JP2000506174A - 殊にガン治療で治療薬として使用するためのシス―４―ヒドロキシ―ｌ―プロリン及びｎ―メチル―シス―４―ヒドロキシ―ｌ―プロリンからなる組合せ物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 治療用、殊にガン治療用作用物質として使用するためのシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン及びＮ−メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンから成る組合せ物が記載されている。更に、ホルモン感受性前立腺ガンの治療用単独物質の使用が記載されている。

Description

【発明の詳細な説明】 殊にガン治療で治療薬として使用するための シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン及び Ｎ−メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン からなる組合せ物 本発明は、殊にヒトのガン治療のための治療用作用物質として使用するための 、主成分としてシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（Ａ）及びＮ−メチル−シ ス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（Ｂ）又はそれらの薬剤学的に認容性の誘導 体を含有する薬剤−組合せ物に関する。本発明は更に、これらの組合せ物を含有 する薬剤組成物及びその使用に関する。本発明は、ガンを患っている患者をこの 組合せ物を用いて治療するための方法にも関する。最後に、本発明はホルモン感 受性前立腺ガンの治療のために個々の成分を使用することに関する。 ドイツ特許第３５３８６１９号明細書から、ガン及び類似腫瘍を治療する際に シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを使用することが公知である。更に、ヨー ロッパ特許（ＥＰ−Ｂ）第０２２３８５０号明細書から、Ｎ−メチル−シス−４ −ヒドロキシプロリン及びＮ−メチル−トランス−４−ヒドロキシプロリンを、 星状細胞腫細胞の治療時に使用することが公知である。この特許文献中には、ヒ ドロキシプロリンの誘導体及び同様に様々な構造、ＯＨ−位置及びアルキル化の プロリンが挙げられている。更に、Cancer Detection and Prevention，Vol．11 ，Nr．1/2，1987，P.66, 要約Nr．2:046，W.Hoerrmann et al.，"Differential effects of cis-4-hydrox y-L-proline(CHP)and methyl-cis-4-hydroxy-L-proline(mcHP)on tumour cells: Evidence for redifferentiation and cell growth inhibition"中に公開されて いる。 さて意外にも、成分（Ａ）及び（Ｂ）、即ちシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロ リン及びＮ−メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンの組合せ物は、殊に 腫瘍の治療に好適な重要な薬剤−組合せ物であることが判明した。腫瘍細胞の細 胞培養で、これらの抗腫瘍作用を特にハッキリと立証することができる。それと いうのも、これらは細胞増殖を著しく抑制するためである。腫瘍細胞をその際、 慣用の培養培地中で、モル比１：１の組合せ物１−１００μｇ／ｍｌの様々な濃 度で６〜１０日間に亙り処理する。一定の時点で細胞数を測定する。細胞数の低 減もしくは細胞増殖の抑制が、該組合せ物で治療しうる腫瘍の重要な指標である 。 本発明の組合せ物は成分（Ａ）及び（Ｂ）を通常、 共力作用が生じるモル比で、有利に１０：１〜１：１０の範囲で、かつ特に有利 に１：１のモル比で含有する。成分は両方とも、１ｋｇ当たり１００００ｍｇを 上回る急性もしくは亜急性毒性を伴う非中毒性である。成分の両方とも、エーム ズテストで変異誘起性ではないことが判明している。 本発明の組合せ物での治療の際に細胞に、細胞増殖抑制が表される治療可能な 腫瘍の特異的例は、腎臓ガン、膀胱ガン、前立腺ガン、乳ガン、脳腫瘍及び繊維 肉腫である。本発明の組合せ物を試験するための典型的なヒト腫瘍細胞系は、様 々な培養寄託局から、例えばドイツガン研究センター（ＤＫＦＺ）の細胞培養寄 託局（ハイデルベルグ）、アメリカ型培養寄託局（ＡＴＣＣ;Rockville，Maryla nd，USA)及び細胞培養ヨーロッパ寄託局（ＥＣＡＣＣ）、応用微生物学研究セン ター(Salisbury，Wiltshire，イギリス)から得ることができる。 例で本発明を詳述するが、本発明はそれに制限されない。 例：細胞増殖抑制に関する実験 本発明の組合せ物を用いての細胞増殖抑制の測定実験のために、ヒト由来の次 の公知の細胞系を使用した。この実験を、無毛マウスに移植された腫瘍に限らず 実施した。それというのも、成分（Ａ）及び（Ｂ）の化学的性質により、動物器 官による物質代謝が可能な 限り迅速に生じ、従って偽陰性結果の危険性があるためである。 １． 腎臓ガン細胞 ＫＴＣＴＬ２：ＤＫＦＺハイデルベルグの１腎臓ガン細胞系に該当する。ＫＴ ＣＴＬ２−細胞は悪性特性を有しており、無毛マウスに腫瘍を、軟質寒天中にコ ロニーを形成し、かつ細胞培養中で基材上に著しく付着して成長する。 ＳＫ Ｎｅｐ：ＤＫＦＺのこの細胞系も同様に、腎臓細胞ガンに由来する。Ｄ Ｋ Ｎｅｐ−細胞はＫＴＣＴＬ２−細胞と同様に、無毛マウスに腫瘍を、かつ軟 質寒天中にコロニーを形成する。しかし、これらは、形態学的に細胞培養中でよ り高い悪性表現型を示す。それというのも、これは明らかに自発的に小さい集合 体を形成し、かつほぼ支持体上での付着に無関係に接触抑制を伴わずに上下に成 長する。 この２種の細胞系を、それらが試験管中で増す悪性特性を有するので選択した 。 ２.膀胱ガン細胞 ＲＴ−４：この細胞系はヒトの高分化乳頭状膀胱ガン（グレード１）に由来す る。この細胞系は著しく付着依存性に成長する。 Ｊ８２：この細胞系は完全に野生化した僅かに分化した膀胱ガンに由来する（ グレード３）。 ３．前立腺ガン細胞 ＰＣ−３：進行性ホルモン耐性前立腺ガン由来の細胞系。 これは、無毛マウスにおいては高度に腫瘍性であり、かつ軟質寒天中でコロニ ーを形成する。 ＬＮＣａＰ：ホルモン感受性中度分化前立腺ガンのリンパ節転移に由来する細 胞系。 乳ガン細胞：細胞系ＭＣＦ７を使用した；これはエストロゲン感受性である。 繊維肉腫細胞：細胞系ＨＴ１０８０を使用した。 脳腫瘍細胞：細胞系ＨＴＺ−１２２及びＨＴＺ−１７を使用した。細胞系ＨＴ Ｚ−１２２には、低悪性星状細胞腫（ＷＨＯグレードＩ）が、細胞系ＨＴＺ−１ ７には高悪性星状細胞種（Glioblastomamultiforme,WHO グレードＩＶ）が該当 する。 これらの細胞系を用いて次の処理実験を実施した： １．物質（Ａ）シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを、様々な濃度で単独で 使用した。 ２．物質（Ｂ）Ｎ−メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを様々な濃 度で単独で使用した。 ３．モル比１：１の（Ａ）及び（Ｂ）からなる組合せ物（Ｋ）を様々な濃度で 使用した。 これらの実験の全ての結果を、添付の図面に記したが、その図面からそれぞれ の細胞数、実験期間（日）及び使用濃度が判る。 これらの図面を以下で詳述する： 腎臓ガン−細胞系ＫＴＣＴＬ２では、単独物質（Ａ）及び（Ｂ）は作用を示さ ない。これに対して両方の物質からなる組合せ物（Ｋ）は約２５％の重要で、か つ配量に依存する成長抑制をもたらす。図面１〜４参照。従って、組合せ物は、 ＫＴＣＴＬ２細胞で共力的（相乗的）細胞成長抑制を示し、これは、単独ではい ずれの物質によっても達成されない。 これとは逆に、特に悪性表現型を示すＳＫ Ｎｅｐでは、（Ａ）、（Ｂ）及び （Ｋ）に効果は無かった。 ヒトの乳頭状膀胱ガン由来の細胞系ＲＴ−４に対する組合せ物（Ｋ）の非常に 強い共力（相乗）効果は驚くべきものである。濃度１００μｇ／ｍｌでは、単独 の物質は実際に効果を示さず、これに対して組合せ物（Ｋ）では細胞成長の劇的 な抑制が示される。図５〜７参照。 完全に野生化し、僅かに分化した膀胱ガンＪ８２では、単独の物質（Ａ）及び （Ｂ）は効果を示さず、組合せ物（Ｋ）は大きな効果を示した。図８〜１０参照 。 ホルモン感受性前立腺ガン−細胞系ＬＮＣａＰでは、細胞成長の重大な抑制が 単独の物質（Ａ）でも（Ｂ）でも見られたが、組合せ物（Ｋ）では更に著しかっ た。図１１〜１３参照。 これに対して、ホルモン耐性前立腺ガン−細胞系Ｐ Ｃ３では、単独物質（Ａ）及び（Ｂ）でも、組合せ物（Ｋ）でも僅かな作用しか 無かった。図１４〜１６参照。 これら両方の前立腺ガン−細胞系の様々な特性は、使用化合物の高い特異性を 証明している。 エストロゲン感受性乳ガン−細胞系ＭＣＦ７では、単独の物質（Ａ）及び（Ｂ ）も組合せ物（Ｋ）も５０％までの抑制を示すが、組合せ物のみについては、こ の効果は用量依存性であることが示された。図１７〜１９参照。 繊維肉腫−細胞系ＨＴ１０８０では、既に単独物質（Ａ）が強い作用を示し、 （Ｂ）に関しては曲線は評価できず、組合せ物（Ｋ）は９０％を上回る細胞増殖 の用量依存性抑制を伴う優れた効果を示す。図２０〜２１参照。 脳腫瘍−細胞系ＨＴＺ１２２では、単独物質（Ａ）及び（Ｂ）並びに組合せ物 （Ｋ）が効果的であるが、組合せ物（Ｋ）が最も強く、約６６％の抑制を伴う。 その際、これらの効果は用量依存性である。図２２〜２４参照。 高悪性脳腫瘍−細胞系ＨＴＺ１７では、既に単独の物質（Ａ）が優れた効果を 示し、単独の物質（Ｂ）は非常に僅かな効果のみを示し、組合せ物（Ｋ）は、約 ７５％の抑制を達成する。図２５〜２７参照。 薬剤及び治療 本発明の組合せ物を含有する薬剤組成物は自体公知の方法で製造することがで きる。"Remington's Pharmaceutical Science"，18．auflage，1990，Macｋ pub lishing Company，Easton，Pennsylvania，USA.,殊に第６部、Pharmaceutical P reparations and Their Manufactureに記載されている。単独の物質は化学合成 により、又は市場で入手することができる。組成物を経口用に又は非経口用に、 殊に静脈内投与用に慣用の助剤を用いて処方することができる。膀胱ガンを治療 するために、膀胱内（経尿道）投与も該当する。この場合には、組合せ物を希釈 水溶液の形で投与する。 用量は、疾患の重度に依存する。本発明の組合せ物は体重１ｋｇ当たり０．０ １〜０．１ｇの一回量で、１日１回又は２回投与することができる。 本発明の薬剤は成分（Ａ）及び（Ｂ）を薬剤学的に認容性の誘導体又は前駆物 質の形で含有しても良い。この場合、次のものを上げることができる：前記の化 合物のアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、酸付加塩、エステル、アミド、酸 アミド及びエーテル、デヒドロプロリン及びデヒドロプロリンのＮ−アルキル− もしくはＮ−メチル−誘導体及びそれらの相応するケト化合物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ， ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ， ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，Ｎ Ｏ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 1. 治療用作用物質として使用するための、相乗作用をもたらすモル比の成分 （Ａ）としてのシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン及び成分（Ｂ）としてのＮ −メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン又はそれらの薬剤学的に認容性 の誘導体からなる組合せ物。 2. 成分（Ａ）及び（Ｂ）のモル比が１０：１〜１：１０である、請求項１に 記載の組合せ物。 3. 成分（Ａ）及び（Ｂ）のモル比が１：１である、請求項１に記載の組合せ 物。 4. 腫瘍の治療で使用するための請求項１から３のいずれかに記載の組合せ物 。 5. 膀胱ガンの治療で使用するための請求項４に記載の組合せ物。 6. ホルモン感受性前立腺ガンの治療で使用するための請求項４に記載の組合 せ物。 7. 腎臓ガンの治療で使用するための請求項４に記載の組合せ物。 8. ホルモン感受性乳ガンの治療で使用するための請求項４に記載の組合せ物 。 9. 繊維肉腫の治療で使用するための請求項４に記載の組合せ物。 10．脳腫瘍の治療で使用するための請求項４に記載 の組合せ物。 11．腫瘍細胞の細胞増殖の抑制で相乗作用をもたらすモル比の、成分（Ａ）と してのシス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン及び成分（Ｂ）としてのＮ−メチル −シス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン又はそれらの薬剤学的に認容性の誘導体 からなる組合せ物を含有する薬剤。 12．成分（Ａ）及び（Ｂ）をモル比１０：１〜１：１０で含有する、請求項１ ０に記載の組合せ物。 13．成分（Ａ）及び（Ｂ）をモル比１：１で含有する、請求項１０に記載の薬 剤。 14．ヒトの腫瘍治療で使用するための請求項１１から１３のいずれかに記載の 薬剤。 15．膀胱ガンの治療で使用するための請求項１４に記載の薬剤。 16．ホルモン感受性前立腺ガンの治療で使用するための請求項１４に記載の薬 剤。 17．腎臓ガンの治療で使用するための請求項１４に記載の薬剤。 18．ホルモン感受性乳ガンの治療で使用するための請求項１３に記載の薬剤。 19．繊維肉腫の治療で使用するための請求項１４に記載の薬剤。 20．脳腫瘍の治療で使用するための請求項１４に記載の薬剤。 21．相乗作用をもたらすモル比の成分（Ａ）としてのシス−４−ヒドロキシ− Ｌ−プロリン及び成分（Ｂ）としてのＮ−メチル−シス−４−ヒドロキシ−Ｌ− プロリン又はそれらの薬剤学的に認容性の誘導体からなる組合せ物の腫瘍治療用 薬剤組成物を製造するための使用。 22．膀胱ガン治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１に記載の使用。 23．ホルモン感受性前立腺ガン治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１ に記載の使用。 24．腎臓ガン治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１に記載の使用。 25．ホルモン感受性乳ガン治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１に記 載の使用。 26．繊維肉腫治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１に記載の使用。 27．脳腫瘍治療用薬剤組成物を製造するための請求項２１に記載の使用。 28．成分（Ａ）と（Ｂ）とのモル比が１０：１〜１：１０、殊に１：１である 、請求項２１から２７のいずれかに記載の使用。