JP2001522817A

JP2001522817A - オピオイドと内因性担体の新規コンジュゲート

Info

Publication number: JP2001522817A
Application number: JP2000520159A
Authority: JP
Inventors: エズリン，アラン，エム．; ブライドン，ドミニク，ピー．; オルメス，ダラン，エル．; ミルナー，ピーター
Original assignee: コンジュケム，インコーポレーテッド
Priority date: 1997-11-07
Filing date: 1998-11-06
Publication date: 2001-11-20
Also published as: AU1312799A; WO1999024074A3; WO1999024462A3; CA2309205A1; CA2301799A1; WO1999024076A9; WO1999024074A2; AU1385699A; DE69812727D1; WO1999024076A3; ES2173641T3; JP2001522863A; AU1519799A; WO1999024076A2; AU750387B2; EP1028971A2; EP1007561B1; ATE216402T1; DE69804974D1; DE69804974T2

Abstract

(57)【要約】抗侵害受容薬、特にオピオイド又はオピオイド類似体、より特定的には、ダイノルフィン、エンドルフィン、デルトルフィン、エンケファリン又はそれらの類似体を、血液成分（好ましくは血液細胞又はタンパク質）と反応することができる反応性官能基を与える物質と結合させることにより、上記の抗侵害受容薬からコンジュゲートを調製する。上記のコンジュゲートは抗侵害受容薬の治療寿命を延長することができる。これらは、痛みを軽減する、鎮痛作用を生じさせる、または麻薬の使用中止の場合を補助するために患者に投与され、また、受容体活性のプローブとしても用いられる。患者への投与は、生体内又は生体外でおこなわれ、反応性官能基を有する誘導体を患者の血管系に導入する方法、またはこれらのコンジュゲートを外部で（またはin vitroで）調製し、次いでそのコンジュゲートを患者の血管系に導入する方法のいずれかによっておこなわれる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の属する技術分野本発明は、抗侵害受容薬(antinociceptive agent)、特にオピオイドと内因性担体のコンジュゲート、特に、オピオイドとさまざまな血液成分、特に血液タン
パク質とのコンジュゲートに関する。

【０００２】発明の背景技術抗侵害受容薬は、痛みを軽減するために用いられる薬物の大クラスを構成して
いる。これらにはステロイド、鎮痛薬、バルビツレートおよびオピオイドが含ま
れる。

【０００３】オピオイドは薬物の大クラスを構成し、痛みを緩和するために臨床的に用いら
れ、植物由来および合成のアルカロイドならびに哺乳動物の脳に固有に見いださ
れるペプチドの両方が含まれる。後者は３つの別個のファミリーを構成する。す
なわち、ベータエンドルフィンおよびプロオピオメラノコルチンに由来する他の
ペプチド、エンケファリンならびにダイノルフィンである。オピオイドは神経細
胞と相互作用し、侵害受容のような生理機能を調節する。このクラスに属する化
合物に起因する生理作用の一つは痛覚脱失である。

【０００４】オピオイド薬物は痛みを緩和するために臨床的に用いられるが、これらの有用
性は、普通慢性の治療によって生じる耐性および依存性のために制限される。モ
ルヒネのようなオピオイド薬物は習慣性があり、呼吸ならびに心臓の低下および
嗜眠状態のような中枢が介在する副作用を有する。オピオイドのもつ痛みを軽減
する性質を利用することができて、中枢が介在する副作用がない、または低減さ
れた治療用薬物の開発が望まれる。また、オピオイドおよび/または他の抗侵害受容薬の陽性の性質を、現在普通に用いられているものと比べて長時間にわたっ
て保持するような治療用薬物の開発ができることも望ましい。

【０００５】発明の概要本発明は、血液成分上の利用可能な反応性官能基と反応して共有結合を形成し
、得られた共有結合によるコンジュゲートが抗侵害受容活性を有するような、抗
侵害受容薬、特にオピオイドの新規な化学反応性誘導体に関する。

【０００６】元の薬物と比較して、コンジュゲートした分子は血流中での寿命が延長され、
そのため、コンジュゲートしていない元の薬物と比較してより長時間にわたって
活性を維持することができ、また、中枢が介在する副作用なしで、またはこれを
最小限にしながら、これらの活性を提供することができる。

【０００７】また、本発明には、これらの薬物と血液成分とのコンジュゲート、および新規
の抗侵害受容薬誘導体または新規のコンジュゲートを哺乳動物宿主の血流に投与
することからなる、患者に活性を提供する方法が含まれる。

【０００８】本発明は、本発明の誘導体を、痛みを治療するため、および患者の免疫応答を
修正するために使用することに関する。

【０００９】本発明はまた、たとえば宿主の血流から望ましくない過剰なコンジュゲートを
除去するために、抗体を、上記のコンジュゲートの所在を突き止め、これらに結
合させるために用いることに関する。

【００１０】発明の詳細な説明本発明の完全な理解を得るために、以下の定義を与える。抗侵害受容薬：抗侵害受容薬は痛みを軽減するために用いられる薬物である。
抗侵害受容薬には、ステロイド、鎮痛薬、バルビツレートおよびオピオイドが含
まれる。

【００１１】オピオイド：オピオイドは薬物の大クラスで、鎮痛剤として臨床的に用いられ
、植物由来および合成のアルカロイドおよび哺乳動物の脳に内在的に見いだされ
るペプチドの両方が含まれる。植物由来のアルカロイドは何千年も前から知られ
、用いられてきたが、内因性オピオイドペプチドは1970年代中頃になってから発
見されたものである。

【００１２】オピオイドには、エンドルフィン、エンケファリン、デルトルフィン(deltorp
hins)、ダイノルフィンおよびこれらの類似体ならびに誘導体が含まれる。オピオイドの中では、ダイノルフィン、特にダイノルフィンAおよびその誘導体ならびに類似体が本発明における使用に適している。

【００１３】ダイノルフィン：ダイノルフィンは中枢神経系に多様な形態で存在する内因性
オピオイドの１クラスである。ダイノルフィンは前駆体のプロダイノルフィン（
プロエンケファリンB）から誘導される。ダイノルフィンA1-17としても知られて
いるダイノルフィンは、配列Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu⁵-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro¹⁰-Lys
-Leu-Lys-Trp-Asp¹⁵-Asn-Gln（配列番号１）を有する周知のオピオイドである。
ダイノルフィンの誘導体および類似体は、DynA1-13（配列番号２）、DynA2-13（
配列番号３）、DynA1-12、DynA2-12およびDynA2-17、ならびに、Leeらの米国特許第4,462,941号に記載されたもののようなアミド類似体、Leeらの国際特許出願
第WO96/06626号に記載されたもののようなN-末端切断型ダイノルフィン類似体、
およびLeeらの国際特許出願第WO93/25217号に開示されたもののようなdes-Tyrま
たはdes-Tyr-Gly類似体をはじめとして、数多く知られている。

【００１４】オピオイド受容体：オピオイド受容体はオピオイド分子が結合する膜結合受容
体である。モルヒネはμオピオイド受容体に結合する。エンケファリンはδオピ
オイド受容体に結合する。ダイノルフィンペプチドはKオピオイド受容体に結合する。

【００１５】受容体アゴニスト：受容体アゴニストは受容体を活性化して、完全なまたは部
分的な薬理反応を誘導することができる化学物質である。

【００１６】受容体アンタゴニスト：受容体アンタゴニストは生物学的に活性な物質と構造
的に関連があり、阻害剤として作用する化学物質である。

【００１７】反応単位：反応単位は共有結合を形成することができる単位である。このよう
な反応試薬は、当該治療用または診断用薬にカップリングまたは結合する。反応
単位は一般的に水性環境において安定で、通常カルボキシル、ホスホリル、また
はエステルまたは混合無水物のいずれかの使いやすいアシル基、またはイミダー
トであって、これにより標的部位の基と共有結合を形成して誘導体を形成するこ
とができるものである。

【００１８】反応基との共有結合の形成に利用できる血管タンパク質上の反応性官能基は、
第１アミノ、カルボキシル、ヒドロキシル、およびチオール基である。

【００１９】これらの定義を考慮して、本発明は、抗侵害受容薬の誘導体、好ましくはオピ
オイド、最も好ましくはダイノルフィンまたはダイノルフィン誘導体もしくは類
似体であって、血液成分上の利用できる反応性官能基と共有結合によって反応す
ることができる組成物に関する。本発明はまた、上記の誘導体、上記の血液成分
との結合体、およびそれを使用する方法に関する。これらの方法には、当該薬物
の治療に有効な時間の効果を、元の薬物それ自体を患者に投与するのと比較して
延長する方法、および痛みを軽減する方法が含まれる。

【００２０】誘導体は、抗侵害受容薬分子、および血液成分、特に血液タンパク質の反応性
官能基と反応することができる、本明細書に記載されるような化学的に反応性の
基を有する結合基からなる、DAC（薬物親和性複合体）と呼ばれるタイプのものである。血液タンパク質は、血液に由来する、血液から精製された、または組換
え血液タンパク質であってよい。血液成分またはタンパク質との反応によって、
誘導体またはDACは血液を介して患者の適切な部位または受容体に送達される。

【００２１】タンパク質および他の血液成分とコンジュゲートできるオピオイドおよび他の
抗侵害受容薬の誘導体は、上記のように、タンパク質上の反応性官能基に共有結
合により結合する化学的に反応性の基を有する結合基を用いて、他の治療薬にお
いて公知の、たとえば米国特許第5,612,034号に記載される方法で調製される。これらの反応性官能基は、第１アミノ、カルボキシル、ヒドロキシルおよびチオ
ール基である。タンパク質上の官能基と共有結合を形成するために、化学的に反
応性の基としてさまざまな活性基を用いることができる。多くの異なる反応性の
基をこれらの結合試薬に用いることができるが、最も便利なものは、N-ヒドロキ
シスクシンイミジル（NHS）およびマレイミドである。これらの基は、たとえば、N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、N-ヒドロキシスルホスクシンイミド（スルホ-NHS）、マレイミドベンゾイルスクシンイミド(MBS)、γ-マレイミドブチリ
ルスクシンイミド(GMBS)、マレイミドプロピオン酸(MPA)またはNHSエステルまた
はマレイミド基を与える他の試薬を使用することによって導入される。本発明の
好ましい実施形態においては、このタンパク質上の官能基はチオール基であって
、化学的に反応性の基はマレイミドを有する基である。

【００２２】利用できる他の結合試薬は、米国特許第5,612,034号に記載されており、この文献を本明細書に組み入れる。

【００２３】本発明で利用できる抗侵害受容薬は、オピオイドと同様に、上記の結合基およ
び化学的に反応性の基と結合して、タンパク質上の官能基と共有結合を形成する
ことができるものである。

【００２４】標的を定めた結合を使用する場合、長寿命の血液成分の選択は、薬物の所望の
寿命、およびオピオイド誘導体との結合に対する血液成分の利用可能性に少なく
とも部分的に影響される。対象のオピオイド誘導体の化学的に反応性の基が反応
するさまざまな部位には、細胞、特に赤血球および血小板、およびタンパク質、
たとえば、IgGおよびIgMを含むイムノグロブリン、血清アルブミン、フェリチン
、ステロイド結合タンパク質、トランスフェリン、チロキシン結合タンパク質、
α-2-マクログロブリン等が含まれる。誘導体化されたオピオイドが反応する、長寿命ではないタンパク質は、一般的に約３日以内に宿主から排出される。上に
示されたタンパク質（細胞のタンパク質を含む）は、特に血中濃度に基づく半減
期によれば、３日間以上体内に留まり、５日以上でも留まり得る（一般的に60日
以下、より普通には30日以下）。

【００２５】ほとんどの場合、反応は、血液中の可動性の成分、特に血液タンパク質および
細胞、より特定的には血液タンパク質および赤血球とおこなわれる。「可動性の
(mobile)」という用語は、成分が長時間、一般的に５分、より普通には１分以下
の時間にわたって固定された位置を持たないことを意味するが、血液成分のいく
つかは長時間にわたって比較的静止している。初めは官能化されたタンパク質お
よび細胞の比較的不均一な集団が存在する。けれども、ほとんどの場合、集団は
２、３日以内に、血流中の官能化された(functionalized)タンパク質の半減期に
依存して、最初の集団から実質的に変化する。そこで、通常は約３日またはそれ
以上のうちに、IgGが血流中の主な官能化されたタンパク質になる。

【００２６】通常、投与後５日までに、IgG、血清アルブミンおよび赤血球が、血中のコンジュゲートした成分の約60モル%以上、普通は約75モル%以上となり、IgG、IgM（
実質的により少ない）および血清アルブミンが細胞以外のコンジュゲート成分の
約50モル%以上、普通は約75モル%以上、より普通には約80モル%以上となる。

【００２７】好ましくは、抗侵害受容薬またはオピオイド誘導体はアルブミンとコンジュゲ
ートする。このようなコンジュゲーションは、マレイミド（たとえば、GMBS、MP
Aまたは他のマレイミド基から調製される）のアルブミン上のチオール基との共有結合によって成されるのが好ましい。アルブミン上にはチオール基が一つしか
ないので、コンジュゲートはオピオイド誘導体とアルブミンの比がおよそ1:1となる傾向がある。これは、一つのアルブミン分子に当該治療薬のたくさんの分子
が共有結合により結合する結果となる典型的なコンジュゲーション技術とは対照
的である。

【００２８】必要があれば、生体外で、本発明の誘導体化したオピオイドまたは他の薬物と
血液を反応させて、誘導体化した薬物を血液成分上の反応性官能基と共有結合さ
せた後、コンジュゲートした血液を宿主に戻すまたは投与することにより、本発
明のコンジュゲートを調製してもよい。さらに、上記の方法を、最初に個々の血
液成分または限られた数の成分、たとえば、赤血球、免疫グロブリン、血清アル
ブミン等を精製し、その成分（１種類または数種類の）を生体外で化学的に反応
性の誘導体と結合させることによって実施してもよい。次に、官能基化された血
液または血液成分を宿主に戻して、本発明の治療に有効なコンジュゲートを生体
内に供給する。血液を、生体外で扱う間の凝固を防ぐために処理してもよい。

【００２９】ヘモグロビンのようないくつかの血液成分は、比較的高い血液神経関門および
血液脳関門の透過性を有することが知られている。本発明の好ましい実施形態の
一つの主眼は、アルブミンの、間質腔に入って末梢ニューロンに到達する能力を
利用することで、それにより、修飾したオピオイド分子を痛みの受容体に送達し
、末梢オピオイド受容体の刺激によって痛みの伝達に影響を与える。臨床データ
は、末梢オピオイド受容体は、モルヒネ用薬物の問題となっている抗侵害受容活
性の潜在的な標的であり、中枢神経系への侵透の必要なしに痛みを低減するのに
有効であることを示唆している(Steinら、1991)。現存するオピオイド様薬物の制限要因の主なものには、中枢に仲介される副作用（呼吸および心臓の抑制）、
嗜癖の可能性およびダウンレギュレーションまたは有効性の低下が含まれる。こ
れに対して、アルブミンのような血漿タンパク質に結合した薬物は活性を保持し
、心臓および呼吸の抑制および嗜癖のような中枢に仲介される副作用を持たない
。

【００３０】好ましくは、本発明のコンジュゲートは、タンパク質上のチオール基と選択的
に反応して共有結合によって結合するように、最も好ましくは血液脳関門または
血液神経関門を通らないタンパク質と結合するように構築される。このようなコ
ンジュゲートは、脳または中枢神経系に影響を与えずに、薬物の抗侵害受容作用
を送達することができる。けれども、これらの関門を通ることができるコンジュ
ゲートを作ることが望まれる場合には、抗侵害受容薬を、コハク酸イミドのよう
なより広い反応性を有する基によって誘導体化する。このような誘導体はさまざ
まな血液タンパク質および他の成分と非選択的に反応することができるので、得
られるコンジュゲートには関門を通るものも含まれる。そこで、本発明の好まし
い実施形態において、中枢に仲介される副作用を最小にするためには、誘導体を
第１にアルブミンとコンジュゲートするように構築することに加えて、抗侵害受
容誘導体の血液に対する比を、血中で比較的量が多いアルブミン（コンジュゲー
トを形成するのに好ましい血液成分）に有利になるように制御する。好ましくは
、生体内または生体外において血液に加える抗侵害受容誘導体の量は、約0.01μ
mol/kgから約100μmol/kgで、最も好ましくは約１μmol/kgから約30μmol/kgである。

【００３１】このように、抗侵害受容薬（またはオピオイド）の誘導体は、血液成分一般と
の、または選択された成分（たとえば、アルブミン）との、無作為の（非選択的
）または標的を定めた（選択的）結合のいずれかを目的としてデザインすること
ができる。標的を定めたまたは選択的な結合は、上記のように、目的とする血液
成分に選択的に結合するような反応基を誘導体に組み込むことによって達成され
る。あるいは、結合ライブラリーを作成して、所望の血液成分会合スペクトルを
与えるライブラリーのメンバーをスクリーニングしてもよい。

【００３２】この一般的なタイプのオピオイドのコンジュゲートは、Kiefferら、Analytica
l Biochemistry Vol.215 p.1(1993)において、著者らによって調製されたペプチ
ド（参照にペプチドBとして示される）を、マレイミドリンカー(MBS)を介してウ
シアルブミン(BSA)と結合させることにより調製された。ペプチドBは配列YdAGFL
TPRRASLGC（dAはd-アラニンを意味する）を有する。このコンジュゲートは、ペプチドBそのものよりも高いδ-オピオイド受容体に対する結合能力を有すること
が測定された。しかしながら、このコンジュゲートの治療上の効果については何
も記載されていない。

【００３３】オピオイドまたは他の抗侵害受容薬と血液成分との所望のコンジュゲートは、
オピオイドまたは他の誘導体を、ヒトまたは他の動物である患者に投与すること
により、生体内で作ることができる。投与はボーラス形態で、または計量した流
入等を用いる注入により時間をかけてゆっくりと導入することによっておこなわ
れる。あるいは、血液を宿主から取り出して、生体外で処理してから宿主に戻し
てもよい。別の適用法では、オピオイドまたは他の誘導体を商業的に入手した血
漿タンパク質（たとえば、アルブミン）と生体外でコンジュゲートさせた後、宿
主に注入する。

【００３４】生体内または生体外におけるコンジュゲートの形成に際して、薬物誘導体は生
理的に許容される媒体、たとえば、脱イオン水、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)、生理食塩水、水性エタノールまたは他のアルコール、血漿、タンパク様溶液、マ
ンニトール、グルコース水溶液、アルコール、植物油等に入れて投与される。必
要ならば、少量の生理的に許容される溶剤または補助溶剤(co-solvent)、たとえ
ばDMSOを加えてもよい。加えることができる他の添加剤には、緩衝剤(媒体が一般的にpH5から10の範囲になるように緩衝されたもの、緩衝剤の濃度が一般的に約50から250mMの範囲であるもの)、塩(塩濃度が一般的に5から500mMの範囲であるもの)、生理学的に許容される安定剤等が含まれる。組成物は、保存および輸送の便宜のために凍結乾燥してもよい。

【００３５】本発明の薬物誘導体はほとんどの場合、脈管内(IV)、眼内(IO)、動脈内(IA)、
筋内(IM)、皮下(SC)等のような非経口経路で投与される。適当な状況においては
、投与は輸液によるものであってよい。活性な官能基の反応が比較的遅い場合で
、コンジュゲートが血管系への移入が可能な性質を有する場合は、投与は経口、
鼻、直腸、経皮またはエアロゾルでおこなってよい。通常１回の注入が用いられ
るが、必要ならば２回以上の注入を用いてもよい。薬物誘導体は、シリンジ、ト
ロカール、カテーテル等のようないかなる使い易い手段を用いて投与してもよい
。個々の投与様式は、投与する量、１回のボーラス投与か連続的な投与か等に依
存して変化する。好ましくは、投与は脈管内投与であって、導入の部位は本発明
にとって重大ではないが、好ましくは血流の速度が速い部位、たとえば静脈内、
末梢または中心静脈に投与される。徐放技術または保護マトリックスと組み合わ
せて投与する場合には他の経路を使用することもできる。目的は、抗侵害受容薬
、特にオピオイド、ダイノルフィン類似体または誘導体が血液中に効果的に分布
して血液成分と反応できるようにすることである。コンジュゲートの濃度は広く
変化するが、一般的に約1pg/mlから50mg/mlの範囲である。脈管内に投与される総量は、一般的に約0.1mg/mlから約10mg/ml、より普通には約1mg/mlから約5mg/m
lの範囲である。

【００３６】イムノグロブリン、血清アルブミン、赤血球および血小板のような寿命の長い
血液成分と結合することにより、多くの利点が生じる。薬物の活性は、数日から
数週間延長される。投与は、この期間内にただ１度しか必要としない。活性化合
物は主に大きい分子に結合し、そのため細胞内に取り込まれて他の生理的なプロ
セスに干渉する可能性が低くなると考えられるので、より高い特異性が達成され
る。

【００３７】哺乳動物宿主の血液を、薬物の存在に関して、１回以上モニターする。宿主の
血液の一部分またはサンプルを採取することにより、薬物が治療に有効となるの
に十分な量で寿命の長い血液成分と結合したかどうか、さらにその化合物の血中
のレベルを測定することができる。必要ならば、どの血液成分に薬物またはその
誘導体分子が結合するかをも測定できる。

【００３８】上記のように、本発明は、抗侵害受容薬、特にオピオイド、オピオイド類似体
およびその誘導体と、血液成分、特にアルブミンのような血液タンパク質とのコ
ンジュゲート、ならびにこれらをヒトまたは他の動物の患者に投与する方法に関
する。

【００３９】本発明の他の態様は、生体サンプル（たとえば血液）中の薬物、またはその誘
導体およびコンジュゲートの濃度を、抗侵害受容薬またはその誘導体およびコン
ジュゲートに特異的な抗体を用いて決定する方法、ならびに上記の薬物またはコ
ンジュゲートに関連する可能性のある毒性の治療への上記の抗体の使用に関する
。これは、患者の生体内での薬物の安定性および寿命が増加することで、治療中
に毒性の可能性の増加のような新たな問題が生じることがあるので、有利である
。モノクローナルまたはポリクローナルのいずれかであって、特定の抗侵害受容
薬またはその誘導体に特異性を有する抗治療薬抗体の使用は、このような問題の
仲裁の助けとなる。抗体は、特定の薬物もしくはその誘導体によって、または薬
物の免疫原性断片によって、または薬物の抗原決定基に対応する合成免疫原によ
って、免疫化した宿主に由来する、または作り出される。好ましい抗体は、抗侵
害受容薬の天然の、誘導化された、およびコンジュゲートした形に対して高い特
異性および親和性を有するものである。かかる抗体は、酵素、蛍光色素、または
放射性ラベルによって標識することもできる。

【００４０】抗治療薬抗体は、抗侵害受容薬またはその誘導体の投与によって引き起こされ
る毒性を治療するために使用され、生体外または生体内において使用される。生
体外の方法には、固体支持体に固定された抗治療薬抗体を用いた毒性の免疫透析
治療が含まれる。生体内の方法には、抗体-薬物複合体の排泄を誘発するのに有効な量の抗治療薬抗体の投与が含まれる。

【００４１】抗体は、患者の血液を無菌条件下で抗体と接触させることにより、生体外で患
者の血液から抗侵害受容薬およびそのコンジュゲートを除去するために用いるこ
とができる。たとえば、抗体をカラムマトリックス上に固定または他の方法で不
動化して、患者の血液を患者から取りだし、マトリックス上を通す。抗侵害受容
薬またはコンジュゲートが抗体に結合した後、低濃度の抗侵害受容薬またはコン
ジュゲートを含む血液を患者の循環系に戻してもよい。圧力および流速を調節す
ることにより、除去される抗侵害受容薬の量をコントロールできる。たとえば、
半透膜の使用によって、または他の当業者に公知の方法によってまず細胞成分か
ら血清成分を分離した後に血清成分を抗治療抗体を含むマトリックス上に通すこ
とによって、患者の血液の血清成分からの抗侵害受容薬およびコンジュゲートの
優先的な除去が達成される。あるいは、コンジュゲートした血液細胞、たとえば
赤血球の優先的な除去は、患者の血液の血清成分を除外して患者の血液中の血液
細胞を集め、濃縮して、これらの細胞を固定した抗治療抗体と接触させることに
よって達成される。

【００４２】抗治療抗体は、抗侵害受容薬またはコンジュゲートを治療のために投与された
患者に、非経口投与によって生体内に投与することができる。抗体は化合物およ
びコンジュゲートに結合する。結合すると、薬物の活性は、完全に遮断されない
場合でも妨げられ、それによって患者の血流中の抗侵害受容薬の生物学的な有効
濃度を減らし、有害な副作用を最小限にする。さらに、結合した抗体-薬物複合体は患者の血流からの抗侵害受容薬およびコンジュゲートの排泄を促進する。

【００４３】抗侵害受容薬の誘導体およびコンジュゲートはいくつかの異なる方法で用いら
れ、いくつかの異なる目的を達成する。上記のように、これらの物質は痛みを軽
減するために典型的な抗侵害受容薬の代わりに用いることができる。現在利用可
能な薬物と比較して、本発明の物質は、中枢を介する副作用、または嗜癖あるい
は効果の低下の可能性なしで痛みを軽減することができ、従来投与されてきた薬
物よりも実質的に長時間にわたって痛みを軽減する効果を有する。本発明のオピ
オイド誘導体およびコンジュゲートはまた、抗炎症および/または抗刺激薬として、または一般的に組織からの血管の漏れを防止するために利用することができ
る（米国特許第5,482,930号による）。さらに、当業者に公知なように、これらの物質はモルヒネに耐性を有するまたは耐性となった宿主を治療するために（ま
たはメタドン治療プログラムをおこなっている途中の患者を治療するために）、
および一般的に麻薬の禁断症状の治療に用いることができる。さらに、本発明の
コンジュゲートおよび物質は、標識して、さまざまな受容体の生物学的な機能を
研究するためのプローブのような実験の目的に利用することができる。

【００４４】以下の実施例によって本発明をさらに説明する。実験の説明概略すべてのダイノルフィンA類似体の合成は、手動の固相合成、およびABI 433A ペプチド合成機を用いておこなった。ペプチド合成機においては、0.55mmol/gの
Fmoc保護Rink Amide MBHA樹脂(NovaBiochem)、4当量のFmoc保護アミノ酸、4当量
の0.45M ヘキサフルオロリン酸O-ベンゾトリアゾール-1-イル-N,N,N',N'-テトラ
メチルウロニウム(HBTU)および1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)のN,N-ジ
メチルホルムアミド溶液を使用し、4当量の2M N,N-ジイソプロピルエチルアミン
(DIEA)の1-メチル-2-ピロリジノン(NMP)溶液により活性化して、Fmoc基をピペリ
ジンで脱保護した。カルボキシ末端のリシン残基の側鎖の誘導体化は、Fmoc-Lys
(Mtt)-OH(NovaBiochem)を用いておこない、メチルトリチル(Mtt)基の脱保護は、
5%トリフルオロ酢酸(TFA)/5%トリイソプロピルシラン(TIS)のジクロロメタン(DC
M)溶液を用いておこなった。アミノ末端に遊離のアミノ酸残基を有する誘導体は
、Boc-Tyr(tBu)-OH(NovaBiochem)またはBoc-Gly-OH(Advanced Chem Tech)のいず
れかを用いて合成した。樹脂の開裂および生成物の単離はすべて、95% TFA/2.5%
TIS/2.5% H₂Oを用いた後に、ドライアイスで冷却したEt₂Oによって沈殿させることにより実施した。すべてのダイノルフィンAの類似体は、Varian(Rainin)分取二元HPLCシステム：DynamaxC₁₈、60Å、8μm安全モジュールおよび214および2
54nmのUV検出器(Varian Dynamax UVD II)を装備したDynamaxC₁₈、60Å、8μm、2
1mm×25cmカラムを用いて、5-60% B(H₂O中0.045% TFA(A)およびCH₃CN中0.045% T
FA(B))の9.5mL/分の勾配溶離を用いた分取逆相HPLCによって精製された。分析用
HPLCは、Varian(Rainin)二元HPLCシステム： DynamaxC₁₈、60Å、8μm安全モジュールおよび214および254nmのUV検出器(Varian Dynamax UVD II)を装備したDyn
amaxC₁₈、60Å、8μm、4.6mm×25cmカラムを用いた、5-60% B(H₂O中0.045% TFA(
A)およびCH₃CN中0.045% TFA(B))の0.5mL/分の勾配溶離を用いておこなった。マススペクトルはPE Sciex API III電気スプレーBiomolecular Mass Analyzerによ
っておこなった。

【００４５】 TFAはヒトに用いることを意図した製品に含まれることは許容されないのでHCl
のようなヒトに適合した保護剤が用いられる。

【００４６】実施例１ Dyn A 1-13(MPA)-NH₂の合成自動ペプチド合成を用いて、Ring Amide MBHA樹脂に以下の保護されたアミノ酸を順次加えた：Fmoc-Lys(Mtt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Pr
o-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、 Fmoc-Arg(Pbf)-OH
、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、およびBoc-Tyr(Boc)
-OH。残りの段階、すなわち、Mtt基の選択的な除去およびDMF中でのHBTU/HOBt/D
IEA活性化によるマレイミドプロピオン酸(MPA)とのカップリングには手動の合成
をおこなった。目的とするダイノルフィン類似体を樹脂から取り出した。生成物
を沈殿によって単離し、分取HPLCによって精製して、凍結乾燥により、目的の生
成物を42%の収率で白色の固体として得た。分析用HPLCにより、生成物は、R_t=33
.00分で、95%以上純粋であることが示された。C₈₂H₁₃₃N₂₆O₁₇(MH⁺)に対するESI-
MS m/zは、計算値1754.0、分析値1754.4、MH³⁺ 585.8であった。この生成物の構造は以下の通りである。

【００４７】

【化１】

【００４８】実施例２ Dyn A 2-13(MPA)-NH₂の合成自動ペプチド合成を用いて、Ring Amide MBHA樹脂に以下の保護されたアミノ酸を順次加えた：Fmoc-Lys(Mtt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Pr
o-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、 Fmoc-Arg(Pbf)-OH
、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、およびBoc-Gly-OH。残りの段階、すなわち、Mtt基の選択的な除去およびDMF中でのHBTU/HOBt/DIEA活性化によるMP
Aとのカップリングには手動の合成をおこなった。目的とするダイノルフィン類似体を樹脂から取り出した。生成物を沈殿によって単離し、分取HPLCによって精
製して、凍結乾燥により、目的の生成物を35%の収率で白色の固体として得た。分析用HPLCにより、生成物は、R_t=30.42分で、95%以上純粋であることが示された。C₇₃H₁₂₃N₂₅O₁₅(MH⁺)に対するESI-MS m/zは、計算値1590.0、分析値MH³⁺ 531
.3であった。

【００４９】実施例３ Dyn A 1-13(AEA₃-MPA)-NH₂の合成自動ペプチド合成を用いて、Ring Amide MBHA樹脂に以下の保護されたアミノ酸を順次加えた：Fmoc-Lys(Mtt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Pr
o-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、 Fmoc-Arg(Pbf)-OH
、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、およびBoc-Tyr(Boc)
-OH。残りの段階、すなわち、Mtt基の選択的な除去、３つのFmoc-AEA-OH基（AEA
=アミノエトキシ酢酸）のカップリングとそれぞれのカップリングの間のFmocの除去、およびDMF中でのHBTU/HOBt/DIEA活性化によるMPA酸のカップリングには手
動の合成をおこなった。目的とするダイノルフィン類似体を樹脂から取り出した
。生成物を沈殿によって単離し、分取HPLCによって精製して、凍結乾燥により、
目的の生成物を29%の収率で白色の固体として得た。分析用HPLCにより、生成物は、R_t=33.06分で、95%以上純粋であることが示された。C₉₄H₁₅₄N₂₉O₂₃(MH⁺)に対するESI-MS m/zは、計算値2057.2、分析値MH⁴⁺ 515.4、MH³⁺ 686.9、MH²⁺ 102
9.7であった。この生成物の構造は以下の通りである。

【００５０】

【化２】

【００５１】実施例４ Dyn A 2-13(AEA₃-MPA)-NH₂の合成自動ペプチド合成を用いて、Ring Amide MBHA樹脂に以下の保護されたアミノ酸を順次加えた：Fmoc-Lys(Mtt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Pr
o-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、 Fmoc-Arg(Pbf)-OH
、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、およびFmoc-Gly-OH 。残りの段階、すなわち、Mtt基の選択的な除去、３つのFmoc-AEA-OH基のカップリングとそれ
ぞれのカップリングの間のFmocの除去、およびDMF中でのHBTU/HOBt/DIEA活性化を用いたMPAのカップリングには手動の合成をおこなった。目的とするダイノルフィン類似体を樹脂から取り出した。生成物を沈殿によって単離し、分取HPLCに
よって精製して、凍結乾燥により、目的の生成物を29%の収率で白色の固体として得た。分析用HPLCにより、生成物は、R_t=31.88分で、95%以上純粋であることが示された。C₈₅H₁₄₅N₂₅O₂₁(MH⁺)に対するESI-MS m/z は、計算値1894.3、分析値MH⁴⁺ 474.6、MH³⁺ 632.4、MH²⁺ 948.10であった。この生成物の構造は以下の通りである。

【００５２】

【化３】

【００５３】実施例5 MPA-AEA₃-Dyn A 2-17-NH₂の合成自動ペプチド合成を用いて、Ring Amide MBHA樹脂に以下の保護されたアミノ酸およびマレイミドを順次加えた：Fmoc-Gln(Trt)-OH、 Fmoc-Asn(Trt)-OH、 Fm
oc-Asp(OtBu)-OH、 Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-
Lys(Boc)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-O
H、 Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH
、 Fmoc-AEA-OH、 Fmoc-AEA-OH、 Fmoc-AEA-OH、およびMPA。次いで、目的とするダイノルフィン類似体を樹脂から取り出した。生成物を沈殿によって単離し、
分離用HPLCによって精製して、凍結乾燥により、目的の生成物を32%の収率で淡黄色の固体として得た。分析用HPLCにより、生成物は、R_t=33.44分で、95%以上純粋であることが示された。C₁₀₉H₁₇₂N₃₅O₂₉(MH⁺)に対するESI-MS m/zは、計算値2436.8、分析値MH³⁺ 813.6であった。この生成物の構造は以下の通りである。

【００５４】

【化４】

【００５５】実施例６ダイノルフィン-ヒト血清アルブミンコンジュゲートの調製（生体外での調製） 10mLの反応バイアルに4.95mLの20% HSAを入れた。そこに、実施例1、３、4または5で調製したダイノルフィン誘導体の10mM水溶液を50.0μL加えた。これらの
混合物を室温で３時間放置した後、逆相HPLCで分析して、出発物質のダイノルフ
ィン誘導体が存在しないことを確認した。

【００５６】実施例７非選択的結合アッセイ上で製造したコンジュゲートの非選択的結合を、ナロキソン(Naloxone)を用い
て以下のようにアッセイした。結合反応 1. それぞれの管に次の成分を入れる： 25μL 薬物または媒体 25μL ³H-ナロキソン 200μL 組織懸濁液（ラットの脳のホモジネート） 2. 組織を加えて結合反応を開始し、25℃で90分間インキュベートする。 3. 未処理のGF/Bフィルターを用いたアッセイ内容物の急速減圧濾過によって
結合反応を終結させる。 4. 管を50mMの氷冷TRIS・HCl(25℃でpH7.4)で１回洗い、次いでフィルターを
およそ7mL/管の同じ氷冷洗浄緩衝液で洗う。 5. フィルター上にトラップされた放射能を液体シンチレーション分光光度測
定を用いてアッセイする。

【００５７】材料および試薬 1. [³H]-ナロキソンを50mM Tris-HCl(25℃でpH7.4)で濃度10nMとなるように希釈して、このアッセイにおける最終的な放射性リガンド濃度が1.0nMとなるようにする。 2. 非特異的結合は、1μMナロキソンが存在し続けることを特徴とする。 3. 対照標準化合物は、最終濃度が3×10^-11、1×10^-10、3×10^-10、1×10^-9 、3×10^-9、1×10^-8、3×10^-8、1×10^-7、および3×10^-7Mであるナロキソンであ
る。 4. 陽性対照は、最終濃度3×10^-9、3×10^-8、および3×10^-7Mでおこなうナロ
キソンである。 5. [³H]-ナロキソンに対するμオピエート受容体のK_dは、2.0nMである。

【００５８】アッセイは、ナロキソン阻害の対照標準としてHSAおよび最初のダイノルフィン(A 1-13、A 2-13、およびA 2-17)を用いておこなった。阻害の試験は、上記の
実施例６で作られたコンジュゲートでおこなった。結果を表１にまとめたが、こ
れにより、４つのコンジュゲートのうち３つが元のダイノルフィンに匹敵するナ
ロキソン阻害を示すことが証明された。

【００５９】

【表１】

【００６０】阻害を示さなかった唯一のコンジュゲートはCCI-Hであった。このコンジュゲート（および実施例５で調製したその前駆体誘導体）は、コンジュゲートがダイ
ノルフィンのカルボキシル末端ではなくアミノ末端を誘導体化することにより作
られた点で他とは異なっている。

【００６１】さらに、CCI-Hは、des-Tyrダイノルフィン誘導体である、Dyn A 2-17から作ら
れた。

【００６２】このアッセイにおいて、コンジュゲートCCI-Eおよび-GがDyn A 1-13-NH₂と同様に機能したという事実は驚くべきことである。同様に有効なのはCCI-Fで、Dyn
A 2-13-NH₂と同程度に阻害した。これらのデータは、ダイノルフィンコンジュゲートが天然のダイノルフィンペプチドと同じ能力を有することを示唆している
。

【００６３】実施例８生体内の実験マウスにおいて20% HSAを用いて生体内および生体外で調製されたダイノルフィン-アルブミンコンジュゲートの抗侵害受容活性を示すために以下のアッセイをおこなった。

【００６４】試験した物質は、グループA：モルヒネ(10μmol/kgまたは3mg/kg)、20% HSA(1用量、すなわち、
250μL)、0.9%生理食塩水。

【００６５】グループB：ダイノルフィンA 1-13-NH₂塩(10μmol/kgまたは20mg/kg)、生体外
のコンジュゲートとしてCCI-1017(10μmol/kgまたは696mg/kg)、および生体内の
コンジュゲートとしてCCI-1008(30μmol/kgまたは70mg/kg)。

【００６６】グループC：ダイノルフィンA 2-13-NH₂塩(10μmol/kgまたは18mg/kg)、生体外
のコンジュゲートとしてCCI-1018(10μmol/kgまたは697mg/kg)、および生体内の
コンジュゲートとしてCCI-1010(30μmol/kgまたは77mg/kg)。

【００６７】グループD：生体外のコンジュゲートとしてCCI-1019(10μmol/kgまたは699mg
/kg)、および生体内のコンジュゲートとしてCCI-1009(30μmol/kgまたは79mg/kg
)。

【００６８】グループE：ダイノルフィンA 2-17-NH₂塩(10μmol/kgまたは25mg/kg)、生体外
のコンジュゲートとしてCCI-1020(10μmol/kgまたは70mg/kg)、および生体内のコンジュゲートとしてCCI-1011(30μmol/kgまたは90mg/kg)。

【００６９】それぞれの処理グループは４つの時点(5分、１時間、３時間、および24時間）
から構成され、３匹のオスのマウス/回/時点を用いた。

【００７０】実験方法：よじり(writhing)アッセイ(Hooke, L. P.; Lee, N. M. J. Pharmacol. Exp. T
her. 1995, 273, 802-807およびHayashi, G.; Takemori, A. E. Eur. J. Pharma
col. 1971, 16, 63-66)

【００７１】よじりアッセイのおよそ１時間前に、順応時間としてマウスを個々に透明な観
察チャンバーに入れる。

【００７２】６分間にわたって腹部の伸長（よじり）の回数を数える。これがアッセイに対
する基準反応となる。

【００７３】被検物質(体積250μL)を尾静脈にボーラス剤として注入する。被検物質を注入
した後、与えられた時点（５分、１時間、３時間、24時間)に、マウスの腹腔内に2mg/kg酢酸(HOAc)を注入する。

【００７４】 HOAc投与の５分後に、マウスを透明なシリンダーに入れて、６分間にわたって
腹部の伸長（よじり）の回数を数える。伸長回数の平均を対照グループ(0.9%生理食塩水)のそれと比較する。抗侵害受容活性を、対照グループのよじりの平均（典型的には18〜25）に対する阻害％として表す。

【００７５】データを下記の表２に示す。

【表２】 ^a 30μmol/kgでは、TAの静脈内注入後５分以内に３匹の動物のうち３匹が死亡した。^b 10μmol/kgでは、TAの静脈内注入後５分以内に３匹の動物のうち３匹が死亡した。^c 10μmol/kgでは、TAの静脈内注入後５分以内に３匹の動物のうち1匹が死亡し
た。^d 30μmol/kgでは、TAの静脈内注入後５分以内に３匹の動物のうち1匹が死亡し
た。

【００７６】この表のデータは、実施例６において生体外で調製されたコンジュゲートCCI-
EおよびＧが、開始を遅らせた後に効力があり、作用時間が持続することを示している。興味深いことに、デスチロシン誘導体のCCI-FおよびCCI-Hは初期の効果
が小さく、持続性も示さなかった。さらに、生体内の投与は中程度の初期活性と
長時間の持続およびモルヒネに類似した活性の特徴を示し、生体内において天然
のアルブミンとコンジュゲートを形成する能力を証明している。

【００７７】配列表の簡単な説明配列番号１は、ダイノルフィンA(1-17)である。配列番号２は、ダイノルフィン類似体、DynA(1-13)である。配列番号３は、ダイノルフィン類似体、DynA(2-13)である。配列番号４は、DynA(1-13)の誘導体である。配列番号５は、DynA(1-13)の別の誘導体である。配列番号６は、DynA(2-13)の誘導体である。配列番号７は、DynA(2-17)の誘導体である。

【配列表】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者オルメス，ダラン，エル．カナダ国エイチ３ジー１ティー３ケベック，モントリオール，ドラモンドストリート 3450 (72)発明者ミルナー，ピーターアメリカ合衆国 94022 カリフォルニア州，ロスアルトスヒルズ，マニュエラロード 14690

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】抗侵害受容薬の誘導体であって、前記誘導体が血液成分と反
応して安定な共有結合を形成する反応性官能基を含み、抗侵害受容薬が配列YdAG
SFLTPRRASLGCを有するオピオイド以外のものである抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項２】血液タンパク質と反応して安定な共有結合を形成する、請求
項１記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項３】アルブミンと反応して安定な共有結合を形成する、請求項１
記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項４】反応性官能基が血液成分上のアミノ基、カルボキシル基、ま
たはチオール基と反応することができる、請求項１記載の抗侵害受容薬の誘導体
。
【請求項５】反応性官能基が血液成分上のチオール基と反応することがで
きる、請求項４記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項６】抗侵害受容薬とスクシンイミドまたはマレイミド化合物との
反応によって調製される、請求項１記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項７】オピオイドまたはその類似体と、N-ヒドロキシスクシンイミ
ド、N-ヒドロキシスルホスクシンイミド、マレイミド-ベンゾイル-スクシンイミ
ド、ガンマ-マレイミド-ブチリルスクシンイミドまたはマレイミドプロピオン酸
との反応によって調製される、請求項６記載の誘導体。
【請求項８】抗侵害受容薬とマレイミド化合物の反応によって調製される
、請求項６記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項９】抗侵害受容薬がオピオイドまたはオピオイド類似体である、
請求項１記載の抗侵害受容薬の誘導体。
【請求項１０】オピオイドがダイノルフィンおよびその類似体から選択さ
れ、前記誘導体が血液タンパク質と反応性である、請求項９記載のオピオイド誘
導体。
【請求項１１】前記誘導体が血液タンパク質上のチオール基と反応性であ
る、請求項９記載のオピオイド誘導体。
【請求項１２】血液成分に共有結合により結合した抗侵害受容薬の誘導体
からなるコンジュゲートであって、該誘導体が、配列YdAGSFLTPRRASLGCを有する
オピオイド以外の抗侵害受容薬の誘導体であるコンジュゲート。
【請求項１３】血液成分が血液タンパク質である、請求項１２記載のコン
ジュゲート。
【請求項１４】血液タンパク質がアルブミンである、請求項１３記載のコ
ンジュゲート。
【請求項１５】共有結合が血液成分上のアミノ、カルボキシルまたはチオ
ール基とオピオイド誘導体に含まれる反応性官能基との間に形成される、請求項
１２記載のコンジュゲート。
【請求項１６】共有結合が血液成分上のチオール基とオピオイド誘導体に
含まれる反応性官能基との間に形成される、請求項１５記載のコンジュゲート。
【請求項１７】抗侵害受容薬がオピオイドまたはオピオイドの類似体であ
る、請求項９記載のコンジュゲート。
【請求項１８】オピオイド誘導体が、ダイノルフィン誘導体またはダイノ
ルフィン類似体で、血液成分がタンパク質である、請求項１７記載のコンジュゲ
ート。
【請求項１９】血液成分がアルブミンである、請求項１８記載のコンジュ
ゲート。
【請求項２０】抗侵害受容薬の誘導体に共有結合により結合した１以上の
血液成分のコンジュゲートを含み、前記コンジュゲートが前記誘導体を血液に加
えた結果得られたものである血液組成物。
【請求項２１】前記誘導体が、配列YdAGSFLTPRRASLGCを有するオピオイド
以外のオピオイドの誘導体である、請求項２０記載の血液組成物。
【請求項２２】オピオイドがダイノルフィンまたはダイノルフィン類似体
である、請求項２１記載の血液組成物。
【請求項２３】オピオイド誘導体がダイノルフィン誘導体またはダイノル
フィン類似体であって、血液成分が１以上の血液タンパク質からなる、請求項２
２記載の血液組成物。
【請求項２４】オピオイド誘導体が１以上の血液タンパク質に共有結合に
より結合している、請求項２０記載の血液組成物。
【請求項２５】コンジュゲートがオピオイド誘導体とアルブミンのコンジ
ュゲートからなる、請求項２０記載の血液組成物。
【請求項２６】共有結合が、血液成分上のアミノ、カルボキシルまたはチ
オール基とオピオイド誘導体に含まれる反応性官能基との間に形成される、請求
項２０記載の血液組成物。
【請求項２７】共有結合が、血液成分上のチオール基と前記誘導体に含ま
れる反応性官能基との間に形成される、請求項２０記載のコンジュゲート。
【請求項２８】血液成分がアルブミンからなる、請求項１６記載のコンジ
ュゲート。
【請求項２９】抗侵害受容薬が、ダイノルフィン、エンドルフィン、デル
トルフィン、エンケファリン、およびこれらの類似体から選択される、請求項１
から２８のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲート。
【請求項３０】抗侵害受容薬が、ダイノルフィンおよびその類似体から選
択される、請求項１から２９のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲート
。
【請求項３１】抗侵害受容薬が、エンドルフィンおよびその類似体から選
択される、請求項１から２９のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲート
。
【請求項３２】抗侵害受容薬が、デルトルフィンおよびその類似体から選
択される、請求項１から２９のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲート
。
【請求項３３】オピオイドが、エンケファリンおよびその類似体から選択
される、請求項１から２９のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲート。
【請求項３４】哺乳動物宿主の血管系に、請求項１から８、または２３か
ら２８のいずれか１項記載の抗侵害受容薬の誘導体を投与することにより、前記
の誘導体が１以上の血液成分と反応して共有結合により結合し、コンジュゲート
を形成することからなる、抗侵害受容薬の寿命を延長する方法。
【請求項３５】抗侵害受容薬が、オピオイドまたはオピオイド類似体であ
る、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】抗侵害受容薬が、ダイノルフィン、エンドルフィン、デル
トリフィン、エンケファリンおよびその類似体から選択される、請求項３５記載
の方法。
【請求項３７】オピオイドがダイノルフィンおよびダイノルフィン類似体
から選択される請求項３６記載の方法。
【請求項３８】痛みをやわらげるまたは鎮痛作用を生じさせるのに有効な
量の請求項１から３３のいずれか１項記載の誘導体またはコンジュゲートを患者
に投与することからなる、患者を治療して痛みをやわらげるまたは鎮痛効果を生
じさせる方法。
【請求項３９】請求項１から１１、または２８から３３のいずれか１項記
載の誘導体を患者に投与して、前記誘導体が患者の血液の成分と反応して請求項
１２から１９、または２８から３３のいずれか１項記載のコンジュゲートを生成
する、請求項３４記載の方法。
【請求項４０】患者の血液の少なくとも一部を患者の体内から抜き取り、
請求項１から１１、または２８から３３のいずれか１項記載の誘導体と接触させ
て、請求項１２から１９、または２８または３３のいずれか１項記載のコンジュ
ゲート、または請求項２０から２３のいずれか１項記載の血液組成物を形成する
、請求項３４記載の方法。
【請求項４１】コンジュゲートを患者に投与する請求項３４記載の方法。
【請求項４２】血液成分を請求項１から１１、または２８から３３のいず
れか１項記載の誘導体と接触させて、請求項１２から１９または２８または３３
のいずれか１項記載のコンジュゲートを形成する、請求項３４記載の方法。
【請求項４３】市販の血液成分がアルブミンである、請求項４３記載の方
法。
【請求項４４】患者の血液またはコンジュゲートを、前記のコンジュゲー
トまたは前記のコンジュゲートの成分として存在する抗侵害受容薬に特異的な抗
体と接触させることからなる、請求項１２から１９、または２８から３３のいず
れか１項記載のコンジュゲートを患者の血液から除去する、または患者の血液中
の前記コンジュゲートを制御する方法。