JP2000500466A

JP2000500466A - 血液調節化合物

Info

Publication number: JP2000500466A
Application number: JP9519103A
Authority: JP
Inventors: バトナガール，プラディップ・クマール; ヘールディング，ディルク・アンドリース; ハルトマン，ミヒャエル; ヒープル，ヨハン; クレミンガー，ペーター; ロヴェンスツキー，フランツ
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1995-11-13
Filing date: 1996-11-12
Publication date: 2000-01-18
Also published as: EP0861080A4; EP0861080A1; US6114357A; WO1997017968A1

Abstract

(57)【要約】本発明は血液調節活性を有し、造血の刺激ならびにウイルス、真菌および細菌感染症の治療に用いることができる一般式（Ｉ）：

Description

【発明の詳細な説明】血液調節化合物発明の分野本発明は、血液調節活性を有する化合物であって、造血を刺激し、ウイルス、真菌および細菌感染症の治療に用いることができる新規な化合物に関する。発明の背景造血系は終生に及ぶ細胞再生プロセスであり、このプロセスにより特定の幹細胞集団が少なくとも９種の異なる細胞系統（赤血球、血小板、好酸球、好塩基球、好中球、単球／マクロファージ、破骨細胞およびリンパ球）のより大きな集団の成熟分化血液細胞（Ｄexter ＴＭ.Ｓtem cells in normal growth and diseas e.Ｂr.Ｍed.Ｊ.1987;195:1192-1194）を生じさせる(Ｍetcalf Ｄ.，Ｔhe Ｍolec ular Ｃontrol of Ｂlood Ｃells.1988;Ｈarvard Ｕniversity Ｐress，Ｃambri dge，ＭＡ)。さらに、幹細胞は、最終的に、細胞毒性物質で治療した後または骨髄移植後の骨髄の再生に関与している。大部分の標準的な抗腫瘍薬の用量−限定の（dose−limiting）主な毒性は骨髄抑制に関連付けられ、これが重度であるかまたは長引くと、生命を脅かす感染性および出血性合併症を引き起こしうる。骨髄抑制は予測可能であり、単一薬剤のＩ相試験細胞毒性化合物の５０％以上で用量−限定的であると報告されている（Ｍerrouche Ｙ.，Ｃatimel Ｇ.，Ｃlavel Ｍ.，Ｈematopoietic growth factors and chemoprotectants; should we move toward a two-step process for phas e Ｉclinical trails in oncology? Ａnn Ｏncol 1993;4;471-474)。感染の危険性は、好中球減少症の重篤度および期間により測定される骨髄抑制の程度に直接関係する(Ｂrody ＧＰ，Ｂuckley Ｍ，Ｓathe ＹＳ，Ｆreireich ＥＪ．Ｑuanti tative relationship between circulating leukocytes and infections with a cute leukemia．Ａnn Ｉn Ｍed 1965;64:328-334)。造血作用の調節は、初期多機能幹細胞および成熟循環エフェクター細胞を含む、造血カスケードの種々の段階での種々のサイトカインおよび増殖因子の相互作用に影響を与える。これらの調節分子として、顆粒球コロニー刺激因子(Ｇ−ＣＳＦ)、顆粒球−マクロファージ刺激因子(ＧＭ−ＣＳＧ)、マクロファージ−コロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）および宿主防御において主要な役割を果たす重複する、付加的かつ相乗的作用を有する種々のインターロイキンが挙げられる。機構的には、これは、顆粒球およびマクロファージの産生の向上、ならびにエフェクター細胞機能の活性化により達成される(Ｍoore ＭＡＳ．Ｈemopoietic growth factor interactions: in vitro and in vivo preclinical evaluation．Ｃance r Ｓurveys 1990;9:7-80)。これらの活性を調整することで、細菌、ウイルスおよび真菌感染症を克服するのに必要な最適宿主防御が支持される。好中球減少症の重篤度および骨髄毒性を予防または軽減させる方法として、造血増殖因子および／または他の造血サイトカインの使用が挙げられる。このような治療法は、抗腫瘍薬の効能を改善させるかもしれない細胞毒性薬の用量を増加させる可能性を付与し、抗腫瘍薬の使用に伴う罹患性を減少させるため、該治療法は一般的に行われるようになってきている(Ｓteward ＷＰ.，Ｇranulocyte an d granulocyte-macrophage colony stimulating factors，Ｌancet 1993;342:15 3-157)。臨床研究により、Ｇ−、ＧＭ−および／またはＭ−ＣＳＦが、細胞毒性化学療法を受けている悪性腫瘍の患者または骨髄移植後の感染の危険性が高い患者において好中球減少症の期間を減少させ、骨髄性回復を促進し、好中球減少症に伴う感染症および他の感染性合併症を減少させうることがわかった(Ｓteward ＷＰ.，Ｇranulocyte and granulocyte-macrophage colony stimulating factor s，Ｌancet 1993;342:153-157およびＭunn ＤＨ，Ｃheung ＮＫＶ.Ｐreclinical studies of macrophage colony-stimulating factor.Ｓemin Ｏncol.1992;19:3 95-407)。本発明者らは骨髄造血細胞に対して刺激効果を有し、ウイルス、真菌および細菌病の治療および予防において有用である、ある種の新規な化合物を見いだした。発明の要約本発明は、血液調節活性を有し、造血作用の刺激ならびに細菌、ウイルスおよび真菌病の予防および治療に用いることができる、後記に式（Ｉ）で表す、化合物を含む。これらの化合物は、種々の臨床的状況、例えば手術により誘発された骨髄抑制、ＡＩＤＳ、ＡＲＤＳ、先天性脊髄形成異常、骨髄および臓器移植に由来の細胞数の減少した患者における白血球の回復；白血球減少症の患者の感染症からの防御；重症の火傷患者の治療；いくつかの細胞周期特異性抗ウイルス剤について観察される脊髄抑制の軽減；骨髄移植を受けた患者、特に移植片対宿主疾患の患者における感染症の治療、結核の治療およびヒトおよび動物における原因不明の熱病の治療において有用である。化合物はさらに免疫抑制および「正常」対象の両方におけるウイルス、真菌および細菌感染症、特にカンジダおよびヘルペスの治療および予防においても有用である。これらの化合物はさらに同時係属の米国出願番号０７／７９９４６５および米国特許第４４９９０８１号（出典明示により本発明の一部とする）のモノマーと組み合わせて用いて、骨髄細胞における活性の高低の交互のピークを得、造血の自然の約２４時間周期のリズムを促進できる。このように、細胞増殖抑制療法を低骨髄活性の期間に適用することができ、かくして骨髄損傷の危険性が軽減され、一方で次の活性のピークにより再生が促進されるであろう。本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物と医薬上許容される担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。本発明はさらに、ヒトを含む動物の骨髄造血系の刺激法であって、これを必要とする動物に、有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。本発明はまた、免疫抑制されたおよび正常なヒトを含む動物におけるウイルス、真菌および敗血症を含む細菌感染症の予防および治療法であって、これを必要とする動物に有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することからなる方法を提供する。発明の詳細な記載本発明の化合物は、構造式（Ｉ）：｛式中、Ａ₁とＡ₂は、互いに独立して、Ｚ−(ＣＨ₂)_k−(ＮＲ''')_qであり；Ｚは、環中に４個までのヘテロ原子Ｎ、Ｏ、Ｓを含有する４ないし１０員単環または二環式複素環系である（ここに、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、環は１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ_1-4アルコキシ、 (ＣＨ₂)_mＲ₄、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、Ｎ (Ｒ₃)₂、アシルアミノまたはアミノアシル基で置換されているかまたは置換されておらず、８、９、１０員単環系は除外する）；ｋは０ないし４の整数であり；Ｒ'''は水素、Ｃ_1-4アルキルまたはＣ_1-4アルキルカルボン酸であり；ｑは０ないし１の整数であり；Ｒ'およびＲ"は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルＣ(Ｏ)Ｒ₄、Ｃ_1-4アルキルであるかまたはＲ'およびＲ"は、１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、またはＮ(Ｒ₃)₂で所望により置換されていてもよいベンジルであり；Ｑは［式中、Ｂ₁は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_m−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_m+1−Ｒ²、−(ＣＨ₂)_m−Ｒ³ 、−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ²または−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ³ （ここで、Ｒ²は独立して−ＯＲ³、−Ｎ(Ｒ³)₂、−ＳＲ³であり；Ｒ³は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｍは０ないし４の整数である）であり；Ｃ₁は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_n−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_n+1−Ｒ⁴、−(ＣＨ₂)_n−Ｒ⁵ 、−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁴または−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁵ （ここで、Ｒ⁴は独立して−ＯＲ⁵、−Ｎ(Ｒ⁵)₂、−ＳＲ⁵であり；Ｒ⁵は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｎは独立して０ないし４の整数である）であり；Ｂ₂は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_p−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_k+1−Ｒ⁶、−(ＣＨ₂)_k−Ｒ⁷、 −(ＣＨ₂)_k−ＣＯＲ⁶または−(ＣＨ₂)_k−ＣＯＲ⁷ （ここで、Ｒ⁶は独立して−ＯＲ⁷、−Ｎ(Ｒ⁷)₂、−ＳＲ⁷であり；Ｒ⁷は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｋは０ないし４の整数である）であり；Ｃ₂は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_s−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_s+s−Ｒ⁸、−(ＣＨ₂)_s−Ｒ⁹ 、−(ＣＨ₂)_s−ＣＯＲ⁸または−(ＣＨ₂)_s−ＣＯＲ⁹ （ここで、Ｒ⁸は独立して−ＯＲ⁹、−Ｎ(Ｒ⁹)²、−ＳＲ⁹であり；Ｒ⁹は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｓは０ないし４の整数である）であり；Ｄは(ＣＨ₂)_i（ここで、２個までの炭素原子はＲ¹⁰およびＲ¹¹で所望によりgem −置換されていてもよく、Ｒ¹⁰およびＲ¹¹は、独立して、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-4アルケニル、Ｃ_2-4アルキニル（これらはすべて、１個または２個のＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｎ(Ｒ¹²)２、(Ｒ¹²)₂ＮＣ(Ｏ)−、−(ＣＨ₂)_sＲ¹³、−(ＣＨ₂)_sＲ¹² 、−(ＣＨ₂)_sＣＯＲ¹³または−(ＣＨ₂)_sＣＯＲ¹²で置換されていてもよい）であるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹は、一緒になって式（Ｉａ）：（ここで、ｐおよびｑは、独立して０ないし３の整数であり；ただし、ｐおよびｑの両方が０ではない；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮ(Ｒ¹²)である）の環または複素環を形成してもく；Ｒ¹²は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；Ｒ¹³は、独立して、ＯＲ¹²、Ｎ(Ｒ¹²)₂またはＳＲ¹²であり；ｉは３ないし８の整数である；ただし、Ｂ₁はＣ₁と同一ではなく、Ｂ₂はＣ₂と同一ではなく；Ａ₁≠Ａ₂；Ｂ₁≠Ｂ₂；Ｃ₁≠Ｃ₂；Ｂ₁≠Ｃ₁；およびＢ₂≠Ｃ₂である］｝で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。前記の式（Ｉ）におけるＺは、所望により置換されていてもよいピロリル、イソピロリル、ピラゾリル、イソイミダゾリル、トリアゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、トリアジニル、モルホリニル、インドリル、インドレニニル、イソベンザゾリル、ピリンジニル、イソインダゾリル、インドキサジニル、ベンズオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、ピリドピリジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、インドリニル、ピロリドニル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピペリジル、テトラゾリル、キヌクリジニル、アゼチジニル、またはプリニルを意味する。Ｚの置換基として可能なものは、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-4アルキル、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ_1-4アルキルアミノ、ジ−Ｃ_1-4アルキルアミノ、アシルアミノまたはアミノアシル基である。Ｒ³、Ｒ⁵、Ｒ⁷およびＲ⁹は、独立して、水素、メチル、エチル、プロピル、ｉ −プロピル、ブチルおよびベンジルを意味する。好ましい化合物は、Ｚがピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、アゼチジニルまたはピロリジニルであり；Ｒ¹⁰およびＲ¹¹がＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ¹²)₂、−(ＣＨ₂)_sＲ¹³、または−(ＣＨ₂)_sＣ(Ｏ)Ｒ¹²により置換されたＣ_1-4アルキルであるか；またはＲ¹ ⁰ およびＲ¹¹が一緒になって式（Ｉａ）（式中ＸがＯ、ＳまたはＣＨ₂であり、ｐおよびｑが１ないし３である）の環または複素環を形成してもよく；Ｒ¹²が水素またはＣ_1-4アルキルであり；およびＲ¹³がＯＲ¹²またはＮ(Ｒ¹²)₂である化合物である。より好ましい化合物は、Ｚが２−ピリジニル、２−ピリミジニル、２−ピラジニル、２−ピロリドン−５−イルまたは２−ピロリジニルであり；Ｒ¹⁰およびＲ¹¹ がＣ_1-2アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ¹²)₂、または−(ＣＨ₂)_sＲ¹³により置換されたＣ_1-2アルキルであるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹が一緒になって式（Ｉａ）（式中ＸがＯであり、ｐおよびｑが１または２である）の複素環を形成してもよく；Ｒ¹²が水素またはＣ_1-4アルキルであり；およびＲ¹³がＯＲ¹²またはＮ(Ｒ¹²)₂である化合物である。Ｚの好ましい置換基は、メチル、エチル、メトキシ、メトキシメチル、オキソ、オキシム、ヒドロキシ、アミノ、エチルアミノまたはジメチルアミノである。好ましいＲ'、Ｒ"、Ｂ₂およびＣ₂は、水素、メチルおよびエチルである。アルキル基は、直鎖でも分岐鎖でもよい。本発明の化合物は１またはそれ以上の不斉炭素原子を含有し、ラセミおよび光学活性な形態で存在してもよい。これらのすべての化合物およびジアステレオマーは本発明の範囲内にあると考えられる。調製法Ｅ、Ｒ'、Ｒ"、Ｒ'''、Ｃ₁、Ｃ₂、Ｂ₁、Ｂ₂、Ａ₁、Ａ₂、Ｚ、ｋ、ｌ、ｍ、ｎ、ｐ、ｘおよびｙが式（Ｉ）において定義したとおりである式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に記載したのと類似した方法により調製される。スキーム１ａ）ブチルリチウム、ＴＨＦ；ｂ）ＮａＮ₃、ＮＢｕ₄Ｉ、ＤＭＦ；ｃ）トリフェニルホスフィン、Ｈ₂Ｏ／ＴＨＦ；ｄ）ＤＭＡＰ、ＨＯＢｔ、ＥＤＣ、ＣＨ₂Ｃｌ₂；ｅ）濃ＨＣｌ、ジオキサン／ＥｔＯＨ；ｆ）ＮａＯＨ、ジオキサン／Ｈ₂Ｏ／ＥｔＯＨ１等量の（２Ｓ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジエトキシイソプロピルピラジン（スキーム１における１）を適当な溶媒（ＴＨＦなど）中、強い塩基（ブチルリチウムなど）を用い、適当な二価求電子試薬（スキーム１における２など）と結合させ、スキーム１における３を得る。適当な溶媒（ＤＭＦなど）中、ＮａＮ₃、ＮＢｕ₄Ｉでの化学基転移、その後、得られたアジドを適当な極性プロトン性溶媒（Ｈ₂Ｏ／ＴＨＦなど）中トリフェニルホスフィンで還元し、スキーム１における４を得て、ついで、非プロトン性極性溶媒（ＣＨ₂Ｃｌ₂など）中、活性化剤（ＥＤＣなど）を用い、適当な複素環酸（スキーム１における５など）でアシル化する。適当な溶媒（ジオキサン／エタノールなど）中、標準的な酸性条件（濃ＨＣｌなど）下で加水分解およびピラジン環の開裂を行い、ついで、得られるアミンを方法ｄ）に従ってアシル化し、スキーム１における７を得る。所望により、適当な溶媒（ジオキサン／エタノールなど）中、標準的な塩基性条件（ＮａＯＨ）下でエステルの加水分解をし、スキーム１における生成物８を得る。式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩をヒトおよび他の哺乳動物の治療に用いるためには、通常、製薬慣習にしたがって医薬組成物として処方される。本発明のさらに別の特徴により、活性成分として、１またはそれ以上の前記した式（Ｉ）の化合物またはその生理学上適合しうる塩を医薬担体または賦形剤と合わせて含んでなる医薬組成物が提供される。本発明の組成物は、たとえば経口、経鼻、非経口または経直腸投与に適した形態で提供してもよい。本明細書において用いる場合、「医薬上」なる用語は、本発明の獣医学的用途を包含する。これらのペプチドを経口投与用にカプセル化、錠剤化あるいはエマルジョンまたはシロップに調製する。医薬上許容される固体または液体担体を添加して、組成物を増強したり、安定化したり、あるいは組成物の調製を容易にすることができる。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、グリセリン、食塩水および水を包含する。固体担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天またはゼラチンを包含する。担体はまた、単独でまたはワックスを含む、グリセリルモノステアラートまたはグリセリルジステアラートなどの徐放性物質を包含する。固体担体の量は変わるが、好ましくは、投与単位当たり約２０ｍｇないし約１ｇの間である。医薬製剤は、ハードゼラチンカプセル形の場合、粉砕、混合および充填を含む通常の調剤技術にしたがって調製される。１または数種の活性成分を含有するカプセルは、例えば、活性成分をラクトースまたはソルビトールなどの不活性な担体と混合し、混合物をゼラチンカプセル中に充填することにより調製される。臓器特異性担体系もまた用いられる。別法として、本発明のペプチドまたはその誘導体の医薬組成物は、非経口投与用凍結乾燥粉末の溶液として処方してもよい。粉末は、使用前に適当な希釈剤または他の医薬上許容される担体の添加により復元される。液体処方は、一般に緩衝化された等張水溶液である。適当な希釈剤の例は、通常の等張塩溶液、標準的５％水中デキストロースまたは緩衝酢酸ナトリウムまたはアンモニウム溶液である。このような製剤は非経口投与に特に適しているが、経口投与用に用いることもできるし、吸入用に計量吸入器またはネブライザー中にいれてもよい。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムなどの賦形剤を添加するのが望ましい。直腸投与の場合、本発明のペプチドの微粉末を、カカオ脂、グリセリン、ゼラチンまたはポリエチレングリコールなどの賦形剤と合し、坐剤に成型する。微粉末はさらに油状製剤、ゲル、クリームまたはエマルションと配合してもよいし、緩衝剤処理してもしなくてもよく、また経皮貼付剤により投与してもよい。鼻スプレーは同様に水溶液中に処方され、エアゾル噴射剤を含むかまたは手動圧縮手段を備えたスプレー容器中に充填する。本発明の化合物を含有する投与単位は好ましくは０．０５−５０ｍｇ、例えば０．０５−５ｍｇの式（Ｉ）の化合物またはその塩を含有する。本発明のさらに別の態様によると、骨髄造血の刺激法であって、有効量の前記した医薬組成物を対象に投与することからなる方法が提供される。本発明の化合物を本発明にしたがって投与した場合に、許容できない毒性はないと考えられる。式（Ｉ）の化合物の生物学的活性を以下の試験により説明する。基質細胞における造血相乗活性の誘発基質細胞系Ｃ６．４由来のネズミ骨髄を１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中１２ウェルプレート中で増殖させる。集密に達すると、Ｃ６．４細胞を洗浄し、培地をＦＢＳ不含の新鮮なＲＰＭＩ１６４０と交換する。ネズミＣ６．４細胞の集密細胞層を化合物で処理する。無細胞上清を１８時間後に集める。上清をＣ entricon−３０分子量カットオフ膜で分画する。Ｃ６．４細胞造血相乗因子（ＨＳＦ）活性をネズミＣＦＵ−Ｃ検定において測定する。ＣＦＵ−Ｃ検定骨髄細胞をＣ５７Ｂ１／６雌マウスから得、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中に懸濁する。骨髄細胞（７．５Ｅ＋４細胞／ｍＬ）を標準的ネズミソフト寒天ＣＦＵ−Ｃ検定において準最適レベルのＣＦＵ＋前記からの試験Ｃ６．４細胞３０Ｋ−Ｅ上清の希釈物とともに培養する。細胞凝集物＞５０細胞をコロニーとして計数する。計数された寒天コロニー数はＣ６．４骨髄基質系上清中に存在するＨＳＦの量に比例する。エフェクター細胞機能検定雌Ｃ５７Ｂ１マウスに試験化合物を８日間毎日、経口投与する。処置または未処置マウスからのex vivoで用いた残存腹腔浸出細胞（ＰＥＣ）を冷カルシウムならびにマグネシウム不含のヘパリンおよび抗生物質を補足したＤＰＢＳで最終注射後の２−４時間以内に収穫する。付着ＰＥＭ集団を、標準化ＰＥＣ懸濁液をマイクロタイター皿中、２時間３７℃（５％ＣＯ₂）で培養し、ウェルを温緩衝液で洗浄することにより非付着細胞を除去することにより調製する。ホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）（１００−２００ｎＭ）による in vitro刺激に応答してエフェクター細胞または予めオプソニン処理した（オートローガスな血清）生シー・アルビカンス（Ｅ：Ｔ＝１：１０）により放出されるスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）の抑制可能なスーパーオキシドをマイクロタイターフェリチトクロムｃ還元検定において定量化する。総体積２０ＯｕＬ／ウェル中１％ゼラチン／ＨＢＳＳおよび８０ｕＭフェリチトクロムｃの存在下で検定を行う。還元されたチトクロムｃのｎモル数／ウェルを３７℃(５％ＣＯ₂)で１時間インキュベートした後に得た分光分析の読み（５５０ｎｍ）から計算する。還元されたＳＯＤ−抑制可能なチトクロムｃの量をＳＯＤ（２００Ｕ／ウェル）を含むウェルの包含により決定する。基線となるスーパーオキシド放出を、刺激のない状態で測定する。実験データは対照群の百分率として表す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者バトナガール，プラディップ・クマールアメリカ合衆国19341ペンシルベニア州エクストン、サウス・バルダーストン・ドライブ300番 (72)発明者ヘールディング，ディルク・アンドリースアメリカ合衆国19355ペンシルベニア州マルバーン、ミル・クリーク・レイン１番 (72)発明者ハルトマン，ミヒャエルオーストリア、アー−4643ペッテンバッハ、ミッテンドルフ130番 (72)発明者ヒープル，ヨハンオーストリア、アー−4030リンツ、モーヴェンヴェーク７番 (72)発明者クレミンガー，ペーターオーストリア、アー−4481アステン、マルゲリテンシュトラーセ10／16番 (72)発明者ロヴェンスツキー，フランツオーストリア、アー−4020リンツ、ツィーラーシュトラーセ27番

Claims

【特許請求の範囲】１．構造式（Ｉ）：｛式中、Ａ₁とＡ₂は、互いに独立して、Ｚ−(ＣＨ₂)_k−(ＮＲ''')_qであり；Ｚは、環中に４個までのヘテロ原子Ｎ、Ｏ、Ｓを含有する４ないし１０員単環または二環式複素環系である（ここに、少なくとも１個のヘテロ原子はＮであり、環は１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ_1-4アルコキシ、 (ＣＨ₂)_mＲ₄、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、Ｎ (Ｒ₃)₂、アシルアミノまたはアミノアシル基で置換されているかまたは置換されておらず、８、９、１０員単環系は除外する）；ｋは独立して０ないし４の整数であり；Ｒ'''は水素、Ｃ_1-4アルキルまたはＣ_1-4アルキルカルボン酸であり；ｑは０ないし１の整数であり；Ｒ'およびＲ"は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルＣ(Ｏ)Ｒ₄、Ｃ_1-4アルキルであるかまたはＲ'およびＲ"は、１または２個のＣ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＨ、またはＮ(Ｒ₃)₂で所望により置換されていてもよいベンジルであり；Ｑは［式中、Ｂ₁は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_m−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_m+1−Ｒ²、−(ＣＨ₂)_m−Ｒ³ 、−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ²または−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ³ （ここで、Ｒ²は独立して−ＯＲ³、−Ｎ(Ｒ³)₂、−ＳＲ³であり；Ｒ³は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｍは０ないし４の整数である）であり；Ｃ₁は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_n−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_n+1−Ｒ⁴、−(ＣＨ₂)_n−Ｒ⁵ 、−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁴または−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁵ （ここで、Ｒ⁴は独立して−ＯＲ⁵、−Ｎ(Ｒ⁵)₂、−ＳＲ⁵であり；Ｒ⁵は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｎは独立して０ないし４の整数である）であり；Ｂ₂は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_p−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_k+1−Ｒ⁶、−(ＣＨ₂)_k−Ｒ⁷、 −(ＣＨ₂)_k−ＣＯＲ⁶または−(ＣＨ₂)_k−ＣＯＲ⁷ （ここで、Ｒ⁶は独立して−ＯＲ⁷、−Ｎ(Ｒ⁷)₂、−ＳＲ⁷であり；Ｒ⁷は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；ｋは０ないし４の整数である）であり；Ｃ₂は、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_s−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_s+s−Ｒ⁸、−(ＣＨ₂)_s−Ｒ⁹ 、−(ＣＨ₂)_s−ＣＯＲ⁸または−(ＣＨ₂)_s−ＣＯＲ⁹ （ここで、Ｒ⁸は独立して−ＯＲ⁹、−Ｎ(Ｒ⁹)₂、−ＳＲ⁹であり；Ｒ⁹は独立して水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；Ｌは０ないし４の整数である）であり；Ｄは(ＣＨ₂)_i（ここで、２個までの炭素原子はＲ¹⁰およびＲ¹¹でgem−置換されていてもよく、Ｒ¹⁰およびＲ¹¹は、独立して、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-4アルケニル、Ｃ_2-4アルキニル（これらはすべて、１個または２個のＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｎ(Ｒ¹²)₂、(Ｒ¹²)₂ＮＣ(Ｏ)−、−(ＣＨ₂)_sＲ¹³、−(ＣＨ₂)_sＲ¹²、 −(ＣＨ₂)_sＣＯＲ¹³または−(ＣＨ₂)_sＣＯＲ¹²で置換されていてもよい）であるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹は、Ｆ、ＣｌまたはＢｒであるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹は、一緒になって式（Ｉａ）：（ここで、ｐおよびｑは、独立して０ないし３の整数であり；ただし、ｐおよびｑの両方が０ではない；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ₂またはＮ(Ｒ¹²)である）の環または複素環を形成してもく；Ｒ¹²は、独立して、水素、Ｃ_1-4アルキルまたはベンジルであり；Ｒ¹¹は、独立して、ＯＲ¹²、Ｎ(Ｒ¹²)₂またはＳＲ¹²であり；ｉは３ないし８の整数である；ただし、Ｂ₁はＣ₁と同一ではなく、Ｂ₂はＣ₂と同一ではなく；Ａ₁≠Ａ₂；Ｂ₁≠Ｂ₂；Ｃ₁≠Ｃ₂；Ｂ₁≠Ｃ₁；およびＢ₂≠Ｃ₂である］｝で示される化合物またはその医薬上許容される塩２．Ｚが、置換されていてもよいピロリル、イソピロリル、ピラゾリル、イソイミダゾリル、トリアゾリル、イソキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、トリアジニル、モルホリニル、インドリル、インドレニニル、イソベンザゾリル、ピリンジニル、イソインダゾリル、インドキサジニル、ベンズオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、ピリドピリジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、キノキサリニル、インドリニル、ピロリドニル、イミダゾリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピペリジル、テトラゾリル、キヌクリジニル、アゼチジニル、またはプリニルである請求項１記載の化合物。３．Ｚがピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリニル、テトラヒドロキノリニル、アゼチジニルまたはピロリジニルであり；Ｒ¹⁰およびＲ¹¹がＣ_1-4アルキル、ＯＨ、Ｎ(Ｒ¹²)₂、−(ＣＨ₂)_sＲ¹³、または−(ＣＨ₂)_s Ｃ(Ｏ)Ｒ¹²により置換されたＣ_1-4アルキルであるか；またはＲ¹⁰およびＲ¹¹が一緒になつて式（Ｉａ）（式中ＸがＯ、ＳまたはＣＨ₂であり、ｐおよびｑが１ないし３である）の環または複素環を形成してもよく；Ｒ¹²が水素またはＣ_1-4 アルキルであり；およびＲ¹³がＯＲ¹²またはＮ(Ｒ¹²)₂である請求項１記載の化合物。４．Ｚが、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-4アルコキシ、Ｃ_1-4アルコキシ−Ｃ_1-4アルキル、オキソ、オキシム、Ｏ−Ｃ_1-4アルキルオキシム、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ_1-4 アルキルアミノ、ジ−Ｃ_1-4アルキルアミノ、アシルアミノまたはアミノアシル基で一置換、多置換またはこれらの混合で置換されていてもよい請求項１記載の化合物。５．Ｚがメチル、エチル、メトキシ、メトキシメチル、オキソ、オキシム、ヒドロキシ、アミノ、エチルアミノまたはジメチルアミノで一置換、多置換またはこれらの混合で置換されていてもよい請求項１記載の化合物。６．Ｒ'およびＲ"が、互いに独立して、水素、メチル、エチル、プロピル、ブチル、Ｃ_1-4アルキルカルボン酸またはＣ_2-4アルキルヒドロキシである請求項１記載の化合物。７．Ｂ₁が、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_m−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_m+1−Ｒ²、−(ＣＨ₂)_m−Ｒ³ 、−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ²または−(ＣＨ₂)_m−ＣＯＲ³（ここで、Ｒ²は−ＯＲ³、 −Ｎ(Ｒ³)₂、−ＳＲ³であり、Ｒ³は水素、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチルまたはベンジルであり、ｍは０ないし４の整数である）である請求項１記載の化合物。８．Ｃ₁が、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_n−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_n+1−Ｒ⁴、−(ＣＨ₂)_n−Ｒ⁵ 、−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁴または−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＲ⁵（ここで、Ｒ⁴は−ＯＲ⁵、 −Ｎ(Ｒ⁵)₂、−ＳＲ⁵であり、Ｒ⁵は水素、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチルまたはベンジルであり、ｎは０ないし４の整数である）である請求項１記載の化合物。９．Ｂ₂が、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_p−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_p+1−Ｒ⁶、−(ＣＨ₂)_p−Ｒ⁷ 、−(ＣＨ₂)_p−ＣＯＲ⁶または−(ＣＨ₂)_p−ＣＯＲ⁷（ここで、Ｒ⁶は−ＯＲ⁷、 −Ｎ(Ｒ⁷)₂、−ＳＲ⁷であり、Ｒ⁷は水素、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチルまたはベンジルであり、ｐは０ないし４の整数である）である請求項１記載の化合物。１０．Ｃ₂が、ハロゲン、−(ＣＨ₂)_l−ＣＮ、−(ＣＨ₂)_l+1−Ｒ⁸、−(ＣＨ₂)_l− Ｒ⁹、−(ＣＨ₂)_l−ＣＯＲ⁸または−(ＣＨ₂)_l−ＣＯＲ⁹（ここで、Ｒ⁸は−ＯＲ⁹ 、−Ｎ(Ｒ⁹)₂、−ＳＲ⁹であり、Ｒ⁹は水素、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチルまたはベンジルであり、１は０ないし４の整数である）である請求項１記載の化合物。１１．請求項１記載の化合物と医薬上許容される担体を含む医薬組成物。１２．骨髄造血系を刺激する方法であって、この刺激を必要とする対象に該骨髄造血の刺激に有効な量の請求項１記載の化合物を投与することからなる方法。１３．敗血症の予防または治療法であって、この予防または治療を必要とする対象に有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる方法。１４．ウイルス、真菌または細菌感染症の予防または治療法であって、この予防または治療を必要とする対象に有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる方法。