JP2000512151A - 糸状菌におけるヘムタンパク質生産を増加せしめるための方法 - Google Patents
糸状菌におけるヘムタンパク質生産を増加せしめるための方法Info
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.ヘムタンパク質の製造方法であって、 (a)糸状菌細胞中に、 (i)前記糸状菌細胞に対して内因性の第1核酸配列によりコードされている ヘム生合成酵素の発現を指令することができる1又は複数の第1制御配列、ここ で前記1又は複数の第1制御配列は前記第1核酸配列に作用可能に連結されてお り;そして/又は (ii)ヘム生合成酵素をコードする1又は複数の第2核酸配列の1又は複数の コピーを導入し; (b)ヘムタンパク質及びヘム生合成酵素の生成のために適切な栄養培地にお いて前記糸状菌細胞を培養し;そして (c)前記糸状菌細胞の栄養培地から前記ヘムタンパク質を回収する; ことを含んで成る方法。 2.1つ又は複数の第1制御配列が前記糸状菌中に導入される請求の範囲第1 項記載の方法。 3.前記第1制御配列が、リーダー、ポリアデニル化配列、プロモーター、プ ロペプチドコード領域、シグナルペプチドコード領域、及び転写ターミネーター から成る群から選択される請求の範囲第2項記載の方法。 4.前記1又は複数の第1制御配列が糸状菌株から得られるものである請求の 範囲第2項記載の方法。 5.1又は複数の第2核酸配列のいずれか1つ又は複数のコピーが糸状菌細胞 中に導入される請求の範囲第1項記載の方法。 6.前記1又は複数の第2核酸配列が、その第2核酸配列の発現を方向づける ことができる1又は複数の第2制御配列に作用可能に 連結される請求の範囲第5項記載の方法。 7.前記1又は複数の第2核酸配列が糸状菌株から得られる請求の範囲第5項 記載の方法。 8.前記1又は複数の第2核酸配列が5−アミノレブリン酸シンターゼをコー ドする請求の範囲第5項記載の方法。 9.前記1又は複数の第2核酸配列が、配列番号2に示されるアミノ酸配列を 有する5−アミノレブリン酸シンターゼをコードする請求の範囲第8項記載の方 法。 10.前記1又は複数の第2核酸配列が、配列番号1に示される核酸配列を有す る請求の範囲第9項記載の方法。 11.前記1又は複数の第2核酸配列が、ポルホビリノーゲンシンターゼをコー ドする請求の範囲第5項記載の方法。 12.前記1又は複数の第2核酸配列が、配列番号4に示されるアミノ酸配列を 有するポルホビリノーゲンシンターゼをコードする請求の範囲第11項記載の方法 。 13.前記ポルホビリノーゲンシンターゼが、配列番号3に示される核酸配列を 有する請求の範囲第12項記載の方法。 14.前記1又は複数の第2核酸配列が、ポルホビリノーゲンデアミナーゼをコ ードする請求の範囲第5項記載の方法。 15.前記1又は複数の第2核酸配列が、ウロポルフィリノーゲンシンターゼを コードする請求の範囲第5項記載の方法。 16.前記1又は複数の第2核酸配列が、ウロポルフィリノーゲンデカルボキシ ラーゼをコードする請求の範囲第5項記載の方法。 17.前記1又は複数の第2核酸配列が、コプロポルフィリノーゲンオキシダー ゼをコードする請求の範囲第5項記載の方法。 18.前記1又は複数の第2核酸配列が、プロトポルフィリノーゲンオキシダー ゼをコードする請求の範囲第5項記載の方法。 19.前記1又は複数の第2核酸配列が、フェロケラーゼをコードする請求の範 囲第5項記載の方法。 20.前記制御配列の1又は複数のコピー及び前記第2核酸配列の1又は複数の コピーが前記糸状菌細胞中に導入される請求の範囲第1項記載の方法。 21.前記ヘムタンパク質をコードする第3核酸配列の1又は複数のコピーを、 段階a又は段階bの前、前記糸状菌細胞中に導入することをさらに含んで成る請 求の範囲第1項記載の方法。 22.ヘム又はヘム類似体源を、栄養培地中に導入することをさらに含んで成る 請求の範囲第1項記載の方法。 23.鉄源を、栄養培地中に導入することをさらに含んで成る請求の範囲第1項 記載の方法。 24.前記ヘムタンパク質がオキシドレダクターゼである請求の範囲第1項記載 の方法。 25.前記オキシドレダクターゼが、カタラーゼ、オキシダーゼ、オキシゲナー ゼ、ハロペルオキシダーゼ又はペルオキシダーゼである請求の範囲第24項記載の 方法。 26.前記オキシドレダクターゼがカタラーゼである請求の範囲第25項記載の方 法。 27.前記オキシドレダクターゼがオキシダーゼである請求の範囲第25項記載の 方法。 28.前記オキシドレダクターゼがオキシゲナーゼである請求の範囲第25項記載 の方法。 29.前記オキシドレダクターゼがハロペルオキシダーゼである請求の範囲第25 項記載の方法。 30.前記オキシドレダクターゼがペルオキシダーゼである請求の範囲第25項記 載の方法。 31.前記ペルオキシダーゼが、コプリナス、アルトロミセス又はファネロカエ トの種から得られる請求の範囲第30項記載の方法。 32.前記ペルオキシダーゼがコプリナスの株から得られる請求の範囲第31項記 載の方法。 33.前記ペルオキシダーゼがコプリナス・シネレウスの株から得られる請求の 範囲第32項記載の方法。 34.前記ペルオキシダーゼがコプリナス・マクロリゾスの株から得られる請求 の範囲第32項記載の方法。 35.前記ヘムタンパク質が前記糸状菌細胞に対して内因性である請求の範囲第 1項記載の方法。 36.前記ヘムタンパク質が前記糸状菌細胞に対して外来性である請求の範囲第 1項記載の方法。 37.前記糸状菌細胞が、アクレモニウム、アスペルギラス、フサリウム、ヒュ ーミコラ、マイセリオプソラ、ムコル、ニューロスポラ、ペニシリウム、チエラ ビア、トリポクラジウム又はトリコダーマの種の細胞である請求の範囲第1項記 載の方法。 38.前記糸状菌細胞がアスペルギラス細胞である請求の範囲第37項記載の方法 。 39.前記アスペルギラス細胞が、アスペルギラス・オリザエ細胞である請求の 範囲第38項記載の方法。 40.前記アスペルギラス細胞が、アスペルギラス・ニガー細胞である請求の範 囲第38項記載の方法。 41.(i)糸状菌細胞に対して内因性の第1核酸配列によりコードされるヘム 生合成酵素の発現を方向づけることができる1又は複数の第1制御配列、ここで 前記1又は複数の第1制御配列は前記第1核酸配列に操作可能的に連結され;及 び/又は (ii)ヘム生合成酵素をコードする1又は複数の第2核酸配列の 1又は複数のコピーを含んで成る、ヘムタンパク質を生成することができる組換 え糸状菌細胞。 42.(i)糸状菌細胞に対して内因性の第1核酸配列によりコードされるヘム 生合成酵素の発現を方向づけることができる1又は複数の第1制御配列、ここで 前記1又は複数の第1制御配列は前記第1核酸配列に操作可能的に連結され;及 び/又は (ii)ヘム生合成酵素をコードする1又は複数の第2核酸配列の1又は複数の コピーを、組換え糸状菌細胞中に導入することを含んで成る、組換え糸状菌細胞 を生成するための方法。
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