JP2001520892A - 溶液中の検体を同定するための分析装置およびその方法 - Google Patents

溶液中の検体を同定するための分析装置およびその方法

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Abstract

(57)【要約】 サンプル中の生体材料、検体、又は微生物の有無又は量を検出するための方法及び分析装置。該方法は、（もし必要であれば）サンプルを液化する工程と、液化したサンプルを分析装置の表面上に配分する工程とを含む。装置は、インキュベーションプレート、ディップシティック、又は他の装置を含んでも良い。装置は、装置中に提供された少なくとも１の試薬を有する。いくつかの装置は、概ね平坦で、複数の凹状のウエルに分割された、水平表面を有する。他の装置は、その上に固定された試薬島を備えた１又はそれ以上の表面を有する。各ウエル又は試薬島は、液体のアリコートを保持するために適合させられる、ウエル又は試薬島は、適当な材料から形成され、表面張力により、ウエル又は試薬島中にアリコートを保持する。液状化されたサンプルからの余った液体は、装置の表面から排出される。該方法は、生体材料、検体、又は微生物の有無又は量が特定されるまで、分析装置をインキュベーションする工程を含む。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 （関連出願） 本発明は、試薬内蔵のインキュベーションプレートを用いたサンプル中の検体
、すなわち生体物質の定量方法を発明の名称とする米国仮出願第６０／０６３，
６３５号の一部継続出願（１９９７年１０月２７日出願）である。
【０００２】 （発明の背景） 本発明は、分析技術の分野に係り、特に、溶液中の検体を同定するための分析
装置およびその方法に関する。
【０００３】 多くの産業分野では、サンプル中に含まれる検体、つまり生体物質の検出およ
びその濃度を定量化することが求められている。例えば、食品や飲料水中の細菌
濃度を測定することは、食品や飲料水の品質を検査する上で欠かすことができな
い。米国環境保護局の規定では、大腸菌などの腸内細菌を飲料水に含むことを規
制している。このような細菌の有無を検出するための試験薬としては、Ｃｏｌｉ
ｌｅｒｔ（登録商標）化学調合物（アイデックス・ラボラトリーズ、メイン州）
があり、これは試験薬として大腸菌や腸内細菌の同定や検出に有用である。Ｃｏ
ｌｉｌｅｒｔ（登録商標）化学調合物は、エドベルグの米国特許第４，９２５，
７８９号および同５，４９２，９３３号に記載された「汚染物質から目的の微生
物を同定するために用いる試薬およびその方法」に説明されている基質限定技術
に基づいている。
【０００４】 細菌の検出ばかりではなく、その濃度の定量化を図る技術も重要である。この
分野には、排水、浄水システムにおける流入水、うわ水および食品検査がある。
例えば、多くの飲食店では、細菌の汚染程度が所定以下でないと、生の牛肉や家
禽類のミンチを受け入れてはくれない。このため、食品処理工場では、必要な微
生物試験を行って、食品に含まれる細菌の濃度を確認してからでないと、消費者
に渡すことができない。
【０００５】 従来、生体物質量の測定にあたっては、標準プレート計数法あるいは多試験管
醗酵法（ＭＴＦ）が用いられていた。この方法では、先ず微生物汚染検査が行わ
れるサンプルがペトリプレート上に取られる。このサンプルには、１５ｍｌの特
定の試薬が注入される。ついで、ペトリプレートを振って微生物と混合させ、室
温で約２０分間放置して固定させる。微生物は、特定の温度で所定時間だけイン
キュベーションされる。これにより生じたコロニーを計数する。
【０００６】 多試験管醗酵法（ＭＴＦ）では、レセル等により１９９２年に発行された第３
版の「食品の微生物検査の試験方法の概要」の第１０５頁〜第１９９頁にかけて
記載の「蓋然的計数技術」に説明されている。これは、グリーンベルグ等により
１９９２年に発行された第８版の「水質および排水の標準検査方法」にも説明さ
れている。この方法によれば、サンプル液が所定の希釈範囲となるように数本の
試験管に分配される。これらの試験管は、各試験管内の細菌が成長するように適
宜の温度でインキュベーションされる。この温度で所定時間だけインキュベーシ
ョンした後には、陽性を呈する試験管を計数する。蓋然性の高いカウント数は、
上記のレセル等により記載された公式を使って求められる。
【０００７】 水質検査は、ほとんどが膜浸透法を用いて行われる。この膜浸透法では、所定
量の水が膜により濾過され、その残滓が膜とともに所定時間だけインキュベーシ
ョンされる。インキュベーション後に膜に残るコロニーが計数される。
【０００８】 多くの産業分野では、溶液中の検体の有無を定性的かつ定量的に検出する必要
に迫られている。例えば、試験溶液を使って検体としての有機イオンを検出する
ことは、製造工程では重要である。
【０００９】 一般的に、これまでは溶液中の検体を測定する装置および方法にあっては、試
験溶液から全てのアリコートを除去したり、ディップスティックを試験溶液に漬
ける必要があった。このような装置および方法によれば、溶液中の検体を検出で
きるものの、多くの欠点をもっている。
【００１０】 ディップスティックを用いる方法では、検体の定量化を図ることができない。
すなわち、ディップスティック方法では、単位溶液中に存在する検体の量を測定
できる能力をもたない。ディップスティックは単に溶液中に接触させるために用
いられるだけである。
【００１１】 また、他の方法によれば、試験者が検査溶液からアリコートを除去し、別の装
置に移してから、検体を検出あるいは定量化を行う必要がある。
【００１２】 このため、従来の装置や方法では、検体を検出する能力を有するものの、分析
技術の特殊性に鑑み、その精度が限られた上にコスト的に不利で使用範囲が制約
されている。
【００１３】 本発明は上記に鑑みてなされたもので、従来技術の欠点を除き、溶液中の検体
の同定を簡素でコスト的に有利かつ正確に行える方法を提供することにある。と
りわけ、溶液の特定量中の検体を定量分析できる分析装置および方法を提供する
ことにある。
【００１４】 （発明の概要） 本発明は、サンプル溶液中に生体物質、検体および微生物が存在するかどうか
を検出し、その量を計数するための分析装置および方法を提供する。
【００１５】 本発明では、サンプル溶液中の生体物質の有無およびその量を求めるために滅
菌されたインキュベーションプレートが設けられている。このインキュベーショ
ンプレートは、複数に区分されたウエル状の窪みを備えた略水平で平坦な表面を
有する。これらの窪みは、所定の大きさに形成され、アリコートの溶液を各窪み
内に表面張力でもって保持できるような材料、寸法および形状で形成されている
。少なくとも一つの窪みは、生体物質の検出のために少なくとも一つの試薬を含
む。目的の生体物質が存在しない場合には、陽性反応を示さない。
【００１６】 本発明の実施例では、試薬はコロナ処理および乾燥処理を経て窪み内に定着さ
れる。変形例ではインキュベーションプレートは蓋を備えている。ウエル状の窪
みは、複数の試薬を含み、窪みが異なれば異なる試薬あるいは種々に組合わされ
た試薬を含み、単一つのインキュベーションプレートで多くの分析試験が行われ
るようにしている。このインキュベーションプレートは、プラスチックにより形
成されるのが好ましいが、分析試験を行うに適しておれば疎水性の材料により形
成されてもよい。他の実施例として、インキュベーションプレートは矩形状を呈
しているが、円形などの幾何学形状であってもよい。インキュベーションプレー
トに形成されたウエル状の窪みは約０．１５インチの直径寸法を有し、溶液の収
容能力は約１ｍｌである。また、変形例によれば、この窪みは０．１〜１００μ
ｌの収容能力をもつ。インキュベーションプレートは面取りがなされて、余った
溶液を除去し易くしている。このインキュベーションプレートはハンドル部を有
し、サンプル溶液に接触することなく操作できるようにしている。
【００１７】 また、本発明によれば、上記のインキュベーションプレートと構成が同様な滅
菌インキュベーションプレートを備えている。この滅菌インキュベーションプレ
ートは蓋を備え、窪みに嵌まる突起部を有する。この突起部の一端部には試薬あ
るいは種々に組合わされた試薬が設けられ、蓋をインキュベーションプレートに
着せるに伴いサンプル溶液中に溶解するようになっている。変形例としては、突
起部は凹部を備えている。この試薬あるいは種々に組合わされた試薬は、突起部
の一端部あるいは凹部の表面に乾燥状態で付着される。この凹部の表面にはコロ
ナ処理を施してから試薬を定着させるようにしている。また、他の実施例では、
試薬あるいは種々に組合わされた試薬は乾燥され、突起部はコロナ処理が施され
、種々に組合わされた試薬は多数の突起部に塗布され、多数の分析試験が単一の
インキュベーションプレート上で行われるようになっている。インキュベーショ
ンプレートの下部は、上記に記載したインキュベーションプレートに関する実施
例に適用できる。
【００１８】 また、本発明では、サンプル溶液中の検体あるいは微生物の有無を決める分析
装置を提供する。この装置では、少なくとも一つの試薬島(reagent island)が固
定された疎水性の支持部材を備え、サンプル溶液の所定量を吸収できるようにし
ている。さらに、検体や微生物の有無や量を決める手段を備え、この手段は試薬
島の表面あるいは内部に位置している。さらに、一あるいはそれ以上の試薬島を
固定したプラスチックまたはポリマー製のディップスティックを備えている。こ
の試薬島はセルロース等の吸収性材料により形成されている。
【００１９】 支持部材は多数の試薬島を固定していてもよい。検体あるいは微生物の有無を
検査する手段にあっては、試薬島を作製する材料に設けられた粉末体を備えてい
てもよい。この手段は、目的の検体や微生物が存在する場合には検出可能な反応
を示す試薬あるいは試薬の組合わせでもよい。この装置にあっては、試薬あるい
は試薬の組合わせを含む多数の試薬島を備えて、単一のインキュベーションプレ
ートで多数の分析試験が行われるようにしてもよい。他の実施例では、試薬島は
セルロース等の吸収性材料により形成されているものである。支持部材は、プラ
スチックやポリマーなど試薬島を分析試験に支障を来すことなく定着できる材料
から形成されてもよい。変形例によれば、この装置は分析試験中および分析試験
前後において支持部材を保持する容器を備えていてもよい。この容器は試験管で
あってもよく、この容器用はキャップを有し分析装置を保護するようにしてもよ
い。
【００２０】 また、本発明ではサンプル溶液中の検体、微生物の有無あるいはその量を測る
分析装置を提供する。この装置は、少なくとも一つ試薬島を個別に固定した疎水
性の支持部材を備え、サンプル溶液の所定量を吸収あるいは保持できるようにな
っている。この試薬島には目的の検体あるいは微生物の有無を決める手段を備え
ている。この装置は両端開口形の容器を有する。この容器は実験室用のピペット
を構成する。また、この装置では上記に記載した装置に関する種々の実施例の構
成要素を有する。この試薬島は、各領域が別の分析試験を行えるように区域に別
けて配置されてもよい。斯かる試薬島は表面張力あるいは吸着によりサンプル溶
液のアリコートを保持できるようにしてもよい。この装置は細長片から構成され
てもよい。試薬島における試薬は、成長媒体でもよく成長指示媒体でもよい。酵
素や酵素基質であってもよい。
【００２１】 また、本発明では、サンプル試験溶液中の検体、微生物の有無あるいはその量
を検知する分析装置を提供する。この装置は少なくとも一つの試薬島を固定した
堅固な支持部材を備えている。各試薬島は、液状のアリコートを保持し、このア
リコートを試薬島内に保持できる材料、形状および寸法で形成されている。試薬
島のうち少なくとも一つは、目的の検体、微生物の検出のために少なくとも一つ
の試薬を含んでいる。この装置では、サンプル溶液中に検体あるいは微生物が存
在しない場合には、これらに対する陽性反応を示さないようになっている。
【００２２】 本発明の実施例では、試薬島は予め設定されたサンプル溶液量を取るようにし
てもよい。また、試薬島は、各領域が別の分析試験を行えるように区域に別けて
配置されてもよい。斯かる試薬島は表面張力あるいは吸着により液状のアリコー
トを保持できるようにしてもよい。試薬島は、それぞれ等量のサンプル溶液を取
るようにしてもよい。この試薬島は、複数の小区域島として存在し、各小区域島
は少なくとも一つの島からなり、一方の小区域島は他方の小区域島から異なるサ
ンプル溶液量を取るように構成してもよい。試薬島は、二つ以上の表面部に固定
されるように構成してもよい。この装置は細長片から構成されてもよい。本発明
の好ましい実施例としては、支持部材は疎水性の材料により形成されてもよい。
試薬島における試薬は、成長媒体でもよく成長指示媒体でもよい。また、他の変
形例としては、少なくとも一つの試薬は少なくとも一種類の細菌の細胞、あるい
は酵素や酵素基質であってもよい。
【００２３】 本発明によれば、サンプル溶液中の検体、微生物の有無あるいはその量を検知
する方法を提供する。この方法では、１）生体物質を検出するために少なくとも
一つの試薬を含んだ少なくとも一つのウエル状の窪みをインキュベーションプレ
ートに設ける工程であって、インキュベーションプレートは、多数のウエル状の
窪みを有する略水平な平坦表面からなり、各窪みは液状のアリコートを表面張力
でもって保持できるように適宜の材料、大きさおよび形状により形成され、生体
物質を検出すべく少なくとも一つの窪みは少なくとも一つの試薬を含んでいるこ
とと、２）必要に応じてサンプルを溶液化し、このサンプル溶液をインキュベー
ション液に散布する工程と、３）過剰の溶液を流し去る工程と、４）一つあるい
は二以上の窪み内の生体物質の有無が確認され、その生体物質の量が特定される
までインキュベーションプレートをインキュベーションする工程を備えている。
サンプル溶液散布工程では、インキュベーションプレートをサンプル溶液に漬け
たり、晒したり、渦状に回したり、叩いたりする工程を含んでもよい。
【００２４】 本発明では、インキュベーションプレートに関して上記で個別に記載した全て
の実施態様に適用できるものである。
【００２５】 また、本発明では、サンプル溶液中の検体、微生物の有無あるいはその量を検
知する方法を提供するものであって、１）生体物質を検出するために少なくとも
一つの試薬を含んだ少なくとも一つのウエル状の窪みを滅菌インキュベーション
プレートの下部位に設ける工程であって、インキュベーションプレートは、多数
のウエル状の窪みを有する略水平な平坦表面からなり、各窪みはアリコートの溶
液を表面張力でもって保持するに適する材料、大きさおよび形状により形成され
、生体物質を検出するために少なくとも一つの試薬を含む少なくとも一つの突起
部を備えた蓋を有し、この蓋がインキュベーションプレートの下部位を閉鎖した
時には、突起部が各窪みに嵌まるようになっていることと、２）必要に応じてサ
ンプルを溶液化し、溶液化されたサンプルをインキュベーション液に散布する工
程と、３）過剰の溶液を流し去る工程と、４）少なくとも一つの突起部が窪み内
のサンプル溶液のアリコートに接触して溶解するように、蓋をインキュベーショ
ンプレートの下部位に閉鎖状態に着せる工程と、５）一つあるいは二以上の窪み
内の生体物質の有無が確認され、その生体物質の量が特定されるまでインキュベ
ーションプレートをインキュベーションする工程とを備えている。
【００２６】 本発明によれば、方法に関して上記の記載した全ての実施例、ならびに上記に
蓋およびインキュベーションプレートについて記載した全ての実施例に適用でき
るものである。
【００２７】 また、本発明では、少なくとも一つの試薬を有するインキュベーションプレー
トを作製する方法を提供し、この方法は、１）アリコートの溶液を表面張力でも
って保持するに適した材料、大きさおよび形状により形成されたウエル状の窪み
を有する略水平な平坦表面を有するインキュベーションプレートを形成する工程
と、２）窪みで少なくとも一つの試薬を乾燥させる工程とを備えている。
【００２８】 他の実施例として好ましくは、少なくとも一つの窪みは、乾燥工程を受けるに
先立ってコロナ処理が施されていてもよい。このようにコロナ処理が施された部
分は、少なくとも一つの窪みの内表面を構成してもよい。また、他の実施例とし
て試薬は細胞成長媒体あるいは細菌成長媒体であるのが好ましい。このインキュ
ベーションプレートは、先にインキュベーションプレートについて述べた全ての
実施例に適用できるものである。
【００２９】 また、本発明ではインキュベーションプレートを作製する方法に関し、この方
法は、１）生体物質を検出するために少なくとも一つの試薬を含んだ少なくとも
一つのウエル状の窪みを滅菌インキュベーションプレートの下部位に設ける工程
であって、インキュベーションプレートは、多数のウエル状の窪みを有する略水
平な平坦表面からなり、各窪みはアリコートの溶液を表面張力でもって保持する
に適した材料、大きさおよび形状により形成され、生体物質を検出するために少
なくとも一つの試薬を含む少なくとも一つの突起部を備えた蓋を有し、この蓋が
インキュベーションプレートの下部位を閉鎖した時には、突起部が各窪みに嵌ま
るようになっていることと、２）少なくとも一つの突起部の試薬を乾燥させる工
程とを備えている。この発明では、方法およびインキュベーションプレートにつ
いて先に記載した全ての実施例に適応できるものである。
【００３０】 また、本発明によれば、サンプル溶液中の検体あるいは微生物を検出するため
に有用な装置を製造する方法に関し、この方法は１）単位材料当たり所定量の溶
液を吸収することができる材料を作製する工程と、２）この材料から少なくとも
一つの試薬島を作製する工程と、３）この材料を検体、微生物の有無あるいはそ
の量を検知する手段と組合わせる工程と、４）この試薬島を略疎水性の支持部材
に取り付ける工程とを備える。変形例として試薬島を作製する工では、多数の試
薬島を作製する工程を含む。変形例として試薬島はサンプル溶液の所定量を吸収
できるものであってもよい。
【００３１】 また、本発明では、サンプル溶液中の検体あるいは微生物の有無を検出する方
法を提供するものであって、１）サンプル溶液を少なくとも一つの試薬島に接触
させてサンプル溶液の所定量を吸収させ、支持部材に固定させて試薬島内あるい
は試薬島に位置する検体あるいは微生物の有無を確認する工程と、２）試薬島が
サンプル試験溶液の所定量を吸収した後に、試薬島からサンプル溶液を分離する
工程と、３）試薬島を試薬反応あるいは指示反応をとおして反応変数にする工程
と、４）検体あるいは微生物の有無またはその量を決定する工程とを備える。
【００３２】 また、本発明では、サンプル溶液中の検体あるいは微生物を検出する方法を提
供するものであって、１）検体あるいは微生物を検出するためのサンプル溶液を
選択する工程と、２）検体あるいは微生物の有無またはその量を決定する手段と
ともに、サンプル溶液の所定量を吸収できるように、少なくとも一つの試薬島を
固定させた略疎水性の支持部材を備えた装置を製作する工程と、３）試薬島がサ
ンプル溶液の所定量を吸収できる時間だけ装置をサンプル溶液に接触させる工程
と、４）検体、微生物の有無あるいはその量を決めるための有無および量決定手
段とを備える。
【００３３】 本発明の実施態様によれば、接触工程には装置をサンプル溶液に案内し、この
装置をサンプル溶液から分離する手順を含む。また、変形例として製作工程には
検体、微生物の有無あるいはその量を決めるための指示反応剤からなる決定手段
を備えてもよい。さらに、変形例として有無および量決定手段は装置を試薬反応
を起こすのに十分な反応変数に晒す工程を備えてもよい。この方法には、有無お
よび量決定手段を監視する工程を追加してもよいし、検体あるいは微生物の有無
またはその量を決定する工程を加えたり、検体あるいは微生物の量を決定する工
程を追加してもよい。
【００３４】 （発明の好ましい実施例の説明） 定義事項 微生物−−細菌や菌糸あるいは原生生物を含む微生物を示す。 細菌（バクテリア）−−モネラ（Monera) 領域に属する全ての有機体を示す。 生体物質−−生物有機体から由来するいかなる物質をも示す。 目的の有機体−−大腸菌、イースト菌や黴に限らず、いかなる微生物をも示す
。 細胞（セル）−−植物、動物、細菌などあらゆる生命体に見られる細胞を示す
。 検体−−生命有機体における細胞代謝に関するいかなる原子、分子あるいはイ
オンを指す。 目的の検体−−代謝体及び／又は酵素活性に限らず、いかなる検体をも示す。 蛋白性物質−−蛋白質、ペプチド、酵素あるいはアミノ酸を示す。 疎水性−−サンプル溶液や試薬液といった溶液が隣接するインキュベーション
用セル、窪みや島が混じり合ったり架橋しない程度に疎水特性を有することをい
う。
【００３５】 本発明の構成 本発明は、サンプル溶液中の微生物の数を正確に定量化したり、サンプル溶液
中の特定の生体物質といったいかなる種類の検体をも定量化するにあたって、簡
易な方法を提供する。このような生体物質には、当業者にはよく知られているよ
うに、菌糸や生命有機体や酵素といった蛋白質集合体、あるいは反応物質を用い
た共同因子がある。本発明は、サンプル溶液中の設定量を取ったり、保持したり
する新規な構成を利用しており、サンプル溶液に試薬を与える。実施例として好
ましくは、サンプル溶液中の設定量は複数のアリコートに分配される。こうして
分けられた複数のアリコートは、全て同一量であってもよいし、それぞれが異な
る量をもったアリコートの一組であってもよい。
【００３６】 ここで使用される装置は、一般的にアリコートの溶液を個別に保持できる多数
のウエル状の窪みを有する滅菌インキュベーションプレートとして構成されてい
る。この装置は、少なくとも一つの窪みには少なくとも一つの試薬、あるいは好
ましくは複数または全ての窪みの個々には少なくとも一つの試薬が含まれるよう
に構成されている。これは蓋を備えたインキュベーションプレートは単一あるい
は複数の試薬を含み、サンプル溶液を導入するに先立ってインキュベーションプ
レートには試薬が備えられているからである。このような試薬は、例えば細菌に
対する特殊な成長媒体であってもよい。試薬はサンプル溶液の注入に先立って添
加され、サンプル溶液の注入時に試薬が流されたり、こぼれ落ちないように設け
られている。インキュベーションプレート内に試薬を設けておけば、試薬を個別
に調製したり、サンプル溶液や試験プレートに加えたりする必要がなくなる。さ
らに、本発明の適用例としてインキュベーションプレートは好ましくはピペット
が不要になる構造になっており、インキュベーションプレートを単にサンプル溶
液に漬けたり、目算量のサンプル溶液をインキュベーションプレートの表面に降
りかけて所定量のサンプル溶液を窪みに保持させる。この際には、インキュベー
ションプレートはサンプル溶液の自動分配機能を果たす。
【００３７】 単一あるいは複数の試薬が配される窪みは、同一あるいは異なる試薬を受ける
。複数の試薬を用いた場合には、各窪みは異なる単一試薬、試薬の異なる組合せ
、あるいはこれらの組合わせを受けるようにしてもよい。
【００３８】 「少なくとも一つの窪みは少なくとも一つの試薬を配される」という文言は、
インキュベーション時には各窪みの少なくとも一つには単一あるいは複数の試薬
が実質的に存在する態様でサンプル溶液を加えるに先立って一つあるいはそれ以
上の試薬がインキュベーションプレートに含まれていることをいう。この文言は
、サンプル溶液とともに試薬を加えたり、余った溶液をインキュベーション液か
ら排除するに先立って試薬がサンプル溶液中で希釈されたり分解したりする状況
とは識別できる状態を述べている。変形例として必ずしも全ての窪みが各試薬を
含まなくてもよく、各窪みは試薬を含まなくてもよい。好ましくは、単一あるい
は複数の試薬は、これらの別々の量が各窪みに個別に配されるようにしてもよい
。サンプル溶液を加えるに先立ってインキュベーションプレートの窪みに試薬を
配することにより、インキュベーションプレートを調製することもできるが、好
ましくは試薬が配され乾燥状態になってからインキュベーションプレートが使用
者に渡されることがよい。一般的に、窪みはサンプル溶液の各アリコートに対し
て個別のインキュベーション室を形成する。これらの窪みは、同一あるいは異な
る寸法であってもよく、計数範囲を広くしたり希釈を効果的に行える形状に形成
してもよい。
【００３９】 本発明では、滅菌インキュベーションプレートは略平坦な水平表面を有する。
この水平表面は、複数のウエル状の窪みが形成されている（好ましくは少なくと
も４０、６０、９０あるいは２００個の窪みが形成されている）。各窪みは、サ
ンプル溶液のアリコートを表面張力により保持するようになっている。サンプル
溶液からの余った溶液は、インキュベーションプレートが疎水性の材料により形
成されているため窪みの外部に流し去られる。このインキュベーションプレート
はプラスチックや他の疎水性材料により形成されてもよい。変形例としてインキ
ュベーションプレートの形状は円形など各種の形状で形成される。
【００４０】 インキュベーションプレートは、少なくとも一つの試薬すなわち成長媒体を含
むように構成されており、少なくとも一つの試薬は少なくとも一つの窪みに別々
に配されるようになっている。要するに、単一あるいは複数の試薬は直接に各窪
みに配される。実施例として異なる窪みには異なる試薬や試薬の異なる組合せを
配して適用範囲を広げてもよい。例えば、異なる試薬や試薬の異なる組合せを異
なる窪みに配することにより、単一のインキュベーションプレートで複数の異な
る分析試験を行うことができる。これら単一あるいは複数の試薬は、サンプル溶
液のアリコートを手動あるいは自動で配る手順において、後述するように洗い流
されてしまわないような態様で配される。
【００４１】 実施例として蓋が設けられており、溶液の汚染防止を図っている。インキュベ
ーションプレートは滅菌されており、サンプル溶液中に少なくとも一つの生体物
質粒子が存在しない限り、アリコートのサンプル溶液に陽性反応が見られること
はない。蓋を設けた実施例では、蓋はインキュベーションプレートと別体であろ
うと取り付けられていようとインキュベーションプレートの一部と見なされる。
この意味では、蓋は「蓋部」であり、窪みを備えたインキュベーションプレート
部は「インキュベーションプレート下部」を示す。この蓋は上部カバーであって
もよいが、蛤形の容器であって窪みを備えたインキュベーションプレート部は蓋
／容器にすっぽりと収容されてもよい。実施例として蓋は矩形の管で形成され、
インキュベーションプレート部が管の開口端部に挿入されるものであってもよい
。この際には、インキュベーションプレートの大寸法部が管状の蓋の開口端部を
閉鎖する。
【００４２】 また、実施例として試薬は、サンプル溶液を窪みに注入する過程で試薬が洗い
流されたり外部に零れないように、個々の窪みに塗布されている。例えば、窪み
の内周面はコロナ処理が施され、乾燥時には試薬がインキュベーションプレート
に強固に付着し、サンプル溶液に接触する時には徐々に溶解する。この試薬ある
いは窪みに配された試薬には、補助剤を添加したり塗布し、試薬の溶解率を調整
するようにしてもよい。
【００４３】 本発明の実施例として試薬を各窪みに分配する蓋を備えたインキュベーション
プレートを構成している。例えば、この蓋は、各窪みに対して試薬を保持する複
数（好ましくは）の隆起部あるいは突起部を有するように構成できる。この蓋は
インキュベーションプレートの下部に取り付けてもよく、別体であってもよい。
サンプル溶液を分別した後に、蓋を閉めたりインキュベーションプレートの下部
に置くと、試薬が窪み内のサンプル溶液と接触してサンプル溶液中に溶解する。
この試薬は、突起部の表面にコロナ処理を施して試薬を突起部に付着させること
により突起部に塗布するようにしてもよい。試薬は突起部上で乾燥してもよい。
この突起部は試薬を保持する凹部を備え、その内表面は試薬に対する付着性を高
めるように処理されている。異なる試薬や試薬の異なる組合せを各突起部に塗布
するようにしてもよい。
【００４４】 実施例としてインキュベーションプレートは試薬分配部を有している。この試
薬分配部は、予め設定された量の一つあるいはそれ以上の試薬を保持するように
なっており、これらの試薬を一つあるいはそれ以上の窪みに個別に配する。例え
ば、この試薬分配部は蓋部の下面に取り付けられた枠体であって、単一あるいは
複数の試薬を保持するための環状部あるいは筒状部を備えている。サンプル溶液
を分配した後に蓋を閉じると、単一あるいは複数の試薬がサンプル溶液の分別液
に接触して溶解する。この場合、種々の形態が設定されてもよい。
【００４５】 インキュベーションプレートを略平坦な水平面に形成したので、窪みの間にサ
ンプル溶液を容易に分別でき、各窪みにサンプル溶液のアリコートを保持しなが
らも、余ったサンプル溶液はインキュベーションプレートから排除される。当業
者ならインキュベーションプレートの大きさ、材料ならびに形状は、サンプル溶
液に使われる種類に応じて溶液のアリコートを重力に対して表面張力により各窪
みに保持できるように選択できる。各種のサンプル溶液に適するインキュベーシ
ョンプレートの材質や窪みの大きさを選択する要素については、当業者によって
判断できる事項である。このサンプル溶液は、水溶液、希釈水溶液または懸濁液
であることが好ましい。実施例として窪みは、０．１５〜０．１６インチの直径
を有している。この窪みの収容能力は５〜１００μｌであることが好ましい。実
施例として窪みは、サンプル溶液のアリコートの保持ないしは試薬の保持力を高
められるような形状に設定されているのが好ましい。この窪みの形状の一例とし
ては、中心部に突き出たリブを有する略円形状のものが挙げられるが、各種の形
状が考えられる。実施例として窪みは面取りが施され、水平面に存する溶液が容
易に注ぎ込むようにするのが好ましい（図２Ｂ参照）。インキュベーションプレ
ートに設ける窪みの寸法や数については、サンプル試験溶液の特定の量がインキ
ュベーションプレートに保持されるように設定できるものであればよい。インキ
ュベーションプレートがサンプル溶液を保持する量は合計で０．１〜１０ｍｌ、
好ましくは合計で０．５〜２ｍｌである。
【００４６】 このインキュベーションプレートは、所望の材料により形成できるが、窪み間
で互いに混じり合うことなく各窪み内に分別液を表面張力により保持するにはプ
ラスチックにより形成することが望ましい。その材質は疎水性が好ましい。窪み
の内面は未処理でもよいし、あるいはインキュベーションプレートを水平面から
いかなる角度だけ傾けても反転させても零れないように、化学物理的に処理して
窪み内での分別液を保持する性能を高めてもよい。さらに、インキュベーション
プレートは、単一あるいは複数の試薬の窪み内で、あるいはインキュベーション
プレートの他の所望の面での保持性能が高まるように例えばコロナ処理などの処
理を施されてもよい。一般に、試薬はインキュベーションプレートで乾燥される
。
【００４７】 実施例としてインキュベーションプレートは透明あるいは一例として白や黄色
に着色してもよい（例えば青色の彩色でインキュベーションプレートの外観を向
上する）。このインキュベーションプレートは、縦横寸法が１．５×２．５イン
チあるいは１×４インチといった矩形であってもよいし、直径２〜５インチの円
形であってもよい。
【００４８】 変形例として先に述べた少なくとも一つの試薬を有するインキュベーションプ
レートを用いてサンプル溶液中の生体物質を検出する方法を提供する。この方法
によれば、必要に応じてサンプルを溶液化する工程と、先に記したように溶液化
したサンプルをインキュベーションプレートの表面に散布する工程（好ましくは
インキュベーションプレートをサンプルに漬ける）とを備える。また、変形例で
はサンプル溶液がインキュベーションプレートに降りかけられ、インキュベーシ
ョンプレートはサンプル溶液を攪拌するため叩かれたり、渦状に旋回されたりす
る。インキュベーションプレートの窪みが形成されている周りは、サンプル溶液
の分配時にはサンプル溶液をインキュベーションプレートに保持するための壁部
により囲まれている。各窪みは分別液を保持できるようになっており、分別液を
窪みに表面張力により保持できる材料、大きさおよび寸法に設定されている。分
別液は各窪みに一つ一つ分けられることなく、個々の窪みに入れられる。このた
め、この方法は自動分別方式を組み込んでいる。過剰のサンプル溶液は、インキ
ュベーションプレートが疎水性材料から形成されていることから、インキュベー
ションプレートの表面から窪みの外部に排除される。
【００４９】 この方法によれば、サンプル溶液の導入に先立って少なくとも一つの試薬が少
なくとも一つの窪みに配され、サンプル溶液のアリコートを窪みに導入するに伴
い単一あるいは複数の試薬がサンプル溶液に溶解する。また、この方法では、単
一あるいは複数の試薬は蓋の突起部上あるいは突起部内に設けられ、蓋をインキ
ュベーションプレートの下部に着せると突起部が窪み内に突き出るようになって
いる。このため、蓋を着せると、試薬がサンプル溶液の分別液に接触して分散な
いしは溶解する。この発明では、「漬ける」とはインキュベーションプレートの
少なくとも一部を溶液中にさっと漬けるこという。この浸漬時間は３秒足らずで
、２秒あるいは１秒位が好ましい。
【００５０】 上記に説明したように、インキュベーションプレートは成長媒体といった少な
くとも一つの試薬を含むように構成され、あるいはサンプル溶液を導入するに先
立って試薬がインキュベーションプレートに配される分析試験を行うに必要な全
ての試薬を含むように構成されるのが好ましい。実施例として異なる窪みには異
なる試薬が配され、単一のインキュベーションプレートで複数の異なる分析試験
が行われるように適用範囲を広げてもよい。試薬は、サンプル溶液を分別する過
程で洗い流されないように配されている。必要な試薬で装置に直接には配されて
いないものは、使用時にサンプル溶液あるいはインキュベーションプレートに直
接配するようにしてもよい。ついで、インキュベーションプレートは生体物質の
有無が確認されるまでインキュベーションされる。
【００５１】 実施例としてインキュベーションプレートには、サンプル溶液に接触しない位
置で使用者がインキュベーションプレートを持てるように把手が取り付けられて
いる。インキュベーションプレートをサンプル溶液に漬けることによりサンプル
溶液がインキュベーションプレートの表面に配される場合には、ハンドル部はサ
ンプル溶液に漬からず、使用者の手がサンプル溶液に接触することにより、サン
プル溶液やインキュベーションプレートが汚染されることを避けている。
【００５２】 インキュベーションプレートの形状はさほど重要ではないが、実施例では矩形
をなしている。この他、インキュベーションプレートはペトリプレートのように
略円形であってもよい。実際、ペトリプレートの代わりにインキュベーションプ
レートを使用することができる。
【００５３】 この発明に関する方法によれば、細菌のコロニーを数えるといったペトリプレ
ートで行っていた既存の試験をインキュベーションプレートで行うことができる
。サンプル溶液の分別液は個別にインキュベーションプレートに配され、先のＭ
ＰＮ試験で述べたようにサンプル溶液中の生体物質の量を決めるにはインキュベ
ーションプレートの陽性を示す窪みの数を数えればよい。実施例としてはこのイ
ンキュベーションプレートはプラスチックや他の疎水性材料により形成されてい
る。
【００５４】 先に述べたように、検出すべき生体物質とは、微生物といったように個別に粒
子を形成しているものであり、インキュベーションプレートの各窪み内の生体物
質の有無を決めることにより定量化できるものである。サンプルとは、生物学的
なサンプルで、排水、食物、表皮や喉を拭き取った綿棒、あるいは当業者には良
く知られたサンプルをいう。このサンプルは、液状でもよいし、溶液に解けてサ
ンプル溶液となるものでもよい。この場合の「溶液化」はインキュベーションプ
レートで素早く分別できるようにサンプルを溶液で提供できるものをいう。溶液
化されたサンプルは、余った溶液を排除した後に窪み内で液体のまま、あるいは
ゲル状態になって残る。
【００５５】 本発明では、使用者が未熟練でもサンプル内の生体物質の量を迅速に決定し得
るといった極めて有用な装置および方法を提供できるものである。このサンプル
溶液は微生物学において特別な訓練を受けなかった者でも、容易に溶液化できる
とともに、試験材料が製造者側から提供されるため、未熟練者でも正確に試験を
行うことができる。生体物質の不適当な検出が行われないようにインキュベーシ
ョンプレートは、一般に滅菌されている。複数の窪み内に溶液を保持するために
はプラスチックの容器を作製することは良く知られているが、本発明による装置
方法では、自動分別方式が取られ、試薬を手作業で加えたりピペットによりサン
プル溶液や他の溶液をインキュベーションプレートに加える必要がなくなり、試
験者が行う工程が少なく、かつ簡素化されている。この点で試薬への汚染や希釈
時の誤りが低下することから、微生物の検出および定量化に用いる既存の製品よ
り優れたところである。
【００５６】 本装置は、とりわけ食品の分析や臨床サンプルの検査に有用である。各窪みが
分離されていることから、分別液間で混ざり合ったり汚染されたりすることが防
止される。これにより、寒天を含んだペトリプレートとは異なり、多くの試験・
検査が蛍光を観察するだけで容易に達成できる。このため、１０ｍｌあるいは１
ｍｌに二つ以上の有機体を含むサンプルといったように、サンプル中に多くの微
生物が存する場合には特に有用である。
【００５７】 本発明の他の特徴や利点は以下に実施例や特許請求の範囲を説明するにつれて
明らかになる。
【００５８】 図１Ａないし図１Ｄにはインキュベーションプレート１０が示されている。こ
のインキュベーションプレート１０は直径寸法を約０．１６インチとする複数の
ウエル状の窪み１２を有している。このインキュベーションプレート１０はプラ
スチックにより矩形状に形成され、その縦横寸法を２．７×１．４インチとする
。各窪み１２は互いに交差しないように十分な距離が確保されている。これらの
窪み１２には、必要に応じて面取り（図２Ｂ参照）が施されて窪みの上縁部にサ
ンプル溶液が残らないようにしてもよい。窪みの内周面には、コロナ処理が施さ
れ、成長媒体といった試薬が乾燥状態で配される。この試薬は、単一あるいは試
薬の組合せであってもよい。このインキュベーションプレート１０は、当業者に
は知られているように標準的な手順で形成され、蓋１４（図３Ａ−３Ｃ参照）が
あってもなくても、あるいは周囲に壁部を有しても有しなくても製作できる。こ
の蓋１４は凹陥部１６に設けられ蓋１４がインキュベーションプレート１０に接
触するのを防いでいる。
【００５９】 図４Ａ−４Ｄおよび図５Ａ−５Ｃを参照すると、蓋２０を有する矩形のインキ
ュベーションプレート１０が示されている。この蓋２０は一組の隆起部あるいは
突起部３２を備え、蓋２０をインキュベーションプレート１０に着せると、突起
部３２がインキュベーションプレート１０の窪み１２に突き出るようになってい
る。試薬は隆起部ないし突起部３２の端部に施されてもよく、蓋２０をインキュ
ベーションプレート１０に着せると、突起部３２がインキュベーションプレート
１０の窪み１２に突き出て試薬がサンプル溶液に溶解するようになっている。こ
の蓋２０はインキュベーションプレート１０の下部から分離されていてもよく、
あるいはインキュベーションプレート１０の下部に一体的になっていてもよい。
例えば、蓋部はインキュベーションプレート１０の下部に薄肉に形成されたプラ
スチック製のヒンジ部を介して取り付けられていてもよい。この様にすれば、蓋
がヒンジ部で曲がってインキュベーションプレートに着せられる。本実施例では
、蓋２０に形成された各突起部３２は先端部に凹部３４を有し、試薬が配される
ようになっている。斯かる凹部３４の内周面はコロナ処理が施され試薬に対する
保持性能を高めている。試薬はコロナ処理領域で乾燥される。使用時にはサンプ
ル溶液は各窪みに自動分別される。そして、蓋を閉めると、突起部３２の先端が
窪み１２内の分別溶液と接触する。この接触により、突起部３２の凹部３４に含
まれる試薬が分別溶液に溶解する。試薬が細菌成長媒体であり、サンプル溶液中
に細菌成長媒体で成長する細菌を含む場合には、窪み１２内に生存する細菌が成
長する。
【００６０】 図６Ａ−６Ｃを参照すると、ハンドル部１８を備えているところを除けば、図
１Ａ−１Ｃのと同様な矩形のインキュベーションプレート１０が示されている。
使用者はハンドル部１８を握ることができることから、インキュベーションプレ
ート１０のサンプル溶液を配する領域に不用意に接触することがない。さらに、
使用時にハンドル部１８を握ってインキュベーションプレート１０をサンプル溶
液に漬ければ、使用者の指がサンプル溶液に接触しないで済むとともに、大量の
サンプル溶液を収容した装置を保持しないで済む。これによりサンプル溶液を汚
染する虞を低下させることができる。
【００６１】 図６Ａ−６Ｃのインキュベーションプレート１０は蓋２０とともに図７Ａ−７
Ｃにも示されている。この蓋はインキュベーションプレートをすっぽりと収容す
るようになっており、これにより浸漬されたインキュベーションプレートの下部
の汚染を防止し、仕事台表面の汚染や浸漬されたインキュベーションプレートの
下部からのサンプル溶液の他の部品との汚染を防止できる。使用に際しては、イ
ンキュベーションプレートの窪みを有する部分はサンプル溶液に漬けられ、余っ
た溶液は窪みから排除され、インキュベーションプレートはインキュベーション
のため蓋／容器内に挿入状態に収容される。この蓋／容器２０は、蓋の上面およ
び下面に設けた摩擦嵌合用凹部２２により閉鎖状態を保つようにできる。インキ
ュベーションプレートの窪みは面取りが施されてもよい。
【００６２】 インキュベーションプレートの表面を試薬で塗布 インキュベーションプレートに単一あるいは複数の試薬を配するには様々な手
法がある。例えば、試薬は緩衝液や溶液、好ましくは水溶液に接触して容易には
解けないように設定することができる。このような場合の実施例では、加えるサ
ンプル溶液量を制御して窪みに分配される試薬の濃度が適切になるようにするこ
とができる。この場合には、検査時に試薬を保持する態様や位置であれば試薬は
インキュベーションプレートの内部に配することができるが、サンプル溶液の添
加に伴い急速に溶解する。
【００６３】 しかしながら、本発明では、窪みに保持された分別溶液内の試薬に適切な濃度
を確保するためには、インキュベーションプレートが接触するサンプル溶液の量
を計測する必要のないような態様あるいは位置に試薬が配される。これは、別々
の量の試薬を必要な窪みに直接配することにより達成される。このように別々の
量の試薬を配する方法には、本実施例の説明を含めて様々な手法がある。これら
の実施例では、溶液の自動分別過程で試薬の溶解量が無視できるような態様で試
薬を窪みの内周面に付着させたり、あるいは自動分別過程が終了後までは試薬を
サンプル溶液に接触させないような位置に配している。
【００６４】 例えば、一あるいはそれ以上の窪みの内周面はコロナ処理が施されており、試
薬は高濃度の溶液からコロナ処理された内周面領域で乾燥させられる。このよう
にして付着した試薬は徐々に溶解し、自動分別過程で失われた試薬の量は無視で
きる。試薬の大部分は、インキュベーション期間の初期段階で溶解する。この溶
解率は組成成分を選択することにより制御できる。
【００６５】 また、試薬はインキュベーションプレートの蓋の表面から突起部に付着しても
よい。この突起部は蓋をインキュベーションプレートに着せるに伴い、先端を各
窪み内にそれぞれ突き出す。この試薬は突起部の外表面に付着させてもよいが、
突起部３２の先端に形成した凹部３４に付着させるのが好ましい。さらに、試薬
はインキュベーションプレートを使用しないうちに、所定の位置に保持されてし
まうような態様に付着してもよい。例えば、試薬を物理的に留める手段を設ける
ことができるが、コロナ処理およびコロナ処理領域に試薬を乾燥させる工程を設
けることにより突起部３２の表面あるいは凹部３４の内周面に付着させるのが好
ましい。
【００６６】 コロナ処理および試薬の付着 代表的なプラスチックの例としては、小単位の分子が多数結合して長連鎖をな
している。例えば、ポリエチレンはエチレンの単位が多数結合した長連鎖である
。一般に、水溶液や水溶液中の溶質は、内部の連鎖端に引かれることがないから
、結合はおこらない。これに対して、特に連鎖端が極性を呈している場合には、
溶質と連鎖端に高い親性を生じることが多い。当業者には良く知られているよう
に、コロナ処理は、プラスチックの処理面の親水性を高める方法である。この処
理過程では、プラスチックを電気アークを通過させる。この電気アークからのエ
ネルギーは、多数の連鎖を断ち切るため、相互に引き合う親水性の鎖端を増やし
ている。さらに、このコロナ処理では強力な酸化剤としてオゾンが生じ、さらに
連鎖を切断し酸化結合により重合体に極性群を発生させる。
【００６７】 このコロナ処理過程では、水溶液成分といったように極性成分結合を増加させ
る。このため、本発明では、インキュベーションプレートの調製にコロナ処理を
使用することにより窪みの内周面へのコロナ処理に続いて試薬の濃縮溶液が窪み
に配される。コロナ処理領域では、濡れ性（親水性）が良好であるため、溶液状
の試薬は窪みの内周面に一様に塗布される。例えばオーブンによりインキュベー
ションプレートが乾燥されるに伴い、溶液が除されて次第に硬化し、固形化した
試薬が窪みに形成される。
【００６８】 先に述べたように、異なる試薬は異なる窪みに付着され、窪みによっては試薬
が配されないものもある。このように試薬の配られない窪みにはコロナ処理は行
われない。インキュベーションプレートに対する試薬の付着力を増大させる既知
の方途が有れば、これも本発明に使用されるものとする。
【００６９】 使用法 使用に際しては、試験用サンプルは溶液化あるいは適宜の滅菌緩衝液や食塩水
により希釈されてもよい。このように液化されたサンプル溶液は、その一定量が
インキュベーションプレートの表面に散布される。このサンプル溶液は、このま
ま、あるいは希釈されて１〜４０単位の生体物質（定量化されるものとして例え
ば生きた細菌細胞）を含むことが好ましい。例えば、図１Ａ−１Ｃに示すインキ
ュベーションプレート１０は、サンプル溶液に窪みが満たされるように漬けられ
、ついでサンプル溶液から引き上げられ、水平面に対して約直角（９０度）に素
早く保持することにより、サンプル溶液を流し去っている。この使用方法では、
インキュベーションプレート１０はサンプル溶液の自動分別機能および自動分配
機能の両役割を果たしている。外周囲に壁部を備えたインキュベーションプレー
トを用いる場合には、多めのサンプル溶液がインキュベーションプレート１０に
配され、渦を成して各窪み１２に分配される。ついで、インキュベーションプレ
ート１０は略９０度に傾けられ、余った溶液をインキュベーション液から流し去
る。図３Ａ−３Ｃに示すように、インキュベーションプレートには蓋１４が設け
られてもよい。そして、インキュベーションプレートはインキュベーション器内
で所定時間（例えば１８〜４８時間）ねかせ、各窪み１２において陽性の有無が
検出される。
【００７０】 例１：多試験用へのインキュベーションプレートの使用法 細菌の計数処理にあたっては、上記のインキュベーションプレートは、食品の
汚染細菌の検出および定量化に用いられる。この際には、食品中に生存する細菌
に対する酵素活動に相関する多重酵素技術が用いられる。これは多重酵素基質を
利用しており、細菌の代謝作用があれば青い蛍光を発するようになっている。多
重酵素試薬がインキュベーションプレートの窪み内周面に塗布される。食品を溶
液状に調製したサンプルをインキュベーションプレートの窪みに分配する。２４
時間後に、生存細菌の全量が決定される。この場合、多重酵素基質は試薬一例で
あり、本発明はこれのみには限られない。
【００７１】 保管と処分 未使用のインキュベーションプレートは室温で４〜２５℃で遮光状態に保管さ
れる。使用後のインキュベーションプレートは活性のある細菌を含んでいるから
注意深く取り扱い、適切に廃棄処分されなければならない。
【００７２】 試験の手順−サンプルの浸漬方法 １．被試験物の適量を取り、それをサンプルとする。 必要に応じてサンプルを溶液化あるいは適量に希釈してインキュベーションプレ
ートが漬けられるようにする。 ２．サンプル溶液に表面に接触しないようにインキュベーションプレートを把持
する。このインキュベーションプレートがハンドル部を備えている場合には、こ
のハンドル部を持つことが好ましい。開放状態のインキュベーションプレートの
底部をサンプル溶液に漬けたら、直ちにサンプル溶液から引き上げ、水平面に対
して約９０度で保持して余ったサンプル溶液をインキュベーションプレートから
流し去る。この流し去るべき余ったサンプル溶液は、サンプル溶液用容器に戻さ
ず、排水用容器に流して試薬がサンプル溶液に混ざる虞れを低下させることが好
ましい。窪み間に交差状に残留するサンプル溶液はインキュベーションプレート
を軽く叩いて除去できたかを確認する。余ったサンプル溶液は適切に排出させる
。 ３．蓋をインキュベーションプレートに戻す（取る付け蓋を着せる）。 ４．インキュベーションプレートをインキュベーション器内で２４時間ねかす。
必要に応じてインキュベーションプレートを反転させる。 ５．２４時間後には、６ワット、波長３６５ナノメータの紫外線をインキュベー
ションプレートの５インチ内に置き、蛍光の発している窪みを数える。これは２
４時間の経過前に行ってはいけない。２４時間経過しないと安定な結果が得られ
ない。 ６．蛍光を発している窪みの数をＭＰＮ図と比較してインキュベーションプレー
ト内の細菌の蓋然数を決める。
【００７３】 例２：単量試験用のインキュベーションプレートの使用法 試薬は例１に記載したのと同様の物を使用する。 試験の手順 １．滅菌緩衝液（食塩水）を１０ｍｌだけ試験管に取る。食品のサンプル溶液が
０．１ｍｌ以上であれば、滅菌緩衝液を減少して試験管内の全量１０ｍｌとなる
ようにする。 ２．被試験物である食品のサンプルに緩衝液を注入する。 ３．試験管を数回振って食品と緩衝液を完全に混合させる。 ４．試験管が十分大きければ、インキュベーションプレートをサンプル溶液内に
漬けるか、あるいは緩衝液／サンプル懸濁液をインキュベーションプレートのサ
ンプル溶液の適用部分に適宜にかける。この場合、全ての窪みがサンプル溶液で
満たされているのを確認のこと。このサンプル溶液を施したら、直ちにインキュ
ベーションプレートを水平面に対して約９０度で保持して余ったサンプル溶液を
インキュベーションプレートから流し去る。この流し去るべき余ったサンプル溶
液は、サンプル溶液用容器に戻さず、排水用容器に流して試薬がサンプル溶液に
混ざる虞れを低下させることが好ましい。窪み間に交差状に残留するサンプル溶
液はインキュベーションプレートを軽く叩いて除去できたかを確認する。余った
サンプル溶液は適切に排出させる。 ５．蓋をインキュベーションプレートに戻す（取る付け蓋を着せる）。 ６．インキュベーションプレートをインキュベーション器内で２４時間ねかす。
必要に応じてインキュベーションプレートを反転させる。 ７．２４時間後には、６ワット、波長３６５ナノメータの紫外線をインキュベー
ションプレートの５インチ内に置き、蛍光の発している窪みを数える。これは２
４時間の経過前に行ってはいけない。２４時間経過しないと安定な結果が得られ
ない。 ８．蛍光を発している窪みの数をＭＰＮ図と比較してインキュベーションプレー
ト内の細菌の蓋然数を決める。 ここで引用した特許書面や参考文献は、それぞれが各文献に記載されている程
度において本発明の一部をなすように組み込まれているものである。
【００７４】 微生物に対するディップスティック試験 検出および計数 つぎに、図８−１３を参照すると、凍結乾燥や浸漬乾燥された試薬を含む小吸
収体を用いる構成が示されている。ここでは、自動サンプル分配および目的の微
生物の自動計数が行われる。
【００７５】 試薬を含んだ多数の親水性吸収体（試薬島）は、疎水性の材料により形成され
た支持部材に固定されて個々の試薬島を構成している。この試薬島は例えば支持
部材に埋め込まれてもよいが、これは試薬を支持部材に取り付ける形態を制限す
るものではなく、分析に支障を来さない限り如何様の取付け形態も使用できる。
本実施例における各試薬島の溶液吸収率は、各試薬島の材質および大きさを等し
くしていることから、同一である。この支持部は、二群あるいはそれ以上の群の
試薬島が異なる大きさで形成され、より多くの微生物の定量化が蓋然的計数（Ｍ
ＰＮ）法に基づいて行われるような形態をとってもよい。
【００７６】 実施例によれば、試薬は、この技術のみには制限されないが、基質限定技術（
ＤＳＴ）あるいは／および多重酵素技術（ＭＥＴ）を利用してサンプル中に目的
の微生物が存在するかどうかを試験するために開発されたものである。このよう
な試薬で目的の微生物の陽性反応が起きれば、試薬の色が変化するか、あるい長
波長紫外線ランプのもとで試薬から蛍光が存在の証として発せられる。このよう
な試薬としては、Ｃｏｌｉｌｅｒｔ（登録商標）、Ｅｎｔｅｒｏｌｅｒｔ、Ｓｉ
ｍｐｌａｔｅＴＰＣおよびＳｉｍｐｌａｔｅＣＥｃがある。
【００７７】 サンプル中の接種材料は、本装置上の試薬島および試薬島の全数の最大吸収率
（飽和点）に基づいて予め算出される。サンプル溶液（水、牛乳、ジュースおよ
び食品類）の設定量が本装置上に分配され、各試薬島は等量のサンプル溶液を吸
収する。サンプル溶液は、装置を前後あるいは円を描くように移動することによ
り各試薬島に分配してもよい。各試薬間の領域は疎水性を呈し、各試薬島がサン
プル溶液を飽和量まで吸収すると、試薬島間にはサンプル溶液が残らないように
なり、試薬島間に汚染が起こらないようになっている。試薬島に吸収されたサン
プル溶液は試薬島の試薬を再び加水分解してサンプル溶液中の微生物の生育を図
る。
【００７８】 サンプル溶液を含んだ装置を所定の温度でインキュベーションした後に、試薬
島が目的の微生物を含んでいる場合は、サンプル溶液に変色が生じるか、あるい
は蛍光が発せられる（陽性反応）。試薬島が目的の微生物を含んでいない場合は
、サンプル溶液の変色もなく、あるいは蛍光も発せられない（陰性反応）。試験
時にサンプル溶液に目的の微生物の濃度は、蓋然的計数法（ＭＰＮ）を用いて観
察される陽性および陰性を呈する試薬島の数量に基づいて算出される。
【００７９】 他の適用例として試薬島を異なる種類の試薬と凍結乾燥させるものがある。各
試薬は、微生物、化学物質や他の検出用微小粒子といったサンプル溶液の特定の
一面を検査する。これらの試薬島を単一の装置に組み合わせることにより、化学
物質、微小粒子や生体物質の複合体に対する単一操作による検査キッドを構成す
る。
【００８０】 とりわけ図８および図９は本発明の他の側面を示し、試薬島１０１を包含した
ディップスティック１００が示されている。このディップスティックは、一般的
にはプラスチックにより形成されているものであるが、この材料だけに限られず
、サンプル溶液にしみ出ず、分析に支障を来さないものであればよい。これら図
８および図９では、単一試薬島を備えたディップスティックを描いている。
【００８１】 図１０は多数の試薬島１０２を備えたディップスティックを示す好ましい実施
例である。試薬島の領域は、ディップスティックに設置されて各領域が他の領域
の試薬とは異なる試薬あるいは異なる試薬の組合せを有し、単一のディップステ
ィックで多くの分析試験が行え、各領域で異なる検体あるいは微生物の検出試験
を実施できる。図１１は図１０のディップスティック形の分析装置で、分析検査
を行い試薬島が陽性反応（黒の試薬島）および陰性反応（白の試薬島）場合を例
示する。
【００８２】 図１２では、本発明の上記側面を好ましい実施例にしたものである。この図に
は、多くの試薬島１０１を備えたディップスティック１００が示されている。こ
れは丸められて試験管に挿入されたものである。この実施例では、試験管はキャ
ップ１０４を有し、試薬島を環境形因子から守る。このディップスティックは、
プラスチック製のスリーブといった他の型の容器をはじめ、本ディップスティッ
クを保護できる容器に設置可能である。試薬島に設けられた試薬は、試薬島の材
質上あるいは材質内に分配できる限り、いかなる試薬あるいは異なる試薬の組合
せであってもよい。
【００８３】 試験サンプルのディップスティックへの適用 サンプル溶液のディップスティックへの適用の仕方は様々である。このディッ
プスティックは、サンプル溶液中に漬けられ、試薬島がサンプル溶液を所定量だ
け吸収するのに十分となるようにサンプル溶液と接触状態に置かれる。この時間
は３秒足らずであるが、試薬島の構成材料の性質によっては長くなる場合もある
。実施例として試薬島はセルロースにより形成されているのが好ましい。しかし
ながら、この試薬島は、サンプル溶液を保持したり吸収できる材料により形成で
きるものである。このサンプル溶液は、ピペットにより試験溶液から試薬島に移
動してもよい。
【００８４】 支持部材は、プラスチック製の箱体や他の疎水性材料により形成されてもよい
。試薬島は、この箱体の内部に配置され、箱体が開けられて試験溶液がピペット
により、あるいは注入など他の手段により箱体内に配される。この箱体は別体あ
るいは箱体に取り付けられた蓋を備え、試薬島を保護するようにしてもよい。図
１３を参照すると、支持部材は、試薬島１０６を含んだ複数の葉部１０５を装着
した中央支部１０４を備えている。この図に見られるように、葉部１０５を三次
元構造に配して、単一の装置に最大限の葉部を収容するようにすることもできる
。この支持部材は円形の容器１０８と円形のキャップ１０７に配置し、分析試験
前後および試験中に支持部材を保護することができるようにしてもよい。
【００８５】 ピペット装置 図１４を参照すると、本発明の他の側面により試験室用のピペット１１１内に
支持部材１０９が収容された装置が示されている。多数の試薬島１１０が支持部
材１０９上あるいは支持部材１０９内に設けられている。この支持部材１０９は
、試薬島を配置できるように一つあるいはそれ以上の配置面を備えているのが好
ましい。この支持部材１０９は、多くの場合は合成ポリマーといったプラスチッ
クにより形成されているのが好ましく、支持部材１０９は、下端部に吸上げ用の
テーパを有し、好ましくはプラスチックやガラスにより形成された試験室用のピ
ペット１１１内に挿入される。サンプル溶液は、吸引器具によりピペット１１１
の内部に吸い上げられ、試薬島が所定量のサンプル溶液を吸収するまでピペット
１１１内に留まってから外部に排出される。このピペット１装置は、分析や同定
ができるに十分な時間だけインキュベーション器でねかされ、結果が定される。
このピペット自体は、サンプル溶液を試験装置に運ぶだけの簡素な構成で、しか
も試薬島を保護できるものである。
【００８６】 例１ ディップスティック形装置を用いた、牛乳内の大腸菌および腸内細菌に対する細 菌検出装置 本発明において牛乳内の大腸菌を検出する方法が如何に行なわれるかを例示す
る。この検出方法は、多段階的な手順が要らず、操作な容易で結果を容易に判別
できるものである。この分析は、それぞれが０．０３３ｍｌの牛乳を吸収した多
数の試薬島を備えた試験装置を用いて行われる。牛乳が試験装置に加えられ、全
ての試薬島に自動分別される。この牛乳サンプルは２４時間だけインキュベーシ
ョンされ、色彩変化の起きた試薬島を調べることにより装置内に存する大腸菌の
数が算出される。この大腸菌の数の算出にあたっては、ＭＰＮ図に基づいて決め
られる。この析試験により得られたデータを表１に示す。サンプル溶液の取り込
み量は、試薬島の数や大きさを変更することにより簡単に調整できるため、試薬
島の取り込み能力の柔軟性については強調すべきである。また、本装置において
は、試薬島に異なる検出媒体をしみ込ませておくことにより、単一装置で多数の
検査を実施できる能力をもっている。
【００８７】 表１ 牛乳サンプル ディップスティック形装置（ｃｆ ｕ／ｍｌ） ＃７１９７Ａ １０．３ ＃７１９７Ｂ １１．８ ＃７１９７Ｃ １６．４ ＃７１０ ５６．３ ＃７１３ １８ ＃３Ｂ１ ０ ＃３Ｂ２ ３７ ＃２Ｂ２ ０ ＃２Ｂ１ ９．３ ＃６１８ ６９．１ ＃６１８Ａ Ａｌｌ＋ ＃６２２Ａ １２ ＃６２２Ｂ ３６ ＃６２２Ｃ ３ ＃７６９７Ａ ５６ ＃７６９７Ｂ ２２ ＃７６９７Ｃ １６ ＃７６９７Ｄ ３１ ＃８１１ ３ ＃８１５ １６ ＃８１３ ６．２ 平均： ２３．４１ 標準偏差 ２０．７５
【００８８】 本発明は、特定の好ましい実施例について詳細な説明を行ったが、発明の要旨
を逸脱しない範囲で種々変更できることは勿論である。
【図面の簡単な説明】
【図１Ａ】 本発明の第一実施例によるサンプル溶液中の検体を決定するた
めの装置を示す平面図である。
【図１Ｂ】 図１Ａの１Ｂ−１Ｂ線に沿う拡大断面図である。
【図１Ｃ】 図１Ａの第一実施例を示す側面図である。
【図２Ａ】 面取りのない窪みを示す図１Ｂの拡大図である。
【図２Ｂ】 面取り付の窪みを示す図１Ｂの拡大図である。
【図３Ａ】 図１Ａの本発明の第一実施例による装置の蓋を示す平面図であ
る。
【図３Ｂ】 図３Ａの蓋を示す部分的拡大図である。
【図３Ｃ】 図３Ａの蓋を示す側面図である。
【図３Ｄ】 図１Ａの装置に設けられた図３Ａの蓋が部分的に露出された態
様の斜視図である。
【図４Ａ】 本発明の第二実施例による内周面に複数の突起部を有する蓋の
平面図である。
【図４Ｂ】 図４Ａの４Ｂ−４Ｂ線に沿う拡大断面図である。
【図４Ｃ】 図４Ａの蓋の側面図である。
【図４Ｄ】 突起部を示すために部分的に露出させた図４Ａの蓋の部分の拡
大斜視図である。
【図５Ａ】 図１Ａの装置に置かれた図４Ａの蓋を示す平面図である。
【図５Ｂ】 図５Ａの一部露出させた拡大図である。
【図５Ｃ】 図５Ａの側面図である。
【図６Ａ】 把手部を有する本装置の本発明の第二実施例における平面図で
ある。
【図６Ｂ】 図６Ａの６Ｂ−６Ｂ線に沿う断面図である。
【図６Ｃ】 図６Ａの装置を示す本発明の第二実施例における側面図である
。
【図７Ａ】 蓋を有する図６Ａの実施例における平面図である。
【図７Ｂ】 図７Ａの７Ｂ−７Ｂ線に沿う断面図である。
【図７Ｃ】 図７Ａの側面図である。
【図８】 単一の分析用ディップスティックを備えた本発明の第三実施例に
おける平面図である。
【図９】 図８の側面図である。
【図１０】 多数の試薬島を有する分析用ディップスティックを備えた本発
明の第四実施例を示す。
【図１１】 多数の分析試験が行われる図１０の装置を示す。
【図１２】 本発明の第五実施例であって、多数の試薬島を有する二つの面
を備えたディップスティック形分析装置がキャップ付の試験管に挿脱可能になっ
ている装置を示す。
【図１３】 本発明の第六実施例であって、複数の試薬島がディップスティ
ックの二つ以上の面に設けられ、着脱可能なキャップ付の試験管に取り外し可能
になっている装置を示す。
【図１４】 本発明の第七実施例であって、試験室用のピペットが一つある
いは二つ以上の面に複数の試薬島を有する細長なブロックを備えたところの装置
を示す。
【手続補正書】
【提出日】平成１２年５月３１日（２０００．５．３１）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ， ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，Ｄ Ｋ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ， ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，Ｌ Ｖ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ， ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，Ｕ Ｓ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 ハオイ・グ アメリカ合衆国04103メイン州ポートラン ド、ウェイバリー・ストリート22番 (72)発明者 アリ・ナクウィ アメリカ合衆国04105メイン州ファルマス、 トゥー・パインハースト・レイン Ｆターム(参考） 2G045 AA28 BB19 BB20 BB48 BB54 CB21 FB04 HA13 HA14 HA16 JA07 4B029 AA07 AA08 BB01 BB15 BB16 BB20 CC02 CC03 CC08 CC10 FA01 FA11 FA12 FA13 FA15 GA03 GA08 GB01 GB02 GB09 GB10 4B063 QA01 QA18 QQ05 QQ21 QQ41 QQ61 QR01 QR31 QR41 QR57 QR69 QR75 QR82 QS36 QS39 QX02

Claims (50)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 生体物質の有無又は量を決定するための減菌インキュベーシ
    ョンプレートであって、 概ね平坦な水平表面であって、該表面は複数の凹状のウエルを規定し、該ウエ
    ルのそれぞれは、液状アリコートを保持するようになり、及び表面張力により該
    ウエル内に該アリコートを保持するのに適した大きさ、形、材料からなり、該ウ
    エルの少なくとも１つは、生体物質の検出用の少なくとも１つの試薬であって、
    該インキュベションプレートに適用されたサンプル中に生体物質が存在しないと
    きは、生体物質に対する陽性反応は生じないような試薬を収容する、水平表面を
    有するプレート。
  2. 【請求項２】 上記試薬が、コロナ処理及び乾燥により上記ウエル内に堆積
    された請求項１のプレート。
  3. 【請求項３】 更に、蓋を含む請求項１のプレート。
  4. 【請求項４】 更に、複数の異なった試薬を含む請求項１のプレート。
  5. 【請求項５】 上記異なった試薬が、複数の上記ウエルの中の異なったウエ
    ルに供給される請求項４のプレート。
  6. 【請求項６】 上記異なった試薬の少なくともいくつかが、異なった分析を
    提供する請求項５のプレート。
  7. 【請求項７】 少なくとも１の上記試薬が、少なくとも１のバクテリア種を
    含む請求項１のプレート。
  8. 【請求項８】 上記プレートが、疎水性の材料から形成された請求項１のプ
    レート。
  9. 【請求項９】 上記ウエルのそれぞれが、余分な液体が除去しやすいように
    面取りされた請求項１のプレート。
  10. 【請求項１０】 上記プレートが、更にハンドル部を含む請求項１のプレー
    ト。
  11. 【請求項１１】 生体物質の有無又は量を決定するための減菌インキュベー
    ションプレートであって、 概ね平坦な水平表面であって、該表面は複数の凹状のウエルを規定し、それぞ
    れのウエルは、液状アリコートを保持するようになり、及び表面張力によりそれ
    ぞれの該ウエル内に該アリコートを保持するのに適した大きさ、形、材料からな
    る水平表面と、 蓋であって、該ウエルの少なくとも１つに適合する、少なくとも１つの突起を
    有し、該プレートに適用されたサンプル中に生体物質が存在しないときは、該イ
    ンキュベーションプレートが生体物質に対する陽性反応は生じないような、少な
    くとも１つの、生体物質の検出用試薬を収容する蓋と、を有するプレート。
  12. 【請求項１２】 少なくとも１つの試薬が、上記少なくとも１つの突起上で
    乾燥された請求項１１のプレート。
  13. 【請求項１３】 上記少なくとも１つの突起の先端が、上記試薬の堆積前に
    コロナ処理された請求項１２のプレート。
  14. 【請求項１４】 上記少なくとも１つの突起が、キャビティを有し、上記試
    薬が該キャビティ内に含まれる請求項１１のプレート。
  15. 【請求項１５】 上記キャビティの表面が、コロナ処理された請求項１４の
    プレート。
  16. 【請求項１６】 更に、複数の異なった試薬を含む請求項１１のプレート。
  17. 【請求項１７】 異なった試薬が、複数の上記ウエルの中の異なったウエル
    に提供される請求項１６のプレート。
  18. 【請求項１８】 上記少なくとも１つの試薬が、少なくとも１つのバクテリ
    ア種のセルを含む請求項１１の装置。
  19. 【請求項１９】 上記異なった試薬の少なくともいくつかが、異なった分析
    を提供する請求項１７のプレート。
  20. 【請求項２０】 上記プレートが、疎水性材料から形成された請求項１１の
    装置。
  21. 【請求項２１】 上記ウエルのそれぞれが、余分な液体を除去し易いように
    面取りがされている請求項１１のプレート。
  22. 【請求項２２】 上記プレートが、更に、ハンドル部分を含む請求項１１の
    プレート。
  23. 【請求項２３】 テスト液中の検体や微生物の有無又は量を決定するための
    装置であって、該装置が、 実質的に疎水性の支持構造体と、 該支持構造体上に固定された少なくとも１つの試薬島であって、少なくとも１
    つの試薬島が予め決められた量のテスト液を吸収できるようになった試薬島と、 試薬島の上又は中に配置され、検体や微生物の有無又は量を決定するための手
    段と、を含む装置。
  24. 【請求項２４】 更に、上記支持構造体の上に固定された、複数の試薬島を
    含む請求項２３の装置。
  25. 【請求項２５】 上記検体や微生物の有無又は量を決定するための手段が、
    上記試薬島の上又は中に組み込まれた粉体である請求項２３の装置。
  26. 【請求項２６】 上記検体や微生物の有無又は量を決定するための手段が、
    ターゲットとなる検体や微生物がサンプル中に存在する場合に、検出可能な信号
    を発生させる試薬を含む請求項２３の装置。
  27. 【請求項２７】 上記少なくとも１つの試薬島が、セルロースからなる請求
    項２３の装置。
  28. 【請求項２８】 上記実質的に疎水性の支持構造体が、プラスチックからな
    る請求項２３の装置。
  29. 【請求項２９】 上記少なくとも１つの試薬が、少なくとも１つのバクテリ
    ア種のセルを含む請求項２３の装置。
  30. 【請求項３０】 更に、複数の異なった試薬を含む請求項２３の装置。
  31. 【請求項３１】 上記装置が、複数の試薬島を含み、上記少なくとも１つの
    試薬が、上記試薬島の異なった島に配置される、試薬の異なった組み合わせを含
    み、上記プレート中で複数の異なった分析を提供する請求項２３の装置。
  32. 【請求項３２】 サンプル中の微生物や検体の有無又は量を決定するための
    装置であって、該装置が、少なくとも１の表面を含む固体の支持構造体を含み、
    該少なくとも１つの表面が、複数の独立した試薬島を規定し、該試薬島のそれぞ
    れが、液状アリコートを保持するようになり、及び該試薬島内に該アリコートを
    保持するのに適した大きさ、形、材料からなり、該試薬島の少なくとも１つが、
    該装置に適用されたサンプル中に微生物や検体が存在しないときは、該装置が検
    体や微生物に対する陽性反応を生じないような、微生物や検体の検出用の少なく
    とも１つの試薬を含む装置。
  33. 【請求項３３】 上記試薬島が、予め選択された全量を共に吸収する請求項
    ３２の装置。
  34. 【請求項３４】 上記少なくとも１つの試薬が、分離された島に配置された
    複数の試薬を含む請求項３２の装置。
  35. 【請求項３５】 上記試薬島が、複数のゾーン内に配置され、該ゾーンのそ
    れぞれが、別個の分析を提供する請求項３２の装置。
  36. 【請求項３６】 上記試薬島が、表面張力により、液状のサンプルのアリコ
    ートを保持するように適用された請求項３２の装置。
  37. 【請求項３７】 上記試薬島が、吸着により、液状のサンプルのアリコート
    を保持するように適用された請求項３２の装置。
  38. 【請求項３８】 上記試薬島が、それぞれが等しい量を吸収するように設計
    され、適用された請求項３２の装置。
  39. 【請求項３９】 上記試薬島が、上記固体の支持構造体の１以上の表面に配
    置された請求項３２の装置。
  40. 【請求項４０】 上記装置がプレートである請求項３２の装置。
  41. 【請求項４１】 上記支持構造体が、細長いストリップである請求項３２の
    装置。
  42. 【請求項４２】 上記支持構造体が、疎水性の材料から構成された請求項３
    ２の装置。
  43. 【請求項４３】 上記少なくとも１つの試薬が、成長培地、バクテリアセル
    、酵素、及び酵素基質からなる組から選択された請求項３２の装置。
  44. 【請求項４４】 上記成長培地が、指標成長培地である請求項４３の装置。
  45. 【請求項４５】 サンプル中の微生物や検体の有無又は量を決定するための
    方法であって、 生体物質を検出するための少なくとも１つの試薬を収容する少なくとも１つの
    ウエルを含むインキュベーションプレートを準備する工程であって、該プレート
    が概ね平坦な水平表面を有し、該表面が複数の凹状のウエルを規定し、該ウエル
    のそれぞれが、液状アリコートを保持するようになっており、表面張力により該
    ウエルのそれぞれに該液状アリコートを保持するのに適した大きさ、形状、材料
    からなり、少なくとも１つのウエルが、該生体物質を検出するための少なくとも
    １つの試薬を含む工程と、 該インキュベーションプレートの表面上に液状のサンプルを配分する工程と、 余分な液体を該インキュベーションプレートから除去する工程と、 該生体物質の有無又は量が決定できるように、該ウエルの１又はそれ以上で該
    生体物質の有無又は量が決定されるまで、該インキュベーションプレートをイン
    キュベーションする工程と、を含む方法。
  46. 【請求項４６】 サンプル中の微生物や検体の有無又は量を決定するための
    方法であって、 概ね平坦な水平表面を有し、該表面が複数の凹状のウエルを規定し、該ウエル
    のそれぞれが液状アリコートを保持するようになり、及び表面張力によりそれぞ
    れの該ウエル内に該アリコートを保持するのに適した大きさ、形、材料からなる
    プレート部と、該生体物質の検出用の少なくとも１つの試薬を含む少なくとも１
    つの突起を有する蓋であって、該下部プレート部の上に該蓋が閉じられたとき、
    該突起のそれぞれが該ウエルのうちの１つに適合する蓋と、を含む滅菌インキュ
    ベーションプレートを提供する工程と、 該インキュベーションプレートの表面上に液状のサンプルを配分する工程と、 余分な液体を該インキュベーションプレートから除去する工程と、 該蓋で該プレート部を閉鎖し、これにより少なくとも１つの該突起上の少なく
    とも１つの該試薬を、該別個のウエル中の液状アリコートに接触させ、その結果
    少なくとも１つの該試薬を溶解させる工程と、 該生体物質の有無又は量が決定できるように、該ウエルの１又はそれ以上で該
    生体物質の有無又は量が決定されるまで、該インキュベーションプレートをイン
    キュベーションする工程と、を含む方法。
  47. 【請求項４７】 少なくとも１つの試薬を含むインキュベーションプレート
    を製造する方法であって、 ａ）概ね平坦な水平表面を備え、該水平表面が複数の凹状のウエルを規定し、該
    ウエルのそれぞれが液状アリコートを保持するようになり、及び表面張力により
    それぞれの該ウエル内に該アリコートを保持するのに適した大きさ、形、材料か
    らなるたプレート部と、少なくとも１つの突起を含み、該下部プレート部の上に
    該蓋が閉じられたとき、該突起が該ウエルのうちの１つに適合する蓋と、を有す
    る滅菌インキュベーションプレートを提供する工程と、 ｂ）懸濁液又は溶液から、上記少なくとも１つの突起上に、上記少なくとも１つ
    の試薬を乾燥させる工程と、を含む方法。
  48. 【請求項４８】 テスト液中の検体や微生物を検出するために有用な装置の
    製造方法であって、 材料の量に対し予め決められた量の液体を吸収できる材料を提供する工程と、 該材料から少なくとも１つの試薬島を準備する工程と、 該材料を、検体や微生物の有無又は量を検出するための手段と組み合わせる工
    程と、 該試薬島を、実質的に疎水性の支持構造体に固定する工程と、を含む製造方法
    。
  49. 【請求項４９】 テスト溶液中の検体や微生物の有無や量を検出する方法で
    あって、 テスト溶液を支持構造体の上に固定された少なくとも１つの試薬島に接触させ
    る工程であって、該少なくとも１つの試薬島が、予め決められた量のテスト溶液
    を吸収でき、該試薬島の上又は中に配置された検体や微生物の有無や量を決定す
    る手段を含む工程と、 該試薬島が予め決められた量のテストサンプルを吸収した後、該テストサンプ
    ルを、支持構造体上に固定された該試薬島から分離する工程と、 該試薬島を、該試薬を成長させる反応パラメータにさらし、これにより感知可
    能な信号を提供する工程と、 検体や微生物の有無又は量を決定する工程と、を含む方法。
  50. 【請求項５０】 テスト溶液中の検体や微生物の有無や量を検出する方法で
    あって、 検体や微生物の有無又は量の検出用のテスト溶液を選択する工程と、 概ね疎水性の支持構造体と、該支持構造体上に固定された少なくとも１つの試
    薬島とを含み、該試薬島が予め決められた量のテスト溶液を吸収することができ
    、該試薬島が検体や微生物の有無又は量を決定する手段を有する装置を提供する
    工程と、 該試薬島が該予め決められた量を吸収するのに十分な時間の間、該装置を該テ
    スト溶液に接触させる工程と、 検体や微生物の有無又は量を決定する該手段に、検体や微生物の有無又は量を
    決定させる工程と、を含む方法。
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