー組織は、器官または身体の一部を含む。他の実施態様において、ドナー組織は、ドナーの器官または組織の一部、部分、またはバイオプシーを含む。なお他の実施態様において、ドナー組織は、細胞、特に単離されたまたは懸濁された細胞を含み、ドナー宿主から回収されたまたは切除された細胞、霊長類培養物において維持される細胞、または不死化細胞株を含む。必要に応じて、ドナー組織は、外因性の遺伝子材料を保有する細胞（例えば、受容者宿主に対して治療学的な価値があるポリペプチドの産生のために必要な遺伝子材料を含むように操作された（またはそのように操作された祖先細胞に由来する）トランスフェクトされた細胞または形質転換された細胞）を含み得る。なお他の実施態様において、ドナー組織は、その体組織のいくつかまたは全てにおいて、受容者宿主に対して治療学的な価値があるポリペプチドの産生のために必要な遺伝子材料を含むように操作された、トランスジェニック哺乳動物に由来し得る。受容者宿主に対して治療学的な価値がある、例示的なポリペプチドとしては：インスリンまたは成長ホルモンのようなホルモン；サイトカイン；増殖および分化因子；酵素；構造タンパク質などが挙げられる。従って、上述を考慮して、本発明は、移植された腎臓、肝臓、膵臓、肺、心臓などのような器官移植片とともに使用され得ることが明らかである。同様に、本発明は、上述の切片または部分とともに、ならびにさらなる組織型（特に、腎臓、肝臓、膵臓（特に島）、呼吸器、心臓、皮膚、脈管、神経、骨、骨髄、軟骨、腱、靭帯、筋肉、脂肪、乳房、胃腸管内層、上皮、内皮、結合組織など）とともに使用され得る。さらに本発明は、例えば、目、耳、鼻、指（手指またはつま先）、関節、血管、神経、筋肉、肢、または他の身体部分の置換、または他の外科的変化または再構築について、複数の組織型を含む身体部分とともに使用され得る。他の実施態様において、本発明は、受容者宿主に、全身的にまたは局所的に導入される、細胞調製物または懸濁物とともに使用され得る。例えば、単離された、懸濁された、または分散された細胞は、静脈内に注入され得るか、または所望の部位（例えば、骨髄腔、肝臓）に、腎臓莢膜もしくは関節莢膜内に、筋肉内で移植されるか、または創傷部位に局所的に適用され得る。例示的な細胞としては、抹消血球、骨髄、または任意のその造血成分、間充織幹細胞、筋肉衛生細胞、肝細胞、ホルモン産生または神経内分泌細胞、線維芽細胞、神経冠細胞、内皮などが挙げられる。いくつかの実施態様において、細胞は、分裂的な成分であり、およびドナー器官の新規な組織を生成する。他の実施態様において、細胞は、分裂的な成分ではないが、受容者に対して治療学的な価値があるポリペプチドまたは他の産物を生成もしくは発現する。例示的なCD40:CD154妨害剤本発明の方法に有用な治療学的成分は、細胞表面CD40（例えば、Ｂ細胞における）と、活性化Ｔ細胞の表面において発現されるCD40L（CD154）との相互作用をブロックする任意の化合物を含む。CD40:CD154結合妨害剤化合物（例えば、具体的に意図される抗CD40L化合物）としては、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体（mAb）、ならびにキメラ分子、ヒト化分子、減少されたエフェクター機能を有する分子、二重特異性分子、および抗体の結合体のような抗体誘導体が挙げられる。好ましい実施態様において、抗体は、米国特許第5,474,771号（本明細書中に参考として援用される）において記載されるような、5c8である。現在非常に好ましい実施態様において、抗体は、ヒト化5c8である。CD154に対する他の公知の抗体としては、抗体ImxM90、ImxM91、およびImxM92（Immunexから得られる）、Ancellから市販されている抗CD40L mAb（クローン24〜31、カタログ番号353-020、Bayport、MN）、ならびにGenzymeから市販されている抗CD40L m Ab（Cambridge、MA、カタログ番号80-3703-01）。また市販されているのは、Pha rMingenからの抗CD40L mAb（SanDiego、カタログ番号33580D）。多数のさらなる抗CD40L抗体が産生され、および特徴付けられている（例えば、Bristol-Myers SquibbのWO 96/23071を参照のこと、この明細書は、本明細書中に参考として援用される）。本発明はまた、完全Fabフラグメント、F(ab')₂化合物、VH領域、Fv領域、１本鎖抗体（例えば、WO 96/23071を参照のこと）、ポリペプチド、ポリペプチドの融合構築物、CD40の融合物（例えば、Hollenbaughら、J．Immunol．Meth．188:1 -7、1995（これは、本明細書中に参考として援用される）におけるような、CD40 Ig）、および小分子化合物（例えば、小さな半ペプチド化合物または非ペプチド化合物）のような他のタイプの抗CD40Lを含み、全て、CD40:CD154結合をブロックまたは妨害し得る。小分子を設計、スクリーニング、および至適化するための手順は、1996年６月21日に出願された特許出願PCT/US96/10664（この明細書は、本明細書中に参考として援用される）において提供される。抗体の種々の形態はまた、標準的な組換えDNA技術を使用して生成され得る（W interおよびMilstein、Nature、349:293-99、1991）。例えば、「キメラ」抗体が構築され得、ここでは、動物抗体からの抗原結合ドメインは、ヒト定常ドメインに連結される（抗体は、非ヒト哺乳動物に最初に由来し、ここでは重鎖のヒンジ領域もしくは定常領域および／または軽鎖の定常領域の全てまたは部分を、ヒト免疫グロブリン軽鎖もしくは重鎖からの対応する領域で置換えるために組換え DNA技術が使用された）（例えば、Cabillyら、米国特許第4,816,567号；Morriso nら、Proc．Natl．Acad．Sci．81:6851-55、1984を参照のこと）。キメラ抗体は、ヒトの臨床学的処置において使用される場合、動物抗体によって誘発される免疫応答を減少する。さらに、組換え「ヒト化」抗体は、合成され得る。ヒト化抗体は、非ヒト哺乳動物に最初に由来し、ここでは抗原結合について必要とされないアミノ酸のいくつかまたは全てを、ヒト免疫グロブリン軽鎖もしくは重鎖からの対応する領域空のアミノ酸で置換するために組換えDNA技術が使用された。すなわち、特異的抗原結合を担う領域が挿入された大部分がヒト免疫グロブリン配列を含有するキメラが存在する（例えば、PCT特許出願WO 94/04679を参照のこと）。動物は、所望の抗原で免疫され、対応する抗体が単離され、そして特異的な抗原決定を担う可変領域配列の部分が、取り出される。次いで、動物由来の抗原結合領域は、抗原結合領域が欠失されたヒト抗体遺伝子の適切な部分にクローン化される。ヒト化抗体は、ヒト治療において使用するための抗体における異種（種間）配列の使用を最小にし、望ましくない免疫応答をより誘発しないようである。霊長類化抗体は、同様に生成され得る。本発明の別の実施態様は、非ヒト動物（例えば、１つ以上のヒト免疫グロブリン導入遣伝子を保有するトランスジェニック動物）において生成され得るヒト抗体の使用を含む。このような動物は、米国特許第5,569,825号において記載されるように、ハイブリドーマを生成するための脾細胞についての供給源として使用され得る。抗体フラグメントおよび一価の抗体はまた、本発明の方法および組成物において使用され得る。第２の重鎖のFc（または幹）領域に結合される重鎖／軽鎖二量体を含む。「Fab領域」は、その完全性において、重鎖のＹ枝部分を含む配列に、および軽鎖に、おおまかに等価、または類似である差の部分をいい、ならびにこれは集合的に（集合体において）抗体活性を示している。Fabタンパク質は、集合体が、特定の抗原または抗原ファミリーと選択的に反応し得る限り、以下の任意の成分が共有結合的にまたは非共有結合的に凝集されるかにかかわらず、１つの重鎖および１つの軽鎖（一般に、Fab'として知られる）、ならびに抗体Ｙの２つの枝別れセグメントに対応する四量体の集合体を含む。さらに、標準的な組換えDNA技術が、抗原結合部位の近傍においてアミノ酸残基を変化することによって、組換え抗体とそれらの抗原との結合親和性を変化するために使用され得る。ヒト化抗体の抗原結合親和性は、分子モデリングに基づく変異誘発（Queenら、Proc．Natl．Acad．Sci．86:10029-33、1989；PCT特許出願WO 94/04679）によって増加され得る。CD40Lについての抗体の親和性を増加することまたは減少することが所望され得、標的される組織のタイプまたは構想される特定の処置スケジュールに依存する。これは、ファージディスプレイ技術を利用してなされ得る（例えば、Winterら、Ann．Rev．Immunol．12:433-455、199 4；Schierら、J．Mol．Biol．255:28-43、1996（これらは本明細書中に参考として援用される）を参照のこと）。例えば、半予防的な処置のために、CD40Lについて減少された親和性を有する抗体の一定レベルで、患者を処置することが有利であり得る。同様に、CD40Lについての増加される親和性を有する抗体は、短期の処置のために有利であり得る。投与の経路本発明の化合物は、医学的に受容可能である任意の様式において投与され得る。特定の情況に依存して、局所的なまたは全身的な投与が、所望され得る。好ましくは、化合物は、非経口経路を介して（例えば、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、眼内、心室内、腹腔内、莢膜内、頭蓋内、脊髄内、または鼻腔内の注射、注入、または吸入によって）、投与される。化合物はまた、ドナー組織の移植の前または後のいずれかに、受容者宿主に、注入ポンプの移植、または生体適合性または生体侵食性に維持される放出移植によって投与され得る。あるいは、本発明のある化合物、またはその処方物は、経口または経腸投与のために適切であり得る。本発明のなお他の化合物は、局所投与のために適切である。一般に、本発明の化合物は、受容者宿主に投与される。しかし、化合物はまた、ドナーに、またはドナー組織に投与され得る。例えば、本発明の化合物は、ドナー組織が、受容者宿主へのその取込みの前に保存または輸送される灌流または保存液中に含まれ得る。処置の投薬量および頻度所与の免疫複合体病について、患者に投与される任意の特定の化合物についての投薬の量および頻度は、例えば、移植外科医のような、組織移植の分野の当業者の技術および臨床学的判断の範囲内である。一般的な投薬量および投与のレジメは、前臨床および臨床治験によって確立され、これらは化合物の至適な投与パラメーターを決定するための広範であるが日常的な研究を含む。このような推奨が作製された後であってさえ、実施者は、しばしば、多様な考慮（例えば、個体の年齢、医学的状態、体重、性別、および他の医薬品との同時処置）に基づいて、異なる受容者宿主についてこれらの投薬量をしばしば変更する。移植片拒絶を阻害するために使用される各抗CD40L化合物の至適な投薬量および投薬レジメを決定することは、医薬および医学の分野における当業者にとって、日常的な事柄である。一般に、投薬の頻度は、付き添いの医師によって決定されるか、または同様に熟練した実施者によって決定され、およびより多くの投薬頻度（例えば、毎日、たは週１回の間隔）を含み得、より少ない頻度の投薬（例えば、月１回、またはより長い間隔）を伴って変化される。抗CD40L化合物についての投薬の考慮を例示するために、投与ストラテジーの以下の例が、抗CD40L化合物mAbについて与えられる。投薬量は、他のタイプの抗 CD40L化合物について容易に調整され得る。一般に、約0.05と約50mg/kg患者体重との間の単回の投薬が意図され、投薬量は、最も頻繁には、１〜20mg/kgの範囲内にある。移植の前もしくは移植時のような、または移植片拒絶が開始したという任意の証拠に応答する、急性の処置について、抗体の有効な用量は、約１mg/k g体重〜約20mg/kg体重の範囲であり、約１〜５日間、毎日、好ましくは、ボーラス静脈内投与によって投与される。同じ投薬量および投薬スケジュールが、負荷維持レジメの負荷期において使用され得、維持期は、毎週から３ヶ月の間隔の任意の期間での、約0.1mg/kg体重〜約20mg/kg体重の範囲における抗体の静脈内または筋肉内の投与を含む。慢性の処置はまた、維持レジメによって行われ得、ここでは抗体は、約１週間から約３ヶ月にわたる用量間の間隔で、約0.1mg/kg体重〜約20mg/kg体重の範囲において、静脈内または筋肉内経路によって投与される。さらに、慢性の処置は、断続的なボーラス静脈内レジメによって達成され、ここでは、約1.0mg/kg体重と約100mg/kg体重との間の抗体が投与され、連続的な処置の間の間隔は、１から６ヶ月である。断続的なボーラスレジメを除く全てについて、投与はまた、経口、肺、鼻、または皮下経路によってであり得る。移植片拒絶を阻害するための本発明の代替の実施態様によれば、抗体の有効性は、従来の抗拒絶治療学的薬剤または薬物（例えば、コルチコステロイドまたは免疫抑制剤）の連続的な、または組合わせの投与によって増加され得る。あるいは、抗体は、従来の薬剤に結合され得る。これは、薬剤が単独療法として投与される場合の従来の用量よりも少ない投薬量（従来の投薬量の約50%未満）における従来の薬剤の投与を許容する。従って、薬剤と関連する多くの副作用の出現が、回避されるべきである。移植片拒絶の処置のための、本発明に従う組合せ療法は、Ｂ細胞で標的される薬剤（例えば、抗CD19、抗CD28、または抗CD20抗体（結合されないかまたは放射性標識される）、IL-14アンタゴニスト、LIP394（LaJolla Pharmaceuticalsのレセプターブロッカー）、IR-1116（Takeda小分子）、および抗Igイディオ型モノクローナル抗体）とともに抗CD40L抗体を使用することを含む。あるいは、組合せは、Ｔ細胞／Ｂ細胞標的化薬剤（CTLA4Ig、IL-2アンタゴニスト、IL-4アンタゴニスト、IL-6アンタゴニスト、レセプターアンタゴニスト、抗CD80/CD86モノクローナル抗体、TNF、LFA1/ICAMアンタゴニスト、VLA4/VCAMアンタゴニスト、ブレキナール（brequinar）、およびIL-2トキシン結合体（例えば、DAB）、プレドニゾン、抗CD-3 MAb（OKT3）、ミコフェノレートモフェチル、シクロホスファミド、および他の免疫抑制剤（例えば、カルシニュリンシグナルブロッカー、タクロリムス（FK506）を含むがこれに制限されない）の使用を含む。組合わせはまた、Ｔ細胞標的化剤（例えば、CD4アンタゴニスト、CD2アンタゴニスト、およびIL-12）を含み得る。移植片取込みの維持のために、または移植片拒絶の急性の発症の抑制後の期間において、抗CD40L抗体の維持用量が、単独でまたは従来の抗拒絶剤と組合わせて、必要であれば投与される。続いて、投与の投薬量もしくは頻度、またはその両方が、減少され得る。移植片拒絶の徴候がないことが明らかである場合、処置は終了され得、移植片拒絶の徴候についての用心深いモニターを伴う。他の例において、当業者によって決定されるように、例えば、４週間以上の間隔で、必要に応じた処置が投与され得る。しかし、受容者宿主は、疾患症状の任意の再発の際に、長期の基準における断続的な処置を必要とし得る。処方物一般に、本発明の化合物は、薬学的に受容可能なキャリアまたは腑形剤中に、懸濁、溶解、または分散される。得られる治療学的組成物は、受容者のホメオスタシス、特に電解質バランスを有害に影響しない。従って、例示的なキャリアは、通常の生理学的生理食塩水（0.15M NaCl、pH7.0〜7.4）を含む。他の受容可能なキャリアは、当該分野において周知であり、および例えば、Remington's Phar ma ceutical Sciences 、Gennaro編、Mack Publishing Co．1990において記載される。受容可能なキャリアは、生体適合性の、不活性なまたは生体吸収可能な塩、緩衝化剤、オリゴ糖または多糖、ポリマー、粘性を改善する薬剤、保存剤などを含み得る。本発明の方法において使用される抗CD40L化合物は、薬学的に有効なまたは治療学的に有効な量において、投与され得、この量は、移植片拒絶の危険性があるかまたはこれに罹患されている受容者に対する、検出可能な、好ましくは医学的に有益な効果を生成するのに十分な量である。医学的に有益な効果は、患者の医学的な状態を防止する、またはその状態の悪化を遅延もしくは減弱する、または検出可能に改善することを含む。例として、腎臓同種移植片または異種移植片、腎機能および健常性の状態の徴候は、血液もしくは尿中の関連の物質の濃度、他の尿特徴、または血液から尿への種々の物質のクリアランスの速度を測定する、１つ以上の日常的な実験室試験を用いてモニターされ得る。これらの試験によって測定されるパラメーターは、個々でまたは組合わせてのいずれかで、腎機能または障害を評価するために、医師によって使用され得る。このようなパラメーターの例は、尿素、クレアチニン、またはタンパク質の血中濃度；タンパク質の、または赤血球もしくは白血球のような種々の血球の尿中濃度；尿特異的重力；尿の量；イヌリン、クレアチニン、尿素、またはp-アミノ馬尿酸のクリアランス速度；および高血圧または浮腫の存在を含む。本発明の方法の臨床学的使用の特定の例として、ドナー腎臓組織の受容者において、抗CD40L MAb（例えば、hu5c8）が、予防的に、または移植片拒絶の証拠を示す受容者に投与される。急性の腎移植片拒絶は、多数の指標によって表され得、血清クレアチニンまたは血液尿素窒素の増加、尿排出量の減少、尿タンパクおよび／もしくは血尿の発生、または移植片拒絶の他の徴候を含む。免疫調節療法の量および過程は、これらの指標の１つ以上において臨床学的な変化を生成するのに十分であるべきである。例示的な過程および用量スケジュールは、本明細書中に含まれる原理の証明の研究において記載される。しかし、本質的に治療は、 50mg/kgまでの量におけるボーラス治療として、静脈内のCD40:CD154結合妨害剤（hu5c8によって例示される）の投与、続いて、治療の開始後２週間までの、または移植片拒絶もしくは不全の指標の所望の有益な変化の証拠が得られるまで、その後の投与の適切なレジメ（例えば、毎日の静脈内または皮下注射）を含む。別の例として、他の期間拒絶の証拠を伴う受容者について、抗CD40L化合物が、上記の様式に類似の様式において投与される。例えば、肝臓移植片の急性の拒絶は、黄痘（高ビリルビン症）、肝炎（増加されるアミノトランスフェラーゼレベル）、凝固障害、および脳症を導く。CD40:CD154 妨害剤処置レジメを評価するための前臨床モデル系好ましい、CD40:CD154妨害剤化合物（例えば、mAb 5c8のような抗CD40L化合物）の抗力を試験するための例示的なモデル系は、以前に関連する米国仮出願第60 /049,389号（06/11/97）およびKirkら（1997）、94 Proc ．Natl．Acad．Sci．US A 8789-8974（これらの両方の技術は、本明細書中に参考として援用される）において開示される、霊長類の腎同種移植片モデルである。本発明のアカゲザルモデルは、免疫操作の精密な試験であることが、反復して示された：同種移植片機能の微量な変化、ならびに受容者の創傷治癒および免疫系機能に対する有害な影響に精巧に感受性であるモデル系。さらに、これは、ヒト腎移植に明白な生物学的類似性を有する。特に、MHCタンパク質をコードする遺伝子は、アカゲザルとヒトとの間で十分に保存されており、および血管新生化されたそれらの拒絶は、密接に対応し、臨床学的に見られる。このモデル系が、腎（腎臓）組織を含む移植片を評価するために適切であることが容易に理解される。他の当該分野において認識される前臨床モデル系は、好ましくは霊長類において、肝臓、心臓、肺、膵臓、膵臓島、皮膚、末梢神経もしくは中枢神経、または他の組織もしくは器官のタイプのような他の移植片組織タイプの有効性を評価するために適切である。材料および方法試薬ヒトCTLA4-Igおよびコントロール融合タンパク質IgG1は、以前に記載されるように調製され、そしてGenetics Institute、Cambridge、MAによって溶液中で輸送された。抗CD40リガンド抗体、ヒト化5c8は、以前に記載されるように調製され、そしてBiogen Corporation、Cambridge、MAによって溶液中で輸送された。ハムスター抗CD28モノクローナル抗体PV-1（IgG、クローンG62）を、ハイブリドーマ培養物上清から精製し、そしてアイソタイプコントロールモノクローナル抗体として使用した。 MHC 類別化およびドナー/受容者選択しかし、ドナー−レシピエント組合せおよび第三者の細胞について選択された動物を、MHCクラスI型およびクラスII型での遺伝的非同一性に基づいて選択した。クラスI型不同性を、以前に記載されるように１次元の等電点電気泳動によって確立した。クラスIIの不同性を、一方向性の混合リンパ球反応（MLR）の結果に基づいて確立した。さらに、動物のDRB遺伝子座を、以前に記載されるように、変性化勾配ゲル電気泳動、および第２エクソンの直接的な配列決定によって不同性であることを評価した。ドナーに対する受容者の活発なＴ細胞応答性を、全てのドナー−受容者対に対して、インビトロで確認した。この研究において記載される実験を、「Guide for the Care and Use of Laboratory Animals」Instit ute of Laboratory Animals Resources、National Research Council DHHS出版番号NIH）86-23（1985）に記載される原理に従って行った。インビトロでの細胞分析一方向性のMLRを、移植の前の全ての動物に対して、および100日後の拒絶のない生存者に対して、行った。各動物を、全ての潜在的なドナーに対して試験し、移植について最も高い応答の対を確立した。応答細胞（３×10⁵）を、照射した刺激細胞（１×10⁵）とともに、37℃で５日間、インキュベートした。細胞を、3 H-チミジンでパルス標識し、そして増殖を、3H-チミジン取込みによってモニターした。コンカナバインＡ（25mcg/ml）でのポリクローナル刺激を、ポジティブコントロールとして作用した。刺激指標を、自己反応性に対する正規化によって算定し、自己反応性は、全ての細胞においてバックグラウンド取込みに近かった。インビトロ用量応答研究のために、CTLA4-Igまたはヒト化5c8を、１日目に、1 00 mcg/mlから0.01mcg/mlの濃度で、MLRに添加した。組合せ治療を、CTLA4-Ig濃度を変化し、およびヒト化5c8濃度を、50mcg/mgで一定に保つことによって行った。抹消血リンパ球表現型分析を、移植の前に、ならびに薬物治療の間および後に周期的に行った。アッセイは、リン酸緩衝化生理食塩水および１%胎児ウシ血清で希釈した、ヘパリン処理した全血の0.2mlを評価した。FITC標識化T11、B1（Co ulter）、およびFN18（David M．Neville，Jr.博士の好意による贈与）のモノクローナル抗体を、それぞれ、CD2（Ｔ細胞/NK細胞）、CD20（Ｂ細胞）、およびCD 3（Ｔ細胞）ポジティブ細胞のパーセントを評価するために使用した。赤血球を、染色後、ACK溶解緩衝液（0.15M NH4Cl、1.0mM KHCO3、0.1mM Na2EDTA、pH7.3 ）処理によって、調製物から取出した。細胞を、迅速に、または１%パラホルムアルデヒド中での固定後に、フローサイトメトリーに供した。フローサイトメトリーを、Becton Dickinson FACSCANを使用して行った。腎同種移植片腎同種移植片を、以前に記載されるように行った。簡潔には、シミアン免疫不全ウイルス、シミアンレトロウイルス、およびＢ型肝炎ウイルスに対して血清ネガティブな、非近交系若年（１〜３年齢）アカゲザルを、Primate Center（ウィスコンシン大学）またはLABS（Yamassee、SC）から得た。手順を、ケタミン（１ mg/kg）、キシラジン（１mg/kg、筋肉内）、およびハロタン（１%、吸入された）を使用して、一般的な麻酔下で行った。移植を、上記のようにMHC分析によって決定されるように、遺伝的に異なるドナー−受容者対間で行った。動物を、器官採集および移植の間、ヘパリン処理した（100ユニット/kg）。同種移植片を、標準的な微小血管技術を使用して移植し、ドナー腎動脈と受容者遠位大動脈との間の、ならびにドナー腎静脈と受容者大静脈との間の側部吻合に対する末端に作製した。次いで、一次尿管膀胱吻合を作製した。両側のネイティブな腎摘出を、閉鎖の前に行った。動物を、経口摂取が十分になったまで、約36時間、静脈内液で処置した。トリメタプリンサルファを、外科的な抗菌予防のために、３日間投与した。各動物は、外科手術の日に81mgのアスピリンを受けた。鎮痛についての必要性を、頻繁に評価し、そして鎮痛剤を、筋肉内ブトルファノールで維持した。動物を毎週、体重測定した。皮膚縫合を、７〜10日後に取出した。CTLA4-Igおよび／またはヒト化 5c8を、薬剤とともに蓄積される経験に基づいて変化する投薬量および投薬スケジュールで、静脈内に与えた。他の免疫医薬品は投与しなかった。血清クレアチニン、ならびに全血電解質（Na+、K+、Ca2+）およびヘモグロビンを、安定になるまで一日おきに、次いで毎週、測定した。病理学的分析バイオプシーを、20ゲージ針コアデバイス（Biopty-Cut、Bard）を使用して、拒絶を有することが疑われる動物に対して行った。ヘマトキシリンおよびエオシンでの標準的な染色を、凍結した組織またはホルマリンで固定した組織に対して行い、拒絶の診断を確認した。動物を、無尿時に、またはAAALAC標準に従って移植前の体重の15%の体重損失が生じた場合に、安楽死させた。結果 CTLA4-Igおよびヒト化5c8の両方は、用量依存性の様式で、アカゲザルのMLRを阻害した。しかし、CTLA4-Igは、Ｔ細胞増殖を防ぐにおいて、単一の薬剤として、ヒト化5c8よりも効果的であった。チミジン取込みにおける実質的な減少は、0 .1mcg/mlのCTLA4-Ig濃度で観察され、およびさらなる阻害が、より高い濃度で観察された。増殖における中程度の減少が、0.01mcg/mlのヒト化5c8の濃度で達成されたが、阻害は、濃度を増加することによって実質的に改善されなかった。組合わせて試験した場合、両方の薬剤はともに、いずれかの試薬単独で阻害するよりも約100倍効果的に阻害した。用量応答研究を、３匹の別々のネイティブな動物について反復し、同一の結果を得た。それゆえ、CTLA4-Igおよびヒト化5c8は、インビボで相乗的に、同種移植片拒絶を防いだ。 12の腎同種移植を行った。４匹の動物は、任意の免疫学的な介入を伴わずに移植を受けた。これらの動物は、５、７、７、および８日内に拒絶した。それらの腎臓の組織学的実験は、浮腫および細胞壊死を伴う散在性の腸および管浸潤によって特徴付けられる急性の細胞性の拒絶を示した。１匹の動物に、移植時で開始して５日間の過程のCTLA4-Ig（10mg/kg/日）を与え、20日間に延長された移植片生存を有した。移植片喪失は、コントロール細胞において観察される細胞性の拒絶と区別できない細胞性の拒絶に起因した。１匹の動物を、移植の日にCTLA-Ig 20mg/kgで、続いて一日おきに12日間の過程の10mg/kgで処置し、30日間に延長された移植片生存を有した。また、移植片喪失は、急性の細胞性の拒絶に起因した。ラット異所性の心臓同種移植片モデルにおける以前に発表された研究から推定されるように、リンパ節由来のリンパ球（10⁸）のドナー特異的輸液を、これらの２匹の動物に移植時に与えた。２匹の動物を、ヒト化5c8単独で処置した。両方の動物は、外科手術の日に開始して、術後14日まで継続して（合計８用量）、一日おきに20mg/kgを受けた。両方の動物は、延長された拒絶のない生存を経験したが、一過性のクレアチニン上昇が、術後第２週と第４週との間に記録された。両方の動物は、移植後95と10 0日との間で拒絶した。バイオプシーを、各動物に対して行い、診断を確認した。次いで、両方の動物を、７用量のヒト化5c8（20mg/kg；１匹の動物は一日おき、および１匹の動物は毎日）で再処置し、そして両方は、実証可能な有害な影響を伴わずに、正常な移植片機能に回復した。これらは、生存を維持し、移植後15 0日を十分に超えた。２匹の動物に、移植後、20mg/kgの各CTLA4-Igおよびヒト化5c8を与えた。さらに、各薬物を、外科手術の日から開始して、術後14日間継続して、一日おきに与えた。１匹の動物が、外科手術の32日後に拒絶した。他方は、100日間拒絶のない状態を保持したが、ヒト化5c8単独で処置したこれらの動物は、この時点で拒絶した。同様に、バイオプシーは、急性の細胞性の拒絶を示した。CTLA4-Igおよびヒト化5c8の最初のレジメを反復し、そして動物のクレアチニンレベルが、ベースライン（1.0）に回復した。この処置後のMLR分析は、反応性のドナー特異的な喪失を示した。第３者の応答は維持された。移植の165日後、動物を重量喪失に起因するプロトコルによって要求されるように屠殺した。その時点での移植片機能は、正常であった。部検時に、動物は、ShigellaおよびCamphylobacter全腸炎（アカゲザルにおける共有の感染）を有することが見出された。この疾病は、元来の霊長類群体において複数の動物（いくつかの未処置の動物を含む）を感染した。他の病理学的な異常は見出されなかった；具体的には、リンパ球増殖疾患または日和見性の感染の証拠はなかった。組識学的に、移植片は、間質におけるリンパ球の単離された群を有したが、管浸潤、糸球体障害、または実質の壊死の証拠を有しなかった。ヒト化5c8単独で処置された動物のように、これらの動物の両方は、術後の第４週の間に、移植片サイズの増加と合わせて、それらのクレアチニンの一過性の増加を有した。この移植片膨潤は、浸潤するリンパ球の第２の急増を反映し、それゆえ、両方の試薬が、外科手術の日、ならびに術後２、４、６、８、12、16、および28日目に与えられるような、改変された用量スケジュールを導いた。２匹の動物を、この改変されたレジメで処置した。両方は、拒絶のない生存を経験し、150日間を超えて、腎機能における疾病または変化を経験しなかった。拒絶のない生存の100日後、MLRをドナー細胞および第三者の細胞に対して反復した。インビトロ反応性における変化は観察されなかった。これらの研究を、拒絶のない生存の150日後に反復し、同一の結果を得た。両方の動物は、ドナーおよび第三者の細胞に対する活発なインビトロ応答を維持したが、それらの同種移植片を拒絶できなかった。用いられた任意の治療からの毒性を実証した動物はなかった。具体的には、発熱、摂食障害、または血行力学的な異常はなく、ならびに日和見性の感染は生じなかった。動物を、標準的な条件において飼育し、および群生において他の動物との接触を許容した。これらは、正常な体重獲得を維持した。実験室化学作用および血液学的パラメーター（例えば、ヘモグロビンおよび白血球計数）は、正常であった。CD2、CD3、およびCD20を発現する細胞のパーセントは、任意の処置レジメによって影響されなかった。具体的には、Ｔ細胞計数における減少は、どの動物においても、処置の間または後に観察されなかった。霊長類腎同種移植片モデル系を使用するさらなる臨床前研究続いて、上記の霊長類腎同種移植片系を使用して、単独療法としての、または別の治療学的薬剤（例えば、CTLA4-Ig、MMF、タクロリムス、コルチコステロイド、またはその組合わせ）と組合わせての、ヒト化mAb 5c8の使用に基づいて、種々のさらなるおよび／またはさらに微細な治療学的レジメを試験した。霊長類における腎同種移植片についての単独療法２匹の動物は、以下のように、誘導および維持レジメを使用して、5c8モノクローナル抗体を受けた：誘導スケジュールは、研究の１、０、３、10、および18 日目での、20mg/kg 5c8の投与を含み、０日目は、腎同種移植外科手術の日であった。維持は、20mg/kg 5c8の毎月の投与を含み、研究の28日目に開始した。処置した動物は、移植片拒絶が本質的にないままであり、それぞれ、研究の170および163日目の白血球サブセット計数および／または血清クレアチニンレベルをモニターすることによって評価した。２つのさらなる動物は、以下のように、標準的な誘導および低用量の維持レジメを使用して、5c8単独療法を受けた：誘導スケジュールは、研究の１、０、３、10、および18日目での、20mg/kg 5c8の投与を含み、０日目は、腎同種移植外科手術の日であった。維持は、10mg/kg 5c8の毎月の投与を含み、研究の28日目に開始した。処置した動物は、それぞれ、研究の149および148日目に、移植片拒絶が本質的にないままであった。２匹のさらなる動物は、以下のように、低用量の誘導および低用量の維持レジメを使用して、5c8単独療法を受けた：誘導スケジュールは、研究の１、０、３、10、および18日目での、10mg/kg 5c8の投与を含み、０日目は、腎同種移植外科手術の日であった。維持は、10mg/kg 5c8の毎月の投与を含み、研究の28日目に開始した。処置した動物は、それぞれ、研究の38および９日目に、移植片拒絶が本質的にないままであった。なお２匹のさらなる動物は、以下のように、低用量の誘導および低用量の維持レジメを使用して、5c8単独療法を受けた：誘導スケジュールは、研究の１、０、３、10、および18日目での、５mg/kg 5c8の投与を含み、０日目は、腎同種移植外科手術の日であった。維持は、５mg/kg 5c8の毎月の投与を含み、研究の28 日目に開始した。処置した動物は、研究の７〜10日目に、腎移植片を拒絶した。霊長類における腎同種移植片の組合せ治療全ての動物は、上記の標準的な20mg/kg誘導および20mg/kg維持レジメを使用する5c8治療を、以下の他の免疫抑制治療薬レジメを組合わせて、受けた：３匹の動物は、治療学的に有効な量でコルチコステロイド（例えば、メチルプレドニゾロン、５日間の誘導過程を含む）およびミコフェノレートモフェチル（MMF;20mg /kg po KID）を含む組合せ治療を受けた。処置した動物は、それぞれ、研究の14 3、81、および80日目に、本質的に移植片拒絶がなかった。対照的に、5c8治療の不在下で類似の用量のMMFおよびコルチコステロイドで処置された１匹のコントロール動物は、研究の７日目で腎移植片を拒絶した。２匹のさらなる動物は、治療学的に有効な用量（1.5〜2mg/kg poBID、標的槽1 0ng/ml）での免疫抑制剤のタクロリムス（以前は、FK506）を含む組合せ治療を受けた。これらの処置した動物は、それぞれ、研究の31および36日目で、実質的に移植片拒絶がないままであった。２匹のさらなる動物は、治療学的に有効な用量でのCTLA4-Igを含む組合せ治療を受けた。これらの処置した動物は、それぞれ、研究の122および３日目で、実質的に移植片拒絶がないままであった。前臨床モデル研究に基づく結論上記の結果は、合わせると、CD40:CD154結合妨害剤のヒト化5c8単独での移植片取込みの誘導は、同種移植された組織の長期の生存を導き得ることを示す。ヒト化5c8の効果は、CD28シグナル伝達妨害剤のCTLA4-Igの効果と相乗的に組合され、およびいくつかの公知の免疫抑制剤および／または免疫調節剤と適合性である。等価物本発明は、本発明の精神および本質的な特徴から逸脱することなく、他の特定の形態において包含され得る。それゆえ、上述の実施態様は、全てに関して、本明細書中に開示される本発明の例示であるが、本発明を制限するものでないことが考慮される。従って、本発明の範囲は、上述の記載によってではなく添付の請求の範囲によって示され、ならびに請求の範囲の意義および同意義の範囲内にある全ての変化は、本発明に含まれることが意図される。

【手続補正書】【提出日】平成１１年１２月２９日（１９９９．１２．２９）【補正内容】請求の範囲１．霊長類移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害するための薬剤を製造するための、CD40:CD154結合妨害剤の使用。２．請求項１に記載の使用であって、前記CD40:CD154結合妨害剤が、抗CD40L（抗CD154）化合物である、使用。３．請求項２に記載の使用であって、抗CD40L化合物が、モノクローナル抗体である、使用。４．請求項３に記載の使用であって、前記モノクローナル抗体が、5c8抗原に結合する、使用。５．請求項４に記載の使用であって、前記モノクローナル抗体が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有する、使用。６．霊長類移植片受容者における移植された組織の急性の拒絶を逆転するための薬剤の製造のための、CD40:CD154結合妨害剤の使用。７．請求項６に記載の使用であって、前記移植された組織が、腎臓、肝臓、心臓、膵臓、皮膚、脈管、神経、骨、および軟骨の組織から選択される、使用。８．霊長類移植片受容者における移植された組織の生存を延長するための薬剤の製造のための、CD40:CD154結合妨害剤の使用。９．霊長類移植片受容者における移植された組織の不全の免疫学的合併症を減弱するための薬剤を製造するための、CD40:CD154結合妨害剤の使用。１０．請求項１、６、８、または９に記載の使用であって、前記移植された組織が、前記霊長類に対して同種であるか；または、前記移植された組織が、前記霊長類に対して異種である、使用。１１．請求項１、６、８、または９に記載の使用であって、前記移植された組織が、単離されたまたは懸濁された細胞からなる、使用。１２．請求項１１に記載の使用であって、前記単離されたまたは懸濁された細胞が：（ａ）抹消血細胞；および（ｂ）骨髄細胞または任意のその造血成分からなる群より選択される、使用。１３．請求項１、６、８、または９に記載の使用であって、免疫抑制または免疫調節化合物の有効量を、前記霊長類に投与するさらなる工程を包含する、使用。１４．請求項１３に記載の使用であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、CD28を介するＴ細胞同時刺激性のシグナル伝達を妨げる薬剤であるか；またはカルシニュリンシグナル伝達を妨げる薬剤である、使用。１５．請求項１４に記載の使用であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、コルチコステロイド、抗増殖剤、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレートモフェチル、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナーナトリウム、レフルノミド、およびアザスピランから選択される、使用。１６．霊長類移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害するための薬剤を製造するための、CD40:CD154結合妨害剤の使用であって、該霊長類への該移植片の移植の日から数えて、２、４、６、８、12、16、および28日目に、該薬剤の有効量が、該霊長類に投与される、使用。１７．霊長類移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害するための薬剤の製造のための、CD40:CD154結合妨害剤の使用であって、有効量の該薬剤が、予期される霊長類移植片受容者に提供され；１日後に、該組織移植片は、該霊長類に移植され、および同時に、該薬剤の有効量が、該霊長類に投与され；ならびに、移植の日から数えて、３、10、18、および28日目に、有効量の該薬剤が、該霊長類に投与される、使用。１８．請求項１７に記載の使用であって、移植の日から数えて、28日後の１月目から開始して、月１回の基準で、前記薬剤が、反復して投与される、使用。１９．霊長類移植片受容者における移植された組織の急性の拒絶を逆転するための薬剤の製造のための、CD40:CD154結合妨害剤の使用であって、該霊長類が急性移植片拒絶の徴候を示す日に、ならびにその後３、10、18、および28日目に、該薬剤が、該霊長類に投与される、使用。２０．請求項１９に記載の使用であって、急性移植片拒絶の徴候の提示の日から数えて、28日後の１月目から開始して、月１回の基準で、該薬剤が、前記霊長類に投与される、使用。２１．請求項１、６、８、９、１６、１７、または１９に記載の使用であって、前記霊長類がヒトである、使用。２２．請求項１、６、８、９、１６、１７、または１９に記載の使用であって、前記CD40:CD154結合妨害剤が、（ａ）非経口経路；（ｂ）生体適合性または生体侵食性に維持される放出移植；（ｃ）注入ポンプの移植；（ｄ）経口または経腸投与；および（ｅ）局所投与からなる群より選択される様式を介して、前記霊長類移植片受容者に投与される、使用。２３．請求項１、６、８、９、１６、１７、または１９に記載の使用であって、前記CD40:CD154結合妨害剤が、前記霊長類移植片受容者への前記組織の取込みの前に、ドナーまたは移植片組織に投与される、使用。２４．ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有するモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント；ならびに以下：（ａ）CD28を介するＴ細胞同時刺激性のシグナル伝達を妨げる薬剤；（ｂ）カルシニュリンシグナル伝達を妨げる薬剤；（ｃ）コルチコステロイドまたは抗増殖剤；または（ｄ）タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレートモフェチル、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナーナトリウム、レフルノミド、およびアザスピランから選択される、免疫抑制または免疫調節化合物を含有する組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/7056 Ａ６１Ｋ 31/7056 39/395 39/395 ＮＭ 45/06 45/06 Ａ６１Ｐ 37/06 Ａ６１Ｐ 37/06 // Ｃ０７Ｄ 215/52 Ｃ０７Ｄ 215/52 307/88 307/88 498/16 498/16 Ｃ０７Ｈ 19/052 Ｃ０７Ｈ 19/052 (31)優先権主張番号６０／０８５，１４５ (32)優先日平成10年５月12日(1998．5．12) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者カーク，アラン，デーアメリカ合衆国、メリーランド 20854、ポトマック、スタリオンコート 12912 (72)発明者ハーラン，ディビッド，エムアメリカ合衆国、メリーランド 20854、ポトマック、ウィローバレードライブ 9012 (72)発明者トーマス，ディビッドアメリカ合衆国、マサチューセッツ 02181、ウェルズリー、アップランドロード９ (72)発明者カウフマン，マイケルアメリカ合衆国、マサチューセッツ 02130、ジャマイカプレーン、ロッドマンストリート 19 (72)発明者バークリー，リンダアメリカ合衆国、マサチューセッツ 02165、ウェストニュートン、ウィンスロップストリート 34

Claims

【特許請求の範囲】１．移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害する方法であって、CD40:CD154 結合妨害剤の有効量を、該移植片受容者に投与する工程を包含する、方法。２．請求項１に記載の方法であって、前記CD40:CD154結合妨害剤が、抗CD40L（抗CD154）化合物である、方法。３．請求項２に記載の方法であって、抗CD40L化合物が、モノクローナル抗体である、方法。４．請求項３に記載の方法であって、前記モノクローナル抗体が、5c8抗原に結合する、方法。５．請求項４に記載の方法であって、前記モノクローナル抗体が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有する、方法。６．移植片受容者における移植された組織の急性の拒絶を逆転する方法であって、CD40:CD154結合妨害剤の有効量を、該移植片受容者に投与する工程を包含する、方法。７．請求項６に記載の方法であって、前記移植された組織が、腎臓、肝臓、心臓、膵臓、皮膚、脈管、神経、骨、および軟骨の組織から選択される、方法。８．移植片受容者における移植された組織の生存を延長する方法であって、CD40 :CD154結合妨害剤の有効量を、該移植片受容者に投与する工程を包含する、方法。９．移植片受容者における移植された組織の不全の免疫学的合併症を減弱する方法であって、CD40:CD154結合妨害剤の有効量を、該移植片受容者に投与する工程を包含する、方法。１０．請求項１、６、８、または９に記載の方法であって、前記移植された組織が、移植片受容者に対して同種である、方法。１１．請求項１、６、８、または９に記載の方法であって、前記移植された組織が、移植片受容者に対して異種である、方法。１２．請求項１、６、８、または９に記載の方法であって、免疫抑制または免疫調節化合物の有効量を、前記移植片受容者に投与するさらなる工程を包含する、方法。１３．請求項１２に記載の方法であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、CD28を介するＴ細胞同時刺激性のシグナル伝達を妨げる薬剤である、方法。１４．請求項１２に記載の方法であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、カルシニュリンシグナル伝達を妨げる薬剤である、方法。１５．請求項１４に記載の方法であって、前記薬剤が、シクロスポリンおよびタクロリムスから選択される、方法。１６．請求項１２に記載の方法であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、コルチコステロイドまたは抗増殖剤である、方法。１７．請求項１２に記載の方法であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、シロリムス、ミコフェノレートモフェチル、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナーナトリウム、レフルノミド、およびアザスピランから選択される、方法。１８．移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害する方法であって、該組織移植片を該移植片受容者に移植する工程；および移植の日から数えて、２、４、６、８、12、16、および28日目に、CD40:CD154結合妨害剤の有効量を、該移植片受容者に投与する工程を包含する、方法。１９．移植片受容者による組織移植片の拒絶を阻害する方法であって、予期される移植片受容者に、CD40:CD154結合妨害剤の有効量を投与する工程；１日後に、該移植片受容者に組織移植片を移植する工程、および該受容者にCD40:CD154結合妨害剤の有効量を同時に投与する工程；ならびに、移植の日から数えて、３、10 、18、および28日目に、有効量のCD40:CD154結合妨害剤を、該受容者に投与する工程を包含する、方法。２０．請求項１９に記載の方法であって、移植の日から数えて、28日後の１月目から開始して、月１回の基準で、前記受容者にCD40:CD154結合妨害剤の有効量の投与を反復する、さらなる工程を包含する、方法。２１．移植片受容者における移植された組織の急性の拒絶を逆転する方法であって、該受容者が急性移植片拒絶の徴候を示す日に、ならびにその後３、10、18、および28日目に、該受容者にCD40:CD154結合妨害剤の有効量を投与する工程を包含する、方法。２２．請求項２１に記載の方法であって、急性移植片拒絶の徴候の提示の日から数えて、28日後の１月目から開始して、月１回の基準で、前記受容者にCD40:CD1 54結合妨害剤の有効量の投与を反復する、さらなる工程を包含する、方法。２３．CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤；および免疫抑制または免疫調節化合物を含有する、組成物。２４．請求項２３に記載の組成物であって、前記CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有するモノクローナル抗体であり；ならびに、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、CD28を介するＴ細胞同時刺激性のシグナル伝達を妨げる薬剤である、組成物。２５．請求項２３に記載の組成物であって、前記CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有するモノクローナル抗体であり；ならびに、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、カルシニュリンシグナル伝達を妨げる薬剤である、組成物。２６．請求項２５に記載の組成物であって、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、タクロリムスである、組成物。２７．請求項２３に記載の組成物であって、前記CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有するモノクローナル抗体であり；ならびに、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、コルチコステロイドまたは抗増殖因子である、組成物。２８．請求項２３に記載の組成物であって、前記CD40:CD154（CD40L）結合妨害剤が、ATCCアクセス番号HB 10916によって産生される5c8抗体の抗原特異的結合特徴を有するモノクローナル抗体であり；ならびに、前記免疫抑制または免疫調節化合物が、シロリムス、ミコフェノレートモフェチル、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナーナトリウム、レフルノミド、およびアザスピランから選択される、組成物。