JP2002030002A

JP2002030002A - 薬物複合体

Info

Publication number: JP2002030002A
Application number: JP2000215919A
Authority: JP
Inventors: Kazuhiro Inoue; 和泓井上; Hiroshi Suzaki; 浩洲崎
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2000-07-17
Filing date: 2000-07-17
Publication date: 2002-01-29

Abstract

(57)【要約】【解決手段】直接又はアミノ酸、２〜８アミノ酸オリ
ゴペプチド若しくはそれらのリンカー付加体からなるス
ペーサーを介して、ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキス
トランポリアルコールと医薬化合物の残基とが結合して
なる薬物複合体。【効果】本発明の薬効複合体を用いれば、薬物担持能
力が高く、薬物を標的部位に確実に到達させることがで
きる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、医薬化合物を標的
部位に効率良く到達させることのできる薬物複合体及び
医薬化合物デリバリー用キャリヤーに関する。

【０００２】

【従来の技術】抗腫瘍剤は、静脈内投与や経口投与など
の投与経路により全身的に投与された後、特定の腫瘍部
位に移行して癌細胞の増殖を阻害ないし抑制することに
より治療効果を発揮する。しかしながら、全身投与され
た抗腫瘍剤は、血中から肝臓・網内系臓器に速やかに取
り込まれたり、あるいは速やかに尿中排泄されるため
に、血中濃度が低下して腫瘍部位への移行が十分でない
場合がある。また、通常の抗腫瘍剤自体では腫瘍部位へ
の移行選択性（腫瘍選択性）が低いために、抗腫瘍剤が
全身の様々な細胞や組織に満遍なく分布してしまい、正
常な細胞や組織に対しても細胞毒として作用するので、
嘔吐、発熱、あるいは脱毛などの副作用を極めて高率に
発生させるという問題がある。従って、抗腫瘍剤を効率
的かつ選択的に腫瘍部位に移行させる手段の開発が求め
られている。

【０００３】このような手段の一つとして、多糖高分子
に抗腫瘍剤を結合させて、抗腫瘍剤の血中からの消失を
遅延させ、かつ、癌組織への指向性を高める方法が提案
されている。例えば、EP0280474-A2には、デキストラン
の過ヨウ素酸酸化物に対してアミノマロン酸を結合さ
せ、これに白金系抗腫瘍剤を結合させた複合体が開示さ
れている。また、ACS symp. Ser., 709, 266-278(1998)
やBiol. Pharm. Bull.,22, 756-761(1999)には、ジカル
ボキシメチルデキストランに白金系抗腫瘍剤を結合させ
た錯体が開示されている。また、WO97/46260には、モノ
カルボキシアルキルデキストランポリアルコールと医薬
化合物とをペプチドを介して結合させた複合体が開示さ
れている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
従来の多糖高分子と抗腫瘍剤との複合体は、高分子部分
の生体内分解性、抗腫瘍剤の担持能力などの面で十分満
足できるものではない。従って、医薬化合物をより効率
的に標的部位に移行させることのできるキャリヤー及び
これを用いた薬物複合体の開発が望まれている。

【０００５】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者は、生
体内分解性に優れたデキストランポリアルコールに着目
し、これにジカルボキシＣ_1-3アルキル基を導入したジ
カルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリアルコール
と医薬化合物とを直接又は特定のスペーサーを介して結
合させれば、薬物担持能力が高く、かつ生体内分解性が
良好で、標的部位への薬物到達性に優れるとともに、水
に対する溶解性が高いので特に注射剤として有用な薬物
複合体が得られることを見出した。また、デキストラン
ポリアルコールのジカルボキシアルキル化反応を水酸化
セシウムの存在下に行うとジカルボキシアルキル基が効
率良く導入されることも見出した。

【０００６】すなわち、本発明は、ジカルボキシＣ_1-3
アルキルデキストランポリアルコールと医薬化合物の残
基とが結合してなる薬物複合体を提供するものである。
また、本発明は、ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキスト
ランポリアルコールと医薬化合物の残基とが１個のアミ
ノ酸からなるスペーサー又はペプチド結合した２〜８個
のアミノ酸からなるスペーサーを介して結合してなる薬
物複合体を提供するものである。また、本発明は、ジカ
ルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリアルコールと
医薬化合物の残基とがリンカーを付加した１個のアミノ
酸からなるスペーサー又はリンカーを付加したペプチド
結合した２〜８個のアミノ酸からなるスペーサーを介し
て結合してなる薬物複合体を提供するものである。ま
た、本発明は、ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラ
ンポリアルコールを含有する医薬化合物デリバリー用キ
ャリヤーを提供するものである。さらに本発明は、上記
薬物複合体製造のためのジカルボキシＣ_1-3アルキルデ
キストランポリアルコールの使用を提供するものであ
る。さらにまた、本発明はハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジ
カルボン酸又はそのエステルとデキストランポリアルコ
ールとを水酸化セシウムの存在下に反応させることを特
徴とするジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリ
アルコールの製造法を提供するものである。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明の医薬化合物デリバリー用
キャリヤーは、ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラ
ンポリアルコールである。当該ジカルボキシＣ_1-3アル
キルデキストランポリアルコールは、デキストランポリ
アルコールのヒドロキシ基にジカルボキシＣ_1-3アルキ
ル基が導入された化合物である。そして、ジカルボキシ
Ｃ_1-3アルキルデキストランポリアルコールを構成する
デキストランポリアルコールは、実質的に完全にポリア
ルコール化可能な条件下においてデキストランを処理し
て得られたデキストランポリアルコールであることが好
ましい。例えば、デキストランに大過剰の過ヨウ素酸ナ
トリウムと水素化ホウ素ナトリウムとを順次作用させて
デキストランを実質的に完全にポリアルコール化したデ
キストランポリアルコールを出発原料として用いるのが
好ましい。もっとも、デキストランのポリアルコール化
の方法は上記のものに限定されることはなく、当業者に
利用可能なものであればいかなる方法を採用してもよ
い。

【０００８】デキストランの種類は特に限定されず、α
−Ｄ−１，６−結合を任意の割合で含んでいてもよい。
例えば、α−Ｄ−１，６−結合の割合が８５％以上、９
０％以上、又は９５％以上のデキストランなどを用いる
ことができる。デキストランの分子量は特に限定されな
いが、例えば１０，０００程度〜２，０００，０００程
度のもの、好ましくは５０，０００程度〜８００，００
０程度のものを用いることができる。

【０００９】ジカルボキシＣ_1-3アルキル基としては、
ジカルボキシメチル基、１，２−ジカルボキシエチル
基、１，１−ジカルボキシエチル基、１，３−ジカルボ
キシプロピル基等が挙げられるが、ジカルボキシメチル
基が特に好ましい。

【００１０】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールは、例えばデキストランポリアルコール
にハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジカルボン酸又はそのエス
テルを反応させることにより得られる。ここで用いられ
るハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジカルボン酸又はそのエス
テルとしては、ジエチルブロモマロネートのハロゲン化
マロン酸又はそのエステル、ブロモコハク酸等が挙げら
れる。このとき塩基の存在下に反応を行うのが好まし
く、当該塩基としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウ
ム、水酸化セシウム等の水酸化アルカリを用いることも
できる。水酸化セシウムを用いるとジカルボキシＣ_1-3
アルキル基の導入効率が特に向上する。

【００１１】ジカルボキシＣ_1-3アルキル化反応は、例
えば、デキストランポリアルコールを反応に関与しない
不活性溶媒（例えば、水、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド、ジメチルスルホキシド等）に溶解し、塩基（例え
ば、水酸化ナトリウムや水酸化カリウム、水酸化セシウ
ム等）の存在下にハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジカルボン
酸又はそのエステルを添加し、氷冷下ないし１００℃程
度の温度範囲で数分ないし数日間反応させればよい。

【００１２】ジカルボキシＣ_1-3アルキル基の導入の程
度は、例えば、ジカルボキシＣ_1-3アルキル化の反応温
度や試薬として用いるハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジカル
ボン酸又はそのエステルの量を適宜選択することにより
容易に調節可能である。デキストランポリアルコールの
水酸基に対するジカルボキシＣ_1-3アルキル化の程度は
特に限定されないが、例えば、構成糖残基あたり０．０
１〜２．０の範囲、好ましくは、０．１〜０．５の範囲
である。なお、ジカルボキシＣ_1-3アルキル化度は、滴
定法により糖残基あたりのカルボン酸の置換を求めた
後、ジカルボキシＣ _1-3アルキル基１残基あたりカルボ
ン酸が２残基存在することから、得られたカルボン酸の
置換度の１／２を糖残基あたりのジカルボキシＣ_1-3ア
ルキル化度とした。ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキス
トランポリアルコールの分子量は、プルランを標準とし
てゲル濾過法で測定した場合に５，０００〜５００，０
００程度、好ましくは５０，０００〜５００，０００程
度、より好ましくは２００，０００〜５００，０００程
度である。

【００１３】当該医薬化合物デリバリー用キャリヤーに
直接又は前記のスペーサー（単にスペーサーというとき
は、リンカーを付加したスペーサーを含む）を介して結
合させ得る医薬化合物としては、カルボキシル基又は当
該スペーサーに反応し得る官能基を有する医薬化合物で
あれば特に制限されないが、例えば金属原子、アミノ
基、カルボキシル基、ヒドロキシ基、メルカプト基、カ
ルボキサミド基、ウレタン基等を有する医薬化合物が好
ましい。当該医薬化合物としては、抗腫瘍剤、抗炎症剤
等が挙げられる。抗腫瘍剤としては、白金系抗腫瘍剤、
カンプトテシン誘導体、アンスラサイクリン系抗腫瘍
剤、タキサン系抗腫瘍剤、フッ化ピリミジン系代謝拮抗
剤、ビンカアルカロイド系抗腫瘍剤、葉酸拮抗剤等が挙
げられる。ここで白金系抗腫瘍剤としてはシスプラチ
ン、カルボプラチン、オキサリプラチンが好ましい。カ
ンプトテシン誘導体としては（特開平６−８７７４６号
公報に記載された抗腫瘍剤、好ましくは（１Ｓ，９Ｓ）
−１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジ
ヒドロ−９−ハイドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ
−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：６，７］インド
リジノ［１，２−ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１
５Ｈ）−ジオン等）などが挙げられる。タキサン誘導体
としてはタキソール、タキソテールなどが挙げられる。
フッ化ピリミジン系代謝拮抗剤としては５−フルオロウ
ラシルなどが挙げられる。ビンカアルカロイド系抗腫瘍
剤としてはビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシ
ン、ナベルビン等が挙げられる。葉酸拮抗剤としてはメ
トトレキセート等が挙げられる。これらのうち、白金系
抗腫瘍剤、特にシスプラチン、カルボプラチン又はオキ
サリプラチンが好ましい。また抗炎症剤としては、コハ
ク酸ヒドロコルチゾン、コハク酸プレドニゾロンなどの
ステロイド系抗炎症剤；メフェナム酸、フルフェナム
酸、ジクロフェナク、イブプロフェン、チノリジンなど
の非ステロイド系抗炎症剤が挙げられる。

【００１４】本明細書において医薬化合物の残基とは、
キャリヤーと直接又はスペーサーを介して医薬化合物残
基との結合が医薬化合物中の反応性官能基とキャリヤー
のカルボキシル基又はスペーサー中の反応性官能基との
反応（例えば脱水縮合など）により形成されたと仮定し
た場合において、結合後の化合物中に存在する医薬化合
物に由来する部分構造を意味している。例えば、医薬化
合物がＤ−ＮＨ₂，Ｄ−ＣＯＯＨ，Ｄ−ＣＯＯＲ，Ｄ−
ＯＨ，Ｄ−ＳＨ，Ｄ−ＣＯＮＨ₂，Ｄ−ＮＨ−ＣＯＯＲ
（Ｄは医薬化合物の主構造、Ｒは低級アルキル基等）で
表される場合、医薬化合物の残基はそれぞれＤ−ＮＨ−
（Ｄ−ＮＨ−ＣＯ−Ｑなど）、Ｄ−ＣＯ−（Ｄ−ＣＯ−
ＮＨ−Ｑ，Ｄ−ＣＯ−Ｏ−Ｑ，Ｄ−ＣＯ−Ｓ−Ｑな
ど）、Ｄ−ＣＯ−（Ｄ−ＣＯ−ＮＨ−Ｑ，Ｄ−ＣＯ−Ｏ
−Ｑ，Ｄ−ＣＯ−Ｓ−Ｑなど）、Ｄ−Ｏ−（Ｄ−Ｏ−Ｃ
Ｏ−Ｑ，Ｄ−Ｏ−Ｑなど）、Ｄ−Ｓ−（Ｄ−Ｓ−ＣＯ−
Ｑ，Ｄ−Ｓ−Ｑなど）、Ｄ−ＣＯＮＨ−（Ｄ−ＣＯ−Ｎ
Ｈ−ＣＯ−Ｑなど）、Ｄ−ＮＨ−ＣＯ−（Ｄ−ＮＨ−Ｃ
Ｏ−Ｏ−Ｑ，Ｄ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−Ｑなど）で表され
る（カッコ内はキャリヤー又はスペーサーと医薬化合物
残基との結合を示し、Ｑはキャリヤー又はスペーサーか
ら反応性官能基を除いた残りの部分構造を示す）。医薬
化合物の残基は、スペーサーのＮ末端アミノ基又はＣ末
端カルボキシル基のほか、スペーサーを構成するアミノ
酸に存在する反応性官能基に結合していてもよい。

【００１５】前記医薬化合物デリバリー用キャリヤーと
医薬化合物とを直接結合させて本発明の薬物複合体を製
造するには、例えばこれらを錯体形成配位結合、エステ
ル結合、チオエステル結合、酸アミド結合、酸無水物形
成などの手段で結合させることにより製造される。例え
ば錯体形成反応の場合には、通常水溶液中で反応させれ
ばよい。エステル結合形成反応の場合には、種々のカル
ボジイミド類などの種々の脱水縮合剤の存在下に行い、
その際必要に応じてジメチルアミノピリジンなどの活性
剤を加えるとよい。また酸アミド結合形成反応の場合に
は、種々のカルボジイミド類などの種々の脱水縮合剤の
存在下に行えばよい。このような直接結合した薬物複合
体のうち、ジカルボキシメチルデキストランポリアルコ
ールと白金系抗腫瘍剤が直接配位結合した薬物複合体が
特に好ましい。

【００１６】前記医薬化合物デリバリー用キャリヤーと
医薬化合物とを結合させるためのスペーサーとしては、
１個のアミノ酸からなるスペーサー、ペプチド結合した
２〜８個のアミノ酸からなるスペーサー、リンカーを付
加した１個のアミノ酸からなるスペーサー、リンカーを
付加したペプチド結合した２〜８個のアミノ酸からなる
スペーサーが挙げられる。これらアミノ酸又はオリゴペ
プチドに付加されるリンカーとしては例えばＷＯ９９／
６１０６１記載のパラアミノベンジルオキシカルボニル
リンカー、特願２０００−７９６５５号記載の置換又は
無置換のアミノメチレンリンカーが挙げられる。

【００１７】より具体的には、スペーサーは、１個のア
ミノ酸の残基（アミノ酸のアミノ基及びカルボキシル基
からそれぞれ１個の水素原子及び１個の水酸基を除いた
残基を意味する）、又はペプチド結合した２ないし８個
のアミノ酸からなるオリゴペプチドの残基（Ｎ末端のア
ミノ基及びＣ末端のカルボキシル基からそれぞれ１個の
水素原子及び１個の水酸基を除いた残基を意味する）の
形態を有している。好ましいスペーサーは２〜６個のア
ミノ酸からなるオリゴペプチドの残基又はリンカーが付
加した２〜６個のアミノ酸からなるオリゴペプチドの残
基である。

【００１８】スペーサーを構成するアミノ酸の種類は特
に限定されないが、例えば、Ｌ−又はＤ−アミノ酸、好
ましくはＬ−アミノ酸を用いることができ、α−アミノ
酸のほか、β−アラニン、ε−アミノカプロン酸、γ−
アミノ酪酸などを用いてもよい。このようなα−アミノ
酸以外のアミノ酸は、キャリヤーに近接した位置に配置
されることが好ましい。スペーサーの結合方向は特に限
定されないが、一般的には、ジカルボキシＣ_1-3アルキ
ルデキストランポリアルコールのカルボキシル基にスペ
ーサーのＮ末端を酸アミド結合によって結合し、医薬化
合物のアミノ基にスペーサーのＣ末端を結合することが
できる。また、例えば、ペプチドスペーサーの構成単位
としてリジン残基を含めておき、リジン残基のα−アミ
ノ基及びε−アミノ基をそれぞれ他のアミノ酸のカルボ
キシル基と酸アミド結合させると、ペプチドスペーサー
の両末端がＮ末端になるので、医薬化合物のカルボキシ
ル基を結合することが可能になる。さらに、スペーサー
中に１個又は２個以上のジアミン化合物又はジカルボン
酸化合物の残基（例えばエチレンジアミンなどのジアミ
ンの残基やコハク酸などのジカルボン酸の残基）を構成
単位として含めておき、それぞれ両末端がＮ末端のスペ
ーサー及び両末端がＣ末端のスペーサーを利用してもよ
い。

【００１９】スペーサーのアミノ酸配列は特に限定され
ないが、例えば、スペーサーが−Ｘ−Ｚ−で表されるジ
ペプチドの残基（Ｘは疎水性アミノ酸の残基を示し、Ｚ
は親水性アミノ酸の残基を示し、−Ｘ−Ｚ−は疎水性ア
ミノ酸（Ｘ）と親水性アミノ酸（Ｚ）とがそれぞれＮ末
端側及びＣ末端側となってペプチド結合したジペプチド
のＮ末端のアミノ基及びＣ末端のカルボキシル基からそ
れぞれ１個の水素原子及び１個の水酸基を除いた残基を
意味する）であるか、又は該ジペプチドの残基を部分ペ
プチド配列として含むスペーサーを好適に用いることが
できる。疎水性アミノ酸としては、例えば、フェニルア
ラニン、チロシン、ロイシンなどを用いることができ、
親水性アミノ酸としては、例えば、グリシン、アラニン
などを用いることができる。スペーサーがこのようなジ
ペプチド残基の繰り返し配列（例えば−Ｘ−Ｚ−Ｘ−Ｚ
−，−Ｘ−Ｚ−Ｘ−Ｚ−Ｘ−Ｚ−など）を有していても
よい。このようなジペプチド構造を含むスペーサーを用
いると、スペーサーがペプチダーゼが豊富であると考え
られる腫瘍部位や炎症部位で加水分解され、当該部位に
おいて医薬化合物が高濃度に遊離する。上記ジペプチド
を含むスペーサーと医薬化合物とが結合して形成される
部分構造は本発明の薬物複合体の好ましい部分構造であ
る。医薬化合物の残基として、例えば、濃度依存型の抗
腫瘍剤（例えば、ドキソルビシン）などを用いる場合に
は、−Ｘ−Ｚ−で示される上記のジペプチド残基からな
るスペーサー又は該ジペプチド残基を部分ペプチド配列
として含むスペーサーを用いることが特に好ましい。ま
た、医薬化合物の残基として、一定の濃度以上で作用時
間の持続を必要とする時間依存型の抗腫瘍剤を用いる場
合にも、上記のスペーサーを用いることによって高い抗
腫瘍効果を達成できる場合があり、例えば、特開平６−
８７７４６号公報に記載された抗腫瘍剤、好ましくは前
記の抗腫瘍剤が挙げられる。一般的には、上記のスペー
サーに限定されることなく、抗腫瘍剤の作用機作、体内
動態や毒性発現の特徴、体内での抗腫瘍剤の遊離性など
の観点から好ましいスペーサーを選択する必要がある。
選択し得るスペーサーとしては国際公開ＷＯ９７／４６
２６０記載のものなどが挙げられる。

【００２０】スペーサーを介して結合する薬物複合体に
関しては、ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポ
リアルコールのカルボキシル基に対して、医薬化合物の
残基と結合させたスペーサーを結合することにより本発
明の薬物複合体を製造することができる。スペーサーと
ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリアルコー
ルのカルボキシル基との結合は、一般的には、スペーサ
ーのＮ末端アミノ基とジカルボキシＣ_1-3アルキルデキ
ストランポリアルコールのカルボキシル基とを酸アミド
結合により結合させることにより形成できる。もっと
も、スペーサーとジカルボキシＣ_1-3アルキルデキスト
ランポリアルコールのカルボキシル基との結合は上記の
ものに限定されることはなく、他の化学結合や１又は２
以上のスペーサーを利用した結合であってもよい。例え
ば、スペーサーのＣ末端カルボキシル基とジカルボキシ
Ｃ_1-3アルキルデキストランポリアルコールのカルボキ
シル基とにより酸無水物を形成させてもよく、また、エ
チレンジアミン等のジアミン化合物をスペーサーとして
用いてそれぞれのカルボキシル基をジアミンの各アミノ
基に酸アミド結合させてもよい。スペーサーのＮ末端ア
ミノ基とジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリ
アルコールのカルボキシル基とを酸アミド結合により結
合させる場合には、ペプチド類の合成に用いる通常の脱
水縮合剤、例えば、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボ
ジイミド（ＤＣＣ）のようなＮ，Ｎ′−ジシクロアルキ
ルカルボジイミド類、１−エチル−３−（３−ジメチル
アミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＰＣ）等のカ
ルボジイミド誘導体、１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル（ＨＯＢＴ）のようなベンゾトリアゾール誘導体のほ
か、１−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−
ジヒドロキシキノリン（ＥＥＤＱ）などを用いることが
できる。また、活性エステル法や酸ハライド法などによ
り反応を行ってもよい。

【００２１】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールに導入する医薬化合物残基の量は特に限
定されないが、医薬化合物残基の物理化学的性質、並び
に本発明の薬物複合体の体内動態、薬効、及び毒性など
の観点から適宜選択すべきである。一般的には、０．１
〜３０重量％、好ましくは１〜１５重量％、さらに好ま
しくは３〜１０重量％、特に好ましくは５〜６重量％程
度の範囲を選択することができる。ジカルボキシＣ_1-3
アルキルデキストランポリアルコールに導入された医薬
化合物残基の割合は、例えば、吸光度分析などにより容
易に決定することが可能である。

【００２２】本発明の薬物複合体は、医薬化合物の残基
の種類（例えば、抗腫瘍剤又は抗炎症剤などの医薬化合
物の残基）に応じて、所望の医薬活性を腫瘍部位や炎症
部位などの局所において特異的に発現させることがで
き、かつ、医薬化合物自体の有する毒性を低減できると
いう特徴を有する。本発明の薬物複合体のジカルボキシ
Ｃ_1-3アルキルデキストランポリアルコール部分は極め
て優れた血中滞留性及び腫瘍・炎症部位への集積性を有
するので薬物送達のキャリヤーとして有用であり、本発
明の薬物複合体は腫瘍選択性及び炎症部位選択性を有し
ている。また、キャリヤーがジカルボキシＣ_1-3アルキ
ル基を有するため、糖残基あたりの医薬化合物の担持能
力が向上している。さらに、本発明の薬物複合体は、水
に対する溶解性が向上していることから、注射剤として
用いる場合に特に有用である。特に本発明の薬物複合体
は、モノカルボキシメチルデキストランポリアルコール
をキャリヤーとして用いた場合に比べて、糖残基あたり
の医薬化合物の担持能力が優れており、さらに白金錯体
のような２座配位子化合物を結合させた場合の水溶性の
向上は顕著である。また、本発明の薬物複合体は、ジカ
ルボキシメチルデキストランをキャリヤーとして用いた
白金系抗腫瘍剤の複合体に比べて、リン酸緩衝液中での
白金錯体の遊離速度が遅く、この複合体よりもＥＰＲ効
果（enhanced permeability and retention effect：Ma
tsumura Y., Maeda H.：Cancer Res. 46：6367-6392, 1
986）が優れている。

【００２３】本発明の薬物複合体を含む医薬は、通常、
凍結乾燥品などの形態でバイアル等に充填することがで
き、用時溶解型の注射用又は点滴用製剤等の非経口投与
用製剤として臨床に提供されるが、本発明の医薬の製剤
形態は上記態様に限定されることはない。上記製剤の製
造には、例えば、溶解補助剤、ｐＨ調整剤、安定化剤な
ど当業界で利用可能な製剤用添加物を用いることができ
る。本発明の医薬の投与量は特に限定されないが、通常
は、医薬化合物残基を構成する医薬化合物の投与量、本
発明の薬物複合体中に導入された医薬化合物の残基の
量、患者の状態や疾患の種類などを勘案して決定すべき
である。例えば、シスプラチンが約５重量％程度の割合
で導入された本発明の薬物複合体を非経口投与する場合
には、一般にシスプラチンとして２〜２００mg／m²投与
するのが好ましい。

【００２４】

【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに具体的に
説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定される
ことはない。

【００２５】実施例１ジカルボキシメチルデキストランポリアルコール−シス
−ジ（１，２−ジアミノシクロヘキサン)白金錯体[DCM-
Dex-PA-Pt(Dach)]の合成：デキストランＴ５００（５０
ｇ,ファルマシア社製, 分子量５００Ｋ)を０．１Ｍ酢酸
緩衝液(ｐＨ５．５，５０００mL）に溶解し、４℃に冷
却した。過ヨウ素酸ナトリウム（１６５．０ｇ）を水
（５０００mL）に溶解した溶液を加えた。遮光しながら
４℃で１０日間攪拌した後、エチレングリコール（３
５．０mL）を加え、一晩攪拌した。反応液を８Ｍ水酸化
ナトリウム水溶液を用いてｐＨ６．５に調整した。水素
化ホウ素ナトリウム（７０ｇ）を水（２０００mL）に溶
解した溶液を加えた後、一晩攪拌した。酢酸でｐＨ５．
５に調整して４℃で１時間攪拌した後、８Ｍ水酸化ナト
リウム水溶液を用いてｐＨ７．５に調整した。得られた
水溶液をバイオマックス−５０膜を用いて限外濾過法に
よる脱塩を行った。膜を通過しない残留溶液を凍結乾燥
して、デキストランポリアルコール（２０．２ｇ）を得
た。この物質のピークトップ分子量（ゲル濾過、プルラ
ン標準）は、１８０Ｋであった。このデキストランポリ
アルコール（５００mg）を、水酸化セシウム（１１．５
９ｇ）を水（１０mL）に溶かして得られる水溶液に加
え、室温で溶解させた。

【００２６】水酸化セシウム（１４．０３ｇ）を水（１
０mL）、メタノール（１０mL）の混合液に溶解した後、
氷冷した。ジエチルブロモマロネート（７．１３mL）を
加え、氷冷しながら５時間反応させた。濃縮した後、上
で得られたデキストランポリアルコールの水溶液に、氷
冷下で加え、室温で一晩反応させた。この反応液を酢酸
でｐＨを８に調整した。０．１Ｍ食塩水を用い、ナトリ
ウムイオン濃度を一定に保ちながら、バイオマックス−
５０膜を用いた限外濾過を行った。さらに、純水を用い
て限外濾過法による脱塩を行い、膜を通過しない残留溶
液を凍結乾燥してジカルボキシメチルデキストランポリ
アルコールのナトリウム塩（４００mg）を得た。この物
質の分子量（ゲル濾過、プルラン標準）は３２７Ｋであ
り、ジカルボキシメチル化度は０．２であった。

【００２７】シス−ジ（１，２−ジアミノシクロヘキサ
ン）ジクロロプラチナ[PtCl₂(Dach)]（２２６mg）に水
１３０mLを加えて、６０℃で２時間加熱した。硝酸銀
（２０２mg）を水（０．５mL）に溶かした水溶液を加え
てさらに６０℃で１９時間加熱した。反応液を遠心分離
（３０００rpm、１０分）した後、上清をミリポアフィ
ルター（０．２２μｍ）で濾過して、Pt(NO₃)₂(Dach)の
水溶液を得た。原子吸光法により定量したところ、白金
としての濃度は０．８１mg／mLであった。

【００２８】上で得られたジカルボキシメチルデキスト
ランポリアルコールのナトリウム塩（８１mg）を水（４
mL）に溶解し、上で得られたPt(NO₃)₂(Dach)の水溶液
（６mL）を加えた。０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で
ｐＨ７．０に調整した後、４０℃で４時間反応させた。
反応液を、ＰＤ−１０カラム（アマシャムファルマシ
ア社製）で精製した。高分子を含む画分をミリポアフィ
ルター（０．２２μｍ）で濾過した後、凍結乾燥して標
記化合物（６１mg）を得た。本化合物の白金含量を原子
吸光法により定量したところ６．６％（W/W）であっ
た。本化合物をゲル濾過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）
（カラム：東ソーTSK Gel PW-6000XL、溶媒：２０％ア
セトニトリル含有０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）、
流速：１．０mL／min）で分析した結果を図１に示す。

【００２９】実施例２ジカルボキシメチルデキストランポリアルコール−シス
−ジアミノ白金錯体[DCM-Dex-PA-Pt(NH₃)₂]の合成シスプラチン、すなわちPtCl₂(NH₃)₂（６００mg）に水
１２０mLを加えて、６０℃で２時間加熱した。硝酸銀
（６８０mg）を水（１mL）に溶かした水溶液を加えてさ
らに６０℃で５時間加熱した。反応液を遠心分離（３０
００rpm、１０分）した後、上清をミリポアフィルター
（０．２２μｍ）で濾過して、Pt(NO₃)₂(NH₃)₂の水溶液
を得た。原子吸光法により定量したところ白金としての
濃度は２．４５mg／mLであった。

【００３０】実施例１で用いたジカルボキシメチルデキ
ストランポリアルコールのナトリウム塩（１１６mg）を
水（８mL）に溶解し、上で得られたPt(NO₃)₂(NH₃)₂の水
溶液（２mL）を加えた。０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶
液でｐＨ７．０に調整した後、４０℃で４時間反応させ
た。反応液を、ＰＤ−１０カラム（アマシャムファル
マシア社製）で精製した。高分子を含む画分をミリポア
フィルター（０．２２μｍ）で濾過した後、凍結乾燥し
て標記化合物（５６mg）を得た。本化合物の白金含量を
原子吸光法により定量したところ４．５％（W/W）であ
った。本化合物をＧＰＣ（カラム：東ソーTSK Gel PW-6
000XL、溶媒：２０％アセトニトリル含有０．１Ｍ酢酸
緩衝液（ｐＨ５．０）、流速：１．０mL／min）で分析
した結果を図２に示す。

【００３１】実施例３ジカルボキシメチルデキストランポリアルコール-Gly-G
ly-Phe-Gly-NH-A'の合成なお、「A-NH- 」は、特開平6-87746 号公報の請求項２
に記載された医薬化合物などのようにラクトン環を有す
る医薬化合物において、ラクトン環が閉環した医薬化合
物を A-NH₂で表した場合の医薬化合物残基を表し、その
一例は、上記のスキーム中にA-NH- で示した基（ラクト
ン環を形成したもの）である。また、A'-NH-は、A-NH-
で表される医薬化合物残基中のラクトン環が閉環型若し
くは開環型のいずれか又はそれらの混合形態であること
を示す。WO9746260に記載のGly-Gly-Phe-Gly-NH-Aを水
とメタノールの混合溶媒に溶解する。この溶液を、ジカ
ルボキシメチルデキストランポリアルコ−ルのナトリウ
ム塩を水とメタノールの混合溶媒に溶かした溶液に加え
る。1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（ Gly-Gly-Phe-G
ly-NH-Aの1.2当量）、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノ
プロピル)-カルボジイミド塩酸塩（ Gly-Gly-Phe-Gly-N
H-Aの1.2当量）を加え、0.1規定水酸化ナトリウム水溶
液でpHを7.0に調整する。室温で２時間撹拌し、1-エチ
ル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミド塩酸
塩（ Gly-Gly-Phe-Gly-NH-Aの0.6当量）を加え、0.1規
定塩酸でpHを7.0に調整する。室温で2時間撹拌し、1-エ
チル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミド塩
酸塩（Gly-Gly-Phe-Gly-NH-Aの0.6当量）を加え、0.1規
定塩酸でpHを7.0に調整する。室温で一晩反応させ、反
応液を0.1規定水酸化ナトリウム水溶液でpHを9.0に調整
する。バイオマックス-50膜を用いた限外濾過法により
脱塩する。膜を通過しない残留溶液をミリポアフィルタ
ー(0.22μm)で濾過し、凍結乾燥して、標記化合物をア
モルファスとして得る。

【００３２】実施例４ジカルボキシメチルデキストランポリアルコール-Gly-G
ly-Phe-Gly-PABC(PABC= p-アミノベンジルオキシカルボ
ニル)-NH-A'の合成 WO9961061に記載のGly-Gly-Phe-Gly-PABC-NH-Aを水とメ
タノールの混合溶媒に溶解する。この溶液を、ジカルボ
キシメチルデキストランポリアルコ−ルのナトリウム塩
を水とメタノールの混合溶媒に溶かした溶液に加える。
1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（ Gly-Gly-Phe-Gly-
PABC-NH-Aの1.2当量）、1-エチル-3-(3-ジメチルアミ
ノプロピル)-カルボジイミド塩酸塩（ Gly-Gly-Phe-Gly
-PABC-NH-Aの1.2当量）を加え、0.1規定水酸化ナトリウ
ム水溶液でpHを7.0に調整する。室温で２時間撹拌し、1
-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カルボジイミ
ド塩酸塩（ Gly-Gly-Phe-Gly-PABC-NH-Aの0.6当量）を
加え、0.1規定塩酸でpHを7.0に調整する。室温で2時間
撹拌し、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)-カル
ボジイミド塩酸塩（ Gly-Gly-Phe-Gly-PABC-NH-Aの0.6
当量）を加え、0.1規定塩酸でpHを7.0に調整する。室温
で一晩反応させ、反応液を0.1規定水酸化ナトリウム水
溶液でpHを9.0に調整する。バイオマックス-50膜を用い
た限外濾過法により脱塩する。膜を通過しない残留溶液
をミリポアフィルター(0.22μm)で濾過し、凍結乾燥し
て、標記化合物をアモルファスとして得る。

【００３３】比較例１比較化合物カルボキシメチルデキストランポリアルコー
ル−シス−ジ（１，２−ジアミノシクロヘキサン）白金
錯体[CM-Dex-PA-Pt(Dach)]の合成カルボキシメチルデキストランポリアルコールのナトリ
ウム塩（カルボキシメチル化度０．４、分子量（ゲル濾
過、プルラン標準）２９８Ｋ、１１６mg）を水（２mL）
に溶解し、それに実施例１で用いたPt(NO₃)₂(Dach)の水
溶液（１０mL）を加えた。０．１Ｎ水酸化ナトリウム水
溶液でｐＨ７．０に調整した後、４０℃で１９時間反応
させた。反応液を、ＰＤ−１０カラム（アマシャムフ
ァルマシア社製）で精製した。高分子を含む画分をミリ
ポアフィルター（０．２２μｍ）で濾過した後、凍結乾
燥して標記化合物（９０mg）を得た。本化合物の白金含
量を原子吸光法により定量したところ５．４％（W/W）
であった。

【００３４】比較例２比較化合物カルボキシメチルデキストランポリアルコー
ル−シス−ジアミノ白金錯体[CM-Dex-PA-Pt(NH₃)₂]の合
成比較例１で用いたカルボキシメチルデキストランポリア
ルコールのナトリウム塩（１００mg）を水（８mL）に溶
解し、それに実施例２で用いたPt(NO₃)₂(NH₃)₂の水溶液
（３mL）を加えた。０．１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で
ｐＨ７．０に調整した後、４０℃で２４時間反応させ
た。反応液を、ＰＤ−１０カラム（アマシャムファル
マシア社製）で精製した。高分子を含む画分をミリポア
フィルター（０．２２μｍ）で濾過した後、凍結乾燥し
て標記化合物（７０mg）を得た。本化合物の白金含量を
原子吸光法により定量したところ６．１％（W/W）であ
った。

【００３５】試験例１低分子白金遊離試験（０．１MNaCl含有０．１Ｍリン酸
緩衝液中（ｐＨ７．４））実施例１で得られたDCM-Dex-PA-Pt(Dach)、実施例２で
得られたDCM-Dex-PA-Pt(NH₃)₂をそれぞれ白金として、
０．０５mg／mLになるように０．１MNaCl含有０．１Ｍ
リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解した。３７℃でイン
キュベーションした後、反応液をＰＤ−１０カラム（ア
マシャムファルマシア社製）で分画した。高分子画分
と低分子画分の白金含量をそれぞれを原子吸光法により
定量した結果から求めた低分子白金の遊離量（％）は下
記表１の通りである。

【００３６】

【表１】

【００３７】表１の結果より、本発明の薬物複合体は、
担持した医薬化合物を長時間に渡って徐々に放出するこ
とがわかる。白金錯体は、蛋白質、アミノ酸等のアミノ
基に白金が転移するとともに全身に分布してしまうため
薬効の低下、副作用を生じるという問題がある。これに
対し、このように緩衝液中で徐々に白金を放出する本発
明の薬物複合体は腫瘍部位に到達するまで、十分に有効
成分である白金錯体を担持し、腫瘍部位で有効に作用さ
せることができる。

【００３８】

【発明の効果】本発明の薬効複合体を用いれば、薬物担
持能力が高く、薬物を標的部位に確実に到達させること
ができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１の化合物のＧＰＣチャートを示す図で
ある。

【図２】実施例２の化合物のＧＰＣチャートを示す図で
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 33/24 Ａ６１Ｋ 33/24 45/00 45/00 Ａ６１Ｐ 29/00 Ａ６１Ｐ 29/00 35/00 35/00 Ｃ０８Ｂ 37/02 Ｃ０８Ｂ 37/02 Ｆターム(参考） 4C076 BB01 BB11 CC04 CC27 DD51 EE38 FF02 FF32 FF65 4C084 AA17 NA13 ZB112 ZB262 4C086 AA01 AA02 BA12 CB22 EA10 MA01 MA05 NA10 NA13 ZB11 ZB26 ZC75 4C090 AA05 AA09 BA12 BB02 BB12 BB32 BB36 BB92 CA28 CA36 DA10 DA22 4C206 AA01 AA02 JB16 JB17 MA01 MA05 NA13 ZB11 ZB26

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールと医薬化合物の残基とが結合してなる薬
物複合体。
【請求項２】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールと医薬化合物の残基とが１個のアミノ酸
からなるスペーサー又はペプチド結合した２〜８個のア
ミノ酸からなるスペーサーを介して結合してなる薬物複
合体。
【請求項３】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールと医薬化合物の残基とがリンカーを付加
した１個のアミノ酸からなるスペーサー又はリンカーを
付加したペプチド結合した２〜８個のアミノ酸からなる
スペーサーを介して結合してなる薬物複合体。
【請求項４】医薬化合物が、抗腫瘍剤又は抗炎症剤であ
る請求項１〜３のいずれか１項に記載の薬物複合体。
【請求項５】医薬化合物が、白金系抗腫瘍剤、カンプト
テシン誘導体、アンスラサイクリン系抗腫瘍剤、タキサ
ン系抗腫瘍剤、フッ化ピリミジン系代謝拮抗剤、ビンカ
アルカロイド系抗腫瘍剤及び葉酸拮抗剤から選ばれる化
合物である請求項１〜４のいずれか１項に記載の薬物複
合体。
【請求項６】医薬化合物がシスプラチン、カルボプラチ
ン又はオキサリプラチンである請求項１〜５のいずれか
１項に記載の薬物複合体。
【請求項７】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールが、ジカルボキシメチルデキストランポ
リアルコールである請求項１〜６のいずれか１項に記載
の薬物複合体。
【請求項８】ジカルボキシメチルデキストランポリアル
コールと白金系抗腫瘍剤とが配位結合してなる薬物複合
体。
【請求項９】ジカルボキシＣ_1-3アルキルデキストラン
ポリアルコールを含有する医薬化合物デリバリー用キャ
リヤー。
【請求項１０】請求項１〜７に記載の薬物複合体製造の
ためのジカルボキシＣ_1- ₃アルキルデキストランポリア
ルコールの使用。
【請求項１１】ハロゲン化Ｃ_1-3アルキルジカルボン酸
又はそのエステルとデキストランポリアルコールを水酸
化セシウムの存在下に反応させることを特徴とするジカ
ルボキシＣ_1-3アルキルデキストランポリアルコールの
製造法。
【請求項１２】ハロゲン化マロン酸又はそのエステルと
デキストランポリアルコールを水酸化セシウム存在下に
反応させることを特徴とするジカルボキシメチルデキス
トランポリアルコールの製造法。