JP2000245500A - 発光による試料の測定方法及び装置 - Google Patents
発光による試料の測定方法及び装置Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】小型で安価な汚れの測定装置を提供する。
【解決手段】拭取検査用器具の収納室９、該収納室９に
おかれた拭取検査用器具による発光を受光するシリコン
ホトダイオード５、及び該シリコンホトダイオード５か
らの信号を電気的に処理をする演算装置４６で汚れの測
定装置１を構成し、汚れをＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素
を含有する発光試薬により発光させその発光量をシリコ
ンホトダイオード５により測定する。
おかれた拭取検査用器具による発光を受光するシリコン
ホトダイオード５、及び該シリコンホトダイオード５か
らの信号を電気的に処理をする演算装置４６で汚れの測
定装置１を構成し、汚れをＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素
を含有する発光試薬により発光させその発光量をシリコ
ンホトダイオード５により測定する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本願発明は、ＡＴＰ再生酵素
を含有する発光試薬と試料を作用させて、アデノシンリ
ン酸エステル類を測定する方法及び装置に関する。
を含有する発光試薬と試料を作用させて、アデノシンリ
ン酸エステル類を測定する方法及び装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】バクテリアまたは食品由来の汚れを検出
するにあたって、ルシフェラーゼ酵素と共に適当な試薬
を用いて、アデノシン三リン酸（以下ＡＴＰと称する）
を指標にして発光反応により、測定できることが知られ
ている。しかし、この光の出力は極めて小さく、今まで
は、測定可能な出力を得るために、光検出装置には光電
子倍増管（ホトマルチプライヤー）が利用されていた。
しかしながら、光電子倍増管は、高電圧を必要とするの
で、電圧変換装置や、安全のための対策を必要とする。
したがって、装置が大型になり、値段も高いという欠点
を有していた。また、アバランシェホトダイオードを使
用する光検出装置（特表平４−５０２４０３)も知られ
ている。アバランシェホトダイオードは、通常、０〜５
℃の使用温度を要求するので、この装置は、アバランシ
ェホトダイオードのための温度安定システムを必要とす
る。該システムは、アバランシェホトダイオードに隣接
して取り付けられたペルティエ効果型のヒートポンプを
有しており、温度制御回路からの電流供給を受けてアバ
ランシェホトダイオードを冷却するようになっている。
したがって、装置も複雑になり、値段も高いという欠点
を有していた。
するにあたって、ルシフェラーゼ酵素と共に適当な試薬
を用いて、アデノシン三リン酸（以下ＡＴＰと称する）
を指標にして発光反応により、測定できることが知られ
ている。しかし、この光の出力は極めて小さく、今まで
は、測定可能な出力を得るために、光検出装置には光電
子倍増管（ホトマルチプライヤー）が利用されていた。
しかしながら、光電子倍増管は、高電圧を必要とするの
で、電圧変換装置や、安全のための対策を必要とする。
したがって、装置が大型になり、値段も高いという欠点
を有していた。また、アバランシェホトダイオードを使
用する光検出装置（特表平４−５０２４０３)も知られ
ている。アバランシェホトダイオードは、通常、０〜５
℃の使用温度を要求するので、この装置は、アバランシ
ェホトダイオードのための温度安定システムを必要とす
る。該システムは、アバランシェホトダイオードに隣接
して取り付けられたペルティエ効果型のヒートポンプを
有しており、温度制御回路からの電流供給を受けてアバ
ランシェホトダイオードを冷却するようになっている。
したがって、装置も複雑になり、値段も高いという欠点
を有していた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】そこで本願発明者は、
高電圧、高電流の電源を不要とし、温度に影響を受けな
いシリコンホトダイオードに着目した。しかし、シリコ
ンホトダイオードは、比較的感度が鈍く通常の生物発光
のものは検出しにくい場合がある。一方、本願発明者は
先に「生物発光試薬及びその試薬を用いたアデノシンリ
ン酸エステルの定量法並びにその試薬を用いたＡＴＰ変
換反応系に関する物質の定量法」（特開平９−２３４０
９９）を出願した。この発明は、少なくともピルベート
オルトホスフェートジキナーゼ（以下ＰＰＤＫと称す
る、Pyruvate orthophospate dikinase、ＥＣ ２．７．
９．１)等のＡＴＰ再生酵素を含有する試薬で生物発光
試薬を構成し、発光反応により高感度にアデノシンリン
酸エステル類を検出する方法である。そこでさらに本願
発明者は鋭意研究の結果、ＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素
を含有する発光試薬によりアデノシンリン酸エステル類
を発光検出し、その発光量をシリコンホトダイオードで
測定すれば、簡便な装置でアデノシンリン酸エステル
類、すなわち汚れを検出できることを知見して本願発明
を完成させた。
高電圧、高電流の電源を不要とし、温度に影響を受けな
いシリコンホトダイオードに着目した。しかし、シリコ
ンホトダイオードは、比較的感度が鈍く通常の生物発光
のものは検出しにくい場合がある。一方、本願発明者は
先に「生物発光試薬及びその試薬を用いたアデノシンリ
ン酸エステルの定量法並びにその試薬を用いたＡＴＰ変
換反応系に関する物質の定量法」（特開平９−２３４０
９９）を出願した。この発明は、少なくともピルベート
オルトホスフェートジキナーゼ（以下ＰＰＤＫと称す
る、Pyruvate orthophospate dikinase、ＥＣ ２．７．
９．１)等のＡＴＰ再生酵素を含有する試薬で生物発光
試薬を構成し、発光反応により高感度にアデノシンリン
酸エステル類を検出する方法である。そこでさらに本願
発明者は鋭意研究の結果、ＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素
を含有する発光試薬によりアデノシンリン酸エステル類
を発光検出し、その発光量をシリコンホトダイオードで
測定すれば、簡便な装置でアデノシンリン酸エステル
類、すなわち汚れを検出できることを知見して本願発明
を完成させた。
【０００４】
【課題を解決するための手段】すなわち本願発明は、ア
デノシンリン酸エステル類を、ＡＴＰ再生酵素を含有す
る発光試薬により発光させその発光量をシリコンホトダ
イオードにより測定することを特徴とする発光による試
料の測定方法、並びに検査用器具の収納室、該収納室に
おかれた検査用器具による発光を受光するシリコンホト
ダイオード、及び該シリコンホトダイオードからの信号
を電気的に処理をする演算装置より構成されることを特
徴とする発光による試料の測定装置である。
デノシンリン酸エステル類を、ＡＴＰ再生酵素を含有す
る発光試薬により発光させその発光量をシリコンホトダ
イオードにより測定することを特徴とする発光による試
料の測定方法、並びに検査用器具の収納室、該収納室に
おかれた検査用器具による発光を受光するシリコンホト
ダイオード、及び該シリコンホトダイオードからの信号
を電気的に処理をする演算装置より構成されることを特
徴とする発光による試料の測定装置である。
【０００５】
【発明の実施の形態】本発明では、汚れを採取しそれを
発光させる検査用器具を収納するための収納室とその放
出光を受光するためのシリコンホトダイオード、及び受
光した光を測定するための演算装置を含み、さらに操作
パネルあるいは表示パネル等を備えた汚れの測定装置が
提供される。シリコンホトダイオードは光電子倍増管ほ
どではないが、光に対して高感度であり、低レベルの光
に反応して測定可能な電気信号を出力する半導体素子で
ある。また、シリコンホトダイオードの回路部には、高
電圧または高電流の電源は必要ではなく電源としてバッ
テリーを使用することができる。また、シリコンホトダ
イオードは、他の一般のダイオード例えばアバランシェ
ホトダイオードに比べて、温度変化に対する性能の変化
が少なく、温度安定装置を必要としない。さらに、シリ
コンホトダイオードは、光電子倍増管に比べて、堅牢で
あり、強い光にさらされても悪影響を受けることがな
い。従って、本発明による清浄度の測定装置は、従来の
ものに比べて、大幅に小型、軽量、低価格とすることが
できる。
発光させる検査用器具を収納するための収納室とその放
出光を受光するためのシリコンホトダイオード、及び受
光した光を測定するための演算装置を含み、さらに操作
パネルあるいは表示パネル等を備えた汚れの測定装置が
提供される。シリコンホトダイオードは光電子倍増管ほ
どではないが、光に対して高感度であり、低レベルの光
に反応して測定可能な電気信号を出力する半導体素子で
ある。また、シリコンホトダイオードの回路部には、高
電圧または高電流の電源は必要ではなく電源としてバッ
テリーを使用することができる。また、シリコンホトダ
イオードは、他の一般のダイオード例えばアバランシェ
ホトダイオードに比べて、温度変化に対する性能の変化
が少なく、温度安定装置を必要としない。さらに、シリ
コンホトダイオードは、光電子倍増管に比べて、堅牢で
あり、強い光にさらされても悪影響を受けることがな
い。従って、本発明による清浄度の測定装置は、従来の
ものに比べて、大幅に小型、軽量、低価格とすることが
できる。
【０００６】本発明に用いる発光試薬は、ＰＰＤＫ等の
ＡＴＰ再生酵素を含有するもので、ルシフェリン・ルシ
フェラーゼ発光試薬に添加して用いることもできる。Ａ
ＴＰ再生酵素を含有する発光試薬は、ＡＴＰのみでなく
アデノシン二リン酸（以下ＡＤＰと称する）やアデノシ
ン一リン酸（以下ＡＭＰと称する）、リボ核酸（以下Ｒ
ＮＡと称する）にも反応して発光し、かつ安定した高水
準の発光を示す。従って、シリコンホトダイオードの光
電子倍増管に比べて若干感度が低いという欠点を補うこ
とができる。本願発明でいう汚れとは、ＡＴＰ、ＡＤ
Ｐ、ＡＭＰ、ＲＮＡ等のアデノシンリン酸エステル類を
含有するものであり、好適には、清浄度検査における汚
れの検査を挙げることができる。本願発明でいうＡＴＰ
再生酵素とは、ＡＭＰからＡＴＰを生成する反応を触媒
する酵素なら何でもよい。例えば、ホスホエノールピル
ベートシンセターゼ（Phosphoenolpyruvate Synthetas
e、ＥＣ ２．７．９．２)が挙げられる。また、アデニ
レートキナーゼ（Adenylate kinase、ＥＣ ２．７．
４．３)、ピルベートキナーゼ（Pyruvate kinase、ＥＣ
２．７．１．４０)を組み合わせて用いて、ＡＭＰから
ＡＴＰを生成しても良い。好適には、ＰＰＤＫを用いる
ことができる。本発明に用いるＰＰＤＫはマグネシウム
等の金属イオンの存在下で、ＡＭＰ、ホスホエノールピ
ルビン酸及びピロリン酸に作用して、ＡＴＰ、ピルビン
酸及びリン酸を生じる反応を触媒する酵素である。その
理化学的性質及び製法についてはすでに知られており容
易に入手可能である（特開平９−２３４０９９参照）。
ＡＴＰ再生酵素を含有する発光試薬としては、例えば、
ルシフェリン、ルシフェラーゼ及び金属塩を含む発光試
薬にＰＰＤＫを添加して用いるが、ホスホエノールピル
ビン酸、ピロリン酸を同時に添加するとよりよい効果が
得られる。これを使用することにより、汚れの指標成分
であるＡＴＰに加え、ＡＭＰも同時に測定することがで
き、少ない汚れを感度よく検出できる。また、上記ＡＴ
Ｐ再生酵素含有発光試薬にさらに、ＡＤＰからＡＴＰを
生成する反応を触媒する酵素および/またはＲＮＡ分解
酵素を併用すると、ＡＴＰおよびＡＭＰに加え、さらに
ＡＤＰ及びＲＮＡも同時に測定して、さらに少ない汚れ
を検出できる。
ＡＴＰ再生酵素を含有するもので、ルシフェリン・ルシ
フェラーゼ発光試薬に添加して用いることもできる。Ａ
ＴＰ再生酵素を含有する発光試薬は、ＡＴＰのみでなく
アデノシン二リン酸（以下ＡＤＰと称する）やアデノシ
ン一リン酸（以下ＡＭＰと称する）、リボ核酸（以下Ｒ
ＮＡと称する）にも反応して発光し、かつ安定した高水
準の発光を示す。従って、シリコンホトダイオードの光
電子倍増管に比べて若干感度が低いという欠点を補うこ
とができる。本願発明でいう汚れとは、ＡＴＰ、ＡＤ
Ｐ、ＡＭＰ、ＲＮＡ等のアデノシンリン酸エステル類を
含有するものであり、好適には、清浄度検査における汚
れの検査を挙げることができる。本願発明でいうＡＴＰ
再生酵素とは、ＡＭＰからＡＴＰを生成する反応を触媒
する酵素なら何でもよい。例えば、ホスホエノールピル
ベートシンセターゼ（Phosphoenolpyruvate Synthetas
e、ＥＣ ２．７．９．２)が挙げられる。また、アデニ
レートキナーゼ（Adenylate kinase、ＥＣ ２．７．
４．３)、ピルベートキナーゼ（Pyruvate kinase、ＥＣ
２．７．１．４０)を組み合わせて用いて、ＡＭＰから
ＡＴＰを生成しても良い。好適には、ＰＰＤＫを用いる
ことができる。本発明に用いるＰＰＤＫはマグネシウム
等の金属イオンの存在下で、ＡＭＰ、ホスホエノールピ
ルビン酸及びピロリン酸に作用して、ＡＴＰ、ピルビン
酸及びリン酸を生じる反応を触媒する酵素である。その
理化学的性質及び製法についてはすでに知られており容
易に入手可能である（特開平９−２３４０９９参照）。
ＡＴＰ再生酵素を含有する発光試薬としては、例えば、
ルシフェリン、ルシフェラーゼ及び金属塩を含む発光試
薬にＰＰＤＫを添加して用いるが、ホスホエノールピル
ビン酸、ピロリン酸を同時に添加するとよりよい効果が
得られる。これを使用することにより、汚れの指標成分
であるＡＴＰに加え、ＡＭＰも同時に測定することがで
き、少ない汚れを感度よく検出できる。また、上記ＡＴ
Ｐ再生酵素含有発光試薬にさらに、ＡＤＰからＡＴＰを
生成する反応を触媒する酵素および/またはＲＮＡ分解
酵素を併用すると、ＡＴＰおよびＡＭＰに加え、さらに
ＡＤＰ及びＲＮＡも同時に測定して、さらに少ない汚れ
を検出できる。
【０００７】本発明の実施に際しては、試験される表面
の汚れを綿棒で拭き、この綿棒を、バクテリア類等の汚
れから、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＲＮＡ等のアデノシ
ンリン酸エステル類を抽出するための界面活性剤などを
含有する抽出試薬に浸す。こうして得られたサンプル液
をＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有する発光試薬と混
合し、放出された発光量を汚れの測定装置で測定するこ
とにより、検体の汚れを検出することができる。好まし
くは、綿棒、抽出試薬、発光試薬が一体になった清浄度
検査用器具、即ち拭取検査用器具を用いると、より簡便
に検査ができる。このＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含
有する発光試薬を備えた拭取検査用器具で装置を構成す
れば、小型、軽量、低価格で、かつ高感度な清浄度検査
方法を提供することができる。すなわち、試験する表面
を拭取検査用器具の綿棒で拭き、これを該器具に備えら
れた抽出試薬に浸し、得られた試料液を同様に該器具に
備えられたＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有する発光
試薬と反応させ、拭取検査用器具ごと清浄度検査装置に
セットし、得られた発光量から汚れの量を測定するので
ある。これらの装置は、全て携帯用ケースに入れて持ち
運び可能に構成することができる。従って本発明によれ
ば、発光量測定装置、綿棒、抽出試薬、発光試薬が一体
になった拭取検査用器具からなる清浄度検査用キットが
提供できる。上記に説明した発光量測定装置は他の多様
な試料の試験、例えば、食品工業における原料と最終製
品の試験、試薬、水質、臨床用試料等の試験にも用いる
ことができる。
の汚れを綿棒で拭き、この綿棒を、バクテリア類等の汚
れから、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＲＮＡ等のアデノシ
ンリン酸エステル類を抽出するための界面活性剤などを
含有する抽出試薬に浸す。こうして得られたサンプル液
をＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有する発光試薬と混
合し、放出された発光量を汚れの測定装置で測定するこ
とにより、検体の汚れを検出することができる。好まし
くは、綿棒、抽出試薬、発光試薬が一体になった清浄度
検査用器具、即ち拭取検査用器具を用いると、より簡便
に検査ができる。このＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含
有する発光試薬を備えた拭取検査用器具で装置を構成す
れば、小型、軽量、低価格で、かつ高感度な清浄度検査
方法を提供することができる。すなわち、試験する表面
を拭取検査用器具の綿棒で拭き、これを該器具に備えら
れた抽出試薬に浸し、得られた試料液を同様に該器具に
備えられたＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有する発光
試薬と反応させ、拭取検査用器具ごと清浄度検査装置に
セットし、得られた発光量から汚れの量を測定するので
ある。これらの装置は、全て携帯用ケースに入れて持ち
運び可能に構成することができる。従って本発明によれ
ば、発光量測定装置、綿棒、抽出試薬、発光試薬が一体
になった拭取検査用器具からなる清浄度検査用キットが
提供できる。上記に説明した発光量測定装置は他の多様
な試料の試験、例えば、食品工業における原料と最終製
品の試験、試薬、水質、臨床用試料等の試験にも用いる
ことができる。
【０００８】以下図面に従って本願発明を具体的に説明
する。まず図１において、１は汚れの測定装置で、その
本体２には検体すなわち汚れを拭取し生物発光反応を行
う拭取検査用器具３、該拭取検査用器具３の発光を集め
る集光レンズ４、該レンズ４からの光を電気信号に変換
するシリコンホトダイオード５、該シリコンホトダイオ
ード５からの電気信号を処理する演算装置４６が収納さ
れている。そして図２において、６は、電源回路部４
１、アンプ部４２、Ａ／Ｄ変換部４３、ＣＰＵ４４とメ
モリ４５より成る演算装置４６、表示部４７、操作部４
８、及び外部インターフェース４９より構成されている
測定回路部である。まず電源回路部４１は、直流電源あ
るいは交流電源の両者を受け入れ可能にするためのもの
である。アンプ部４２は、拭取検査用器具３の発光の強
弱すなわちシリコンホトダイオード５からの電気信号の
強弱に応じて、その出力を電圧に変換し増幅するための
ものであり、該アンプ部４２からの電圧信号は、Ａ／Ｄ
変換部４３でディジタル化され演算装置４６へと送信さ
れる。演算装置４６は、シリコンホトダイオード５から
の信号を受け、それを数値化し表示部４７に示させた
り、必要に応じ予めメモリ４５に記憶させておいた汚れ
度のデータと比較し、例えば洗浄の必要性等の対応策を
表示させたりするものである。操作部４８は、ＣＰＵ４
４へ指示するもので、測定データの保存あるいはそれら
データを外部インターフェース４９を介してプリンター
への送信、又は遠隔地への送信、さらにはメモリ４５へ
のデータの入力等を行うためのものである。そしてさら
に、図３に示すように本体２の正面には、操作部４８及
び表示部４７が設けられており、それらは、前述した図
２に示すように演算装置４６に電気的に接続されてい
て、測定条件の設定あるいは開始を指示したり、また結
果が表示される。図２においては、集光レンズを省略し
た。本体２には、さらに拭取検査用器具３の収納室９が
設けられており、該器具３は、テーブル部材１０に載せ
られ常に同じ位置に定位するよう構成されている。１１
は拭取検査用器具３の背面に配置した反射鏡で、より多
くの発光量を集光レンズ４を介してシリコンホトダイオ
ード５に送ることができる。
する。まず図１において、１は汚れの測定装置で、その
本体２には検体すなわち汚れを拭取し生物発光反応を行
う拭取検査用器具３、該拭取検査用器具３の発光を集め
る集光レンズ４、該レンズ４からの光を電気信号に変換
するシリコンホトダイオード５、該シリコンホトダイオ
ード５からの電気信号を処理する演算装置４６が収納さ
れている。そして図２において、６は、電源回路部４
１、アンプ部４２、Ａ／Ｄ変換部４３、ＣＰＵ４４とメ
モリ４５より成る演算装置４６、表示部４７、操作部４
８、及び外部インターフェース４９より構成されている
測定回路部である。まず電源回路部４１は、直流電源あ
るいは交流電源の両者を受け入れ可能にするためのもの
である。アンプ部４２は、拭取検査用器具３の発光の強
弱すなわちシリコンホトダイオード５からの電気信号の
強弱に応じて、その出力を電圧に変換し増幅するための
ものであり、該アンプ部４２からの電圧信号は、Ａ／Ｄ
変換部４３でディジタル化され演算装置４６へと送信さ
れる。演算装置４６は、シリコンホトダイオード５から
の信号を受け、それを数値化し表示部４７に示させた
り、必要に応じ予めメモリ４５に記憶させておいた汚れ
度のデータと比較し、例えば洗浄の必要性等の対応策を
表示させたりするものである。操作部４８は、ＣＰＵ４
４へ指示するもので、測定データの保存あるいはそれら
データを外部インターフェース４９を介してプリンター
への送信、又は遠隔地への送信、さらにはメモリ４５へ
のデータの入力等を行うためのものである。そしてさら
に、図３に示すように本体２の正面には、操作部４８及
び表示部４７が設けられており、それらは、前述した図
２に示すように演算装置４６に電気的に接続されてい
て、測定条件の設定あるいは開始を指示したり、また結
果が表示される。図２においては、集光レンズを省略し
た。本体２には、さらに拭取検査用器具３の収納室９が
設けられており、該器具３は、テーブル部材１０に載せ
られ常に同じ位置に定位するよう構成されている。１１
は拭取検査用器具３の背面に配置した反射鏡で、より多
くの発光量を集光レンズ４を介してシリコンホトダイオ
ード５に送ることができる。
【０００９】そして次ぎに拭取検査用器具３についてで
あるが、この器具３は、発光試薬としてＰＰＤＫ等のＡ
ＴＰ再生酵素を利用できればどのような構成のものでも
よく、一例として図４に示すものを挙げることができ
る。まず図４において、拭取検査用器具３は、主に検体
採取具１２と試験管状をした発光試薬容器１３から構成
されている。そして検体採取具１２は、検体拭取具１
４、抽出液容器１５、及び管状をした検体採取具１２の
本体１６より構成されている。発光試薬容器１３の開口
部１７は、例えばアルミ箔で形成されたシール材１８に
より閉鎖されており、発光試薬容器１３は密閉される。
検体拭取具１４は、棒状の綿軸１９とその下端部の卵状
に形成されて設置されている綿部２０より成る綿棒２１
と、該綿棒２１を保持する保持部材２２より構成されて
いる。
あるが、この器具３は、発光試薬としてＰＰＤＫ等のＡ
ＴＰ再生酵素を利用できればどのような構成のものでも
よく、一例として図４に示すものを挙げることができ
る。まず図４において、拭取検査用器具３は、主に検体
採取具１２と試験管状をした発光試薬容器１３から構成
されている。そして検体採取具１２は、検体拭取具１
４、抽出液容器１５、及び管状をした検体採取具１２の
本体１６より構成されている。発光試薬容器１３の開口
部１７は、例えばアルミ箔で形成されたシール材１８に
より閉鎖されており、発光試薬容器１３は密閉される。
検体拭取具１４は、棒状の綿軸１９とその下端部の卵状
に形成されて設置されている綿部２０より成る綿棒２１
と、該綿棒２１を保持する保持部材２２より構成されて
いる。
【００１０】保持部材２２は、下段の小径部２３と上段
の大径部２４より成り、小径部２３と大径部２４の境界
の段部２５は、本体１６の上端部２６に当接し、検体拭
取具１４が本体１６において下動する時に常に一定の位
置で停止する機能を有する。検体拭取具１４は、本体１
６に着脱自在に装着されており、本体１６より取り外し
検体の表面を綿棒２１で拭き、汚れを採取する機能を有
する。抽出液容器１５には、検体を拭くことにより綿棒
２１の綿部２０に付着した汚れを抽出するための抽出液
３２が封入されている。抽出液容器１５は、上下端部は
開口されていて、まず下部をシール材２７でシールした
後、前記抽出液３２を注入し、次いで上部をシール材２
８でシールして、抽出液３２を封入する。このシール材
２７，２８は、綿棒２１の押圧により容易に破れる程度
のもので例えばアルミ箔で形成される。
の大径部２４より成り、小径部２３と大径部２４の境界
の段部２５は、本体１６の上端部２６に当接し、検体拭
取具１４が本体１６において下動する時に常に一定の位
置で停止する機能を有する。検体拭取具１４は、本体１
６に着脱自在に装着されており、本体１６より取り外し
検体の表面を綿棒２１で拭き、汚れを採取する機能を有
する。抽出液容器１５には、検体を拭くことにより綿棒
２１の綿部２０に付着した汚れを抽出するための抽出液
３２が封入されている。抽出液容器１５は、上下端部は
開口されていて、まず下部をシール材２７でシールした
後、前記抽出液３２を注入し、次いで上部をシール材２
８でシールして、抽出液３２を封入する。このシール材
２７，２８は、綿棒２１の押圧により容易に破れる程度
のもので例えばアルミ箔で形成される。
【００１１】検体採取具１２の本体１６は、上下端部が
開放された管状の部材で構成されており、下方の内壁面
に円環状をした突起部材２９が設けられており、さらに
該突起部材２９に下方に連結して飛散防止部材３０が延
設されている。そして、発光試薬容器１３を突き上げる
ことにより、飛散防止部材３０の鋭角部３１によりシー
ル材１８が破られ、綿部２０より抽出された汚れが抽出
液と共に発光試薬容器１３に落下送出され、発光等の反
応をし、汚れを検出する構成となっている。
開放された管状の部材で構成されており、下方の内壁面
に円環状をした突起部材２９が設けられており、さらに
該突起部材２９に下方に連結して飛散防止部材３０が延
設されている。そして、発光試薬容器１３を突き上げる
ことにより、飛散防止部材３０の鋭角部３１によりシー
ル材１８が破られ、綿部２０より抽出された汚れが抽出
液と共に発光試薬容器１３に落下送出され、発光等の反
応をし、汚れを検出する構成となっている。
【００１２】
【作用】最初に、検体拭取具１４を本体１６より引き抜
き、綿部２０により検体表面を拭き、汚れを採取する。
次に汚れを採取した検体拭取具１４を本体１６に挿入し
た後、発光試薬容器１３を押し上げ該容器１３のシール
材１８を飛散防止部材３０の鋭角部３１に押し当ててシ
ール材１８を破る。次いで、検体拭取具１４を押し下げ
ると、まず綿棒２１によりシール材２８を破り、綿部２
０は抽出液容器１５の内部に入る。そして次に、検体拭
取具１４を保持部材２２の段部２５と本体１６の上端部
２６が当接するまで押し下げ、シール材２７を綿棒２１
により破る。
き、綿部２０により検体表面を拭き、汚れを採取する。
次に汚れを採取した検体拭取具１４を本体１６に挿入し
た後、発光試薬容器１３を押し上げ該容器１３のシール
材１８を飛散防止部材３０の鋭角部３１に押し当ててシ
ール材１８を破る。次いで、検体拭取具１４を押し下げ
ると、まず綿棒２１によりシール材２８を破り、綿部２
０は抽出液容器１５の内部に入る。そして次に、検体拭
取具１４を保持部材２２の段部２５と本体１６の上端部
２６が当接するまで押し下げ、シール材２７を綿棒２１
により破る。
【００１３】そして次に、拭取検査用器具３全体を上下
方向に軽く振ることにより、バクテリアや汚れを含んだ
抽出液３２が発光試薬容器１３に落下し、発光試薬３３
と接触して、例えば発光反応によりこの部分が光ること
になる。そして、拭取検査用器具３を汚れ測定装置１の
収納室９に装着し、発光量すなわち汚れの量を測定する
のである。以上説明した拭取検査用器具３における発光
試薬３３としてＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有した
ものを用いるのである。以上検体として拭取の場合を説
明したが、その他としてＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を
含有する発光試薬が収納された試験管に検査対象となる
液体、固形物、粉粒体等を投入しその汚れの量を測定し
てもよい。また本発明にかかる装置は、試料として生物
発光だけではなく、化学発光あるいは蛍光によるものも
測定できることは言うまでもない。
方向に軽く振ることにより、バクテリアや汚れを含んだ
抽出液３２が発光試薬容器１３に落下し、発光試薬３３
と接触して、例えば発光反応によりこの部分が光ること
になる。そして、拭取検査用器具３を汚れ測定装置１の
収納室９に装着し、発光量すなわち汚れの量を測定する
のである。以上説明した拭取検査用器具３における発光
試薬３３としてＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を含有した
ものを用いるのである。以上検体として拭取の場合を説
明したが、その他としてＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生酵素を
含有する発光試薬が収納された試験管に検査対象となる
液体、固形物、粉粒体等を投入しその汚れの量を測定し
てもよい。また本発明にかかる装置は、試料として生物
発光だけではなく、化学発光あるいは蛍光によるものも
測定できることは言うまでもない。
【００１４】
【実施例】次ぎに実施例を示し本願発明の効果を数値的
に示す。酵素の単位は国際単位である。
に示す。酵素の単位は国際単位である。
【実施例１】
【００１５】 ＰＰＤＫを含有する発光試薬の組成 ＥＤＴＡ（エチレンジアミンテトラアセテート） 1.0mM ジチオスレイトール 1.0mM 硫酸アンモニウム 3.75mM ピロリン酸 0.3mM ホスホエノールピルビン酸 2.1mM ルシフェリン 0.75mM 硫酸マグネシウム 7.5mM ＢＳＡ（牛血清アルブミン） 0.5% シュークロース 5.0% ルシフェラーゼ 2.5mg/ml ＰＰＤＫ 1.5U/ml アデノシンリン酸デアミナーゼ 0.05U/ml ＨＥＰＥＳ(50mM) pH7.8
【００１６】抽出試薬の組成 塩化ベンザルコニウム 0.02％ ＨＥＰＥＳ (10mM) pH7.8
【００１７】上記の組成のＰＰＤＫを含有する発光試薬
を凍結乾燥したものを、図４に示す拭取検査用器具３の
発光試薬容器１３に、抽出試薬を抽出液容器１５にそれ
ぞれ封入した（ＰＰＤＫあり）。一方、上記の組成か
ら、ＰＰＤＫのみを除いた発光試薬を凍結乾燥したもの
を、同様に発光試薬容器に封入した。ただし抽出試薬は
同じものを抽出液容器１５にセットした（ＰＰＤＫな
し）。食品由来の汚れのモデルとして、市販の酵母エキ
ス、牛肉エキス、麦芽エキス、ビール、牛乳を超純水で
各濃度に希釈したものに拭取検査用器具３の綿棒２１を
浸した後、綿棒ホルダーを押し込み綿棒頭部を抽出試薬
に浸し、さらに綿棒ホルダーを押し込み、汚れが溶け込
んだ抽出試薬を発光試薬の凍結乾燥物の入った発光試薬
容器１３に送り込み、発光させた。次いで拭取検査用器
具３ごとシリコンホトダイオードを使用した汚れの測定
装置１にセットして、発光量を測定した。測定値は、相
対発光量ＲＬＵ（Relativelight Unit）で示し、結果を
表１に示す。この表１より、ＰＰＤＫを含有しない発光
試薬を用いた場合（ＰＰＤＫなし）は、ＡＴＰ由来の発
光量しか得られず、また、発光量が急激に減衰し不安定
であるために、測定値はほとんどの場合０であった。一
方、ＰＰＤＫを含有した発光試薬の場合（ＰＰＤＫあ
り）は、ＡＴＰ以外に、食品中に大量に含まれるＡＭＰ
由来の発光が得られ、また、発光量も安定しているため
に、汚れを高感度に測定することができた。
を凍結乾燥したものを、図４に示す拭取検査用器具３の
発光試薬容器１３に、抽出試薬を抽出液容器１５にそれ
ぞれ封入した（ＰＰＤＫあり）。一方、上記の組成か
ら、ＰＰＤＫのみを除いた発光試薬を凍結乾燥したもの
を、同様に発光試薬容器に封入した。ただし抽出試薬は
同じものを抽出液容器１５にセットした（ＰＰＤＫな
し）。食品由来の汚れのモデルとして、市販の酵母エキ
ス、牛肉エキス、麦芽エキス、ビール、牛乳を超純水で
各濃度に希釈したものに拭取検査用器具３の綿棒２１を
浸した後、綿棒ホルダーを押し込み綿棒頭部を抽出試薬
に浸し、さらに綿棒ホルダーを押し込み、汚れが溶け込
んだ抽出試薬を発光試薬の凍結乾燥物の入った発光試薬
容器１３に送り込み、発光させた。次いで拭取検査用器
具３ごとシリコンホトダイオードを使用した汚れの測定
装置１にセットして、発光量を測定した。測定値は、相
対発光量ＲＬＵ（Relativelight Unit）で示し、結果を
表１に示す。この表１より、ＰＰＤＫを含有しない発光
試薬を用いた場合（ＰＰＤＫなし）は、ＡＴＰ由来の発
光量しか得られず、また、発光量が急激に減衰し不安定
であるために、測定値はほとんどの場合０であった。一
方、ＰＰＤＫを含有した発光試薬の場合（ＰＰＤＫあ
り）は、ＡＴＰ以外に、食品中に大量に含まれるＡＭＰ
由来の発光が得られ、また、発光量も安定しているため
に、汚れを高感度に測定することができた。
【００１８】
【表１】
【００１９】
【実施例２】炊飯米を分けるために使用した、しゃもじ
を軽く水ですすいだものの表面の約10ｃｍ2を実施例１
で用いた拭取検査用器具３の綿棒２１で拭き取り、同様
に発光させ、発光量を測定した。ＰＰＤＫなしの場合の
測定値は０であったが、ＰＰＤＫありの場合の測定値は
８３４ＲＬＵであった。
を軽く水ですすいだものの表面の約10ｃｍ2を実施例１
で用いた拭取検査用器具３の綿棒２１で拭き取り、同様
に発光させ、発光量を測定した。ＰＰＤＫなしの場合の
測定値は０であったが、ＰＰＤＫありの場合の測定値は
８３４ＲＬＵであった。
【００２０】
【実施例３】抽出されたコーヒーの詰め装置において、
分注口付近を軽く水で洗浄したのちに、該分注口の表面
の約10ｃｍ2を実施例１で用いた拭取検査用器具３の綿
棒２１で拭き取り、同様に発光させ、発光量を測定し
た。ＰＰＤＫなしの場合の測定値は０であったが、ＰＰ
ＤＫありの場合は測定値は６７５ＲＬＵであった。
分注口付近を軽く水で洗浄したのちに、該分注口の表面
の約10ｃｍ2を実施例１で用いた拭取検査用器具３の綿
棒２１で拭き取り、同様に発光させ、発光量を測定し
た。ＰＰＤＫなしの場合の測定値は０であったが、ＰＰ
ＤＫありの場合は測定値は６７５ＲＬＵであった。
【００２１】
【実施例４】ラーメンの製造装置において、麺を切断す
るカッターを軽く水で洗浄した後に、該カッターの表面
の約10ｃｍ2を実施例で用いた拭取検査用器具３の綿棒
２１で拭き取り、同様に発光させ、発光量を測定した。
ＰＰＤＫなしの場合の測定値は０であったが、ＰＰＤＫ
ありの場合の測定値は１６６０ＲＬＵであった。
るカッターを軽く水で洗浄した後に、該カッターの表面
の約10ｃｍ2を実施例で用いた拭取検査用器具３の綿棒
２１で拭き取り、同様に発光させ、発光量を測定した。
ＰＰＤＫなしの場合の測定値は０であったが、ＰＰＤＫ
ありの場合の測定値は１６６０ＲＬＵであった。
【実施例５】実施例１においてＰＰＤＫを含有する発光
試薬の場合をＰＰＤＫあり、また、同試薬からＰＰＤＫ
のみを除いた発光試薬の場合をＰＰＤＫなしとした。Ｐ
ＰＤＫありとＰＰＤＫなし各２００μｌを試験管に採取
し、市販のウーロン茶を超純水にて０．０１%に希釈し
たものを各１００μｌ添加した。これを、汚れの測定装
置１にセットして、発光量を測定した。測定値は、相対
発光量ＲＬＵ（Relative light Unit）で示した。ＰＰ
ＤＫなしの場合の測定値は６ＲＬＵであったが、ＰＰＤ
Ｋありの場合の測定値は６１８ＲＬＵであった。
試薬の場合をＰＰＤＫあり、また、同試薬からＰＰＤＫ
のみを除いた発光試薬の場合をＰＰＤＫなしとした。Ｐ
ＰＤＫありとＰＰＤＫなし各２００μｌを試験管に採取
し、市販のウーロン茶を超純水にて０．０１%に希釈し
たものを各１００μｌ添加した。これを、汚れの測定装
置１にセットして、発光量を測定した。測定値は、相対
発光量ＲＬＵ（Relative light Unit）で示した。ＰＰ
ＤＫなしの場合の測定値は６ＲＬＵであったが、ＰＰＤ
Ｋありの場合の測定値は６１８ＲＬＵであった。
【００２２】
【発明の効果】発光試薬としてＰＰＤＫ等のＡＴＰ再生
酵素を含有する発光試薬を用いているので、発光が強く
安定しており、シリコンホトダイオードでもその発光を
検出でき、さらに装置を小型、軽量化できる。
酵素を含有する発光試薬を用いているので、発光が強く
安定しており、シリコンホトダイオードでもその発光を
検出でき、さらに装置を小型、軽量化できる。
【図１】汚れの測定装置の正面断面図
【図２】回路図
【図３】汚れの測定装置の正面図
【図４】拭取検査用器具
１ 汚れの測定装置 ２ 本体 ３ 拭取検査用器具 ４ 集光レンズ ５ シリコンホトダイオード ６ 測定回路部 ９ 収納室 １０ テーブル部材 １１ 反射鏡 １２ 検体採取具 １３ 発光試薬容器 １４ 検体拭取具 １５ 抽出液容器 ４６ 演算装置 ４７ 表示部 ４８ 操作部
Claims (5)
- 【請求項１】アデノシンリン酸エステル類を、ＡＴＰ再
生酵素を含有する発光試薬により発光させ、その発光量
をシリコンホトダイオードにより測定することを特徴と
する発光による試料の測定方法。 - 【請求項２】検査用器具の収納室、該収納室におかれた
検査用器具による発光を受光するシリコンホトダイオー
ド、及び該シリコンホトダイオードからの信号を電気的
に処理をする演算装置より構成されることを特徴とする
発光による試料の測定装置。 - 【請求項３】検査用器具が、拭取検査用器具である請求
項２記載の発光による試料の測定装置。 - 【請求項４】拭取検査用器具がＡＴＰ再生酵素を含有す
る発光試薬を利用する請求項２あるいは３記載の発光に
よる試料の測定装置。 - 【請求項５】検査用器具が試験管である請求項２記載の
発光による試料の測定装置。
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11362071A JP2000245500A (ja) | 1998-12-28 | 1999-12-21 | 発光による試料の測定方法及び装置 |
| EP99961365A EP1143012B1 (en) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Method and apparatus for measuring sample by luminescence |
| DE69935612T DE69935612T2 (de) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Verfahren und vorrichtung zum messen von proben mit hilfe von lumineszenz |
| CNB998163848A CN1140631C (zh) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | 发光试样的测定方法及装置 |
| PCT/JP1999/007276 WO2000040748A1 (fr) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Procede et appareil pour mesurer un echantillon par luminescence |
| AU17999/00A AU1799900A (en) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Method and apparatus for measuring sample by luminescence |
| CA002356317A CA2356317C (en) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Method and apparatus for measuring sample by luminescence |
| US09/869,218 US6599712B1 (en) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Method and apparatus for measuring sample by luminescence |
| AT99961365T ATE357534T1 (de) | 1998-12-28 | 1999-12-24 | Verfahren und vorrichtung zum messen von proben mit hilfe von lumineszenz |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10-373290 | 1998-12-28 | ||
| JP37329098 | 1998-12-28 | ||
| JP11362071A JP2000245500A (ja) | 1998-12-28 | 1999-12-21 | 発光による試料の測定方法及び装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000245500A true JP2000245500A (ja) | 2000-09-12 |
Family
ID=26581346
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11362071A Pending JP2000245500A (ja) | 1998-12-28 | 1999-12-21 | 発光による試料の測定方法及び装置 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6599712B1 (ja) |
| EP (1) | EP1143012B1 (ja) |
| JP (1) | JP2000245500A (ja) |
| CN (1) | CN1140631C (ja) |
| AT (1) | ATE357534T1 (ja) |
| AU (1) | AU1799900A (ja) |
| CA (1) | CA2356317C (ja) |
| DE (1) | DE69935612T2 (ja) |
| WO (1) | WO2000040748A1 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
| AU4883401A (en) * | 2000-04-26 | 2001-11-07 | Kikkoman Corporation | Method of measuring biological luminescence |
| JP4467304B2 (ja) | 2001-12-06 | 2010-05-26 | バイオコントロール システムズ，インコーポレイティド | サンプル収集および試験システム |
| US20030209653A1 (en) | 2002-04-24 | 2003-11-13 | Biocontrol Systems, Inc. | Sample collection and testing system |
| GB0401288D0 (en) | 2004-01-21 | 2004-02-25 | Orion Diagnostica Oy | Sampling and assay device |
| CN100462714C (zh) * | 2005-05-23 | 2009-02-18 | 西安交通大学 | 一种多样本微生物污染快速筛拣的方法 |
| CN101113985B (zh) * | 2006-07-27 | 2010-12-15 | 中国科学院电子学研究所 | 一种卫生状况现场快速检测装置及检测方法 |
| WO2008045121A1 (en) * | 2006-10-13 | 2008-04-17 | Charm Sciences, Inc. | Method and apparatus for reducing luminescent test result interferences |
| CN101464412B (zh) * | 2007-12-19 | 2011-06-29 | 中国科学院电子学研究所 | 光学快速检测表面洁净度用生物传感器及测试方法 |
| WO2010129726A1 (en) * | 2009-05-06 | 2010-11-11 | 3M Innovative Properties Company | Articles with matrix comprising a cell extractant and biodetection methods thereof |
| WO2010129727A1 (en) * | 2009-05-06 | 2010-11-11 | 3M Innovative Properties Company | Coated substrates comprising a cell extractant and biodetection methods thereof |
| US20120094281A1 (en) * | 2009-05-06 | 2012-04-19 | Raj Rajagopal | Articles with shell structures including a cell extractant and biodetection methods thereof |
| BRPI1015218B1 (pt) * | 2009-05-07 | 2019-10-08 | Biomerieux Inc. | Métodos para determinar a resistência antimicrobiana |
| US9446406B2 (en) * | 2012-06-29 | 2016-09-20 | Biocontrol Systems, Inc. | Sample collection and bioluminescent analysis system |
| EP3262400B1 (en) * | 2015-02-23 | 2021-03-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Device and method for testing and inspecting integrity of a container |
| DE102016012369B3 (de) * | 2016-10-15 | 2017-02-23 | Bundesrepublik Deutschland, vertreten durch das Bundesministerium der Verteidigung, vertreten durch das Bundesamt für Ausrüstung, Informationstechnik und Nutzung der Bundeswehr | Probennahmekit für eine CBRN-Probe |
| KR102651024B1 (ko) * | 2017-09-27 | 2024-03-26 | 액신 피티와이 엘티디 | 진단 테스트 시스템 및 방법 |
| US10612175B2 (en) | 2017-09-28 | 2020-04-07 | Midea Group Co., Ltd. | Automatic color composition detection for laundry washing machine |
| WO2019084675A1 (en) | 2017-10-31 | 2019-05-09 | Luminultra Technologies Ltd. | Decision support system and method for water treatment |
| US11866868B2 (en) | 2020-12-18 | 2024-01-09 | Midea Group Co., Ltd. | Laundry washing machine color composition analysis with article alerts |
| US11898289B2 (en) | 2020-12-18 | 2024-02-13 | Midea Group Co., Ltd. | Laundry washing machine calibration |
| US11773524B2 (en) | 2020-12-18 | 2023-10-03 | Midea Group Co., Ltd. | Laundry washing machine color composition analysis during loading |
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|---|---|---|---|---|
| US4349510A (en) * | 1979-07-24 | 1982-09-14 | Seppo Kolehmainen | Method and apparatus for measurement of samples by luminescence |
| JPH06105185B2 (ja) | 1986-05-16 | 1994-12-21 | ミノルタ株式会社 | 光電変換処理装置 |
| GB8824712D0 (en) | 1988-10-21 | 1988-11-30 | Biotrace Ltd | Luminescence monitoring apparatus & method |
| JPH0759555A (ja) * | 1993-08-26 | 1995-03-07 | Nippon Health Sci Kk | 包装体 |
| JP3409962B2 (ja) | 1996-03-04 | 2003-05-26 | キッコーマン株式会社 | 生物発光試薬及びその試薬を用いたアデノシンリン酸エステルの定量法並びにその試薬を用いたａｔｐ変換反応系に関与する物質の定量法 |
-
1999
- 1999-12-21 JP JP11362071A patent/JP2000245500A/ja active Pending
- 1999-12-24 WO PCT/JP1999/007276 patent/WO2000040748A1/ja active IP Right Grant
- 1999-12-24 US US09/869,218 patent/US6599712B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-24 DE DE69935612T patent/DE69935612T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-24 CN CNB998163848A patent/CN1140631C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-24 EP EP99961365A patent/EP1143012B1/en not_active Expired - Lifetime
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