JP2000503312A

JP2000503312A - ヒドロキサム酸を基礎とするコラゲナーゼ阻害剤

Info

Publication number: JP2000503312A
Application number: JP9525693A
Authority: JP
Inventors: ベイリー，スチュアート; バックル，デレク・リチャード; ファラー，アンドリュー; スミス，デイビッド・グリン
Original assignee: スミスクライン・ビーチャム・パブリック・リミテッド・カンパニー
Priority date: 1996-01-17
Filing date: 1997-01-14
Publication date: 2000-03-21
Also published as: NO983283D0; HUP9901022A3; TW462967B; AU725056B2; EP0912545A1; AU1443697A; CZ222498A3; BR9707024A; NO983283L; CN1213368A; KR19990077325A; IL125381A0; NZ326352A; HUP9901022A2; WO1997026257A1; GB9601041D0; PL327820A1; CA2242913A1; ZA97345B; AR005472A1

Abstract

(57)【要約】式（Ｉ）：

Description

【発明の詳細な説明】ヒドロキサム酸を基礎とするコラゲナーゼ阻害剤本発明は可溶性ヒトＣＤ２３形成の新規阻害剤ならびに自己免疫疾患およびアレルギーのごとき可溶性ＣＤ２３（ｓ−ＣＤ２３）の過剰産生に関連する症状の治療におけるそれらの使用に関する。ＣＤ２３（低親和性ＩｇＥ受容体ＦｃｅＲＩＩ、ブラスト２）はＢおよびＴリンパ球、マクロファージ、ナチュラルキラー細胞、ランゲルハンス細胞、単球および血小板等の種々の成熟細胞の表面に発現する４５ｋＤのＩＩ型の細胞膜内タンパク質である[Delespesse ら、Adv.Immunol.49:149-191（1991）]。好酸球上にもＣＤ２３様分子がある[Grangette ら、J.Immunol．143:3580-3588（1989）] 。ＣＤ２３は免疫応答の制御に関与している[Delespesse ら、Immunol.Rev.125: 77-97（1992）]。ヒトＣＤ２３は別個に制御される２種のアイソホーム、ａおよびｂとして存在し、これはアミノ酸の細胞内Ｎ末端において異なるだけである[Y okota ら、55:611-618（1988)]。ヒトでは構成性ａアイソホームはＢリンパ球においてのみ見出され、一方ＩＬ４により誘導可能なｂ型はＣＤ２３を発現できる全ての細胞において見出される。無傷の、細胞結合性ＣＤ２３（ｉ−ＣＤ２３）が、細胞表面から切断され、複雑な一連のタンパク質溶解事象の結果として生成される、多くの熟知されている可溶性フラグメント（ｓ−ＣＤ２３）を形成することが知られているが、その機構は未だ明確ではない[Bourget ら、J.Biol.Chem.269:6927-6930（1994）]。未だ解明されてはいないが、これらのタンパク質溶解事象の結果生じる主要な可溶性フラグメント（Ｍｒ３７、３３、２９および２５ｋＤ）は、全てｉ−ＣＤ２３に共通するＣ末端レクチン・ドメインを保持しており、その事象は最初の３７ｋＤのフラグメントの形成を介して連続的に生じると考えられる[Letellier ら、J.Exp.Med.172:693-700（1990）]。別の細胞内切断経路によりＣ末端ドメインがｉ−ＣＤ２３とは異なる安定した１６ｋＤａのフラグメントを生じる[Grenier −Brosette ら、Eur.J.Immunol.22:1573-1577（1992）]。ヒトの膜結合性ｉ−ＣＤ２３に寄与する作用がいくつかあるが、それらは全てＩｇＥ制御において役割を果たすことがわかっている。それらの作用にはとりわけ：ａ）抗原の提示、ｂ）ＩｇＥ媒介好酸球細胞毒性、ｃ）Ｂ細胞のリンパ節および脾臓の胚中枢へのホーミング、およびｄ）ＩｇＥ合成のダウンレギュレーション等がある[Delespesse ら、Adv.Immunol.49:149-191（1991）]。３種の高分子量可溶性ＣＤ２３フラグメント（Ｍｒ３７、３３および２９ｋＤ）は多機能サイトカイン特性を有し、ＩｇＥ産生において重要な役割を果たすと考えられる。従って、ｓ−ＣＤ２３の過剰形成は、外因性喘息、鼻炎、アレルギー性結膜炎、湿疹、アトピー性皮膚炎およびアナフィラキシーのごときアレルギー疾患の特徴である、ＩｇＥの過剰産生に関与している[Sutton および Gould、Nature，366:421-42 8（1993）]。ｓ−ＣＤ２３に起因するその他の生物学的作用にはＢセル成長の刺激および単球からのメディエーター放出の誘導等がある。従って、慢性Ｂリンパ球性白血病の患者の血清[Sarfati ら、Blood,71:94-98（1988）]およびリュウマチ性関節炎の患者の滑液[Chomarat ら、Arthritis and Rheumatism，36:234-242（1993）] では高レベルのｓ−ＣＤ２３が観察される。炎症におけるＣＤ２３の役割は多種のサンプルにより示唆される。最初に、ｓＣＤ２３は活性化されると、細胞が媒介する炎症に関与する細胞外受容体に結合すると報告されている。従って、ｓＣＤ２３は単球ＴＮＦ、ＩＬ−１およびＩＬ−６放出を直接的に活性化すると報告されている[Armant ら、J.Exp.Med.180:1005-1011（1994）]。ＣＤ２３は単球／マクロファージ上の、ＮＯ₂ ^-、過酸化水素およびサイトカイン（ＩＬ−１、ＩＬ −６およびＴＮＦ）放出を作動させるＢ２インテグリン付着分子、ＣＤ１１ｂおよびＣＤ１１ｃと相互作用することが報告されている[S.Lecoanet−Henchoz ら、Immunity,3:119-125（1995）]。最後に、ＩＬ−４またはＩＮＦがＣＤ２３の発現を誘起し、ヒト単球がそれをｓＣＤ２３として放出するのを誘起する。膜結合性ＣＤ２３受容体をＩｇＥ／抗ＩｇＥ免疫複合体または抗ＣＤ２３ｍＡｂと連結してｃＡＭＰおよびＩＬ−６産生ならびにトロンボキサンＢ２形成を活性化し、これは炎症におけるＣＤ２３の受容体媒介の役割を示している。これらのＣＤ２３の種々の特性により、ｓ−ＣＤ２３の形成を妨げる化合物にはａ）Ｂセル表面上のｉ−ＣＤ２３のレベルを維持することによるＩｇＥ合成のネガティブフィードバック阻害の増強、およびｂ）ｓ−ＣＤ２３の高分子量可溶性フラグメント（Ｍｒ３７、３３および２９ｋＤａ）の免疫刺激サイトカイン活性の阻害作用という二面的な作用があるはずである。加えて、ＣＤ２３の切断を阻止することによりｓ−ＣＤ２３誘起の単球活性化およびメディエーター形成が軽減され、それにより炎症応答が低減するはずである。国際特許出願ＰＣＴ／ＥＰ９５／０２６９３（Snithkline Beecham plc）はマトリックス・メタロプロテアーゼ（例えばコラゲナーゼ、ストロメリシンおよびゲラチナーゼ）の作用を阻止する化合物が哺乳動物細胞培養系にトランスフェクトしたヒト可溶性ＣＤ２３の放出を効果的に阻止することを開示している。既知のマトリックス・メタロプロテアーゼ・阻害剤には以下の表に列挙する特許出願に記載される化合物等がる。本発明によれば式（Ｉ）：（式中、ＲおよびＲ３は各々独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアリールを意味し；Ｒ１はアリールメチルを意味し；およびＲ２はアルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキルまたはシクロアルケニルを意味する）で示される化合物が提供される。本明細書で用いるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は６個までの炭素原子を含有する直鎖および分岐鎖の基を包含し、アリール、ヘテロサイクリル、（Ｃ_1-6）アルキルチオ、（Ｃ_1-6）アルケニルチオ、（Ｃ_1-6）アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロサイクリルチオ、（Ｃ_1-6）アルコキシ、アリール（Ｃ_1-6）アルコキシ、アリール（Ｃ_1-6）アルキルチオ、アミノ、モノ−またはジ−（Ｃ_1-6）アルキルアミノ、シクロアルキル、シクロアルケニル、それらのカルボキシおよびエステル、ヒドロキシ、ならびにハロゲンからなる群から選択される１個またはそれ以上の基で置換されていてもよい。本明細書で用いるシクロアルキルおよびシクロアルケニル基は３から８個の環炭素原子を有する基を包含し、アルキル、アルケニルおよびアルキニル基について前記されているように置換されていてもよい。本明細書で用いる「アリール」なる用語はフェニルおよび２−ナフチルのごときナフチルを包含する。適当には、フェニルおよびナフチル等の任意のアリール基は５個まで、好ましくは３個までの置換基で置換されていてもよい。適当な置換基にはハロゲン、（Ｃ_1-6）アルキル、アリール（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6 ）アルコキシ、（Ｃ_1-6）アルコキシ（Ｃ_1-6）アルキル、ハロ（Ｃ_1-6）アルキル、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−（Ｃ_1-6）アルキルアミノ、アシルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−（Ｃ_1-6）アルキルカルバモイル、（Ｃ_1-6）アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、（Ｃ_1-6）アルキルチオ、（Ｃ_1-6）アルキルスルフィニル（Ｃ_1-6）アルキルスルホニル、ヘテロサイクリルならびにヘテロサイクリル（Ｃ_1-6）アルキル等がある。加えて２個の隣接する環炭素原子は（Ｃ_1-6）アルキレン鎖により連結され、炭素環を形成できる。本明細書で用いる「ヘテロサイクリル」および「複素環式」なる用語は、特記しなければ、適当には各環に各々酸素、窒素および硫黄から選択されるヘテロ原子を適当に４個まで含有し、例えば３個までの置換基で置換されていてもいなくてもよい芳香族および非芳香族単環および縮合環を包含する。各複素環は適当には４から７個の、好ましくは５または６個の環原子を有する。縮合複素環系は炭素環を含有でき、複素環１個は含有する必要がある。好ましくは、ヘテロサイクリル基の置換基はハロゲン、（Ｃ_1-6）アルキル、アリール（Ｃ_1-6 ）アルキル、（Ｃ_1-6）アルコキシ、(C_1-6）アルコキシ（Ｃ_1-6)アルキル、ハロ（Ｃ_1-6）アルキル、ヒドロキシ、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ− （Ｃ_1-6）アルキル−アミノ、アシルアミノ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−（Ｃ_1-6）アルキルカルボニル、アリールオキシカルボニル、（Ｃ_1-6）アルコキシカルボニル（Ｃ_1-6）アルキル、アリール、オキシ基、ウレイド、グアニジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、（Ｃ_1-6）アルキルチオ、（Ｃ_1-6）アルキルスルフィニル、（Ｃ_1-6）アルキルスルホニル、ヘテロサイクリルならびにヘテロサイクリル（Ｃ_1-6）アルキルから選択される。本発明の特定の態様において、Ｒは水素またはアリールチオまたはヘテロサイクリルチオで置換されていてもよいメチルを意味し；および／またはＲ１はベンジル基を意味し；および／またはＲ２はベンジル基を意味し；および／またはＲ３は水素、メチルまたはベンジルを意味する。さらなる態様によれば、本発明はｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与するアレルギー、炎症性疾患および自己免疫疾患のごとき障害の治療または予防用の医薬品を製造するための式（Ｉ）で示される化合物の使用を提供する。さらなる態様において、本発明はｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与するアレルギー、炎症性疾患および自己免疫疾患のごとき障害の治療または予防のための方法であって、式（Ｉ）で示される化合物をそれらを必要とするヒトまたはヒト以外の哺乳動物に投与することからなる方法を提供する。本発明はまたｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与するアレルギー、炎症性疾患および自己免疫疾患のごとき障害の治療または予防のための医薬組成物であって、式（Ｉ）で示される化合物を含んでなり、医薬上許容される担体を含んでもよい医薬組成物を提供する。とりわけ炎症性障害にはアルツハイマー病、多発性硬化症および多発梗塞性痴呆、ならびに炎症により媒介される発作および頭部外傷の後遺症のごときＣＮＳ障害等がある。医薬上許容される塩、溶媒和物および式（Ｉ）で示される化合物のその他の医薬上許容される誘導体もまた本発明の範囲内に包含されることは理解されるべきである。式（Ｉ）で示される化合物の塩には例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、リン酸塩、硫酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、蓚酸塩、酒石酸塩および安息香酸塩のごとき無機または有機酸から誘導される酸付加塩等がある。塩基で塩を形成するすることもできる。このような塩には無機または有機塩基から誘導される塩、例えばナトリウムまたはカリウム塩のごときアルカリ金属塩、およびモルホリン、ビペリジン、ジメチルアミンまたはジエチエルアミン塩のごとき有機アミン塩等がある。驚くべきことに、本発明の化合物は強力で選択的なＣＤ２３プロセッシングの阻害剤であるが、一方先行文献の前記の化合物と比較してコラゲナーゼ阻害活性が低いことが解っている。本発明の化合物は任意の適当な常法を用いて製造でき、例えば特許出願ＷＯ９０／０５７１６、ＷＯ９３／２４４７５、ＷＯ９４／２１６２５、ＷＯ９５／１９９５６、Ｗ０９０／０５７１９、ＷＯ９１／０２７１６、ＷＯ９２／１３８３１、ＷＯ９３／２００４７、ＥＰ−Ａ−０２１４６３９、ＥＰ−Ａ−０２３６８７２、ＥＰ−Ａ−０２７４４５３、ＥＰ−Ａ−０４８９５７７、ＥＰ−Ａ−０４８９５７９、ＥＰ−Ａ−０４９７１９２、ＥＰ−Ａ−０５７４７５８およびＵＳＰ４５９９３６１に開示される方法に類似の方法により製造できる。従って、本発明のさらなる態様は、前記した式（Ｉ）で示される化合物の製法であって、（ａ）式（ＩＩ）：（式中、ＲないしＲ３は前記で定義するとおりであり、Ｘはベンジルもしくはトリメチルシリルのごとき保護基を意味する）で示される化合物を脱保護するか；または（ｂ）式（ＩＩＩ）：（式中、ＲないしＲ３は前記で定義するとおりである）で示される化合物をヒドロキシルアミンもしくはその塩と反応させるか；または（ｃ）式（ＩＶ）：（式中、ＲないしＲ３は前記で定義するとおりである）で示される化合物をチオールと反応させて式（Ｉ）（ここでＲはアルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオまたはヘテロサイクリルチオで置換されたメチルを意味する）で示される化合物を得るか；または（ｄ）式（Ｉ）で示される化合物を前記で定義した別の式（Ｉ）で示される化合物に変換すること；からなる方法を提供する。式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）で示される化合物は新規であり、本発明のさらなる態様である。式（ＩＩ）で示される化合物は式（ＩＩＩ）で示される化合物から、保護したヒドロキシルアミンと反応させることにより製造できる。式（ＩＩＩ）で示される化合物は式（Ｖ）：（式中、ＲないしＲ３は前記で定義するとおりであり、Ｙはｔ−ブチルのごとき保護基を意味する）で示される化合物を加水分解することにより製造できる。ヒドロキサム酸の適当な保護基は当業界で周知であり、ベンジル、トリメチルシリル、ｔ−ブチルおよびｔ−ブチルジメチルシリル等がある。カルボン酸の適当な適当な保護基は当業界で周知であり、ｔ−ブチル、ベンジルおよびメチル等がある。式（Ｖ）で示される化合物は式（ＶＩ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３およびＹは前記で定義するとおりであり、ＺはＺＣＨ₂ −がＲとなるような基を意味する）で示される化合物を還元することにより製造できる。式（Ｖ）で示される化合物は式（ＶＩＩ）：（式中、Ｒ、Ｒ１およびＹは前記で定義するとおりである）で示される化合物を式（ＶＩＩＩ）：（式中、Ｒ２およびＲ３は前記で定義するとおりである）で示される化合物またはその活性誘導体と反応させて製造することもできる。式（ＩＩＩ）で示される化合物は式（ＩＸ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３は前記で定義するとおりである）で示される化合物をチオールと反応させて製造でき、式（ＩＩＩ）（ここでＲはアルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオまたはヘテロサイクリルチオで置換されたメチルを意味する）で示される化合物が得られる。式（ＩＸ）で示される化合物は式（Ｘ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３およびＹは前記で定義するとおりである）で示される化合物を加水分解することにより製造できる。式（Ｘ）で示される化合物は式（ＸＩ）（式中、Ｒ１およびＹは前記で定義するとおりである）で示される化合物を前記で定義した式（ＶＩＩＩ）で示される化合物またはその活性化誘導体と反応させることにより製造できる。出発物質およびその他の試薬は市販により入手可能であるかまたは周知の常法により合成できる。立体異性体を包含する本発明の化合物の異性体はかかる異性体の混合物として、または個々の異性体として製造できる。個々の異性体は任意の適当な方法により製造でき、例えば個々の立体異性体はキラル基質から出発して立体特異的な化学合成によるか、または常法によりジアステレオマーの混合物を分離して製造できる。好ましい態様において、本発明は式（ＩＡ）：で示される化合物を提供する。化合物は実質的に純粋な形態で単離されるのが好ましい。本明細書で記載するように、可溶性ヒトＣＤ２３形成の阻害剤は医学的に有用な特性を有する。好ましくは活性な化合物を医薬上許容される組成物として投与する。組成物を経口投与するのが好ましい。しかしながら、これらをその他の投与様式、例えば気道の障害の治療にはスプレイ、エアロゾルの形態もしくはその他の通常の吸入方法で、心不全の患者には非経口投与することができる。別の投与様式には舌下または経皮投与等がある。組成物を錠剤、カプセル、散剤、顆粒、糖衣錠、坐剤、復元可能な散剤、または経口投与用もしくは滅菌非経口投与用溶液もしくは懸濁液のごとき液体調製物の形態に処方できる。投与に一貫性をもたらすために、本発明の組成物を単位用量の形態にするのが好ましい。経口投与用の単位投与形は錠剤およびカプセルであり、結合剤例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガント、もしくはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、ショ糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトールもしくはグリシン；錠剤化滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム；崩壊剤、例えばデンプン、ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウムもしくは微結晶セルロース；またはラウリル硫酸ナトリウムのごとき医薬上許容される湿潤化剤等の慣用される賦形剤を含有できる。固体の経口用組成物は通常の混和、充填または錠剤化方法により製造できる。繰り返し混和操作を用いて多量の充填剤を用いるこれらの組成物全体に活性成分を分配できる。もちろんこれらの操作は当業界で償用されるものである。錠剤は通常の医薬品製造において周知の方法によりコーティングとりわけ腸溶コーティングできる。経口用液体調製物は例えば乳剤、シロップまたはエリキシルの形態に処方できるか、または使用前に水もしくはその他の適当なベヒクルで復元するための乾燥品にできる。かかる液体調製物は懸濁化剤、例えばソルビトール、シロップ、メチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、硬化食用脂肪；乳化剤、例えばレシチン、モノオレイン酸ソルビタン、またはアラビアゴム；非水性ベヒクル（食用油を含む）、例えば落花生油、分留ココナッツ油、グリセリン、プロピレングリコールもしくはエチルアルコールのエステルのごとき油状エステル；保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピルまたはソルビン酸；および所望により着香剤または着色剤のごとき慣用される添加剤を含有できる。非経口投与の場合、本発明の化合物および滅菌ベヒクルを用いて流体単位投与形を調製し、用いる濃度に応じて化合物をベヒクル中に溶解または懸濁させることができる。溶液を調製するにおいて、本発明の化合物を注射用水に溶解し、滅菌濾過した後に適当なバイアルまたはアンプルに充填し密封することができる。局所麻酔剤、保存剤および緩衝化剤のごとき補助剤をベヒクル中に溶解するのが有利である。安定性を増すために組成物をバイアルに充填した後凍結し、真空下水を除去できる。非経口用懸濁液は、本発明の化合物をベヒクル中に溶解させる代わりに懸濁させること、滅菌処理を濾過により行うことができないことを除いて、実質的に同一の方法で処方できる。本発明の化合物を滅菌ベヒクルに懸濁する前にエチレンオキサイドに曝露して滅菌できる。有利には、界面活性剤または湿潤化剤を紹成物中に配合し、化合物の均一な分散を容易にする。本発明の組成物はまた嗅剤もしくはエアロゾルもしくはネブライザー用溶液として、または通気用の微細粉末として、単独でまたはラクトースのごとき不活性担体と組み合わせて気道投与用に適当に処方できる。このような場合、活性化合物の粒子の直径を適当には５０ミクロン以下、好ましくは１０ミクロン以下、例えば１ −５０ミクロン、１−１０ミクロンまたは１−５ミクロンの範囲にする。必要ならば少量のその他の抗喘息薬および気管支拡張剤、例えばイソプレナリン、イソエタリン、サルブタモール、フェニルフェリンおよびエフェドリンのごとき交感神経興奮作用性アミン；テオフィリンおよびアミノフィリンのごときキサンチン誘導体ならびにプレドニゾロンのごときコルチコステロイドおよびＡＣＴＨのごとき副腎刺激薬を含有してもよい。該組成物は投与方法に応じて活性物質を０．１重量％から９９重量％、好ましくは１０−６０重量％含有できる。吸入投与には１０−９９％、とりわけ６０− ９９％の範囲、例えば９０、９５または９９％の範囲で投与するのが好ましい。微細粉末製剤は規定用量のエアロゾルで、または適当な呼吸器により適当に投与できる。適当な規定用量のエアロゾル製剤は慣用されるスプレイ用高圧ガス、エタノールのごとき共存溶媒、オレイルアルコールのごとき界面活性剤、オレイルアルコールのごとき潤滑剤、硫酸カルシウムのごとき乾燥剤および塩化ナトリウムのごとき密度改変剤を含んでなる。適当なネブライザー用溶液は等張滅菌溶液であり、所望により緩衝化し、例えばｐＨ４−７で本発明の化合物を２０ｍｇ／ｍｌまで含有するが、より一般には０．１−１０ｍｇ／ｍｌであり、標準的なネブライザー装置を用いる。有効量は本発明の化合物の相対的な効果、処置すべき障害の重篤度および患者の体重に依存する。適当には本発明の組成物の投与量単位は本発明の化合物を０．１から１０００ｍｇ（吸入では０．００１から１０ｍｇ）および通常１から５００ｍｇ、例えば１から２５または５から５００ｍｇ含有できる。このような組成物を１日１から６回、より通常的には１日２から４回、一日投与量が７０ｋｇの成人で１ｍｇから１ｇ、とりわけ５から５００ｍｇになるように投与できる。これは約１．４ｘ１０^-2ｍｇ／ｋｇ／日から１４ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり、とりわけ約７ｘ１０^-2ｍｇ／ｋｇ／日から７ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にできる。以下の実施例は本発明を説明するものであり、何ら本発明を限定するのではない。生物学的試験法方法１：試験化合物が可溶性ＣＤ２３の放出を妨げる能力を以下の方法を用いて試験した。ＲＰＭＩ８８６６細胞膜ＣＤ２３切断活性のアッセイ：高レベルのＣＤ２３を発現する、ヒト・エプステイン−バール（Epstein−Bar r）ウイルスで形質転換したＢセルラインであるＲＰＭＩ８８６６細胞の原形質膜[Sarfati ら、Immunology，60:539-547（1987）]を水抽出法を用いて精製する。ホモジナイゼーション・バッファー（２０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭＮａＣｌ、１．５ｍＭＭｇＣｌ₂、１ｍＭＤＴＴ）に細胞を再懸濁し、パールボム（Parr bomb）中Ｎ₂キャビテーションにより粉砕してその他の膜と混合された原形質膜分画を１００００ｘｇで遠心して回収する。軽いペレットを０．２Ｍリン酸カリウム、ｐＨ７．２を湿った細胞１−３ｇあたり２ｍｌを用いて再懸濁し、核ペレットを捨てる。その膜を膜タンパク質１０−１５ｍｇ当たり合計１６ｇにて、０．２５Ｍシュークロースで、デキストラン５００（６．４重量／重量％）およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）５０００（６．４重量／重量％）（ｒｅｆ）間で分配してさらに分画化する［Morre and Morre，BioTe chniques，7:946-957（1989）]。１０００ｘｇで短時間遠心して相分離し、ＰＥＧ（上）相を収集し、２０ｍＭリン酸カリウム緩衝液、ｐＨ７．４で３−５倍に希釈し、１０００００ｘｇで遠心してその相の膜を回収する。ペレットをリン酸緩衝化セイラインに再懸濁し、原形質膜およびその他の細胞膜（例えばリソソーム、ゴルジ体）が３−４倍豊富になる。膜を等分し、−８０℃で保存する。６．６％デキストラン／ＰＥＧでの分画化により原形質膜が１０倍豊富になる。分画化した膜を３７℃で４時間までインキュベートしてＣＤ２３のフラグメントを得、これをＰ３０９９４の５μＭ調製物１でアッセイをクエンチした後０．２ミクロンのデュラポア（Durapore）・フィルター・プレート（Millipore）で濾過して膜から分離する。The Bibding Site（Birmingham，ＵＫ）のＥＩＡキットまたはサンドウィッチＥＩＡにて捕捉抗体としてＭＨＭ６抗ＣＤ２３ｍＡｂ[R owe ら、Int,J,Cancer,29:373-382（1982）]もしくは別の抗ＣＤ２３ｍＡｂを用いる類似のキットを用いて膜から放出したｓＣＤ２３を測定する。リン酸緩衝化セイラインの全容量中０．５μｇ膜タンパク質が生成した可溶性ＣＤ２３の量をＥＩＡにより測定し、種々濃度の阻害剤の存在下で生成した量と比較する。水またはジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）の溶液中に阻害剤を調製し、ＤＭＳＯの最終濃度を２％以下にする。阻害剤なしでインキュベートした対照とのｓＣＤ２３の差異に相対して観察された、ｓＣＤ２３産生が５０％阻害される濃度として曲線適合によりＩＣ５０を決定する。方法２：試験化合物がコラゲナーゼを阻害する能力を以下の方法を用いて試験した。コラゲナーゼ阻害アッセイコラゲナーゼの阻害剤として作用する化合物の能力を Cowston および Barett の方法[Anal.Biochem.99:340-345（1975）]により測定し（これを出典明示により本明細書の一部とする）、これにより試験すべき阻害剤の１ｍＭ溶液またはこれの希釈物をコラーゲンおよびイー・コリ（E.coli）からクローン化し、発現し、精製した滑液の繊維芽細胞からのヒト組み換えコラーゲンと共に３７℃で１８時間インキュベートした（１５ｍＭ塩化カルシウム、０．００５％ Brij３５、２００ｍＭ塩化ナトリウムおよび０．０２％アジドナトリウムを含有する１５０ｍＭトリス、ｐＨ７．６で緩衝化）。コラーゲンは Cawston および Murph y の方法[methods in Enzymology，80:711（1981）]により調製したアセチル化³ Ｈ１型ウシコラーゲンである。サンプルを遠心し、未消化のコラーゲンを沈降させ、放射活性のある上澄部分を取り、シンチレーションカウンターのアッセイに供し、加水分解を測定した。１ｍＭの阻害剤またはその希釈物の存在下のコラゲナーゼ活性を阻害剤を含まない対照における活性と比較し、結果をコラゲナーゼ活性を５０％阻害する濃度として報告した（ＩＣ５０）。実施例１Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドａ）２−ベンジリデン−４−ターシャリー・ブトキシコハク酸メタノール（２０ｍｌ）中２−べンジリデン−４−ターシャリー・ブトキシコハク酸メチル（２ｇ、７．２５ミリモル）の溶液を水酸化ナトリウム溶液（２Ｍ、７．２５ｍ１、１４．５ミリモル）と反応させて混合物を２０℃で１６時間攪拌した。反応物を真空下濃縮して水（２０ｍｌ）を加えた。水溶液をエーテル（２ｘ２０ｍｌ）で抽出し、２Ｍ塩酸で酸性にし、再度エーテル（３ｘ２５ｍｌ）で抽出した。酸性抽出物からのエーテルを乾燥し（ＭｇＳＯ₄）濾過して蒸発させて白色固体の酸を得た（１．７４ｇ、９２％）。融点１１０−１１５℃。 dH(CDCl3)1.46(9H,s),3.47(2H,s),7.38(5H,m),7.94(1H,s),12.58,brs). ｂ）Ｎ−（２−ベンジリデン−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドＤＭＦ（２０ｍｌ）中２−ベンジリデン−４−ターシャリー・ブトキシコハク酸（５２４ｍｇ、２ミリモル）、塩酸（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミド（５８０ｍｇ、２ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（４８６ｍｇ、３．６ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｍｌ、２ミリモル）の溶液を０℃で塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル） −３−エチルカルボジイミド（４２４ｍｇ、２．２ミリモル）と反応させ、反応物を０℃で１時間、および２０℃で１６時間攪拌した。蒸発させた後、残留物を飽和炭酸水素ナトリウム（２５ｍｌ）およびジクロロメタン（５０ｍｌ）間で分配した。有機相を炭酸水素ナトリウム（２ｘ２５ｍｌ）、１０％クエン酸（２ｘ２５ｍｌ）および塩類溶液（２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。濾過し蒸発させて得た残留物をシリカのクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール１００：１）に供し、オフホワイト色の泡状の標題化合物を得た（８５０ｍｇ、８５％）。 dH（CDCl3）1.40 9H,s),3.25(2H,m),3.32(1H,d,J=16.5Hz),3.50(1H,d,J=16.5Hz) ,4.40(2H,m),4.80(1H,dd,J=6.9,7.2Hz),6.75(2H,m),7.26(16H,m). ｃ）Ｎ−（２−（Ｒ／Ｓ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドエタノール（５０ｍｌ）中Ｎ−（２−ベンジリデン−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミド（７９０ｍｇ、１．５８ミリモル）の溶液を大気圧下４．５時間水素化した。反応物を濾過し、減圧下蒸発させて残留物をシリカのクロマトグラフィー（クロロホルム− メタノール１００：１）に供し、白色固体のジアステレオマーの１：１混合物である所望の物質を得た（６６０ｍｇ、８３％）。融点９５−１００℃。 dH（CDCl3）1.25＋1.41(9H,2xs),2.3-3.5(7H,m),4.05-4.70(2H,m),4.60-4.80(1H ,m),5.33-6.02(2H,m),6.7-7.4(15H). ｄ）Ｎ−（２−（Ｒ／Ｓ）−ベンジル−４−ヒドロキシスクシニル）−（Ｓ）− フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドジクロロメタン（１５ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ／Ｓ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミド（６５０ｍｇ、１．３ミリモル）の溶液をトリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）と反応させ、２０℃で４時間攪拌した。反応物を蒸発させてトルエンと同時蒸発させた。残留物をエーテルで粉砕し、白色固体の酸を１：１のジアステレオマー異性体として得た（４７０ｍｇ、８１％）。融点１７２−１７５℃。 dH[(CD3)2SO]2.01-3.03(7H,m),[4.22(d,J=5.8Hz)+4.27(d,J=5.4Hz),合計 2H],4. 53(1H,m),7.02-7.31(15H,m),[8.18(t,J=5.8Hz)+8.27(t,J:5.9Hz，合計 1H],[8.2 2(d,J=8.3Hz)+8.35(d,J=8.5Hz),合計 1H],12.1(1H,brs,CO2H). ｅ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ） −フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドジクロロメタン（１０ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ／Ｓ）−ベンジル−４−ヒドロキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミドのジアステレオマー１：１混合物（２５０ｍｇ、０．５６ミリモル）、ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍｌ、1．１２ミリモル）およびＯ-トリメチルシリルヒドロキシルアミン（３００ｍｇ、２．８ミリモル）の溶液を０℃まで冷却し、アルゴン下ブロモ−トリス−ピロリジノホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒｏＰ）（１６０ｍｇ、０．６７ミリモル）と反応させた。反応物を０℃ で１時間、および２０℃で１６時間攪拌した。有機相を塩類溶液（２ｘ１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、蒸発させて粘着性の固体を得た。この残留物をＶＹＤＡＣタンパク質およびペプチドＣ₁₈逆相カラムを用いる分取ＨＰＬＣに供し、水中０．１％ＴＦＡ：水中０．１％ＴＦＡ中７０％アセトニトリルの１：１混合物で２０ｍｌ／分で溶出した。最初に溶出したジアステレオマー（９．７分）がＮ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）− （Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミド（５０ｍｇ、１９％）、融点１９５−１９７℃であった。 dH[(CD3)2SO]１.８８(1H,dd,J:6.9,14.9Hz),2.09(1H,dd,J=7.5,14.9Hz),2.72-3. 05(5H,m),4.21(2H,m),4.47(1H,m),7.23(15H,m),8.18(2H,m),8.70(1H,brs),10.35 (1H,brs). ２番めに溶出したジアステレオマー（１２．５分）はＮ−（２−（Ｓ）−ベンジル−４−ヒドロキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−ベンジルアミド（３０ｍｇ、１２％）、融点２０３−２０５℃であった。 dH[(CD3)2SO]1.92(1H,dd,J=6.1,15.1Hz),2.23(1H,dd,J=8.8,15.0Hz),2.35-2.75( 3H,m),2.98(2H,m),4.27(2H,m),4.45(1H,m),7.21(15H,m),8.33(1H,d,J=8.5Hz),8. 45(1H,m),8.71(1H,s),10.42(1H,s).実施例２Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミドａ）４−（Ｓ）−ベンジル−３−（３−フェニルプロピオニル）−２−オキサゾリジノンテトラヒドロフラン（２５０ｍｌ）中４−（Ｓ）−ベンジル−２−オキサゾリジノン（２３．９ｇ、１３５ミリモル）の溶液に−６５℃でｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ１０１ｍｌ、１７８ミリモル）を滴加した。得られたオレンジ色の溶液を３０分間攪拌し、次いでテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）中３−フェニルプロピオニル・クロライド（２５ｇ、１４８ミリモル）の溶液を滴加した。１．５時間後反応物を氷冷２Ｍ塩酸（２００ｍｌ）に注ぎ、酢酸エチル（３ｘ１５０ｍｌ）で抽出した。オレンジ色の抽出物を合わせて２Ｍ塩酸（１５０ｍｌ）、炭酸水素ナトリウム（１５０ｍｌ）、および塩類溶液（１００ｍl）で洗浄した。乾燥（ＭｇＳＯ₄）および蒸発させた後、残留物をエーテルから結晶化し、白色針状の標題化合物を得た。融点１０９−１１１℃。 dH(CDCl₃)2.75(1H,dd,J=13.5,10Hz),2.96-3.07(2H,m);3.17-3.38(3H,m),4.14(1H ,s),4.16(1H,d,J=4),4.60-4.70(1H,m),7.15-7.35(10H,m). ｂ）４−（Ｓ）−ベンジル−３−（２−[ターシャリー・ブトキシカルボニルメチル]３−フェニル）プロピオニル−２−オキサゾリジノンテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）中１，１，１−３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（９．６ｍｌ、４５ミリモル）の溶液に−２０℃でｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ２８．３ｍｌ、４５ミリモル）を滴加した。４５分後溶液を− ７５℃まで冷却し、テトラヒドロフラン（６０ｍｌ）中４−（Ｓ）−ベンジル− ３−（３−フェニルプロピオニル）−２−オキサゾリジノン（１０ｇ、３２ミリモル）の溶液を滴加した。溶液を１時間攪拌し、次いでさらに１時間−５０℃まで加温した。−７５℃まで冷却した後テトラヒドロフラン（５０ｍｌ）中ブロモ酢酸ターシャリー・ブチル（７．８ｍｌ、４８ミリモル）を滴加し、溶液を１時間攪拌してからさらに２．５時間以上−２０℃まで加温した。次いで反応物を飽和塩化アンモニウム溶液（１００ｍｌ）に注ぎ、エーテル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。オレンジ色の抽出物を２Ｍ塩酸（５０ｍｌ）、炭酸水素ナトリウム（５０ｍｌ）、および塩類溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。乾燥（ＭｇＳＯ₄）および蒸発させた後、黄色油状物をエーテル／ヘキサン（１：４）で粉砕し、白色固体の標題化合物を得た（１２．３ｇ、９０％）。融点１１１．５−１１２．５℃。 dH(CDCl₃)1.4(9H,s)，2.37(1H,dd,J=17,4Hz)，2.64(1H,dd,J=13,9Hz)，2.72(1H, dd,J=14,10Hz)，2.85(1H,dd,J=17,11Hz)，3.01(1H,dd,J=13,6Hz)，3.31(1H,dd,J =13.5,3Hz),3.93(1H,t,J=6Hz),4.07(1H,dd,J=9,2.5Hz),4.44-4.57(2H,m),7.18-7 .37(10H,m). ｃ）２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシコハク酸ＴＨＦ／水３：１（２００ｍｌ）中４−（Ｓ）−ベンジル−３−（２−[ターシャリー・ブトキシカルボニルメチル]３−フェニル）プロピオニル−２−オキサゾリジノン（５．５ｇ）１３ミリモル）の溶液を２７．５％過酸化水素（９．６５ｍｌ）７８ミリモル）と０℃で反応させ、１０分間攪拌した後水（１００ｍｌ）中水酸化リチウム（１．１ｇ、２６ミリモル）の溶液を加えた。反応物を０℃で３０分間攪拌し、水（５８ｍｌ）中１．５Ｍ亜硫酸ナトリウム（１１ｇ、８７ミリモル）溶液を添加して過剰の過酸化物を駆逐した。炭酸水素ナトリウムで溶液をｐＨ９まで緩衝し、ＴＨＦを蒸発させた。残留物を水（３００ｍｌ）およびジクロロメタン（３００ｍｌ）間で分配し、水相をジクロロメタン（２ｘ２００ｍｌ）で洗浄した。水相を１ＭＨＣｌで酸性にし、酢酸エチル（３ｘ２００ｍｌ）で抽出した。有機相（ＭｇＳＯ₄）を乾燥し、濾過して蒸発させ、透明油状の所望の酸を得た（３．４ｇ、１００％）。 dH(CDCl₃)1.42(9H,s),2.35(1H,dd,J=4.7,16.8Hz),2.56(1H,dd,J=8.7,16.8Hz),2. 77(1H,dd,J=10.4,15.4Hz),3.09(2H,m),7.17-7.34(5H,m),酸プロトンは観察されなかった。ｄ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）− （Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミドＤＭＦ（７0ｍｌ）中２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシコハク酸（１ｇ、３．７８ミリモル）、塩酸（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド（８１２ｍｇ、３．７８ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．６６ｍｌ、３．７８ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（９１９ｍｇ、６．８ミリモル）および塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（７９７ｍｇ、４．１６ミリモル）を実施例１ｂ）のように反応させ、白色固体の標題化合物を得、これを酢酸エチル− ヘキサンから再結晶した（１．１５ｇ、７２％）。 d_H（CDCl₃）1.43(9H,s),2.38(1H,dd,J=4.4,16.8Hz),2.57(3H,d,J=4.7Hz),2.53-2 .99(5H,m)3.15(1H,dd,J=5.8,13.8Hz),4.54(1H,m),5.33(1H,br m),5.90(1H,br d, J=8Hz),7.12-7.31(10H,m). ｅ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミドジクロロメタン（１０ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド（１．０２g、２．４１ミリモル）を実施例１ｄ）に準じて反応させ、白色固体の所望の酸を得た（８３０ｍｇ、９４％）。 d_H[(CD₃)₂SO]2.03(1H,dd,J=5.5,16.5Hz),2.33(1H,dd,J=8.4,16.6Hz)，2.50(3H,d ,J=4.6Hz),2.56(1H,m),2.75-2.99(4H,m),4.39(1H,m),7.14-7.27(10H,m),7.47(1H ,m),8.17(1H,d,J=8.2Hz),12.07(1H,brs). ｆ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ） −フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミドＴＨＦ（５０ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド（０．８ｇ、２．１７ミリモル）の溶液を−２０℃まで冷却し、Ｎ−メチルモルホリン（０．２９ｍｌ、２．６１ミリモル）およびイソブチルクロロホルメート（０．３４ｍｌ、２．６１ミリモル）と反応させ、反応物を−２０℃で１時間攪拌した。Ｏ−ＴＭＳ−ヒドロキシルアミン（２．２ｍｌ、２０．９ミリモル）を滴加し、反応物を外気温まで加温し、１６時間攪拌した。その後、反応物を蒸発させ、酢酸エチルおよび１０％クエン酸間で分配した。有機相を塩類溶液で洗浄し乾燥した（ＭｇＳＯ₄ ）。濾過し蒸発させて固体を得、これを酢酸エチル−メタノールから再結晶して白色固体の標題化合物を得た（３００ｍｇ、３６％）。融点１８８−１９０℃。 d_H[(CD₃)₂SO]1.91(1H,dd,J=7.2,15.0Hz),2.06(1H,dd,J=7.2,15.0Hz),2.50(4H,m) ,2.75(2H,m),2.95(2H,m),4.31(1H,m),7.06-7.27(10H,m),7.38(1H,m),8.11(1H,d, J=8.2Hz),8.73(1H,s),10.4(1H,S).実施例３Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミドａ）３−（Ｒ）−フェニル酢酸ベンジルＴＨＦ（１６０ｍｌ）中３−（Ｒ）−フェニル乳酸（２０．３８１ｇ、１２３ミリモル）の溶液をトリエチエルアミン（２３．５ｍｌ、１７．０２ｇ、１６８．５ミリモル）および臭化ベンジル（１６．２ｍｌ）２３．１８ｇ、１３５．３ミリモル）と反応させ、混合物を１時間還流して攪拌した。冷却後、沈殿物を濾過により除去し、濾液を蒸発させた。残留物を酢酸エチルに取り、飽和炭酸水素ナトリウム、１ＭＨＣｌ、塩類溶液で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）した。濾過し、蒸発させて黄色油状の標題化合物を得た（２４．０８６ｇ、７６％）。 dH[(CD₃)₂SO]2.84(1H,dd,J=7.97,13.75 Hz),2.97(1H,dd,J=5.5,13.75 Hz),4.26- 4.34(1H,m),5.09(2H,s),5.62(1H,d,J=6.32 Hz),7.16-7.43(10H,m) ｂ）２−（Ｒ）−ベンジル−３−ターシャリー・ブトキシカルボニルコハク酸ジベンジルＤＭＦ（１６５ｍｌ）中ターシャリー・ブチルマロン酸ベンジル（２１．１ｇ、８４．４ミリモル）の溶液に水素化ナトリウム（鉱物油中６０％分散物、３．３７ｇ、８４．３ミリモル）を０℃で加えた。溶液を室温まで加温し、アルゴン下１時間攪拌した。無水トリフラート（２１．８５ｍｌ、３6．６ｇ、１３０．２ミリモル）をジクロロメタン（２２０ｍｌ）中３−（Ｒ）−フェニル酢酸ベンジル（２４ｇ、９３．７５ミリモル）およびピリジン（７．０９ｍｌ、８６．８ミリモル）の溶液をに０℃で一度に加えた。溶液をアルゴン下１時間攪拌した。混合物を氷冷水、塩類溶液で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過した。濾液を０℃でマロン酸塩のＤＭＦ溶液に加え、溶液を外気温まで加温し、１６時間攪拌した。蒸発させた後、残留物を酢酸エチルに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液、１ＭＨＣｌ、塩類溶液で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。濾過し、蒸発させて残留物を得、これをシリカのクロマトグラフィー（５％酢酸エチル−へキサン）に供し、油状の標題化合物を得た（２４．６７ｇ、６０％）。 dH（CDCl3)1.35(9H,d,J=11.55 Hz)2.84-3.02(2H,m),3.38-3.48(1H,m),3.68(1H,d d,J=3.7,9.5Hz),4.86-5.19(4H,m),7.03-7.37(15H,m) ｃ）２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシ−３−エテニルコハク酸イソプロピルアルコール（９０ｍｌ）中２−（Ｒ）−ベンジル−３−ターシャリー・ブトキシカルボニルコハク酸ジベンジル（１４．６４ｇ、３０ミリモル）の溶液を１０％Ｐｄ／Ｃと反応させ、大気圧下で水素化した。反応物を濾過し、濾液をピペリジン（８．９１ｍｌ、９０ミリモル）およびホルムアルデヒド（３７％、３６．６３ｍｌ、４５０ミリモル）と反応させて一晩外気温で攪拌した。蒸発させた後残留物を酢酸エチルに溶解し、１ＭＨＣｌ、塩類溶液で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）した。濾過し、蒸発させて無色油状の標題化合物を得た（７．１７ｇ、８７％）。 dH(CDCl3)1.48(9H,s),2.96(1H,dd,J=8.25,14.02 Hz),3.26(1H,dd,J=7.98,14.02H z),3.75(1H,t,J=7.98Hz),5.55(1H,s),6.23(1H,s),7.14-7.30(5H,m),酸プロトンは見られなかった．ｄ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシ−３−エテニルスクシニル）−（Ｓ）-フェニルアラニンアミドＤＭＦ（８０ｍｌ）中２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキジ− ３−エテニルコハク酸（７．０８３ｇ、２５．６３ミリモル）、塩酸（Ｓ）−フェニルアラニンアミド（４．６８ｇ、２３．３ミリモル）、ジイソプロピルエチルアミン（３．９７ｍｌ、２３．３ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（７．１６ｇ、４６．４ミリモル）の溶液を０℃で塩酸１−（３ −ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（５．３５ｇ、２７．９６ミリモル）と反応させ、反応物を０℃で１時間、および外気温で１６時間攪拌した。蒸発させた後残留物をジクロロメタンに溶解し、１０％クエン酸、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。濾過し蒸発させて残留物を得、これをシリカのクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル７：３−３：７でグラジエント溶出）に供し、白色固体の標題化合物を得た（５．８３ｇ、６０％）。 dH[(CD₃)₂SO]1.39(9H,s),2.68-2.79(2H,m),2.92-3.05(2H,m),3.72(1H,t,J=7.42H z),4.38-4.47(1H,m),5.44(1H,s),5.94(1H,s),7.03-7.25(12H,m),7.90(1H,d,J=8. 25 Hz). ｅ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−エテニルスクシニル） −（Ｓ）−フェニルアラニンアミドジクロロメタン（５０ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ターシャリー・ブトキシ−３−エテニルスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミド（２．１１ｇ、５ミリモル）の溶液をトリフルオロ酢酸（５０ｍｌ）と反応させ、外気温で３時間攪拌した。反応物を蒸発させてトルエンで同時蒸発させた。残留物をエーテルで粉砕し、白色固体の標題化合物を得た（１．５９ｇ、８７％）。 dH[(CD₃)₂SO]2.70-2.78(2H,m),2.92-3.05(2H,m),3.77(1H,t,J=7.42 Hz),4.36−4 .44(1H,m),5.48(1H,s),6.02(1H,s),7.04-7.24(12H,m),7.87(1H,d,J=8.53 Hz),12 .59(1H,br.s). ｆ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミドメタノール（２0ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシ−３ −エテニルスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミド（１．４８ｇ、３．９ミリモル）の溶液を外気温で２−メルカプトチオフェン（５．０７ｍｌ）と反応させ、アルゴン下１８時間加熱還流した。反応物を蒸発させてトルエンで同時蒸発させた。残留物をエーテルで粉砕し、白色固体の標題化合物を得た（１．６３ｇ、８６％）。 dH[(CD₃)₂SO]1.95(1H,dd,J=3.03,12.92 Hz),2.28-2.75(6H,m),2.98(1H,dd,J=4,1 3.5 Hz),4.32-4.41(1H,m),6.32(1H,s),6.91-7.27(13H,m),7.60(1H,dd,J=1.37,5. 22Hz),8.19(1H,d,J=8.53Hz),12.70(1H,br.s) ｇ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２− チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミドＴＨＦ（２５ｍｌ）およびＤＭＦ（１０ｍｌ）中Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル −４−ヒドロキシ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニノレ）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミド（１．４４５ｇ、３ミリモル）の溶液をアルゴン下 −２０℃でＮ−メチルモルホリン（０．４２ｍｌ、３．６ミリモル）およびイソブチルクロロホルメート（０．４８ｍｌ、４８９ｍｇ、３．６ミリモル）と反応させた。−２０℃で１時間攪拌した後、Ｏ−トリメチルシリルヒドロキシルアミン（２．６ｍｌ、２．５３ｇ、２１ミリモル）を滴加して反応させ、外気温で１６時間攪拌した。蒸発させた後残留物を酢酸エチルに溶解し、１０％クエン酸、塩類溶液で洗浄し、乾燥した（ＭｇＳＯ₄）。濾過し、蒸発させ、エーテルで粉砕した後固体を酢酸エチル中加熱し、残留物を濾過して（これを何回も繰り返す）白色固体の標題化合物を得た（２５ｍｇ）。 dH[(CD₃）₂SO]1.81(1H,dd,J=2.3,12.5 Hz),2.25-2.66(6H,m),2.97(1H,dd,J=3.7, 13.5Hz),4.25-4.33(1H,m),5.89(1H,s),6.85(1H,s),6.96-7.24(12H,m),7.56(1H,d d,J=1.2,5.4Hz,8.13(1H,d,J=8.52 Hz),8.98(1H,s),10.71(1H,s).実施例４Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミドａ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド実施例３ｆに準じるがＮ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシ−３−エテニルスクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド（２００ｍｇ、０．５３ミリモル）を用いて製造し、白色固体の標題化合物を得た（１００ｍｇ、３８％）。 d_H[(CD₃)₂SO]1.94(1H,dd,J=3.2,12.8Hz),2.28-2.72(6H,m),2.44(3H,d,J=4.7Hz), 2.93(1H,dd,J=4.1,13.5Hz)，4.37(1H,m)，6.79(1H,m)，7.01-7.27(12H,m)，7.60 (1H,dd,J=1.5,5.1Hz),8.23(1H,d,J=8.8Hz),12.7(1H,brs). ｂ）Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２− チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド実施例３ｇに準じて製造し白色固体の標題化合物を得た（３５％）。 d_H[(CD₃)₂SO] 1.83(1H,d,J=10.5Hz),2.30(1H,m),2.39(3H,d,J=4.7Hz),2.50-2.63 (5H,m),2.94(1H,dd,J=4.1,13.7Hz),4.33(1H,m),6.45(1H,m),7.00(4H,m),7.17(8H ,m),7.56(1H,dd,J=1.4,5.2Hz),8.20(1H,d,J=8.2Hz,),8.97(1H,brs),10.70(1H,br s). 活性データ＊「比較実施例」はＥＯ９０／０５７１９の実施例２の、式：[式中、ＲはＣＨ₂Ｓ−（２−チエニル）を意味し、Ｒ¹はメチルを意味する]で示される化合物である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/16 Ａ６１Ｋ 31/16 31/381 31/38 ６０１Ｃ０７Ｃ 237/22 Ｃ０７Ｃ 237/22 Ｃ０７Ｄ 333/34 Ｃ０７Ｄ 333/34 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者バックル，デレク・リチャードイギリス、ケイティ18・５エックスキュー、サリー、エプソム、ユー・トゥリー・ボトム・ロード、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者ファラー，アンドリューイギリス、シーエム18・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、サード・アベニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ (72)発明者スミス，デイビッド・グリンイギリス、シーエム18・５エイダブリュー、エセックス、ハーロウ、サード・アベニュー、ニュー・フロンティアーズ・サイエンス・パーク・サウス、スミスクライン・ビーチャム・ファーマシューティカルズ

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）：（式中、ＲおよびＲ３は、各々、独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアリールであり；Ｒ１はアリールメチルであり；およびＲ2はアルキル、アルケニル、アリール、シクロアルキルまたはシクロアルケニルを意味する）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体。２．式（ＩＡ）：（式中、ＲないしＲ３は請求項１で定義するとおりである）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体。３．Ｒが水素またはアリールチオもしくはヘテロサイクリルチオで置換されていてもよいメチルであり；および／またはＲ１がベンジル基であり；および／またはＲ２がベンジル基であり；および／またはＲ３が水素、メチルもしくはベンジルである請求項１または２に記載の化合物。４．Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ）− フェニルアラニン−N’−ベンジルアミド；Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノスクシニル）−（Ｓ）− フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド；Ｎ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニンアミド；およびＮ−（２−（Ｒ）−ベンジル−４−ヒドロキシアミノ−３−（Ｓ）−[２−チエノチオメチル]スクシニル）−（Ｓ）−フェニルアラニン−Ｎ’−メチルアミド；からなる群から選択される化合物。５．ｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与する障害の治療または予防用の医薬の製造における請求項１ないし４のいずれかに記載の化合物の使用。６．ｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与する障害の治療または予防方法であって、請求項１ないし４のいずれか１つに記載の化合物をそれを必要とするヒトまたはヒト以外の哺乳動物に投与することからなる方法。７．ｓ−ＣＤ２３の過剰産生が関与する障害の治療または予防用の医薬組成物であって、請求項１ないし４のいずれか１つに記載の化合物および任意の医薬上許容される担体を含んでなる組成物。８．請求項１ないし４のいずれか１つに記載の化合物の製法であって：（ａ）式（ＩＩ)：（式中、ＲないしＲ３は請求項１で定義するとおりであり、Ｘはベンジルもしくはトリメチルシリルのごとき保護基を意味する）で示される化合物を脱保護するか；または（ｂ）式（ＩＩＩ）：（式中、ＲないしＲ３は請求項１で定義するとおりである）で示される化合物をヒドロキシルアミンもしくはその塩と反応させるか；または（ｃ）式（ＩＶ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３は請求項１で定義するとおりである）で示される化合物を、チオールと反応させて式（Ｉ）の化合物（ここでＲはアルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオまたはヘテロサイクリルチオで置換されたメチルである）を得るか；または（ｄ）式（Ｉ）で示される化合物を別の式エー（Ｉ）で示される化合物に変換すること；からなる方法。９．請求項８で定義する式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）で示される化合物。１０．式（Ｖ）：（式中、ＲないしＲ３は請求項１で定義するとおりであり、Ｙはｔ−ブチルのごとき保護基を意味する）で示される化合物；または式（ＶＩ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３およびＹは前記で定義するとおりであり、ＺはＺＣＨ₂ がＲであるような基を意味する）で示される化合物；または式（ＩＸ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３は前記で定義するとおりである）で示される化合物；または式（Ｘ）：（式中、Ｒ１ないしＲ３およびＹは前記で定義するとおりである）で示される化合物。