JP2000516246A - 化学療法における改良されたポリマー組成物とそれを用いた治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 プルロニック及び水溶性非毒性ホモポリマーと結合される抗腫瘍剤を含むことにより、結果として毒性を減少させ、及び／または抗癌活性を増加させる、改良された抗腫瘍組成物、及びそれらの処方の使用による治療方法。

Description

【発明の詳細な説明】 化学療法における改良されたポリマー組成物とそれを用いた治療方法 本発明は、抗腫瘍の処方の改良とその改良された処方の治療方法に関する。 発明の背景 様々な抗腫瘍剤が現在化学療法に使用されている（Ｃｕｔｔｉｎｇｓ Ｈａｎ ｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，７ｔｈ Ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅ ｒ １３，Ｓｃａｋｙ ａｎｄ Ｂａｒｎｅｓ参照。）。しかしながら、しばし ば複雑な構造のために、抗腫瘍剤は血流において、安定性が低いことが知られて いる。しばしば、化学療法剤は極端に不溶性で、細胞膜を通して移動することは ほとんどない。そのうえ、有効量の抗腫瘍剤は、血漿タンパク質との結合、さら にターゲットに到達する前に薬剤は血流で他の非特異的相互作用により、大部分 が損なわれうる。多剤耐性（ＭＤＲ）は、さらに化学療法剤でみられる複雑さで あり、結果として、構造的に異なる抗腫瘍剤にも宿主の抵抗性が生じることであ る。 現在使用されているある抗腫瘍剤は、患者に毒性があることが説明されてきた 。従って、（ｉ）これらの組成物の毒性を減少する、（ｉｉ）全体的に抗ガン活 性を増加する、あるいは（ｉｉｉ）その両方、のどれかが望まれる。同様に、化 学療法剤を処方される患者のＭＤＲを解決することが望まれる。 発明の詳細な説明 上記の問題は、両親媒性のブロックコポリマーと非毒性水溶性ホモポリマーあ るいはランダムコポリマーを含む組成物に配合された抗腫瘍剤 を投与することによって解決することができる。 このように、本発明は、両親媒性のブロックコポリマーと水溶性非毒性ホモポ リマーあるいはランダムポリマーとを結合した抗腫瘍剤からなる改良された組成 物に関連する。この結合により、（ｉ）毒性を減少する、（ｉｉ）抗ガン活性を 増加する、（ｉｉｉ）その両方のどれかが生じることが発見された。この結合に より、さらに腫瘍による障害をうけている患者のＭＤＲが減少されるか、あるい は回避されることができる。 結果として得られた組成物の有利な性質は、少なくとも一種の抗腫瘍剤、水溶 性あるいはランダム非毒性ポリマー及び疎水性コポリマー、（すなわちコポリマ ーは５０％以上の含量のポリ（オキシプロピレン）、あるいはPOPを含む。）の 組み合わせによりなっている。 一つの実施態様において、列挙されたホモポリマーは水溶性である。これらの ポリマーはｐＨ依存的にイオン性であるかあるいはイオン性電荷を有することが できる。非毒性水溶性ホモポリマーあるいはランダムコポリマーにおいて、好ま しい分子量は約０.５×１０³から０.５×１０⁵である。混合物中のこれらのポリ マーの好ましい濃度は約１×１０^-4から約２５％ｗ／ｖである。 ホモポリマーが使用される場合、ホモポリマーは好ましくは、ポリ（エチレン オキシド）あるいはＰＥＯである。ブロックコポリマーが使用される場合、ブロ ックコポリマーは、好ましくは、ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピ レン）ブロックコポリマーである。これらのＰＯＥ−ＰＯＰブロックコポリマー において、疎水性部分（ＰＯＰ）は５０％以上の濃度が有用であることが発見さ れた。 ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）は一般的に次の構造式の 一つによって特性が表されている。 または、 または、（ただし、式中、ｘ及びｚは独立に、約５から約１００の値であり、またｙは約 ２０から約８０の値である。）。そのようなブロックコポリマーは公知である（ Ｓｃｈｍｏｌｋａ，Ｌｏｃ．Ｃｉｔ．，８２（７），２５−３０（１９６７）； Ｓｔａｎｔｏｎ，Ａｍ．Ｐｅｒｆｕｍｅｒ．Ｃｏｓｍｅｔ．，７２（４），５４ −５８（１９５８）；ａｎｄ Ｎｏｎｉｏｎｉｃ Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ，Ｓ ｃｈｉｃｋ，Ｅｄ．，３００−３７１（Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ，１９６７）参照） 。これらの多数のコポリマーは商用上、一般名として「プルロニックス」（ｐｌ ｕｒｏｎｉｃｓ）及び「ポロキサマーズ」（ｐｏｌｏｘａｍｅｒｓ）として利用 できる。 与えられたブロックコポリマーの疎水性／親水性の性質は、オキシエチレン基 の数に対するオキシプロピレン基の割合に依存している。与えられた抗腫瘍剤あ るいは抗腫瘍剤との混合物に対して適切なバランスをうるためにＰＯＥ−ＰＯＰ の異なるブロックコポリマーの混合物を使用して、オキシエチレン基に対するオ キシプロピレン基の割合を選択し、適切な粒子サイズを保持させる。 様々なコポリマーが本発明で適切に使用される。本発明の組成物として、次の コポリマーを使用することができるが、それに限定されるものではない。 化学療法剤の潜在力を高めることにおいて、本発明のブロックコポリマーの効 果（毒性を減少する、及び／またはＭＤＲを減少する、あるいは回復する。）は 、疎水性部分の比率や疎水性部分の重量に依存している。総合的な組成物の効果 は、疎水性部分の重量、疎水性部分の比率あるいは両方のどれかを増加すること により、上がることが発見された。例えば、Ｌ６１はＰ８５より効果的であり、 Ｐ８５はＦ１０８より効果的であり、Ｆ１０８はＦ６８より効果的であることが 発見された。しかし、熟練した技術を有した者は、容易に、目的とした用途の特 異的な状況に基づいて、最も好ましいコポリマーを決定することができる。 本発明によると、好まれるホモポリマーはポリ（エチレンオキシド）あるいは ＰＥＯであり、次の式で表される。 （ただし、式中、ｎはＰＥＯの分子量の範囲が約０.５×１０³から約０.５×１ ０⁵になるような値である。より好ましく約１×１０³から約０.２×１０⁵、及び 最も好ましくは約１.５×１０³から約０.１５×１０⁵である。 しかし、本適用はＰＥＯの使用に制限されない。他の水溶性ポリマーは本発明 に従って使用されるであろう。適切な水溶性ポリマーは次のものを含むが、それ に限定されるものではない。例えば、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタク リルアミドコポリマー、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ビニルピロリドン）、 ポリ（ビニルアルコール）、多糖類、及びデキストランやヘパリンを含むそれら の誘導体。 最も好まし実施態様において、該組成物は抗腫瘍剤としてドキソルビシン（ｄ ｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ブロックコポリマーとしてプルロニ ックＬ６１（ＰｌｕｒｏｎｉｃＬ６１）、及びＰＥＯを含む。ダウノルビシン（ ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）やエピルビシン（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）のような 他のアントラサイクリン系抗生物質は同様に最も好ましい。プルロニックＬ６１ は、少なくとも約９０％の疎水性部分（ＰＯＰ）を含むことによって、特徴づけ られる。しかし、本発明は列挙された疎水性プルロニックポリマーに制限されな いことが高く評価されるであろう。 様々な抗腫瘍剤は本発明によって、適切に使用される。これらは、ビンブラス チン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、コルチシン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ）及びデ メコリン（ｄｅｍｅｃｏｌｉｎｅ）のようなアルカロイド、ロドマイシン（ｒｈ ｏｄｏｍｙｃｉｎ）群（例えば、ダウノルビシン（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ） 、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）あるいはエピルビシン（ｅｐｉｒ ｕｂｉｃｉｎ））を含むアントラサイクリン系抗生物質、マイトマイシン（ｍｉ ｔｏｍｙｃｉｎ）群（例えば、マイトマイシンＣ（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ）及び Ｎ−メチルマイトマイシンＣ（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ））、ブ レオマイシン（ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ）群（例えば、ブレオマイシンＡ₂（ｂｌｅ ｏｍｙｃｉｎＡ₂））、及び葉酸拮抗剤（メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅ ｘａｔｅ）、アミノプテラン（ａｍｉｎｏｐｔｅｒａｎ）、及びジデアザテトラ ヒドロ葉酸（ｄｉｄｅａｚａｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ））を 含むが、それに限定されるものではない。これらの薬剤のいくつかの混合物は発 明の範囲から予期される。 本発明は、これらの薬剤の潜在的な抗腫瘍活性についてではなく、処方を通じ てのこの活性の現れ方を改良することであることが評価されるであろう。本組成 物は、腫瘍による傷害をうけている及び処置を必要とするほ乳類に単独か、ある いは他の抗腫瘍剤、ステロイド等を含む他の 治療剤との組合せにより、水溶性処方で非経口的に投与されることができる。そ のような非経口投与ルートは、筋肉内、クモ膜下内、腹腔内、静脈内、動脈内を 含む。一つあるいはより多くの抗腫瘍剤を配合する一つあるいはより多くのブロ ックコポリマーの等張性ミセル溶液は非経口的投与として、使用することができ る。摂取量は特別な腫瘍、患者の状況、特異反応において滴定されなければなら ないのだけれど、投与量は典型的に、特異的な抗腫瘍剤に関連される。このよう に、特異的な投与量が各々の患者の状況に基づいて、出席する医者あるいは世話 人によって決められるであろう。例えば、体重ｋｇあたり約１ｍｇのダウノルビ シンを提供するためにダウノルビシンの等張性ミセル溶液が投与される。逆に、 ビンブラスチンは同様の様式で投与されるが、体重ｋｇあたり０.１から０.２ｍ ｇの低投与量で、従来の使い方に従って、投与される。 次の実施例は発明の性質をさらに特徴づけるが、発明の範囲を制限するように 解釈されるべきではない。それは添付される請求の範囲によって、唯一定義され る。実施例１ プルロニックＬ６１、ドキソルビシン及びＰＥＯよりなる３成分組成物の調製 ドキソルビシン（セントルイス シグマ社製：Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ ）は滅菌水に異なる濃度で溶解された（Ｐｒｅｐ．Ａ）。ついでポリエチレンオ キシド（ＰＥＧ８０００，セントルイス シグマ社製）は、１０％ｗ／ｖの濃度 でＰＢＳに溶解され、かつプルロニックＬ６１（ＢＡＳＦ）（０.２％ｗ／ｖ） が添加された。得られた混合物は好適には透明になるまで、４℃で撹拌された（ 約４５分間）（Ｐｒｅｐ．Ｂ）。Ｐｒ−ｅｐ．Ｂはその後、０.２μＭフィルタ ーを通して、ろ過滅菌された。Ｐｒｅｐ．ＡとＰｒｅｐ．Ｂはその後、等比率で いっしょに 混合され（Ｐｒｅｐ．Ｃ）、３７℃で３０分間インキュベートされた。実施例２ インビトロにおけるルイス肺癌（３ＬＬ）細胞系における抗癌活性の評価 転移性の高いクローナルルイス肺癌細胞（ｓｕｂｌｉｎｅ）Ｈ−５９（３ＬＬ ）はＰｒｅｐ．Ｃの細胞毒性活性を評価するために使用され、ドキソルビシンの 毒性と比較された。このために、細胞は１０％胎児牛血清が添加されたＲＰＭＩ １６４０培養液に懸濁され、９６−ウエルマイクロタイターフルートに２０００ −３０００個／ウエルに接種された。ドキソルビシンの最終濃度が１から１０， ０００ｎｇ／ｍｌの範囲であるＰｒｅｐ．Ｃが細胞に添加され、３７℃、５％二 酸化炭素条件下２時間インキュベートされた。その後、細胞はＲＰＭＩ１６４０ で３回洗浄され、４日間培養された。薬剤の細胞毒性は標準ＸＴＴアッセイによ って測定された。このために、滅菌ＰＢＳに溶解された１.５４μｇ／ｍｌのフ ェナジンメタ硫酸溶液の５μｌ／ｍｌを含むＲＰＭＩ１６４０中の滅菌１ｍｇ／ ｍｌのＸＴＴ溶液が細胞に添加され（１００μｌ／ウエル）、３７℃、５％二酸 化炭素条件下、４から１６時間インキュベートされた。λ₄₂₀での吸収はマイク ロタイターリーダーを使うことにより測定された。全ての実験が３度行われた。 ＳＥＭ値は１０％（Ｐ＜０.０５）以下であった。細胞成長を５０％抑制するＰ ｒｅｐ．Ｃ中の遊離ドキソルビシンとドキソルビシンの濃度（ＩＣ₅₀）が表１に 示された。 実施例３ 転移発達における３成分組成物の効果 転移性の高いルイス肺の癌（３ＬＬ−Ｈ５９）のクローナル（ｓｕｂｌｉｎｅ ）Ｈ５９がモデルとして使用された。この細胞系は腋窩領域に３ＬＬｃ皮下腫瘍 を生じるマウスに見られた、奇特発性肺転移を皮下に移植することによって、確 立された。本研究はこの細胞が良質の器官選択性転移を示すことを示した。これ らの細胞は５％二酸化炭素の湿潤雰囲気中３７℃で１０％胎児牛血清が添加され たＤ−ＭＥＭ中で培養された。７から１０回経代培養後、対数増殖期の細胞が次 の実験のためにトリプシンで処理された。 動物：メスのＣ５７ＢＬ／６マウスがチャールズリバーカナダインコーポレイテ ッド（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｃａｎａｄａ Ｉｎｃ．）（カナダ、キュ ベック州、セント コンスタント：Ｓｔ．Ｃｏｎｓｔａｎｔ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃ ａｎａｄａ）から得られ、６から７週齢のものが使用された。動物は光照射下（ １２時間 明／暗サイクル、６時に明かりがつけられた。）及び温度制御環境（ ２２±１℃）条件下、空気フィルターカバーを使用したケージ当たり５匹ずつに グループ化された。全ての動物の操作は滅菌薄板下行われた。動物は適宜プリナ マウスチョウ（Ｐｕｒｉｎａ Ｍｏｕｓｅ Ｃｈｏｗ）（Ｐｒｏ Ｌａｂ ＰＭＨ４０１８、ニューヨーク州、シラクース、アグウェイの商標：Ｔｒａｄｅ ｍａｒｋ ｏｆ Ａｇｗａｙ，Ｓｙｒａｃｕｓｅ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）と水に近 づけられた。動物の研究は「実験動物の世話と使用のガイドライン」に従って、 行われた。 動物は細胞（５×１０⁵個／動物）を静脈内注射され、ランダムに４つのグル ープに分けられた（１グループあたり１０匹の動物）。動物には次の処置が施さ れた。１）コントロール（等張性溶液）、２）Ｄｏｘ（５.０ｍｇ／ｋｇ）、３ ）Ｄｏｘ／Ｌ６１［（５.０ｍｇ／ｋｇ）／（０.２５％ｗ／ｖ）］、４）Ｄｏｘ ／Ｌ６１／ＰＥＧ８０００［（５.０ｍｇ／ｋｇ）／（０.２５％ｗ／ｖ）／（１ ％ｗ／ｖ）］。注入ボリュームは全実験のグループについて動物あたり１００μ ｌであった。処理は腫瘍接種後、１日、４日及び７日で３回行われた。 腫瘍接種後１６日で、動物が殺され、定期的に転移が観察された。転移形成は 典型的に肺にだけ検出されたが、全ての器官が定期的にスクリーンされた。器官 の除去後、器官表面の転移性コロニーが直接数えられた。器官表面の転移性小節 の数は５０か、あるいはそれ以上の場合、動物は５０の転移性部位を有すると考 えられた。結果は表２に示されている。データは転移性部位の数を平均±ＳＥＭ として、転移発達の発生を転移を有する動物の比率として表されている。統計的 な有意性はダンカン−クレイマーの多様分布試験（ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｒａｎｇｅ ｔｅｓｔ ｏｆ Ｄｕｎｃａｎ Ｋｒａｍｅｒ）によって計算され た。転移発達の発生の分析はフィッシャーの完全試験（Ｆｉｓｈｅｒ’ｓ ｅｘ ａｃｔ ｔｅｓｔ）を使用することにより、行われた。 実施例４ ＷＢＣ計算による組成物の効果 細胞：実施例３と同様 動物：実施例３と同様 動物は細胞（５×１０⁵個）を静脈注射され、ランダムに４つのグループに分 けられた（１グループあたり１０匹の動物）。動物には次の処置が施された。１ ）コントロール（等張性溶液）、２）Ｄｏｘ（５.０ｍｇ／ｋｇ）、３）Ｄｏｘ ／Ｌ６１［（５.０ｍｇ／ｋｇ）／（０.２５％ｗ／ｖ）］、４）Ｄｏｘ／Ｌ６１ ／ＰＥＧ８０００［（５.０ｍｇ／ｋｇ）／（０.２５％ｗ／ｖ）／（１％ｗ／ｖ ）］。注入ボリュームは全実験のグループについて動物あたり１００μｌであっ た。処理は腫瘍接種後、１日、４日及び７日で３回行われた。 腫瘍接種後１６日で、血液サンプル（２０μｌ）が尾側部静脈から集められた 。各々のサンプルは４００μｌの３％酢酸に添加され、２０分間インキュベート され、かつ白血球の数が数えられた（血液ｍｌあたりＷＢＣ）。 結果は表３に示されている。データはスチュウーデントの標準（Ｓｔｕｄｅｎ ｔ’ｓ ｃｒｉｔｅｒｉａ）によって処理され、平均±ＳＥＭ で表された。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ， ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ， ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，Ｎ Ｚ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 カバノフ，アレクサンダー ブイ アメリカ合衆国，ネブラスカ州 68144, オマハ，サウス 126ス ストリート 1304 (72)発明者 アラクホフ，バレリー ユ カナダ国，ケベック州 エッチ９エックス ３ブイ４，バイエーディー’ウルフェ, デビッド ケネディー 48

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 抗腫瘍剤よりなる医薬組成物において、該剤が少なくとも一種の両親媒 性ブロックコポリマー及び少なくとも一種の水溶性ホモポリマー及びランダムコ ポリマーのミセルに配合されてなる改良された組成物。 ２． 該ブロックコポリマーはポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピ レン）からなる請求の範囲第１項に記載の組成物。 ３． 該ブロックコポリマーのポリ（オキシプロピレン）部分はブロックコポ リマーの少なくとも５０重量％よりなる請求の範囲第２項に記載の組成物。 ４． 該非毒性水溶性ホモポリマーあるいはランダムコポリマーの分子量範囲 は約０.５×１０³から約０.５×１０⁵である請求の範囲第１項に記載の組成物。 ５． 該非毒性水溶性ポリマーの濃度は約１×１０^-4から約２５％ｗ／ｖであ る請求の範囲第１項に記載の組成物。 ６． 該非毒性水溶性ポリマーはＮ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリ ルアミドコポリマー、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポ リ（ビニルアルコール）、多糖類及びそれらの誘導体よりなる群から選ばれたも のである請求の範囲第５項に記載の組成物。 ７． 該水溶性非毒性ホモポリマーはポリ（エチレンオキシド）である請求の 範囲第１項に記載の組成物。 ８． 該抗腫瘍剤はアントラサイクリン系抗生物質である請求の範囲第１項に 記載の組成物。 ９． 該アントラサイクリン系抗生物質はドキソルビシン、ダウノルビシンお よびエピルビシンよりなる群から選ばれたものである請求の範囲第８項に記載の 組成物。 １０． 該抗腫瘍剤はドキソルビシンであり、該ブロックコポリマーはプルロニ ックＬ６１であり、かつ該ホモポリマーはＰＥＯである請求の範囲第１項に記載 の組成物。 １１． 請求の範囲第１項に記載の組成物の治療量をほ乳類に投与することより なる腫瘍から傷害をうけるほ乳類を治療する方法。