JP2001513775A

JP2001513775A - トリペプチドおよびテトラペプチド医薬化合物

Info

Publication number: JP2001513775A
Application number: JP53780298A
Authority: JP
Inventors: ノーマン，ブライアン・エイチ; シー，チュアン
Original assignee: University of Hawaii; Eli Lilly and Co
Current assignee: University of Hawaii; Eli Lilly and Co
Priority date: 1997-02-26
Filing date: 1998-02-25
Publication date: 2001-09-04
Also published as: WO1998038178A1; EP0975610A1; AU6338698A; CA2281107A1; EP0975610A4

Abstract

(57)【要約】本発明は、抗腫瘍薬として、および癌を処置するための、微小管系の破壊に有用で有り得る新規のクリプトフィシン化合物を提供する。本発明はさらに、新規のクリプトフィシン化合物を投与するための製剤を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称トリペプチドおよびテトラペプチド医薬化合物発明の分野本発明は、抗微小管薬として有用な新規のクリプトフィシン化合物に関する。発明の背景細胞増殖の正常な制御下にない細胞の増殖によって特徴付けられる腫瘍性の疾患は、ヒトおよび他の動物における死の主な原因である。癌化学療法における臨床実験により、新規でより効果的な薬物がこれらの疾患を処置するために望ましいことが実証された。このような臨床実験はまた、細胞骨格の微小管系を破壊（ disrupt）する薬物は腫瘍細胞の増殖を阻止することにおいて効果的で有り得るということも実証した。クリプトフィシン環にアミド置換を有する、ここに特許請求する化合物は、驚くべき強力な抗微小管活性を有すると同時にさらに特に望ましい溶解特性を有する。ここで特許請求される化合物は、許容し得る溶解性を有すると同時に望ましい抗微小管活性に関係する化合物に対する必要性に取り組むものである。さらに、微小管系を破壊する能力を有するこのような薬剤は研究目的のために有用であり得る。ここに特許請求する化合物は、全合成法を用いて製造することができるので医薬として有用な薬剤としての開発によく適している。発明の要約ここに特許請求する発明は、式（Ｉ）：［式中、 Arは、フェニル、任意の単純な置換されていない芳香族、置換された芳香族、非置換ヘテロ芳香族、および置換されたヘテロ芳香族からなる群から選択され；Ｒ¹はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェートおよびホスフェートからなる群から選択され；Ｒ²はＯＨまたはＳＨであるか；またはＲ¹およびＲ²はＣ₁₈およびＣ₁₉と一緒になってエポキシド環、アジリジン環、エピスルフィド環、スルフェート環もしくはモノアルキルホスフェート環を形成してよく；あるいはＲ¹およびＲ²は一緒になってＣ₁₈とＣ₁₉との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ³は低級アルキル基であり；Ｒ⁴はＨまたはＨ₂であり；Ｒ⁵はＨまたはＨ₂であり；Ｒ⁴およびＲ⁵は一緒になってＣ₁₃とＣ₁₄との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ⁶はベンジル、ヒドロキシベンジル、アルコキシベンジル、ハロヒドロキシベンジル、ジハロヒドロキシベンジル、ハロアルコキシベンジル、およびジハロアルコキシベンジル基からなる群から選択され；Ｒ⁷はＨまたは低級アルキル基であり；Ｒ⁸はＨまたは低級アルキル基であり；またはＲ⁷およびＲ⁸は、場合により、一緒になってシクロプロピル環を形成してよく；Ｒ⁹はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；Ｒ¹⁰はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；Ｒ¹¹は、水素、単純アルキル、ＯＨ、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、および置換されたベンジルからなる群から選択され；ＸはＯ、ＮＨ、またはアルキルアミノである］で示される新規のクリプトフィシン化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物を提供する。本発明は、医薬製剤、有効量の式（Ｉ）で示される化合物を使用する微小管系を破壊するための方法、有効量の式（Ｉ）で示される化合物を投与することを含んでなる哺乳類細胞の増殖を阻止する方法、および有効量の式（Ｉ）で示される化合物を投与することを含んでなる哺乳類における腫瘍（neoplasia）を処置するための方法を提供する。発明の詳細な記載本明細書において使用される「単純なアルキル」なる用語は、アルキルが飽和されていてもいなくても、分岐していてもまたは直鎖でもよいＣ₁−Ｃ₇アルキルを意味する。例としてメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、プロペニル、sec−ブチル、ｎ−ペンチル、イソブチル、tert−ブチル、s ec−ブチル、メチル化されたブチル基、ペンチル、tert−ペンチル、sec−ペンチル、メチル化されたペンチル基などが含まれるが、なんらこれらに限られない。本明細書に使用される「置換されたフェニル」なる用語は、単純アルキル、Ｃ l、Br、ＦおよびＩからなる群から独立に選択し得る１〜３の炭化水素でない置換基を有するフェニル基を意味する。本明細書において使用される「置換されたベンジル」なる用語は、単純アルキル、Cl、Br、ＦおよびIからなる群から独立に選択し得る１〜３の炭化水素でない置換基を有するベンジルを意味する。本明細書において使用される「低級アルコキシ基」は、酸素原子と結合した炭素原子１〜５のいずれかのアルキル基を意味する。本明細書において使用される「低級アルキル基」は、炭素原子１〜５のアルキル基を意味し、直鎖および非直鎖状の炭化水素鎖を含む。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチル、sec−ブチル、メチル化されたブチル基、ペンチル、tert−ペンチル、sec−ペンチル、およびメチル化されたペンチル基が含まれるがこれらに限られない。本明細書において使用される「アルキル置換されたアルケン」なる語は、炭素原子１〜７を有し、そこにおいてアルキル置換を含んでいるいずれかのアルケンを意味する。本明細書において使用される「エポキシド環」は、その骨格が２つの炭素と１つの酸素原子がらなる３員環を意味する。本明細書において使用される「アジリジン環」は、その骨格が２つの炭素原子と１つの窒素原子からなる３員環を意味する。本明細書において使用される「スルフィド環」は、その骨格が２つの炭素原子と１つの硫黄原子からなる３員環を意味する。本明細書において使用される「エピスルフィド環」は、その骨格が２つの炭素と１つの硫黄原子からなる３員環を意味する。本明細書において使用される「スルフェート基」は、硫黄原子に結合した２つのさらなる酸素原子を有する炭素−炭素−酸素−硫黄−酸素骨格からなる５員環を意味する。本明細書において使用される「モノアルキルホスフェート環」は、炭素−炭素−酸素−リン−酸素骨格からなる５員環であって、２つのさらなる酸素原子を有し、その１つは低級アルキル基を有し、リン原子に結合しているものを意味する。本明細書において使用される「単純な置換されていない芳香族基」は、単環共役系において４ｎ＋２π電子を有する通常の芳香環を意味する。例えば、フリル、ピロリル、チエニル、ピリジルなどであるがこれらに限られない。または共役二環系、例えばインドリルまたはナフチルであるがこれらに限られない。本明細書において使用される「単純な置換された芳香族基」は、ハロゲンおよび低級アルキル基からなる群から選択される１つの基で置換されたフェニル基を意味する。本明細書において使用する「アリール」なる用語は、芳香族炭化水素から原子１個を除くことにより得られる有機の基、例えばフェニルまたはナフチルを意味する。最も好ましくは、任意のアルキル置換基を含んでいるアリール環系が炭素原子６〜１０を含んでなるＣ₆−Ｃ₁₀アリールを意味する。「Ｃ₁−Ｃ₃アルキルアリール」なる用語は、アルキル基が直線状かまたは分岐している（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール置換基を意味し、例えばベンジル、フェネチル、３−フェニルプロピル、またはフェニル−ｔ−ブチルなどであるがこれに限られない。アルキルアリール部分はアルキル基によって親分子に結合している。本明細書において使用する「アルキルアミノ」は、その一般的な意味である。したがって、この言葉は、Ｎ−Ｒ^R'（Ｒ^R'はＣ₁−Ｃ₃アルキルである）を意味する。「Ｘ」および／または「Ｙ」がアルキルアミノである場合のようにアミノアルキルアミノ基が環のなかに含まれるときは、環におけるこのようなアルキルアミノ基はで示される基で示すことができる。本明細書において使用される「ヘテロ芳香族基」は、１またはそれ以上の、酸素、窒素および硫黄からなる群から選択される非炭素の置換基を含んでいる芳香環を意味する。本明細書において使用される「ハロゲン」は、歴史的に周期表上でハロゲンとして知られている群の構成員を意味する。ハロゲン化の方法にはハロゲン化水素の付加、高温での置換、光ハロゲン化などが含まれるがこれらに限られない。このような方法は当業者に知られている。本明細書において使用する「クリプトＡ−Ｂ−ＯＣＨ₂ＣCl₃」または「クリプトフィシンＡ−Ｂトリクロロエチルエステル」は、次式：で示される基を意味する。本明細書において使用される「哺乳類」は、高等脊椎動物の哺乳綱を意味する。「哺乳類」なる語には、ヒトが含まれるがこれに限られない。本明細書において使用される「処置」なる語には、命名された状態の予防または一旦確立されてしまった状態の改善を意味する。ここに特許請求されるクリプトフィシン化合物は、家畜の健康目的並びにヒトの患者の処置に有用であり得る。本発明の幾つかの好ましい特徴を表の形式で以下に記載する。その表において、その特徴を独立に選択し本発明の好ましい態様を提供する。本発明は以下に記載した特徴になんら制限されない：Ａ）Ｒ⁸はエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはイソペシチルである；Ｂ）Ｒ⁷はエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはイソペンチルである；Ｃ）Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁸はメチルであり、Ｒ³はメチルであり、ＸおよびＹは同時にＯではない；Ｄ）Ｒ³はエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはイソペンチルである；Ｅ）Ｒ⁹はメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはイソペンチルである；Ｆ）Ｒ¹⁰はメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはイソペンチルである；Ｇ）Ｃ−３、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−１０、Ｃ−１６、Ｃ−１７、およびＣ−１８からなる群から選択される基の少なくとも１つがＲ立体化学を有するクリプトフィシン化合物（番号付けは後述の請求項１に記載）；Ｈ）Ｃ−３、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−１０、Ｃ−１６、Ｃ−１７、およびＣ−１８からなる群から選択される基の少なくとも１つがＳ立体化学を有するクリプトフィシン化合物（番号付けは後述の請求項１に記載）；Ｉ）Arが、水素、ハロゲンおよび単純アルキルからなる群から選択される置換基を有するフェニルである；Ｊ）Ｃ−７置換基がＲ配置である化合物；Ｋ）Ｃ−７置換基がＳ配置である化合物；Ｌ）Ｒ⁷、Ｒ⁸がそれぞれ水素である；Ｍ）Ｒ⁷およびＲ⁸がそれぞれ水素またはＯＨから選択される；Ｎ）Ｒ¹¹が単純アルキルである；Ｏ）Ｒがメチル、エチル、ｎ−プロピル、およびフェニルからなる群から選択される；Ｐ）Ｒ¹およびＲ²がエポキシド環を形成する；Ｑ）ＸとＹが両方ともＯである；Ｒ）Ｒ⁴およびＲ⁵が二重結合を形成する；Ｓ）Ｒ⁶は置換されたベンジルであって、ある置換基はハロゲンであり、ある置換基はＯＲ¹²基（Ｒ¹²は低級アルキルである）である；Ｔ）微小管系の破壊のために使用される式（Ｉ）で示される化合物；Ｕ）抗腫瘍薬として使用される式（Ｉ）で示される化合物；Ｖ）哺乳類において癌の処置のために使用される式（Ｉ）で示される化合物；Ｗ）ＹがＯ、ＮＨ、Ｓ、ＳＯ、およびＳＯ₂からなる群から選択される化合物；Ｘ）ＹがＣであり、Ｒ⁷、Ｒ⁸、R⁹、およびＲ¹⁰がそれぞれ水素であり、Ｒ¹およびＲ²がエポキシドを形成する化合物；Ｙ）Ｒ¹⁰が水素である；およびＺ）Ｒ³がメチルである。本発明の幾つかの好ましい化合物の例には、以下のものが含まれるがこれらにはなんら限定されない：式中、 Arはフェニルであり、Ｒ¹およびＲ²は一緒になって三員環のエポキシド環を形成し、Ｒ³はメチルであり、Ｒ⁴およびＲ⁵は一緒になって二重結合を形成し、Ｒ⁶はクロロメトキシベンジルであり、Ｒ¹⁰は水素であり、それ以外の置換基は以下の表に示したものである。本発明は、哺乳類細胞の過剰増殖によって引き起こされた病的状態を軽減する方法を提供し、その方法は、有効量の本明細書において開示された医薬または家畜病治療用組成物を患者に投与して、細胞の増殖を阻止することを含んでなる。本発明の好ましい態様において、本方法は、さらに、病的状態を軽減することを目的とする少なくとも１つのさらなる治療を患者に投与することを含んでなる。本発明の好ましい態様において、病的状態は新生物の形成によって特徴付けられる。本発明のさらに好ましい態様において、新生物は、乳房、小細胞肺、非小細胞肺、結腸直腸、白血病、メラノーマ、膵臓アデノカルチノーマ、中枢神経系（ＣＮＳ）、卵巣、前立腺、軟組織または骨のサルコーマ、頭および首、膵臓および食道を含む胃、ミエローマ、膀胱、腎臓、甲状腺を含む神経内分泌、並びに非ホジキン病およびホジキン病新生物の新生物からなる群から選択される。本明細書において使用される「腫瘍」は、異常に増殖する新生物（neoplasm）を意味し、このような増殖は通常の増殖の制限を受けない細胞の増殖によって引き起こされる。本明細書において使用される「抗腫瘍薬」は、細胞の腫瘍性表現型を阻止、排除、妨害、または逆転するいずれかの化合物、組成物、混合物、共混合物（co-mixture）、または配合である。抗核分裂剤または核分裂毒は、その分子の作用の機構に基づいて３つのグループに分類することができる。第１のグループは、コルシチンおよびコルセミドを含む、チューブリンの引き離し（sequestering）により微小管の形成を阻害する薬剤からなる。第２のグループは、ビンブラスチンおよびビンクリスチンを含む、チューブリンの多結晶性凝集（paracrystalline aggregates）の形成を誘導する薬剤からなる。ビンブラスチンおよびビンクリスチンは、抗癌剤としてよく知られており、有糸分裂において紡錘体を構成する微小管（mitotic spindle micr otubules）を優先的に破壊するそれら作用が異常増殖性の細胞を阻害する。第３のグループは、タキソールを含む、チューブリンの重合を促進して微小管を安定化する薬剤からなる。多くの腫瘍細胞により薬物耐性や多重薬物耐性表現型が示されること、および腫瘍細胞に対する抗微小管薬の臨床的に明らかにされた作用形態は、非薬剤耐性の腫瘍細胞に対して細胞毒性であると同時に薬剤耐性を有する腫瘍細胞に対しても細胞毒性である抗微小管薬の開発を必要とする。化学療法、手術、照射療法、生物学的応答改変剤による治療、および免疫療法が癌の処置において現在用いられている。治療のそれぞれの形態には、当業者に知られている特異的な適応症が存在し、１つまたはすべてを腫瘍細胞の全体的な破壊を達成する試みにおいて用いることができる。さらに、組み合わせ療法は単独の抗腫瘍薬の使用よりも通常は効果的なので、組み合わせ療法、即ち他の腫瘍薬と組み合わせて式（Ｉ）の化合物を使用する化学療法もまた本発明によって提供される。したがって、本発明のさらなる態様は、治療上有効量の、上記の利点をもたらすのに役立つ少なくとも１つの、式（Ｉ）の化合物（非毒性のその付加塩を含む）を含有する組成物を提供する。このような組成物はまた、生理学的に寛容な液体、ゲル、または固体の担体、希釈剤、アジュバントおよび添加剤と共に提供され得る。このような担体、アジュバント、および添加剤は、U ．S．Phar macopeia ，Vol，XXIIおよびNational Formulary，vol XVII，U ．S．Pharmacopei a，Convention ，Inc．Rockvile，MD（1989）に記載されている。処置のさらなる形態は、American Hospital Formulary Service，pp．522-660のAHFS Drug Info mation ，1993 e．に記載されている。これら文献はそれぞれ、当業者によく知られており容易に入手することができる。本発明はさらに、腫瘍性の疾患を処置するために使用する少なくとも１つの式（Ｉ）で示される化合物と少なくとも１つのさらなる抗腫瘍薬とをを含有する医薬組成物を提供する。式（Ｉ）または式（ＩＩＩ）で示される化合物と組み合わせて使用することができる抗腫瘍薬は、Merck Index 11，pp 16−17，Merck & C o.，Inc．（1989）に記載されているものである。Merck Indexは当業者に広く認識されており容易に入手することができる。本発明のさらなる態様において、抗腫瘍薬は抗代謝薬であってよく、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシン、アラビノシド、ヒドロキシ尿素、および２−クロロデオキシアデノシンからなる群から選択されるものが含まれ得るが何らこれに限られない。本発明のさらに別の態様において、意図する抗腫瘍薬はアルキル化剤であり、シクロホスファミド、メファラン、ブスルファン、パラプラチン、クロラムブシル、およびナイトロジェンマスタードからなる群から選択されるものが含まれ得るが何らこれに限られない。さらなる態様において、抗腫瘍薬は植物アルカロイドであり、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール、およびエトポシドからなる群から選択されるものが含まれ得るが何らこれに限られない。さらなる態様において、意図する抗腫瘍薬は抗生物質であり、ドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシンＣ、およびブレオマイシンからなる群から選択されるものが含まれ得るが何らこれに限られない。さらなる態様において、意図する抗腫瘍薬はホルモンでありカルステロン、ジオモスタボロン、プロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、タモキシフェン、ポリエストラジオール、ホスフェート、メゲステロールアセテート、フルタミド、ニルタミド、およびトリロタンからなる群から選択されるものが含まれ得るが何らこれに限られない。さらなる態様において、意図する抗腫瘍薬には、Ｌ−アスパラギナーゼからなる群から選択されるものが含まれ得るがこれに限定されない酵素、およびアムサクリンなどの、しかしこれに限られないアミノアクリジン誘導体を含む。さらなる抗腫瘍薬には、Skeel，Roland T.，“Antineoplastic Drugs and Biologic Re sponse Modifier：Classification，Use and Toxicity of Clinically Useful A gents”Handbook of Cancer Chemotherapy （第三版）、Little Brown & Co．（ 1991）に記載されているものが含まれる。これらの化合物および組成物は、家畜病治療の使用のために哺乳類に投与し得る。例えば、家畜をヒトの臨床患者とほぼ同じように処置し得る。一般に、治療的効果に必要な投与量は、使用の形式、投与の形態、並びに個々の受容者の個別的な必要条件に従って変わるであろう。典型的には、投与量は、約０．００１〜１０００mg／kg、およびさらに一般的には０.０１〜１０mg／kg（受容者の体重）の範囲であろう。あるいは、この範囲内の投与量を、通常２４時間を越える持続した一定時間、所望の治療効果が得られるまで一定量の注入（constant infus ion）により投与し得る。確かに、薬物の投与量、並びに投与経路は相対的な効果、相対的な毒性、腫瘍の成長特性および細胞サイクルに対する式（Ｉ）または式（ＩＩＩ）の化合物の効果、薬物の薬物動力学、年齢、性別、患者の身体的状態、それ以前の処置に基づいて選択されねばならない。さらなる抗腫瘍薬を含むまたは含まない式（Ｉ）または式（ＩＩＩ）で示される化合物を、天然のまたは塩の形態として治療用組成物に製剤化することができる。薬学的に許容し得る非毒性の塩には、無機の塩基、例えばナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムまたは鉄の水酸化物、および有機の塩基、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどから誘導することができる塩基の付加塩が含まれる。このような塩はまた、いずれかの遊離のカチオン基と酸の付加塩として形成することができ、一般に無機の酸例えば塩酸、リン酸または有機の酸例えば酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などと形成されるであろう。さらなる添加剤は、例えばU ．S．Pharmacopeiaにおいて当業者に提供されている。ある治療用組成物における注入のための特定の担体の適性は、好ましい投与経路に依存する。例えば、抗腫瘍組成物を経口投与用に製剤化することができる。このような組成物は、典型的には、溶液としてかまたは懸濁液としてかまたは固体の形態で製造することができる。経口製剤は、結合剤、賦形剤、担体、保存剤、安定化剤、乳化剤、緩衝化剤、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの添加物を通常含有する。これらの組成物は、溶剤、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、徐放性製剤、または散剤の形態をとることができ、典型的には１％〜９５％の活性成分を含有する。最も好ましくは、組成物は約２％〜約７０％の活性成分を含有する。本発明の組成物は注入用として、溶液としてかまたは懸濁液としてか、または乳剤としてか；注入の前の液体中の溶液または懸濁液に適当な固体の形態として製造することができる。このような注入用製剤は、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、髄腔内または胸膜腔内投与することができる。活性成分または成分は、生理学的に寛容で活性成分と適合する希釈剤、担体または添加剤と混合することが多い。適当な希釈剤および添加剤は、例えば、水、生理食塩水、ジオキサン、グリセリンなど、またはその組み合わせである。さらに、所望ならば、組成物は少量の補助物質例えば湿潤剤または乳化剤、安定化剤またはpH緩衝化剤を含有することができる。本発明はさらに、哺乳類細胞を、哺乳類細胞の増殖を阻止するに十分な量の式（Ｉ）の化合物と接触させることによる、これら細胞の増殖を阻止するための式（Ｉ）の化合物の使用方法を提供する。好ましい態様は過剰増殖性の哺乳類細胞の増殖を阻止する方法である。本発明の目的に関して、「過剰増殖性の哺乳類細胞」は、増殖の特徴的な制限（例えばプログラムされた細胞死）を受けない哺乳類細胞である。さらに好ましい態様は、哺乳類がヒトである場合である。本発明はさらに、哺乳類細胞を少なくとも１つの式（Ｉ）または式（ＩＩＩ）の化合物および少なくとも１つの抗腫瘍薬を接触させることを提供する。考えられる抗腫瘍薬の種類は上に述べた。本発明はさらに、過剰増殖性哺乳類細胞の増殖を阻止するに十分な量の式（Ｉ）の化合物と該細胞とを接触させることによる、多重薬物耐性表現型を有するものを含む薬物耐性表現型を有している過剰増殖性細胞の増殖を阻止するための、式（Ｉ）の化合物を使用する方法を提供する。好ましい態様は哺乳類がヒトである場合である。本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物と少なくとも１つの前述のさらなる抗腫瘍薬を接触させることを提供する。本発明は、過剰増殖する細胞の増殖を阻止するための、式（Ｉ）または式（ＩＩＩ）の化合物を含有する医薬組成物の有効量を患者に投与することによる、例えば腫瘍のような哺乳類細胞の過剰増殖によって引き起こされる病的状態を軽減するための方法を提供する。本明細書において使用される「病的状態」は、正常な増殖制限の支配下にない哺乳類細胞の増殖から生じるいずれかの病態を意味する。このような細胞の増殖は前記の新生物が原因となり得る。さらに好ましい態様において、腫瘍細胞はヒトである。本発明は、他の治療並びに他の抗腫瘍薬と組み合わせて式（Ｉ）で示される化合物を使用するこのような病的状態を軽減する方法を提供する。特許請求した化合物の有効性は、当業者に知られた標準的な方法を用いて評価することができる。化合物を、ＫＢ、ヒト鼻咽頭カルチノーマセルライン、ＬｏＶｏ、ヒト結腸直腸アデノカルチノーマセルラインに対する最小発育阻止濃度についてスクリーニングした。Corbettアッセイ（Corbett，T．H．ら，Cytotoxic Anticancer Drugs ：Models and Concepts for Drug Discovery and Development ，pp 35-87，Kluw er Academic Publishers：Norwell，1992を参照。さらに、Valeriote，ら，Disc overy and Development of Anticancer Agents ：Kluwer Academic Publishers： Norwell，1993を参照）。最も活性な化合物を、４つの異なる細胞型、例えばネズミ白血病、ネズミ充実性腫瘍、ヒト充実性腫瘍、および低悪性度繊維芽細胞に対する細胞毒性について、Corbettアッセイを用いてさらに調べた。化合物をさらに、マウスに移植した薬物耐性腫瘍を含むネズミおよびヒト腫瘍の広域スペクトルについて調べた。腫瘍重量（Ｔ／Ｃ）（処置した動物における平均腫瘍重量対未処置の動物における平均腫瘍重量）をさらなる評価として用いた。４２％未満のＴ／Ｃ値は、Na tional Cancer Institute Standardsによって活性であると考えられ、１０％未満のＴ／Ｃ値は、National Cancer Institute Standardsによって優れた活性と潜在性のある臨床上の活性を有すると考えられる。式（Ｉ）で示される化合物の試験は、この化合物がここで特許請求する処置方法において有用であり得るということを示唆している。さらに、この化合物は、微小管系の破壊に有用であろう。上記の分析を用いた本発明の試験化合物の結果は、以下のとおりである：式（ＩＩＩ）：［式中、 Arは、フェニル、任意の単純な置換されていない芳香族、置換された芳香族、非置換ヘテロ芳香族、および置換されたヘテロ芳香族基からなる群から選択され；Ｒ¹はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニワム、アルキルテオ、ジアルキルスルホニワム、スルフェートおよびホスフェートからなる群から選択され；Ｒ²はＯＨまたはＳＨであるか；またはＲ¹およびＲ²はＣ₁₈およびＣ₁₉と一緒になってエポキシド環、アジリジン環、エピスルフィド環、スルフェート環もしくはモノアルキルホスフェート環を形成してよく；あるいはＲ¹およびＲ²は一緒になってＣ₁₈とＣ₁₉との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ³は低級アルキル基であり；Ｒ⁴はＨまたはＨ₂であり；Ｒ⁵はＨまたはＨ₂であり；Ｒ⁴およびＲ⁵は一緒になってＣ₁₃とＣ₁₄との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ⁶はベンジル、ヒドロキシベンジル、アルコキシベンジル、ハロヒドロキシベンジル、ジハロヒドロキシベンジル、ハロアルコキシベンジル、およびジハロアルコキシベンジル基からなる群から選択され；Ｒ⁷はＨまたは低級アルキル基であり；Ｒ⁸はＨまたは低級アルキル基であり；またはＲ⁷およびＲ⁸は、場合により、一緒になってシクロプロピル環を形成してよく；Ｒ⁹はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；Ｒ¹⁰はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；ＸはＯ、ＮＨ、またはアルキルアミノである］で示される化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物は好ましいであろう。さらに好ましい化合物は、式中Ｒ¹¹がＣ₁−Ｃ₂アルキルまたはベンジルである化合物であり得る。本発明の化合物は以下の反応式を用いて説明するように製造することができる。反応式１反応式２クリプトフィシンＡ−Ｂトリクロロエチルエステルは、文献において知られた情報を用いて製造することができるが、当業者の便宜のため、以下の方法を提供する：当業者は、前記の反応式と以下の実施例の指針を用い、適当な出発物質と試薬を使用して所望の化合物を製造することができる。当業者は、前記の反応式と以下の実施例の指針を用い、適当な出発物質と試薬を使用して所望の化合物を製造することができる。本発明を説明するために以下に実施例を提供する。本発明の範囲は、以下の実施例にまたは実施例によって限定されるものであるとはなんら解釈されない。塩化メチレン５mL中にクリプトフィシンＡ−Ｂトリクロロエチルエステル１００mg（０.２２１mmol）とＮ−ＢＯＣ−ロイシン８２mg（０.３３２mmol）を含む溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）６８mg（０.３３２mmol）とＮ，Ｎ−４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）５mgを加えた。反応物を２５℃で３０分間撹拌した後、酢酸エチル５０mLで希釈した。有機溶液を０.５ＮのＨＣｌおよび飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。粗製物を２５％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液として用いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。主画分を減圧濃縮して、白色の非晶質の固体１１０mg（６２％）を得、これは２と特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ８０２（Ｍ⁺）。塩化メチレン２mL中に９２ｍｇ（０.１１５mmol)の２を含む溶液に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２mLを加えた。反応物を２５℃で１時間撹拌し、減圧濃縮して対応するＴＦＡ塩１００mgを得、これをさらに精製することなく使用した。５０％ＴＨＦ−ＤＭＦ１０mL中にＮ−ＢＯＣ−２,２−ジメチル−ｂ−アラニン５３mg（０.２４４mmol）を含む溶液に、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯBt）４１mg（０.３０５mmol）と１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）５２mg（０.２４４mmol）を加えた。反応物を２５℃で１５分間撹拌した後、ＤＭＦ５mL中にそのＴＦＡ塩およびＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）２０mL（０.１８３mmol）を含む溶液を加えた。反応物を２５℃で１５時間撹拌し、酢酸エチル１００mLで希釈し、有機溶液を０. ５ＮＨClで２回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回およびブラインで２回洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して白色の非晶質の固体１０５mg（９５％）を得、これは３aと特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ９０１（Ｍ⁺）。３aの製造方法にしたがって３bを製造した。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ８７３（Ｍ⁺）。ＣＨ₂Cl₂２mL中の１０５mg（０.１１６mmol）の３aの溶液に、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２mLを加えた。反応物を２５℃で３０分間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２５mLに注いだ。さらにＣＨ₂Cl₂２５mLを加え、有機相を１ＮＮaＯＨで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。この粗製物をトルエン１０mLに溶解し、２５℃で撹拌しながら２−ヒドロキシピリジン（０.１１６mmol）を加えた。反応物を２５℃で１８時間撹拌した。反応物を酢酸エチル５０mLで希釈し、有機相を１ＮＨClで２回、ブラインで２回、そして飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回洗浄した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。粗製物を、５０％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液として用いるシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。主画分を減圧濃縮して白色の非晶質の固体２７mg（３６％）を得、これは４aと特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ６５１（Ｍ⁺）。４aの製造方法にしたがって４bを製造した。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ６２３（Ｍ⁺）。ＣＨ₂Cl₂５ｍＬ中に４a２０mg（０.０３１mmol）を含む溶液に、ｍ−クロロペル安息香酸（ｍＣＰＢＡ）６.３mg（０.０３７mmol）を加えた。反応物を２５℃ で撹拌し、ＨＰＬＣ（逆相、Ｃ１８、７０％アセトニトリル−水）により監視した。約５時間後に反応は遅くなり、ｍＣＰＢＡ５mgをさらに加えた。反応物を２５℃で撹拌し、さらに１２時間後に反応は完結した。反応物を２５mLのＣＨ₂Cl₂ で希釈し、飽和メタ−硫酸ナトリウム溶液で２回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で２回洗浄した。有機層を乾燥し、減圧濃縮して白色の非晶質の固体１８mg（８５％）を得、これは５aで示されるジアステレオマーエポキシドの２：１混合物と特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ６６７（Ｍ⁺）。５aの製造方法にしたがって５bを製造した。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ６３９（Ｍ⁺）。クロロホルム２mL中に５a５０mg（０.０７５mmol）を含む溶液を−６０℃に冷却し、クロロトリメチルシラン（ＴＭＳCl）４７mL（０.３７５mmol）を加えた。反応物を２５℃に加温し、水２０mLに注いだ。クロロホルム２０mLをさらに加え、有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮してクロロヒドリンの混合物を得た。クロロヒドリンの主生成物を、酢酸エチルを溶出液として用いるシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。主画分を減圧濃縮して白色の非晶質の固体１９ｍｇ（５４％）を得、これは６と特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ７０４（Ｍ⁺）。２mLの５０％アセトニトリル：水中の５.０mg（０.００７１mmol）の６の溶液に、炭酸ナトリウム２mgを加えた。反応物を２５℃で１時間撹拌した後、酢酸エチル１０mLで希釈した。有機溶液を水で１回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して、白色の非晶質の固体４.０mg（８５％）を得、これは純粋なエポキシド７と特徴付けられた。質量分析（ＦＤ⁺）ｍ／ｅ６６７（Ｍ⁺）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者ノーマン，ブライアン・エイチアメリカ合衆国46236インディアナ州インディアナポリス、アドミラルズ・ベイ・ドライブ8648番 (72)発明者シー，チュアンアメリカ合衆国46033インディアナ州カーメル、ペブルポイント・パス12532番

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）：［式中、 Arは、フェニル、または任意の単純な置換されていないもしくは置換された芳香族、またはヘテロ芳香族基であり；Ｒ¹はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェートまたはホスフェートであり；Ｒ²はＯＨまたはＳＨであるか；またはＲ¹およびＲ²は一緒になって３員のエポキシド環、アジリジン環、エピスルフィド環、スルフェート環またはモノアルキルホスフェート環を形成してよく；あるいはＲ¹およびＲ²は一緒になってＣ₁₈とＣ₁₉との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ³は低級アルキル基であり；Ｒ⁴はＨであり；Ｒ⁵はＨであり；Ｒ⁴およびＲ⁵は一緒になってＣ₁₃とＣ₁₄との間に第２の結合を形成してよく；Ｒ⁶はベンジル、ヒドロキシベンジル、アルコキシベンジル、ハロヒドロキシベンジル、ジハロヒドロキシベンジル、ハロアルコキシベンジル、またはジハロアルコキシベンジル基であり；Ｒ⁷はＨまたは低級アルキル基であり；Ｒ⁸はＨまたは低級アルキル基であり；またはＲ⁷およびＲ⁸は、場合により、一緒になってシクロプロピル環を形成してよく；Ｒ⁹はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；Ｒ¹⁰はＨ、低級アルキル基、（Ｃ₁−Ｃ₃）アルキルアリール、およびアリールからなる群から選択され；Ｒ¹¹は、水素、単純アルキル、フェニル、置換されたフェニル、ベンジル、および置換されたベンジルからなる群から選択され；ＸはＯ、ＮＨ、またはアルキルアミノである］で示される化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物。２．Ｒ¹¹が水素である、請求項１に記載の化合物。３．ＸがＯである、請求項２に記載の化合物。４．Ｒ⁶が、式で示される基である、請求項３に記載の化合物。５．Ｒ⁸およびＲ⁷がそれぞれメチルである、請求項４に記載の化合物。６．Ｒ⁹がイソブチルでありＲ¹⁰が水素である、請求項５に記載の化合物。７．Ｒ¹およびＲ²がエポキシド基を形成する、請求項６に記載の化合物。８．Ｒ¹がClでありＲ²がＯＨである、請求項６に記載の化合物。９．ＸがＯである、請求項１に記載の化合物。１０．Ｒ⁶が、式で示される基である、請求項９に記載の化合物。１１．Ｒ⁸およびＲ⁷がそれぞれメチルである、請求項１０に記載の化合物。１２．Ｒ⁹がイソブチルでありＲ¹⁰が水素である、請求項１１に記載の化合物。１３．Ｒ¹¹がＣ₁−Ｃ₄アルキルである、請求項１２に記載の化合物。１４．Ｒ¹¹がベンジルである、請求項１２に記載の化合物。１５．Ｒ¹およびＲ²がエポキシド基を形成する、請求項１４に記載の化合物。１６．Ｒ¹がClでありＲ²がＯＨである、請求項１４に記載の化合物。１７．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することを含んでなる、哺乳類において微小管結合を破壊する方法。１８．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することを含んでなる、イン・ビトロで微小管結合を破壊する方法。１９．有効量の請求項１に記載の化合物を、その処置を必要とする患者に投与することを含んでなる、哺乳類において新生物を処置する方法。２０．請求項１に記載の化合物と、その製剤のための１またはそれ以上の薬学的に許容し得る希釈剤または担体を含有する製剤。２１．医薬品としてし様するための、請求項１記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩。２２．請求項１記載の化合物またはその薬学的に許容し得る塩を活性成分として、その製剤のための１またはそれ以上の希釈剤または担体と共に含む医薬製剤。