JP2000507355A - 血液サンプル分析装置及びその方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は血液サンプルの分析方法、特に白血球数を得る方法に関し、サンプルを回転して遠心力によって血小板浮遊クラウドを分離し、その後クラウドの吸光度又は光透過率を測定する方法について述べる。

Description

【発明の詳細な説明】 血液サンプル分析装置及びその方法 本発明は、血液サンプルを分析するための、改良された装置及び方法に関する 。 分析及び診断する目的で、血液サンプルをヘマトクリットチューブに入れ、そ の後チューブをローターで回転することが知られている。回転による遠心力によ って、血液サンプル中の異なる比重を持つ種々の成分又は相が分離される。その 比重が血液サンプル中で最も高い赤血球は、典型的に、チューブの一端に片寄る であろう。赤血球の隣には白血球の相ができ、白血球の隣には血小板の相ができ るであろう。さらにチューブに沿って、より比重の低い血漿が位置し得る。 ヘマトクリットチューブが回転され、種々の血液成分を分離すると、その後サ ンプル中の各成分の含有量パーセンテージ又は含有数を決定することが知られて いる。これを効果的に行うためには、種々の相間の境界面の位置をある程度正確 なレベルで同定しなければならない。 しかしながら、血小板と白血球との間に発生する境界面を十分正確な度合いで 検出するのは困難である。そのため、オペレータは血小板と白血球との間の境界 面の位置を、分析や同定というよりも経験や予想によって推定するのが通常であ る。この推定されたパーセンテージを白血球相と血小板相の容量から引くことに よって、白血球数が決定される。 この方法における問題点は、異常な状態や異常なサンプルに対応できない点で ある。例えば、血小板は凝集することが知られており、凝集することによってよ り高い比重を持ち、ヘマトクリットチューブが回転されると、血小板はその他の 血球と混合してしまう。そのため、オペレータが白血球相と血小板相の長さを合 わせて測り、その後推定した血小板の容量を引く場合に、凝集によって明確な血 小板相が見られなければ、かなり大きい誤差が生じる。 この白血球数を決定する方法は、分析する血液中の血小板の含有量が通常より もかなり多いか又は少ない場合にも、一般的に誤り又は不正確となる。 本発明において、血小板の含有量を決定するためのより正確な方法が得られれ ば、白血球数もより正確に決定できるという利点があることが認識される。 本発明によれば、血液サンプル中の白血球数を得る方法であって、 a) 赤血球及び白血球を、血小板が血漿クラウド中に浮遊される程度の遠心 力によって血小板から分離するステップと、 b) 血漿クラウドを光学的にスキャンして、血漿クラウドの光吸収率及び又 は光透過率を測るステップと、 c) 上記ステップb)で得られた測定値を血漿クラウドの長さ以上に亘って積 分し、血液サンプル中の血小板の含有量又は量を決定するステップと、 d) サンプルを、赤血球及び白血球の最適なパッキングができ赤血球と白血 球との間に明確な境界面ができるまで、さらに回転するステップと、 e) パック状の白血球相と血小板相の混合物の容量を測るステップと、及び f) 白血球と血小板の混合物の含有量から血小板の含有量を引いて、白血球 数を決定するステップと、を備えた方法が提供される。 好ましくは、血液サンプルが、ヘマトクリットチューブに入れられ、最初に、 毎分約１０，３００回転する速度で約１５秒間回転される。これによって血液サ ンプルの細胞成分と水成分とを分離する。 好ましくは、種々の相の吸光度が、赤外線レーザー等の光源からの光線のサン プルに対する透過率を測ることによって決定される。好適には、遠心分離器が毎 分約１，０００回の回転に減速されて回転している間、光源を有している走査ア ームが遠心分離ロータを横切り、光源が試料に透過される。 好ましくは、血小板の含有量が決定された後に、サンプルがさらに毎分約１０ ，３００回の回転速度で、約５分間回転され、赤血球及び白血球の最適なパッキ ングと分離が得られる。 本発明を実行するのに用いられる装置が以下の図に示されている。 図１は遠心分離器及び走査アームを示している。 図２ａ及び２ｂは血液サンプルを含んだヘマトクリットチューブを示しており 、血液サンプルの成分は遠心力によって見分けが付く程度に分離されている。 図の中には図３も含まれており、図３にはヘマトクリットチューブの長さに沿 った、典型的なアナログ図形が示されており、各相に対する光透過量によって境 界面の検出と特質が示されている。 図を参照にして、図２に示されているヘマトクリットチューブ１は部分的に血 液サンプルによって満たされ、パテによる接着、又は熱シーリング等によって封 をされる。その後ヘマトクリットチューブ１は、図１に示した遠心分離ロータ３ の溝２に入れられてもよい。遠心分離器は毎分１０，０００回転まで及びそれを 超える範囲で回転するよう調整され機能付けられている。 様々な光源を持つ走査アーム４が遠心分離ロータ３と連帯している。特に、走 査アーム４は赤外線レーザー５及び多色性可視光源（図示していない）を収容し ている。 本発明によると、溝２に配置されたチューブ１は、例えば毎分１０，０００回 転の高速度で、しかし約１０〜２０秒の比較的短い時間だけ、回転される。これ によってたとえ細胞の完全なパッキングは得られなくても、サンプル中の細胞成 分と水成分との分離がなされることが望ましい。つまり、図２ａに示されている のと同様な形状のサンプルを得ることが望ましい。この図から、白血球６と赤血 球７はチューブ１の一端側にあり、一方血小板は血漿クラウド８中に浮遊され、 チューブ１の他端側にあることがわかる。 望ましくは、その後遠心分離器はサンプルをスキャンできる程度に回転速度を 落とし、もし図１に示されている装置が用いられた場合は、走査アーム４がチュ ーブ１上を通過し、特に、赤外線レーザーがクラウドに投射され、光エネルギー のクラウド８に対する透過率を測ることができ、クラウドの濃度が示される。 クラウド８の濃度と光透過量を関連付けるアルゴリズムが、クラウド８の大き さと関連して用いられ、サンプル中の血小板のパーセンテージを決定する。 その後チューブはより速い速度で再び回転され、各細胞タイプの完全な分離と 十分なパッキングを促進し、パックされた細胞容量の正確な測定が行われる。サ ンプルは図２ｂに示した形状であると思われる。これはチューブ１を毎分約１０ 〜１０，５００回という速い回転速度で、約５分間回転することによって得られ る。図２ｂでは、血液サンプルは以下のような分離した成分を含んでいる；パッ クされた赤血球７、白血球６、血小板９、血漿１０及び空気１１。 図３は図２ｂに示されたヘマトクリットチューブ１中のサンプルのアナログ図 形を示している。一般的にアナログ図形に基づいて、成分間にある境界面の位置 と特質が検出される。しかし、血小板９と白血球６との間の境界面がどこにある かはいつも明確にわかるわけではない。本発明によってサンプル中に含まれる血 小板の含有量パーセンテージが比較的正確に決定されるため、白血球６と血小板 ９の大きさを合わせて測り、その後に血小板の含有量を引くことによって、これ までに比べてより確実な白血球数を得ることができる。 本発明の範囲に反することなく、本発明に係る方法、特に成分を分離するため にサンプルを回転する技術、速度、又は時間に関して、は修正を加えることが可 能である。

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Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 血液サンプル中の白血球数を得る方法であって、 a) 赤血球及び白血球を、血小板が血漿クラウド中に浮遊される程度の遠心 力によって前記血小板から分離するステップと、 b) 前記血漿クラウドを光学的にスキャンして、前記血漿クラウドの光吸収 率及び又は光透過率を測るステップと、 c) 前記ステップb)で得られた測定値を前記血漿クラウドの長さ以上に亘っ て積分し、前記血液サンプル中の血小板の含有量又は量を決定するステッ プと、 d) 前記サンプルを、赤血球及び白血球の最適なパッキングができ前記赤血 球と前記白血球との間に明確な境界面ができるまで、さらに回転するステ ップと、 e) パック状の白血球相と血小板相の混合物の容量を測るステップと、及び f) 前記白血球と血小板の混合物の含有量から前記血小板の含有量を引いて 、白血球数を決定するステップと、を備えた方法。 ２． 請求項１記載の方法において、前記血液サンプルが、ヘマトクリットチュ ーブに入れられ、最初に、毎分約１０，３００回転する速度で約１５秒間回 転される方法。 ３． 請求項１又は２記載の方法において、種々の相の前記吸光度が、光源から の光線の前記サンプルに対する透過率を測ることによって決定される方法。 ４． 請求項３記載の方法において、前記光線が、遠心分離器が毎分約１，００ ０回の回転に減速されて回転している間、試料に透過される方法。 ５． 前記請求項のいずれか一つに記載された方法において、血小板の含有量が 決定された後に、前記サンプルがさらに毎分約１０，３００回の回転速度で 、約５分間回転される方法。