JP2000230001A - ヒアルロン酸ゲルスラリー及びその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ヒアルロン酸単独で形成された難溶性のヒア
ルロン酸ゲルをスラリーとすることにより、特に生体適
合性の高い医用材料を提供すること。 【解決手段】 ヒアルロン酸単独で形成されたゲルを含
有することを特徴とするヒアルロン酸ゲルスラリーを構
成とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ヒアルロン酸単独
で形成されたゲルを含有するヒアルロン酸ゲルスラリー
に関し、特にそれらの医用材料に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヒアルロン酸は、β−Ｄ−Ｎ−アセチル
グルコサミンとβ−Ｄ−グルクロン酸が交互に結合した
直鎖状の高分子多糖である。ヒアルロン酸は哺乳動物の
結合組織に分布するほか、ニワトリのとさか、連鎖球菌
の夾膜などにも存在が知られている。ニワトリのとさ
か、臍帯等が抽出材料として用いられているほか、連鎖
球菌の培養物からも精製物が調整されている。ヒアルロ
ン酸は、種及び臓器特異性をもたず、生体に移植または
注入した場合であっても優れた生体適合性を示すことが
知られている。

【０００３】さらに、生体に適用する場合のヒアルロン
酸自体の易水溶性に由来する短所、例えば、生体内滞留
時間が比較的短いことなどから、多種多様なヒアルロン
酸の化学修飾物も提案されている（米国特許第４，５８
２，８６５号明細書、特公平６−３７５７５号公報、特
開平７−９７４０１号公報、特開昭６０−１３０６０１
号公報、特開平３−１０５００３号、欧州特許０３４１
７４５Ａ１、特開平６−７３１０３号公報参照）。

【０００４】ヒアルロン酸は、極めて高い粘ちょう性と
保湿性を有し、本質的に抗原性が無く生体適合性が高い
ため、変形性膝関節症の治療薬や眼科手術補助剤等に用
いられている。また、ヒアルロン酸溶液そのものを手術
後の癒着防止材として用いることも検討されているが、
生体内での貯留性が比較的短いので効果が弱く、水溶性
のため短時間で創面から拡散・流動してしまう（Journa
l of Gynecologic Surgery vol.7 No.2 97-101(1991)。

【０００５】ヒアルロン酸自体が本来持っている優れた
生体適合性の特徴を最大限生かすために、なんら化学的
架橋剤や化学的修飾剤を使用することなく、またカチオ
ン性の高分子と複合体化することなく、生体適合性医用
材料として使用可能な、生体内滞留時間が長いヒアルロ
ン酸ゲルを見出した（ＰＣＴ／ＪＰ９８／０３５３６
号）。

【０００６】癒着防止材、創傷治療材として用いられる
ヒアルロン酸単独で形成された医用材料はシート状に成
形され、外科手術部位に直接貼付することにより効果を
発現する。しかし、シートは内視鏡等を用いた局所の外
科手術の場合は、操作性がよくない。また、微小部位、
形状の複雑な部位への適用も難しい。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、ゲル化
したヒアルロン酸を破砕処理して得られた粒子、または
低濃度ヒアルロン酸性水溶液を凍結して得られたヒアル
ロン酸ゲル粒子は、大きな平均粒径では微小部位、形状
の複雑な部位に均一な投与が難しい。そこで、平均粒径
を１０ｍｍ以下にすることにより微小部位、形状の複雑
な部位への均一な施用を可能とした。また、スラリー濃
度を０．１〜５重量％に調製する事により好適な流動性
を保持し、注入材としても有効であり、更にこのヒアル
ロン酸ゲルスラリーが医用材料、化粧料としても有用で
あることを見出し、本発明を完成させるに至った。

【０００８】

【課題を解決するための手段】即ち、本発明は、（１）
ヒアルロン酸単独で形成されたゲルを含有することを特
徴とするヒアルロン酸ゲルスラリー、（２）ヒアルロン
酸単独で形成されたゲルの平均粒径が１０ｍｍ以下であ
る（１）記載のヒアルロン酸ゲルスラリー、（３）ヒア
ルロン酸単独で形成されたゲルのスラリー濃度が０．１
〜５重量％である（１）又は（２）記載のヒアルロン酸
ゲルスラリー、（４）（１）〜（３）のいずれか１項に
記載のヒアルロン酸ゲルスラリーを含有することを特徴
とする医用材料、（５）（１）〜（３）のいずれか１項
に記載のヒアルロン酸ゲルスラリーを含有することを特
徴とする化粧料である。

【０００９】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いられるヒアルロン酸は、動物組織から抽出
したものでも、また発酵法で製造したものでもその起源
を問うことなく使用できる。発酵法で使用する菌株は自
然界から分離されるストレプトコッカス属等のヒアルロ
ン酸生産能を有する微生物、又は特開昭６３−１２３３
９２号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−１００（微工研菌寄第9027号) 、特開平２−２３４６
８９号公報に記載したストレプトコッカス・エクイＦＭ
−３００（微工研菌寄第2319号) のような高収率で安定
にヒアルロン酸を生産する変異株が望ましい。上記の変
異株を用いて培養、精製されたものが用いられる。

【００１０】本発明でいうヒアルロン酸単独で形成され
たゲルとは、ヒアルロン酸の架橋構造によって三次元網
目構造が形成されている。中性水溶液に難溶性であるこ
とを特徴とし、このヒアルロン酸ゲルを中性水溶液中に
投入すると、ゲル化していないヒアルロン酸と比較して
有意の難溶性を示す。難溶性は、中性の３７℃の水溶液
中でのゲルの形態の保持とゲルの溶解率で規定する。本
発明でいうヒアルロン酸ゲルは、アルカリ性水溶液中、
例えばｐＨ１１のアルカリ性緩衝水溶液中に投入すると
速やかに溶解する特徴も有する。

【００１１】本発明でいうヒアルロン酸単独で形成され
たゲルとは、ヒアルロン酸以外に化学的架橋剤や化学的
修飾剤等は使用しないことまた、カチオン性の高分子と
複合体化しないことでゲルを形成させることであり、自
己架橋したゲルを意味するものである。

【００１２】本発明に用いられるヒアルロン酸の分子量
は、約１×１０⁵ 〜約１×１０⁷ ダルトンの範囲内のも
のが好ましい。また、上記範囲内の分子量をもつもので
あれば、より高分子量のものから、加水分解処理等をし
て得たものでも同様に好ましく使用できる。なお、本発
明にいうヒアルロン酸は、そのアルカリ金属塩、例え
ば、ナトリウム、カリウム、リチウムの塩をも包含する
概念で使用される。

【００１３】本発明でいうヒアルロン酸ゲルは、ヒアル
ロン酸の促進酸加水分解反応条件下でヒアルロン酸ゲル
を処理することで分解、可溶化することができる。可溶
化されたヒアルロン酸が架橋構造を保持している場合、
分岐点を有するヒアルロン酸として高分子溶液論的に直
鎖状のヒアルロン酸と区別することができる。

【００１４】本発明でいうヒアルロン酸の促進酸加水分
解反応条件としては、水溶液のｐＨ１．５、温度６０℃
が適当である。ヒアルロン酸のグリコシド結合の加水分
解による主鎖切断反応が、中性の水溶液中と比較して、
酸性やアルカリ性の水溶液中で著しく促進される。更に
酸加水分解反応は、反応温度が高い方が促進される。

【００１５】本発明ではＧＰＣ−ＭＡＬＬＳ法を用い、
ＧＰＣで分離された分子量フラクションの分子量と分岐
度をオンラインで連続的に測定した。本発明では、同一
溶出体積のフラクションの可溶化されたヒアルロン酸の
分子量と対照となる直鎖状ヒアルロン酸の分子量を比較
して分岐度を計算する溶出体積法を使って分岐度の測定
を行った。分岐度は可溶化されたヒアルロン酸の高分子
鎖１コ当たりに存在する分岐点の数であり、可溶化され
たヒアルロン酸の分子量に対してプロットされる。

【００１６】可溶化されたヒアルロン酸は、ＧＰＣ溶媒
で希釈して濃度を調製し、０．２μｍのメンブランフィ
ルターでろ過した後測定に供した。本発明でいうヒアル
ロン酸ゲル中に、ヒアルロン酸の促進酸加水分解条件下
でも安定に存在する架橋構造がある場合、可溶化された
ヒアルロン酸に分岐構造が高分子溶液論的に確認され
る。本発明でいうヒアルロン酸ゲルの分岐度は、０．５
以上である。

【００１７】ヒアルロン酸の水溶液は、ヒアルロン酸の
粉末と水を混合し、撹拌して得られる。また、酸で酸性
に調製した水にヒアルロン酸を投入する方法によっても
得られる。このヒアルロン酸の濃度は５．０重量％以下
が水溶液の処理上好都合である。また、ヒアルロン酸の
水溶液のｐＨを調整するために使用する酸は、ｐＨ２．
０以下に調整できる酸であれば、いずれの酸も使用する
ことができる。酸の使用量を低減するために、好ましく
は強酸、例えば、硝酸、塩酸、硫酸等を使用することが
望ましい。

【００１８】ヒアルロン酸酸性水溶液の凍結は任意の容
器に注入した後、−３０℃〜−１０℃の温度で行う。凍
結は底面から冷凍する方法、空冷方式による凍結いずれ
の方法によってもよい。４時間以上凍結した後解凍する
ことによりヒアルロン酸ゲルが得られるが、短時間の凍
結だとゲル化率の低いヒアルロン酸ゲルが、長時間の凍
結だとゲル化率の高いヒアルロン酸ゲルが得られ、いず
れも破砕、懸濁処理することにより好適なスラリーが製
造できた。

【００１９】ヒアルロン酸ゲルの破砕は、目的とする破
砕粒度によって下記の粉砕機が選択される。圧縮粉砕方
式の粗砕型（ブレーキ、ドッジ、シングル、トッグルジ
ョークラッシャー）、旋動型（ジャイレトリ、コーン、
ハイドロコーンクラッシャー）、回転型（ロールクラッ
シャー、シングルロールクラッシャー、ディスククラッ
シャー）。衝撃圧縮粉砕方式のひき臼型（スタンプミ
ル）、ハンマー型（ハンマーミル、インパクトクラッシ
ャー、インペラーブレーカー、レイモンド垂直ミル、チ
タンミル、ノボロータ、ミクロンミル、ディスインテグ
レーター、ディスメンブレーター）、流体エネルギー型
（ジェットミル、ジェットパルペライザ、ミクロナイザ
ー、リダクショナイザ噴射式粉砕機、エヤーミル）、回
転円筒型（ボール、チューブ、コンパートメント、ロッ
ド、コニカル、トリコン、ヒルデブランドミル）。せん
断粉砕方式の回転型（カッティングミル、せん断ロール
ミル、ユーヒーミル）。摩擦粉砕方式の回転型（ひき
臼、パンミル、アトリションミル、エージランナー）、
旋動型（スクリュークラッシャー、塔式摩砕機、サイド
グライダー）、遠心力型（遠心ローラーミル、遠心ボー
ルミル）、回転円筒型（リングローラーミル、高速ボー
ルミル、低速ボールミル、ハイスイングボールミル、振
動ボールミル）、湿式コロイドミル型（プレミヤミル、
シャロッテミル）および超音波破砕方式等を用いるが、
破砕可能なものであればこれらに限定されない。

【００２０】ヒアルロン酸ゲルの破砕平均粒径は１０ｍ
ｍ以下であり、好ましくは１０〜５０００μｍである。

【００２１】ヒアルロン酸ゲルを破砕することで得られ
た粒状ヒアルロン酸ゲルを、生理的食塩水に５０ｍＭ濃
度でリン酸緩衝成分を加えて調製したｐＨ７のリン酸緩
衝生理的食塩水で中和した後、注射用水で洗浄する。得
られた粒状ヒアルロン酸ゲルを任意の溶液にスラリー濃
度０．１〜５重量％で懸濁することによりヒアルロン酸
ゲルスラリーが得られる。

【００２２】次に、本発明に用いられる低濃度ヒアルロ
ン酸酸性水溶液を凍結して得られる粒状ヒアルロン酸ゲ
ルを用いたスラリーの製造方法について説明する。ヒア
ルロン酸の水溶液の調製は、破砕により粒状化する方法
の時と同様である。

【００２３】ヒアルロン酸濃度は０．００５〜０．５重
量％であり、０．０１〜０．２重量％が好ましい。０．
００５重量％以下ではゲルが成形されず、０．５重量％
以上では粒状のヒアルロン酸ゲルが得られず、容器形状
に依存した一塊のヒアルロン酸ゲルが得られるためであ
る。

【００２４】次にヒアルロン酸の水溶液のｐＨを０．５
〜２．０に調製する。ｐＨ２．０以下に調整できる酸で
あれば、いずれの酸も使用することができる。酸の使用
量を低減するために、好ましくは強酸、例えば、硝酸、
塩酸、硫酸等を使用することが好ましい。

【００２５】この低濃度ヒアルロン酸酸性水溶液の凍結
は、任意の容器に注入した後、−３０℃〜−１０℃の温
度で行う。−３０℃より低い凍結温度ではゲル化の進行
が遅く、長時間が必要になってしまうため好ましくな
い。また、−５℃より高い温度では溶液が凍結しない場
合があり好ましくない。

【００２６】また、凍結は底面から冷凍する方法、空冷
方式の凍結いずれの方法によってもよい。２日以上凍結
した後、解凍することにより粒状ヒアルロン酸ゲルが得
られる。

【００２７】低濃度ヒアルロン酸酸性溶液を凍結するこ
とで得られた粒状ヒアルロン酸ゲルを含む当該酸性水溶
液をメンブレンフィルターで粒状ヒアルロン酸ゲルを回
収した後、生理的食塩水に５０ｍＭ濃度でリン酸緩衝成
分を加えて調製したｐＨ７のリン酸緩衝生理的食塩水で
中和した後、注射用水で洗浄する。得られた粒状ヒアル
ロン酸ゲルを任意の溶液にスラリー濃度０．１〜５重量
％で懸濁することによりヒアルロン酸ゲルスラリーが得
られる。なお、注射用水で洗浄した後、凍結乾燥したも
のを再び任意の溶液に懸濁させることでもスラリーの製
造は可能である。

【００２８】本発明で得られたヒアルロン酸ゲルスラリ
ーは、一般の生体内分解性医用材料及びヒアルロン酸が
用いられる分野であれば特に制限なく使用することがで
きる。例えば、癒着防止材、薬理活性物質の担体、創傷
被覆材、人工皮膚、組織置換型生体組織修復材、関節注
入剤、皮膚注入剤、外科手術用縫合糸、止血剤、人工臓
器、人工細胞外マトリックス又は人工基底膜、診断・治
療に用いる医療器具・医療用具等の生物医学的製品又は
医薬組成物、およびワンポイント化粧料、各種化粧用ク
リーム、乳液、化粧水、美容液、パック剤、アンダーメ
イクアップ、ファンデーション、ゼリー剤、軟膏等の化
粧料への使用が挙げられる。

【００２９】ヒアルロン酸ゲルスラリーは、単一形態で
の使用は当然ながら、異なるヒアルロン酸ゲル形態との
混合又は併用、更にゲル化されていないヒアルロン酸と
の混合又は併用による組合せ処方により効果の増強が期
待できる。例えば、術後癒着防止材としてヒアルロン酸
ゲルからなるスラリーをヒアルロン酸ゲルシート状成形
物、ヒアルロン酸溶液の組み合わせを腹部に併用した場
合、局所効果と腹腔内全体効果が期待できる。

【００３０】次に、本発明の医用材料のうち癒着防止材
について説明する。本発明で得られた粒状ヒアルロン酸
ゲルスラリーの癒着防止材は、外科手術に用いられ、外
科手術部位に直接投与するのが好ましい。ヒアルロン酸
ゲルスラリーの癒着防止材は、癒着が生じるいかなる動
物にも適用でき、哺乳動物、特に人間に於いて好適に手
術後の癒着を防止することができる。

【００３１】生体内の投与場所は腹腔、胸腔内の各種臓
器、腱鞘、頭蓋、神経、及び眼球、等に係わる、腹部手
術、婦人科手術、胸部手術、腱や靭帯に係わる整形外科
手術、硬膜に係わる神経外科手術、等どこでも有用であ
る。

【００３２】本発明で得られた粒状ヒアルロン酸ゲルス
ラリーの癒着防止材の投与時期は、術後の癒着を防止で
きるどの時期でも良く、手術中又は手術終了時に投与で
きるが、特に手術終了の直前に投与するのが好ましい。

【００３３】

【実施例】以下、実施例により本発明を更に詳しく説明
する。なお、本発明はこれにより限定されるものではな
い。

【００３４】実施例１ 分子量が２×１０⁶ ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
を注射用水に溶解し、１重量％のヒアルロン酸水溶液を
調整した。この水溶液のｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ１．５
に調整し、ヒアルロン酸酸性水溶液を得た。このヒアル
ロン酸酸性水溶液８０ｍｌを、１００ｍｌサンプル瓶に
入れ、−２０℃に設定した冷凍庫に入れた。１２０時間
の凍結でヒアルロン酸ゲルが得られた。次にこれを注射
用水１０ｍｌを加え１０分間放置後デカンテーションす
る洗浄を３回繰り返した後、生理的食塩水に５０ｍＭ濃
度でリン酸緩衝成分を加えて調整したｐＨ７のリン酸緩
衝生理的食塩水１００ｍｌを加えデカンテーションする
中和を２回繰り返した後、注射用水で十分に洗浄しヒア
ルロン酸ゲルを得た。更にヒアルロン酸ゲルを下記表１
の実験に従い任意の溶液中にスラリー濃度を調整するよ
うに添加し、マイクロホモジナイザー（NISSEI EXCEL A
UTO HOMOGENIZER)を用い破砕処理をすると平均粒径が３
００〜１，０００μｍの粒状ヒアルロン酸ゲルを含むス
ラリーを得た。なお、これら一連の操作は無菌・無埃環
境下で行い、使用する薬液等も予め滅菌処理を行ったも
のを用いた。

【００３５】実施例２ 分子量が２×１０⁶ ダルトンのヒアルロン酸ナトリウム
を注射用水に溶解し、０．０１重量％のヒアルロン酸水
溶液を調整した。この水溶液のｐＨを、１Ｎ塩酸でｐＨ
１．５に調整し、低濃度ヒアルロン酸酸性水溶液を得
た。この低濃度ヒアルロン酸酸性水溶液８リットルを、
１０リットルの容器に入れ、−２０℃に設定した冷凍庫
に入れた。１２０時間の凍結で平均粒径１００〜５００
μｍの粒状のヒアルロン酸ゲルが得られた。粒状ヒアル
ロン酸ゲルを含む当該酸性水溶液をメンブレンフィルタ
ーで粒状ヒアルロン酸ゲルを回収した後、注射用水１０
ｍｌを加え１０分間放置後デカンテーションする洗浄を
３回繰り返した後、生理的食塩水に５０ｍＭ濃度でリン
酸緩衝成分を加えて調整したｐＨ７のリン酸緩衝生理的
食塩水１００ｍｌを加えデカンテーションする中和を２
回繰り返し、注射用水で十分に洗浄した。更に、ヒアル
ロン酸ゲルを下記実験に従い任意の溶液中にスラリー濃
度を調整するように添加しするとヒアルロン酸ゲルスラ
リーを得た。なお、これら一連の操作は無菌・無埃環境
下で行い、使用する薬液等も予め滅菌処理を行ったもの
を用いた。

【００３６】

【表１】

【００３７】実施例３ ヒアルロン酸ゲルの分岐度測定 実施例１及び２で得られた粒状ヒアルロン酸ゲルを以下
の試験に供した。

【００３８】ヒアルロン酸ゲルをｐＨ１．５の塩酸水溶
液１５ｍｌに浸漬し、６０℃で６時間加水分解し、ゲル
を完全に可溶化させた。これをＧＰＣ溶媒で２倍に希釈
して濃度を０．０５重量％に調整し、０．２μｍのメン
ブレンフィルターでろ過した後、０．１ｍｌ注入してＧ
ＰＣ−ＭＡＬＬＳで測定した結果、分岐度はいずれも
０．５以上であった。

【００３９】実施例４ ヒアルロン酸ゲルスラリーの溶解性試験 表１の各実験で得られたヒアルロン酸ゲルスラリーを以
下の試験に供した。

【００４０】生理食塩水に５０ｍＭ濃度でリン酸緩衝成
分を加え、ｐＨ７のリン酸緩衝生理食塩水を調製した。
実験Ｎｏ．１で得られた生理食塩水に懸濁した１．０重
量％、平均粒径１，０００μｍのヒアルロン酸ゲルスラ
リー、実験Ｎｏ．２で得られた生理食塩水に懸濁した
１．０重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリー、実験Ｎｏ．４で得られたＰＢＳに懸濁した
１．０重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリー、実験Ｎｏ．６で得られた０．５重量％ヒアル
ロン酸溶液に懸濁した１．０重量％、平均粒径３００μ
ｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．８で得られ
た生理食塩水に懸濁した１．０重量％、平均粒径５００
μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．９で得ら
れた生理食塩水に懸濁した１．０重量％、平均粒径１０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．１１で
得られたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均粒径１０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．１３で
得られた０．５重量％ヒアルロン酸溶液に懸濁した１．
０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラ
リー、それぞれ１ｍｌを５０ｍｌのリン酸緩生理食塩水
に浸漬し緩やかに攪拌した。３７℃でリン酸緩衝生理食
塩水中に溶出するヒアルロン酸の割合を、リン酸緩衝生
理食塩水中ヒアルロン酸濃度から求めた。その結果を表
２に示す。

【００４１】ヒアルロン酸濃度の測定 リン酸緩衝生理食塩水中のヒアルロン酸濃度は、ＧＰＣ
を用いて、示差屈折率検出器のピーク面積から求めた。

【００４２】

【表２】

【００４３】表２より、ヒアルロン酸ゲルスラリーは有
効な貯留性を示すことが確認された。

【００４４】実施例５ ヒアルロン酸ゲルスラリー癒着防止材のマウス子宮モデ
ルによる癒着防止効果試験 ヒアルロン酸水溶液を比較として、実験Ｎｏ．２〜５及
び実験Ｎｏ．９〜１２で得られたヒアルロン酸ゲルスラ
リーを以下の試験に供した。

【００４５】７週令雌ＩＣＲマウス（体重２５〜３０
ｇ）を腹腔内ペントバルビタール注射で麻酔後正中切開
にて開腹し、子宮角に約１０ｍｍの長さでヨードチンキ
擦過塗布により損傷を加えた。各群１０匹のマウスにコ
ントロールとして無処置及び、実験Ｎｏ．２で得られた
生理食塩水に懸濁した１．０重量％、平均粒径３００μ
ｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．３で得られ
た生理食塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径３００
μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．４で得ら
れたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均粒径３００μ
ｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．５で得られ
たＰＢＳに懸濁した３．０重量％、平均粒径３００μｍ
のヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．９で得られた
生理食塩水に懸濁した１．０重量％、平均粒径１００μ
ｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．１０で得ら
れた生理食塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径１０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．１１で
得られたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均粒径１０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、実験Ｎｏ．１２で
得られたＰＢＳに懸濁した３．０重量％、平均粒径１０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリー、また比較として
１．０重量％ヒアルロン酸水溶液を用いた。

【００４６】ヒアルロン酸水溶液及びヒアルロン酸ゲル
スラリー１ｍｌを損傷部位に添加し、５−０デキソンに
て閉腹した。

【００４７】術後１０日目に、無処置、ヒアルロン酸ゲ
ルスラリー、ヒアルロン酸水溶液を投与したマウス各１
０匹を頚椎脱臼致死後、腹部を再開腹し、癒着形成の有
無を判定した。癒着形成は、膜状のごく軽度の癒着は癒
着と判定せず、繊維状で厚く、ピンセットで引ぱっても
容易に引き剥がれない強い癒着を生じた場合を癒着と判
定した。その結果を表３に示す。

【００４８】

【表３】

【００４９】表３より、無処置で癒着の形成割合が１０
匹中９匹の時、１．０重量％ヒアルロン酸水溶液が１０
匹中６匹、実験Ｎｏ．２で得られた生理食塩水に懸濁し
た１．０重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲ
ルスラリーが１０匹中０匹、実験Ｎｏ．３で得られた生
理食塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径３００μｍ
のヒアルロン酸ゲルスラリーが１０匹中０匹、実験Ｎ
ｏ．４で得られたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均
粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが１０匹中
１匹、実験Ｎｏ．５で得られたＰＢＳに懸濁した３．０
重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリ
ーが１０匹中０匹、実験Ｎｏ．９で得られた生理食塩水
に懸濁した１．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアル
ロン酸ゲルスラリーが１０匹中１匹、実験Ｎｏ．１０で
得られた生理食塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径
１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが１０匹中１
匹、実験Ｎｏ．１１で得られたＰＢＳに懸濁した１．０
重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリ
ーが１０匹中１匹、実験Ｎｏ．１２で得られたＰＢＳに
懸濁した３．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロ
ン酸ゲルスラリーが１０匹中１匹と、ヒアルロン酸ゲル
スラリーが優れた癒着防止作用があることが示唆され
た。

【００５０】実施例６ ヒアルロン酸ゲルスラリーの癒着防止剤のラット盲腸モ
デルによる癒着防止効果試験 実験Ｎｏ．２で得られた生理食塩水に懸濁した１．０重
量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリ
ー、実験Ｎｏ．３で得られた生理食塩水に懸濁した３．
０重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラ
リー、実験Ｎｏ．４で得られたＰＢＳに懸濁した１．０
重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリ
ー、実験Ｎｏ．５で得られたＰＢＳに懸濁した３．０重
量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリ
ー、実験Ｎｏ．９で得られた生理食塩水に懸濁した１．
０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラ
リー、実験Ｎｏ．１０で得られた生理食塩水に懸濁した
３．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリー、実験Ｎｏ．１１で得られたＰＢＳに懸濁した
１．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリー、実験Ｎｏ．１２で得られたＰＢＳに懸濁した
３．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリー、また比較として１．０重量％ヒアルロン酸水
溶液を試験に供した。

【００５１】１０週令雄Wistarラット（体重約２５０
ｇ）を腹腔内にケタミン（６０ｍｇ／体重１ｋｇ）とキ
シラジン（１０ｍｇ／体重１ｋｇ）注射で麻酔後正中切
開にて開腹し、盲腸に約１０×１０ｍｍの領域をゲージ
で擦り（約２０回）点状の出血が生じるまでの擦過傷を
つくった。各群５匹のラットに、ヒアルロン酸水溶液及
びヒアルロン酸ゲルスラリー２ｍｌを損傷部位に添加
し、３−０デキソンにて閉腹した。

【００５２】術後１４日目に、無処置、ヒアルロン酸ゲ
ルのスラリー、ヒアルロン酸水溶液を投与したラットを
各５匹屠殺後、腹部を再開腹し、癒着形成の有無を判定
した。癒着形成は、膜状のごく軽度の癒着は癒着と判定
せず、繊維状で厚く、ピンセットで引ぱっても容易に引
き剥がれない強い癒着を生じた場合を癒着と判定した。
その結果を表４に示す。

【００５３】

【表４】

【００５４】表４より、無処置で癒着の形成割合が５匹
中５匹の時、１．０重量％ヒアルロン酸水溶液が５匹中
３匹、実験Ｎｏ．２で得られた生理食塩水に懸濁した
１．０重量％、平均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリーが５匹中１匹、実験Ｎｏ．３で得られた生理食
塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径３００μｍのヒ
アルロン酸ゲルスラリーが５匹中０匹、実験Ｎｏ．４で
得られたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均粒径３０
０μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが５匹中０匹、実験
Ｎｏ．５で得られたＰＢＳに懸濁した３．０重量％、平
均粒径３００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが５匹中
１匹、実験Ｎｏ．９で得られた生理食塩水に懸濁した
１．０重量％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲル
スラリーが５匹中０匹、実験Ｎｏ．１０で得られた生理
食塩水に懸濁した３．０重量％、平均粒径１００μｍの
ヒアルロン酸ゲルスラリーが５匹中０匹、実験Ｎｏ．１
１で得られたＰＢＳに懸濁した１．０重量％、平均粒径
１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが５匹中０匹、
実験Ｎｏ．１２で得られたＰＢＳに懸濁した３．０重量
％、平均粒径１００μｍのヒアルロン酸ゲルスラリーが
５匹中１匹と、ヒアルロン酸ゲルスラリーが優れた癒着
防止作用があることが示唆された。

【００５５】

【発明の効果】以上、本発明によれば、ヒアルロン酸単
独で形成された難溶性のヒアルロン酸ゲルをスラリーと
することにより、特に生体適合性の高い医用材料が得ら
れる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 柳 慎一 東京都町田市旭町３丁目５番１号 電気化 学工業株式会社中央研究所内 Ｆターム(参考） 4C090 AA01 AA07 AA09 BA67 BD19 BD22 BD24 DA10 DA22 DA24 DA26

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ヒアルロン酸単独で形成されたゲルを含
   有することを特徴とするヒアルロン酸ゲルスラリー。
2. 【請求項２】 ヒアルロン酸単独で形成されたゲルの平
   均粒径が１０ｍｍ以下である請求項１記載のヒアルロン
   酸ゲルスラリー。
3. 【請求項３】 ヒアルロン酸単独で形成されたゲルのス
   ラリー濃度が０．１〜５重量％である請求項１又は２記
   載のヒアルロン酸ゲルスラリー。
4. 【請求項４】 請求項１〜３のいずれか１項に記載のヒ
   アルロン酸ゲルスラリーを含有することを特徴とする医
   用材料。
5. 【請求項５】 請求項１〜３のいずれか１項に記載のヒ
   アルロン酸ゲルスラリーを含有することを特徴とする化
   粧料。