JP2001507221A - 新規エンドグルカナーゼ - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.85℃を超える温度において最適活性を有するエンド−1,4−β−グルカ ナーゼ活性を有する酵素製剤。 2.前記温度が、90℃を超える、好ましくは95℃を超える、より好ましくは10 0℃を超える温度である、請求項1に記載の製剤。 3.前記酵素製剤が、グラム陽性バクテリア門に属する株から得られることが でき又はそれに対して内因性のものである、請求項1又は2に記載の製剤。 4.前記株が、亜部門クロストリジウムに属する、請求項3に記載の製剤。 5.前記株が、ジクチオグロムス属に属し、好ましくは、ジクチオグロムス種 DSM 6262である、請求項4に記載の製剤。 6.約4と約11の間の、好ましくは、約5.5と約10の間のpHにおいて活性であ る、請求項1〜5のいずれか1項に記載の製剤。 7.70℃及びpH10におけるカルボキシメチルセルロースに対する活性(CMCアッ セイ)は、70℃及び最適pHにおける活性に対して、50%高い、エンドグルカナー ゼ活性を有する酵素製剤。 8.前記比活性は、55%より高い、好ましくは60%より高い、より好ましくは 65%より高い、特に70%より高い、請求項7に記載の製剤。 9.前記酵素製剤が、グラム陽性バクテリア門に属する株から得られることが でき、又はそれに対し内因性であるものである、請求項7又は8に記載の製剤。 10.前記株が、亜部門クロストリジウムに属する、請求項9に記載の製剤。 11.前記株が、ジクチオグロムス属に属し、好ましくはジクチオ グロムス種DSM 6262の種である、請求項10に記載の製剤。 12.エンドグルカナーゼ活性を有し、かつ、85℃を超える、好ましくは90℃を 超える、より好ましくは100℃を超える最適活性を有する酵素をコードするDNA配 列を含むDNA構築物であって、そのDNA配列が、 a)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列、又は b)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列のアナログを 含み、それが、 i)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列に、相同であ り、好ましくは少なくとも60%相同であり、又は ii)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列と同一のオリ ゴヌクレオチド・プローブとハイブリダイズし、又は iii)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるD NA配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列を含むDNA配 列によりコードされたポリペプチドに、相同であり、好ましくは少なくとも60% 相同である、ポリペプチドをコードし、又は iv)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列によりコード された精製されたエンドグルカナーゼ に対して作られた抗体と、免疫学的に反応性であるポリペプチドをコードする、 前記DNA構築物。 13.前記DNA配列が、原核生物又は古細菌、好ましくはバクテリアからのDNAラ イブラリーから単離され、又はそれに基づき製造される、請求項12に記載のDNA 構築物。 14.前記DNA配列が、グラム陽性バクテリア門、好ましくは亜部門クロストリ ジウムに属する株、特にジクチオブロムスの株、特に、ジクチオグロムス種DSM 6262からのDNAライブラリーから単離され、又はそれに基づき製造される、請求 項13に記載のDNA構築物。 15.前記DNA配列が、Escherichia coli,DSM 11201から単離される、請求項12 〜14のいずれか1項に記載のDNA構築物。 16.セルロース結合性ドメイン(CBD)をコードするDNA配列をさらに含む、請求 項12〜15のいずれか1項に記載のDNA構築物。 17.セルロース結合性ドメイン(CBD)をコードするDNA配列をさらに含み、その セルロース結合性ドメインと、そのDNA構築物のDNA配列によりコードされた酵素 の酵素コア(触媒活性ドメイン)が作用可能な状態で連結されている、請求項16 に記載のDNA構築物。 18.請求項12〜17のいずれか1項に記載のDNA構築物を含む組換え発現ベクタ ー。 19.請求項12〜17のいずれか1項に記載のDNA構築物又は請求項18に記載の組 換え発現ベクターを含む細胞。 20.原核生物細胞、特にバクテリア細胞、又はエンドグルカナーゼ活性を示す 酵素をコードするDNA配列に起源をもつところの同種細胞である、請求項19に記 載の細胞。 21.前記細胞が、バチルスの株、好ましくは、バチルス・サブチリス、バチル ス・レンタス、バチルス・リクエファシエンス、及び バチルス・リケニフォルミスから成る群に属する株に属する、請求項20に記載の 細胞。 22.前記細胞が、糸状菌の株、好ましくは、アスペルギルス、フザリウム、及 びトリコデルマ属から成る群に属する株、より好ましくは、アスペルギルス・ニ ガー、アスペルギルス・オリザエ、フザリウム・グラミネララム、及びトリコデ ルマ・レーセイ種から成る群に属する群に属する、請求項20に記載の細胞。 23.前記細胞が、ジクチオグロムスの株、好ましくはジクチオグロムス種DSM 6262に属する、請求項20に記載の細胞。 24.前記細胞が、サッカロミセスの株、好ましくは、サッカロミセス・セレビ シエの株に属する、請求項19に記載の細胞。 25.エンドグルカナーゼ活性を有し、かつ85℃を超える、好ましくは90℃を超 える、より好ましくは100℃を超える最適活性を有する酵素の製法であって、そ の酵素の製造を許容する条件下、請求項19〜24のいずれか1項に記載の細胞を培 養し、そしてその培養物からその酵素を回収することを含む、前記製法。 26.エンドグルカナーゼ活性を有する単離された酵素であって、その酵素が、 (i)同種不純物を含まず、そして(ii)請求項25に記載の方法により製造され ている、前記酵素。 27.エンドグルカナーゼ活性を有し、かつ、85℃を超える、好ましくは90℃を 超える、より好ましくは100℃を超える最適活性を有する酵素であって、その酵 素が、 a)請求項12〜17のいずれか1項に記載のDNA構築物によりコードされ、又は b)請求項25に記載の方法により製造され、又は c)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分によ りコードされることができる、ジクチオグロムス種DSM 6262により製造されるポ リペプチドであり、又は d)Escherichia coli DSM 11201内のプラスミドから得られることができるDN A配列のエンドグルカナーゼ・コーディング部分に対応するDNA配列によりコード された精製エンドグルカナーゼに対して作られた抗体と免疫学的に反応性である 、前記酵素。 28.請求項26又は27に記載の酵素に富む、酵素製剤。 29.マンナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、アラビナナーゼ、ペクチン ・アセチル・エステラーゼ、ポリガラクツロナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、 ペクチン・リアーゼ、ペクテート・リアーゼ、ペクチン・メチルエステラーゼ、 エンドグルカナーゼ、プロテアーゼ、リパーゼ、アミラーゼ、クチナーゼ、ペル オキシダーゼ、ラッカーゼ、セロビオヒドロラーゼ、及びトランスブルタミナー ゼから成る群から選ばれた1以上の酵素をさらに含む、請求項1〜11、及び28の 中のいずれか1項に記載の製剤。 30.Escherichia coli,DSM 11201株の単離された実質的に純粋な生物学的培 養物。 31.セルロース繊維又は布ふくの特性を改良するための又はデニムのストーン ・ウォッシュ外観を提供するための繊維産業における;又は工業的洗浄プロセス における;又は加熱押出しポリマー材料中での;又はバイオマスから糖への変換 における;又はアルコールの製造における;又は飼料製造において使用される、 例えば穀類の事前消化のための;又はインスタント・コーヒーの製造又は同様の 抽出プロセスにおける、請求項26又は27に記載の酵素又は請求項1〜11,28、及 び29のいずれか1項に記載の酵素製剤の使用。
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