JP3765518B2 - 汚れ採取用担体収納容器 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、測定値の信頼性の高い、ＡＴＰ法による清浄度検査法に好適な綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなどの汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ＡＴＰ法による清浄度検査法として、以下に記載する従来法および本発明者らが開発した方法が挙げられる。
【０００３】
（従来法）
（１）無菌水で湿らせた綿棒で検査箇所（例えば１０ｃｍ2）を拭き取り
（２）綿棒を無菌水を入れた試験管の中で濯ぐ
（３）濯ぎ液の所定量を測定用試験管に取る
（４）ＡＴＰ抽出試薬を所定量加える
（５）発光試薬（ルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬）を所定量加える。
（６）発光量測定器（ルミノメーター）で発光量を測定する。
【０００４】
（本発明者らが開発した方法）
（１）ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（以下、ＰＰＤＫということがある）、ホスホエノールピルビン酸、ピロリン酸、ルシフェリン、ルシフェラーゼおよび金属塩を含む発光試薬（以下「ＰＰＤＫ含有発光試薬」ということがある）を使用して、汚れの指標成分であるＡＴＰに加え、従来のルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬では測定が不可能であったＡＭＰも同時に測定して、少ない汚れを、感度よく検出して、精度の高い清浄度検査を行なう方法。
【０００５】
（２）上記ＰＰＤＫ含有発光試薬にさらに、「ＡＤＰからＡＴＰを生成する反応を触媒する酵素」および／または「ＲＮＡ分解酵素」を添加せしめて、ＡＴＰおよびＡＭＰに加え、さらにＡＤＰおよびＲＮＡも同時に測定して、さらに少ない汚れを、感度よく検出して、より精度の高い清浄度検査を行なう方法。
【０００６】
上記「ＡＤＰからＡＴＰを生成する反応を触媒する酵素」としては、ピルビン酸キナーゼ、酢酸キナーゼ、クレアチンキナーゼ、ケトヘキソキナーゼ、ホスホリブロキナーゼ、カルバメートキナーゼおよびホスホグリセレートキナーゼなどが、また「ＲＮＡ分解酵素」としては、ＲＮＡから５’−モノヌクレトチド（ＡＭＰ、ＧＭＰ、ＣＭＰ、ＵＭＰ）を生成する反応を触媒する酵素でエンドヌクレアーゼ・エス・ワン、ベノム・エキソヌクレアーゼ、ホスホ・ジエステラーゼ・ワンなどが挙げられる。
【０００７】
本発明では、従来法および本発明者らが開発した上記清浄度検査方法を、「ＡＴＰ法による清浄度検査法」という。
また、ＡＴＰ、ＡＭＰ、ＡＤＰおよびＲＮＡを「アデノシンリン酸エステル類」という。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、ＡＴＰ法による清浄度検査法に使用される綿棒などの汚れ採取用担体および該担体収納容器の内周壁には、驚くべきことにアデノシンリン酸エステル類が若干含まれていて、あるいは付着していて、そのまま使用すると、これらの成分が汚れとして分析され、ブランク値が高まり、測定値の信頼性、感度が低下する問題点を有していることが判明した。
したがって、本発明は測定値の信頼性、感度が高い、ＡＴＰ法による清浄度検査法にとって好適な綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなどの汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器を提供することを目的とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討を重ねた結果、ついに本発明を完成した。即ち、（１）本発明はシリンダー、該シリンダーの一方から挿入されるピストン、該シリンダーの他方から挿入される発光試薬収納槽、該シリンダー内に収納される綿棒、該綿棒と該発光試薬収納槽の間に介装されたＡＴＰ抽出試薬収納槽を含み、かつ該綿棒基端部を該ピストンの先端部に取付けると共に該綿棒他端の汚れ採取部を該ピストンの挿入によって該ＡＴＰ抽出試薬収納槽の一方の壁面から他方の壁面を貫通可能とした汚れ採取用担体収納容器であって、該綿棒は、終濃度で０．００１Ｕ／ｍｌ以上のアデノシンリン酸エステル分解酵素を含有する水溶液と１分以上接触され次いで該酵素が除去処理された綿棒であることを特徴とする汚れ採取用担体収納容器である。
【００１０】
【発明の実施の形態】
先ず本発明を実施するには、汚れ採取用担体の全体または汚れ採取部を、アデノシンリン酸エステル分解酵素の水溶液に接触させ、ついで必要により該酵素を除去（例えば、超純水洗浄処理、加熱処理など）する。
【００１１】
また、汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素の水溶液に接触させ、ついで必要により該酵素を除去する。
【００１２】
ここに用いられるアデノシンリン酸エステル分解酵素としては、アデノシンリン酸デアミナーゼ、アピラーゼ、アルカリホスファターゼ、酸性ホスファターゼ、ヘキソキナーゼ、アデノシントリホスファターゼ、ホスホジエステラーゼ１などが挙げられる。これらは単独で使用するか、または併用する。
【００１３】
例えば、アデノシンリン酸デアミナーゼまたはホスホジエステラーゼ１を単独で利用する方法、およびアピラーゼ、アルカリホスファターゼ、酸性ホスファターゼ、ヘキソキナーゼおよびアデノシントリホスファターゼからなる群より選ばれる少なくとも一種とアデノシンリン酸デアミナーゼとを併用する方法が挙げられる。
【００１４】
これらの酵素は、目的とする汚れ採取用担体および該汚れ採取用担体収納容器内周壁に含まれる（あるいは付着する）アデノシンリン酸エステルを実質的に除去するのに十分な条件で接触を行なう。
その濃度は、終濃度で０．００１Ｕ／ｍｌ以上、特に０．０１〜１００Ｕ／ｍｌとなる濃度が好ましい。なお、酵素活性を示すＵ（単位）は、国際単位を意味する。
【００１５】
上記酵素の接触時におけるｐＨは、弱酸性〜弱アルカリ性の範囲において行なうことが好ましい。
例えば、アデノシンリン酸デアミナーゼ単独、またはこれにアピラーゼ併用の場合は、ｐＨ５．０〜８．０が好ましい。
【００１６】
接触時間は、汚れ採取用担体の先端拭取部の嵩密度、容積並びに汚れ採取用担体収納容器の内周壁の組織、構造、大きさなどによっても異なるが、上記酵素水溶液が汚れ採取部、または内周壁にまんべんなく浸透（または付着）し、そこに存在するアデノシンリン酸エステル類が完全に分解消去するのに十分な時間、例えば１分以上、好ましくは３０〜９０分行なう。
【００１７】
このようにして、接触が終了した汚れ採取用担体または汚れ採取用担体収納容器は、超純水に晒す（浸す）などして洗浄処理するか、加熱処理（例えば６０℃〜１００℃で、１〜６０分処理）するか、あるいは両処理をするなどして、該酵素の影響を完全に除去する。
【００１８】
このようにして、実質的にアデノシンリン酸エステル類の含まない汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器を得ることができる。
通常の汚れ採取用担体あるいは汚れ採取用担体収納容器は、その製造に際して原料由来、製造装置、人手および作業環境などを介してアデノシンリン酸エステル類の混入は避けられず、またこれを除去することも容易ではない。従って、本発明でいう「実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない」とは、通常の方法で得られる製品に含まれる該エステル類の濃度を１／２以下に低減したことを意味する。
【００１９】
汚れ採取用担体収納容器としては、該担体を収納する任意の容器が挙げられる。
【００２０】
汚れ採取用担体収納容器の実施例を添付図面に基づいて説明する。
図１は、汚れ採取用担体収納容器の概略説明を示す。図示のように、この汚れ採取用担体収納容器は、シリンダー１、該シリンダーの一方から挿入されるピストン２、該シリンダーの他方から挿入される発光試薬３の収納槽４、該シリンダー１内に収納される拭取用綿棒５、該綿棒５と該発光試薬収納槽４の間に介装されたＡＴＰ抽出試薬６の収納槽７を含み、かつ該綿棒基端部をピストン２の先端部に取付けると共に他端拭取部５ａを該ピストン２の挿入によって該ＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａから他方の壁面７ｂを貫通可能ならしめた構造となっている。
なお、４ａは、発光試薬３の収納槽４の開口部を密閉するための薄膜部材（アルミニウム箔、プラスチックフィルムなど）で、シリンダーの下部内周壁に設けた突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂可能に構成されている。
【００２１】
上記、ＡＴＰ抽出試薬収納槽７に収納される該ＡＴＰ抽出試薬としては、界面活性剤（塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、トリトンＸ１００など）、メタノール、エタノール、エタノールとアンモニアの混合液、トリクロル酢酸水溶液、過塩素酸水溶液などを含む水溶液が挙げられる。
【００２２】
また上記、発光試薬収納槽４に収納される該発光試薬３としては、ルシフェリン、ルシフェラーゼおよび金属塩を含む発光試薬、市販のルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬、例えばルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）あるいはＰＰＤＫ含有発光試薬などが挙げられる。
このうち、ＰＰＤＫ含有発光試薬を利用すると高精度、高感度の清浄度検査が行なえるので好ましい。
【００２３】
次に、上記ＰＰＤＫ含有発光試薬の構成成分の好適な濃度範囲を以下に示す。
（１）ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（ＰＰＤＫ）：０．００１Ｕ／ｍｌ以上（終濃度）、特に０．００２〜１００Ｕ／ｍｌ（〃）となる濃度。
（２）ホスホエノールピルビン酸：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜８．０ｍＭ（〃）となる濃度。
（３）ピロリン酸：１．０μＭ（〃）以上、特に５．０〜１０００μＭ（〃）となる濃度。
（４）ルシフェリン：５．０μＭ（〃）以上、特に５０．０〜１００００μＭ（〃）となる濃度。
（５）ルシフェラーゼ：０．１ｍｇ／ｍｌ（〃）以上、特に０．５〜２０ｍｇ／ｍｌ（〃）となる濃度。
（６）マグネシウムイオン：１．０ｍＭ（〃）以上、特に５．０〜１００ｍＭ（〃）となる濃度。
（７）硫酸アンモニウム：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１００ｍＭ（〃）となる濃度。
（８）ジチオスレイトール：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１０ｍＭ（〃）となる濃度。
（９）ＥＤＴＡ：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１０ｍＭ（〃）となる濃度。
（１０）ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）：１０ｍＭ（〃）以上、特に２０〜２００ｍＭとなる濃度。
（１１）アデノシンリン酸デアミナーゼ：０．００１Ｕ／ｍｌ以上、特に０．０１Ｕ／ｍｌ〜１０Ｕ／ｍｌとなる濃度。
【００２４】
以下本発明の汚れ採取用担体を用いた清浄度検査法について説明する。
本発明の清浄度検査法は、まな板、包丁、シャモジなどの調理器具、医薬品製造用機械、食品製造機械など検査箇所に、綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなど汚れ採取用担体を接触させて、該汚れの付着した担体を得る。
【００２５】
次いでこれにＡＴＰ抽出試薬を接触させる。ＡＴＰ抽出試薬として界面活性剤を用いる場合その濃度は、０．００１％〜１％が好ましい。
【００２６】
この接触操作により、汚れの主体である微生物の細胞内成分（例えばＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＲＮＡなど）およびその他の汚れ成分が抽出された抽出液が調製される。
【００２７】
次いでこの抽出液にルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬を混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーターにより測定し、その結果から清浄度を推定する。
【００２８】
次に汚れ採取用担体収納容器を用いた清浄度検査法について説明する。
図１において、無菌水で湿らせた綿棒で検査箇所（例えば１０ｃｍ2）を拭き取り、汚れ採取部５ａに汚れの付着した綿棒５を得、この綿棒のついたピストン２を、シリンダー１の下方に向けて挿入し、綿棒５の汚れ採取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａを貫通して一時停止し、該ＡＴＰ抽出試薬６の収納槽の中で濯ぎを行い、汚れ（微生物、その他の汚れ成分）の抽出液、特に微生物のＡＴＰ抽出液を得る。
一方、シリンダー１の下方から発光試薬収納槽４を挿入して、該収納槽の薄膜部材４ａを突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂する。
次いで、ピストン２を前記停止位置からさらに押し下げ、拭取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の他方の壁面７ｂを貫通（開裂）し、汚れの抽出液を滴下させ、発光試薬収納槽４の発光試薬と混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーターで測定し、その結果から清浄度を推定する。
【００２９】
以下実施例を示して本発明をより具体的に説明する。
【００３０】
【実施例】
実施例１
市販綿棒（プラスチック芯）をアデノシンリン酸デアミナーゼ０．５Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し２５℃で１時間処理した。その後この綿棒を新たに超純水に浸し８０℃で３０分間処理し、使用したアデノシンリン酸デアミナーゼを除去し、綿棒を得た（以下、アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒という）。
この綿棒を超純水１ｍｌに浸し、その綿棒に残存（付着または吸着）していたアデノシンリン酸エステルを抽出した。この浸漬液１００μｌをプラスチック製チューブに採取した。これに発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を１００μｌ添加し、生じた発光量をルミノメーター「ルミテスターＫ１００（キッコーマン社製）」で測定したところ６ＲＬＵであった。
【００３１】
比較例１
上記方法において、「アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒」を用いる代わりに「市販綿棒（プラスチック芯）を超純水に浸し２５℃で１時間処理した後この綿棒を再び超純水に浸し８０℃で３０分間処理し、得た綿棒（以下、水処理の綿棒という）」を用いる以外は全く同様にして、水処理の綿棒の発光量を測定したところ、４３ＲＬＵであった。
【００３２】
上記実施例１および比較例１の結果から、アデノシンリン酸デアミナーゼで処理することにより、元来ブランク発光量が４３ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない６ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００３３】
実施例２
実施例１のアデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒の発光量測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を用いる代わりに以下に示す「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は全く同様にして、アデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒の発光量を測定したところ８６ＲＬＵであった。
また、上記比較例１の水処理綿棒の発光量測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を用いる代わりに「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は全く同様にして、水処理綿棒の発光量を測定したところ２５８９０ＲＬＵであった。
これらの結果から、アデノシンリン酸デアミナーゼで処理することにより、元来ブランク発光量が２５８９０ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない８６ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００３４】
（ＰＰＤＫ含有発光試薬）
ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（ＰＰＤＫ） １．８Ｕ／ｍｌ
ホスホエノールピルビン酸 ４．２ｍＭ
ピロリン酸ナトリウム ２００μＭ
ルシフェリン １．５ｍＭ
ルシフェラーゼ（キッコーマン社製） ４．５ｍｇ／ｍｌ
硫酸マグネシウム（金属塩） １５ｍＭ
（注）ＨＥＰＥＳ（緩衝剤） ５０ｍＭ（ｐＨ７．０）
（注）シュークロース（酵素安定剤） ０．３７重量％
（注）ＥＤＴＡ・２Ｎａ（酵素の金属による阻害防止剤）１．０ｍＭ
（注）ジチオスレイトール（酵素安定剤） １．０ｍＭ
（注）硫酸アンモニウム（酵素活性化剤） ７．５ｍＭ
（注）アデノシンリン酸デアミナーゼ ０．１Ｕ／ｍｌ
【００３５】
なお上記成分のうち（注）のついた、ＨＥＰＥＳ緩衝剤は反応系のｐＨ安定のため、シュークロースはルシフェラーゼの安定のため、ＥＤＴＡは酵素の金属による阻害防止のため、ジチオスレイトールは酵素安定のため、硫酸アンモニウムはピルベ−トオルトホスフェ−トジキナ−ゼの活性を強めるため、そしてまた、アデノシンリン酸デアミナーゼは発光試薬の持込みＡＴＰ消去のため、それぞれ使用するもので、必須の成分ではない。
【００３６】
実施例３
図１の構成要素をそれぞれ以下のものとして本発明の汚れ採取用担体収納容器を得た。
シリンダー１：内径１２ｍｍ、長さ１２５ｍｍのプラスチック製円筒とする。
ピストン２：シリンダー１内摺動可能な外径を有するものとする。
発光試薬３の収納槽４：シリンダー１内摺動可能な外径を有し、長さ５５ｍｍ、容量３．５ｍｌそして、その開口部をアルミニウム箔で液密的に閉鎖した無色透明プラスチック製試験管（ルミノメーターで発光量を測定できる）とする。
発光試薬：「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」の発光試薬とする。
綿棒（汚れ採取用担体）５：６０ｍｍプラスチック芯の先端部に長さ１３ｍｍ拭取部５ａを有するものとする。
ＡＴＰ抽出試薬の収納槽７：外径１１．５ｍｍ、高さ１４ｍｍの円筒体であって、上部（一方）および下部（他方）の開口部をアルミニウム箔（壁面）で液密的に閉鎖したものとする。
ＡＴＰ抽出試薬：「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」のＡＴＰ抽出試薬を収納した。
シリンダーの下部内周壁に設けた突起８：プラスチック製中空部材の下端部を斜めに切断し下端に尖鋭部を形成したものとする。
【００３７】
上記の汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させ、実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない汚れ採取用担体収納容器を製造した。
即ち、上記構成要素において、シリンダー１（汚れ採取用担体収納容器）の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体（綿棒５、５ａ）およびＡＴＰ抽出試薬の収納槽７（その他の部材）をアデノシンリン酸デアミナーゼ０．１Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し、２５℃で３０分アデノシンリン酸エステルを分解処理し、次いで超純水に浸し７０℃で３０分間加熱処理し、アデノシンリン酸デアミナーゼを失活処理し、次いでこれを乾燥させた。
また発光試薬３の収納槽４の上部外周壁および薄膜部材４ａの外面に、アデノシンリン酸デアミナーゼ０．１Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し、２５℃で３０分アデノシンリン酸エステルを分解処理し、次いで超純水で洗浄処理を行い、アデノシンリン酸デアミナーゼを除去処理し、次いでこれを乾燥させた。
こうして得られる汚れ採取用担体収納容器は、拭き取り検査用器具として好適に用いることができる。
【００３８】
次に汚れ採取用担体収納容器に格納されたアデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のブランク発光を測定した。
上記実施例において、アデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のついたピストン２を、シリンダー１の下方に向けて挿入し、綿棒５の汚れ採取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａを貫通して一時停止し、該ＡＴＰ抽出試薬６の収納槽の中で濯ぎを行い、あらかじめ綿棒に含まれていたアデノシンリン酸エステル類の抽出液を得る。
一方、シリンダー１の下方から発光試薬収納槽４を挿入して、該収納槽の薄膜部材４ａを突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂する。
次いで、ピストン２を前記停止位置からさらに押し下げ、拭取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の他方の壁面７ｂを貫通（開裂）し、アデノシンリン酸エステル類抽出液を滴下させ、発光試薬収納槽４の発光試薬と混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーター「ルミテスターＫ１００（キッコーマン社製）」で測定し、綿棒に含まれていたアデノシンリン酸エステル（ブランク値）に基づく発光量を測定したところ５ＲＬＵであった。
以上一連の操作は外気と遮断された状態、即ち気密的な状態で行なわれるので、綿棒以外の汚れ成分（大気に浮遊する細菌、ゴミなどに含まれるアデノシンリン酸エステル）の混入によるブランク発光を完全に除外することが可能となる。
【００３９】
比較例２
上記実施例３の汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させ、実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない汚れ採取用担体収納容器の製造法において、該「容器内に収納される汚れ採取用担体」として、上記実施例３で調製した「アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒」を用い、それ以外は「超純水に２５℃で１時間浸し、さらに７０℃の超純水で３０分間加熱処理し、次いで乾燥する」ことを行い、比較例の汚れ採取用担体収納容器を製造した。
【００４０】
次に比較例の汚れ採取用担体収納容器に格納されたアデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のブランク発光を上記実施例３と同様にして測定したところ６４ＲＬＵであった。
【００４１】
この結果から、汚れ採取用担体収納容器の内周壁およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させることにより、それらの表面に付着するアデノシンリン酸エステル類を消去し、これに由来するブランク発光を大巾に低減できることが判る。
【００４２】
実施例４
上記実施例３および比較例２の汚れ採取用担体収納容器におけるアデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒のブランク発光量の測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」に代えて、実施例２に記載された「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は、全く同様に処理してブランク発光量を測定したところ、それぞれ７２ＲＬＵ、３９８５２ＲＬＵであった。
この結果から、汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液で処理することにより、ブランク発光量が３９８５２ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない７２ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００４３】
【発明の効果】
従来の「ＡＴＰ法による清浄度検査法」において、用いられる綿棒などの汚れ採取用担体および該担体収納容器の内周壁に含まれる、アデノシンリン酸エステル類を実質的に消去することができるので、ブランク発光量の少ない汚れ採取用担体を得ることができ、また汚れの測定値の信頼性を損なうことが解消される。またブランク発光の少ない汚れ採取用担体を用いるものであるから、さらに極めて少ない汚れでも、感度よく検出して、より精度の高い清浄度検査を行なうことが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の汚れ採取用担体収納容器の１具体例を示す概略説明。
【符号の説明】
１：シリンダー
２：ピストン
３：発光試薬
４：発光試薬収納槽
４ａ：薄膜部材
５：汚れ採取用担体（綿棒）
５ａ：汚れ採取部
６：ＡＴＰ抽出試薬
７：ＡＴＰ抽出試薬収納槽
７ａ：壁面
７ｂ：壁面
８：突起
【発明の属する技術分野】
本発明は、測定値の信頼性の高い、ＡＴＰ法による清浄度検査法に好適な綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなどの汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ＡＴＰ法による清浄度検査法として、以下に記載する従来法および本発明者らが開発した方法が挙げられる。
【０００３】
（従来法）
（１）無菌水で湿らせた綿棒で検査箇所（例えば１０ｃｍ2）を拭き取り
（２）綿棒を無菌水を入れた試験管の中で濯ぐ
（３）濯ぎ液の所定量を測定用試験管に取る
（４）ＡＴＰ抽出試薬を所定量加える
（５）発光試薬（ルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬）を所定量加える。
（６）発光量測定器（ルミノメーター）で発光量を測定する。
【０００４】
（本発明者らが開発した方法）
（１）ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（以下、ＰＰＤＫということがある）、ホスホエノールピルビン酸、ピロリン酸、ルシフェリン、ルシフェラーゼおよび金属塩を含む発光試薬（以下「ＰＰＤＫ含有発光試薬」ということがある）を使用して、汚れの指標成分であるＡＴＰに加え、従来のルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬では測定が不可能であったＡＭＰも同時に測定して、少ない汚れを、感度よく検出して、精度の高い清浄度検査を行なう方法。
【０００５】
（２）上記ＰＰＤＫ含有発光試薬にさらに、「ＡＤＰからＡＴＰを生成する反応を触媒する酵素」および／または「ＲＮＡ分解酵素」を添加せしめて、ＡＴＰおよびＡＭＰに加え、さらにＡＤＰおよびＲＮＡも同時に測定して、さらに少ない汚れを、感度よく検出して、より精度の高い清浄度検査を行なう方法。
【０００６】
上記「ＡＤＰからＡＴＰを生成する反応を触媒する酵素」としては、ピルビン酸キナーゼ、酢酸キナーゼ、クレアチンキナーゼ、ケトヘキソキナーゼ、ホスホリブロキナーゼ、カルバメートキナーゼおよびホスホグリセレートキナーゼなどが、また「ＲＮＡ分解酵素」としては、ＲＮＡから５’−モノヌクレトチド（ＡＭＰ、ＧＭＰ、ＣＭＰ、ＵＭＰ）を生成する反応を触媒する酵素でエンドヌクレアーゼ・エス・ワン、ベノム・エキソヌクレアーゼ、ホスホ・ジエステラーゼ・ワンなどが挙げられる。
【０００７】
本発明では、従来法および本発明者らが開発した上記清浄度検査方法を、「ＡＴＰ法による清浄度検査法」という。
また、ＡＴＰ、ＡＭＰ、ＡＤＰおよびＲＮＡを「アデノシンリン酸エステル類」という。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは、ＡＴＰ法による清浄度検査法に使用される綿棒などの汚れ採取用担体および該担体収納容器の内周壁には、驚くべきことにアデノシンリン酸エステル類が若干含まれていて、あるいは付着していて、そのまま使用すると、これらの成分が汚れとして分析され、ブランク値が高まり、測定値の信頼性、感度が低下する問題点を有していることが判明した。
したがって、本発明は測定値の信頼性、感度が高い、ＡＴＰ法による清浄度検査法にとって好適な綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなどの汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器を提供することを目的とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討を重ねた結果、ついに本発明を完成した。即ち、（１）本発明はシリンダー、該シリンダーの一方から挿入されるピストン、該シリンダーの他方から挿入される発光試薬収納槽、該シリンダー内に収納される綿棒、該綿棒と該発光試薬収納槽の間に介装されたＡＴＰ抽出試薬収納槽を含み、かつ該綿棒基端部を該ピストンの先端部に取付けると共に該綿棒他端の汚れ採取部を該ピストンの挿入によって該ＡＴＰ抽出試薬収納槽の一方の壁面から他方の壁面を貫通可能とした汚れ採取用担体収納容器であって、該綿棒は、終濃度で０．００１Ｕ／ｍｌ以上のアデノシンリン酸エステル分解酵素を含有する水溶液と１分以上接触され次いで該酵素が除去処理された綿棒であることを特徴とする汚れ採取用担体収納容器である。
【００１０】
【発明の実施の形態】
先ず本発明を実施するには、汚れ採取用担体の全体または汚れ採取部を、アデノシンリン酸エステル分解酵素の水溶液に接触させ、ついで必要により該酵素を除去（例えば、超純水洗浄処理、加熱処理など）する。
【００１１】
また、汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素の水溶液に接触させ、ついで必要により該酵素を除去する。
【００１２】
ここに用いられるアデノシンリン酸エステル分解酵素としては、アデノシンリン酸デアミナーゼ、アピラーゼ、アルカリホスファターゼ、酸性ホスファターゼ、ヘキソキナーゼ、アデノシントリホスファターゼ、ホスホジエステラーゼ１などが挙げられる。これらは単独で使用するか、または併用する。
【００１３】
例えば、アデノシンリン酸デアミナーゼまたはホスホジエステラーゼ１を単独で利用する方法、およびアピラーゼ、アルカリホスファターゼ、酸性ホスファターゼ、ヘキソキナーゼおよびアデノシントリホスファターゼからなる群より選ばれる少なくとも一種とアデノシンリン酸デアミナーゼとを併用する方法が挙げられる。
【００１４】
これらの酵素は、目的とする汚れ採取用担体および該汚れ採取用担体収納容器内周壁に含まれる（あるいは付着する）アデノシンリン酸エステルを実質的に除去するのに十分な条件で接触を行なう。
その濃度は、終濃度で０．００１Ｕ／ｍｌ以上、特に０．０１〜１００Ｕ／ｍｌとなる濃度が好ましい。なお、酵素活性を示すＵ（単位）は、国際単位を意味する。
【００１５】
上記酵素の接触時におけるｐＨは、弱酸性〜弱アルカリ性の範囲において行なうことが好ましい。
例えば、アデノシンリン酸デアミナーゼ単独、またはこれにアピラーゼ併用の場合は、ｐＨ５．０〜８．０が好ましい。
【００１６】
接触時間は、汚れ採取用担体の先端拭取部の嵩密度、容積並びに汚れ採取用担体収納容器の内周壁の組織、構造、大きさなどによっても異なるが、上記酵素水溶液が汚れ採取部、または内周壁にまんべんなく浸透（または付着）し、そこに存在するアデノシンリン酸エステル類が完全に分解消去するのに十分な時間、例えば１分以上、好ましくは３０〜９０分行なう。
【００１７】
このようにして、接触が終了した汚れ採取用担体または汚れ採取用担体収納容器は、超純水に晒す（浸す）などして洗浄処理するか、加熱処理（例えば６０℃〜１００℃で、１〜６０分処理）するか、あるいは両処理をするなどして、該酵素の影響を完全に除去する。
【００１８】
このようにして、実質的にアデノシンリン酸エステル類の含まない汚れ採取用担体および汚れ採取用担体収納容器を得ることができる。
通常の汚れ採取用担体あるいは汚れ採取用担体収納容器は、その製造に際して原料由来、製造装置、人手および作業環境などを介してアデノシンリン酸エステル類の混入は避けられず、またこれを除去することも容易ではない。従って、本発明でいう「実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない」とは、通常の方法で得られる製品に含まれる該エステル類の濃度を１／２以下に低減したことを意味する。
【００１９】
汚れ採取用担体収納容器としては、該担体を収納する任意の容器が挙げられる。
【００２０】
汚れ採取用担体収納容器の実施例を添付図面に基づいて説明する。
図１は、汚れ採取用担体収納容器の概略説明を示す。図示のように、この汚れ採取用担体収納容器は、シリンダー１、該シリンダーの一方から挿入されるピストン２、該シリンダーの他方から挿入される発光試薬３の収納槽４、該シリンダー１内に収納される拭取用綿棒５、該綿棒５と該発光試薬収納槽４の間に介装されたＡＴＰ抽出試薬６の収納槽７を含み、かつ該綿棒基端部をピストン２の先端部に取付けると共に他端拭取部５ａを該ピストン２の挿入によって該ＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａから他方の壁面７ｂを貫通可能ならしめた構造となっている。
なお、４ａは、発光試薬３の収納槽４の開口部を密閉するための薄膜部材（アルミニウム箔、プラスチックフィルムなど）で、シリンダーの下部内周壁に設けた突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂可能に構成されている。
【００２１】
上記、ＡＴＰ抽出試薬収納槽７に収納される該ＡＴＰ抽出試薬としては、界面活性剤（塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、トリトンＸ１００など）、メタノール、エタノール、エタノールとアンモニアの混合液、トリクロル酢酸水溶液、過塩素酸水溶液などを含む水溶液が挙げられる。
【００２２】
また上記、発光試薬収納槽４に収納される該発光試薬３としては、ルシフェリン、ルシフェラーゼおよび金属塩を含む発光試薬、市販のルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬、例えばルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）あるいはＰＰＤＫ含有発光試薬などが挙げられる。
このうち、ＰＰＤＫ含有発光試薬を利用すると高精度、高感度の清浄度検査が行なえるので好ましい。
【００２３】
次に、上記ＰＰＤＫ含有発光試薬の構成成分の好適な濃度範囲を以下に示す。
（１）ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（ＰＰＤＫ）：０．００１Ｕ／ｍｌ以上（終濃度）、特に０．００２〜１００Ｕ／ｍｌ（〃）となる濃度。
（２）ホスホエノールピルビン酸：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜８．０ｍＭ（〃）となる濃度。
（３）ピロリン酸：１．０μＭ（〃）以上、特に５．０〜１０００μＭ（〃）となる濃度。
（４）ルシフェリン：５．０μＭ（〃）以上、特に５０．０〜１００００μＭ（〃）となる濃度。
（５）ルシフェラーゼ：０．１ｍｇ／ｍｌ（〃）以上、特に０．５〜２０ｍｇ／ｍｌ（〃）となる濃度。
（６）マグネシウムイオン：１．０ｍＭ（〃）以上、特に５．０〜１００ｍＭ（〃）となる濃度。
（７）硫酸アンモニウム：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１００ｍＭ（〃）となる濃度。
（８）ジチオスレイトール：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１０ｍＭ（〃）となる濃度。
（９）ＥＤＴＡ：０．１ｍＭ（〃）以上、特に０．５〜１０ｍＭ（〃）となる濃度。
（１０）ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）：１０ｍＭ（〃）以上、特に２０〜２００ｍＭとなる濃度。
（１１）アデノシンリン酸デアミナーゼ：０．００１Ｕ／ｍｌ以上、特に０．０１Ｕ／ｍｌ〜１０Ｕ／ｍｌとなる濃度。
【００２４】
以下本発明の汚れ採取用担体を用いた清浄度検査法について説明する。
本発明の清浄度検査法は、まな板、包丁、シャモジなどの調理器具、医薬品製造用機械、食品製造機械など検査箇所に、綿棒、ガーゼ、織布、不織布およびスポンジなど汚れ採取用担体を接触させて、該汚れの付着した担体を得る。
【００２５】
次いでこれにＡＴＰ抽出試薬を接触させる。ＡＴＰ抽出試薬として界面活性剤を用いる場合その濃度は、０．００１％〜１％が好ましい。
【００２６】
この接触操作により、汚れの主体である微生物の細胞内成分（例えばＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＲＮＡなど）およびその他の汚れ成分が抽出された抽出液が調製される。
【００２７】
次いでこの抽出液にルシフェリン・ルシフェラーゼ発光試薬を混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーターにより測定し、その結果から清浄度を推定する。
【００２８】
次に汚れ採取用担体収納容器を用いた清浄度検査法について説明する。
図１において、無菌水で湿らせた綿棒で検査箇所（例えば１０ｃｍ2）を拭き取り、汚れ採取部５ａに汚れの付着した綿棒５を得、この綿棒のついたピストン２を、シリンダー１の下方に向けて挿入し、綿棒５の汚れ採取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａを貫通して一時停止し、該ＡＴＰ抽出試薬６の収納槽の中で濯ぎを行い、汚れ（微生物、その他の汚れ成分）の抽出液、特に微生物のＡＴＰ抽出液を得る。
一方、シリンダー１の下方から発光試薬収納槽４を挿入して、該収納槽の薄膜部材４ａを突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂する。
次いで、ピストン２を前記停止位置からさらに押し下げ、拭取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の他方の壁面７ｂを貫通（開裂）し、汚れの抽出液を滴下させ、発光試薬収納槽４の発光試薬と混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーターで測定し、その結果から清浄度を推定する。
【００２９】
以下実施例を示して本発明をより具体的に説明する。
【００３０】
【実施例】
実施例１
市販綿棒（プラスチック芯）をアデノシンリン酸デアミナーゼ０．５Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し２５℃で１時間処理した。その後この綿棒を新たに超純水に浸し８０℃で３０分間処理し、使用したアデノシンリン酸デアミナーゼを除去し、綿棒を得た（以下、アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒という）。
この綿棒を超純水１ｍｌに浸し、その綿棒に残存（付着または吸着）していたアデノシンリン酸エステルを抽出した。この浸漬液１００μｌをプラスチック製チューブに採取した。これに発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を１００μｌ添加し、生じた発光量をルミノメーター「ルミテスターＫ１００（キッコーマン社製）」で測定したところ６ＲＬＵであった。
【００３１】
比較例１
上記方法において、「アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒」を用いる代わりに「市販綿棒（プラスチック芯）を超純水に浸し２５℃で１時間処理した後この綿棒を再び超純水に浸し８０℃で３０分間処理し、得た綿棒（以下、水処理の綿棒という）」を用いる以外は全く同様にして、水処理の綿棒の発光量を測定したところ、４３ＲＬＵであった。
【００３２】
上記実施例１および比較例１の結果から、アデノシンリン酸デアミナーゼで処理することにより、元来ブランク発光量が４３ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない６ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００３３】
実施例２
実施例１のアデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒の発光量測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を用いる代わりに以下に示す「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は全く同様にして、アデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒の発光量を測定したところ８６ＲＬＵであった。
また、上記比較例１の水処理綿棒の発光量測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵ（キッコーマン社製）」を用いる代わりに「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は全く同様にして、水処理綿棒の発光量を測定したところ２５８９０ＲＬＵであった。
これらの結果から、アデノシンリン酸デアミナーゼで処理することにより、元来ブランク発光量が２５８９０ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない８６ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００３４】
（ＰＰＤＫ含有発光試薬）
ピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（ＰＰＤＫ） １．８Ｕ／ｍｌ
ホスホエノールピルビン酸 ４．２ｍＭ
ピロリン酸ナトリウム ２００μＭ
ルシフェリン １．５ｍＭ
ルシフェラーゼ（キッコーマン社製） ４．５ｍｇ／ｍｌ
硫酸マグネシウム（金属塩） １５ｍＭ
（注）ＨＥＰＥＳ（緩衝剤） ５０ｍＭ（ｐＨ７．０）
（注）シュークロース（酵素安定剤） ０．３７重量％
（注）ＥＤＴＡ・２Ｎａ（酵素の金属による阻害防止剤）１．０ｍＭ
（注）ジチオスレイトール（酵素安定剤） １．０ｍＭ
（注）硫酸アンモニウム（酵素活性化剤） ７．５ｍＭ
（注）アデノシンリン酸デアミナーゼ ０．１Ｕ／ｍｌ
【００３５】
なお上記成分のうち（注）のついた、ＨＥＰＥＳ緩衝剤は反応系のｐＨ安定のため、シュークロースはルシフェラーゼの安定のため、ＥＤＴＡは酵素の金属による阻害防止のため、ジチオスレイトールは酵素安定のため、硫酸アンモニウムはピルベ−トオルトホスフェ−トジキナ−ゼの活性を強めるため、そしてまた、アデノシンリン酸デアミナーゼは発光試薬の持込みＡＴＰ消去のため、それぞれ使用するもので、必須の成分ではない。
【００３６】
実施例３
図１の構成要素をそれぞれ以下のものとして本発明の汚れ採取用担体収納容器を得た。
シリンダー１：内径１２ｍｍ、長さ１２５ｍｍのプラスチック製円筒とする。
ピストン２：シリンダー１内摺動可能な外径を有するものとする。
発光試薬３の収納槽４：シリンダー１内摺動可能な外径を有し、長さ５５ｍｍ、容量３．５ｍｌそして、その開口部をアルミニウム箔で液密的に閉鎖した無色透明プラスチック製試験管（ルミノメーターで発光量を測定できる）とする。
発光試薬：「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」の発光試薬とする。
綿棒（汚れ採取用担体）５：６０ｍｍプラスチック芯の先端部に長さ１３ｍｍ拭取部５ａを有するものとする。
ＡＴＰ抽出試薬の収納槽７：外径１１．５ｍｍ、高さ１４ｍｍの円筒体であって、上部（一方）および下部（他方）の開口部をアルミニウム箔（壁面）で液密的に閉鎖したものとする。
ＡＴＰ抽出試薬：「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」のＡＴＰ抽出試薬を収納した。
シリンダーの下部内周壁に設けた突起８：プラスチック製中空部材の下端部を斜めに切断し下端に尖鋭部を形成したものとする。
【００３７】
上記の汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させ、実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない汚れ採取用担体収納容器を製造した。
即ち、上記構成要素において、シリンダー１（汚れ採取用担体収納容器）の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体（綿棒５、５ａ）およびＡＴＰ抽出試薬の収納槽７（その他の部材）をアデノシンリン酸デアミナーゼ０．１Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し、２５℃で３０分アデノシンリン酸エステルを分解処理し、次いで超純水に浸し７０℃で３０分間加熱処理し、アデノシンリン酸デアミナーゼを失活処理し、次いでこれを乾燥させた。
また発光試薬３の収納槽４の上部外周壁および薄膜部材４ａの外面に、アデノシンリン酸デアミナーゼ０．１Ｕ／ｍｌ水溶液に浸し、２５℃で３０分アデノシンリン酸エステルを分解処理し、次いで超純水で洗浄処理を行い、アデノシンリン酸デアミナーゼを除去処理し、次いでこれを乾燥させた。
こうして得られる汚れ採取用担体収納容器は、拭き取り検査用器具として好適に用いることができる。
【００３８】
次に汚れ採取用担体収納容器に格納されたアデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のブランク発光を測定した。
上記実施例において、アデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のついたピストン２を、シリンダー１の下方に向けて挿入し、綿棒５の汚れ採取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の一方の壁面７ａを貫通して一時停止し、該ＡＴＰ抽出試薬６の収納槽の中で濯ぎを行い、あらかじめ綿棒に含まれていたアデノシンリン酸エステル類の抽出液を得る。
一方、シリンダー１の下方から発光試薬収納槽４を挿入して、該収納槽の薄膜部材４ａを突起８の尖鋭部分に押しつけることにより開裂する。
次いで、ピストン２を前記停止位置からさらに押し下げ、拭取部５ａをＡＴＰ抽出試薬収納槽７の他方の壁面７ｂを貫通（開裂）し、アデノシンリン酸エステル類抽出液を滴下させ、発光試薬収納槽４の発光試薬と混和し、発光反応を行い、その生成する発光量をルミノメーター「ルミテスターＫ１００（キッコーマン社製）」で測定し、綿棒に含まれていたアデノシンリン酸エステル（ブランク値）に基づく発光量を測定したところ５ＲＬＵであった。
以上一連の操作は外気と遮断された状態、即ち気密的な状態で行なわれるので、綿棒以外の汚れ成分（大気に浮遊する細菌、ゴミなどに含まれるアデノシンリン酸エステル）の混入によるブランク発光を完全に除外することが可能となる。
【００３９】
比較例２
上記実施例３の汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させ、実質的にアデノシンリン酸エステル類を含まない汚れ採取用担体収納容器の製造法において、該「容器内に収納される汚れ採取用担体」として、上記実施例３で調製した「アデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒」を用い、それ以外は「超純水に２５℃で１時間浸し、さらに７０℃の超純水で３０分間加熱処理し、次いで乾燥する」ことを行い、比較例の汚れ採取用担体収納容器を製造した。
【００４０】
次に比較例の汚れ採取用担体収納容器に格納されたアデノシンリン酸デアミナーゼ処理綿棒のブランク発光を上記実施例３と同様にして測定したところ６４ＲＬＵであった。
【００４１】
この結果から、汚れ採取用担体収納容器の内周壁およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液に接触させることにより、それらの表面に付着するアデノシンリン酸エステル類を消去し、これに由来するブランク発光を大巾に低減できることが判る。
【００４２】
実施例４
上記実施例３および比較例２の汚れ採取用担体収納容器におけるアデノシンリン酸エステル分解酵素処理綿棒のブランク発光量の測定において、発光試薬「ルシフェールＬＵプラス（キッコーマン社製）」に代えて、実施例２に記載された「ＰＰＤＫ含有発光試薬」を用いる以外は、全く同様に処理してブランク発光量を測定したところ、それぞれ７２ＲＬＵ、３９８５２ＲＬＵであった。
この結果から、汚れ採取用担体収納容器の内周壁、該容器内に収納される汚れ採取用担体およびその他の部材をアデノシンリン酸エステル分解酵素水溶液で処理することにより、ブランク発光量が３９８５２ＲＬＵを示す綿棒の、該発光量を極めて少ない７２ＲＬＵまで低減できることが判る。
【００４３】
【発明の効果】
従来の「ＡＴＰ法による清浄度検査法」において、用いられる綿棒などの汚れ採取用担体および該担体収納容器の内周壁に含まれる、アデノシンリン酸エステル類を実質的に消去することができるので、ブランク発光量の少ない汚れ採取用担体を得ることができ、また汚れの測定値の信頼性を損なうことが解消される。またブランク発光の少ない汚れ採取用担体を用いるものであるから、さらに極めて少ない汚れでも、感度よく検出して、より精度の高い清浄度検査を行なうことが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の汚れ採取用担体収納容器の１具体例を示す概略説明。
【符号の説明】
１：シリンダー
２：ピストン
３：発光試薬
４：発光試薬収納槽
４ａ：薄膜部材
５：汚れ採取用担体（綿棒）
５ａ：汚れ採取部
６：ＡＴＰ抽出試薬
７：ＡＴＰ抽出試薬収納槽
７ａ：壁面
７ｂ：壁面
８：突起
Claims (1)
- シリンダー、該シリンダーの一方から挿入されるピストン、該シリンダーの他方から挿入される発光試薬収納槽、該シリンダー内に収納される綿棒、該綿棒と該発光試薬収納槽の間に介装されたＡＴＰ抽出試薬収納槽を含み、かつ該綿棒基端部を該ピストンの先端部に取付けると共に該綿棒他端の汚れ採取部を該ピストンの挿入によって該ＡＴＰ抽出試薬収納槽の一方の壁面から他方の壁面を貫通可能とした汚れ採取用担体収納容器であって、該綿棒は、終濃度で０．００１Ｕ／ｍｌ以上のアデノシンリン酸エステル分解酵素を含有する水溶液と１分以上接触され次いで該酵素が除去処理された綿棒であることを特徴とする汚れ採取用担体収納容器。
Priority Applications (2)
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| JP3228198A JP3765518B2 (ja) | 1998-01-30 | 1998-01-30 | 汚れ採取用担体収納容器 |
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Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3228198A JP3765518B2 (ja) | 1998-01-30 | 1998-01-30 | 汚れ採取用担体収納容器 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
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