JP2000507559A

JP2000507559A - 毒液による咬傷および刺傷の処置法

Info

Publication number: JP2000507559A
Application number: JP9534695A
Authority: JP
Inventors: コーエン，マーレーン・エル; ジョンソン，カーク・ダブリュー
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1996-03-25
Filing date: 1997-03-17
Publication date: 2000-06-20
Also published as: AU711748B2; WO1997035479A1; CA2250459A1; EA199800859A1; EP0797994A2; CN1219104A; AU2450597A; BR9708351A; EP0797994A3; US5886003A

Abstract

(57)【要約】この発明は必要とする哺乳類に５−ＨＴ₂拮抗剤の１種またはそれ以上を投与することを含む、咬傷および刺傷の毒液による症状の処置法または緩解法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】毒液による咬傷および刺傷の処置法本発明は５−ＨＴ₂拮抗剤を咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善するために使用する方法に関する。毒液による咬傷および刺傷は毒液の種類および個体または動物の感受性に依存して種々の反応を起こす。場合によっては、咬傷および刺傷からの毒液は致命的なこともある即時的過敏症であるアナフィラキシーを起こす。別の場合には、ある種の毒液は皮膚に「局所的」反応を起こすことがある。皮膚の局所的反応は、１）範囲および期間が限られた「非アレルギー性」反応として、または２）典型的には範囲が大きく、期間の長い「アレルギー性」または「大規模」局所反応として、特徴付けられる。膜翅類毒液（蜂、黄蜂、オオクマバチ、およびスズメバチ）に関しては、「非アレルギー性局所反応は毒液成分による毒性反応であり、一方では、大規模局所反応は毒液の蛋白質に対するアレルギー性反応によって起こされると思われる」。D.N.Wright著、「Local Reactions To Stinging Insects (Hymenoptera)(刺傷性昆虫（ハイメノプテラ）に対する局所反応)」、Allergy Proc.、１１巻（１号）：２３〜２８頁（１９９０年１月〜２月）参照。毒液による咬傷および刺傷を受けると、毒液によって、痒み、紅斑、尋麻疹、血管浮腫、軟部組織腫張、患部の炎症および患部における痛みを含む種々の症候が現れることがある。皮下注射すると、咬傷および刺傷からの毒液の多くは近接する血管からの血液漏出を誘導する。V.Cattel著、「Focal Mesangial Proliferative Glomeruloneph ritis In The Rat Caused By Habu Snake Venom:The Role of Platelets(ラットにおけるハブ蛇毒に起因する局所性糸球体増殖性腎炎：血小板の役割)」、Britis h J.of Exp.Pathol.、６０巻（２号）：２０１〜２０８頁（１９７９年４月）参照。これに加えて毒液は血管外漏出に伴う炎症を構成する要素の２種である血小板の凝集および肥満細胞の脱顆粒化を誘導する。毒液の注射によってセロトニンの放出も起きる。例えばY.Ozakiほか著、「Mastoparan,A Wasp Venom,Activates Platelets Via Pertussis Toxin-Sensitive GTP-Binding Proteins(黄蜂毒液の１種マストパランは百日咳トキシンに感受性のＧＴＰ結合蛋白質を経て血小板を活性化する)」、Biochem. Biophys.Res.Commun.、１７０巻（２号）：７７９〜８５頁（１９９０年７月３１日）およびC.Wangほか著、「Experimental Study of Chinese Agkistrodon Act us Venom In Activation Of Rabbit Platelets In Vivo(ウサギ血小板の生体内活性化におけるチャイニーズアグキストロドンアクタス毒液の実験的研究)」、Hu a His I Ko Ta Hsueh Hsueh Pao、２５巻（１号）：３８〜４０頁（１９９４年３月）参照。４０年以上前のセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン、５−ＨＴ）の発見以来、多数の研究結果が蓄積されて中枢神経系および末梢系の双方でセロトニンが哺乳類体内の機能に重要な役割を果たすことが示されている。中枢神経系の形態学的研究では脳幹に発するセロトニン作動性ニューロンは非常に広汎な系を形成しており、脳および脊髄の殆どの領域に投射していることが証明されている。 R.A.O'Brien著、「Serotonin in Mental Abnormalities(精神的異常におけるセロトニン)」、１巻：４１頁（１９７８年）;H.W.M.Steinbusch著、「HANDBOOK OF CHEMICAL NEUROANATOMY(化学的神経解剖学ハンドブック)」、３巻、ＩＩ部：６８頁（１９８４年）;N.E.Adenほか著、Acta Physiologica Scandinavia、６７巻：３１３頁(１９６６年)。脳および脊髄に高濃度の５−ＨＴが存在することを示す生化学的な事実はこれらの研究結果を補足している。H.W.M. Steinbusch著、前出。このような広汎なシステムでは５−ＨＴが様々な行動、生理学的応答および中枢神経系に起源を有する疾患の発現に関与すると思われていることは驚くに当たらない。これらには、たとえば睡眠、摂食、痛覚、体温制御、血圧制御、抑欝、精神分裂およびその他の身体的病状のような広範囲な領域を包含する。R.W. Fuller著、BIOLOGY OF SEROTONERGIC TRANSMISSION(セロトニン作動性伝達の生物学)」、２２１頁（１９８２年）;D.J.Boullin著、「SEROTONIN IN MENTAL ABNORMALITIES(精神的異常におけるセロトニン)」、１巻、３１６頁（１９７８年）;J.Barchasほか著、「Serotonin and Behavior(セロトニンと行動)」、 (１９７３年)。セロトンは末梢系でも重要な役割を果たす。例えば体内セロトニンの約９０％は消化管内で合成され、この系内でセロトニンは様々な収縮、分泌、および電気生理学的な効果を媒介することが見出されている。セロトニンは血小板に取込まれ、血小板の凝集に際して放出されて、循環系がセロトンを放出し、応答できる末梢性ネットワークの別種の例であることを示す。体内にセロトニンが広範囲に分布しているので、セロトニン作動性システムに影響を及ぼす薬剤に莫大な関心が持たれていることが理解できる。殊に、受容体特異的な作動剤および拮抗剤が不安症、欝病、高血圧、頭痛、強迫的疾患、精神分裂症、自閉症、たとえばアルツハイマー病、パーキンソン病、およびハンチントンの舞踏病のような神経変性疾患、および癌化学療法由来の嘔吐を含む広範囲な疾患の処置について興味を持たれている。M.D.Gershonほか著、「THE PERIPHERAL ACTIONS OF 5- HYDROXYTRYPTAMIN(５−ヒドロキシトリプタミンの末梢性作用)」、２４６頁（１９８９年）;P.R.Saxenaほか著、Journal of Cardiovascular Pharmacology、１５巻：補７頁(１９９０年)。セロトニンは細胞表面にある特殊化された受容体に結合することによって細胞生理学への影響を発揮する。セロトニンを含む多数の神経伝達物質およびホルモンに対する受容体には多数の型が存在する。多重で構造的に差のあるセロトニン受容体の存在はサブタイプに選択的な薬理学的薬剤を製造できる可能性を提供する。このような化合物の開発は、個々の受容体サブタイプの活性化は中枢および／または末梢性セロトニン作動性システムにある異なる部分の特異的作用に影響を及ぼすであろうから、副作用の少ない新規で選択性の優れた治療用薬剤をもたらすこととなろう。このような特異性の例は血管系を用いて例示できる。ある種の血管では、内皮細胞にある一種の５−ＨＴ受容体を刺激すると血管拡張を起こすが、平滑筋細胞にある５−ＨＴ受容体を刺激すると血管収縮を起こす。最近では、セロトニン受容体の主な型（５−ＨＴ₁、５−ＨＴ₂、５−ＨＴ₃、５−ＨＴ₄、５−ＨＴ₅、５−ＨＴ₆、および５−ＨＴ₇）には薬理学的または構造的な相違に基づいて形式的に分類すると約１４から１８種の異なる受容体を含むとされている。[種々の５−ＨＴ受容体タイプの薬理学的効果および臨床的意義の優れた綜説には、Glennonほか著、Neuroscience and Behavioral Reviews、１４巻：３５頁（１９９０年）を参照]。発見。セロトニン受容体のクラスの一つは５−ＨＴ₂である。このクラスには数種のサブクラスが存在することが知られている。このサブクラスには、５−ＨＴ_2A、５−ＨＴ_2B、および５−ＨＴ_2Cを含む。サブタイプ５−ＨＴ_2Aは、これに限定するものではないが、血管平滑筋、血小板、肺臓、ＣＮＳおよび消化管を含む多数の組織中に存在する。この受容体は数種の効果：例えば血管収縮、血小板凝集、および気管支収縮など、に関連すると思われている。５−ＨＴ_2B受容体はラット肺臓、胃底、子宮、膀胱、および大腸に局在する。ヒトにおける５−ＨＴ_2B受容体の局在で興味深い分野は、これに限定するものではないが、脳および血球である。サブタイプ５−ＨＴ_2CはＣＮＳに局在し、脈絡叢には高濃度で存在する。咬傷および刺傷の毒液による患者集団の現行の処置方法が全般的に不満足であるために、さらに有効で安全な処置法に対する必要性が現存する。本発明はそのような処置法を提供する。この発明は必要とする哺乳類に５−ＨＴ₂拮抗剤として活性を示す化合物１種またはそれ以上を有効量投与することを含む、哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状の処置法または改善法を提供する。本製剤例および実施例で使用する用語および略号は、特段の指摘がない限り、通常の意味を有する。例えば「℃」は摂氏の度を示し；「Ｎ」は規定度または規定を示し；「ｍｍｏｌ」はミリモルを示し；「ｇ」はグラムを示し；「ｍＬ」はミリリットルを意味し、「Ｌ」はリットルを意味し；「Ｍ」はモルまたはモル濃度を示し；「ＭＳ」は質量スペクトル術を示し；「ＩＲ」は赤外線スペクトル術を示し；「ＮＭＲ」は核磁気共鳴スペクトル術を示す。用語「刺傷」は各個体に導入された昆虫またはその他の動物の毒液（バイオトキシン）によって起きる障害、およびそれと共にその導入を起こす器官が起こす機械的外傷を示す。用語「毒液」は毒を示し、さらに特定的には昆虫またはその他の動物が正常に分泌する毒性物質を示す。本明細書に使用する用語「毒液」はニューロトキシンと考えられる物質は含まないものとする。毒液を分泌することが知られている昆虫またはその他の動物の例には、これに限定するものではないが、ある種の蛇、蟻、クラゲ、ヒドラ、カツオノエボシ、アカエイ、イソギンチャク、ウニ、コーンスネイル、クモ、サソリ、蚊、ハチ、クマバチ、スズメバチ、黄蜂、ブヨおよび蝿を包含する。「炎症」は広範囲な刺激または発作に対する組織の非特異的な反応であって、炎症部位に物質の放出が起きて痛みを起こす。現在では肥満細胞、好中球およびＴ細胞が炎症性皮膚病状の病理生理学ならびにその他の生理学的疾患に関連していることが認識されている。本発明の方法は５−ＨＴ₂受容体を利用する。５−ＨＴ拮抗剤の５−ヒドロキシトリプタミン２(５−ＨＴ₂)ファミリーには５−ＨＴ_2A、５−ＨＴ_2Bおよび５ −ＨＴ_2C受容体の３種がある。これらの受容体はＧプロテイン結合受容体であって、少なくともクローニングされたこれらの受容体においてはホスホイノシチド代謝に明確に連環している。これらの受容体は配列相同性を共有しており、同じパターンのイントロンおよびエクソンを有する。リガンドに対するこれらの受容体の特異性の類似性はさらにこのファミリーの受容体の共通性を示す。好ましくは、本発明の方法は５−ＨＴ_2B拮抗剤を利用する。本発明は、必要とする哺乳類に有効量の５−ＨＴ₂受容体拮抗剤の１種またはそれ以上を投与することを含む、咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する方法を提供する。記載のように本方法では５−ＨＴ₂拮抗剤の１種またはそれ以上を使用する。態様の一つでは５−ＨＴ₂拮抗剤を１種だけ使用する。ある例では、この５−ＨＴ₂拮抗剤は５−ＨＴ₂受容体のサブタイプの１種(すなわち、５−ＨＴ_2A、５−ＨＴ_2Bまたは５−ＨＴ_2Cに対する特異性)にのみ親和性を有するものである。他の例では、この５−ＨＴ₂拮抗剤は複数の５−ＨＴ₂サブタイプ（すなわち、５−ＨＴ_2Aおよび５−ＨＴ_2B；５−ＨＴ_2Aおよび５− ＨＴ_2C；５−ＨＴ_2Bおよび５−ＨＴ_2C；または５−ＨＴ_2A、５−ＨＴ_2Bおよび５−ＨＴ_2Cに対する特異性）に親和性を有するものである。別種の態様では、複数の５−ＨＴ₂拮抗剤を使用するものである。これらの５−ＨＴ₂拮抗剤は各々が特異的な５−ＨＴ₂受容体サブタイプ、複数の５−ＨＴ₂受容体サブタイプに対して親和性を有することができるか、または特異的な受容体サブタイプおよび複数の受容体サブタイプに親和性を有する５−ＨＴ₂拮抗剤の混合物であることができる。本発明のさらに好適な態様では、必要とする哺乳類に有効量の５−ＨＴ_2B 受容体拮抗剤の１種またはそれ以上を投与することを含む、咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する方法を提供する。当技術分野の通常の熟練者は、本発明で使用される拮抗剤は５−ＨＴ₂受容体サブタイプの１種またはそれ以上に親和性を有することもあるが、他の５−ＨＴ受容体クラスとの間にもある程度の交差反応性があってもよいことを認識することとなろう。化合物または組成物は５−ＨＴ受容体のクラスの１つまたはそれ以上に対して親和性を有するとの理由のみで本方法における使用から除外されることはない。最近の報告には本方法に利用できる種々の５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が多数記載されている。例えば、ここに参考のために引用する米国特許第５４２８０３６号は式ＩＩ：［式中、ＸはＣ０、ＣＳ、またはＣＨ₂から選択されるが、ただし、ＸがＣＯまたはＣＳであれば、Ｒは i）水素、Ｃ₁〜Ｃ₂₄−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₂₄−アルケニル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルケニル、Ｃ₄〜Ｃ₃₂−シクロアルキル(またはアルケニル)アルキル(またはアルケニル)(これらは、要すればヒドロキシ基１個または２個で置換されていてもよい)、または、または要すればハロゲン、トリフルオロメチル、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルチオ、アシルオキシまたはシアノから構成される群から選択された置換基１種またはそれ以上で置換されていてもよいフェニル；ｉｉ）ＹＲ¹［ここに、ＹはＯまたはＳであり、Ｒ¹は前記ｉ）でＲについて定義した置換基から選択される］;およびｉｉｉ）ＮＲ²Ｒ³［ここに、Ｒ²およびＲ³は前記ｉ）でＲについて定義した置換基から独立に選択されるか、またはＲ²およびＲ³は結合して窒素原子１個から３個および酸素原子または硫黄原子０個から３個を含む４員環から８員環のヘテロ環を形成する］から構成される群から選択される。ただし、ＸがＣＨ₂であれば、Ｒはｉｖ）前記ｉｉ）で定義した基ＹＲ¹；ｖ）前記ｉｉｉ）で定義した基ＹＲ²Ｒ³；またはｖｉ）基ＯＣ(Ｏ)Ｒ⁴［ここに、Ｒ⁴はＲ¹について定義したものである］から構成される群から選択される。］で示される化合物およびその医薬的に許容される塩からなる一群の５−ＨＴ₂拮抗剤を記載している。別群の５−ＨＴ₂拮抗剤にはここに参考のために引用する米国特許第５２２９３８２号に記載された化合物を含むが、これは一般式ＩＩＩ：で示される。さらに別群の５−ＨＴ₂拮抗剤は式ＩＶ：［式中、Ａｒはフェニル基であるか、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、およびシアノから選択された置換基少なくとも１個で置換されたフェニル基であるか、２−チエニル、３−チエニル、２− フラニル、３−フラニル、２−オキサゾリル、２−イミダゾリル、２−ピリジル、３−ピリジル、および４−ピリジルから選択されたヘテロ芳香環基である；点線はおのおの二重結合であってもよいことを示す；ＸおよびＸ¹は水素、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルホニル、低級アルキルアミノ、低級ジアルキルアミノ、シアノ、トリフルオロメチル、およびトリフルオロメチルチオから構成される群から独立に選択される；またはＸおよびＸ¹は結合して５員環から７員環の炭素環を形成する；Ｒ¹は水素、低級アルキル、およびヒドロキシ１個または２個で置換された低級アルキル、から構成される群から選択される；但し、Ｘが水素またはフルオロである時には、Ｒ¹は水素であることはできないものとする；Ｒは式：［式中、ｎは整数２〜６である；Ｗは酸素または硫黄である；Ｖ¹はＯＲ⁴、ＳＲ⁵ 、ＣＨＲ⁶Ｒ⁷、およびＮＲ⁸Ｒ⁹から選択されるが、ここにＲ³からＲ⁹は水素、低級アルキル、低級アルケニル、シクロアルキル、１個または２個のヒドロキシで置換された低級アルキル、から構成される群から独立に選択される］で示される置換基である；およびその医薬的に許容される酸付加塩またはプロドラッグ］で示される拮抗剤を記載するここに参考のために引用する米国特許第５４５７１１５号のものである。本方法に利用できるなお別群の５−ＨＴ₂拮抗剤は式Ｖ：［式中、Ｒ¹、Ｒ²、およびＲ³は独立に水素原子または直鎖または分枝状鎖のＣ₁〜Ｃ₆−アルキル基を表す；Ｘは水素またはハロゲン原子を表す；Ｚはカルボニルまたはメチレン基を表す；付加塩］で示される拮抗剤を記載する、ここに参考のために引用する米国特許第５４８０８８５号のものを含む。本方法に利用できるなお別群の５−ＨＴ₂拮抗剤は式ＶＩ：［式中、ＲはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルまたはアリルである；Ｒ¹はＣ₁〜Ｃ₃−ヒドロキシアルキルまたはＣ₁〜Ｃ₃−ジヒドロキシアルキルである；およびＲ²はＨまたはＣＨ₃である；またはその医薬的に許容される塩］で示される化合物を記載するここに参考のために引用する米国特許第４５６３４６１号のものを含む。前記化合物の群は利用可能な５−ＨＴ₂拮抗剤受容体の例示に過ぎない。これらの化合物群の列挙は包括的であることを意味するものではなく、本発明の方法はいかなる５−ＨＴ₂受容体拮抗剤を採用してもよく、またいかなる特定の化合物群に限定されるものでもない。拮抗剤のさらに好適な群は式ＶＩＩ：［式中、Ｒ¹は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ³は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ⁶は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆−アルケニル、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ⁵、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルカノイル、ＣＯ₂Ｒ^5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル)_m−アミノ、ＮＯ₂、−ＳＲ⁵、および− ＯＲ⁵から構成される群から選択される；Ｒ⁷およびＲ⁸は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆-アルケニル、ＮＯ₂、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ⁵、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルカノイル、Ｃ₇〜Ｃ₁₆−アリールアルキル、ＣＯ₂Ｒ^5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆− アルキル)_m−アミノ、−ＳＲ⁵、および−ＯＲ⁵から構成される群から独立に選択される；ｎは１、２、または３である；ｎ’は１、２、または３である；ｍは１または２である；Ｒ⁵は独立に水素またはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである。Ｒ^5'はＣ₁ 〜Ｃ₄−アルキルである；---は所望による結合である；およびその医薬的に許容される塩または溶媒物］で示される５−ＨＴ₂受容体拮抗剤である。式ＶＩＩで示される化合物の例は、これに限定するものではないが、次のものを含む：スピロ−９，９[２−(３，４−ジクロロ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール、スピロ−９，９[２−(３，４−ジメトキシ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−メチル−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール、スピロ−９，９[２−(３，４−ジエトキシ)−１，２，３，４ −テトラヒドロナフチル]−５−メチル−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ −ピリドインドール、スピロ−９，９[２−(３，５−ジクロロ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−ジメチルアミノ−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール、スピロ−９，９[２−(３−フルオロ−４−クロロ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−エチル−１，２，３，９− テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール、スピロ−９，９[２(３，４−ジメトキシ)−１，２，３，４−インドール、スピロ−９，９[２−(３,４−ジメトキシ) −１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−ブロモ−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール、スピロ−９，９[２-(３，４−ジメトキシ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５−クロロ−１，２，３，９− テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール。これらの化合物の合成はここに参考のために引用する１９９６年３月２５日に出願した同時係属米国暫定出願第６０／０１４１１９号、代理人包袋番号Ｐ−１０６５６号に記載されている。特定的実施例６個を含むこのクラスの典型的化合物の合成法は以下に詳記する。式ＶＩＩで示される化合物は当技術分野で理解される化学的工程を用いて製造できる。実施例は単なる例示であり、本発明の範囲限定は意図していない。下記のインドール出発物質（１ａ、１ｂ、１ｃ）は購入(１ａ)、Bartoliの操作法［Bartoli,G.ほか著、Tetrahedron Lett.、１９８９年：３０号、２１２９頁］に従って合成（１ｂ）または２−ヨード−４，６−ジメチルアニリン（５” ’）から合成（１ｃ）した。この工程を次の反応式に例示する：反応式ＩＶ２−ヨード−４，６−ジメチルアニリン(５”’)合成法は次の通りに行うことができる：５”’(２４ミリモル)、ＣｕＩ(０．０５当量)、および(ＰＰｈ₃)₂ ＰｄＣｌ₂（０．０５当量）を乾燥トリエチルアミン（３０ｍＬ）に懸濁し、Ａｒ雰囲気下に、これにトリメチルシリルアセチレン（１．１当量）を添加し、得られた混合物を３時間撹拌した。次に、溶媒を真空除去し、残渣をヘキサン／酢酸エチル（３：１）を溶離液に使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して定量的収率で６”を得た。６”’（２３ミリモル）およびＣｕＩ（２当量）の乾燥ジメチルホルムアミド(５０ｍＬ)スラリーをＡｒ雰囲気下に100℃に２．５時間加熱した。室温まで冷却した後に反応混合物を濾過し、固体をエーテル（２０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を水（３×５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、溶媒を蒸発乾固した。粗製生成物をヘキサン／酢酸エチル３：１）を溶離液とすて使用するフラッシュクロマトグラフィーで精製して１ｃ（１．５ｇ、４５％）を得た。実施例１対応するトリプタミン塩酸塩（３ａ）（１ｇ）と対応するジメトキシテトラロン（３ｂ）（１ｇ）とのエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を１２８時間還流した。この時間の後に反応混合物を室温まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。融点：２６１℃。理論値実験値Ｃ６９．２５６９．３４Ｈ６．８２６．９７Ｎ７．０２６．９８実施例２対応するトリプタミン塩酸塩（２ａ）（５７５ｍｇ）および対応するケトン（２ｂ）（４６４ｍｇ）のエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を１２８時間還流した。この時間の後に反応混合物を室温まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。収量：５２５ｍｇ。理論値実験値Ｃ７４．４３７４．３６Ｈ６．８４６．８４Ｎ８．２７８．２５ＭＳ：３０１。実施例３対応するトリプタミン塩酸塩（２ａ）（５００ｍｇ）および対応するケトン（２ｂ）（３９６ｍｇ）のエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を７２時間還流した。この時間の後に反応混合物を約０℃まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。収量：２６２ｍｇ。ＭＳ：２７４。実施例４対応するトリプタミン塩酸塩（４ａ）（5００ｍｇ）および対応するケトン（４ｂ）（３９６ｍｇ）のエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を７２時間還流した。この時間の後に反応混合物を２４時間に約０℃まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。質量スペクトル分析を行ってｍｉ２７４を得た。実施例５対応するトリプタミン塩酸塩（５ａ）（５００ｍｇ）および対応するケトン（５ｂ）（３９７μＬ）のエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を７２時間還流した。この時間の後に反応混合物を１４時間に約０℃まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。収量：６３０ｍｇ。理論値実験値Ｃ７３．９５７３．３２Ｈ６．５２６．７３Ｎ８．６２８．５９ＭＳ：２８８。実施例６対応するトリプタミン塩酸塩（４ａ）（１ｇ）および対応するケトン（４ｂ）（８００ｍｇ）のエタノール（１０ｍＬ）懸濁液を７２時間還流した。この時間の後に反応混合物を約２４時間に約０℃まで冷却し、濾過した。粗製の固体を洗浄し、乾燥した。収量：５５０ｍｇ。理論値実験値Ｃ７０．６７７０．８８Ｈ７．０６７．１６Ｎ７．８５７．８８これとは別の５−ＨＴ₂受容体拮抗剤の好適な一群はここに参考のために引用するＷＯ９５／２４２００に記載されている化合物であって、式Ｉ： [式中、Ｑは水素または(ＣＨＲ₂)Ｒ₄である；Ｒ₁は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₂は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₃は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₄はＣ₅〜Ｃ₈−シクロアルキル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₅〜Ｃ₈− シクロアルケニル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、双環性または置換双環性基である；Ａは式：および [式中、Ｒ₆およびＲ₇は独立に水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆−アルケニル、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ₅、Ｃ₁ 〜Ｃ₁₀−アルカノイル、ＣＯ₂Ｒ_5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル)_mアミノ、ＮＯ₂、 −ＳＲ₅、またはＯＲ₅である；ｍは１または２である；Ｒ₅は独立に水素またはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである；Ｒ_5'はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである；Ｒ₈はＲ₆基、置換Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル−(Ｃ₁〜Ｃ₃)アルキル、Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル−(Ｃ₁〜Ｃ₃)アルキル、Ｃ₇〜Ｃ₁₆−アリールアルキルから構成される群から独立に選択される；またはＲ₆およびＲ₇は基Ａの炭素原子とともに５員から８員の炭素環を形成する] から構成される群から選択される；またはその医薬的に許容される塩または溶媒和物] で示される。式Ｉで示される化合物の例には、これらに限定するものではないが、８−メチル −１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]１，２，３，４−テトラヒドロ −９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、８−ブロモ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４ −ｂ]インドール塩酸塩、６，８−ジブロモ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６−メチル−８−ブロモ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、８−メトキシ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６，８−ジフルオロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、７−メチル−８−ブロモ−１−[( ３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ− ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−(１，１−ジメチルエチル)−１−[( ３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−９Ｈ− ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、５−フルオロ−６−メチル−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、７，８，９，１０−テトラヒドロ−１０−[(３，４ −ジメトキシフェニル)メチル]−１１Ｈ−ベンゾ[ｇ]ピリド[３，４−ｂ]インドール、６−シクロヘキシル−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、５，８−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−(１−メチルエチル)−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル) メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６，８−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−９Ｈ− ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、５，７−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６，７−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ −１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６−エチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ −ピリド[３，４−ｂ]インドール、７，８−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４− ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(３，４，５−トリメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２，３，４−トリメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４− テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１− [(２−メトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２，５−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル −１−[(２，４，５−トリメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−(１−メチルエチル) −１-[(２，３，４−トリメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(３，４−ジメトキシ−５−ニトロフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(３−ヨード−４，５−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール、６−メチル−１−[(３，４−ジメトキシ− ５−アミノフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[ ３，４−ｂ]インドール二塩酸塩、６−メチル−１−[(３−メトキシ−４−プロポキシフェニル)メチル]−１，２，３，４-テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４ −ｂ]インドール、６−メチル−１−[(４−ジメチルアミノフェニル)メチル]− １，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３,４−ｂ]インドール二塩酸塩、６−メチル−１−[(４−ジブチルアミノフェニル)メチル]−１，２，３，４− テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール二塩酸塩、６−メチル−１ −[(３−フルオロ−４−メトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル１１−[(３，４ −ジメチルフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[ ３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２−クロロ−３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２−クロロ−３−メトキシ−４ −ヒドロキシフェニル)メチル]−１，２，３，４-テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[ ３，４−ｂ]インドール塩酸塩、５−フルオロ−６−メチル−１−[(２−クロロ −３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ −ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−(シクロヘキシルメチル)− １，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩、６−メチル−１−[(２−ブロモ−３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[２，４−ｂ]インドール塩酸塩、および６−ヨード−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４− テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩を包含する。実施例７６−メチル−１−[(２−クロロ−３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３,４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩の製造２−クロロ−３，４−ジメトキシベンズアルデヒド(１０．４５ｇ)、Ｎ−アセチルグリシン(１１．９ｇ)０．１０モル)、および酢酸ナトリウム（８．４ｇ、０．１モル）を無水酢酸（１００ｍＬ）に溶解し、１００℃に２時間加熱した。反応混合物を常温まで冷却して、撹拌しつつ氷（３００ｍＬ）に注入した。生成物を濾取し、水（３×５０ｍＬ）およびジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下に乾燥した(５．２６ｇ)。前記で製造したアザラクトン（１．３４ｇ、４．７６ミリモル）および５−メチルトリプタミン塩酸塩（１．０ｇ、４．７５ミリモル）を１Ｎ−塩酸（3０ｍＬ）に懸濁し、窒素雰囲気下に２４時間加熱還流した。反応混合物を常温まで冷却し、粗製生成物を濾取した。固体をエタノール中でかきまぜ、ジエチルエーテルで洗浄した。この生成物（１.１９ｇ）を濾取した。ｍ／ｅ＝３７０。ｍｐ．２４４℃（分解）。分析値理論値実験値Ｃ６１．９２６１．６７Ｈ５．９４５．９４Ｎ６．８８６．９４実施例８６−メチル−１−[(２−ブロモ−３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドールの製造実施例８の化合物を次の点を除いて実施例７に記載のものと同じ様式で製造した：出発物質として２−クロロ−３，４−ジメトキシベンズアルデヒドの代わりに２−ブロモ−３，４−ジメトキシベンズアルデヒドを使用した。製造された最終化合物は次式：を示し、収率：７９.２％；Ｍ／Ｉ：４１６,４１４；およびｍｐ．２７２〜４℃ であった。分析値理論値実験値Ｃ５５．８３５５．５７Ｈ５．３５５．３６Ｎ６．２０６．０９実施例９６−ヨード−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩の製造実施例９の化合物を次の点を除いて実施例７と同じ様式で製造した：出発物質として３，４−ジメトキシベンズアルデヒドを２−クロロ−３，４−ジメトキシベンズアルデヒドの代わりに、また５−ヨードトリプタミンを５−メチルトリプタミンの代わりに使用した。反応終了後、混合物を炭酸カリウム水溶液で中和してクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を集め、無水炭酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。この生成物を２％メタノール含有クロロホルムで溶離するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。生成物を含有する画分を集めて濃縮した。残渣をジエチルエーテルに溶解し、ＨＣｌガスで処理した。得られたＨＣｌ塩を濾取して単離し、減圧下に乾燥した。製造した最終化合物は次式：を示し、収率：３１．３％；Ｍ／Ｉ：４４８；ｍｐ．２７０〜３℃であった。分析値理論値実験値Ｃ４９．５５４９．６２Ｈ４．５７４．５１Ｎ５．７８５．６６５−ＨＴ₂受容体拮抗剤として有効であると信じられる化合物の生物学的効果はまず被験化合物の５−ＨＴ₂受容体への結合を迅速かつ正確に測定する第１次スクリーニングを採用することによって確認してもよい。被験化合物の結合を確定した後に、被験化合物の生体内活性を確定する。５−ＨＴ₂拮抗剤を評価するために有用な検定法は当技術分野の熟練者にはよく知られている。５−ＨＴ_2B受容体結合活性ある化合物が５−ＨＴ_2B受容体に結合する性能はたとえば下記のような標準的操作法を使用して測定される。検定操作法本発明のある化合物および中間体は５−ＨＴ_2B受容体を変調するために有用である。５−ＨＴ_2B受容体に結合するために最も有用な化合物は次の操作法を使用して確認できる。さらに５−ＨＴ_2B活性を証明するために有用な生体内モデルを後述する。５−ＨＴ_2Bのためのラジオリガンド結合研究：形質転換細胞からの膜の調製：ラット５−ＨＴ_2B受容体を発現するクローン細胞の懸濁液を４℃で１５分間２２００×ｇでの遠心分離によって収集した。J.Ku rsarほか著、Mol.Pharmacol.、４２巻：５４９〜５５７頁（１９９２年）。結合検定に用いる膜はこのペレットを５０ｍＭ-トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４（０.５ ×１０⁹細胞／３０ｍＬ）中で振混ぜて調製した。この組織懸濁液を次に４℃で１０分間３９８００×ｇで遠心分離した。この操作を合計３回反復したが、第１回と第２回の洗浄の間に３７℃で１０分間インキュベーションした。最終ペレットを６７ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４（５−ＨＴ_2B受容体の発現レベルが低い細胞と比較的高い細胞について各々初期細胞数２０〜４０および１２５０万細胞／ｍＬ）中でTissumizer（Tekmar社、シンシナチ、ＯＨ）を６５に設定して用いて１５秒間ホモゲナイズした。 [³ Ｈ］５−ＨＴ結合研究：結合検定はBiomek１０００(Beckman Instruments社、フラートン、ＣＡ）を用いて自動化し、全容積０．８ｍＬ中で３重に実施した。膜懸濁液２００μＬ（０．０４〜０．２７ｍｇ蛋白質）および薬剤の水希釈物２００μＬを、[³Ｈ]５−ＨＴ、パルギリン、ＣａＣｌ₂、およびＬ−アスコルビン酸を含有する６７ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.４の４００μＬ中に添加した。パルギリン、ＣａＣｌ₂、およびＬ−アスコルビン酸の最終濃度は各々１０ μＭ、３ｍＭおよび０．１％とした。３７℃で１５分間または０℃で２時間、チューブをインキュベーション（両条件の双方について結合の平衡化を検証した）し、次にBrandel細胞収集装置（ＭＢ−４８Ｒ型、Brandel社、ゲーザーズバーグ、ＭＤ）を用い、予め０．５％ポリエチレンイミンに浸漬し、予め氷冷５０ｍＭ −トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４で冷却しておいたWhatman GF/Bフィルターを通して迅速に濾過した。次にフィルターを氷冷５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４の１ｍＬで迅速に４回洗浄した。フィルターが捕捉した[³Ｈ]５−ＨＴの量を液体シンチレーションスペクトル（Ready Protein and Beckman ＬＳ６０００ＩＣ、Beckman Instruments社、フラートン、ＣＡ）測定によって定量した。飽和実験には結合した放射能を遠心分離によって分離した並行飽和実験の上清液からサンプリングすることによって実測的な遊離ラジオリガンド濃度を測定した。[³Ｈ]５−ＨＴの濃度は０℃と３７℃でインキュベーションした飽和実験について各々０．０２から５ｎＭまでおよび０．６から６３ｎＭの範囲であった。５−ＨＴ１０μＭまたは１−ナフチルピペラジ(１−ＮＰ)１０μＭが非特異的結合であった。競合実験では、置換すべき薬剤を対数単位で６に及ぶ６個から１２個の濃度で使用し、[³Ｈ]５−ＨＴの最終濃度は２ｎＭであった。蛋白質はウシ血清アルブミンを標準に用いてBradfordの方法で測定した。M.M.Bradford著、An al.Biochem.、７２巻：２４８〜２５４頁（１９７６年）。統計学的分析：飽和検定法から得たＫ_dおよびＢ_max値は部分Ｆ−検定法を用いて１部位または２部位結合モデルに対する最良適合で決定した。A.De Leanほか著、Mol. Pharmacol.、２１巻：５〜１６頁（１９８１年）。１部位−結合モデルには下記の等式：［式中、結合＝特異的に結合した[³Ｈ]５−ＨＴの量、Ｂ_max＝結合部位の最大数、Ｋ_d＝平衡解離定数、および［Ｌ］＝[³Ｈ]５−ＨＴの遊離濃度である]を使用し、また、２部位−結合モデルには下記の等式：［式中、結合＝特異的に結合した[³Ｈ]５−ＨＴの量、Ｂ_max1＝高親和性結合部位の最大数、Ｂ_max2＝低親和性結合部位の最大数、Ｋ_d1＝高親和性結合部位の平衡解離定数、Ｋ_d2＝低親和性結合部位の平衡解離定数、および[Ｌ]＝[³Ｈ]５− ＨＴの遊離濃度である]を使用した。競合検定からのＩＣ₅₀値、ＩＰ₃標準曲線についての結合パラメータおよびＩＰ₃検定から得たＥＣ₅₀値およびＥ_max値は四パラメータのロジスティック式の非線形回帰分析（Systat、systat社、エバンストン、ＩＬ）によって決定した。A.De Leanほか著、Mol.Pha mlacol.、２１巻：５〜１６頁(１９８１年)。このＩＣ₅₀値はCheng-Prusoff式を用いてＫ_i値に変換した。Y.Chengほか著、Biochem.Pharmacol、２２巻：３０９９〜３１０８頁（１９７３年）。試験管内における５−ＨＴ_2Bの検定法：雄性ウイスターラット（１５０〜３７５ｇ、Laboratory Supply社、インディアナポリス、ＩＮ）を頚部脱臼によって屠殺し、試験管内実験用に胃底の長軸切片標本を調製した。ラット胃底１個から４個の調製物を得た。摘出頚静脈の環状標本はHookerが記載したようにして調製した。Hooker著、Blood Vessels、１４巻：１頁（１９７７年）およびM.L.Cohen著、J.Pharmacol.Exp.Ther.、２２７巻：３２７頁（１９８３年）。組織を次の組成（ミリモル濃度）を持つ修正クレブス液１０ｍＬを入れたオーガンバスに装着した。ＮａＣｌ、１１８．２；ＫＣｌ、４．６；ＣａＣｌ₂・Ｈ₂Ｏ、１．６；ＫＨ₂ＰＯ₄、１．２；ＭｇＳＯ₄、１．２；デキストロース、１０．０；およびＮａＨＣＯ₃、２４．８。組織浴溶液は３７℃に維持し、９５％Ｏ₂および５％ＣＯ₂と平衡させた。組織は最適休止力( ４ｇ）下に保持し、被験化合物と接触する前に約１時間平衡させた。等長性収縮をStatham ＵＣ−３トランスデューサーによるBeckman Dynographで測定した力のグラム変化として記録した。見掛けの作動剤解離定数の測定：１５〜２０分毎に前回の濃度を洗い去った後に濃度を段階的に増加させて底部のセロトニンに対する非蓄積性収縮濃度−応答曲線および頚静脈の蓄積性濃度応答曲線を得た。各作動剤濃度を組織と約２分間接触させ続け、各化合物濃度の最大応答を測定した。ＥＤ₅₀値を半最大濃度を示す作動剤濃度として判定した。対照となる応答を得た後、組織を適当な濃度の緩衝液または拮抗剤とともに１時間インキュベーションした。次に拮抗剤の存在下にセロトニンに対する応答測定を反復した。各組織について応答の濃度には作動剤１種および拮抗剤１種の濃度のみを利用した。一般的に、緩衝液処理の存在下における継続的な作動剤反応は変化しなかった（平均用量比は１．２８＋／−０．２１であった）。各濃度についての見掛けの拮抗剤解離定数(Ｋ_B)は次の等式に従って測定した：Ｋ_B＝［Ｂ］／（用量比−１） [式中、［Ｂ］は拮抗剤の濃度であり、用量比は拮抗剤存在下の作動剤のＥＤ₅₀ を対照のＥＤ₅₀で割った商である]。一般的に、拮抗剤の存在下には濃度−応答曲線の並行移動が起きた。この結果をＫ_Bの逆対数（すなわち、-logＫ_B）で表示した。計算は既知方法を用いて行った。B．R．Zaborowsky著、J.Pharmacol. Methods、４巻：４１６５頁（１９８０年）。５−ＨＴ_2B形質転換細胞中におけるＩＰ₃の形成ＩＰ₃の形成および抽出：懸濁培養したＡ６００Ｋ−２−３−ＭＴＸ細胞を２００×ｇの遠心分離によって収集し、蛋白質不含の細胞培養培地に再懸濁した。この細胞(１２５μＬ中、２.５〜３×１０⁶細胞／チューブ)を３７℃で１０分間インキュベーションした後、蛋白質不含培地１２５μＬに希釈した目的化合物を添加した。インキュベーションは全て３重に行った。５−ＨＴの効果を阻止するために拮抗剤を使用した時には、５−ＨＴを添加する前に細胞を拮抗剤と共に３７℃で１０分間インキュベーションした。作動剤添加後、細胞懸濁液を振混ぜてさらに１０秒間３７℃でインキュベーションした（この１０秒間には振混ぜの時間も含む)。氷冷１０％過塩素酸２５０μＬを添加して反応を止めた。チューブを氷上で１０分間インキュベーションし、次に1500×ｇで１０分間遠心分離した。遠心分離後、上清液４００μＬを試料として取出した。下記のＩＰ₃抽出法は報告されている操作法（E.S.Sharpsほか著、「A High Performance Liquid Chromatographic Method To Measure³²P Incorporation Into Phospholylated M etabolites In Cu1tured Cells(培養細胞における燐酸化代謝産物への³²Ｐの取込みを測定するための高速液体クロマトグラフィー法)」、Anal.Biochem.、１２４巻：４２１〜４２４頁（１９８２年）およびK.A.Wreggettほか著、「A Rapic S eparation Method For Inositol Phosphates And Their Isomers(イノシトールホスフェートおよびその異性体のラピックな分離法)」、Biochem.J.、２４５巻：６５５〜６６０頁 (１９８７年)]を修飾したものである。試料４００μＬを１０ｍＭ−ＥＤＴＡ１００μＬ、ｐＨ９.０を入れた１.５ｍＬミクロフュージチューブに添加した。続いて1，１，２−トリクロロトリフルオロエタン／トリ−ｎ−オクチルアミン(１：１、ｖ／ｖ)５００μＬを添加した。チューブを５〜７分間激しく振混ぜ、次に1500×ｇで２分間遠心分離して三層の分離を加速した。一番上にある水層１００μＬを採取し、下記の検定法によってＩＰ₃含有量の測定を行った。ＩＰ ₃ 結合検定法：ラットの小脳膜をＩＰ₃-結合蛋白質の原料として用いて、報告されている操作法（R.F.Worleyほか著、「Characterization 0f Inositol Triphosphate Receptor binding in brain（脳におけるトリ燐酸イノシトール受容体結合の特性）」、J.Biol.Chem.、２６２巻：１２１３２〜１２１３６頁（１９８７年）およびD.S.Bredtほか著、「A Simple,Sensitive,And Specific Radior eceptor Assay For Inositol1,4,5-Triphosphate In Biological Tissues（生物学的組織内イノシトール−１，４，５−Triphosphateの簡易、高感度、かつ特異的なラジオレセプター検定法)」、Biochem.Biophys.Res.Commun.、１５９巻：９７６〜９８２頁(１９８９年)）を修飾した結合検定法を行った。膜は次のようにして調製した：均質化緩衝液３０容（１ｍＭ−ＥＤＴＡおよび１ｍＭ-２−メルカプトエタノールの５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．７溶液）中でラット小脳をTissumizer（Tekmar社）を６５に設定して１５秒間ホモジナイズした。ホモゲネートを３９８００×ｇで１０分間４℃で遠心分離した。この操作をさらに３回反復して、合計４回洗浄した。この最終ペレットをＩＰ₃結合緩衝液（１ｍＭ −ＥＤＴＡおよび１ｍＭ-２−メルカプトエタノールの６４．３ｍＭ-トリス−ＨＣｌ、ｐＨ９．０溶液）３０容に懸濁し、使用時まで−７０℃に凍結しておいた。結合緩衝液（[³Ｈ]ＩＰ₃および結合蛋白質ホモゲネート５０μＬを含む）の３５０μＬを前記のような抽出操作に付しておいた抽出ＩＰ₃試料または既知のＩＰ₃標準品１００μＬに加えた。[³Ｈ]ＩＰ₃の最終濃度は１ｎＭであった。チューブを０℃で１５分間インキュベーションし、次にBrandel社のセルハーベスタを用いてWhatman GF/Bフィルター［予め水で濡らし、予め氷冷ＩＰ₃洗浄緩衝液（１ｍＭ-ＥＤＴＡの５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ９．０溶液）２ｍＬで冷却しておいたもの］で濾過した。フィルターは氷冷したＩＰ₃洗浄緩衝液１ｍＬで迅速に２回洗浄した。フィルターが捕捉した［³Ｈ]ＩＰ₃の量を液体シンチレーション計数法によって測定した。試料中のＩＰ₃の量は標準曲線との比較によって測定した。５−ＨＴを添加する前に５−ＨＴ_2B受容体を発現する細胞をミアンセリン (mianserin)、メチセルジド(methysergide)、ラウウォルシン(rauwolscin)、または１−ＮＰと予備的にインキュベーションした時には、５−ＨＴ単独の場合よりも５−ＨＴ曲線は右側にシフトし、Ｅ_max値は減少した。５−ＨＴ_2Aおよび５−ＨＴ_2C受容体結合活性ある化合物が５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2C受容体に結合する性能は、たとえば下記のような標準的な操作法を使用して測定した。検定操作法．形質転換細胞系統からの膜標本．膜は５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2cの受容体で安定に形質転換されたＡＶ１２細胞（シリアンハムスター線維芽細胞、ＡＴＣＣＣＲＬ９５９５）(Wainscottほか著、「Pharmacological Characteristics Of The Newly Cloned Rat 5-Hydroxytryptamine_2FReceptor(新たにクローニングされたラットの５−ヒドロキシトリプタミン_2F受容体の薬理学的特性)」、Mol. Pharmlacol.、４８巻：４１９〜４２６頁(１９９３年))を使用して調製した。略述すれば、目的とする受容体を発現する細胞を懸濁培養し、遠心分離によって収集した。細胞を低張性緩衝液、５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.４、最小容積中に再懸濁し、使用するまで−７０℃で凍結した。検定の日に、懸濁液を解凍し、３５ｍＬ／０．５×１０²細胞、原細胞数まで５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.４で希釈し、３９８００×ｇで４℃で遠心分離した。得られたペレットを振り混ぜて再懸濁し、３７℃で１０分間インキュベーションし、次に３９８００×ｇで４℃で遠心分離した。このペレットを再懸濁し、もう一度遠心分離した。膜の均質な懸濁液を得るために、最終ペレットをTissumizer（Tekmar社、シンシナチ、ＯＨ）を７５に設定して、１０秒から１５秒間使用して、ヒトまたはラットの５−ＨＴ_2A受容体を発現する細胞については６７ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４中に再懸濁し、ヒトの５−ＨＴ_2c受容体を発現する細胞については１３ｍＭ−ＭｇＣｌ₂および０．６７ｍＭ−ＥＤＴＡを含有する６７ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．４中に再懸濁した。５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2cの［¹²⁵Ｉ]ＤＯＩ結合研究：ヒトの５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2C結合研究は本質的に次の例外を除いて５−ＨＴ_2B受容体についての［³Ｈ]５−ＨＴ結合について記載した通りに行った。検定用緩衝液は最終濃度として１０ｍＭ−パルギリン、９．７５ｍＭ−ＭｇＣｌ₂、０．５ｍＭ−ＥＤＴＡ、０．１％アスコルビン酸ナトリウムおよび５０ｍＭ−トリス−ＨＣｌ、ｐＨ７ .４を含有していた。インキュベーションは５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2cについて各々約４０および３０ｍｇの蛋白質と共に３７℃で３０分間行い、次に予め０．５％（ｗ／ｖ）ポリエチレンイミンに浸漬し、あらかじめ氷冷洗浄緩衝液４ｍＬで冷却したWhatman GF/Cフィルターで濾過した。次にフィルターを氷冷洗浄緩衝液１ｍＬで４回迅速に洗浄した。フィルターに捕捉された［¹²⁵Ｉ]ＤＯＩの量はガンマ線計数装置を使用して測定した。非特異的な結合は５−ＨＴ_2cについては１０ｍｍミアセリンで測定し、５−ＨＴ_2Aについては１ｍＭ−ケタンセリンで測定した。競合実験では[¹²⁵Ｉ]ＤＯＩの最終濃度は約０．０７から０．１５ｍＭであった。統計学的分析：飽和および競合曲線についての非線形回帰分析は報告（Wainscottほか著、「Pharmlacological Characteristics 0f The Newly Cloned Rat 5-Hydroxytryptamine_2FReceptor(新たにクローニングされたラットの５− ヒドロキシトリプタミン_2F受容体の薬理学的特性)」、Mol.Pharmacol.、４８巻：４１９〜４２６頁(１９９３年)）通りに行った。ｐＫ₁値（すなわち、logK、モル）については変動の一元分析を行い、続いてTukay-Kramerの真正有意差検定（ JMP；SAS Institute社、カリー、ＮＣ）を行った。競合曲線から得たＩＣ₅₀値は Cheng-prusoff（１９７３年）を使用してＫ_d値に変換した。[¹²⁵Ｉ]ＤＯＩ−標識受容体については、５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2cの受容体に関する[¹²⁵Ｉ]ＤＯＩのＫ_dはCheng-Prusoffの再配列を用いて次の条件下に決定した：Ｋ_d＝ＩＣ₅ ₀ −［Ｌ]、[ここにＩＣ₅₀は特異的[¹²⁵Ｉ]ＤＯＩ結合の５０％阻害を起こす非標識ＤＯＩの濃度、［Ｉ］は遊離[¹²⁵Ｉ]ＤＯＩの濃度である]。５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2C形質転換細胞におけるＩＰ₃の形成５−ＨＴ_2Aまたは５−ＨＴ_2Cで形質転換した細胞でのＩＰ₃形成検定は次の点を除いて５−ＨＴ_2B形質転換細胞におけるＩＰ₃形成検定と同様に行った：５− ＨＴ_2cについてはヒトのＡＨＳ１Ｃ−３Ｓ細胞を用い、５−ＨＴ_2AについてはヒトのＨｕ２−３Ｓ細胞を使用した。次の実験を毒液による咬傷および刺傷を処置または改善する５−ＨＴ₂拮抗剤の効力を検定するために提唱する。実験例＃１実験の１６から２４時間前に体重２５０〜４００ｇの雄性Wisterラットの背部を電気バリカンで剃毛する。実験日にラットをメトファン（メトキシフルレーン）吸入で麻酔する。２６ゲージの皮下用注射針で０．０５ｍＬ容中のセロトニン３濃度を皮内に注射する。これに加えて、食塩水０．０５ｍＬを各動物の皮内に注射して注射によって起きる血管漏出量を測定する。試料１(６−メチル−１−[ (２−クロロ−３，４−ジメトキシフェニル)−メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩)、試料２(スピロー９，９[２−(３，４−ジメトキシ)−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル]−５− メチル−１，２，３，９−テトラヒドロ−８Ｈ−ピリドインドール)、試料３(６ −メチル−１−[(２−ブロモ−３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール)、および試料４（6−ヨード−１−[(３，４−ジメトキシフェニル)メチル]−１，２，３，４− テトラヒドロ−９Ｈ−ピリド[３，４−ｂ]インドール塩酸塩）を腹腔内に投与し、１５分後にセロトニンを皮内投与する。セロトニン皮内投与の２分前にエバンスブルー色素（３５ｍｇ／ｋｇ）を静脈内に投与する。最大の応答を起こさせるためにセロトニン皮内注射の３０分後に動物を頚部脱臼によって屠殺する。皮膚を反転し、各注射部位（直径約１〜１．５ｃｍ）を切除し、採取する。皮膚の一片を背中の未処理部分から採取する。皮膚の各片の重量を測定し、１．０Ｎ−ＫＯＨ１ｍＬ中に入れて３７℃で１６時間から２０時間インキュベーションする。アセトン３．３ｍＬおよび１．２Ｎ −Ｈ₃ＰＯ₄０.７ｍＬを添加した後に、混合物を振混ぜ、次に遠心分離（４００ ×ｇ、２５分間）する。上清液をデカンテーションし、Bausch and Lomb Spectronic７１０分光光度計を用いて６２０ｎｍでその吸光度を測定する。既知濃度３種のエバンスブルー色素の吸光度を用いて標準曲線を構築して、これから未知の試料に含まれるエバンスブルー色素濃度を測定する。いずれの皮膚切片中にある全色素も血管内および血管外にある色素の合計なので、我々は非処置皮膚切片の皮膚ミリグラム当り色素マイクログラムを決定し、その量を他の切片の各々について重量当りの量から引算することによって修正して血管内色素とする。統計学的分析は変動分析に続いてDunnettの検定を行って平均値を比較することによって行う。Ｐ＜０．０５の時には統計学的有意性が推定される。結果皮内に投与された時、セロトニンは皮膚での色素血管外漏出の増加を起こす。セロトニンの皮内投与の１５分前に試料１〜４（０．１および１．０ｍｇ／ｋｇ腹腔内）を投与すると用量依存的にセロトニンが誘導する皮膚血管浸透性の増加を阻害する。実験例＃２実験の１６から２４時間前に体重２５０〜４００ｇの雄性Wisterラットの背部を電気バリカンで剃毛する。実験日にラットをメトファン（メトキシフルレーン）吸入で麻酔する。２６ゲージの皮下用注射針で３濃度の蜂毒液（天然懸濁液、 Sigma社、＃Ｖ３２５０）０．０５ｍＬ容を皮内に注射する。これに加えて、食塩水０．０５ｍＬを各動物の皮内に注射して注射によって起きる血管漏出の量を測定する。蜂毒液を皮内投与する２分前にエバンスブルー色素（３５ｍｇ／ｋｇ）を静脈注射する。最大の応答を起こさせるために蜂毒液皮内注射の３０分後に動物を頚部脱臼によって屠殺する。皮膚を反転し、各注射部位（直径約１〜１．５ｃｍ）を切除し、採取する。皮膚の一片を背中の未処理部分から採取する。皮膚の各片の重量を測定し、１．０Ｎ−ＫＯＨ１ｍＬ中に入れて３７℃で１６時間から２０時間インキュベーションする。アセトン３．３ｍＬおよび１．２Ｎ −Ｈ₃ＰＯ₄０．７ｍＬを添加した後に、混合物を振混ぜ、次に遠心分離(４００ ×ｇ、２５分間)する。上清液をデカンテーションし、Bausch and Lomb Spectronic７１０分光光度計を用いて６２０ｎｍでその吸光度を測定する。既知濃度３種のエバンスブルー色素の吸光度を用いて標準曲線を構築し、これから未知試料に含まれるエバンスブルー色素濃度を測定する。いずれの皮膚切片中の全色素量も血管内および血管外にある色素の合計なので、我々は未処置皮膚切片中の皮膚ミリグラム当り色素マイクログラムを決定し、その量を他の切片の各々について重量当りの量を引き算することによって修正して血管内色素とする。統計学的分析は変動分析に続いてDunnettの検定を行って平均値を比較することによって行う。Ｐ＜０．０５の時には統計学的有意性が推定される。結果皮内に投与された時、蜂毒液は皮膚色素血管外漏出の増加を起こす。実験例＃３実験の１６から２４時間前に体重２５０〜４００ｇの雄性Wisterラットの背部を電気バリカンで剃毛する。実験日にラットをメトファン（メトキシフルレーン）吸入で麻酔する。２６ゲージの皮下用注射針で３濃度の蜂毒液（天然懸濁液、 Sigma社、＃Ｖ３２５０、０．０５ｍＬ容を皮内に注射する。これに加えて、食塩水０．０５ｍＬを各動物の皮内に注射して注射によって起きる血管漏出の量を測定する。蜂毒液皮内投与の１５分前に試料１〜４を腹腔内に投与する。蜂毒液を皮内注射する２分前にエバンスブルー色素（３５ｍｇ／ｋｇ）を静脈内に投与する。最大の応答を起こさせるために蜂毒液皮内注射の３０分後に動物を頚部脱臼によって屠殺する。皮膚を反転し、各注射部位（直径約１〜１．５ｃｍ）を切除し、採取する。皮膚の一片を背中の未処理部分から採取する。各皮膚片を秤量し、１．０Ｎ−ＫＯＨ１ｍＬ中に入れて３７℃で１６時間から２０時間インキュベーションする。アセトン３．３ｍＬおよび１．２Ｎ−Ｈ₃ＰＯ₄０．７ｍＬを添加した後に、混合物を振混ぜ、次に遠心分離（４００×ｇ、２５分間）する。上清液をデカンテーションし、Bausch and Lomb Spectronic ７１０分光光度計を用いて６２０ｎｍでその吸光度を測定する。既知濃度３種のェバンスブルー色素の吸光度を用いて標準曲線を構築し、これから未知試料に含まれるエバンスブルー色素濃度を測定する。いずれの皮膚切片中にある全色素も血管内および血管外にある色素の合計なので、我々は未処置皮膚切片中の皮膚ミリグラム当り色素マイクログラムを決定し、その量を他の切片の各々について重量当りの量を引き算することによって修正して血管内色素とする。結果皮内に投与された時、蜂毒液は皮膚色素血管外漏出の増加を起こす。蜂毒液の皮内投与前１５分間に投与すると試料１〜４（０．１および１．０ｍｇ／ｋｇ腹腔内）は用量依存的に蜂毒液が誘導する皮膚血管浸透性の増加を阻害する。本発明の方法で採用する化合物は製剤化せずに直接投与することも可能であるが、本化合物は通常は医薬的に許容される添加剤と活性成分（本発明の化合物）少なくとも１種とを含む医薬的組成物の型で投与される。このような組成物は約０．１％重量から約９０．０％重量の本化合物を含有する。これら組成物は経口投与、経直腸投与、局所投与、経皮投与、皮下投与、脈管内投与、筋肉内投与、および鼻内投与を含む種々の経路で投与できる。この発明の方法で採用する化合物の多くは注射用、経口用、および局所用の組成物内で有効である。このような組成物は医薬技術分野でよく知られている方法によって調製され、活性化合物を少なくとも１種含有する。たとえば、REMINGTONのPHARMACEUTICAL SCIENCES、（１６版、１９８０年）参照。本発明で採用する組成物を製造するに当たって、活性成分は通常添加剤と混合し、添加剤で希釈し、または、たとえばカプセル、分包包装、紙またはその他の容器であってもよい担体中に封入する。添加剤が希釈剤の役目をする時には、それは活性成分の基剤、担体または媒体として作用する固体、半固体、または液体物質であることができる。そこでこの組成物は錠剤、丸剤、粉剤、ロゼンジ剤、分包包装剤、カシェ剤、エリキシール剤、懸濁剤、乳化剤、液剤、シラップ剤、エアロゾル剤（固体として、または液状媒体中で）、例えば１０％重量までの活性化合物を含む軟膏剤、軟または硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、無菌注射用液剤および無菌包装粉剤の型をとることができる。製剤の調製に当たっては、適当な粒子径を提供するには他の成分と混合する前に活性化合物の粉砕が必要なこともある。活性化合物が実質的に不溶性ならば、通常は２００メッシュ以下の粒子径まで粉砕する。活性化合物が実質的に水溶性ならば、粒子径は通常製剤中で実質的に均質な分散が達成されるように、たとえば約４０メッシュまで粉砕して調整する。適当な担体、添加剤、および希釈剤の例をいくつか例示すれば、乳糖、デキストロース、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、澱粉、アラビアゴム、燐酸カルシウム、アルギネート、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、トラガカント、ゼラチン、水、シロップ、およびメチルセルロースを包含する。この製剤はさらに次のものを含有できる：たとえばタルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油のような滑沢化剤；湿潤剤；乳化剤および懸濁剤；たとえばメチル−およびプロピル− ヒドロキシベンゾエートのような保存剤；甘味剤；および矯味剤。本発明の組成物は当技術分野で知られている操作法を採用して患者に投与した後に活性成分の迅速な、持続した、または遅延した放出を与えるように製剤化できる。この発明の化合物は、知られている経皮的送達システムおよび添加剤を用いて経皮的に送達することもある。最も好ましくは、この発明の化合物を、これに限定するものではないが、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウレート、およびアザシクロアルカン−２−オンを含む浸透強化剤と混合して、パッチ剤または類似の送達システムに入れる。所望によってはこの経皮的製剤にゲル化剤、乳化剤、および緩衝液を含む他種の添加剤を添加することもある。局所的投与には、この発明の化合物は理想的には粘性のある液体またはクリーム状の製剤を形成するために種々の添加剤と混合できる。経口投与のためには、この発明の化合物は理想的には担体および希釈剤と混合し、錠剤に成形するか、またはゼラチンカプセルに充填する。好ましくは、本組成物は各用量剤が約０．０５から約１００ｍｇまで、より通常には約１．０から約３０ｍｇまでの活性成分を含有する単位用量剤型に製剤化する。用語「単位用量剤型」とは各単位が予め所望の治療効果を発揮するように計算して決められた量の活性物質を適当な医薬的添加剤とともに含むヒトまたはその他の動物ための単位用量として適する物理的に区別された単位を示す。活性化合物は一般に広い用量範囲にわたって有効である。例えば、日用量は通常約０.０１から約３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内にある。成人の処置では約０.１から約１５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲を単回または複数回に分割して投与するのが特に好適である。しかしながら、実際に投与する化合物量は処置すべき病状、選択する投与経路、実際に投与する単数または複数の化合物、各患者の年齢、体重および反応、および患者の症状の重症度を含む関連する状況に照らして医師が決定するものであって、それ故に前記用量範囲には本発明の範囲を限定する意図はないことは理解すべきものである。ある例では前記範囲の最低限以下の用量レベルがさらに適当なこともあり、一方では他の例ではさらに大用量を有害な副作用を起こさずに採用することもあるが、そのような大用量は最初に数個の小用量に分割してその日の中に投与する。本発明の操作法をさらに完全に例示するため、以下の製剤例を提供する。各例は例示に過ぎず、本発明の範囲を限定する意図はない。製剤例では活性成分（化合物）として本発明化合物のいずれを採用してもよい。製剤例１次の成分を含有する硬ゼラチンカプセル剤を製造する：成分量（ｍｇ／カプセル）活性成分（１種またはそれ以上、以下同じ）１００．０澱粉２３５．０ステアリン酸マグネシウム５．０前記成分を混合し、３４０ｍｇ量を硬ゼラチンカプセルに充填する。製剤例２下記の成分を使用して錠剤を製造する：成分量（ｍｇ／錠剤）活性成分１００．０微細結晶性セルロース１２５．０コロイド二酸化ケイ素１０．０ステアリン酸５．０各成分を混合し、打錠して２４０ｍｇ重量の錠剤とする。製剤例３次の成分を含む吸入用乾燥粉末製剤を製造する：成分重量％活性成分５乳糖９５活性成分を乳糖と混合し、混合物を乾燥粉末吸入装置に入れる。製剤例４活性成分３０ｍｇを含有する錠剤を次の通りに製造する：成分量（ｍｇ／錠剤）活性成分３０．０ｍｇ澱粉４５．０ｍｇ微細結晶性セルロース３５．０ｍｇポリビニルピロリドン（１０％水溶液として）４．０ｍｇカルボキシメチル澱粉ナトリウム４．５ｍｇステアリン酸マグネシウム０．５ｍｇタルク１．０ｍｇ合計１２０．０ｍｇ活性成分、澱粉およびセルロースを米国局方２０メッシュの篩を通し、よく混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を得られた粉末と混合し、次にこれを米国局方１６メッシュの篩を通す。こうして製造した顆粒を５０〜６０℃で乾燥し、米国局方１６メッシュの篩を通す。予め米国局方３０メッシュの篩を通しておいたカルボキシメチル澱粉ナトリウム、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒に加え、これを混合した後に錠剤製造機で打錠して１２０ｍｇ重量の錠剤を得る。製剤例５薬剤４０ｍｇを含有するカプセル剤を次の通りに製造する：成分量（ｍｇ／カプセル）活性成分４０．０ｍｇ澱粉１０９．０ｍｇステアリン酸マグネシウム１．０ｍｇ合計１５０．０ｍｇ活性成分、セルロース、澱粉、およびステアリン酸マグネシウムを混合し、米国局方２０メッシュの篩を通し、１５０mg重量を硬ゼラチンカプセルに充填する。製剤例６活性成分２５ｍｇを含有する坐剤を次の通りに製造する：成分量活性成分２５ｍｇ飽和脂肪酸グリセリドを加えて２０００ｍｇとする。活性成分を米国局方６０メッシュの篩を通し、予め必要最小限度の熱を使用して融解しておいた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁する。次に混合物を公称２．０ｇ容の坐剤金型に注入し、放冷する。製剤例７５．０ｍＬ用量毎に薬剤５０ｍｇを含有する懸濁剤を次の通りに製造する：成分量活性成分５０．０ｍｇキサンタンガム４．０ｍｇカルボキシメチルセルロースナトリウム（１１％）微結晶性セルロース（８９％）５０．０ｍｇショ糖１．７５ｇ安息香酸ナトリウム１０．０ｍｇ矯味剤および着色剤適量精製水を加えて５．０ｍＬ薬剤、ショ糖、およびキサンタンガムを混合し、米国局方１０メッシュの篩を通し、次に予め作成しておいた微結晶性セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウムの水溶液と混合する。安息香酸ナトリウム、矯味剤および着色剤を少量の水で希釈し、撹拌しながら添加する。次に充分量の水を添加して必要な容積とする。製剤例８薬剤１５ｍｇを含有するカプセル剤を次の通りに製造する：成分量（ｍｇ／カプセル）活性成分１５．０ｍｇ澱粉４０７．０ｍｇステアリン酸マグネシウム３．０ｍｇ合計４２５．０ｍｇ活性成分、セルロース、澱粉およびステアリン酸マグネシウムを混合し、米国局方２０メッシュの篩を通し、その４２５ｍｇ重を硬ゼラチンカプセルに充填する。製剤例９静脈注射用製剤を次の通りに製造する：成分量活性成分２５０．０ｍｇ等張性食塩水１０００ｍＬ製剤例１０局所用製剤を次の通りに製造する：成分量活性成分１〜１０ｇ乳化ワックス３０ｇ流動パラフィン２０ｇ白色ワセリン１００ｇまで白色ワセリンを加熱して溶融する。流動パラフィンおよび乳化ワックスを入れて溶解するまで撹拌する。活性成分を添加し、次に分散するまで撹拌する。次に混合物が固化するまで冷却する。製剤例１１活性成分１０ｍｇを含有する舌下錠またはバッカル錠は次の通りに製造してもよい：成分１錠当り量活性成分１０．０ｍｇグリセリン２１０．５ｍｇ水１４３．０ｍｇクエン酸ナトリウム４．５ｍｇポリビニルアルコール２６．５ｍg ポリビニルピロリドン１５．５ｍｇ合計４１０．０ｍｇ温度を約９０℃に維持しながらグリセリン、水、クエン酸ナトリウム、ポリビニルアルコールおよびポリビニルピロリドンを継続的に撹拌して混合する。ポリマーが溶解した後、溶液を約５０〜５５℃まで冷却し、薬剤をゆっくりと混合する。均質な混合物を不活性物質でできた材料に注入して厚さ約２〜４ｍｍの薬剤含有拡散マトリックスを製造する。次にこの拡散マトリックスを切断して適当な大きさを有する錠剤を形成する。本発明方法に採用する別種の好適な製剤には経皮送達用具（「パッチ剤」）を採用する。この経皮パッチは本発明の化合物を制御された量で連続的または非連続的に注入するために使用することがある。医薬的薬剤を送達するための経皮パッチの構築および使用は当技術分野でよく知られている。たとえば、ここに参考のために引用する１９９１年６月１１日に発行された米国特許第５０２３２５２号参照。このようなパッチ剤は医薬的薬剤の連続的、波動的または用時的な送達をするように構築することもある。一般的に好適な間接的技術には通常、親水性薬剤を脂溶性薬剤またはプロドラッグに変換することによって薬剤を潜在化させるような組成物を形成することが含まれる。潜在化は一般的に薬剤の脂溶性を高め、また血液−脳関門を通過する輸送に適合させるために薬剤に含まれるヒドロキシ、カルボニル、スルフェートおよび１級アミン基を閉鎖することによって達成される。これとは別に、血液ー -脳関門を一過性に開くことができる高張性溶液を動脈内に注入することによって親水性薬剤の送達を増強することもある。本発明の方法に採用する化合物を投与するために採用する製剤の型は採用する特定化合物、投与経路およびその化合物から所望される薬力学的プロファイルの型および患者の状態によって支配されることもある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｃ０７Ｄ 471/04 １０３Ｃ０７Ｄ 471/04 １０３Ａ (81)指定国ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＹＵ

Claims

【特許請求の範囲】１．哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する薬剤を製造するための、５−ＨＴ受容体拮抗剤としての活性を有する化合物または組成物１種またはそれ以上の使用。２．哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する薬剤を製造するための、５−ＨＴ₂受容体拮抗剤としての活性を有する化合物または組成物１種またはそれ以上の使用。３．５−ＨＴ₂受容体拮抗剤としての活性を有する化合物または組成物を１種使用する請求項２の使用。４．５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が、５−ＨＴ_2A、５−ＨＴ_Bまたは５−ＨＴ_c受容体拮抗剤である請求項３の使用。５．５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が５−ＨＴ_2Aと５−ＨＴ_2B、５−ＨＴ_2Aと５− ＨＴ_2C、５−ＨＴ_2Bと５−ＨＴ_2C、または５−ＨＴ_2Aと５−ＨＴ_2Bと５−ＨＴ_2C 、の各受容体サブタイプの５−ＨＴ₂受容体拮抗剤である請求項３の方法。６．５−ＨＴ₂受容体拮抗剤としての活性を有する化合物または組成物を１種以上使用する請求項２の使用。７．各５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が異なる受容体サブタイプに対する受容体拮抗剤である請求項６の使用。８．各５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が多重な受容体サブタイプに対する親和性を有する受容体拮抗剤である請求項６の使用。９．５−ＨＴ₂受容体拮抗剤が単一の受容体サブタイプに対する親和性を有する受容体拮抗剤と多重な受容体サブタイプに対する親和性を有する受容体拮抗剤との混合物である請求項６の使用。１０．哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する薬剤を製造するための、式：［式中、Ｒ¹は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ³は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ⁶は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆−アルケニル、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ⁵、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルカノイル、ＣＯ₂Ｒ^5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル)_mアミノ、ＮＯ₂、−ＳＲ⁵、および−ＯＲ⁵から構成される群から選択される；Ｒ⁷およびＲ⁸は水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆−アルケニル、ＮＯ₂、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ₅、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルカノイル、Ｃ₇〜Ｃ₁₆−アリールアルキル、ＣＯ₂Ｒ^5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆− アルキル)_mアミノ、−ＳＲ⁵、および−ＯＲ⁵から構成される群から独立に選択される；ｎは１、２、または３である；ｎ’は１、２、または３である；ｍは１または２である；Ｒ⁵は独立に水素またはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである；Ｒ^5'はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである； ---は所望による結合である］で示される５−ＨＴ₂受容体拮抗剤またはその医薬的に許容される塩または溶媒和物の使用。１１．哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善する薬剤を製造するための、式：［式中、Ｑは水素または(ＣＨＲ₂)Ｒ₄である；Ｒ₁は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₂は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₃は水素またはＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである；Ｒ₄はＣ₅〜Ｃ₈−シクロアルキル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₅〜Ｃ₈− シクロアルケニル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、双環性基または置換双環性基である；Ａは式：および［式中、Ｒ₆およびＲ₇は独立に水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₂〜Ｃ₆−アルケニル、ハロ、ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ハロ(Ｃ₂〜Ｃ₆)アルケニル、ＣＯＲ₅、Ｃ₁〜Ｃ₁₀−アルカノイル、ＣＯ₂Ｒ^5'、(Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル)_mアミノ、ＮＯ₂、−ＳＲ₅、またはＯＲ₅である；ｍは１または２である；Ｒ₅は独立に水素またはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである；Ｒ_5'はＣ₁〜Ｃ₄−アルキルである；Ｒ₈はＲ₆基、置換Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル、Ｃ₃〜Ｃ₈−シクロアルキル−(Ｃ₁〜Ｃ₃)アルキル、Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、置換Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル、Ｃ₅〜Ｃ₈−シクロアルケニル−(Ｃ₁〜Ｃ₃)アルキル、およびＣ₇〜Ｃ₁₆−アリールアルキルから構成される群から独立に選択される；またはＲ₆およびＲ₇は基Ａの炭素原子とともに５員から８員の炭素環を形成する］で示される基から構成される群から選択されるまたはその医薬的に許容される塩または溶媒和物で示される５−ＨＴ₂受容体拮抗剤の使用。１２．哺乳類における咬傷および刺傷の毒液による症状を処置または改善するために使用する５−ＨＴ₂受容体拮抗剤を含む医薬的組成物。