JP2001314172A - 免疫賦活化組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 腸管上皮におけるサイトカイン産生を亢進す
ることにより、腸管免疫系の機能低下の改善、予防、あ
るいは免疫賦活化が期待できる核酸組成物を提供するこ
とを課題とする。 【解決手段】 核酸組成物の経口摂取により、ＩＥＬに
おけるαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのサブセット構成比率
において、γδ-ＩＥＬの発現比率が高められる方向に
シフトすること、また、核酸組成物の経口摂取により、
小腸上皮において、ＩＦＮ-γ、ＩＬ-２、ＩＬ-７、お
よびＴＧＦ-βの産生が亢進すること、さらにまた、核
酸組成物の経口摂取により、抗原特異的分泌型ＩｇＡ抗
体産生が誘導されることを見出した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明が属する技術分野】本発明は、核酸組成物を有効
成分として含む免疫賦活作用を有する飲食品および該飲
食品の製造のための核酸組成物の使用に関する。

【０００２】

【従来の技術】腸管は、食物を消化吸収し必要な栄養素
やエネルギーを得る消化器官であるとともに、有益な食
物成分に対する免疫応答を可能な限り抑制する一方で、
有害な病原微生物や各種トキシンに対しては免疫防御応
答を速やかに惹起する第一級の免疫器官でもある。

【０００３】腸管の免疫器官を総称して腸管関連リンパ
組織（gut-associated lymphoid tissue : ＧＡＬＴ）
という。ＧＡＬＴは、パイエル板、腸間膜リンパ球、粘
膜固有層、および腸管上皮細胞からなり、たがいに協調
的に働いている。この中で、抗原の侵入ルートとして特
に重要と考えられるのがパイエル板と腸管上皮である。

【０００４】腸管免疫系において、有害な病原微生物や
毒素などに対する防御機構として代表的ものがＩｇＡ抗
体産生を主体とした局所免疫応答であり、有益な食品を
受け入れる機構の代表的なものが経口免疫寛容である。

【０００５】ＩｇＡ抗体は、病原菌の腸管粘膜からの侵
入阻止、毒素の中和、アレルゲンの侵入阻止などの働き
をしている。これらの抗原はパイエル板から取り込ま
れ、抗原特異的なＴ細胞の作用により、Ｂ細胞がＩｇＡ
抗体産生細胞に分化し、さらにＢ細胞が粘膜固有層に移
動してＩｇＡ抗体分泌細胞に分化する。

【０００６】一方、もう一つの抗原侵入ルートとして考
えられている腸管上皮は、腸管上皮細胞（intestinal e
pithelial cells : ＩＥＣ）とその間に埋め込まれた形
で存在する巨大なＴ細胞集団である腸管上皮内リンパ球
（intraepithelial lymphocytes : ＩＥＬ）からなる。
ＩＥＬはそのほとんどがＴ細胞である。Ｔ細胞が抗原を
認識する分子すなわちＴＣＲ分子は、α鎖とβ鎖からな
るαβＴＣＲとγ鎖とδ鎖からなるγδＴＣＲの２種類
がある。ＩＥＬのＴ細胞は、パイエル板や粘膜固有層を
構成する細胞とは大きく性質が異なっている。その多く
は胸腺には依存せず、腸管独自の選択を受けていると推
測され、末梢にはほとんど存在しないγδＴＣＲ（γδ
-ＩＥＬ）やＣＤ８ααホモダイマーを発現しているの
が多数存在する。現在ＩＥＬが認識している抗原、機能
についてはほとんど明らかにされていない。しかしなが
ら、腸管免疫応答において最前線に存在する小腸上皮
が、局所的ＩｇＡ抗体産生誘導や経口免疫寛容など特徴
的な腸管免疫応答において重要な役割を担っていること
は容易に考えられる。そこで、ＧＡＬＴについて、小腸
上皮を構成する上皮細胞とＩＥＬとの間のサイトカイン
とそのレセプターを介した粘膜細胞間の相互作用につい
て活発な研究がなされてきている。

【０００７】例えば、γδ-ＩＥＬはケラチノサイト成
長因子（keratinocyte growth factor : ＫＧＦ）を産
生し、上皮細胞の成長、増殖をコントロールしている
（Boismenu, R. and Havran, W. L.: Sience, 266: 125
3, 1994）、ＴＣＲδ^-/-マウスでは、上皮細胞の発達が
低下している（Komano, H.: et al.: Proc. Natl. Aca
d.Sci., 92: 6147-6151, 1995）、逆に上皮細胞が分泌
するインターロイキン７（ＩＬ-７）が、γδ-ＩＥＬの
成長、活性化因子として深く関与している（Fujihashi,
K.: et al.: Proc. Natl. Acad. Sci., 93: 3613, 199
6）、ＩＬ-７やＩＬ-７レセプター特異的遺伝子が欠落
しているマウスでは、これら粘膜系γδ-ＩＥＬの発達
の低下や欠損が認められる、マウスの上皮細胞は、幹細
胞成長因子（stem cell factor : ＳＣＦ）を産生し、
このＳＣＦはγδ-ＩＥＬの増殖と分化に深く関わって
いる（Puddington, L. et al.: Immunity 1: 733, 199
4）、ＩＬ-２とＩＬ-７によりγδ-ＩＥＬが相乗的に増
殖する（Fujihashi, K. et al.: Proc. Naqtl. Acad. S
ci., 93: 3613, 1996）、上皮細胞の産生するＴＧＦ-β
がＩｇＡへのクラススイッチ因子としてＩｇ遺伝子のμ
鎖からα鎖への遺伝子変換を促すシグナルを提供する
（Sonoda, E. et al.: J. Exp. Med., 170: 1415, 198
9）、などの報告がある。

【０００８】したがって、小腸上皮におけるサイトカイ
ン産生亢進をとおして、腸管免疫系の免疫機能を増強す
ることが考えられる。そしてこのようなサイトカイン産
生亢進作用を有する経口性組成物は、腸管免疫系の機能
低下の予防、改善、あるいは免疫活性の賦活化に有用で
あると考えられる。これまで、経口経腸的な核酸投与、
あるいは経静脈的な核酸成分投与が免疫能に及ぼす効果
についての報告（宇佐美 眞・他：化学と生物. 36(10)
: 620, 1998）はあるが、核酸成分の経口摂取が腸管上
皮におけるサイトカイン産生に及ぼす効果についての報
告は見当たらない。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、腸管上皮に
おけるサイトカイン産生を亢進することにより、腸管免
疫系の機能低下の改善、予防、あるいは免疫賦活化が期
待できる核酸組成物を提供することを課題とする。さら
に本発明は該核酸組成物の有効量を含有する経口性組成
物を提供することを課題とする。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究した結果、核酸組成物の経口
摂取により、ＩＥＬにおけるαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬ
のサブセット構成比率において、γδ-ＩＥＬの発現比
率が高められる方向にシフトすることを見出した。ま
た、核酸組成物の経口摂取により、小腸上皮において、
ＩＦＮ-γ、ＩＬ-２、ＩＬ-７、およびＴＧＦ-βの産生
が亢進することを見出した。さらにまた、核酸組成物の
経口摂取により、抗原特異的分泌型ＩｇＡ抗体産生が誘
導されることを見出した。

【００１１】すなわち、本発明は、（１） 核酸組成物
を有効成分として含む免疫賦活作用を有する飲食品、
（２） 核酸組成物が、高分子核酸、ポリヌクレオチ
ド、ヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸塩基からなる群
から選ばれる核酸組成物である（１）の飲食品、（３）
核酸組成物が、ヌクレオチドおよびヌクレオシドの混
合物である（１）または（２）の飲食品、（４） ヌク
レオチドが、シチジル酸、グアニル酸、アデニル、ウリ
ジル酸、およびイノシン酸の少なくとも１つ、または２
つ以上を含む（３）の飲食品、（５） ヌクレオシド
が、シチジン、グアノシン、アデノシン５、ウリジン、
およびイノシンの少なくとも１つ、または２つ以上を含
む（３）の飲食品、（６） 免疫賦活作用が、腸管免疫
系における腸管上皮細胞間Ｔリンパ球（ＩＥＬ）のαβ
-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのサブセット構成比を、γδ-Ｉ
ＥＬを高める方向にシフトする（１）の飲食品、（７）
免疫賦活作用が腸管上皮におけるＩＦＮ-γ、ＩＬ-
２、ＩＬ-７、およびＴＧＦ-βの産生亢進である（１）
の飲食品、（８） 免疫賦活作用がマクロファージおよ
び脾細胞におけるＩＬ-１２の産生亢進である（１）の
飲食品、（９） 免疫賦活作用が細胞性免疫増強で
（６）〜（８）のいずれかの飲食品、（１０） 免疫賦
活作用が整腸作用、抗腫瘍作用、抗変異作用、血圧低下
作用、抗潰瘍作用、脂質代謝改善作用である（１）また
は（６）〜（８）のいずれかの飲食品、（１１） 食
品、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用
食品、経腸栄養食品、経腸栄養剤、医薬品部外品からな
る群から選ばれる（１）〜（１１）のいずれかの飲食
品、（１２） （１１）の飲食品を製造するための核酸
組成物の使用、に関する。以下本発明を詳細に説明す
る。

【００１２】

【発明の実施の形態】Ｔ細胞はサイトカインの分泌によ
り機能を発揮する。タンパク質抗原を経口投与し、Ｔ細
胞応答を誘導し、産生されるサイトカインや抗体産生ヘ
ルパー機能などを解析する場合、免疫能増強のためアジ
ュバントを共に投与するのが通常である。この場合、ア
ジュバントの影響を否定できない。タンパク質抗原の経
口投与に対するＴ細胞応答は、アジュバントなしで投与
した場合に相当する。最近、アジュバントを用いずにタ
ンパク質抗原を経口投与した場合の弱いＴ細胞応答を、
ＴＣＲ遺伝子を導入したＴＣＲ-トランスジェニック
（ＴＣＲ-Ｔｇ）マウスを用いることにより解析するこ
とが可能となった。通常のマウスでは、抗原特異的Ｔ細
胞の頻度が極めて低く、解析が困難であるのに対し、Ｔ
ＣＲ-Ｔｇマウスでは、単一の抗原を認識するＴ細胞の
頻度が極めて高い。そこで本発明者らは、通常のマウス
の他に、卵白アルブミン（ＯＶＡ）を認識するＴＣＲを
発現するＴＣＲ-Ｔｇマウス（ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウ
ス）を用い、核酸の経口摂取が腸管免疫系におけるＴ細
胞応答に及ぼす影響を調べた。

【００１３】以下本発明を試験例に基づき説明するが、
本発明は、これらの試験例に限定されるものではなく、
当業者であるならば、本試験例に基づいて導き出される
本発明のさらなる技術の広がりをも当然含まれる。

【００１４】１） 核酸の経口摂取がＩＥＬにおけるＴ
細胞サブセット構成に及ぼす影響 マウスの腸管に存在するＩＥＬの８０〜９０％はＣＤ３
⁺Ｔ細胞であり（これは、他の生体部位に分布するＴ細
胞の半数以上がＣＤ４⁺Ｔ細胞であることを考えると際
だった特徴である）、γδ-ＩＥＬが末梢血リンパ球と
比較して非常に多く、約半数を占める。抗ＣＤ４抗体お
よび抗ＣＤ８抗体を用いてＣＤ３⁺Ｔ細胞を染色する
と、１）ＣＤ４^-ＣＤ８⁺群（ＣＤ８⁺）、２）ＣＤ４⁺Ｃ
Ｄ８⁺群、３）ＣＤ４^-ＣＤ８^-群、および４）ＣＤ４⁺Ｃ
Ｄ８^-群（ＣＤ４⁺）の４つのサブセットに分類できる。
また、この４つのサブセット群においてαβ-ＩＥＬは
ＣＤ４⁺群、ＣＤ８⁺群、ＣＤ４⁺ＣＤ８⁺群に存在し、γ
δ-ＩＥＬはＣＤ４^-ＣＤ８ ⁺群、ＣＤ４^-ＣＤ８^-群のみ
に認められる。マウスＩＥＬにおけるＴ細胞サブセット
の全体像を把握しやすいように表１に示した。

【００１５】

【表１】

【００１６】核酸を添加した食餌を、通常のマウスに２
週間自由に経口摂取させた後、ＩＥＬにおけるＴＣＲサ
ブセット構成を、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）で
解析した。

【００１７】核酸摂取群におけるαβ-ＩＥＬの発現率
（％）は、核酸非摂取群（対照群）のそれよりも有意
（ｐ＜０．０５）に低くなり、逆にγδ-ＩＥＬの発現
率は、対照群のそれよりも有意（ｐ＜０．０５）に高く
なった（図１）。これを、核酸摂取群におけるαβ-Ｉ
ＥＬ/γδ-ＩＥＬの発現比、対照群におけるαβ-ＩＥ
Ｌ/γδ-ＩＥＬの発現比で比較すると、核酸摂取群の方
が対照群よりも有意（ｐ＜０．０５）に低下した（図
２）。これらの結果は、核酸を添加した食餌を経口摂取
すると、ＩＥＬにおけるαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬの構
成比が、γδ-ＩＥＬが高められる方法にシフトするこ
とを示している。

【００１８】さらに、αβ-ＩＥＬおよびγδ-ＩＥＬの
それぞれにおけるＣＤ４とＣＤ８の発現比率をＦＡＣＳ
で個体別に解析した。

【００１９】αβ-ＩＥＬにおける核酸摂取群のＣＤ８
αα⁺の発現率（％）が、対照群のそれよりも有意（ｐ
＜０．０５）に低くなったのに対し、γδ-ＩＥＬにお
ける核酸摂取群のＣＤ８αα⁺の発現比率（％）は、対
照群のそれよりも有意（ｐ＜０．０５）に高くなった
（図３）。

【００２０】データは示さないが、核酸摂取群と対照群
との間で、αβ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αβ⁺の発現比率
には差は認められなかったこと、ＣＤ４⁺、ＣＤ４⁺ＣＤ
８⁺、の発現比率は、核酸摂取群と対照群で変わらなか
ったこと、γδ-ＩＥＬにおけるＣＤ４^-ＣＤ８^-は、核
酸摂取群で僅かに増加したが、対照群と有意差はなかっ
たことから、核酸摂取群において、αβ-ＩＥＬにおけ
るＣＤ８αα⁺の構成比率が低くなり、γδ-ＩＥＬにお
けるＣＤ８αα⁺の構成比率が高くなることと、αβ-Ｉ
ＥＬとγδ-ＩＥＬの構成比率が、γδ-ＩＥＬの発現比
率が高められる方向にシフトすることとは相関している
ことを示していると考えられる。したがって、核酸の経
口摂取は、胸腺外でのγδ-ＩＥＬ発達・分化を促進す
ると考えられる。

【００２１】さらに、タンパク質抗原の経口摂取が、Ｉ
ＥＬにおけるＴＣＲサブセットの発現、およびＣＤ４と
ＣＤ８発現に及ぼす影響を、主要な食物アレルゲンであ
る卵白アルブミン（ＯＶＡ）に特異的なＴ細胞抗原レセ
プター（ＴＣＲ）をもつトランスジェニックマウス（Ｏ
ＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇ）で調べた。

【００２２】核酸を含む食餌とともにＯＶＡ含む水を自
由に摂取したＯＶＡ-ＴＣＲ ＴｇマウスからＩＥＬを調
製し、ＴＣＲサブセット構成、およびαβ-ＩＥＬとγ
δ-ＩＥＬにおけるそれぞれのＣＤ４とＣＤ８サブセッ
ト発現を、ＦＡＣＳで個体別に解析した。

【００２３】経口抗原存在下でも、αβ-ＩＥＬとγδ-
ＩＥＬの構成比は、核酸の経口摂取により、γδ-ＩＥ
Ｌが高められる方向に有意（ｐ＜０.０５）にシフトし
た（図４）。ＣＤ８αα⁺の発現率（％）についても、
γδ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αα ⁺の発現率は、対照群の
それよりも有意（ｐ＜０．０５）に高くなった（図
５）。しかしながら、核酸摂取群、対照群ともにαβ-
ＩＥＬの発現比率が、通常マウスの場合に比較して著明
に増加した（図１と４参照）。

【００２４】一方、八村らは、ＯＶＡを経口摂取したＯ
ＶＡＴＣＲ-Ｔｇマウスでは、ＯＶＡ特異的ＣＤ４⁺-Ｉ
ＥＬが増殖し、ＩＥＬ全体に占める割合が増加すること
を明らかにしている（八村敏志・他：日本農芸化学会
誌, 73(5): 523-527, 1999）。

【００２５】２） 核酸の経口摂取が腸管上皮における
サイトカイン産生に及ぼす影響 核酸を添加した食餌とともにＯＶＡを含む水を自由に摂
取したＯＶＡ-ＴＣＲＴｇマウスから調製したＩＥＬ
と、未感作のＢＡＬＢ/ｃマウスから調製しマイシンＣ
処理した脾細胞（抗原提示細胞）とを、ＯＶＡの存在
下、あるいは非存在下で共培養すると、核酸摂取群にお
いて、ＯＶＡ特異的ＩＦＮ-γおよびＩＬ-２の産生増強
が観察された（図６および７）。

【００２６】これは、核酸の経口摂取は、ＩＥＬ中の抗
原特異的なＴｈ１タイプの細胞の増殖応答を誘導するこ
とを示していると考えられる。

【００２７】核酸の経口摂取はマウスの小腸上皮細胞の
ＩＬ-７産生を有意（ｐ＜０．０１）に増強する（図
８）。

【００２８】また、核酸を添加した食餌とともにＯＶＡ
を含む水を自由に摂取したＯＶＡ-Ｔｇマウスの小腸上
皮細胞のＩＬ-７産生およびＴＧＦ-β産生は、核酸摂取
により有意（ｐ＜０．０１）に増強した（図９および１
０）。

【００２９】３） 核酸の経口摂取が抗原特異的ＩｇＡ
抗体産生に及ぼす影響

【００３０】核酸の経口摂取は、腸管における抗原特異
的ＩｇＡ抗体の産生を対照群に比較して有意（ｐ＜０．
０５）に増強した（図１１）。

【００３１】ヌクレオチドをマウスに経口摂取させ、脾
臓細胞や腹腔マクロファージのp70型のＩＬ-１２に与え
る影響を、生物学的測定法（Bioassay法）で検討した。
また、in vitroでヌクレオチドとともにマクロファージ
を培養し、その上清中のＩＬ-１２活性をBioassay法で
測定した。腹腔マクロファージのＩＬ-１２活性は、Ｌ
ＰＳ刺激下でヌクレオチド投与群の方がヌクレオチド非
投与群に比べて有意に高くなった（図１２）。また、in
vitroでヌクレオチドとともに腹腔マクロファージを培
養した場合のＩＬ-１２活性は、ヌクレオチドを添加し
ていない場合に比べて、有意差は見られないものの高く
なる傾向が見られた（図１３）。

【００３２】脾臓リンパ細胞のＩＬ-１２活性は、ヌク
レオチド投与群の方がヌクレオチド非投与群に比べて有
意に高くなった（図１４）。

【００３３】以上のことから、核酸組成物の経口摂取
は、マクロファージなどによるＩＬ-１２産生を促進
し、ＩＬ-１２はナイーブＴ細胞からＴｈ１細胞への分
化の促進、抹消血からＩＦＮ-γ産生を誘導することか
ら、生体内でのＴｈ１／Ｔｈ２バランスをＴｈ１優位に
シフトすることが期待される。その結果、Ｔｈ１／Ｔｈ
２バランスが波綻し、Ｔｈ２優位に変異すること起因す
る疾患、例えば、アレルギー疾患や自己免疫疾患に対し
て、核酸組成物を含む飲食品を日常の食生活のなかで摂
取することにより、その予防、改善あるいは治療が期待
できる。

【００３４】また、ＩＬ-１２は、静止期のＴ細胞およ
びＮＫ細胞からのＩＦＮ-γの産生誘導、ＮＫ細胞活性
の亢進、ＬＡＫ細胞活性の誘導、静止期Ｔ細胞のレクチ
ン刺激による細胞増殖亢進などが知られており、核酸組
成物を含む飲食品を日常の食生活のなかで摂取すること
により、生体内での微生物および腫瘍細胞に対する排除
能を高め、ＩＦＮ-γの産生増強をとおしてウイルスや
腫瘍細胞に対する防御能を高めることが期待される。

【００３５】これらの結果から、核酸の経口摂取は、
１）ＩＥＬにおけるＴ細胞のαβ-ＩＥＬサブセットと
γδ-ＩＥＬサブセットの構成比がγδ-ＩＥＬ優位に高
められ、それは、γδ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αα⁺の比
率の増加と、αβ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αα⁺の比率の
減少と相関しており、２）ＩＥＬにおいて、抗原特異的
ＩＬ-２およびＩＦＮ-γの産生を促進し、３）腸管上皮
細胞におけるＩＬ-７およびＴＧＦ-βの産生を促進し、
４）抗原特異的ＩｇＡ抗体産生を誘導する、５）ＩＬ-
１２産生を増強することが示された。

【００３６】一方、本発明者らは、ヌクレオチドを含む
食餌を経口摂取したマウスは、１）パイエル板Ｔリンパ
球のマイトジェン刺激に対する増殖応答能およびＩｇＡ
産生能が、ストレス下（絶食）で促進されること、２）
血清中のＩｇＥ産生が抑制されること、３）ＩｇＧ１／
ＩｇＧ２aが低下すること、４）脾細胞のＩＦＮ-γの産
生が促進され、ＩＬ-４産生が抑制されること、を示し
た（特開平9-323979）。さらにその後、本発明者らは、
ヌクレオチドを含む食餌を経口摂取したマウスの血清中
では、１）カゼイン特異的ＩｇＧ１は変化なかったが、
ＩｇＧ２aは高まったこと、２）卵白アルブミン（ＯＶ
Ａ）特異的ＩｇＧ１は変化なかったが、ＩｇＧ２aは高
くなり、またＯＶＡ特異的ＩｇＥは低下したこと、３）
血清中の全ＩｇＥが低くなったこと、を示した（特開平
11-35468）。

【００３７】一方、γδ-ＩＥＬはＫＧＦを産生し小腸
上皮細胞の成長、増殖を制御している（Boismenu, R. &
Havran, W.L.: Science, 266: 1253, 1994; Komano,
H. etal.: Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 92: 6147, 1
995）、分泌型ＩｇＡ産生を促進する（Fujihashi, K. e
t al.: J. Exp. Med., 183: 1929, 1996）、経口免疫寛
容の誘導に必要である（Ke, Y. et al.: J. Immunol.,
158: 3610-3618, 1997）、などから、ＩＥＬにおけるγ
δ-ＩＥＬの発現が高まる方向へシフトは、腸管免疫系
の賦活化に重要であると考えられる。

【００３８】また、Ｔｈ１細胞の産生するＩＦＮ-γ
は、上皮細胞の基底膜側に発現している分泌成分（sere
ctory component: ＳＣ）産生に深く関与している（Tag
uchi,T. et al.: J. Immunol., 3736, 1991）。このＳ
ＣとＩｇＡ形質細胞が産生する２量体のＩｇＡは結合し
て分泌型ＩｇＡを形成する。

【００３９】また、上皮細胞のＩＬ-７は、γδ-ＩＥＬ
のＩＬ-７レセプター（ＩＬ-７Ｒ）を介してγδ-ＩＥ
Ｌの分化・増殖に重要な役割を果たす（Fujihashi, K.
et al.: Eur. J. Immunol., 27: 2133, 1997）。さら
に、ＩＬ-２とＩＬ-７は胸腺由来のγδ-ＩＥＬやαβ-
ＩＥＬに対して活性化因子として働いている（Okazaki,
et al.: J. Immunol., 143: 2917, 1989）。

【００４０】また、ＴＧＦ-βは、免疫抑制性のサイト
カインとして知られており、これを分泌するＴ細胞は経
口免疫寛容における調節性Ｔ細胞として、免疫応答を抑
制していることが示唆されている（八村敏志・他：日本
農芸化学会誌, 73(5): 523-527, 1999）。また、ＴＧＦ
-βは、ＩｇＡへのクラススイッチを行うことが知られ
ており（Sonoda, E. et al.: J. Exp. Med., 170: 141
5, 1989）、腸管におけるＩｇＡへの関与も示唆されて
いる。

【００４１】ところで、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞は、産
生するサイトカインプロフィルとそれに基づくエフェク
ター機能によって、ＩＬ-２やＩＦＮ-γを産生するＴｈ
１細胞と、ＩＬ-４やＩＬ-５、ＩＬ-１０を産生するＴ
ｈ２細胞に分類される。このＴｈ１とＴｈ２のバランス
の破綻は、がん、感染症、アレルギー、自己免疫疾患、
動脈硬化など、さまざまな免疫病の発症に関与している
ほか、ストレスと免疫、移植免疫、妊娠免疫にも重要な
因子であることが知られている。核酸の経口摂取は、こ
のＴｈ１とＴｈ２のバランスにおけるＴｈ２優位へのバ
ランス破綻を、Ｔｈ１の発現を高めることにより、該バ
ランスを改善することが期待される。

【００４２】結論として、有効量の核酸の経口摂取によ
り、腸管免疫系に抗原特異的な分泌型ＩｇＡ抗体産生を
促進して、有害な病原体などに対する防御能を高め、一
方、抗原特異的な経口免疫寛容を効果的に誘導し、さら
に、Ｔｈ１/Ｔｈ２細胞のバランスの破綻を改善し、結
果、腸管免疫系、あるいは全身免疫系を賦活化すること
が期待される。

【００４３】本明細書における“核酸の有効量”は、例
えば、ＩＥＬにおけるγδ-ＩＥＬの発現比率が高めら
れること、腸管上皮におけるＩＦＮ-γ、ＩＬ-２、ＩＬ
-７、およびＴＧＦ-βの産生が促進されること、抗原特
異的ＩｇＡ抗体の産生が促進されること、血清中の抗原
特異的ＩｇＥ抗体産生やｔｏｔａｌＩｇＥ抗体産生が抑
制されること、脾細胞におけるＩＬ-４産生が抑制され
ること、ＩｇＧ１/ＩｇＧ２ａの比が低下すること、等
を指標にして、公知のアッセイによりその有効量を決定
し、さらに臨床症状等を勘案して、有効摂取量を決定す
ることができる。

【００４４】経口的に摂取された核酸は、膵液中のリボ
ヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼによって加水
分解を受け、ヌクレオチドになり、ホスファーターゼに
よってリン酸がはずれてヌクレオシドになり、さらにヌ
クレオシダーゼによって分解されて核酸塩基と五炭糖に
なる。胃腸からの吸収は、ヌクレオチド、ヌクレオシド
として行われる。

【００４５】ここでいう塩基は、アデニン、グアニン、
ヒポキサンチン、キサンチン、シトシン、ウラシル、チ
ミンのことである。ここでいうヌクレオシドは、ウリジ
ン、アデノシン、グアノシン、シチジン、リポチミジ
ン、デオキシアデノシン、デオキシグアノシン、デオキ
シウリジン、デオキシシチジン、チミジン、イノシン、
キサントシンのことである。

【００４６】ここでいうヌクレオチドは、ヌクレオシド
の糖部分にリン酸がエステル結合で結合している化合物
のことで、結合するリン酸の位置はどこでもよく、結合
するリン酸の数もいくつでもよい。また、例えば、１つ
のリン酸が 5'、3' 位の両方に結合する化合物もヌクレ
オチドに含める。この場合も結合するリン酸の数や位置
はどこでもよい。

【００４７】ここでいう核酸は、ＲＮＡ、ＤＮＡなどの
ポリヌクレオチドや上記したヌクレオチドが結合したポ
リヌクレオチドのことである。本発明の核酸は、アデノ
シン-n'-一リン酸、シチジン-n'-一リン酸、グアノシン
-n'-一リン酸、ウリジン-n'-一リン酸、チミジン-n'-一
リン酸、およびイノシン-n'-一リン酸の１種または２種
以上を含む核酸組成物を意味する。ここでn'は２'、
３'、または５'を示す。

【００４８】本発明の核酸組成物は、特定の組み合わせ
の核酸を有効成分として含有するものであり、組み合わ
せを遊離形で示すと、次のとおりである。なお、核酸成
分は、ＩＵＰＡＣ-ＩＵＢ規定、あるいは当該分野にお
ける慣用記号にしたがう。

【００４９】すなわち、アデノシンーリン酸（ＡＭＰ）
／シチジンーリン酸（ＣＭＰ）／グアノシンーリン酸
（ＧＭＰ）／ウリジンーリン酸（ＵＭＰ）／イノシン-
n'-一リン酸（ＩＭＰ）の各組み合わせである。これら
の組み合わせにおける各成分としては、公知のヌクレオ
シド、ヌクレオチド類、またはこれらの無毒性塩が含ま
れる。

【００５０】また、核酸成分の配合割合を、例えば核酸
のモル比で表せば、モル比は、上記のアッセイ系で、核
酸成分の種類、配合量等を決定し、さらに患者の病態等
を勘案して決定することができる。これらの好ましい組
み合わせの１例としては、モル比として、ＩＭＰ：ＡＭ
Ｐ：ＧＭＰ：ＣＭＰ：ＵＭＰ：ＡＭＰ＝１〜４：１〜
４：１〜４：１〜４である。さらに好ましい一つの例と
して、ＧＭＰ：ＣＭＰ：ＵＭＰ：ＩＭＰ＝１：３〜４：
１〜２：１〜３である。

【００５１】これらの核酸塩基のうちでの最適な核酸塩
基の選択、あるいは組み合わせは、当業者であれば、上
記アッセイ系で適切に決定することが可能である。した
がって、そのようにして得られた核酸組成物も本発明に
包含される。

【００５２】核酸はその由来に制限はなく、例えば、酵
母、細菌、乳、魚介類、動物、植物由来が挙げられる。
飲食品タイプの核酸組成物として使用する場合には、有
効量の核酸成分（その処理物）をそのまま、使用した
り、他の食品ないし食品成分と併用したりして適宜常法
にしたがって使用できる。有効量の核酸成分を用いる本
発明に係る組成物は、固体状（粉末、顆粒状その他）、
ペースト状、液状ないし懸濁状のいずれでもよいが、甘
味料、酸味料、ビタミン剤その他ドリンク剤製造に常用
される各種成分を用いて、健康ドリンクに製剤化すると
好適である。

【００５３】腸管免疫系の賦活化（抗原特異的ＩｇＡ抗
体産生や免疫寛容）を目的として、核酸の有効量を、食
品、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用
食品、経腸栄養食品、あるいは経腸栄養剤等の医薬品製
剤や医薬部外品製造のために配合することができる。そ
れは周知・慣用技術である。

【００５４】プリン・ピリミジンの成人１日の必要量
は、450〜700mgとされ、また、尿酸に蓄積を生じない最
大安全量は、４g/日とされている（Rudolph, F.B. et a
l.: Nutrition, 6 : 45, 1990）。

【００５５】［試験例］ 以下、核酸の経口摂取が免疫
系に及ぼす影響についての試験例を示すが、本発明はこ
れらの試験例に限定されるものではない。

【００５６】統計処理 データの統計的有意差は、Student's testによつて決定
した。p＜０.０５における値を有意とみなした。

【００５７】フローサイトメトリー 一次抗体は、ビオチン化抗マウスＴＣＲβ(Ｈ５７-５９
７)（PharMingen, SanDiego, CA, U.S.A）、ビオチン化
抗マウスＣＤ４(Ｈ１２９.１９)（PharMingen）、およ
びビオチン化抗マウスＩＬ-２Ｒ抗体(ＣＤ２５)(７Ｄ
４)(PharMingen)、を用いた。インキュベーションは全
て遮光下に行った。細胞は、一次抗体、あるいはアイソ
タイプコントロール抗体とともに、氷上で３０分間イン
キュベートした。Ｈａｎｋ's平衡塩類溶液で細胞を洗浄
後、Fluorescein isothiocyanate（ＦＩＴＣ）標識抗マ
ウスＴＣＲδ抗体(ＧＬ３)(Cedar Lane Lab.)、ＦＩＴ
Ｃ標識抗マウスＣＤ４(Ｈ１２９.１９)（PharMinge
n）、phycoerythrin（ＰＥ）標識抗マウスＣＤ８α(５
３-６.７)（GIBCO,Grand Island, NY, U.S.A）、ＦＩＴ
Ｃ標識抗マウスＣＤ８β(Ｙ８.７７)（Seikagaku Co.,
Tokyo, Japan)、ＰＥ標識抗マウスＴＣＲβ、(Ｈ８７-
５９７)(PharMingen)、およびstreptavidin-Red 670(GI
BCO)、とともに氷上で３０分間インキュベートした。細
胞は、遠心して洗浄した。染色細胞は、３カラーによる
フローサイトメトリー（Becton Dickinson FACSort）で
ＩＥＬsサブセットを解析した。解析には、Lysis IIソ
フトウエアを用いた。

【００５８】サイトカインアッセイ（ＥＬＩＳＡ） アッセイバッファーとして３％ポリエチレングリコール
６０００（Nacalai Tesque Inc., Japan）を含むリン酸
緩衝液（ｐＨ７.４）を用いた（アッセイバッファ
ー）。洗浄バッファーには、０.０５％Ｔｗｅｅｎ-２０
を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７.４）（ＰＢＳ-０．０５％
Ｔｗｅｅｎ）を用いた。ＩＦＮ-γ、およびＩＬ-２は、
ＥＬＩＳＡ法（enzyme-linked immunosorbentassay）で
測定した。ラット抗マウスＩＦＮ-γ抗体（６Ａ２）(Ph
arMingen)、ラット抗マウスＩＬ-２抗体（ＪＥＳ６-１
Ａ１２）(PharMingen)と、ビオチン化ラット抗マウスＩ
ＦＮ-γ抗体（ＸＭＧ１.２）(PharMingen)、ビオチン化
ラット抗マウスＩＬ-２抗体（ＪＥＳ６-５Ｈ４)（PharM
ingen）を用いた。０.０５Ｍ-Ｔｒｉｓ緩衝液（ｐＨ８.
９）で希釈したラット抗マウスＩＦＮ-γ抗体（１μg/
ｍｌ）、あるいは０.１Ｍ-NaHCO₃で希釈したラット抗マ
ウスＩＬ-２抗体（１μg/ｍｌ）を、マイクロタイター
プレート（Nunc, Roskilde, Denmark）の各ウエルに分
注した。４℃で一晩インキュベートし、抗体をウエルに
吸着させた。ウエルを洗浄後、５％ＦＣＳを含むアッセ
イバッファーを加え、室温１時間ブロックした。ウエル
を洗浄後、アッセイバッファーで希釈した培養上清を各
ウエルに加え、２時間インキュベートした。ウエルを洗
浄後、アッセイバッファーで希釈したビオチン化抗マウ
スＩＦＮ-γ抗体、またはビオチン化抗マウスＩＬ-２抗
体を各ウエルに加え、２時間インキュベートした。洗浄
後、アッセイバッファーで希釈したアルカリホスファタ
ーゼ標識ストレプトアビジン（Zymed Lab., South San
Francisco, CA, U. S.A）を各ウエルに加え反応させ
た。ウエルを洗浄後、基質溶液［０.１Ｍジエタノール
アミン緩衝液(ｐＨ９.８)に溶解した0.１％４ニトロフ
ェニルホスフェイト（Tokyo Kasei Co.）］を各ウエル
に加え、室温で１時間インキュベートした。５Ｎ-NaOH
を加えて反応を停止し、４０５ｎｍにおける吸収度を測
定した。ＩＬ-７およびＴＧＦ-βは、ＥＬＩＳＡ法で測
定した。

【００５９】0.１Ｍ-NaHCO₃で希釈した抗マウスＩＬ-７
抗体溶液（２μg/ｍｌ）(Genzyme)をマイクロタイター
プレート（Nunc）の各ウエルに分注し、４℃一晩インキ
ュベートし、抗体をウエルに吸着させた。ウエルを洗浄
後、１０％ＯＶＡを含むアッセイバッファーをウエルに
加え、室温１時間ブロックした。ウエルを洗浄後、0.１
％Ｔｗｅｅｎ２０を含むアッセイバッファーで希釈した
培養上清をウエルに加え、２時間インキュベートした。
ウエルを洗浄後、0.１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むアッセイ
バッファーで希釈したのヒツジ抗マウスＩＬ-７抗体(１
μg/ｍｌ）（R and D, Minneapolis, MN, USA）を各ウ
エルに加え２時間インキュベートした。ウエルを洗浄
後、０.１％Ｔｗｅｅｎ２０を含むアッセイバッファー
で希釈したビオチン化抗ヒツジＩｇＧ抗体を各ウエルに
加え、１５分間反応させた。ウエルを洗浄後、アッセイ
バッファーで希釈したアルカリホスファターゼ標識スト
レプトアビジンを各ウエルに加えた。ウエルを洗浄後、
ＩＦＮ-γおよびＩＬ-２と同様に、基質溶液を各ウエル
に加え、４０５ｎｍにおける吸収度を測定した。

【００６０】［試験例１］ＩＥＬのＴＣＲサブセット発
現に及ぼす影響 ３週齢の雌性ＢＡＬＢ/ｃマウス［ＳＬＣ,Hamamatsu, J
apan］は、ヌクレオチド非添加食餌［ＮＴ(−)］群（ｎ
＝４）、およびヌクレオチド添加食餌［ＮＴ(＋)］群
（ｎ＝４）、の２群にランダムに分けた。ＮＴ(−)、あ
るいはＮＴ(＋)を、それぞれ２週間自由摂取させた。ヌ
クレオチド［Yamasa Co.（Chosi, Japan）］組成を表２
に示す。

【００６１】

【表２】

【００６２】また該ヌクレオチドを含みホエータンパク
質（ＷＰＩ）［Davisco, International Inc.（Le Sueu
r, MN, U.S.A）］を基本とした食餌組成を表３に示す。

【００６３】

【表３】

【００６４】食餌の摂取後、小腸を摘出し、ＩＥＬを、
Nannoらの方法（Nanno, M. et al.:J. Immunol., 153:
2014-2020, 1994）にしたがって調製した。マウスから
小腸を摘出した。腸管腔内容物を洗い流した後、ポリエ
チレンチューブを貫通させ、一端を固定し、内腔が外側
になるように反転した。反転した腸管を４等分し、５％
ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）を含むＨＢＳＳ４５ｍｌを入れ
た５０ｍｌコニカルチューブに移し、３７℃で４５分
間、水平方向に１３５ｒｐｍ振とうした。振とう後、ガ
ラスウールカラムで濾過して異物を取り除き、細胞を回
収した。細胞は、３０％パーコール（Pharmacia, Uppsa
la, Sweden）に浮遊させ、１８００ｒｐｍで２５分間遠
心した。パーコールを用いた密度勾配遠心（１８００ｒ
ｐｍで２５分間遠心）により、４４％と７０％パーコー
ルの境界に集積したＩＥＬを採取した。ＩＥＬの生存Ｃ
Ｄ３⁺Ｔ細胞は、＞９０％であった。得られたＩＥＬの
ＴＣＲサブセット構成を、フローサイトメトリー（ＦＡ
ＣＳ）で個体別に解析した。αβ-ＩＥＬのＮＴ(−)群
とＮＴ(＋)群における発現率、およびγδ-ＩＥＬのＮ
Ｔ(−)群とＮＴ(＋)群における発現率を図１に示す。ま
た、ＮＴ(−)群におけるαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬの発
現比、およびＮＴ(＋)群におけるαβ-ＩＥＬとγδ-Ｉ
ＥＬの発現比を図２に示す。αβ-ＩＥＬの発現率
（％）は、ＮＴ(＋)群がＮＴ(−)群のそれよりも有意
（ｐ＜０．０５）に低くなり、γδ-ＩＥＬの発現率
は、ＮＴ(＋)群がＮＴ(−)群のそれよりも有意（ｐ＜
０．０５）に高くなった（図１）。ＮＴ(＋)群のαβ-
ＩＥＬとγδ-ＩＥＬの発現比は、ＮＴ(−)群のαβ-Ｉ
ＥＬとγδ-ＩＥＬの発現比よりも有意（ｐ＜０．０
５）に低下した（図２）。以上の結果、核酸の経口摂取
は、αβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのバランスを、γδ-Ｉ
ＥＬ優位に誘導することが明らかとなった。

【００６５】［試験例２］ＩＥＬのＣＤ４、ＣＤ８サブ
セット発現に及ぼす影響 αβ-ＩＥＬは、ＣＤ８αα⁺、ＣＤ８αβ⁺、ＣＤ４⁺、
およびＣＤ４⁺ＣＤ８αα⁺の４つのサブセットに分類さ
れるのに対し、γδ-ＩＥＬは、ほとんどがＣＤ８αα⁺
で残りがＣＤ４^-ＣＤ８^-ある（表１参照）。試験例１
の、αβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのＣＤ４とＣＤ８の発現
率を、ＦＡＣＳで個体別に解析した（図３）。結果、α
β-ＩＥＬにおいては、ＮＴ(＋)群のＣＤ８αα⁺の発現
比率がＮＴ(−)群のそれよりも有意に低下し、逆にγδ
-ＩＥＬにおいては、ＮＴ(＋)群のＣＤ８αα⁺の発現比
率がＮＴ(−)群のそれよりも有意に高くなった。一方、
αβ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αβ⁺の発現比率とγδ-Ｉ
ＥＬにおけるＣＤ８αβ⁺の発現比率には差は認められ
なかった（データは示さない）。また、ＣＤ４⁺、ＣＤ
４⁺ＣＤ８⁺、およびＣＤ４^-ＣＤ８^-の発現比率は、ＮＴ
(＋)群とＮＴ(−)群で変わらなかった。γδ-ＩＥＬＣ
Ｄ４^-ＣＤ８^-は、ＮＴ(＋)群で僅かに増加したが有意差
はなかった（データは示さない）。

【００６６】これらの結果は、核酸の経口摂取による、
γδ-ＩＥＬサブセットの優位な誘導が、γδ-ＩＥＬに
おけるＣＤ８αα⁺の有意(ｐ＜０.０５)な上昇およびα
β-ＩＥＬにおけるＣＤ８αα⁺の有意（ｐ＜０.０５）
な低下、と相関していることを示している。

【００６７】［試験例３］ＩＥＬのＴＣＲサブセット発
現に及ぼす影響 卵白アルブミン（ＯＶＡ）特異的ＴＣＲを発現するＴＣ
Ｒトランスジェニックマウス（ＯＶＡＴＣＲ-Ｔｇマウ
ス）（ＯＶＡ２３-３；Sato, T. et al.: Eur.J. Immu
n., 24: 1512-1516, 1994）を用いた。

【００６８】３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウス
は、ＮＴ(−)群(ｎ=１０)、およびＮＴ(＋)群(ｎ=７)の
２群に分けた。ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を４週間自
由摂取させた。この期間中、２％ＯＶＡを含む水を自由
摂取させた。その後、ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウスは殺
し、腸を摘出し、試験例１と同様にＩＥＬを調製した。

【００６９】ＩＥＬのＴＣＲサブセットの発現比率
（％）、およびαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのＣＤ４とＣ
Ｄ８サブセットの発現比率を、ＦＡＣＳで個体別に解析
した。αβ-ＩＥＬのＮＴ(−)群とＮＴ(＋)群における
発現率、およびγδ-ＩＥＬのＮＴ(−)群とＮＴ(＋)群
における発現率を図４に示す。また、αβ-ＩＥＬのＮ
Ｔ(−)群とＮＴ(＋)群におけるＣＤ８αα⁺サブセット
発現比率、およびγδ-ＩＥＬのＮＴ(−)群とＮＴ(＋)
群におけるＣＤ８αα⁺サブセット発現比率、を図５に
示す。

【００７０】図５にＮＴ(−)群のαβ-ＩＥＬにおける
ＣＤ８αα⁺サブセット発現比率、γδ-ＩＥＬにおける
それらの発現比率をそれぞれ示す。ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇ
マウスの場合、抗原の経口摂取により、ＩＥＬにおける
αβ-ＩＥＬサブセットの発現比率が、抗原を摂取しな
い場合に比較して、図１と図４に示すように、ＮＴ(−)
群においては約４８％から約８３％、ＮＴ(＋)群におい
ては約４０％から約７７％と顕著に増加した。しかし、
ＮＴ(＋)群におけるγδ-ＩＥＬの発現比率はＮＴ(−)
群におけるそれに比較して有意に高く（図４）、これ
は、ＮＴ(＋)群のγδ-ＩＥＬにおけるＣＤ８αα⁺の発
現比率が、ＮＴ(−)群におけるそれに比較して有意に高
い（図５）ことと相関している。すなわち、抗原の経口
摂取により、ＩＥＬにおいて抗原特異的ＣＤ４⁺Ｔ細
胞、が顕著に増加するが、核酸と経口摂取は、ＩＥＬの
ＴＣＲサブセット構成を、核酸を経口摂取しない場合に
比較して、γδ-ＩＥＬ優位に誘導することが明らかと
なった。

【００７１】［試験例４］ＩＥＬにおける抗原特異的サ
イトカイン産生に及ぼす影響 試験例３におけるＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウスから得たＩ
ＥＬは、１０％非働化ＦＣＳ、ペニシリン１００Ｕ/ｍ
ｌ、ストレプトマイシン１００μg/ｍｌ、メルカプトエ
タノール５×１０^-5Ｍ、および２ｍＭ Ｌ-グルタミンを
含むＲＰＭＩ１６４０培地（Nissui, Pharmaceutical C
o., Tokyo）に、５.０×１０⁵細胞/１.０ｍｌ浮遊さ
せ、９６ウエルプレートに、それぞれ、０.２ｍｌ/ウエ
ルまいた（duplicate）。

【００７２】一方、抗原提示細胞として用いる脾細胞
は、以下のように調製した。未感作のＢＡＬＢ/ｃマウ
スから脾臓を無菌的に摘出し、細かくきざんだ。細胞
（１×１０⁸細胞）は、５０μg/ｍｌのマイトマイシン
Ｃ（SIGMA, St. Louis, MO, U.S.A）を含む１ｍｌのＲ
ＰＭＩ １６４０培地培養液中で、３７℃、４５分間イ
ンキュベートした。細胞は、0.８３％ＮＨ₄Ｃｌ溶液に
浮遊させ、赤血球を溶解除去した。つぎに、細胞浮遊液
は、ステンレススチールのメッシュに通し、均一の細胞
浮遊液を得た。細胞は、ＲＰＭＩ-１６４０培地で２回
洗浄した。マイトマイシンＣ処理した脾細胞（５×１０
⁵細胞）とＴ細胞とを、５０μＭ濃度のＯＶＡ（Seikaga
ku Co.）の存在下、あるいは非存在下、５％ＣＯ₂/９５
％ａｉｒの湿潤条件下で、３７℃２日間培養した。培養
後、培養上清は、遠心して集め、−２５℃で貯蔵した。
上清中のＩＦＮ-γ、およびＩＬ-２レベルをＥＬＩＳＡ
法で測定した。ＩＦＮ-γについて図６に、ＩＬ-２につ
いて図７に示す。ＯＶＡ特異的ＩＦＮ-γの産生増強
が、ＮＴ(−)群と比較して、有意な差はないがＮＴ(＋)
群で観察された。ＮＴ(＋)群におけるＯＶＡ特異的ＩＬ
-２産生は、ＮＴ(−)群よりも有意（ｐ＜０.０５）に高
かった。

【００７３】［試験例５］腸管上皮細胞のＩＬ-７産生
に及ぼす影響 ３週齢のＢＡＬＢ/ｃマウスにＮＴ(−)(ｎ＝８)とＮＴ
(−)(ｎ＝９)をそれぞれ２週間自由摂取させた。その
後、小腸を摘出し小腸上皮細胞を調製した。小腸上皮細
胞の培養は、Perreaultらの方法（Perreaul, N. and Be
aulieu, J. F. :Exp. Cell. Res., 245: 34-42, 1998）
にしたがった。小腸を縦に開き、ＰＢＳで洗浄し、４つ
のセグメントにカットした。これらのセグメントは、１
０ｍｌのice-cold MatriSperse(Collaborative Biomedi
calProducts, Becton Dickinson Lab.)を含む１５-ｍｌ
チューブに移した。小腸は、４℃で８〜１０時間攪拌な
しでインキュベートした。つぎに、各チューブは、穏や
かに振って上皮細胞を分離した。浮遊液は、ＰＢＳで２
回洗浄（４℃、１２００ｒｐｍ、８分間）した。１０％
ＦＣＳ、ペニシリン１００Ｕ/ｍｌ、ストレプトマイシ
ン１００μｇ/ｍｌ、メルカプトエタノール５×１０^-5
Ｍおよび２ｍｌ-グルタミンを添加した９６ウエルプレ
ート中のＲＰＭＩ １６４０培地に浮遊させた。これら
の上皮細胞は、５％ＣＯ₂インキュベーターに入れ、３
７℃で１６時間培養した。培養上清のＩＬ-７レベル
は、Sharmaらの方法（Sharma, S. et al.: Gene Therap
y., 4: 1361-1370, 1997）にしたがい、ＥＬＩＳＡ法で
測定した（図８）。ＮＴ(＋)群において、小腸上皮細胞
のＩＬ-７産生が、ＮＴ(−)群のそれに比較して有意
（ｐ＜０.０１）に増強していることが認められる。す
なわち、核酸の経口摂取は小腸上皮細胞のＩＬ-７産生
を増強することが明らかとなった。

【００７４】［試験例６］核酸の経口摂取が腸管上皮細
胞のＩＬ-７およびＴＧＦ-β産生に及ぼす影響 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ ＴｇマウスにＮＴ(−)（ｎ
＝８）とＮＴ(＋)（ｎ＝８）をそれぞれ４週間自由摂取
させた。実験期間中、２％ＯＶＡを添加した水を自由に
摂取させた。その後、小腸を摘出し、４℃で８時間マト
リスパーゼ中に静置した。静置後、軽く振とうし、腸管
を除き、マトリスパーゼ中の小腸上皮細胞を２回洗浄し
た。洗浄後、小腸上皮細胞を１０％ＦＣＳ含有ＲＰＭＩ
-1640培地またはＦＣＳを含まないＲＰＭＩ-1640培地で
１６時間培養した。培養後、上清中のＩＬ-７およびＴ
ＧＦ-βをＥＬＩＳＡで測定した。その結果、小腸上皮
細胞のＩＬ-７産生は、ＮＴ(+)食群の方がＮＴ(-)食群
に比べて有意（ｐ＜０.０１）に高くなった（図９）。
また、小腸上皮細胞のＴＧＦ-β産生も、ＮＴ(+)食群の
方がＮＴ(-)食群に比べて有意（ｐ＜０.０５）有意に高
くなった（図１０）。

【００７５】［試験例７］抗原特異的ＩｇＡ抗体産生に
及ぼす影響 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウス にＮＴ(−)
（ｎ＝１８）とＮＴ(＋)（ｎ＝１６）を自由摂取させ
た。実験期間中、２％ＯＶＡを添加した水を自由に摂取
させた。６、７、８週齢で糞便を採取し、ＯＶＡ特異的
ＩｇＡ抗体をＥＬＩＳＡ法で測定した。結果を図１１に
示す。ＯＶＡ特異的ＩｇＡ抗体は、８週齢でＮＴ(＋)食
群の方が有意に高くなった。したがって、核酸の経口摂
取は、腸管免疫系の抗原特異的ＩｇＡの産生を増強する
ことが明らかとなった。

【００７６】［試験例８］マクロファージの機能に及ぼ
す影響 Whey Protein Isolate（ＷＰＩ）をタンパク源としたヌ
クレオチド無添加の食餌 (ＮＴ(-)食) および以下の割
合で配合したヌクレオチドを０.４％添加した食餌 (Ｎ
Ｔ(+)食) をそれぞれ１群６匹でＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマ
ウスに３週齢から自由摂取させた。なお、このとき２％
ＯＶＡ水溶液を自由摂取させた。チオグリコレートを腹
腔投与し、投与後４日後（７週齢）に腹腔マクロファー
ジを採取した。このマクロファージをＬＰＳ（0.1μg/m
lおよび1μg/ml）刺激下で２日間培養し、その上清のＩ
Ｌ-１２活性をBioassay法で測定した。マウスＩＬ-１２
のbioassayは、Skeenら (Skeen, M.J.ら, J Immunol 15
6:1196 - 1206, 1996) の方法で行った。すなわち、９
６ウェルプレートに10μg/mlの抗ＩＬ-１２p40抗体をコ
ーティングした。ウェルを洗浄し、様々な濃度のリコン
ビナントＩＬ-１２ (rＩＬ-１２) 、脾臓またはマクロ
ファージの培養上清をウェルに加え、プレートを一晩イ
ンキュベートした。正常マウスの脾臓細胞を、CO2イン
キュベーター中で37℃２日間の培養後、培養上清を回収
し、ＩＦＮ-γ濃度をELISAで測定した。既知のrＩＬ-１
２濃度とＩＦＮ-γ濃度との検量線から上清中のＩＬ-１
２濃度を外挿した。コーティングした抗体に、ＩＬ-１
２p40とp70が結合するが、ＩＬ-１２p70だけがＩＦＮ-
γ産生を誘導できる。その結果、ＬＰＳ濃度が0.1μg/m
lでも1μg/mlいずれでも、ＩＬ-１２活性については、
ＮＴ(+)食群の方が、ＮＴ(-)食群より有意に高くなった
(図１２)。

【００７７】［試験例９］マクロファージの機能に及ぼ
す影響 ８週齢の雌性ＢＡＬＢ/cマウスにチオグリコレートを腹
腔投与し、４日後（７週齢）、腹腔マクロファージを採
取した。この腹腔マクロファージをヌクレオチド（０〜
１０μg/ml）とともに１日間培養し、その上清中のＩＬ
-１２活性をBioassay法で測定した。その結果、0.３２
〜１０μg/mlのヌクレオチドを添加したときのＩＬ-１
２活性は、ヌクレオチドを添加していない場合に比べ
て、有意差は見られないものの高くなる傾向が見られた
(図１３)。

【００７８】［試験例１０］脾細胞におけるサイトカイ
ン産生に及ぼす影響 Whey Protein Isolateをタンパク源としたヌクレオチド
無添加の食餌 (ＮＴ(-)食) および上記の割合で配合し
たヌクレオチドを０.４％添加した食餌 (ＮＴ(+)食) を
それぞれ3週齢のＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウス（１群６
匹）に、２％ＯＶＡ水溶液とともに自由摂取させ、７週
齢で脾臓細胞を採取した。この脾臓細胞をＯＶＡ（100
μg/ml）刺激下で2日間培養し、その上清のＩＬ-１２活
性をBioassay法で測定した。その結果、脾臓細胞のＩＬ
-１２活性については、ＮＴ(+)食群の方が、NT(-)食群
より有意に高くなった (図１４)。

【００７９】

【実施例】 以下、実施例により本発明を具体的に説明
するが、本発明は、これらの実施例に限定されるもので
はない。

【００８０】［実施例１］核酸関連物質として、下記の
配合割合の核酸混合物を0.０１％の割合で市販の育児用
調製粉乳（明治乳業 (株) 製）に配合した。 シチジン5' - 一リン酸 1.62g/kg グアノシン5' - 一リン酸 0.57g/kg イノシン5' - 一リン酸 1.10g/kg ウリジン5'-一リン酸 0.71g/kg 粉乳１gあたり、0.1mg、好ましくは0.01〜4mgを使用す
ればよい。また、一般に核酸関連物質の構成成分である
塩基は、魚介類や肉などの食品に含まれているので安全
である。したがって、上記範囲を越えて使用しても何ら
差し支えはないし、予防ないし保健を目的とする場合
は、上記範囲よりも少量使用してもよい。また、育児用
粉乳以外の飲食品を調製する場合も、上記範囲を参考に
してヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸 または塩基の
使用量を定めればよい。

【００８１】［実施例２］アレルゲンとなるタンパク質
を酵素分解した育児用調製粉乳（明治乳業 (株) 製; 調
製粉乳A、調製粉乳B）に、ヌクレオチド、ヌクレオシ
ド、核酸(RNA、DNA) またはその構成成分である塩基の
混合物0.01%を配合した。この場合、調製粉乳Aは乳清タ
ンパク質を酵素分解し、調製粉乳Bはカゼインを酵素分
解したものである。しかし、酵素分解するタンパク質に
制限はないし、分解に用いる酵素にも制限はない。製品
の配合組成は下記表1の通りである。なお、ヌクレオチ
ドの配合割合は実施例1の通りである。なお、本発明に
よる育児用粉乳を製造するにあたり、核酸関連物質の構
成成分である塩基は、上記の使用量を１例として使用す
ることができるが、本発明においては、粉乳1gあたり、
0.1mg、好ましくは0.01〜4mgを使用すればよい。また、
上記範囲を越えて使用しても何ら差し支えはないし、予
防ないし保健を目的とする場合は、上記範囲よりも少量
使用してもよい。

【００８２】［実施例３］ビタミンC40gまたはビタミン
Cとクエン酸の等量混合物40g、グラニュー糖100g、コー
ンスターチと乳糖の等量混合物60gに、ヌクレオチド、
ヌクレオシド、核酸 (RNA、DNA)またはその構成成分で
ある塩基を40g加えて十分に混合した。混合物を袋に詰
め、1袋1.5gのスティック状栄養健康食品を100袋製造し
た。

【００８３】［実施例４］次の配合によりTCRγδ陽性
Ｔ細胞とTCRαβ陽性Ｔ細胞の比率を高める製剤を製造
した。(1)ヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DN
A)またはその構成成分である塩基50g、(2)ラクトース90
g、(3)コーンスターチ29g、(4)ステアリン酸マグネシウ
ム1g。先ず、(1)、(2)、(3) (但し17g) を混合し、(3)
(但し7g) から調製したペーストとともに顆粒化し
た。得られた顆粒に (3) (但し5g) と (4) を加えてよ
く混合し、この混合物を圧縮錠剤機により圧縮して、1
錠あたりヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DN
A)またはその構成成分である塩基を10mg含有する錠剤10
0個を製造した。投与量は、患者の症状、年齢によって
も異なるが、0.1〜1500mg/kg/dayで1日1〜4回投与す
る。本発明において用いるヌクレオチド、ヌクレオシ
ド、核酸 (RNA、DNA)、塩基は、本来食品由来のもので
あり、既述のように安全性にはほとんど問題はなく、し
たがって、上記容量を越えて、投与しても差し支えはな
い。また、健康の維持増進、保健栄養剤等としてこれを
利用する場合は、上記容量より少ない量を長期間にわた
って服用すればよい。また、既述のように本発明による
錠剤は、経口投与以外の方法でも投与することができる
が、静脈投与および筋肉投与の場合は0.01〜1200mg/kg/
dayである。

【００８４】［実施例５］次の配合を用意した。(1)ヌ
クレオチド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DNA)またはそ
の構成成分である塩基 1g、(2)塩化ナトリウム 8g、(3)
クロロブタノール 4g、(4)炭酸水素ナトリウム 1g。全
成分を蒸留水1000mlに溶解し、これを500mlの点滴ビン2
本に分注し、TCRγδ陽性Ｔ細胞とTCRαβ陽性Ｔ細胞の
比率を高め、IgA抗体の産生を促進する製剤を製造し
た。

【００８５】［実施例６］次の配合を用意した。(1)ヌ
クレオチド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DNA)またはそ
の構成成分である塩基 0.5g、(2)殺菌乳 1l 。(1)を(2)
に無菌的に混合し、ビン詰めした。本発明においては、
殺菌乳 1l あたり、(1)を 0.01〜10gを混合すればよ
い。

【００８６】［実施例７］実施例1の配合割合のヌクレ
オチドを有効成分として用い、下記に示す組成にて皮膚
外用剤を調製した。処方例の配合中、「適量」とは、全
体で100％重量になる量を意味する。

【００８７】 処方例１ クリーム（１） Ａ （重量％） モノステアリン酸 ポリエチレングリコール（40.E.O) ２.０ 自己乳化型モノステアリン酸グリセリン ５.０ ステアリン酸 ５.０ ベヘニルアルコール １.０ 流動パラフィン １０.０ トリオクタン酸グリセリル 1 ０.０ ビタミンE ０.１ ヌクレオチド １.０ Ｂ グリセリン ５.０ エチルパラベン ０.１ 精製水 適量 Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分
を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却
してクリームを製造した。

【００８８】 処方例２ クリーム（２） Ａ （重量％） モノステアリン酸 ポリエチレングリコール（40.E.O） ２.０ 自己乳化型モノステアリン酸グリセリン ５.０ ステアリン酸 ５.０ ベヘニルアルコール １.０ 流動パラフィン １０.０ トリオクタン酸グリセリル １０.０ ビタミンE ０.２ ヌクレオチド ０.５ Ｂ グリセリン ５.０ エチルパラベン ０.１ 精製水 適量 Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分
を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却
してクリームを製造した。

【００８９】 処方例３ 乳液 Ａ （重量％） モノステアリン酸 ポリオキシエチレンソルビタン（20.E.O） １.０ モノステアリン酸 ポリオキシエチレンソルビタン（60.E.O） ０.５ 親油型モノステアリン酸グリセリン １.０ ステアリン酸 ０.５ ベヘニルアルコール ０.５ アボガド油 ４.０ トリオクタン酸グリセリル ４.０ ヌクレオチド ５.０ Ｂ １, ３ - ブチレングリコール ５.０ エチルパラベン ０.１ 精製水 適量 Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分
を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却
して乳液を製造した。

【００９０】 処方例４ 化粧水 Ａ （重量％） ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60.E.O） ８.０ エタノール １５.０ ヌクレオチド ０.１ エチルパラベン ０.１ クエン酸 ０.１ クエン酸ナトリウム ０.３ １, ３ - ブチレングリコール ４.０ エデト酸二ナトリウム ０.０１ 精製水 適量 上記の各成分を混合、均一に撹拌、溶解し、化粧水を製
造した。

【００９１】 処方例５ 親水性軟膏 Ａ （重量％） ポリオキシエチレンセチルエーテル ２.０ グリセリンモノステアレート １０.０ 流動パラフィン １０.０ ワセリン ４.０ セタノール ５.０ ヌクレオチド ３.０ Ｂ プロピレングリコール １０.０ メチルパラベン ０.１ 精製水 適量 Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分
を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却
して親水性軟膏を製造した。本発明においては、実施例
1の配合割合のヌクレオチドだけでなく、ヌクレオチ
ド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DNA)またはその構成成
分である塩基いずれを用いてもよい。また、上記範囲を
越えて使用しても何ら差し支えはないし、上記範囲より
も少量使用してもよい。好ましくは、皮膚外用剤1gあた
り、ヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸 (RNA、DNA)ま
たはその構成成分である塩基を0.1〜100mg使用すればよ
い。

【００９２】

【発明の効果】核酸組成物の経口摂取により、ＩＥＬに
おけるαβ-ＩＥＬとγδ-ＩＥＬのサブセット構成比が
γδ-ＩＥＬが高められる方向にシフトすることが明ら
かにされた。さらに、核酸組成物の経口摂取により、腸
管上皮におけるサイトカイン（ＩＬ-２、ＩＬ-７、ＩＦ
Ｎ-γ、ＴＧＦ-βなど）の産生が亢進することが明らか
にされた。さらに、腸管における抗原特異的分泌型Ｉｇ
Ａ抗体の産生が亢進することが明らかにされた。これら
の結果、有効量の核酸の経口摂取により、腸管免疫系に
抗原特異的な分泌型ＩｇＡ抗体産生を促進して、有害な
病原体などに対する防御能を高め、一方、抗原特異的な
経口免疫寛容を効果的に誘導し、さらに、Ｔｈ１/Ｔｈ
２細胞のバランスの破綻を改善し、結果、腸管免疫系、
あるいは全身免疫系を賦活化することが期待される。

【図面の簡単な説明】

【図１】 ３週齢の雌性ＢＡＬＢ/ｃマウスに、ヌクレ
オチド非添加食餌［ＮＴ(−)］、あるいはヌクレオチド
添加食餌［ＮＴ(＋)］を、２週間自由摂取させた後の、
ＮＴ(−)群におけるＴＣＲαβ⁺ＩＥＬとＴＣＲγδ⁺Ｔ
細胞との構成比率（％）、およびＮＴ(＋)群におけるＴ
ＣＲγδ⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺Ｔ細胞との構成比率
（％）、をそれぞれ示す（平均値±ＳＥ;ｐ＜０.０
５）。

【図２】 同上の、ＮＴ(−)群におけるＩＥＬのＴＣＲ
αβ⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺ＩＥＬとの比、およびＮＴ
(＋)群におけるＴＣＲαβ⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺Ｔ細胞
との比、をそれぞれ示す（平均値±ＳＥ;^*ｐ＜０.０
５）。

【図３】 同上のＩＥＬのＣＤ４分子およびＣＤ８分子
の発現パターンのうち、ＮＴ(−)群におけるＴＣＲαβ
⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺ＣＤ８αα⁺ＩＥＬの
構成比率（％）、およびＮＴ(＋)群におけるＴＣＲαβ
⁺ＣＤ８αα ⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞と
の構成比率（％）、をそれぞれ示す（平均値±ＳＥ;^*ｐ
＜０.０５）

【図４】 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウスに、
ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡ添加した
水とともに、４週間自由摂取させた後のＮＴ(−)群にお
けるＴＣＲαβ⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺Ｔ細胞との構成比
率（％）、およびＮＴ(＋)群におけるＴＣＲαβ⁺Ｔ細
胞とＴＣＲγδ⁺Ｔ細胞との構成比率（％）、をそれぞ
れ示す（平均値±ＳＥ;ｐ＜０.０５）。

【図５】 同上のＩＥＬのＣＤ４分子、およびＣＤ８分
子の発現パターンのうち、ＮＴ(−)群におけるＴＣＲα
β⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞
の構成比率（％）、およびＮＴ(＋)群におけるＴＣＲα
β⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞とＴＣＲγδ⁺ＣＤ８αα⁺Ｔ細胞
の構成比率（％）、をそれぞれ示す（平均値±ＳＥ;^*ｐ
＜０.０５）

【図６】 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウスに、
ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡを添加し
た水とともに、４週間自由摂取させた後のＮＴ(−)群に
おけるＩＥＬのインターフェロン-γ（ＩＬ-γ）産生、
あるいはＮＴ(＋)群におけるＩＬ-γ産生をそれぞれ示
す（平均値±ＳＥ）。

【図７】 同上のＮＴ(−)群におけるＩＥＬのインター
ロイキン２（ＩＬ-２）産生、あるいはＮＴ(＋)群にお
けるＩＬ-２産生をそれぞれ示す。（平均値±ＳＥ;ｐ＜
０.０５）。

【図８】 ３週齢の雌性ＢＡＬＢ/ｃマウスに、ＮＴ
(−)、あるいはＮＴ(＋)を２週間自由摂取させた後のＮ
Ｔ(−)群における小腸上皮細胞のインターロイキン７
（ＩＬ-７）産生、あるいはＮＴ(＋)群における小腸上
皮細胞のインターロイキン７（ＩＬ-７）産生をそれぞ
れ示す。（平均値±ＳＥ;ｐ＜０.０１）。

【図９】 経口摂取されたヌクレオチドが、OVA-TCR Tg
マウス (n=10) の小腸上皮細胞のＩＬ-７産生に与える
影響（**; p <０.０１）を示す。(平均値±ＳＤ)

【図１０】 経口摂取されたヌクレオチドがＯＶＡ-Ｔ
ＣＲ Ｔｇマウス(n=4) のＩＥＬのＴＧＦ-β産生に与え
る影響（*; p <０.０５）を示す。(平均値±ＳＤ)

【図１１】 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウス
に、ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡ添加
した水とともに、自由摂取させ、６、７、および８週齢
で、糞中のＯＶＡ特異的なＩｇＡ抗体量を測定した結果
を示す（平均値±ＳＥ;p＜０.０５）

【図１２】 ３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウス
に、ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡ添加
した水とともに４週間自由摂取させ後（７週齢）の腹腔
マクロファージのＩＬ-１２産生を示す（平均値±ＳＥ;
p＜０.０５）。

【図１３】 ３週齢の雌性ＢＡＬＢ/ｃマウスに、ＮＴ
(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡ添加した水と
ともに４週間自由摂取させ後（７週齢）の腹腔マクロフ
ァージのＩＬ-１２産生を示す（平均値±ＳＥ;p＜０.０
５）。

【図１４】３週齢の雌性ＯＶＡ-ＴＣＲ Ｔｇマウスに、
ＮＴ(−)、あるいはＮＴ(＋)を、２％のＯＶＡ添加した
水とともに４週間自由摂取させ後（７週齢）の脾細胞の
ＩＬ-１２産生を示す（平均値±ＳＥ;p＜０.０５）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/708 Ａ６１Ｋ 31/708 31/7088 31/7088 Ａ６１Ｐ 1/04 Ａ６１Ｐ 1/04 1/14 1/14 3/06 3/06 9/12 9/12 35/00 35/00 37/04 37/04 (72)発明者 八村 敏志 東京都文京区本郷５−28−２−601 (72)発明者 矢島 高二 神奈川県小田原市成田540番地 明治乳業 株式会社栄養科学研究所内 (72)発明者 桑田 有 神奈川県小田原市成田540番地 明治乳業 株式会社栄養科学研究所内 (72)発明者 上野川 修一 埼玉県春日都市増田新田400−８ Ｆターム(参考） 4B001 AC99 EC05 4B018 LB07 LB08 LE01 LE03 LE05 MD44 ME02 ME04 ME08 ME11 4C086 AA01 AA02 EA16 EA17 EA18 MA01 MA04 NA14 ZA42 ZA68 ZA73 ZB09 ZB26 ZC33

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 核酸組成物を有効成分として含む免疫賦
   活作用を有する飲食品。
2. 【請求項２】 核酸組成物が、高分子核酸、ポリヌクレ
   オチド、ヌクレオチド、ヌクレオシド、核酸塩基からな
   る群から選ばれる核酸組成物である請求項１に記載の飲
   食品。
3. 【請求項３】 核酸組成物が、ヌクレオチドおよびヌク
   レオシドの混合物である請求項１または２に記載の飲食
   品。
4. 【請求項４】 ヌクレオチドが、シチジル酸、グアニル
   酸、アデニル、ウリジル酸、およびイノシン酸の少なく
   とも１つ、または２つ以上を含む請求項３に記載の飲食
   品。
5. 【請求項５】 ヌクレオシドが、シチジン、グアノシ
   ン、アデノシン５、ウリジン、およびイノシンの少なく
   とも１つ、または２つ以上を含む請求項３に記載の飲食
   品。
6. 【請求項６】 免疫賦活作用が、腸管免疫系における腸
   管上皮細胞間Ｔリンパ球（ＩＥＬ）のαβ-ＩＥＬとγ
   δ-ＩＥＬのサブセット構成比を、γδ-ＩＥＬを高める
   方向にシフトする請求項１に記載の飲食品。
7. 【請求項７】 免疫賦活作用が腸管上皮におけるＩＦＮ
   -γ、ＩＬ-２、ＩＬ-７、およびＴＧＦ-βの産生亢進で
   ある請求項１に記載の飲食品。
8. 【請求項８】 免疫賦活作用がマクロファージおよび脾
   細胞におけるＩＬ-１２の産生亢進である請求項１に記
   載の飲食品。
9. 【請求項９】 免疫賦活作用が細胞性免疫増強である請
   求項６〜８のいずれかに記載の飲食品。
10. 【請求項１０】 免疫賦活作用が整腸作用、抗腫瘍作
    用、抗変異作用、血圧低下作用、抗潰瘍作用、脂質代謝
    改善作用である請求項１または請求項６〜８のいずれか
    に記載の飲食品。
11. 【請求項１１】 食品、健康食品、機能性食品、栄養補
    助食品、特定保健用食品、経腸栄養食品、経腸栄養剤、
    医薬品部外品からなる群から選ばれる請求項１〜１１の
    いずれかに記載の飲食品。
12. 【請求項１２】 請求項１１に記載の飲食品を製造する
    ための核酸組成物の使用。