JP2002034553A - Ｍｒｓａスクリーニング用培地 - Google Patents
Ｍｒｓａスクリーニング用培地Info
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
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Abstract
(57)【要約】
【課題】本発明は院内感染の原因菌として問題になって
いるＭＲＳＡの有無を、特殊な熟練や技術を必要とせず
に短時間で容易に検出できる特定の組成のスクリーニン
グ用培地を提供する。 【解決手段】本発明のＭＲＳＡスクリーニング用培地に
より、複数の細菌が混在する検体であっても、培地色
（コロニー色）の変化および蛍光の有無で容易にＭＲＳ
Ａの存在を確認できるようになった。
いるＭＲＳＡの有無を、特殊な熟練や技術を必要とせず
に短時間で容易に検出できる特定の組成のスクリーニン
グ用培地を提供する。 【解決手段】本発明のＭＲＳＡスクリーニング用培地に
より、複数の細菌が混在する検体であっても、培地色
（コロニー色）の変化および蛍光の有無で容易にＭＲＳ
Ａの存在を確認できるようになった。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、複数の細菌が混合
して存在する被検体から、多剤耐性を示すブドウ球菌す
なわちメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）の存
否を、容易に検出（スクリーニング）できる培地に関す
る。なお、本発明では次の略語を使用することがある。
して存在する被検体から、多剤耐性を示すブドウ球菌す
なわちメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）の存
否を、容易に検出（スクリーニング）できる培地に関す
る。なお、本発明では次の略語を使用することがある。
【０００２】
ＭＲＳＡ：メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Methicilli
n Resistant Staphylococcus aureus） ＭＳＳＡ：メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（Methicil
lin Sensitive Staphylococcus aureus） ＭＵＰ：４−メチルウンベリフェリルリン酸（4-Methyl
-Umbelliferyl Phosphate） ＣＡＭＨＢ：陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培
地 (Cation Adjusted Mueller Hinton Broth) ＮＣＣＬＳ：米国臨床検査標準委員会 (National Commi
tee for Clinical Laboratory Standards) ＭＩＣ：最小発育阻止濃度 (Minimum Inhibitory Conce
ntration)
n Resistant Staphylococcus aureus） ＭＳＳＡ：メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（Methicil
lin Sensitive Staphylococcus aureus） ＭＵＰ：４−メチルウンベリフェリルリン酸（4-Methyl
-Umbelliferyl Phosphate） ＣＡＭＨＢ：陽イオン調整ミューラー・ヒントン液体培
地 (Cation Adjusted Mueller Hinton Broth) ＮＣＣＬＳ：米国臨床検査標準委員会 (National Commi
tee for Clinical Laboratory Standards) ＭＩＣ：最小発育阻止濃度 (Minimum Inhibitory Conce
ntration)
【０００３】
【従来の技術】近年臨床的に院内感染が重要な問題にな
っており、特に院内感染症の起因菌として多剤耐性を獲
得したＭＲＳＡが注目されている。ＭＲＳＡは通常鼻腔
や咽頭などに常在、あるいは床や壁などの周辺環境に常
在することができる細菌である。これを保有する保菌者
を介して、あるいは周辺環境との接触により、癌、免疫
不全などの疾患、あるいは術後の抵抗力の低下した患者
などが感染した場合には重篤な症状を呈することがあ
る。このため保菌者や床などの周辺環境の状況を、前も
って簡単に、あるいはスクリーニング的に把握できるな
らば、保菌者の鼻腔や咽頭を消毒する、あるいは保菌者
と患者との接触を低減する、周辺環境の消毒を行うなど
の方策をとり、感染の伝播防止に寄与することができ
る。
っており、特に院内感染症の起因菌として多剤耐性を獲
得したＭＲＳＡが注目されている。ＭＲＳＡは通常鼻腔
や咽頭などに常在、あるいは床や壁などの周辺環境に常
在することができる細菌である。これを保有する保菌者
を介して、あるいは周辺環境との接触により、癌、免疫
不全などの疾患、あるいは術後の抵抗力の低下した患者
などが感染した場合には重篤な症状を呈することがあ
る。このため保菌者や床などの周辺環境の状況を、前も
って簡単に、あるいはスクリーニング的に把握できるな
らば、保菌者の鼻腔や咽頭を消毒する、あるいは保菌者
と患者との接触を低減する、周辺環境の消毒を行うなど
の方策をとり、感染の伝播防止に寄与することができ
る。
【０００４】これらの問題に対して、たとえば医療関係
者の鼻腔内、咽頭などや壁・床などの周辺環境より得ら
れた検体中にＭＲＳＡが存在するか否かを確認しようと
した場合には、検体中にはＭＲＳＡではない S.aureus
も含めた複数種類の細菌が混在している。また選択分離
培養をするにしても、検出対象の細菌の存在量が少ない
こともある。それ故、目的の細菌（ＭＲＳＡ）が低濃度
でも培養でき、かつ発育の有無を簡単に感知することを
可能とする検出用培地を提供することが重要である。検
体中にＭＲＳＡが存在するか否かを確認するには、ＭＲ
ＳＡの保菌者の鼻腔や咽頭などを綿棒などで拭った被検
物（擦過物）等を検体とし、ＭＲＳＡを選択的にスクリ
ーニングできる培地にそれを接種し、培養して判定す
る。また、この被検物中には必ずしも目的の細菌が多量
に含まれているわけではないので、可能な限り低濃度の
対象細菌に対しても培養ができる培地であることが必要
である。
者の鼻腔内、咽頭などや壁・床などの周辺環境より得ら
れた検体中にＭＲＳＡが存在するか否かを確認しようと
した場合には、検体中にはＭＲＳＡではない S.aureus
も含めた複数種類の細菌が混在している。また選択分離
培養をするにしても、検出対象の細菌の存在量が少ない
こともある。それ故、目的の細菌（ＭＲＳＡ）が低濃度
でも培養でき、かつ発育の有無を簡単に感知することを
可能とする検出用培地を提供することが重要である。検
体中にＭＲＳＡが存在するか否かを確認するには、ＭＲ
ＳＡの保菌者の鼻腔や咽頭などを綿棒などで拭った被検
物（擦過物）等を検体とし、ＭＲＳＡを選択的にスクリ
ーニングできる培地にそれを接種し、培養して判定す
る。また、この被検物中には必ずしも目的の細菌が多量
に含まれているわけではないので、可能な限り低濃度の
対象細菌に対しても培養ができる培地であることが必要
である。
【０００５】このＭＲＳＡを培養・検出するための培地
としてすでに特開平05 - 227992号、特開平06 - 178696
号、特開平06 - 233696号、特開平07 - 000181号がすで
に出願されている。また市販されているものでは、テル
モ社ＭＲＳＡスクリーニング用培地やコロナ技研社ＳＴ
チューブＭＲＳＡ等が知られている。しかしながらこれ
らの培地は、選択剤としてオキサシリンやセフチゾキシ
ムを用いており、これらの薬剤が溶液状態では安定性が
悪いため培地に直接添加されずに薬剤だけを乾燥濾紙
（ディスク）として供給されたり、また粉末培地部分と
液体培地部分と２部に分けて供給され、用時調製された
りしており、使い勝手の良いものではない。また調製後
の保存安定性も不良である。
としてすでに特開平05 - 227992号、特開平06 - 178696
号、特開平06 - 233696号、特開平07 - 000181号がすで
に出願されている。また市販されているものでは、テル
モ社ＭＲＳＡスクリーニング用培地やコロナ技研社ＳＴ
チューブＭＲＳＡ等が知られている。しかしながらこれ
らの培地は、選択剤としてオキサシリンやセフチゾキシ
ムを用いており、これらの薬剤が溶液状態では安定性が
悪いため培地に直接添加されずに薬剤だけを乾燥濾紙
（ディスク）として供給されたり、また粉末培地部分と
液体培地部分と２部に分けて供給され、用時調製された
りしており、使い勝手の良いものではない。また調製後
の保存安定性も不良である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、検体中にＭＲＳＡが存在するかどうかを、簡便な操
作で正確かつ迅速に検出することが可能なスクリーニン
グ用培地を提供することにある。
は、検体中にＭＲＳＡが存在するかどうかを、簡便な操
作で正確かつ迅速に検出することが可能なスクリーニン
グ用培地を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】かかる実状において本発
明者は、エリスロマイシンの使用によりＭＲＳＡとＭＳ
ＳＡの分別が可能であることを見いだし、鋭意努力の結
果、本発明を完成した。
明者は、エリスロマイシンの使用によりＭＲＳＡとＭＳ
ＳＡの分別が可能であることを見いだし、鋭意努力の結
果、本発明を完成した。
【０００８】すなわち本発明は、 （１）黄色ブドウ球菌が増殖可能な培地に、食塩、黄色
ブドウ球菌によって分解され酸を生成する１種以上の糖
類、ｐＨ指示薬、ＭＵＰ、及びエリスロマイシンを添加
したことを特徴とするＭＲＳＡスクリーニング用培地で
ある。
ブドウ球菌によって分解され酸を生成する１種以上の糖
類、ｐＨ指示薬、ＭＵＰ、及びエリスロマイシンを添加
したことを特徴とするＭＲＳＡスクリーニング用培地で
ある。
【０００９】黄色ブドウ球菌が培養可能な培地として
は、ハートインフュージョン培地、トリプトソイ培地、
マンニット食塩培地、エッグヨーク食塩培地、スタヒロ
コッカスNo.１１０培地等が挙げられるが、基本的に黄
色ブドウ球菌が増殖可能な培地であれば本発明に使用可
能である。
は、ハートインフュージョン培地、トリプトソイ培地、
マンニット食塩培地、エッグヨーク食塩培地、スタヒロ
コッカスNo.１１０培地等が挙げられるが、基本的に黄
色ブドウ球菌が増殖可能な培地であれば本発明に使用可
能である。
【００１０】食塩は非耐塩性の菌の増殖を抑制する作用
がある。黄色ブドウ球菌は高濃度の食塩を含む培地でも
発育することができるが、ほかの菌は発育ができない。
黄色ブドウ球菌により分解され酸を生成する糖として、
マンニット、トレハロース、サリシンなどが知られてお
り、その中でもマンニットが本発明には適している。マ
ンニットは、黄色ブドウ球菌により発酵分解され、酸を
生成する。このマンニット発酵分解能は、黄色ブドウ球
菌の特異的な性状とされているものである。本発明にお
いては、マンニットの分解により酸が生成し、培地のｐ
Ｈが低下することを利用し、当該ｐＨの低下をｐＨ指示
薬により検出する。このｐＨ指示薬としては中性域と酸
性域で呈色が異なる指示薬、例えばフェノールレッドや
ブロムクレゾールパープルが本発明には好ましい。
がある。黄色ブドウ球菌は高濃度の食塩を含む培地でも
発育することができるが、ほかの菌は発育ができない。
黄色ブドウ球菌により分解され酸を生成する糖として、
マンニット、トレハロース、サリシンなどが知られてお
り、その中でもマンニットが本発明には適している。マ
ンニットは、黄色ブドウ球菌により発酵分解され、酸を
生成する。このマンニット発酵分解能は、黄色ブドウ球
菌の特異的な性状とされているものである。本発明にお
いては、マンニットの分解により酸が生成し、培地のｐ
Ｈが低下することを利用し、当該ｐＨの低下をｐＨ指示
薬により検出する。このｐＨ指示薬としては中性域と酸
性域で呈色が異なる指示薬、例えばフェノールレッドや
ブロムクレゾールパープルが本発明には好ましい。
【００１１】ＭＵＰは、ホスファターゼにより分解さ
れ、４−メチルウンベリフェロン（蛍光物質）を生成す
る蛍光基質である。黄色ブドウ球菌はホスファターゼ産
生菌であるので、検体中に黄色ブドウ球菌があれば、Ｍ
ＵＰが分解され、蛍光物質が生成する。ここに３６５nm
付近の紫外線を照射すると青色の蛍光を発する。もし、
蛍光分光光度計等で検出するのであれば４５０nm付近の
波長で検出すると良い。
れ、４−メチルウンベリフェロン（蛍光物質）を生成す
る蛍光基質である。黄色ブドウ球菌はホスファターゼ産
生菌であるので、検体中に黄色ブドウ球菌があれば、Ｍ
ＵＰが分解され、蛍光物質が生成する。ここに３６５nm
付近の紫外線を照射すると青色の蛍光を発する。もし、
蛍光分光光度計等で検出するのであれば４５０nm付近の
波長で検出すると良い。
【００１２】本培地に添加されるエリスロマイシンは、
検体中の細菌のうちメチシリン感受性菌の増殖を抑制
し、メチシリン耐性菌のみを選択的に増殖させるために
用いられる。エリスロマイシンは水溶性でありアルコー
ルに易溶性である。従って５−１０％程度のエタノール
水溶液で容易に溶解し、それを培地に添加してもエリス
ロマイシンの析出は起こらない。さらに温度安定性が高
く、かつ溶液状態でも安定性が優れている。それ故、本
発明に適した選択剤である。
検体中の細菌のうちメチシリン感受性菌の増殖を抑制
し、メチシリン耐性菌のみを選択的に増殖させるために
用いられる。エリスロマイシンは水溶性でありアルコー
ルに易溶性である。従って５−１０％程度のエタノール
水溶液で容易に溶解し、それを培地に添加してもエリス
ロマイシンの析出は起こらない。さらに温度安定性が高
く、かつ溶液状態でも安定性が優れている。それ故、本
発明に適した選択剤である。
【００１３】（２）具体的に本発明は、培地１Ｌあたり
以下の成分を含むことを特徴とするＭＲＳＡスクリーニ
ング用培地である。
以下の成分を含むことを特徴とするＭＲＳＡスクリーニ
ング用培地である。
【成分３】（１Ｌ） ─────────────────── ペプトン ５−２０g 酵母エキス １−１０g 塩化リチウム １−１０g 塩化ナトリウム ５−３０g マンニット ５−２０g フェノールレッド ５−１００mg ＭＵＰ ５０−５００mg エリスロマイシン ８−１２８mg ポリミキシンＢ ５−５０mg シノキサシン ５−２０mg アムホテリシンＢ 0.５−１０mg 寒天 ０−２０g ─────────────────── ｐＨ７．３±０．３
【００１４】ペプトン、酵母エキスは栄養源として黄色
ブドウ球菌の増殖に必要であり、塩化リチウムはブドウ
球菌以外の菌に対して増殖抑制効果がある。マンニット
は黄色ブドウ球菌により分解され、酸を生成する。フェ
ノールレッドはｐＨ指示薬であり、中性で赤、酸性で黄
色の発色を示す。ポリミキシンＢはグラム陰性菌及び緑
膿菌に対して増殖抑制作用があり、シノキサシンはグラ
ム陰性菌に対して増殖抑制作用があり、アムホテリシン
Ｂは真菌に対して増殖抑制作用がある。
ブドウ球菌の増殖に必要であり、塩化リチウムはブドウ
球菌以外の菌に対して増殖抑制効果がある。マンニット
は黄色ブドウ球菌により分解され、酸を生成する。フェ
ノールレッドはｐＨ指示薬であり、中性で赤、酸性で黄
色の発色を示す。ポリミキシンＢはグラム陰性菌及び緑
膿菌に対して増殖抑制作用があり、シノキサシンはグラ
ム陰性菌に対して増殖抑制作用があり、アムホテリシン
Ｂは真菌に対して増殖抑制作用がある。
【００１５】また寒天は培地の固化に関係し、添加した
濃度により培地を液状培地、半流動培地、固形培地（平
板）とすることができる。つまり寒天濃度が０〜０．０
４％（０〜０．４g/L）の時は培地は液状培地となり、
寒天濃度が０．０５〜０．６％（０．５〜６．０g/L）
の時は培地は半流動培地となり、寒天濃度が１〜２％
（１０．０〜２０．０g/L）の時は培地は固形培地とな
る。液状培地はマイクロプレート等を用いた微量液体希
釈法に有用であり、半流動培地は穿刺培養に適している
ので菌の保存や検体の輸送用培地として有用であり、固
形培地（寒天平板）は一般的な細菌培養や平板希釈法に
有用である。
濃度により培地を液状培地、半流動培地、固形培地（平
板）とすることができる。つまり寒天濃度が０〜０．０
４％（０〜０．４g/L）の時は培地は液状培地となり、
寒天濃度が０．０５〜０．６％（０．５〜６．０g/L）
の時は培地は半流動培地となり、寒天濃度が１〜２％
（１０．０〜２０．０g/L）の時は培地は固形培地とな
る。液状培地はマイクロプレート等を用いた微量液体希
釈法に有用であり、半流動培地は穿刺培養に適している
ので菌の保存や検体の輸送用培地として有用であり、固
形培地（寒天平板）は一般的な細菌培養や平板希釈法に
有用である。
【００１６】（３）さらに具体的に本発明は、培地１Ｌ
あたり以下の成分を含むことを特徴とするＭＲＳＡスク
リーニング用培地である。
あたり以下の成分を含むことを特徴とするＭＲＳＡスク
リーニング用培地である。
【成分４】（１Ｌ） ─────────────────── ペプトン ８−１２g 酵母エキス ３−５g 塩化リチウム ４−６g 塩化ナトリウム ８−１２g マンニット ８−１２g フェノールレッド ２０−４０mg ＭＵＰ １００−２００mg エリスロマイシン ２０−４０mg ポリミキシンＢ １０−３０mg シノキサシン ５−１５mg アムホテリシンＢ １−３mg 寒天 ２−６g ─────────────────── ｐＨ７．３±０．３
【００１７】本培地は寒天量を２−６gとし半流動培地
としたので、試験管等に分注して綿棒を挿入して菌を接
種しても固すぎて培地が割れてしまうことが無い。それ
故、綿棒擦過物を検体として用いることが多いＭＲＳＡ
のスクリーニングに適している。
としたので、試験管等に分注して綿棒を挿入して菌を接
種しても固すぎて培地が割れてしまうことが無い。それ
故、綿棒擦過物を検体として用いることが多いＭＲＳＡ
のスクリーニングに適している。
【００１８】（４）さらに本発明は上記（１）−（３）
記載の培地を用いたＭＲＳＡのスクリーニング方法でも
ある。検体中にＭＲＳＡが存在すると、ｐＨ指示薬が酸
性色を示し、さらに紫外線を当てると蛍光を発すること
より、容易にＭＲＳＡの存在が判定できる。なお、一部
の菌ではマンニット分解能を示したり、フォスファター
ゼ産生能を示すものが存在するが、その両方を示すもの
はほとんどなく、高い確率で酸性色及び発蛍光を示した
菌はＭＲＳＡと判断できる。
記載の培地を用いたＭＲＳＡのスクリーニング方法でも
ある。検体中にＭＲＳＡが存在すると、ｐＨ指示薬が酸
性色を示し、さらに紫外線を当てると蛍光を発すること
より、容易にＭＲＳＡの存在が判定できる。なお、一部
の菌ではマンニット分解能を示したり、フォスファター
ゼ産生能を示すものが存在するが、その両方を示すもの
はほとんどなく、高い確率で酸性色及び発蛍光を示した
菌はＭＲＳＡと判断できる。
【００１９】以下、実施例に基づき本発明をさらに詳細
に説明する。なお、下記実施例は単に説明のためのもの
であり、本発明を何ら限定するものではない。
に説明する。なお、下記実施例は単に説明のためのもの
であり、本発明を何ら限定するものではない。
【００２０】実施例１ エリスロマイシン添加量の決定 以下に示す組成の本培地Ａ（液状培地）を調製し、微量
液体希釈法でエリスロマシンに対するＭＩＣを調べた。
ＣＡＭＨＢ培地に食塩、マンニット及びフェノールレッ
ドを加えて溶解し高圧蒸気滅菌（１２１℃、１５分）し
た。ＭＵＰ、エリスロマイシンは少量の滅菌精製水に溶
解し濾過滅菌（０．４５μm）した。約５０℃に冷却
後、両者を混合し、以下に示す組成の本培地Ａ（液体培
地）を調製した。ＮＣＣＬＳの微量液体希釈法及び日本
化学療法学会標準法（CHEMOTHERAPY,38(1),102-105,199
0 及び CHEMOTHERAPY,41(2),183-189,1993）に準じて操
作し、ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の菌についてエリス
ロマイシンのＭＩＣを測定した。エリスロマイシンを０
−１２８μg/mL含有する本培地Ａの２倍希釈系列を作成
し、９６穴マイクロプレートに１００μLづつ分注し
た。各ウェルそれぞれに、ＭＲＳＡ（１０8cfu/mL）、
ＭＲＳＡ（１０4cfu/mL）、ＭＳＳＡ（１０8cfu/mL）、
ＭＳＳＡ（１０4cfu/mL)、S.epidermidis（１０8cfu/m
L）それぞれ１０μLを接種し、３５℃で１晩培養し、各
菌の発育を見た。結果を表１に示す。なお、発育したＭ
ＲＳＡは培地色は黄色であり、暗所で３６５nmの紫外線
を当てると青色の蛍光を発した。ＭＳＳＡ及びS.epider
midis(表皮ブドウ球菌)はエリスロマイシン濃度が０の
時のみ発育した。
液体希釈法でエリスロマシンに対するＭＩＣを調べた。
ＣＡＭＨＢ培地に食塩、マンニット及びフェノールレッ
ドを加えて溶解し高圧蒸気滅菌（１２１℃、１５分）し
た。ＭＵＰ、エリスロマイシンは少量の滅菌精製水に溶
解し濾過滅菌（０．４５μm）した。約５０℃に冷却
後、両者を混合し、以下に示す組成の本培地Ａ（液体培
地）を調製した。ＮＣＣＬＳの微量液体希釈法及び日本
化学療法学会標準法（CHEMOTHERAPY,38(1),102-105,199
0 及び CHEMOTHERAPY,41(2),183-189,1993）に準じて操
作し、ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の菌についてエリス
ロマイシンのＭＩＣを測定した。エリスロマイシンを０
−１２８μg/mL含有する本培地Ａの２倍希釈系列を作成
し、９６穴マイクロプレートに１００μLづつ分注し
た。各ウェルそれぞれに、ＭＲＳＡ（１０8cfu/mL）、
ＭＲＳＡ（１０4cfu/mL）、ＭＳＳＡ（１０8cfu/mL）、
ＭＳＳＡ（１０4cfu/mL)、S.epidermidis（１０8cfu/m
L）それぞれ１０μLを接種し、３５℃で１晩培養し、各
菌の発育を見た。結果を表１に示す。なお、発育したＭ
ＲＳＡは培地色は黄色であり、暗所で３６５nmの紫外線
を当てると青色の蛍光を発した。ＭＳＳＡ及びS.epider
midis(表皮ブドウ球菌)はエリスロマイシン濃度が０の
時のみ発育した。
【００２１】
【組成１】本培地Ａ組成（１Ｌ） ───────────────── ＣＡＭＨＢ 塩化ナトリウム １０g マンニット １０g フェノールレッド ３０mg ＭＵＰ １５０mg エリスロマイシン ０−１２８mg ───────────────── ｐＨ７．３±０．１
【００２２】結果
【表１】 ──────────────────────────────────── エリスロマイシン濃度 (μg/mL) ────────────────────────────── 菌名 ０ ８ １６ ３２ ６４ １２８ ──────────────────────────────────── S.aureus MRSA (１０8) ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ S.aureus MRSA (１０4) ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ − S.aureus MSSA (１０8) ＋ − − − − − S.aureus MSSA (１０4) ＋ − − − − − S.epidermidis (１０8) ＋ − − − − − ──────────────────────────────────── ＋：発育 −：発育せず
【００２３】菌数が１０8cfu/mLのＭＲＳＡはエリスロ
マイシン濃度１２８μg/mLで発育し、菌数が１０4cfu/m
LのＭＲＳＡはエリスロマイシン濃度６４μg/mLで発育
した。ＭＳＳＡはエリスロマイシン濃度８μg/mLで発育
が抑制された。本発明のスクリーニング培地に用いるエ
リスロマイシンの濃度は１６−６４μg/mLが適当であっ
た。
マイシン濃度１２８μg/mLで発育し、菌数が１０4cfu/m
LのＭＲＳＡはエリスロマイシン濃度６４μg/mLで発育
した。ＭＳＳＡはエリスロマイシン濃度８μg/mLで発育
が抑制された。本発明のスクリーニング培地に用いるエ
リスロマイシンの濃度は１６−６４μg/mLが適当であっ
た。
【００２４】実施例２ 本培地によるＭＲＳＡの検出 以下に示す組成の本培地Ｂ（半流動培地）を調製し、試
験管に３mLづつ分注し、ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の
社内保存菌を綿棒にて接種し、本培地の性能をしらべ
た。ペプトン、酵母エキス、塩化リチウム、塩化ナトリ
ウム、マンニット、フェノールレッド、寒天を精製水約
９５０mLに溶解し、高圧蒸気滅菌した。ＭＵＰ、エリス
ロマイシン、ポリミキシンＢ、シノキサシン、アムホテ
リシンＢを約５０mLの滅菌精製水に溶解し、濾過滅菌し
た。約５０℃に冷却後、両者を混合し、直径１２mm長さ
９０mmの試験管に３mLづつ分注し、本培地Ｂ（半流動高
層培地）を調製した。ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の社
内保存菌をハートインフュージョン寒天培地で１夜培養
し、滅菌生理食塩液で所定の菌濃度に調整した。使用菌
株及び濃度は表２に記載した。次いで各菌液に綿棒（栄
研器材（株）製、吸水量約１００μL）を浸し、その綿
棒を本培地Ｂに穿刺し、綿棒を培地内に留置したまま密
栓して培養した。３５℃で２０時間培養後、陽性／陰性
を判定した。判定は外観（培地色）が赤色から黄色にな
ったものを培地色：陽性、３６５nmの紫外線照射で蛍光
が認められたものを蛍光：陽性と判定した。結果を表２
に示す。
験管に３mLづつ分注し、ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の
社内保存菌を綿棒にて接種し、本培地の性能をしらべ
た。ペプトン、酵母エキス、塩化リチウム、塩化ナトリ
ウム、マンニット、フェノールレッド、寒天を精製水約
９５０mLに溶解し、高圧蒸気滅菌した。ＭＵＰ、エリス
ロマイシン、ポリミキシンＢ、シノキサシン、アムホテ
リシンＢを約５０mLの滅菌精製水に溶解し、濾過滅菌し
た。約５０℃に冷却後、両者を混合し、直径１２mm長さ
９０mmの試験管に３mLづつ分注し、本培地Ｂ（半流動高
層培地）を調製した。ＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ、その他の社
内保存菌をハートインフュージョン寒天培地で１夜培養
し、滅菌生理食塩液で所定の菌濃度に調整した。使用菌
株及び濃度は表２に記載した。次いで各菌液に綿棒（栄
研器材（株）製、吸水量約１００μL）を浸し、その綿
棒を本培地Ｂに穿刺し、綿棒を培地内に留置したまま密
栓して培養した。３５℃で２０時間培養後、陽性／陰性
を判定した。判定は外観（培地色）が赤色から黄色にな
ったものを培地色：陽性、３６５nmの紫外線照射で蛍光
が認められたものを蛍光：陽性と判定した。結果を表２
に示す。
【００２５】
【組成２】本培地Ｂ組成（１Ｌ） ─────────────────── ペプトン １０g 酵母エキス ４g 塩化リチウム ５g 塩化ナトリウム １０g マンニット １０g フェノールレッド ３０mg ＭＵＰ １５０mg エリスロマイシン ３２mg ポリミキシンＢ ２０mg シノキサシン １０mg アムホテリシンＢ ２mg 寒天 ４g ─────────────────── ｐＨ７．３±０．３
【００２６】結果
【表２】 ─────────────────────────────────── 菌名（菌株番号） 接種菌数 培地色 蛍光 cfu/mL ─────────────────────────────────── （ＭＲＳＡ）S.aureus MRSA1076 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1076 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1081 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1081 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1122 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1122 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1718 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1718 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1719 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1719 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1815 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1815 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1816 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1816 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1817 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1817 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA4022 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA4022 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA4029 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA4029 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA4036 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA4036 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3263 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3263 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3264 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3264 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3265 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3265 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3266 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3266 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3267 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3267 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA3268 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA3268 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1722 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1722 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1723 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1723 １０3 ３＋ ＋S.aureus MRSA1724 １０2 ３＋ ＋S.aureus MRSA1724 １０3 ３＋ ＋ （ＭＳＳＡ）S.aureus MSSA3321 １０6 − −S.aureus MSSA4094 １０6 − −S.aureus MSSA4095 １０6 − −S.aureus MSSA4096 １０6 − −S.aureus MSSA4097 １０6 − −S.aureus MSSA3088 １０6 − −S.aureus MSSA2090 １０6 − −S.aureus MSSA2091 １０6 − − （その他の菌）S.epidermidis 2756 １０8 − ＋S.epidermidis 2776 １０8 − ＋S.epidermidis 1190 １０8 − −S.epidermidis 1191 １０8 − −E.feacalis 1110 １０8 ３＋ −E.feacalis 1110 １０6 ２＋ −E.feacalis 1110 １０4 − −E.feacalis 1112 １０8 ３＋ −E.feacalis 1112 １０6 ２＋ −E.feacalis 1112 １０4 − −E.feacium 1120 １０8 ３＋ −E.feacium 1120 １０6 ３＋ −E.feacium 1120 １０4 ２＋ −E.feacium 1121 １０8 ３＋ −E.feacium 1121 １０6 ３＋ −E.feacium 1121 １０4 − −P.aeruginosa 1378 １０8 − −E.coli 0704 １０8 − −C.freundii 0389 １０8 − −K.pneumoniae 0004 １０8 − −P.mirabilis 0436 １０8 − −P.vulgalis 0184 １０8 − − ─────────────────────────────────── 接種菌数： 記載の各濃度の菌液に綿棒（スワブ）を浸し、培地に穿刺した。実 際に綿棒に付着した菌数（接種菌数）はこの１０分の１の量 培地色： ３＋：培地全体が黄色、２＋：培地の２／３以上が黄色、＋：培地の １／２以上が黄色 蛍光： ＋：蛍光を発光
【００２７】ＭＲＳＡでは培地色は黄色になり、蛍光を
発光し、どちらも陽性を示した。ＭＳＳＡはどちらも陰
性（−）であった。その他の菌では培地色・発蛍光のど
ちらかが陽性（＋）を示すことがある。例えば、S.epid
ermidis（表皮ブドウ球菌）では発蛍光を示すものがあ
り、E.feacalis（腸球菌）やE.feacium（腸球菌）では
培地色が陽性を示すものが認められ、特に接種菌数が高
濃度（１０8cfu/mL）のとき顕著であった。しかし、両
方とも陽性を示す菌は無かった。
発光し、どちらも陽性を示した。ＭＳＳＡはどちらも陰
性（−）であった。その他の菌では培地色・発蛍光のど
ちらかが陽性（＋）を示すことがある。例えば、S.epid
ermidis（表皮ブドウ球菌）では発蛍光を示すものがあ
り、E.feacalis（腸球菌）やE.feacium（腸球菌）では
培地色が陽性を示すものが認められ、特に接種菌数が高
濃度（１０8cfu/mL）のとき顕著であった。しかし、両
方とも陽性を示す菌は無かった。
【００２８】実施例３ 本培地によるＭＲＳＡ検出時間 本培地Ｂを用い、ＭＲＳＡ接種菌数と陽性となる時間を
調べた。菌株はS.aureus MRSA1076を用い、ハートイン
フュジョン寒天培地で１夜培養後、滅菌生理食塩液で１
０1、１０2、１０4、１０6cfu/mLに調整した。各菌液を
綿棒に吸わせて培地に接種した。 ３５℃で培養し、８
時間後〜２４時間後まで判定した。結果を表３に示す。
調べた。菌株はS.aureus MRSA1076を用い、ハートイン
フュジョン寒天培地で１夜培養後、滅菌生理食塩液で１
０1、１０2、１０4、１０6cfu/mLに調整した。各菌液を
綿棒に吸わせて培地に接種した。 ３５℃で培養し、８
時間後〜２４時間後まで判定した。結果を表３に示す。
【００２９】結果
【表３】 接種菌数と陽性時間 ──────────────────────────────────── 接種菌数 １０1 １０2 １０4 １０6 cfu/mL 培養時間 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 ──────────────────────────────────── ８ − − − − − − − ＋ １０ − − − − − − ＋ ＋ １２ − − − − − ＋ ＋ ＋ １３ − − − − ＋ ＋ ２＋ ＋ １４ − − − − ＋ ＋ ２＋ ＋ １５ − − − − ＋ ＋ ２＋ ＋ １６ − − − − ＋ ＋ ３＋ ＋ １７ − − − − ＋ ＋ ３＋ ＋ １８ − − ＋ ＋ ＋ ＋ ３＋ ＋ １９ ＋ ＋ ＋ ＋ ２＋ ＋ ３＋ ＋ ２０ ＋ ＋ ＋ ＋ ２＋ ＋ ３＋ ＋ ２１ ＋ ＋ ２＋ ＋ ２＋ ＋ ３＋ ＋ ２２ ＋ ＋ ２＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ２３ ２＋ ＋ ２＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ２４時間 ２＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ──────────────────────────────────── 接種菌数： 記載の各濃度の菌液に綿棒（スワブ）を浸し、培地に穿刺した。実 際に綿棒に付着した菌数（接種菌数）はこの１０分の１の量 培地色： ３＋：培地全体が黄色、２＋：培地の２／３以上が黄色、＋：培地の １／２以上が黄色 蛍光： ＋：蛍光を発光
【００３０】接種菌数が１０1cfu/mLでは１９時間、１
０2cfu/mLでは１８時間、１０4cfu/mLでは１３時間で陽
性となった。従って１０1cfu/mLや１０2cfu/mLといった
極少量の接種菌数であっても本培地Ｂを用いることによ
り、２０時間以下の培養でＭＲＳＡの検出が可能であっ
た。
０2cfu/mLでは１８時間、１０4cfu/mLでは１３時間で陽
性となった。従って１０1cfu/mLや１０2cfu/mLといった
極少量の接種菌数であっても本培地Ｂを用いることによ
り、２０時間以下の培養でＭＲＳＡの検出が可能であっ
た。
【００３１】実施例４ 本培地Ｂの保存安定性 本培地Ｂのエリスロマイシン３２mg/Lをオキサシリン４
mg/Lに変更したオキサシリン培地を作成し、本培地Ｂと
ともに冷所に密栓して保存し、本培地の保存安定性を調
べた。本培地Ｂと本培地Ｂのエリスロマイシンをオキサ
シリン４mg/Lに変更したオキサシリン培地を作製した。
各培地を４℃に密栓して保存し、０、１ヶ月、３ヶ月、
６ヶ月、８ヶ月後にＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ及びその他の菌
を接種して保存安定性試験を行った。試験は各菌株をハ
ートインフュージョン寒天培地で１夜培養したものを滅
菌生理食塩液でＭＲＳＡは１０2cfu/mLに調整し、他の
菌は１０6cfu/mLに調整した。各菌液を綿棒に吸わせた
後培地に接種し、３５℃で２０時間培養し、外観色と蛍
光を測定した。結果を表４、表５に示す。
mg/Lに変更したオキサシリン培地を作成し、本培地Ｂと
ともに冷所に密栓して保存し、本培地の保存安定性を調
べた。本培地Ｂと本培地Ｂのエリスロマイシンをオキサ
シリン４mg/Lに変更したオキサシリン培地を作製した。
各培地を４℃に密栓して保存し、０、１ヶ月、３ヶ月、
６ヶ月、８ヶ月後にＭＲＳＡ、ＭＳＳＡ及びその他の菌
を接種して保存安定性試験を行った。試験は各菌株をハ
ートインフュージョン寒天培地で１夜培養したものを滅
菌生理食塩液でＭＲＳＡは１０2cfu/mLに調整し、他の
菌は１０6cfu/mLに調整した。各菌液を綿棒に吸わせた
後培地に接種し、３５℃で２０時間培養し、外観色と蛍
光を測定した。結果を表４、表５に示す。
【００３２】結果
【表４】 ──────────────────────────────────── 本培地Ｂ ０ １ヶ月 ３ヶ月 ６ヶ月 ８ヶ月 菌名（菌番号） 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 ────────────────────────────────────S.aureus MRSA1076 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MRSA1081 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MRSA1122 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MSSA3321 − − − − − − − − ＋ ＋S.aureus MSSA4094 − − − − − − − − − −S.aureus MSSA4095 − − − − − − − − − −E.coli 704 − − − − − − − − − − ────────────────────────────────────
【００３３】
【表５】 ──────────────────────────────────── オキサシリン培地 ０ １ヶ月 ３ヶ月 ６ヶ月 ８ヶ月 菌名（菌番号） 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 外観 蛍光 ────────────────────────────────────S.aureus MRSA1076 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MRSA1081 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MRSA1122 ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MSSA3321 − − ２＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MSSA4094 − − ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋S.aureus MSSA4095 − − ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋ ３＋ ＋E.coli 704 − − − − − − − − − − ──────────────────────────────────── 培地色： ３＋：培地全体が黄色、２＋：培地の２／３以上が黄色、＋：培地の １／２以上が黄色 蛍光： ＋：蛍光を発光
【００３４】エリスロマイシンを含有する本培地Ｂでは
少なくとも６ヶ月間は保存安定性がみられた。オキサシ
リンを用いた培地では１ヶ月でＭＳＳＡが陽性となっ
た。
少なくとも６ヶ月間は保存安定性がみられた。オキサシ
リンを用いた培地では１ヶ月でＭＳＳＡが陽性となっ
た。
【００３５】実施例５ 鼻腔擦過検体のＭＲＳＡスクリ
ーニング及び確認 健常者１０名の鼻腔を綿棒で擦過し、本培地Ｂ、テルモ
社ＭＲＳＡスクリーニング培地（テルモ培地）を用い
て、スクリーニングを行った。さらにＭＲＳＡ陽性を示
した検体はポアメデイアＭＲＳＡ分離培地（栄研化学株
式会社）で釣菌し、次いてフローズンプレート（栄研化
学株式会社）にて、オキサシリンに対するＭＩＣを測定
し、ＮＣＣＬＳの基準に従い、ＭＲＳＡの判定を行っ
た。結果を表６に示す。
ーニング及び確認 健常者１０名の鼻腔を綿棒で擦過し、本培地Ｂ、テルモ
社ＭＲＳＡスクリーニング培地（テルモ培地）を用い
て、スクリーニングを行った。さらにＭＲＳＡ陽性を示
した検体はポアメデイアＭＲＳＡ分離培地（栄研化学株
式会社）で釣菌し、次いてフローズンプレート（栄研化
学株式会社）にて、オキサシリンに対するＭＩＣを測定
し、ＮＣＣＬＳの基準に従い、ＭＲＳＡの判定を行っ
た。結果を表６に示す。
【００３６】
【組成３】テルモ社ＭＲＳＡスクリーニング培地組成 ─────────────────── （粉末部分） （液体部分） ペプトン類 滅菌精製水 マンニット 塩化リチウム 亜テルル酸カリウム フェノールレッド オキサシリン ─────────────────── テルモ培地はオキサシリンを含む粉末部と滅菌精製水の
液体部よりなり、用時に溶解して調製する。ＭＲＳＡが
存在すると培地色が赤色から黄色に変化する。なお、調
製法・使用法はその添付文書に従った。
液体部よりなり、用時に溶解して調製する。ＭＲＳＡが
存在すると培地色が赤色から黄色に変化する。なお、調
製法・使用法はその添付文書に従った。
【００３７】結果
【表６】 ─────────────────── 検体番号 本培地 テルモ 確認 ─────────────────── 検体１ 陰性 陰性 検体２ 陰性 MRSA 腸球菌 検体３ 陰性 陰性 検体４ 陰性 陰性 検体５ 陰性 陰性 検体６ MRSA MRSA MRSA 検体７ 陰性 陰性 検体８ MRSA MRSA MRSA 検体９ 陰性 陰性 検体１０ 陰性 陰性 ───────────────────
【００３８】テルモ培地ではフェノールレッドによる培
地色の変化のみでＭＲＳＡを分別している。そのため、
マンニット分解性の菌が発育すると陽性を示すことがあ
る。表６では検体２（腸球菌）がそれに当たる。ＭＲＳ
Ａと腸球菌はＭＵＰの利用性で鑑別できる。本培地Ｂは
ＭＵＰを含有しているので発蛍光の有無でＭＲＳＡと腸
球菌との鑑別が可能である。テルモ培地ではマンニット
分解性の腸球菌が発育し陽性を示した。テルモ培地はＭ
ＵＰが入っていないため腸球菌が発育すると区別がつか
ない。
地色の変化のみでＭＲＳＡを分別している。そのため、
マンニット分解性の菌が発育すると陽性を示すことがあ
る。表６では検体２（腸球菌）がそれに当たる。ＭＲＳ
Ａと腸球菌はＭＵＰの利用性で鑑別できる。本培地Ｂは
ＭＵＰを含有しているので発蛍光の有無でＭＲＳＡと腸
球菌との鑑別が可能である。テルモ培地ではマンニット
分解性の腸球菌が発育し陽性を示した。テルモ培地はＭ
ＵＰが入っていないため腸球菌が発育すると区別がつか
ない。
【００３９】
【発明の効果】選択薬剤として水溶性で安定性に優れた
エリスロマイシンを用いたことにより、調製した培地の
保存安定性が改善され、調製済みの「生培地」として市
場に流通させることが可能になった。また寒天量を増減
することにより、液状培地、半流動培地、固形培地とす
ることが可能であり、本培地の使用者は、培地の用時調
製といった面倒な手技から解放され、適当な形状の調製
済みの本培地を市場から購入し、それに被検菌を接種す
るだけの簡単な操作でＭＲＳＡのスクリーニングが可能
になった。さらに本培地はフェノールレッドの発色とＭ
ＵＧの発蛍光でダブルチェックするのでＭＲＳＡ確認の
正確度が高く、他の菌の影響を受け難い。さらに短時間
でのスクリーニングが可能となり、例えばＭＲＳＡ１０
6cfu/mLであれば１０時間で検出される。
エリスロマイシンを用いたことにより、調製した培地の
保存安定性が改善され、調製済みの「生培地」として市
場に流通させることが可能になった。また寒天量を増減
することにより、液状培地、半流動培地、固形培地とす
ることが可能であり、本培地の使用者は、培地の用時調
製といった面倒な手技から解放され、適当な形状の調製
済みの本培地を市場から購入し、それに被検菌を接種す
るだけの簡単な操作でＭＲＳＡのスクリーニングが可能
になった。さらに本培地はフェノールレッドの発色とＭ
ＵＧの発蛍光でダブルチェックするのでＭＲＳＡ確認の
正確度が高く、他の菌の影響を受け難い。さらに短時間
でのスクリーニングが可能となり、例えばＭＲＳＡ１０
6cfu/mLであれば１０時間で検出される。
【００４０】本培地を半流動培地として試験管に分注し
た形（高層培地）で用いると、綿棒擦過検体を培地内に
挿入したままで検体の保存・輸送さらには培養（スクリ
ーニング）が可能となり、広い用途で使用可能となる。
また綿棒擦過検体は培地に挿入されたまま培養され、培
養後は滅菌処理後に廃棄されるので衛生的である。本発
明は、綿棒で被検体を拭うだけの簡単な操作で、短時間
でかつ正確にＭＲＳＡを検出でき、院内感染・日和見感
染等を早期に発見でき、その早期の治療や予防に有用で
ある。
た形（高層培地）で用いると、綿棒擦過検体を培地内に
挿入したままで検体の保存・輸送さらには培養（スクリ
ーニング）が可能となり、広い用途で使用可能となる。
また綿棒擦過検体は培地に挿入されたまま培養され、培
養後は滅菌処理後に廃棄されるので衛生的である。本発
明は、綿棒で被検体を拭うだけの簡単な操作で、短時間
でかつ正確にＭＲＳＡを検出でき、院内感染・日和見感
染等を早期に発見でき、その早期の治療や予防に有用で
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｒ 1:445） Ｃ１２Ｒ 1:445） (Ｃ１２Ｑ 1/14 (Ｃ１２Ｑ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:445） Ｃ１２Ｒ 1:445）
Claims (4)
- 【請求項１】黄色ブドウ球菌が培養可能な培地に、食
塩、黄色ブドウ球菌によって分解され酸を生成する１種
以上の糖類、ｐＨ指示薬、４−メチルウンベリフェリル
リン酸（ＭＵＰ）、及びエリスロマイシンを含むことを
特徴とするＭＲＳＡスクリーニング用培地 - 【請求項２】培地１Ｌあたり以下の成分を含むことを特
徴とするＭＲＳＡスクリーニング用培地 【成分１】（１Ｌ） ─────────────────── ペプトン ５−２０g 酵母エキス １−１０g 塩化リチウム １−１０g 塩化ナトリウム ５−３０g マンニット ５−２０g フェノールレッド ５−１００mg ＭＵＰ ５０−５００mg エリスロマイシン ８−１２８mg ポリミキシンＢ ５−５０mg シノキサシン ５−２０mg アムホテリシンＢ 0.５−１０mg 寒天 ０−２０g ─────────────────── ｐＨ７．３±０．３ - 【請求項３】培地１Ｌあたり以下の成分を含むことを特
徴とするＭＲＳＡスクリーニング用培地 【成分２】（１Ｌ） ─────────────────── ペプトン ８−１２g 酵母エキス ３−５g 塩化リチウム ４−６g 塩化ナトリウム ８−１２g マンニット ８−１２g フェノールレッド ２０−４０mg ＭＵＰ １００−２００mg エリスロマイシン ２０−４０mg ポリミキシンＢ １０−３０mg シノキサシン ５−１５mg アムホテリシンＢ １−３mg 寒天 ２−６g ─────────────────── ｐＨ７．３±０．３ - 【請求項４】請求項１−３記載の培地に検体を添加して
培養後、色の変化及び蛍光強度を測定することを特徴と
するＭＲＳＡのスクリーニング方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000221793A JP4583559B2 (ja) | 2000-07-24 | 2000-07-24 | Ｍｒｓａスクリーニング用培地 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000221793A JP4583559B2 (ja) | 2000-07-24 | 2000-07-24 | Ｍｒｓａスクリーニング用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002034553A true JP2002034553A (ja) | 2002-02-05 |
| JP4583559B2 JP4583559B2 (ja) | 2010-11-17 |
Family
ID=18716135
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000221793A Expired - Lifetime JP4583559B2 (ja) | 2000-07-24 | 2000-07-24 | Ｍｒｓａスクリーニング用培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4583559B2 (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006136272A (ja) * | 2004-11-15 | 2006-06-01 | Prima Meat Packers Ltd | 乳酸菌検出用半流動培地 |
| GB2462186A (en) * | 2008-08-01 | 2010-02-03 | Oxoid Ltd | MRSA screening method |
| JP2016527186A (ja) * | 2013-05-22 | 2016-09-08 | ニュー・ファーマ・ライセンス・ホールディングス・リミテッド | 異なった抗生物質と一緒の組合せ療法におけるポリミキシン誘導体及びその使用 |
| CN109251957A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-22 | 长春理工大学 | 金黄色葡萄球菌选择性显色培养基测试片 |
| CN114703110A (zh) * | 2022-05-10 | 2022-07-05 | 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种诱导醋酸菌进入vbnc状态的培养基及方法 |
| CN115232856A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-10-25 | 河南省健康元生物医药研究院有限公司 | 一种基于固体发酵的产黄支顶孢霉高通量筛选方法 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01180825A (ja) * | 1988-01-06 | 1989-07-18 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 感染症用剤 |
| JPH06253892A (ja) * | 1993-03-08 | 1994-09-13 | Kazuyuki Sugawara | 寒天培地及びこの寒天培地を用いた抗菌剤耐性菌の検出と有効抗菌剤選択試験法 |
| JPH07303477A (ja) * | 1994-03-14 | 1995-11-21 | Fumiaki Taguchi | 薬剤耐性菌増菌、保存、鑑別用培地 |
| JPH07308184A (ja) * | 1994-05-16 | 1995-11-28 | Nippon Millipore Kk | 耐性菌の簡易検知装置 |
| JPH09132532A (ja) * | 1995-09-06 | 1997-05-20 | Mitsui Norin Kk | 抗生物質の抗菌力増強方法 |
| WO1999001572A2 (en) * | 1997-07-03 | 1999-01-14 | Id Biomedical Corporation | Methods for rapidly detecting methicillin resistant staphylococci |
| JPH11140087A (ja) * | 1997-09-15 | 1999-05-25 | F Hoffmann La Roche Ag | 抗菌性組成物 |
| JPH11169197A (ja) * | 1997-11-11 | 1999-06-29 | Becton Dickinson & Co | バンコマイシン耐性菌の検出方法及び検出用培地 |
-
2000
- 2000-07-24 JP JP2000221793A patent/JP4583559B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01180825A (ja) * | 1988-01-06 | 1989-07-18 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 感染症用剤 |
| JPH06253892A (ja) * | 1993-03-08 | 1994-09-13 | Kazuyuki Sugawara | 寒天培地及びこの寒天培地を用いた抗菌剤耐性菌の検出と有効抗菌剤選択試験法 |
| JPH07303477A (ja) * | 1994-03-14 | 1995-11-21 | Fumiaki Taguchi | 薬剤耐性菌増菌、保存、鑑別用培地 |
| JPH07308184A (ja) * | 1994-05-16 | 1995-11-28 | Nippon Millipore Kk | 耐性菌の簡易検知装置 |
| JPH09132532A (ja) * | 1995-09-06 | 1997-05-20 | Mitsui Norin Kk | 抗生物質の抗菌力増強方法 |
| WO1999001572A2 (en) * | 1997-07-03 | 1999-01-14 | Id Biomedical Corporation | Methods for rapidly detecting methicillin resistant staphylococci |
| JPH11140087A (ja) * | 1997-09-15 | 1999-05-25 | F Hoffmann La Roche Ag | 抗菌性組成物 |
| JPH11169197A (ja) * | 1997-11-11 | 1999-06-29 | Becton Dickinson & Co | バンコマイシン耐性菌の検出方法及び検出用培地 |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006136272A (ja) * | 2004-11-15 | 2006-06-01 | Prima Meat Packers Ltd | 乳酸菌検出用半流動培地 |
| GB2462186A (en) * | 2008-08-01 | 2010-02-03 | Oxoid Ltd | MRSA screening method |
| JP2016527186A (ja) * | 2013-05-22 | 2016-09-08 | ニュー・ファーマ・ライセンス・ホールディングス・リミテッド | 異なった抗生物質と一緒の組合せ療法におけるポリミキシン誘導体及びその使用 |
| CN109251957A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-22 | 长春理工大学 | 金黄色葡萄球菌选择性显色培养基测试片 |
| CN114703110A (zh) * | 2022-05-10 | 2022-07-05 | 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种诱导醋酸菌进入vbnc状态的培养基及方法 |
| CN114703110B (zh) * | 2022-05-10 | 2024-01-26 | 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种诱导醋酸菌进入vbnc状态的培养基及方法 |
| CN115232856A (zh) * | 2022-07-27 | 2022-10-25 | 河南省健康元生物医药研究院有限公司 | 一种基于固体发酵的产黄支顶孢霉高通量筛选方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4583559B2 (ja) | 2010-11-17 |
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