JP2002500617A - 有機リン誘導体の合成方法および組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 新規有機リンモノヌクレオシド誘導体とその合成方法、ならびに該有機リンモノヌクレオシド誘導体を利用する有機リンジヌクレオチド誘導体を提供する。本発明の合成有機リンモノヌクレオシド誘導体は式（１）： によって特徴づけられる。

Description

【発明の詳細な説明】 有機リン誘導体の合成方法および組成物 関連出願との相互関係 本出願は、以下のポーランド特許出願の優先権主張出願および一部継続出願で ある：ポーランド特許出願第P-308803号（1995年５月26日出願）、ポーランド特 許出願第P-310248号（1995年8月31日出願）およびポーランド特許出願第P-31293 4号（1996年2月26日出願）。 技術分野 本発明は、一般的には新規有機リンモノおよびジヌクレオシド誘導体およびそ の合成方法に関する。 発明の背景 病気の状態を含む動物の身体の状態のほとんどにタンパク質が関与しているこ とはよく知られている。そのようなタンパク質は直接作用するかまたはその酵素 的機能を介して動物およびヒトの多くの病気の状態の一因となっている。 古典的治療薬は一般的に、その病気を引き起こすかまたは病気を増悪させる機 能を軽減しようとするために、そのようなタンパク質との相互作用に絞られてき た。しかしながら、近年、そのようなタンパク質の合成をもたらす分子（すなわ ち、細胞間ＲＮＡ）の相互作用により該タンパク質の実際の産生を軽減する試み がなされてきた。これらの相互作用には、ＲＮＡに対する相補性「アンチセンス 」オリゴヌクレオチドまたはそのある類似体のハイブリダイゼーションが関与し ている。ハイブリダイゼーションとは、ＲＮＡまたはＤＮＡに対するオリゴヌク レオチドまたはオリゴヌクレオチド類似体の配列特異的水素結合をいう。ハイブ リダイゼーションが起きると、タンパク質の生合成を妨げることができる。この タンパク質の産生の干渉は、最小の副作用で最大の効果をもたらす治療効果を生 むものと期待されてきた。オリゴヌクレオチド類似体は、同様な機序によりタン パク質の産生を軽減するのにも利用することができよう。 アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチド類似体の薬理活性 は、他の治療薬同様、特定の細胞間標的における該物質の有効濃度に影響を及ぼ す多くの因子に左右される。オリゴヌクレオチドにおいて１つの重要な因子は、 ヌクレアーゼ存在下におけるオリゴヌクレオチドの安定性である。非修飾オリゴ ヌクレオチドはヌクレアーゼによって急速に分解するため、有用な治療物質では ないようである。したがって、オリゴヌクレオチドをヌクレアーゼに耐性にする ためのオリゴヌクレオチドの修飾が強く望まれている。 ヌクレアーゼ耐性を増強するオリゴヌクレオチドの修飾は、一般的に糖−ホス フェートバックボーンのリン原子に生じる。ホスホロチオエート、メチルホスホ ネート、ホスホラミデート、およびホスホロトリエステルは、種々のレベルのヌ クレアーゼ耐性をもたらすことが報告されてきた。しかしながら、一般的にはこ の種のホスフェート修飾オリゴヌクレオチドには、ハイブリダイゼーション特性 が劣っているという悩みがあった（Cohen，J.S.編、Oligonucleotides:Antisens e Inhibitors of Gene Expression，CRC Press，Inc．Boca Raton FL，1989)。 別の鍵となる因子は、アンチセンス化合物が、病気の経過に関与する特定の細 胞の原形質膜を横切る能力である。細胞膜は、小さな非イオン性の脂溶性化合物 は自由に浸透するが、ほとんどの天然代謝物および治療物質は依然として本質的 に浸透できない脂質タンパク質二重層からなる（Wilson，D.S.、Ann．Rev．Bioc hem．47:933，1978）。培養哺乳動物細胞における天然および修飾オリゴヌクレ オチドの生物学的および抗ウイルス作用はよく知られている。このように、これ らの物質は膜に浸透し、その細胞間標的に到達することができる。HL-60、Syria n Bamster繊維芽細胞、U937、L929、CV-1、およびATH8細胞を含む種々の哺乳動 物細胞によるアンチセンス化合物の取り込みは、天然のオリゴヌクレオチド、お よびアルキルトリエステル(Miller P.S.ら、Biochem．16:1988，1977)、メチル ホスホネート（Marcus-Sekura，C.H.ら、Nuc．Acids Res．15:5749,1987;Miller P.S.ら、Biochem．16:1988，1977;およびLokeS.K.ら、Top．Microbiol．Immuno l．141:282，1988）のようなヌクレアーゼ耐性類似体を用いて研究されてきた。 修飾オリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチド類似体は、それらの天然の 対応物より取り込まれにくいかも知れない。その結果、多くの従来利用可能なア ンチセンスオリゴヌクレオチドの活性は、実際の治療、研究、または診断目的に 十分なものではなかった。先行技術文献で認識されている他の２つの欠陥は、以 前に設計されたオリゴヌクレオチドアンチセンス治療薬の多くが細胞間ＲＮＡと のハイブリダイゼーション効率が悪く、基本的なＲＮＡ機能を終わらせるための 明確な化学的事象または酵素介在事象を欠くことである。 アンチセンスオリゴヌクレオチドの有効性を増強し、これらの問題を克服する ための修飾は多くの形をとってきた。該修飾には、塩基環修飾、糖部分修飾、お よび糖−ホスフェートバックボーン修飾が含まれる。従来の、特にリン原子にお ける糖−ホスフェートバックボーン修飾はヌクレアーゼに対する種々のレベルの 耐性をもたらした。しかしながら、アンチセンスォリゴヌクレオチドの、特定の ＤＮＡまたはＲＮＡとの忠実な結合能はアンチセンス方法論の基礎であるが、修 飾リンオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーション特性は一般的に劣っていた 。 リン原子の置換は、プロキラルホスフェート部分の修飾に関連する問題を避け る試みにおける別のアプローチであった。リンの置換が達成されるいくつかの修 飾については、Matteucci（Tetrahedron Letters 31:2385，1990；リン原子のメ チレン基との置換は、使用に適さなくする不安定性と該バックボーンを通じたホ ルムアセタール結合の一様な挿入をもたらさない利用可能な方法論によって制限 される）、Cormier（Nuc．Acids Res．16:4583，1988；リン部分のジイソプロピ ルシリル部分による置換は、方法論、ホモポリマーの可溶性、およびハイブリダ イゼーション特性によって制限される）、Stirchak（J．Org．Chem．52:4202，1 987；カルバメートまたはモルホリノ結合を含む短いホモポリマーによるリン結 合の置換は、方法論、得られる分子の可溶性、およびハイブリダイゼーション特 性によって制限される）、Mazur（Tetrahedron 40:3949，1984；リン結合のホス ホン酸結合による置換は、ホモトリマー分子の合成以外には生じなかった）、お よびGoodrich（Bioconj．Chem．1:165，1990；エステル結合はエステラーゼによ り酵素的に分解されるため、アンチセンスの応用におけるホスホネート結 合の置換に適していない）。 別の鍵となる因子は、キラル中心を有するオリゴマーに生じる立体化学的効果 である。一般的に、ｎヌクレオシドの長さを持つオリゴマーは、連続的非立体特 異的鎖合成における２^n-1異性体の混合物を構成するであろう。 すべてのヌクレオチド間メタンスルホネートリン原子における絶対配置がＲｐ またはＳｐである、ＲｐおよびＳｐホモキラル鎖および非立体規則性鎖は、物理 化学的特性が異なり、オリゴヌクレオチドの相補配列との付加生成物形成能が異 なることが報告されている。さらに、ヌクレオチドのホスホロチオエート類似体 は、ヌクレアーゼ活性に対する耐性においてオリゴ−Ｒｐおよびオリゴ−Ｓｐオ リゴヌクレオチド間で実質的な立体選択的な差がみられた(Potter、Biochemistr y，22:1369、1983、およびBryantら、Biohcemistry，18:2825，1979）。 Lesnikowski（Nuc1．Acids Res.，18:2109，1990）は、７個のメタンホスホネ ート結合のうちの６個がペンタデカデオキシリボアデニル酸のマトリックスと結 合したときに、リン原子における配列が限定されているジアステレオマー的に純 粋なオクタチミジンメタンスルホネートの融点に実質的な差がみられることを観 察した。これらの研究で使用した、リン原子における予め決定された配列を有す るオリゴヌクレオチド化合物は、Grignard試薬によって活性化される5'-ヒドロ キシルヌクレオシド基とジアステレオマー的に純粋なヌクレオシドｐ−ニトロフ ェニルメタンホスホネート間の立体制御的過程によって製造された（Lesnikowsk iら、Nucl．Acids Res.，18:2109，1990;Lesnikowskiら、Nucleosides & Nucleo tides，10:773，1991;Lesnilowski，Nucl．Acids Res.，16:11675，1988）。し かしながら、この方法は長い反応時間を必要とし、テトラマーホモチミジン断片 およびヘテロマーのヘキサマーを合成する場合にのみ立証された。 低温（−８０℃）での５’または３’位が保護された適切なヌクレオシドおよ びメチルジクロロホスフィンとの反応によりジアステレオマー的に純粋なオリゴ メチルホスホネート化合物を製造する試みでは、８：１の最大優勢度で関連ジヌ クレオシドメチルホスホネートのＲｐ異性体が形成された（Loschner，Tetrahed ron Lett.，30:5587，1989;およびEnglesら、Nucleosides & Nucleotides，10: 347，1991）。 しかしながら、より長い立体規則的な鎖は、縮合中に形成された中間体ヌクレ オシド3'-O-クロロメチルホスホナイトが低温度でさえ脆い配列を有するためこ の方法では製造できない。 有機リン誘導体を修飾および合成するのに利用可能な方法が限られていること から、アンチセンスオリゴヌクレオチド診断薬、治療薬、および研究のためのヌ クレアーゼに対する耐性および満足なハイブリダイゼーション特性をもたらす他 の修飾法が永い間求め続けられてきた。 発明の要約 本発明の１つの目的は、新規単量体有機リン誘導体の組成物を提供することで ある。最初の一連の化合物として、式（１）[式中、（ａ）Ｙは炭素数１〜約10 の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキ ル部分、またはＳｅ−ハロアルキル部分であるか、またはＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁ はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数６〜約20のアラルキル部分、ハロア リール部分、またはアルキルアリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環 式部分である）であり、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアル キル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、またはアルキルアリール部分、ア ミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基であり、（ｄ）Ｒ₂ はＨ、ハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキ ルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃ 、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ−アルケニル 部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−ア ルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリール部分、また はＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）であり、（ｅ）Ｂは所望により保護 されたヌクレオシド塩基である]で示される構造を有するものが提供される。 第2の一連の化合物として、式（１）[式中、Ｙはアミン部分、ハロゲン、また はＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のア ルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、ハロアリール部分、アルキル アリール部分、またはアリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環式部分 である）であり、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキル部分、 ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、 またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は 保護基であり、（ｄ）Ｒ₂はＨ、ハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、 炭素数約５〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、 保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アル キル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ −アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部 分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保 護基である）であり、（ｅ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩基である ]で示される構造を有するものが提供される。 第3の一連の化合物として、式（１）[式中、（ａ）Ｙは第１級アミン、ハロゲ ン、またはＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜 約20のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、ハロアリール部分、 アルキルアリール部分、またはアリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素 環式部分である）であり、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロア ルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、または アリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基 であり、（ｄ）Ｒ₂はハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、炭素数約５ 〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、 ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ −アルケニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル 部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリ ール部分、Ｎ−アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である） であり、（ｅ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩基である]で示される 構造を有するものが提供される。 第４の一連の化合物として、式（１）[式中、（ａ）Ｙは炭素数3〜約10の第１ 級アミン部分、Ｏ−アラルキル部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリール部分、 Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分岐鎖Ｏ−アルキル部分、ま たはＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜約20の アラルキル部分、ハロアリール部分、またはアルキルアリール部分、または炭素 数５〜10の芳香族複素環式部分である）であり、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のア ラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキル アリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり 、（ｃ）Ｒ₁は保護基であり、（ｄ）Ｒ₂はハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキ ル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ 、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ −アルキル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部 分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリ ール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、 Ｒ₄は保護基である）であり、（ｅ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩 基である]で示される構造を有するものが提供される。 Ｙが第１級アミン部分であるときは、該アミンはＮＨＲ₅（ここで、Ｒ₅は炭素 数１〜約20の直鎖または分岐鎖アルキル部分、アラルキル部分、アリール部分、 またアルキルアリール部分、炭素数３〜約８のシクロアルキル部分、または炭素 数約10〜約30のポリシクロアルキル部分である）であることが好ましい。 さらに、上記第2および第3の一連の化合物において、Ｒ₃がＣＨ₃またはＣＨ₂ Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₆（ここで、Ｒ₆はＨ、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖アルキル部分 、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキル部分、ハロゲン、またはＮＯ₂ である）であることが好ましい。あるいはまた、上記第１および第４の一連の 化合物において、Ｒ₃がＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₆（ここで、Ｒ₆はＨ、炭素数１〜約６の直 鎖または分岐鎖アルキル部分、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキル 部分、ハロゲン、またはＮＯ₂である）であることが好ましい。 本発明の別の目的は、二量体有機リン誘導体を提供することである。本発明の この目的のある態様は、 （ａ）Ｘが０またはＳであり、（ｂ）Ｚが炭素数約４〜約２０のアルキル部分、 炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキ ニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、または アミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁が保護基であり、（ｄ）Ｒ₂が炭素数１〜約20の アルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキル部分 、ＣＮ、Ｎ₃、ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、 Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニ ル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、またはＮ −アリール部分であり、（ｅ）Ｒ₉がアシル保護基、カップリング基、またはシ リル保護基であり、（ｆ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩基である式 （３）の構造を有する化合物である。 本発明の方法のさらに別の目的は、有機リンモノヌクレオシド誘導体の合成方 法を提供することである。本発明のある態様では、 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨまたは炭素 数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基である式 （２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムまたは酸化剤を加えて 、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドチオエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニ リドセレノエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリデートのジステレオ マーの混合物を生成する工程を含むあらゆる一連の化合物の合成方法が提供され る。好ましい態様では、酸化剤は、ヨード／2,6-ルチジン／H₂O、t-ブチルヒド ロパーオキシド、または（±）-（10-カンファースルホニル）オキザジリジンか らなる群から選ばれる。 本発明の別の態様では、 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨまたは炭素 数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基である式 （２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z- 置換）ホスホノアニリドチオエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレノ エートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）工程（ｂ）から得られるジアステレオマー混合物を水素化ナトリウムまた は1,8-ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エン、（DBU）、および二酸化炭素 と反応させて一時的ヌクレオシド（Z-置換）ホスホノチオン酸、（Z-置換）ホス ホノセレン酸を生成し、 （ｄ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤で処 理することにより工程（ｃ）の一時的ヌクレオシドをアルキル化する工程を含む 、ＹがＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳまたはＳｅであり、Ｒ₃はＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₇（ここ でＲ₇はＨ、Ｃｌ、またはＮＯ₂である）である上記第１および第４の一連の化合 物に従った化合物の合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨまたは炭素 数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基である式 （２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレ ノエートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することによりジアステレオマー混合物を酸化する工程を含 む上記第1および第４の一連の化合物の合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨまたは炭素 数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基である式 （２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレ ノエートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することにより該ジアステレオマー混合物を酸化して酸化さ れたジアステレオマーを得、 （ｄ）工程（ｃ）から得られる酸化されたジアステレオマーを水素化ナトリウム または1,8-ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二硫化炭素と反応さ せて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｅ）一般式Ｒ₈Ｚ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、Ｃｌまたは ＮＯ₂である）であり、ＺはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化 剤で処理することにより一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸 をアルキル化する工程を含む、ＹがＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳであり、Ｒ₃は-Ｃ Ｈ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₇（ここでＲ₇はＨ、Ｃｌ、またはＮＯ₂である）である上記第１およ び第４の一連の化合物の合成方法が提供される。 Ｒ₁保護がメトキシメチルエーテル、メトキシエトキシメチルエーテル、2(-ト リメチルシリル)エトキシエーテル、アシル、カルバモイル、置換シリル、4,4'- ジメトキシトリチル、または9-フェニルキサンテン-9-オキシルであることが好 ましい。 さらに、塩酸スカベンジャーがトリエチルアミン、ジイイソプロピルエチルア ミン、ピリジン、またはあらゆる第３級アルキルまたはアリールアミンであるこ とが好ましい。 さらに、酸化剤がカリウムパーオキシモノサルフェートまたは過酸化水素であ ることが好ましい。 本発明の別の態様では、先に得られた単量体有機リン誘導体を利用する有機リ ン誘導体ジヌクレオシドの合成方法が提供される。本発明のある態様では、 （ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8- ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的 ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）および（７ｂ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ 部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり 、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、 アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分 、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基で ある）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の合成方法が提供さ れる。 別の態様では、 （ａ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8- ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的 ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）および（11ｂ ）のヌクレオシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ 部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり 、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、 アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分 、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基で ある）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の合成方法が提供さ れ る。 さらに別の態様では、 （ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサル フェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）および（９ｂ）の中間体ヌク レオシドを生成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホス ホノチオン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と一 時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）および（７ｂ）のヌクレオ シド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラ ルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ） および（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜 約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシ リル保護基であり、Ｚはアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、ア ルケニル部分、アルキニル部分、または原子、アミノメチル、またはアミノエチ ルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のP-キラルジヌクレオシドの ジアステレオマー混合物の合成方法が提供される。 本発明のさらに別の態様では、（ａ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシ ドをカリウムパーオキシモノサルフェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ ａ）および（９ｂ）の中間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二セレン化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換） ホスホノセレン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ｂ）からの一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（９ａ）および（ ９ｂ）のヌクレオシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラ ルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ） および（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜 約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシ リル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハ ロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、ま たはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌ クレオシド塩基である）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の 合成方法が提供される。 本発明の別の目的は、キラル的に純粋な有機リン誘導体ジヌクレオチドの合成 方法を提供することである。本発明のこの目的のある態様では、 （ａ）式（８ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシクロ ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3' -O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のヌクレオシ ド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｂ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル 的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は 保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、 Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数 １〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部 分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチ ル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラ ル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 本発明の別の態様では、 （ａ）式（10ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシクロ ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3' -O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のヌクレオシ ド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｂ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル 的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は 保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、 Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数 １〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部 分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチ ル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラ ル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまたは 過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の一時的ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホス ホノチオン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のアルキル化 ヌクレオシドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キ ラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁ は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉ はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜 約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、 またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的 に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 本発明のさらに別の態様では、 （ａ）式（10ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまたは 過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の中間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二セレン化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換） ホスホノセレン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のアルキル化 ヌクレオシドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キ ラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁ は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉ はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜 約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、 またはアミノエチルであり、（ｅ）ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキ ラル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二酸化 炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオン酸を形 成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のアルキル化 ヌクレオシドを形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｂ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キ ラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁ は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉ はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜 約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、 またはアミノエチルであり、（ｅ）ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキ ラル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）式（１０ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二酸 化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセレン酸を 形成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（１１ｂ）のアルキル 化ヌクレオシドを形成し、（ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびア クチベーターの存在下で、工程（ｂ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌ クレオシドを反応させ、キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む 、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のア ルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護 基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキ ル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリ ール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｅ）ＢはＮ−保護ヌク レオシド塩基である）のキラル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供され る。 さらに別の態様では、 （ａ）式（８ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまたは 過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホス ホノチオン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のアルキル化 ヌクレオシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のアルキル化中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的 に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保 護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシ ル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０ のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキ ニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、または アミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋 なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 さらに別の態様では、 （ａ）式（10ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまたは 過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）工程（ａ）から得られる中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤ ＢＵおよび二セレン化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換） ホスホノセレン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と工 程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ｂ）のアルキル化 ヌクレオシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応さ せ、キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここ で、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり 、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素 数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル 部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメ チル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキ ラル的に純粋なジヌクレオシドの合成方法が提供される。 非プロトン性有機溶媒がアセトニトリルであり、アクチベーターが1,8-ジアザ ビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンであることが好ましい。 図面の簡単な説明 図１は、式（１）の有機リンモノヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図２は、式（２）の有機リンモノヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図３は、式（３）の有機リンジヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図４は、式（４）の有機リンモノヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図５は、式（５）の有機リンモノヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図６は、式（６ａ）および（６ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図７は、式（７ａ）および（７ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図８は、式（８ａ）および（８ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図９は、式（９ａ）および（９ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図10は、式（10ａ）および（10ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図11は、式（11ａ）および（11ｂ）のジアステレオマー有機リンジヌクレオシ ド誘導体の化学構造を示す。 図12は、式（12）の有機リンジヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図13は、式（13）の有機リンジヌクレオシド誘導体の化学構造を示す。 図14は、ジアステレオマー有機リン誘導体（８ａ）および（８ｂ）からの式（ ６ａ）の有機リンジヌクレオチドの合成方法に関する反応式を示す。 図15は、ジアステレオマー有機リン誘導体（８ａ）および（８ｂ）からの式（ ６ｂ）の有機リンジヌクレオチドの合成方法に関する反応式を示す。 図16は、ジアステレオマー有機リン誘導体（10ａ）および（10ｂ）からの式（ ６ａ）の有機リンジヌクレオチドの合成方法に関する反応式を示す。 図17は、ジアステレオマー有機リン誘導体10ａおよび10ｂからの式６ｂの有機 リンジヌクレオチドの合成方法に関する反応式を示す。 詳細な説明 本発明を説明する前に、以下で使用する用語の定義を最初に示すことが本発明 の理解を助けるであろう。これらの用語は特記しない限り以下の意味を有する。 用語「アルキル」は、直鎖、分岐鎖、および環状の基を含む飽和脂肪族基を表 す。適切なアルキル基には、シクロヘキシルおよびシクロヘキシルメチルが含ま れる。「低級アルキル」は、炭素数１〜６のアルキル基を表す。 用語「アリール」は、共役(conjugated)ｐｉ電子系を有する少なくとも１個の 環を有する芳香族基を表し、炭素環式アリール、複素環式アリール、ビアリール 基（これらはすべて所望により置換されていてもよい）を含む。 用語「炭素環式アリール」は、芳香族環の環形成原子が炭素原子である芳香族 基を表す。炭素環式基には、単環状炭素環式アリール基およびナフチル基（これ らはすべて所望により置換されていてもよい）が含まれる。適切な炭素環式アリ ール基には、フェニルおよびナフチルが含まれる。 用語「芳香族複素環」は、芳香族環の環形成原子として１〜３個の異種原子を 有する芳香族基を表し、残る環形成原子は炭素原子である。適切な異種原子には 、酸素、硫黄および窒素が含まれ、適切な複素環式アリールには、フラニル、チ エニル、ポイリジル、ピロイリル、ピリミジル、ピラジニル、イミダゾリルなど が含まれる。 用語「ビアリール」は、本明細書中で定義された炭素環式または複素環式アリ ールによって置換されたフェニル（フェニル環の結合位置に対してオルソ、メタ またはパラ、好都合にはパラ）を表す。 本明細書において有機基または化合物と併せて用いている用語「低級」は、炭 素数が６およびそれ以下、好ましくは４およびそれ以下、好都合には１または２ であることを表す。そのような基は直鎖または分岐鎖であってよい。 用語「アルコキシ」は、−ＯＲ（ここで、Ｒはアルキルである）を表す。 用語「アラルキル」は、アリール基で置換されたアルキル基を表す。適切なア ラルキル基には、ベンジル、ピコリルなど（これらはすべて所望により置換され ていてよい）が含まれる。 用語「シクロアルキル」は、環状アルキル基を表す。適切なシクロアルキル基 にはシクロヘキシルが含まれる。 用語「アルケニル」は、少なくとも１個の二重結合を有する不飽和脂肪族基を 表す。 用語「アルキレン」は、二価の、直鎖または分岐鎖の飽和脂肪族基を表す。 用語「ヌクレオシド塩基」は、アデニン、グアニン、シトシン、チミジン、ウ ラシル、ならびに偽(pseudo-)イソシトシンおよび偽ウラシルのようなピリミジ ン類似体を含む天然の塩基の修飾形および類似体、および8-置換プリンのような 他の修飾塩基を表す。 用語「Ｚ−置換（された）」は、Ｚが炭素数１〜約２０のアラルキル部分、ハ ロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、またはアルキルアリール部 分、アミノメチル、またはアミノエチルであるＺ置換体を含む反応体または試薬 を表し、該試薬または反応体は明記されたもの、例えば、ジクロロホスフィン、 ホスホノチオン酸、ホスホノセレン酸、ホスホノアニリドセレノエート、または ホスホノアニリドチオエートである。 用語「モノヌクレオシド」、「ジヌクレオシド」およびオリゴヌクレオシド中 で使用する用語「ヌクレオシド」は、５−炭素糖および窒素含有塩基を含む核酸 サブユニットを表す。該用語には、アデニン、グアニン、シトシン、チミジンお よびウラシルをその塩基として有するそれらのヌクレオシジル単位、および偽イ ソシトシンおよび偽ウラシルのようなピリミジン類似体を含む天然の塩基の類似 体および修飾形、ならびに8-置換プリンのような他の修飾塩基が含まれる。ＲＮ Ａでは５−炭素糖はリボースであり、ＤＮＡでは５−炭素糖はデオキシリボース である。用語ヌクレオシドには、例えば2'-O-アルキルリボースのような修飾さ れた糖を有するものを含むそのようなサブユニットの他の類似体も含まれる。接 頭辞「モノ」、「ジ」および「オリゴ」は、存在するヌクレオシドの数を表す。 「モノ」は１を意味し、ヌクレオシド１個を表し、「ジ」は２を意味し、ヌクレ オシド２個を含む化合物を表し、「オリゴ」は多数を意味し、複数個のヌクレオ シドを有する化合物を表す。 有機リン誘導体の修飾および合成するのに利用可能な方法が限られているため 、ヌクレアーゼに対する耐性と、アンチセンスオリゴヌクレオチド診断薬、治療 薬および研究にとって十分なハイブリダイゼーション特性を有する他の修飾法が 求め続けられてきた。下記のすべての引用文献は本明細書の一部を構成する。 本発明の有機リン誘導体は、診断薬、治療薬、研究用試薬として有用なオリゴ ヌクレオチドを製造するのに使用でき、またキットで使用することができる。 キラル的に純粋な有機リン誘導体は、予め選択したリラリティー（Ｒｐ配置、 Ｓｐ配置またはその混合物のいずれかが豊富）のオリゴヌクレオシドを合成する のに用いることができよう。 特に、ホスホネートでキラリティーが限定された本発明の有機リンジヌクレオ シド誘導体は、自動化ＤＮＡ合成装置を用いて一緒にカップリングさせることが できよう。二量体シントン（synthon）は、一緒にカップリングしてキラル的に 豊富化されたホスホネートオリゴマーが得られるカップリング基を有する（実施 例１〜13参照）。製造した有機リンジヌクレオシド誘導体のストックからあらゆ るヌクレオシド塩基配列のオリゴヌクレオシドは、適切なジヌクレオシドを一緒 に結合させることにより合成することができよう。所望の数のヌクレオシドを有 するオリゴヌクレオチドが得られるまで、成長しているオリゴヌクレオシド鎖に ジヌレオシドに加える。得られるオリゴヌクレオシドは１つおきの結合で限定さ れたキラリティーを有する。 このようにして生成されたオリゴヌクレオチドは二重または三重らせんコンプ レックス、または核酸の転写領域と安定に結合した他の形を形成するため、それ らは生細胞中の特定遺伝子または標的配列の発現を干渉もしくは阻害するかまた は変化させ、発現を選択的に不活化もしくは阻害するか、または変化させるのに 用いることができよう。標的配列はプレ−ｍＲＮＡまたはｍＲＮＡのようなＲＮ ＡまたはＤＮＡであってよい。 多くの疾病および他の異常は、ある場合には一本鎖であり、他の場合には二本 鎖であってよい、望ましくないＤＮＡまたはＲＮＡの存在によって特徴づけられ る。これらの疾病および異常は、当該分野で一般に理解されているアンチセンス 療法の原理を用いて治療することができる。 好ましい態様では、本発明は有機リンモノヌクレオシドおよびジヌクレオシド 誘導体、およびその合成方法に関する。本発明のモノヌクレオシドは式（１）：［式中、Ｙは炭素数１〜約10の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−ア リール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、またはＳｅ−ハロアルキル部分、またはＸ₁ Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、ＳまたはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数６〜約20のアラルキ ル部分、ハロアリール部分、またはアルキルアリール部分、または炭素数５〜10 の芳香族複素環式部分である）であり、 Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、またはアルキルアリール部分、アミノメチルまたはアミノエチ ルであり、 Ｒ₁は保護基であり、 Ｒ₂はＨ、ハロゲン、炭素数１〜約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のア ルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、Ｏ ＣＦ₃、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ−アル ケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部分、 Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、またはＮ−アリー ル部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）であり、 Ｂは所望により保護されたヌクレオチド塩基である］ によって特徴づけられる。 本発明の別のモノヌクレオシドは、Ｚ、Ｒ₁およびＢが前記と同意義であり、 Ｙがアミン部分、ハロゲンまたはＸ₁Ｒ₃（ここでＸ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅで あり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部 分、ハロアリール部分、アルキルアリール部分またはアリール部分、または炭素 数５〜10の芳香族複素環式部分であり、 Ｒ₂がハロゲン、炭素数１〜約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキ ルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃ 、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部 分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アル キニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ− アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）である式（１） によって特徴づけられる。 本発明のさらに別のモノヌクレオシドは、Ｚ、Ｒ₁およびＢが前記と同意義で あり、 Ｙが第１級アミン、ハロゲンまたはＸ₁Ｒ₃（ここでＸ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅ であり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル 部分、ハロアリール部分、アルキルアリール部分またはアリール部分、または炭 素数５〜10の芳香族複素環式部分であり、 Ｒ₂がハロゲン、炭素数１〜約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキ ルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃ 、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部 分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アル キニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ− アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）である式（１） によって特徴づけられる。 本発明のさらに別のモノヌクレオシドは、Ｚ、Ｒ₁およびＢが前記と同意義で あり、 Ｙが炭素数３〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−アラルキル、Ｓ−アリール部分 、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分岐 鎖Ｏ−アルキル部分またはＸ₁Ｒ₃（ここでＸ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃ は炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアリール部分またはアルキルアリール 部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環式部分であり、 Ｒ₂がハロゲン、炭素数１〜約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキ ルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃ 、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部 分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アル キニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ− アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）である式（１） によって特徴づけられる。 Ｙがアミン部分であるときは、該アミン部分はＮＨＲ₅（ここで、Ｒ₅は炭素数 １〜約20の直鎖または分岐鎖アルキル部分、アラルキル部分、アリール部分、ま たはアルキルアリール部分であり、炭素数３〜約８のシクロアルキル部分、また は炭素数10から約30のポリシクロアルキル部分である）からなる群から選ばれる ことが好ましい。 Ｙがアミン部分、ハロゲンまたはＸ₁Ｒ₃（Ｘ₁はＯ、ＳまたはＳｅである）で あるときは、Ｒ₃はＣＨ₃またはCH₂C₆H₄R₆（ここで、Ｒ₆はＨまたは炭素数１〜約 ６の直鎖または分岐鎖アルキル部分、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロア ルキル部分、ハロゲンまたはＮＯ₂である）であることが好ましい。 Ｙが炭素数１〜約10の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリール 部分、Ｓ−ハロアルキル部分またはＳｅ−ハロアルキル部分であるか、またはＹ が炭素数３〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−アラルキル、Ｓ−アリール部分、Ｓ ｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分岐鎖Ｏ −アルキル部分またはＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、ＳまたはＳｅである）である ときは、Ｒ₃はCH₂C₆H₄R₆（ここで、Ｒ₆はＨまたは炭素数１〜約６の直鎖または 分岐鎖アルキル部分、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキル部分、ハ ロゲンまたはＮＯ₂である）であることが好ましい。 本発明のジヌクレオシドは式（３）：［式中、ＸはＯまたはＳであり、 Ｚは炭素数約４〜約20のアルキル部分、炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハ ロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、ま たはアリール部分、アミノメチルまたはアミノエチルであり、 Ｒ₁は保護基であり、 Ｒ₂は炭素数１〜約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリール 部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｓ−アルキル 部分、Ｎ−アルキル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アル キニル部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ −アリール部分、またはＮ−アリール部分であり、 Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、 Ｂはヌクレオシド塩基である］ によって特徴づけられる。 上記で得られたモノヌクレオチド化合物は、本発明が提供する種々の方法によ って合成することができよう。ある合成方法によれば、本発明のモノヌクレオチ ド化合物は、 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｚ−置換ジクロロホスフィン、および 式（２）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコ キシド部分であり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のヌクレオシドを反 応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムまたは酸化剤を加え 、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドチオエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニ リドセレノエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリデートのジアステレオマー 混合物を生成する。 好ましくは、酸化剤は、ヨウ素／2,6-ルチジン／H₂O、t-ブチルヒドロパーオ キシド、または（±）-（10-カンファースルホニル）オキサジリジンである。 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｚ−置換ジクロロホスフィン、および 式（２）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコ キシド部分であり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のヌクレオシドを反 応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加え、3'-O-（Z- 置換）ホスホノアニリドチオエートまたは3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセ レノエートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）ジアステレオマー混合物を水素化ナトリウム、または1,8-ジアザビシク ロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド（ Z-置換）ホスホノチオン酸または（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｄ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、Ｃｌ、またはＮ Ｏ₂であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤で処理す ることにより該一時的ヌクレオシドをアルキル化することを含む、Ｚ、Ｒ₁およ びＢが前記と同意義であり、 （２）Ｙが炭素数１〜約10の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−ア リール部分、Ｓ−ハロアルキル部分またはＳｅ−ハロアルキル部分であるか、 Ｙが、炭素数３〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−アラルキル、Ｓ−アリール部 分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分 岐鎖Ｏ−アルキル部分であるか、または Ｙが、Ｘ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳまたはＳｅであり、Ｒ₃はCH₂C₆H₄R₇（ここで 、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂である）である式（１）のモノヌクレオシド化合物 の別の合成方法が好ましい。 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｚ−置換ジクロロホスフィン、および 式（２）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコ キシド部分であり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のヌクレオシドを反 応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加え、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエートまたは3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレノ エートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することによりジアステレオマー混合物を酸化することを 含む、Ｚ、Ｒ₁およびＢが前記と同意義であり、 （２）Ｙが炭素数１〜10の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリ ール部分、Ｓ−ハロアルキル部分またはＳｅ−ハロアルキル部分であるか、 Ｙが、炭素数３〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−アラルキル、Ｓ−アリール部 分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分 岐鎖Ｏ−アルキル部分であるか、または Ｙが、Ｘ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、ＳまたはＳｅであり、Ｒ₃はCH₂C₆H₄R₆（こ こで、Ｒ₆はＨ、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖アルキル部分、炭素数１〜 約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキル部分、ハロゲン、またはＮＯ₂である）で ある式（１）のモノヌクレオシド化合物の別の合成方法がさらに好ましい。 （ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｚ−置換ジクロロホスフィン、および 式（２）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコ キシド部分であり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のヌクレオシドを反 応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加え、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエートまたは3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレノ エートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することによりジアステレオマー混合物を酸化して酸化さ れたジアステレオマーを得、 （ｄ）酸化されたジアステレオマーを水素化ナトリウム、または1,8-ジアザビ シクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンおよび二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシ ド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｅ）一般式Ｒ₈Ｚ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、Ｃｌ、また はＮＯ₂である）であり、ＺはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル 化剤で処理することにより一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン 酸をアルキル化することを含む、Ｚ、Ｒ₁およびＢが前記と同意義であり、 （２）Ｙが炭素数１〜10の第１級アミン部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリ ール部分、Ｓ−ハロアルキル部分またはＳｅ−ハロアルキル部分であるか、 Ｙが、炭素数３〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−アラルキル、Ｓ−アリール部 分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分 岐鎖Ｏ−アルキル部分であるか、または Ｙが、Ｘ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳであり、Ｒ₃はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、 ＣｌまたはＮＯ₂である）である式（１）によって特徴づけられるモノヌクレオ シド化合物の別の合成方法がさらに好ましい。 上記合成方法に用いる式（２）のヌクレオシドのＲ₁保護基はメトキシメチル エーテル、メトキシエトキシメチルエーテル、２（−トリメチルシリル）エトキ シエーテル、アシル、カルバモイル、置換シリル、4,4'-ジメトキシトリチルま たは9-フェニルキサンテン-9-オキシルであることが好ましい。 上記合成方法に用いる塩酸スカベンジャーはトリエチルアミン、ジイソプロピ ルエチルアミン、ピリジンまたはあらゆる第３級アルキルもしくはアリールアミ ンであることも好ましい。当業者に知られている他の塩酸スカベンジャーを用い ることもできよう。 さらに、上記合成方法に用いる酸化剤はカリウムパーオキシモノサルフェート または過酸化水素であることが好ましい。 Ｐ−キラルジヌクレオチドのジアステレオマー混合物を合成するための種々の 方法が提供される。 式（６ａ）および（６ｂ）のジヌクレオチドを製造するための１つの合成方法 には、 （ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1, 8-ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時 的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 工程（ａ）から得られる一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ） および（７ｂ）のヌクレオシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 式（６ａ）および（６ｂ）のジヌクレオチドを合成するためのP-キラルジヌク レオチドのジアステレオマー混合物の別の合成方法には、（ａ）式（10ａ）およ び（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシクロ［5.4. 0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z -置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）および（11ｂ）のヌク レオシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌク レオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 式（６ａ）および（６ｂ）のジヌクレオチドを合成するためのP-キラルジヌク レオチドのジアステレオマー混合物の別の合成方法には、（ａ）式（10ａ）およ び（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシクロ［5.4. 0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z -置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）および（11ｂ）のヌ クレオシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌク レオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 式（６ａ）および（６ｂ）のジヌクレオチドのさらに別の合成方法には、（ａ ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジア ザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌク レオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）および（11ｂ）のヌク レオシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌク レオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 式（６ａ）および（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまた は炭素数１〜10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基ま たはシリル保護基であり、Ｚはアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部 分、アルケニル部分、アルキニル部分、または原子、アミノメチル、またはアミ ノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のジヌクレオチドのさ らに別の合成方法には、 （ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサ ルフェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）および（９ｂ）の中間体ヌ クレオシドを形成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二硫化炭 素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオン酸を形成 し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）および（７ｂ）のヌ クレオシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ａ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キ ラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 式（６ａ）および（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまた は炭素数１〜10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基ま たはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキル部分 、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分 またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護 ヌクレオシド塩基である）のＰ−キラルジヌクレオシドのさらに別の合成方法に は、 （ａ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモ ノサルフェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）および（９ｂ）の中間 体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二セレン 化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセレン酸を 形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（９ａ）および（９ｂ）のヌ クレオシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌク レオシドのジアステレオマー混合物を形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチドを合成するために種々の合成方法が提供され る。キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、 Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、 カップリング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分 、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アル キルアリール部分、アリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）の１つの合成方法には、 （ａ）式（８ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシク ロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド 3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と工程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｂ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラ ル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カ ッ プリング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、ア ラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキル アリール部分、アリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、Ｂは Ｎ−保護ヌクレオシド塩基である）の別の合成方法には、 （ａ）式（10ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシク ロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド 3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と工程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｂ）のヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラ ル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップ リング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラ ルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルア リール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 （ｅ）ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のさらに別の合成方法には、 （ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまた は過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）工程（ａ）の中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよ び二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン 酸を生成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 工程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のアルキル 化ヌクレオシドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、 キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップ リング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラ ルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルア リール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 （ｅ）ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のさらに別の合成方法には、 （ａ）式（10ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまた は過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）工程（ａ）の中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよ び２セレン化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセ レン酸を生成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈は-CH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 と工程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のアルキ ル化ヌクレオシドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、 キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カッ プリング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、ア ラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキル アリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり 、（ｅ）ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）の合成方法には、 （ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二酸 化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生 成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 工程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のヌクレオ シドを形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｂ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、 キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリ ング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラル キル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリ ール部分、アリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｅ）Ｂ はＮ−保護ヌクレオシド塩基である）の別の合成方法には、 （ａ）式（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二酸 化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生 成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨＮＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 工程（ａ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ｂ）のヌクレオ シドを形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、 キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップ リング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラ ルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルア リール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）の別の合成方法には、 （ａ）式（８ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまた は過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）工程（ａ）の中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよ び二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン 酸を生成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 工程（ｂ）の一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のヌクレオ シド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応 させ、キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 キラル的に純粋なジヌクレオチド（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂ はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ基であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップ リング基またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラ ルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルア リール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋なジヌクレオチドのさ らに別の合成方法には、 （ａ）式（10ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェートまた は過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二セレン化 炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成 し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と 該一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ｂ）のヌクレオシド中間体 を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で 、工程（ｃ）のアルキル化ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応 させ、キラル的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程が含まれる。 本合成方法で用いる非プロトン性溶媒がアセトニトリルであるときは、アクチ ベーターは1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンであることが好ましい。 本発明の理解を助けるため、一連の実験の結果を記載した以下の実施例が含ま れる。もちろん、本発明に関連する以下の実施例は本発明を具体的に限定するも のと解釈すべきではなく、当業者の範囲内にあると思われる現在知られているか または今後開発される本発明のそのような変化は、本明細書および特許請求の範 囲に記載のごとく本発明の範囲内にあるものと考えられる。 以下の実施例は例示であって限定を意図するものではない。 実施例 実施例１ 式８（ＺはＣＨ₃である）の一般的合成手順 −40℃に冷却したＴＨＦ中のメチルジクロロホスフィン（0.29g、2.5mmol）お よびトリエチルアミン（0.55g、5.5mmol)の溶液に、ＴＨＦ(10mL)中の適切に保 護されたヌクレオシド（1.0mmol）の溶液を徐々に加えた。30分後、反応混合物 を室温に温め、アニリン（0.28g、3.0mmol）、次いで硫黄元素を滴加した。次い で反応物をｔｌｃにかけ、それが終わったら反応混合物をクロロホルムで希釈し 、NaHCO₃水溶液で抽出した。抽出物を無水Na₂SO₄で乾燥し、減圧下で濃縮して粗 生成物を得、これをクロロホルム中のヘプタン（10〜20％）混合物を用いるシリ カゲル（230-400メッシュ）フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。適 切な分画を混合し、減圧下で濃縮して所望の生成物をジアステレオマー混合物と して得た。実施例２ ［Ｒｐ，Ｓｐ］−5'−Ｏ−ＤＭＴ−チミジン３’−Ｏ−（メチルホスホノアニリ ドチオエート） 実施例１に記載の一般的手順に従って、5'-O-チミジン（0.540g、１mmol）か ら標記化合物混合物を製造し、固形白色泡沫状物を得た。 収量：0.66g（93％）。³¹ P NMR（CDCl₃）σ79.44、79.58;MS(FAB^-)m/e 712.4[(M-H)^-]。 実施例３ ［Ｒｐ，Ｓｐ］−5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ⁴−ベンゾイル−２’−デオキシシチジン ３’−Ｏ−（メチルホスホノアニリドチオエート） 実施例１に記載の一般的手順に従って、5'-O-ＤＭＴ−Ｎ⁴−ベンゾイル−２’ −デオキシシチジン（１mmol）から標記化合物混合物を製造し、無色泡沫状物を 得た。 収率：70％。³¹ P NMR（CDCl₃／C₆D₆）σ79.38、79.74。 実施例４ ［Ｒｐ，Ｓｐ］−5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ⁶−ベンゾイル−２’−デオキシアデノシ ン３’−Ｏ−（メチルホスホノアニリドチオエート） 実施例１に記載の一般的手順に従って、5'-O-ＤＭＴ−Ｎ⁶−２’−デオキシア デノシン（0.657g、１mmol）から標記化合物混合物を製造し、無色泡沫状物を得 た。 収率：75％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ79.21、79.60。 実施例５ ［Ｒｐ，Ｓｐ］−5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ²−イソブチリル−２’−デオキシグアノ シン３’−Ｏ−（メチルホスホノアニリドチオエート） 実施例１に記載の一般的手順に従って、5'-O-ＤＭＴ−Ｎ²−イソブチリル−２ ’−デオキシグアノシン（0.640g、１mmol）から標記化合物混合物を製造し、白 色泡沫状物を得た。 収量：0.71g（98％）。³¹ P NMR（CDCL₃）σ79.65、79.72。 実施例６ ［Ｒｐ，Ｓｐ］−5'−Ｏ−ＤＭＴ−２’−メチルウリジン３’−Ｏ−（メチルホ スホノアニリドチオエート） 実施例１に記載の一般的手順に従って、5'-O-ＤＭＴ−２’−メチルウリジン （0.540g、１mmol）から標記化合物混合物を製造し、無色泡沫状物を得た。 収量：0.68g（85％）。³¹ P NMR（CDCL₃）σ81.96、81.38。実施例７ 式８のジアステレオマーの分離 実施例２〜６に記載の式８のＲｐおよびＳｐジアステレオマーの分離は、クロ ロホルム中の10〜20％ヘプタン混合物を溶離剤に用いるシリカゲルフラッシュク ロマトグラフィーにより実施された。 表1 実施例／８ ジアステレオマー* ³¹P NMR （σ） ＩＩ；Ｂ＝チミン 速 79.44 遅 79.58 ＩＩＩ；Ｂ＝シトシン 速 79.38 遅 79.74 IV；Ｂ＝アデニン 速 79.21 遅 79.60 V；Ｂ＝グアニン 速 79.65 遅 79.72 VI；Ｂ＝ウラシル 速 81.38 遅 81.96 *シリカゲルでの移動度（Kieselgel 60，240-400メッシュ）；溶離剤CHCl₃/MeOH (95:5v/v) 実施例８ ５’−Ｏ−ＤＭＴ−（Ｎ−保護）ヌクレオシド３’−Ｏ−（Ｓ−ベンジルメチル ホスホノチオエート）（式７ａおよび７ｂ、ＺはＣＨ₃である）の一般的合成手 順 乾燥DMF（10mL）中の対応するヌクレオシド3'-O-（メチルホスホノアニリドチ オエート）８（1mmol）の撹拌溶液に、NaH（1.2モル当量）を数回に分けて加え た。水素の放出が止むまで撹拌を続けた。得られたスラリーに乾燥ガス状CO₂流 を導入した。反応の進行をTLCによってモニターした。反応混合物に臭化ベンジ ル（5mmol）を加えた。反応が完結したときに、ロータリーエバポレーターによ っ て溶媒および過剰の臭化ベンジルを除去した。固体残留物をCHCl₃に溶解し、飽 和NaHCO₃水溶液で洗浄し、乾燥し、濃縮した。粗生成物を、クロロホルム中の0- 5％エタノールを溶離剤に用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによ り精製した。基質８をジアステレオマー混合物として反応させてから、精製方法 と分離方法を組み合わせて純粋なジアステレオマー７ａ（遅）および７ｂ（速） を得た。 実施例９ ５’−Ｏ−ＤＭＴ−チミジン３’−Ｏ−（Ｓ−ベンジルメチルホスホノチオエー ト） 実施例８に記載の一般的手順に従って８（Ｂはチミンであり、ＺはＣＨ₃であ る）（0.712g、1mmol）から標記化合物を製造した。 収量：0.55g（86％）³¹ P NMR（CDCl₃）σ56.44、55.94。 実施例１０ 5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ⁴−ベンゾイル−２’−デオキシシチジン３’−Ｏ−（Ｓ− ベンゾイルメチルホスホノチオエート） 実施例８に記載の一般的手順に従って、８（Ｂはシトシンであり、ＺはＣＨ₃ である）（１mmol）から標記化合物を製造した。 収率：82％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ55.41、55.21。 実施例１１ 5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ⁶−ベンゾイル-２’−デオキシアデノシン３’−Ｏ−（Ｓ− ベンゾイルメチルホスホノチオエート） 実施例８に記載の一般的手順に従って、８（Ａはアデニンであり、ＺはＣＨ₃ である）（１mmol）から標記化合物混合物を製造した。 収率：75％。³¹ P NMR（CDCl₃/C₆D₆）σ55.80、55.21ppm。 実施例１２ 5'−Ｏ−ＤＭＴ−Ｎ⁴−イソブチリル−２’−デオキシグアノシン３’−Ｏ−（ Ｓ−ベンゾイルメチルホスホノチオエート） 実施例８に記載の一般的手順に従って、８（Ｂはグアニンであり、ＺはＣＨ₃ である）（１mmol）から標記化合物を製造した。 収率：75％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ56.01、55.85。 実施例１３ カリウムパーオキシモノサルフェートを用いる（速）５’−Ｏ−ＤＭＴ−チミジ ン３’−Ｏ−（メチルホスホノチオアニリデート）８ａの（速）５’−Ｏ−ＤＭ Ｔ−チミジン３’−Ｏ−（メタンホスホノアニリデート）９ａへの酸化 Me0HとTHFの混合物中の化合物８ａ（0.072g、２mmol）の溶液に、カリウムパ ーオキシモノサルフェート（pH6.7-7、2mmol）の水溶液を加えた。10分後に10％ Na₂S₂O₃水溶液を加え、該混合物をクロロホルムで抽出した。抽出物を無水Na2SO 4で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、クロロホルム中の10−20％ヘプタンの混合 物を溶離剤に用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ジ アステレオマー的に純粋な（速）−９ａ 0.047g（73％）を得た。³¹ P NMR（CDCl₃）σ30.1。MS(FAB-)m/e 696.4[(M-H)^-]。 実施例１４ カリウムパーオキシモノサルフェートを用いる（遅）５’−Ｏ−ＤＭＴ−チミジ ン３’−Ｏ−（メチルホスホノチオアニリデート）８ｂの（遅）５’−Ｏ−ＤＭ Ｔ−チミジン３’−Ｏ−（メタンホスホノアニリデート）への酸化 ８ｂ（遅）の９ｂ（遅）への変換は実施例１３に記載の手順と類似の手順を用 いて行った。 収率：70％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ29.89。 実施例１５ ５’−Ｏ−ＤＭＴ−チミジン３’−Ｏ−メタンホスホノアニリデート９の５’− Ｏ−ＤＭＴ−チミジン３’−Ｏ−（Ｓ−ベンジルメタンホスホノチオエート） ７への変換 化合物９（速または遅）を、反応前に乾燥し、次いでＴＨＦ（2mL）に溶解し た。この溶液に1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン（ＤＢＵ）（0.02mL ）を加え、反応混合物を周囲温度で45分間撹拌し、次いでＣＳ₂（1mL）を加えた 。20分後に、臭化ベンジルを加え（５当量）、反応の進行をｔｌｃでモニターし た。反応が完結したときに、混合物を水で希釈し、クロロホルムで抽出した。抽 出物を無水Na₂SO₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、クロロホルム中の0-5％エ タノールを溶離剤に用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーによって精 製した。 化合物９ａ（速）から生成物７ｂ（速）を収率65％で得た。³¹ P NMR（CDCl₃）σ56.85。 化合物９ｂ（遅）を収率70％で７ａ（遅）に変換した。³¹ P NMR（CDCl₃）σ55.38。 実施例１６ ジヌクレオシド（３’，５’）メチルホスホネート（速）−６ａまたは（遅）− ６ｂ（ＺはＣＨ₃である）の一般的合成方法 対応するジアステレオマー的に純粋な化合物７（遅または速）（0.3mmol）お よび3'-O-アセチル(N-保護)-2'-デオキシヌクレオシド５（0.1mmol）を反応前に 乾燥し、次いで乾燥ピリジン（5mL）に溶解した。この溶液に塩化リチウム（0.1 25g、3mmol）、次いでピリジン（1.5mL）中のＤＢＵ（0.456g、3mmol）の溶液を 一回で加えた。反応物を室温で撹拌し、その進行をｔｌｃによりモニターした。 反応が完結した後、溶媒を蒸発させ、油状残留物をクロロホルムに溶解し、リン 酸緩衝液で抽出した。有機抽出物を無水Na₂SO₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物を 、クロロホルム中の0-3％エタノールの混合物を溶離剤に用いるシリカゲルフラ ッシュクロマトグラフィーにより精製した。 実施例１７ （速）−５’−Ｏ−ＤＭＴ−チミジリル−（３’Ｄ５’）−３’−Ｏ−アセチル チミジン３’−メチルホスホネート 実施例１６に記載の一般的手順に従って、標記化合物を対応する化合物（遅） −７ａから製造した。 収率：85％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ33.00。¹H NMR（CDCl₃）σ1.58(d，J_P-H=17.64Hz，3H,P-CH₃ )，MS（FAB^-）m/e 887[(M-H)^-]。 実施例１８ （速）−Ｎ⁴−ベンゾイル−５’−Ｏ−ＤＭＴ−２’−デオキシシチジリル−（ ３’Ｄ、５’）−Ｎ⁴−ベンゾイル-３’−Ｏ−アセチル-２’−デオキシシチジ ン３’−メチルホスホネート 実施例１６に記載の一般的手順に従って、標記化合物を対応する化合物（遅） −７ａから製造した。 収率：73％。³¹ P NMR（CDCl₃）σ33.08。¹H NMR（CDCl₃）σ1.6(d，J_P-H=17.5Hz，3H，P-CH₃) ，MS（FAB^-）m/e 1067[(m-H)^-]。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号 Ｐ−３１２９３４ (32)優先日 平成８年２月26日(1996．2．26) (33)優先権主張国 ポーランド（ＰＬ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＣＡ，ＪＰ，Ｋ Ｒ，ＮＺ (72)発明者 ヴォズニアク，ルチーナ ポーランド、ペエル−90−369ウッジ、ピ ョトルコヴスカ222エム６番 (72)発明者 ライリー，ティモシー アメリカ合衆国92129カリフォルニア州 サンディエゴ、ライマー・ウェイ9740番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式（１）［式中、（ａ）Ｙは炭素数１〜約10の第１級アミン部分、Ｓ−ア リール部分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分、またはＳｅ−ハロア ルキル部分であるか、またはＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり 、Ｒ₃は炭素数６〜約20のアラルキル部分、ハロアリール部分、またはアルキル アリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環式部分である）であり、（ｂ ）Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、またはアルキルアリール部分、アミノメチル、またはアミノエ チルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基であり、（ｄ）Ｒ₂はＨ、ハロゲン、炭素数１〜 約２０のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリール部分またはアラル キル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−ア ルキル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、 Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール 部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は 保護基である）であり、（ｅ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩基であ る］で示される化合物。 ２．式（１）［式中、Ｙはアミン部分、ハロゲン、またはＸ₁Ｒ₃(ここで、Ｘ₁ はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキ ル部分、ハロアルキル部分、ハロアリール部分、アルキルアリール部分、または アリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環式部分である）であり、（ｂ ）Ｚは炭素数１〜約20のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、ア ルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、 アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基であり、（ｄ） Ｒ₂はＨ、ハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、炭素数約５〜約20のア ルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、Ｏ ＣＦ₃、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケ ニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ −アルキニ ル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリ ール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）であり、（ｅ）Ｂは 所望により保護されたヌクレオシド塩基である］で示される化合物。 ３．式（１）［式中、（ａ）Ｙは第１級アミン、ハロゲン、またはＸ₁Ｒ₃（こ こで、Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のアルキル部分、 アラルキル部分、ハロアルキル部分、ハロアリール部分、アルキルアリール部分 、またはアリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素環式部分である）であ り、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニ ル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノ メチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基であり、（ｄ）Ｒ₂はハ ロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリー ル部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｏ−ア ルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ−アルケニル部分、Ｓ− アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−アルキニル部 分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、Ｎ−アリール 部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）であり、（ｅ）Ｂは所望 により保護されたヌクレオシド塩基である］で示される化合物。 ４．式（１）［式中、（ａ）Ｙは炭素数3〜約10の第１級アミン部分、Ｏ−ア ラルキル部分、Ｓ−アリール部分、Ｓｅ−アリール部分、Ｓ−ハロアルキル部分 、Ｓｅ−ハロアルキル部分、分岐鎖Ｏ−アルキル部分、またはＸ₁Ｒ₃（ここで、 Ｘ₁はＯ、Ｓ、またはＳｅであり、Ｒ₃は炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロ アリール部分、またはアルキルアリール部分、または炭素数５〜10の芳香族複素 環式部分である）であり、（ｂ）Ｚは炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロア ルキル部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、または アリール部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁は保護基 であり、（ｄ）Ｒ₂はハロゲン、炭素数１〜約２０のアルキル部分、炭素数約５ 〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキル部分、ＣＮ、Ｎ₃、保護ＮＨ₂、 ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｏ−アルキル部分、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル部分、Ｏ − アルケニル部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部 分、Ｓ−アルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリー ル部分、Ｎ−アリール部分、またはＯ（Ｒ₄）（ここで、Ｒ₄は保護基である）で あり、（ｅ）Ｂは所望により保護されたヌクレオシド塩基である］で示される化 合物。 ５．Ｙが第１級アミン部分ＮＨＲ₅（ここで、Ｒ₅は炭素数１〜約20の直鎖また は分岐鎖アルキル部分、アラルキル部分、アリール部分、またアルキルアリール 部分、炭素数３〜約８のシクロアルキル部分、または炭素数約10〜約30のポリシ クロアルキル部分である）である請求項１、２、３または４のいずれかに記載の 化合物。 ６．Ｒ₃がＣＨ₃またはＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₆（ここで、Ｒ₆はＨ、炭素数１〜約６の 直鎖または分岐鎖アルキル部分、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキ ル部分、ハロゲン、またはＮＯ₂である）である請求項２または３に記載の化合 物。 ７．Ｒ₃がＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₆（ここで、Ｒ₆はＨ、炭素数１〜約６の直鎖または分 岐鎖アルキル部分、炭素数１〜約６の直鎖または分岐鎖ハロアルキル部分、ハロ ゲン、またはＮＯ2である）である請求項１または４に記載の化合物。 ８．（ａ）Ｘが０またはＳであり、（ｂ）Ｚが炭素数約４〜約２０のアルキル 部分、炭素数１〜約20のアラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、 アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、 またはアミノエチルであり、（ｃ）Ｒ₁が保護基であり、（ｄ）Ｒ₂が炭素数１〜 約20のアルキル部分、炭素数約５〜約20のアルキルアリール部分またはアラルキ ル部分、ＣＮ、Ｎ₃、ＮＨ₂、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、Ｓ−アルキル部分、Ｎ−アルキル 部分、Ｓ−アルケニル部分、Ｎ−アルケニル部分、Ｏ−アルキニル部分、Ｓ−ア ルキニル部分、Ｎ−アルキニル部分、Ｏ−アリール部分、Ｓ−アリール部分、ま たはＮ−アリール部分であり、（ｅ）Ｒ₉がアシル保護基、カップリング基、ま たはシリル保護基であり、（ｆ）Ｂが所望により保護されたヌクレオシド塩基で ある式（３）で示される化合物。 ９．（ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨまた は炭素数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基で ある式（２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムまたは酸化剤を加えて 、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドチオエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニ リドセレノエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリデートのジステレオ マーの混合物を生成する工程を含む請求項１、２、３または４のいずれかに記載 の化合物の合成方法。 １０．酸化剤が、ヨード／2,6-ルチジン／H₂O、t-ブチルヒドロパーオキシド 、または（±）-（10-カンファースルホニル）オキザジリジンからなる群から選 ばれるものである請求項９に記載の方法。 １１．（ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨま たは炭素数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基 である式（２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応混合物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z- 置換）ホスホノアニリドチオエート、3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレノ エートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）ジアステレオマー混合物を水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシクロ［ 5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド（Z- 置換）ホスホノチオン酸、（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｄ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤で処 理することにより工程（ｃ）の一時的ヌクレオシドをアルキル化する工程を含む 、ＹがＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳまたはＳｅであり、Ｒ₃はＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₇（ここ でＲ₇はＨ、Ｃｌ、またはＮＯ₂である）である請求項１または４に記載の化合物 の合成方法。 １２．（ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨま たは炭素数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基 である式（２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレ ノエートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することによりジアステレオマー混合物を酸化する工程を含 む請求項１または４に記載の化合物の合成方法。 １３．（ａ）塩酸スカベンジャーの存在下で、Ｒ₁が保護基であり、Ｒ₂がＨま たは炭素数１〜約10のアルコキシド部分であり、ＢがＮ−保護ヌクレオシド塩基 である式（２）のヌクレオシドおよびＺ−置換ジクロロホスフィンを反応させ、 （ｂ）反応物にアニリンおよび硫黄またはセレニウムを加えて、3'-O-（Z-置換 ）ホスホノアニリドチオエート、または3'-O-（Z-置換）ホスホノアニリドセレ ノエートのジアステレオマー混合物を生成し、 （ｃ）酸化剤で処理することにより該ジアステレオマー混合物を酸化して酸化さ れたジアステレオマーを得、 （ｄ）酸化されたジアステレオマーを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザビシク ロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二硫化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド 3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｅ）一般式Ｒ₈Ｚ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮ Ｏ₂である）であり、ＺはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤 で処理することにより一時的ヌクレオチド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を アルキル化する工程を含む、ＹがＸ₁Ｒ₃（ここで、Ｘ₁はＳであり、Ｒ₃はＣＨ₂ Ｃ₆Ｈ₄Ｒ₇（ここでＲ₇はＨ、Ｃｌ、またはＮＯ₂である）である請求項１または ４に記載の化合物の合成方法。 １４．Ｒ₁がメトキシメチルエーテル、メトキシエトキシメチルエーテル、2(- トリメチルシリル)エトキシエーテル、アシル、カルバモイル、置換シリル、4,4 '-ジメトキシトリチル、または9-フェニルキサンテン-9-オキシルからなる群か ら選ばれる保護基である請求項９、１１、１２または１３のいずれかに記載の方 法。 １５．塩酸スカベンジャーがトリエチルアミン、ジイイソプロピルエチルアミ ン、ピリジン、第３級アルキルアミンまたは第３級アリールアミンからなる群か ら選ばれる保護基である請求項９、１１、１２または１３のいずれかに記載の方 法。 １６．酸化剤がカリウムパーオキシモノサルフェートまたは過酸化水素である 請求項９、１２または１３のいずれかに記載の方法。 １７．（ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムま たは1,8-ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させ て一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）および（７ｂ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ 部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり 、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、 アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分 、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基で ある）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の合成方法。 １８．（ａ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムま たは1,8-ジアザビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させ て一時的ヌクレオシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）および（11ｂ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ 部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり 、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、 アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分 、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基で ある）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の合成方法。 １９．（ａ）式（８ａ）および（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシ モノサルフェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）および（９ｂ）の中 間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二硫化炭素と 反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオン酸を形成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と一 時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）および（７ｂ）のヌクレオ シド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアル コキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基 であり、Ｚはアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部 分、アルキニル部分、または原子、アミノメチル、またはアミノエチルであり、 ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレ オマー混合物の合成方法。 ２０．（ａ）式（10ａ）および（10ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシ モノサルフェートまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）および（９ｂ）の中 間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二セレン化 炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセレン酸を形 成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（９ａ）および（９ｂ）のヌクレ オシド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、P-キラルジヌクレ オシドのジアステレオマー混合物を形成する工程を含む、式（６ａ）および（６ ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基であり、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアル コキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保護基、カップリング基、またはシリル保護基 であり、Ｚは炭素数１〜約２０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル 部分、アルケニル部分、アルキニル部分、アルキルアリール部分、またはアリー ル部分、アミノメチル、またはアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド 塩基である）のP-キラルジヌクレオシドのジアステレオマー混合物の合成方法。 ２１．（ａ）式（８ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザ ビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレ オシド3'-O-（Z-置換）ホスホノチオン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のヌクレオシド中間体を 形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純粋な ジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であ り、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル 保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０の アルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニ ル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはア ミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋な ジヌクレオシドの合成方法。 ２２．（ａ）式（10ａ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたは1,8-ジアザ ビシクロ［5.4.0］ウンデカ-7-エンおよび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレ オシド3'-O-（Z-置換）ホスホノセレン酸を生成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のヌクレオシド中間体を 形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純粋な ジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基であ り、Ｒ₂はＨ、ＯＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル 保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０の アルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニ ル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはア ミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋な ジヌクレオシドの合成方法。 ２３．（ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェー トまたは過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の一時的ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二硫化炭素 と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオン酸を形成し 、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ａ）のアルキル化ヌクレオシ ドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純 粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基 であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保 護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のア ルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル 部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミ ノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋なジ ヌクレオシドの合成方法。 ２４．（ａ）式（10ｂ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェー トまたは過酸化水素と反応させて式（９ｂ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二セレン化 炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセレン酸を形 成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ａ）のアルキル化ヌクレオシ ドを形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純 粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ａ）（ここで、Ｒ₁は保護基 であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保 護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のア ルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル 部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミ ノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋なジ ヌクレオシドの合成方法。 ２５．（ａ）式（８ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよ び二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオ ン酸を形成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のアルキル化ヌクレオシ ドを形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純 粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基 であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保 護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のア ルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル 部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミ ノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋なジ ヌクレオシドの合成方法。 ２６．（ａ）式（１０ｂ）のヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵお よび二酸化炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセ レン酸を形成し、 （ｂ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（１１ｂ）のアルキル化ヌクレオ シドを形成し、 （ｃ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシドと式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル的に純 粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は保護基 であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はアシル保 護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２０のア ルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アルキニル 部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、またはアミ ノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純粋なジ ヌクレオシドの合成方法。 ２７．（ａ）式（８ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェー トまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを生成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二硫化炭素 と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノチオン酸を形成し 、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（７ｂ）のアルキル化ヌクレオシ ド中間体を形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル 的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は 保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はア シル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２ ０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アル キニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、また はアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純 粋なジヌクレオシドの合成方法。 ２８．（ａ）式（10ａ）のヌクレオシドをカリウムパーオキシモノサルフェー トまたは過酸化水素と反応させて式（９ａ）の中間体ヌクレオシドを形成し、 （ｂ）該中間体ヌクレオシドを水素化ナトリウムまたはＤＢＵおよび二セレン化 炭素と反応させて一時的ヌクレオシド3'-O-（Ｚ−置換）ホスホノセレン酸を形 成し、 （ｃ）式Ｒ₈Ｗ（ここで、Ｒ₈はCH₂C₆H₄R₇（ここで、Ｒ₇はＨ、ＣｌまたはＮＯ₂ である）であり、ＷはＣｌ、ＢｒまたはＩである）で示されるアルキル化剤と該 一時的ヌクレオシドを反応させることにより式（11ｂ）のヌクレオシド中間体を 形成し、 （ｄ）非プロトン性有機溶媒中のリチウム塩およびアクチベーターの存在下で、 該アルキル化ヌクレオシド中間体と式（５）のヌクレオシドを反応させ、キラル 的に純粋なジヌクレオシドを形成する工程を含む、式（６ｂ）（ここで、Ｒ₁は 保護基であり、Ｒ₂はＨまたは炭素数１〜約10のアルコキシ部分であり、Ｒ₉はア シル保護基、カップリング基、またはシリル保護基であり、Ｚは炭素数１〜約２ ０のアルキル部分、アラルキル部分、ハロアルキル部分、アルケニル部分、アル キニル部分、アルキルアリール部分、またはアリール部分、アミノメチル、また はアミノエチルであり、ＢはＮ−保護ヌクレオシド塩基である）のキラル的に純 粋なジヌクレオシドの合成方法。 ２９．非プロトン性有機溶媒がアセトニトリルである請求項１９、２０、２１ 、２２、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８のいずれかに記載の方 法。 ３０．アクチベーターが1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エンである請 求項１９、２０、２１、２２、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８ のいずれかに記載の方法。