JP2000026309A - 可溶性トロンボモジュリン含有組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】長期間に渡り安定性に優れ、容器への吸着が防
止された血液凝固疾患に係わる疾病の予防および治療薬
として有用な可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥製
剤、その製法、可溶性トロンボモジュリンの安定化剤、
安定化方法、吸着防止剤、および吸着防止方法を提供す
る。 【解決手段】１種あるいは２種以上の分子種の可溶性ト
ロンボモジュリンと、マルトース、ラクトース、蔗糖、
アルギニンおよびその塩、および非イオン性界面活性剤
から選ばれる１種あるいは２種以上を含有する可溶性ト
ロンボモジュリン含有組成物、およびその製法、並びに
可溶性トロンボモジュリンの安定化剤、安定化方法、吸
着防止剤および吸着防止方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、１種または２種以
上の可溶性トロンボモジュリンと、マルトース、ラクト
ース、蔗糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種
あるいは２種以上を必須成分として含有することを特徴
とする組成物およびその組成物の製法に関する。また、
本発明は、１種または２種以上の可溶性トロンボモジュ
リンと、非イオン性界面活性剤を必須成分として含有す
ることを特徴とする組成物およびその組成物の製法に関
する。また、本発明は、１種または２種以上の可溶性ト
ロンボモジュリンと、マルトース、ラクトース、蔗糖、
アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるいは２種
以上と、非イオン性界面活性剤を必須成分として含有す
ることを特徴とする組成物およびその組成物の製法に関
する。また、本発明は、マルトース、ラクトース、蔗
糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるいは
２種以上を含有することを特徴とする可溶性トロンボモ
ジュリンの安定化剤に関する。また、本発明は、マルト
ース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩から
選ばれる１種あるいは２種以上を添加することを特徴と
する可溶性トロンボモジュリンの安定化方法に関する。
また、本発明は、非イオン性界面活性剤を含有すること
を特徴とする可溶性トロンボモジュリンの吸着防止剤に
関する。また、本発明は、非イオン性界面活性剤を添加
することを特徴とする可溶性トロンボモジュリンの吸着
防止方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】トロンボモジュリンはトロンビンを向凝
固酵素から抗凝固酵素へと変換せしめるユニークな性質
を持つ血管内皮表面に存在する蛋白質として、１９８１
年エスモン（Ｅｓｍｏｎ）ら（プロシーディングズ・オ
ブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ
・オブ・ザ・ユーエスエー（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏ
ｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓｏｆ ｔｈｅ ＵＳＡ）７８、２２
４９−２２５４、１９８１）により報告された。続く論
文において、ウサギ肺組織よりの単離精製に成功し、こ
れを報告した（ザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル
・ケミストリー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉ
ｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）２５７
（２），８５９−８６４，１９８２）。さらに、ヒトト
ロンボモジュリンの全ＤＮＡ配列およびアミノ酸配列が
報告され（エンボ・ジャーナル（ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ）６，１８９１−１８９７，１９８７；バイオケミ
ストリー（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）２６（１４），
４３５０−４３５７，１９８７）、各ドメインの役割が
明らかにされつつある。トロンボモジュリンはトロンビ
ンと結合し、トロンビンの持つ血液凝固作用を失わせし
め、トロンビン−トロンボモジュリン複合体はプロテイ
ンＣを活性化することにより抗凝固作用を示すとされて
いる。すなわち、トロンボモジュリンは血液凝固阻害作
用と線溶促進作用の両方の作用を発揮する可能性があ
り、臨床応用が期待されている。

【０００３】従来、血液凝固能異常に係わる疾患の治療
剤としては、抗血液凝固作用をもったアンチトロンビン
ＩＩＩやヘパリンが、一方、血栓溶解作用をもったウロ
キナーゼ、ストレプトキナーゼ、組織プラスミノーゲン
アクチベーター等が使用されている。しかしながら、こ
れらの物質は、出血傾向等の副作用を有し、作用が抗血
液凝固あるいは血栓溶解のいずれかに偏っている。従っ
て、この両方の作用を発揮する可能性があるトロンボモ
ジュリンあるいは基本的にトロンビンと親和性を有しプ
ロテインＣの活性化を促進するというトロンボモジュリ
ン活性を有したトロンボモジュリン様物質の臨床応用に
期待が高まっている。

【０００４】ヒトトロンボモジュリンは、溶解性が低
く、特に医薬品として利用する場合、精製や製剤化等で
問題を生じていた。すなわち、トロンボモジュリンは膜
結合性であり、アミノ末端領域、ＥＧＦ様構造領域、Ｏ
−グリコシル化部位領域、細胞膜貫通領域および細胞質
内領域の５つからなる完全長のアミノ酸配列を持つもの
は精製過程あるいは製剤化等に際して溶解補助剤を添加
する必要がある。このため溶解性の高いトロンボモジュ
リン様物質（以下可溶性トロンボモジュリンと呼ぶ）が
望まれていた。抗原性等の安全性のことを考慮すると、
天然型であるヒト尿由来可溶性トロンボモジュリンなど
がより望まれている。このような可溶性トロンボモジュ
リンの例のうち、遺伝子工学的手法によるものとして、
細胞膜貫通領域および細胞質内領域を除去した可溶性ト
ロンボモジュリン（特開平１−６２１９号公報、特開平
２−２５５６９９号公報、特開平３−１３３３８０号公
報、特開平３−２５９０８４号公報、特開平４−２１０
７００号公報、特表平３−５０３７５７号公報、特表平
４−５０５５５４号公報、ＥＰ４７４２７３号公報、Ｗ
Ｏ９１／０４２７６号公報、ＷＯ９１／０５８０３号公
報、ＷＯ９１／１５５１４号公報、ＷＯ９２／００３２
５号公報、ＷＯ９２／０３１４９号公報、ＷＯ９３／１
５７５５号公報、土肥ら，日本薬学会，第１１３年会，
講演要旨集３，演題番号３０ＥＭ１４−１，１９９３
年）等が挙げられる。あるいは天然型としてヒト尿由来
の可溶性トロンボモジュリン（特開昭６３−３０４２３
号公報、特開昭６３−１４６８９８号公報、特開平３−
８６９００号公報、特開平３−２１８３９９号公報、イ
シイ（Ｉｓｈｉｉ）ら，ザ・ジャーナル・オブ・クリニ
カル・インベスティゲーション（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａ
ｌ ｏｆ ＣｌｉｎｉｃａｌＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏ
ｎ）７６，２１７８−２１８１，１９８５、平本ら，日
本薬学会，第１０８年会，講演要旨集，演題番号６Ｆ０
５ １１−１，１９８８年、矢谷ら，血液と脈管，２
０，１９７−２００，１９８９、ヤマモト（Ｙａｍａｍ
ｏｔｏ）ら，ザ・ジャーナル・オブ・バイオケミストリ
ー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ）１１３，４３３−４４０，１９９３）等の公
知のものがある。

【０００５】具体的には、遺伝子工学的手法によるもの
として、特開平１−６２１９号公報には少なくともアミ
ノ末端から３４５−４６２番目のアミノ酸配列を含む可
溶性トロンボモジュリンが、特開平２−２５５６９９号
公報には１１５のアミノ酸残基からなる可溶性トロンボ
モジュリンが、特開平３−１３３３８０号公報には少な
くともアミノ末端から１−４９７番目のアミノ酸残基を
含む可溶性トロンボモジュリンが、特開平３−２５９０
８４号公報には４６８のアミノ酸残基からなる可溶性ト
ロンボモジュリンが、特開平４−２１０７００号公報に
は硫酸化グリコサミノグリカンで修飾されない可溶性ト
ロンボモジュリンが、特表平３−５０３７５７号公報に
はヒト組織プラスミノーゲンアクチベーターのアミノ酸
配列の一部を含んでいてもよい可溶性トロンボモジュリ
ンが、特表平４−５０５５５４号公報にはヒト組織プラ
スミノーゲンアクチベーター等のアミノ酸配列の一部を
含んでいてもよい可溶性トロンボモジュリンが、ＥＰ４
７４２７３号公報には１９残基からなるトロンビン結合
部位とプロテインＣ活性化部位とを含んでなる可溶性ト
ロンボモジュリンが、ＷＯ９１／０４２７６号公報には
コンドロイチン及び／又はコンドロイチン硫酸を含む糖
鎖を有する可溶性トロンボモジュリンが、ＷＯ９１／０
５８０３号公報には硫酸化グリコサミノグリカンで修飾
された可溶性トロンボモジュリンが、ＷＯ９１／１５５
１４号公報にはメチオニンを他のアミノ酸に置換するこ
とによって酸化を防止した可溶性トロンボモジュリン
が、ＷＯ９２／００３２５号公報には組換ヒト尿由来可
溶性トロンボモジュリンおよびその変異型物質が、ＷＯ
９２／０３１４９号公報にはＯ−グリコシル化部位領域
の糖鎖を修飾あるいはＯ−グリコシル化部位領域を欠失
させた可溶性トロンボモジュリンが、ＷＯ９３／１５７
５５号公報にはアミノ酸配列を修飾することによって蛋
白分解酵素による分解を防止した可溶性トロンボモジュ
リンが、ＷＯ９３／２５６７５号公報にはアミノ酸配列
を修飾することによってコファクター活性を修飾した可
溶性トロンボモジュリンが、各々開示されている。さら
に、土肥らはウシトロンボモジュリン由来の酸性アミノ
酸配列を含む配列を付加した可溶性トロンボモジュリン
を報告している（日本薬学会，第１１３年会，講演要旨
集３，演題番号３０ＥＭ１４−１，１２８頁，１９９３
年）。

【０００６】また、ヒト尿由来の該物質として、特開昭
６３−３０４２３号公報には非還元状態での分子量が２
００，０００、４８，０００および４０，０００からな
る可溶性トロンボモジュリンの混合物が、特開昭６３−
１４６８９８号公報には非還元状態での分子量が３９，
０００±１０，０００および３１，０００±１０，００
０の可溶性トロンボモジュリンが、特開平３−８６９０
０号公報には非還元状態での分子量が５５，０００〜５
８，０００および６０，０００〜６５，０００の可溶性
トロンボモジュリンが、特開平３−２１８３９９号公報
には非還元状態での分子量が７２，０００±３，０００
および７９，０００±３，０００の可溶性トロンボモジ
ュリンが、各々開示されている。さらに、イシイ（Ｉｓ
ｈｉｉ）らは血漿中および尿中の可溶性トロンボモジュ
リンを（ザ・ジャーナル・オブ・クリニカル・インベス
ティゲーション（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌ
ｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ）７６，２
１７８−２１８１，１９８５）、平本らは血中あるいは
尿中の数種の可溶性トロンボモジュリンを（日本薬学
会，第１０８年会，講演要旨集，演題番号６Ｆ０５ １
１−１，１９８８年）、矢谷らは尿中の還元状態での分
子量が６３，０００の可溶性トロンボモジュリンを（血
液と脈管，２０，１９７−２００，１９８９）、ヤマモ
ト（Ｙａｍａｍｏｔｏ）らは４６８のアミノ酸残基から
なる可溶性トロンボモジュリンを（ザ・ジャーナル・オ
ブ・バイオケミストリー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）１１３，４３３−４４
０，１９９３）、各々報告している。

【０００７】しかしながら、可溶性トロンボモジュリン
は化学的に十分安定とはいえず、例えば凍結乾燥下の状
態でも、数ヶ月から数年に渡る長期間室温に放置する
と、活性の低下、凝集物の出現等が起こり問題となって
いる。また、凍結乾燥工程の条件によっては、微量では
あるが変性することがあり問題となっている。可溶性ト
ロンボモジュリンが変性して凝集体を生じ、凝集体が混
在したままヒト血中に投与された場合、その凝集体は変
性した蛋白質であるため、過敏症等の免疫反応を惹起す
る、あるいは塞栓症を誘発する危険性がある。従って、
医薬品として使用するにあたっては、医療現場で強く求
められている品質を長期間に渡り保証できる製剤を調製
することは困難な現状である。

【０００８】特定の糖類が特定の蛋白質を安定化するこ
とがこれまでにいくつか報告されている。しかしながら
特定の蛋白質を不安定化する、あるいは安定化しないと
いった報告もいくつかある。例えば、蔗糖はチューブリ
ンを不安定化する（バイオキミカ・エト・バイオフィジ
カ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈ
ｙｓｉｃａ Ａｃｔａ）５３２，１５５−１６０，１９
７８）、また、グルコース等の糖類はガン壊死因子の活
性を安定化するが、ラクトース、マルトース、蔗糖等の
糖類は全く安定化効果を示さない（特開昭５９−５９６
２５号公報）ことなどが報告されている。

【０００９】トロンボモジュリンあるいはトロンボモジ
ュリン様物質の製剤化について、これまでに報告がほと
んどない。限られた情報であるが、例えば、特開平１−
６２１９号公報、特開平２−２５５６９９号公報および
ＷＯ９１／０４２７６号公報中の発明の詳細な説明にお
いて、注射剤の添加剤として、蔗糖、グリセリン、メチ
ルセルロース、カルボキシメチルセルロースの記載があ
る。これらの物質は増粘剤として添加されており、安定
化効果についての記載はおろか具体的な効果の実証がな
い。また、特開平１−６２１９号公報、特開平２−２５
５６９９号公報、特開平３−２１８３９９号公報および
ＷＯ９２／００３２５号公報中の発明の詳細な説明にお
いて、処方例にアルブミン、精製ゼラチン、あるいはマ
ンニトールを添加した例が記述されているが、その製剤
の安定性等、特徴、すなわち添加したことによる効果に
ついての開示がまったくない。

【００１０】そこで、ヒト尿由来可溶性トロンボモジュ
リンについて、アルブミン、精製ゼラチン、グリシン、
グルコースおよびマンニトールとの組成物を調製し、さ
らなる試験を行ったところ、いずれも長期に渡る安定性
が不十分であることが判った。このように、可溶性トロ
ンボモジュリンを製剤化するにあたり、長期のしかも室
温での保存に耐え得る技術の開示は未だなされていな
い。また、可溶性トロンボモジュリンは比活性が非常に
高いため、臨床使用時は１回の投与蛋白量が微量であ
り、更に輸液で非常に低濃度に希釈して持続投与する場
合が多い。可溶性トロンボモジュリンについて輸液で低
濃度に希釈したときにはガラス容器、プラスチック製容
器あるいは輸液セットへの吸着が起こり、特にプラスチ
ック製容器および輸液セットへの吸着が著しいことが判
った。従って、実際に投与をするときに、有効投与量が
減少してしまうおそれが生じることが判った。吸着を防
止する手段として、塩基性アミノ酸によるセクレチンの
吸着防止（特開昭５７−１６９４２５号公報）、セルロ
ース誘導体や非イオン性界面活性剤、メチルシクロデキ
ストリンによるセクレチン、インシュリン、主に低分子
ペプタイドの吸着防止（特開昭５８−２０６５１３号公
報、特開昭５９−７６０２４号公報、特開昭６０−１０
０５２４号公報）の例が報告されているが、可溶性トロ
ンボモジュリンにおいて吸着を防止する技術についての
開示は未だされていない。

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、長期
保存時でも安定性に優れた可溶性トロンボモジュリン含
有組成物を提供することにある。更に低濃度に希釈した
ときも容器への吸着が起こらない可溶性トロンボモジュ
リン含有組成物を提供することにある。更に詳しくは、
長期の室温保存時でも安全で安定性に優れた医薬品とし
て使用可能な可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥組
成物を提供することにある。更に、低濃度水溶液におい
ても容器への吸着による配合量低下を起こさない医薬品
として使用可能な可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾
燥組成物を提供することにある。また、本発明の目的
は、可溶性トロンボモジュリンの安定化剤および安定化
方法を提供することにある。また、本発明の目的は、可
溶性トロンボモジュリンの吸着防止剤および吸着防止方
法を提供することにある。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明者らは可溶性トロ
ンボモジュリンの安定性に関する問題点を解消すべく、
特に凍結乾燥した組成物について鋭意研究を行い、マル
トース（α形、β形、またはα形とβ形の任意比率混合
物であっても良く、以下、特に記載のない場合は、マル
トースというときにはこれら全てを包含する）、ラクト
ース（α形、β形、またはα形とβ形の任意比率混合物
であっても良く、以下、特に記載のない場合は、ラクト
ースというときにはこれら全てを包含する）、蔗糖、あ
るいはアルギニン（Ｄ体、Ｌ体またはラセミ体のいずれ
であっても良く、以下、特に記載のない場合は、アルギ
ニンというときはこれら全てを包含する）およびその塩
に優れた安定化効果、特に長期間に渡る安定化効果、を
見いだした。更に、非イオン性界面活性剤に可溶性トロ
ンボモジュリンを低濃度に希釈した場合の容器への吸着
防止効果を見いだして本発明を完成した。

【００１３】従って、本発明は、可溶性トロンボモジュ
リンと、マルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニンお
よびその塩から選ばれる１種あるいは２種以上を必須成
分とする可溶性トロンボモジュリン含有組成物、並びに
同組成物において非イオン性界面活性剤が添加された可
溶性トロンボモジュリン含有組成物、および、可溶性ト
ロンボモジュリンと非イオン性界面活性剤を必須成分と
する可溶性トロンボモジュリン含有組成物を提供する。

【００１４】可溶性トロンボモジュリンは、ヒト尿由来
可溶性トロンボモジュリンであることが好ましい。ま
た、可溶性トロンボモジュリンは、組換えヒト可溶性ト
ロンボモジュリンであることも好ましい。従って、本発
明の可溶性トロンボモジュリンは、前述の従来の技術で
引用された公知文献中の可溶性トロンボモジュリンを含
有し、これらの文献中の記載を引用し本発明の可溶性ト
ロンボモジュリンの内容とする。

【００１５】そして、ヒト尿由来可溶性トロンボモジュ
リンが以下の部分構造及び性質を有する物質であること
がさらに好ましい。 イ）分子量 ７２，０００±３，０００ ［非還元状態でのドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−
ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＰＡＧＥ）により
測定］ ロ）等電点 ３．９±０．２ ハ）末端アミノ酸配列 Ｎ末端 ： Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｐ
ｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｌａ
−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ− Ｃ末端 ： −Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ、または−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−
Ａｒｇ ニ）糖含量（重量％） 中性糖 ：５．５±１．０％ ［フェノール硫酸法で測定］ アミノ糖 ：２．２±１．０％ ［Ｅｌｓｏｎ−Ｍｏｒｇａｎ法（Ｂｌｉｘ変法）で測
定］ シアル酸 ：２．８±１．５％ ［Ｗａｒｒｅｎ法で測定］

【００１６】また、ヒト尿由来可溶性トロンボモジュリ
ンが以下の部分構造及び性質を有する物質であることが
さらに好ましい。 イ）分子量 ７９，０００±３，０００ ［非還元状態でのＳＤＳ−ＰＡＧＥにより測定］ ロ）等電点 ３．８±０．２ ハ）末端アミノ酸配列 Ｎ末端 ： Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｐ
ｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｌａ
−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ− Ｃ末端 ： −Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ、または−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−
Ａｒｇ ニ）糖含量（重量％） 中性糖 ：６．２±１．０％ ［フェノール硫酸法で測定］ アミノ糖 ：３．１±１．０％ ［Ｅｌｓｏｎ−Ｍｏｒｇａｎ法（Ｂｌｉｘ変法）で測
定］ シアル酸 ：３．８±１．５％ ［Ｗａｒｒｅｎ法で測定］

【００１７】また、２種あるいは３種以上の分子種の可
溶性トロンボモジュリンと、マルトース、ラクトース、
蔗糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるい
は２種以上を必須成分とする可溶性トロンボモジュリン
含有組成物、並びに同組成物において非イオン性界面活
性剤が添加された可溶性トロンボモジュリン含有組成
物、および、可溶性トロンボモジュリンと非イオン性界
面活性剤を必須成分とする可溶性トロンボモジュリン含
有組成物を提供する。このときの可溶性トロンボモジュ
リンの好ましい態様は前記と同様である。また、前記の
いずれの組成物も凍結乾燥処理されているのが好まし
い。

【００１８】また、可溶性トロンボモジュリンと、マル
トース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩か
ら選ばれる１種あるいは２種以上を必須成分とする可溶
性トロンボモジュリン含有組成物と、非イオン性界面活
性剤を、それぞれ別々に用意し、用時両者を混合する組
成物形態を提供する。このときの可溶性トロンボモジュ
リンの好ましい態様は前記と同様である。

【００１９】また、可溶性トロンボモジュリンと、マル
トース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩、
および非イオン性界面活性剤から選ばれる１種あるいは
２種以上とを溶解混合する工程を含む可溶性トロンボモ
ジュリン含有組成物の製法を提供する。

【００２０】そして、可溶性トロンボモジュリンと、マ
ルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその
塩、および非イオン性界面活性剤から選ばれる１種ある
いは２種以上との溶液状態の組成物を凍結乾燥する工程
を含む上述の可溶性トロンボモジュリン含有組成物の製
法を提供する。

【００２１】また、２種あるいは３種以上の分子種の可
溶性トロンボモジュリンと、マルトース、ラクトース、
蔗糖、アルギニンおよびその塩、および非イオン性界面
活性剤から選ばれる１種あるいは２種以上とを溶解混合
する工程を含む上述の可溶性トロンボモジュリン含有組
成物の製法を提供する。

【００２２】そして、２種あるいは３種以上の分子種の
可溶性トロンボモジュリンと、マルトース、ラクトー
ス、蔗糖、アルギニンおよびその塩、および非イオン性
界面活性剤から選ばれる１種あるいは２種以上との溶液
状態の組成物を凍結乾燥する工程を含む上述の可溶性ト
ロンボモジュリン含有組成物の製法を提供する。

【００２３】そして、可溶性トロンボモジュリンに、マ
ルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩
から選ばれる１種あるいは２種以上を添加する可溶性ト
ロンボモジュリンの安定化方法を提供する。また、マル
トース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩か
ら選ばれる１種あるいは２種以上からなる可溶性トロン
ボモジュリンの安定化剤を提供する。そして非イオン性
界面活性剤を添加する可溶性トロンボモジュリンの吸着
防止方法および非イオン性界面活性剤からなる可溶性ト
ロンボモジュリンの吸着防止剤を提供する。

【００２４】また、２種あるいは３種以上の分子種の可
溶性トロンボモジュリンにマルトース、ラクトース、蔗
糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるいは
２種以上を添加する可溶性トロンボモジュリンの安定化
方法と、２種あるいは３種以上の分子種の可溶性トロン
ボモジュリンに非イオン性界面活性剤を添加する可溶性
トロンボモジュリンの吸着防止方法を提供する。

【００２５】また、本発明は、医薬として有効な量の可
溶性トロンボモジュリンと、マルトース、ラクトース、
蔗糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるい
は２種以上を必須成分とする可溶性トロンボモジュリン
含有医薬組成物、並びに同組成物において医薬添加可能
な非イオン性界面活性剤が添加された可溶性トロンボモ
ジュリン含有医薬組成物、および、医薬として有効な量
の可溶性トロンボモジュリンと、医薬添加可能な非イオ
ン性界面活性剤が添加された可溶性トロンボモジュリン
含有医薬組成物を提供し、長期保存時でも安定性に優
れ、低濃度に希釈したときも容器への吸着が起こらない
血液凝固疾患に係わる疾病の予防治療薬を提供する。こ
のときの可溶性トロンボモジュリンの好ましい態様は前
記と同様である。

【００２６】

【発明の実施の形態】以下に本発明を詳細に説明する。
本発明において用いられる可溶性トロンボモジュリン
は、天然型あるいは遺伝子工学的に生産されたものいず
れでもよい。また、遺伝子工学的手法により得られる改
変型あるいはキメラ型の可溶性トロンボモジュリンであ
ってもよい。例として、従来の技術に記載した可溶性ト
ロンボモジュリンが挙げられる。医薬品とする場合、好
ましくはヒトの可溶性トロンボモジュリンが望まれる。
さらに好ましくは、天然型のヒト尿由来の可溶性トロン
ボモジュリンがよい。また、具体例としては、特開平３
−２１８３９９号公報に記載の非還元状態での分子量が
７２，０００±３，０００（以下、ＵＴＭ１とする。）
または／および７９，０００±３，０００（以下、ＵＴ
Ｍ２とする。）の可溶性トロンボモジュリンが、また、
遺伝子工学的に生産されたものとして、ＷＯ９２／００
３２５号公報に記載の組換ヒト尿由来可溶性トロンボモ
ジュリン、あるいは特開平１−６２１９号公報において
取得されている、アミノ末端のアミノ酸配列がＡｌａ−
Ｐｒｏ−Ａｌａ−であるアミノ酸４９８残基よりなる可
溶性トロンボモジュリンなどがあげられる。医薬品とし
て用いる場合、可溶性トロンボモジュリンは医薬品とし
て適用可能な程度まで精製されていればよい。

【００２７】また、可溶性トロンボモジュリンは、上述
のような可溶性トロンボモジュリンを単独で用いても、
あるいは、２種あるいは３種以上の分子種の可溶性トロ
ンボモジュリン混合物であってもよく、その混合比率は
任意である。例えば、特開平３−２１８３９９号公報に
開示される２種類のヒト尿中の可溶性トロンボモジュリ
ンの混合物であってもよい。また、ＷＯ９１／０４２７
６号公報に示されるような糖鎖構造の異なる可溶性トロ
ンボモジュリンの混合物であってもよい。このような可
溶性トロンボモジュリンは、例えば、天然型については
特開平３−２１８３９９号公報あるいは特開平３−８６
９００号公報等に記載の方法で、遺伝子組み換え型につ
いてはＷＯ９２／００３２５号公報、特開平１−６２１
９号公報あるいはＷＯ９１／０４２７６号公報等に記載
の方法で製造する事ができる。

【００２８】本発明で用いられる安定化剤は、還元性の
ある二糖類、蔗糖またはアミノ酸である。好ましい、本
発明で用いられる安定化のための必須成分としては、マ
ルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩
から選ばれる１種あるいは２種以上が用いられる。アル
ギニンの塩の場合、無機酸、有機酸との塩があるがその
種類としては医薬品として利用可能なものであればよ
い。好ましい例として塩酸塩、クエン酸塩、硫酸塩等が
挙げられ、さらに塩酸塩が好ましい。安定化剤の添加量
としては、特に限定されるものではないが、可溶性トロ
ンボモジュリン１ｍｇ力価あたり０．１ｍｇ〜１０００
ｍｇ程度が例示される。より好ましくは可溶性トロンボ
モジュリン１ｍｇ力価あたり０．５ｍｇ〜５００ｍｇ程
度である。さらに好ましくは可溶性トロンボモジュリン
１ｍｇ力価あたり０．５ｍｇ〜１００ｍｇ程度である。
蔗糖に関しては、凍結乾燥体とした場合、可溶性トロン
ボモジュリンに対する蔗糖の比率が高いと保存中に崩壊
しやすいため、可溶性トロンボモジュリン１ｍｇ力価あ
たり０．５ｍｇ〜５０ｍｇ程度にするのが好ましい。ま
た、蔗糖を用いた場合、崩壊を抑制する目的でデキスト
ラン等の高分子を適宜添加してもよい。

【００２９】なお、マルトース、ラクトース、蔗糖、ア
ルギニンおよびその塩から選ばれる安定化剤は可溶性ト
ロンボモジュリンを含有する溶液（組成物）１ｍＬ当た
り１００ｍｇ以下であることがより好ましい。これらの
安定化剤はその量により安定化効果ばかりでなく賦形効
果、緩衝効果、等張化効果あるいは分散効果等さまざま
な効果を発揮するので、その組成物の使用目的に応じて
添加量が決定される。

【００３０】本発明で用いられる吸着防止剤は、界面活
性剤であり、好ましい成分としては、非イオン性界面活
性剤であり、それは医薬品として利用可能なものが好ま
しいが、特に限定されるものではない。エチレンオキサ
イドプロピレンオキサイド共重合体、ポリ（オキシアル
キレン）モノ−及びトリ−ソルビタンエステル（ソルビ
トールの脂肪酸エステル及び様々のモル数のエチレンオ
キサイドと共重合したその無水物）、ポリオキシエチレ
ン硬化ヒマシ油等が好ましい。エチレンオキサイドプロ
ピレンオキサイド共重合体としては、プルロニックＦ６
８、ポロクサマー１８８等、ポリ（オキシアルキレン）
モノ−及びトリ−ソルビタンエステルとしては、ポリソ
ルベート８０（オレートエステル）、ポリソルベート２
０（ラウレートエステル）、ポリソルベート４０（パル
ミテートエステル）、ポリソルベート６９（ステアレー
トエステル）等、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油とし
ては、ＨＣＯ４０、ＨＣＯ６０等が挙げられる。これら
の非イオン性界面活性剤から選ばれる１種あるいは２種
以上を用いることができる。１種を用いる場合は、エチ
レンオキサイドプロピレンオキサイド共重合体、あるい
はポリ（オキシアルキレン）モノ−及びトリ−ソルビタ
ンエステルが好ましく、プルロニックＦ６８、ポリソル
ベート８０、あるいはポリソルベート２０が好ましく、
さらにプルロニックＦ６８が好ましい。

【００３１】吸着防止剤としての非イオン性界面活性剤
の添加量は特に限定されるものではないが、可溶性トロ
ンボモジュリン含有組成物を水溶液とした場合に、当該
水溶液中において０．００００５wt％以上であることが
望ましい。また、これらの物質が生体内に投与された場
合に、それ自体が薬理作用を呈しない程度の低い量であ
ることが望ましく、かかる意味で可溶性トロンボモジュ
リン水溶液中で１wt％以下の濃度であることが望まし
い。これらの吸着防止成分は効果が濃度に依存し、また
容器の材質や表面積にも影響を受けるため、組成物の臨
床使用時における希釈倍率や希釈に用いる容器の材質や
大きさなどによって添加量を調節することができる。好
ましくは、当該水溶液中において上記濃度範囲すなわち
０．００００５〜１wt％となる量であれば、本発明の目
的を達成する上で適当である。さらに、生体内に投与さ
れる際は、０．０００１〜０．０１wt％となる量が好ま
しい。

【００３２】本発明で用いられる安定化剤および吸着防
止剤の必須成分のマルトース、ラクトース、蔗糖、アル
ギニンおよびその塩、および非イオン性界面活性剤はそ
れぞれ単独で用いてもよいし、これらから選ばれる２種
以上を組み合わせて用いることもできる。組み合わせの
例としては、マルトースおよび非イオン性界面活性剤、
ラクトースおよび非イオン性界面活性剤、蔗糖および非
イオン性界面活性剤、アルギニンおよび非イオン性界面
活性剤、マルトースおよびアルギニン、ラクトースおよ
びアルギニン、蔗糖およびアルギニン、マルトースおよ
びラクトース、マルトースおよび蔗糖、ラクトースおよ
び蔗糖、マルトース・ラクトースおよび蔗糖、マルトー
ス・アルギニンおよび非イオン性界面活性剤、ラクトー
ス・アルギニンおよび非イオン性界面活性剤、あるい
は、蔗糖・アルギニンおよび非イオン性界面活性剤等が
挙げられ、混合比率は任意である。また、上記のうち、
非イオン性界面活性剤は１種あるいは２種以上を組み合
わせて用いることができる。

【００３３】このうち、マルトース、ラクトース、蔗糖
あるいはアルギニンから選ばれる１種と、非イオン性界
面活性剤の組み合わせが好ましく、組み合わせる非イオ
ン性界面活性剤としては、プルロニックＦ６８、ポリソ
ルベート８０、あるいはポリソルベート２０が好まし
く、さらにプルロニックＦ６８が好ましい。すなわち、
マルトースおよびプルロニックＦ６８、ラクトースおよ
びプルロニックＦ６８、蔗糖およびプルロニックＦ６８
あるいはアルギニンおよびプルロニックＦ６８の組み合
わせが好ましく、混合比率は任意である。

【００３４】本発明の可溶性トロンボモジュリン含有組
成物は、可溶性トロンボモジュリンおよびマルトース、
ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩から選ばれ
る１種あるいは２種以上の必須成分に加えて、その使用
目的に応じた保存剤、防腐剤、緩衝剤、増粘剤、界面活
性剤等の任意の添加剤を含有していてもよい。また、本
発明の可溶性トロンボモジュリン含有組成物は、可溶性
トロンボモジュリンおよびマルトース、ラクトース、蔗
糖、アルギニンおよびその塩から選ばれる１種あるいは
２種以上の必須成分、および非イオン性界面活性剤に加
えて、その使用目的に応じた安定化剤、保存剤、防腐
剤、緩衝剤、増粘剤、界面活性剤等の任意の添加剤を含
有していてもよい。また、本発明の可溶性トロンボモジ
ュリン含有組成物は、可溶性トロンボモジュリンおよび
非イオン性界面活性剤に加えて、その使用目的に応じた
安定化剤、保存剤、防腐剤、緩衝剤、増粘剤、界面活性
剤等の任意の添加剤を含有していてもよい。医薬として
用いる凍結乾燥製剤は、その製剤化の目的に応じて、医
薬製造上許容できる、保存剤、安定化剤、結合剤、賦形
剤、崩壊剤、湿潤剤、滑沢剤、着色剤、芳香剤、矯味
剤、懸濁化剤、乳化剤、溶解補助剤、緩衝剤、等張化
剤、界面活性剤、吸着防止剤、無痛化剤等を含有させる
ことは任意である。特に、ｐＨ調節の為の緩衝剤、浸透
圧調節の為の等張化剤の含有は好ましい。本発明はこれ
らの物質の影響を受けるものではないが、塩濃度が高い
と、凍結乾燥を行う際にケーキの形成に害を及ぼすため
好ましくない。

【００３５】本発明の可溶性トロンボモジュリン含有組
成物の製造方法は、前記の方法で得られる可溶性トロン
ボモジュリンを含有する溶液にマルトース、ラクトー
ス、蔗糖、アルギニンおよびその塩、および非イオン性
界面活性剤から選ばれる１種あるいは２種以上を加えて
溶解し、溶液を得ることにより行われる。

【００３６】可溶性トロンボモジュリンの凍結乾燥物に
マルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその
塩、および非イオン性界面活性剤から選ばれる１種ある
いは２種以上を加えて蒸留水や生理食塩水に溶解しても
よい。また、適当な緩衝液に溶解してもよい。すなわ
ち、可溶性トロンボモジュリンとマルトース、ラクトー
ス、蔗糖、アルギニンおよびその塩、および非イオン性
界面活性剤から選ばれる１種あるいは２種以上を溶解混
合し溶液状態の組成物とすればよい。また、いずれの方
法においてもマルトース、ラクトース、蔗糖、アルギニ
ンおよびその塩、および非イオン性界面活性剤から選ば
れる１種あるいは２種以上はその溶液として加えてもよ
い。医薬品として使用する場合にはこれらの添加剤は医
薬品に使える規格を満たすものが好ましい。

【００３７】さらにこれらの溶液を通常の方法により凍
結乾燥を行い、ケーキ状のあるいは粉末状に変換された
組成物とすることができる。医薬品として使用する場合
には、上記の溶液を無菌濾過した後、アンプル、バイア
ル等に投与量単位で分注することが望ましく、さらに所
望により通常の方法で凍結乾燥してもよい。

【００３８】また、医薬として使用する場合、本発明の
可溶性トロンボモジュリン含有組成物は、一般に使用さ
れている投与方法、すなわち、非経口投与方法、例えば
静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与等によって投与する
ことが好ましい。凍結乾燥製剤とした場合は、用時、注
射用水等に溶解して、患者に投与することができる。経
口投与した場合には、消化管内で分解を受けるため、該
投与方法は効果的ではないが、消化管内での分解を受け
にくい製剤、例えばリポソームやマイクロスフェアー、
ナノスフェアーに内包した形態で経口投与することも可
能である。また、直腸、鼻腔内、舌下等の粘膜から吸収
せしめる投与方法も可能である。１日投与量としては、
例えば特開平３−２１８３９９号公報に記載されるよう
に０．００５〜５００ｍｇ力価、好ましくは０．１〜１
０ｍｇ力価が例示されるが、患者の年齢、体重、症状等
に応じて適宜増減することができる。

【００３９】このようにして得られた本発明の組成物
は、凍結・乾燥・保存・加熱および再溶解の過程いずれ
においても安定であり、室温において長期の保存性に優
れる。今回見いだされた安定化の為の必須成分および吸
着防止剤の成分はいずれも極めて高い安全性を有してお
り、本発明の組成物を医薬品として用いる場合に、長期
間に渡り活性の低下や凝集塊等の心配がなく、極めて高
い品質を維持する事ができる。また、本発明の組成物は
低濃度の水溶液としたときも容器への吸着が防止され、
医療現場において輸液にて希釈して投与する場合も吸着
により有効量を減ずることなく投与が可能となる。以上
のように、安全でかつ室温における長期の保存性に優れ
た血液凝固疾患に係わる疾病の予防治療薬を提供すると
が可能となった。更に、臨床使用時の容器への吸着が防
止された血液凝固疾患に係わる疾病の予防治療薬を提供
することが可能となった。また、本発明の組成物、製
法、安定化剤、安定化方法、吸着防止剤あるいは吸着防
止方法は可溶性トロンボモジュリンの精製工程でも利用
でき、さらに各種用途に用いるための可溶性トロンボモ
ジュリンの原体の保存にも利用できる。

【００４０】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を説明する。 （可溶性トロンボモジュリンの取得例１） ヒト尿中可溶性トロンボモジュリンの精製 特開平３−２１８３９９号公報の方法に準じてヒト尿中
可溶性トロンボモジュリンを調製した。すなわち、原尿
１００Ｌを１０％ ＮａＯＨでｐＨ８．５に調整し、析
出した沈澱物を除去した。次いで、尿のｐＨを４Ｍ Ｈ
ＣｌでｐＨ５．５に調整後、アクリロニトリル繊維で濾
過し尿中のウロキナーゼを吸着除去し、通過尿を分画分
子量４万の限外濾過膜を使用して脱塩濃縮した。

【００４１】ｐＨを７．３に調整後、６０℃で１５分間
処理した。０．０６８Ｍ ＮａＣｌを含有する０．０５
Ｍ 燐酸緩衝液（ｐＨ６．５）で予めコンディショニン
グしておいたＤＥＡＥセルロース（ワットマン社製）の
３００ｍＬカラムに濃縮尿を通過させて活性画分を吸着
させ、コンディショニングに使用したと同じ緩衝液７５
０ｍＬで洗浄後、０．０５Ｍ ＮａＣｌを含む酢酸緩衝
液（ｐＨ４．０）で活性画分を溶出した。

【００４２】溶出液は、分画分子量３万の限外濾過膜で
濃縮し、２Ｍ ＮａＯＨでｐＨ７．５に調整し、０．１
Ｍ ＮａＣｌ、１ｍＭ ベンザミジン塩酸塩および０．
５ｍＭ ＣａＣｌ₂を含む０．０２Ｍ トリス塩酸緩衝
液（ｐＨ７．５）で予めコンディショニングしたＤＩＰ
−トロンビン−アガロースの２．５ｍＬカラムを通過さ
せて活性画分を吸着させた。

【００４３】次いで、コンディショニングに使用したと
同じ緩衝液２５ｍＬで洗浄後、１ＭＮａＣｌ、１ｍＭ
ベンザミジン塩酸塩および０．５ｍＭ ＥＤＴＡを含む
０．０２Ｍ トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で溶出
し、この溶出液をコンディショニングに使用したと同じ
緩衝液に対して透析後、再度前回と同様の条件にコンデ
ィショニングしたＤＩＰ−トロンビン−アガロースクロ
マトグラフィーで精製した。２回目のＤＩＰ−トロンビ
ン−アガロースクロマトグラフィーにおいても同容のカ
ラムを用い、コンディショニングで使用したと同じ緩衝
液１０ｍＬで洗浄後、１０ｍＬの０．８Ｍ ＮａＣｌ、
１ｍＭ ベンザミジン塩酸塩および０．５ｍＭ ＣａＣ
ｌ₂ を含む０．０２Ｍ トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．
５）で洗浄し、１Ｍ ＮａＣｌ、１ｍＭ ベンザミジン
塩酸塩および０．５ｍＭ ＥＤＴＡを含む０．０２Ｍ
トリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で活性画分を溶出し
た。

【００４４】溶出液は、分画分子量３万の限外濾過膜で
濃縮し、予め０．１４Ｍ ＮａＣｌを含む０．０１Ｍ
燐酸緩衝液（ｐＨ７．０）でコンディショニングしてお
いたセファクリルＳ−３００（ファルマシアファインケ
ミカル社製）の５００ｍＬカラムでゲル濾過し、活性画
分を採取した（ＵＴＭ０）。また、別の実験では非還元
状態下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥで分子量７２，０００±
３，０００に相当する活性画分を（ＵＴＭ１）、あるい
は、分子量７９，０００±３，０００に相当する活性画
分を採取した（ＵＴＭ２）。これらの画分は一晩蒸留水
に対して透析した後凍結乾燥した。

【００４５】このようにして得られた天然型のヒト尿中
可溶性トロンボモジュリンＵＴＭ１およびＵＴＭ２はそ
れぞれ以下の部分構造および性質を有する。 （１）ＵＴＭ１ イ）分子量 ７２，０００±３，０００ ［非還元状態でのドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−
ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＰＡＧＥ）により
測定］ ロ）等電点 ３．９±０．２ ハ）末端アミノ酸配列（配列表の配列番号１のアミノ酸
配列） Ｎ末端 ： Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｐ
ｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｌａ
−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ− Ｃ末端 ： −Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ、または−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−
Ａｒｇ ニ）糖含量（重量％） 中性糖 ：５．５±１．０％ ［フェノール硫酸法で測定］ アミノ糖 ：２．２±１．０％ ［Ｅｌｓｏｎ−Ｍｏｒｇａｎ法（Ｂｌｉｘ変法）で測
定］ シアル酸 ：２．８±１．５％ ［Ｗａｒｒｅｎ法で測定］

【００４６】（２）ＵＴＭ２ イ）分子量 ７９，０００±３，０００ ［非還元状態でのＳＤＳ−ＰＡＧＥにより測定］ ロ）等電点 ３．８±０．２ ハ）末端アミノ酸配列（配列表の配列番号１のアミノ酸
配列） Ｎ末端 ： Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｐ
ｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｌａ
−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ− Ｃ末端 ： −Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ、または−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−
Ａｒｇ ニ）糖含量（重量％） 中性糖 ：６．２±１．０％ ［フェノール硫酸法で測定］ アミノ糖 ：３．１±１．０％ ［Ｅｌｓｏｎ−Ｍｏｒｇａｎ法（Ｂｌｉｘ変法）で測
定］ シアル酸 ：３．８±１．５％ ［Ｗａｒｒｅｎ法で測定］

【００４７】（可溶性トロンボモジュリンの取得例２） 遺伝子組換え型ヒト可溶性トロンボモジュリンの製造
（ＲＴＭ１） ＷＯ９２／００３２５号公報の方法で製造した。すなわ
ち、ヒト胎盤ｃＤＮＡライブラリーより釣り上げたＤＮ
Ａを利用してアミノ酸４５６残基よりなる可溶性トロン
ボモジュリン（ｒｕＴＭ−Ａｌａ）を発現するベクター
を調製し、これをＣＨＯ細胞に組み込んだ後、遺伝子増
幅を行って高発現株を得た。この高発現株の培養液をＤ
ＩＰ−トロンビン−アガロースカラムとゲル濾過により
精製し目的物を得た（ＲＴＭ１）。

【００４８】（可溶性トロンボモジュリンの取得例３） 遺伝子組換え型ヒト可溶性トロンボモジュリンの製造
（ＲＴＭ２） ＷＯ９２／００３２５号公報の方法に準じて製造した。
すなわち、ヒト胎盤ｃＤＮＡライブラリーより釣り上げ
たＤＮＡを利用してアミノ末端のアミノ酸配列がＡｌａ
−Ｐｒｏ−Ａｌａ−であるアミノ酸４９８残基よりなる
可溶性トロンボモジュリンを発現するベクターを調製
し、これをＣＨＯ細胞に組み込んだ後、遺伝子増幅を行
って高発現株を得た。この高発現株の培養液をＤＩＰ−
トロンビン−アガロースカラムとゲル濾過により精製し
目的物を得た（ＲＴＭ２）。

【００４９】本発明を詳細に説明するために実験例によ
り効果を具体的に説明するが、本発明はこれらによっ
て、なんら限定されるものではない。 （実験例１）前述の可溶性トロンボモジュリンの取得例
１で得られたＵＴＭ０を用いて、下記に示した凍結乾燥
された注射剤を調製した。これらを５０℃の恒温槽に保
存し、３ヶ月目および６ヶ月目に残存力価を、６ヶ月目
に該物質の凝集体生成率を測定した。測定方法は以下の
方法により行った。結果を表１および表２に示す。尚、
力価残存率は４℃にて同一時間保存した該物質の力価に
対する％で表した。なお、本実験で用いたＵＴＭ０はＵ
ＴＭ１とＵＴＭ２とがそれぞれ６９％、３１％含まれて
いた。製剤例１ ＵＴＭ０ ７５ｍｇ力価とマルトース
３００ｍｇを加え、注射用蒸留水３０ｍＬにて溶解し
た。この溶液を無菌ろ過後、無菌ガラスバイアルに１ｍ
Ｌずつ分注した後、凍結乾燥し、用時溶解型の注射剤を
調製した。以下同様に下記の成分を用いて製剤例２から
９の製剤を調製した。

【００５０】（力価の測定方法）トロンビン共存下での
プロテインＣ活性化能を合成基質Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−ｐ−ＮＡ（カビ社製）を用い、持田製薬（株）で精
製したヒト尿中可溶性トロンボモジュリン（ＵＴＭ０）
を標準物質として使用した。すなわち、０．０５％ポリ
ソルベート２０／トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．４）で適
当濃度に希釈した標準物質もしくは本発明の可溶性トロ
ンボモジュリン含有製剤２０μＬに２０ｍＭ ＣａＣｌ
₂ ／トリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．４）６０μＬ、さらに
牛トロンビン（持田製薬製）４０Ｕ／ｍＬ溶液を２０μ
Ｌ添加し、室温で２０分間反応する。次いでヒトプロテ
インＣ（アメリカンダイアグノスティカ社製）１２Ｕ／
ｍＬ溶液を２０μＬ添加し、室温で２０分間反応後、反
応液にヒトアンチトロンビンＩＩＩ（ミドリ十字製）と
ヘパリン（持田製薬製）の混合液（終濃度はそれぞれ
０．１５Ｕ／ｍＬ、１５Ｕ／ｍＬ）８０μＬを添加し、
室温で２０分間反応する。次いで、反応液を１２５μＬ
採取し、前記合成基質３ｍＭ溶液１２５μＬを添加し、
室温で経時的に４０５ｎｍの波長における吸光度を測定
し、反応初期速度を求める。標準溶液について得られた
反応初期速度から検量線を作成し、試料の力価を算出し
た。力価は特開平３−２１８３９９号公報の記載に従っ
てウサギ肺トロンボモジュリンに換算した。

【００５１】（凝集体生成率の測定法）可溶性トロンボ
モジュリンの凝集体生成率をＴＳＫ−ｇｅｌ^TM Ｇ３０
００ＳＷ_XL（東洋曹達製）を用いたゲル濾過法により測
定した。

【００５２】

【００５３】 表１および表２に示すように、マルトース、ラクトー
ス、蔗糖および塩酸アルギニンを添加した場合、グルコ
ース、マンニトール、グリシン、精製ゼラチン、ヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ）等の他の一般的な添加剤を添加
した場合に比較してヒト尿中可溶性トロンボモジュリン
が有意に安定化された。すなわち、ヒト可溶性トロンボ
モジュリンの保存安定性が有意に増大した。その効果
は、ラクトースおよび塩酸アルギニンでより顕著であっ
た。

【００５４】（実験例２）前述の可溶性トロンボモジュ
リンの取得例１で得られたＵＴＭ１あるいはＵＴＭ２を
用いて、下記に示した凍結乾燥された組成物を調製し
た。これらを４０℃湿度７５％の恒温槽に保存し、６ヶ
月目に残存力価と該物質の凝集体生成率を測定した。測
定方法は上記実験例１の方法により行った。結果を表３
および表４に示す。尚、力価残存率は実験開始時の力価
に対する％で表した。 組成物例１ ＵＴＭ２ ２．５ｍｇ力価とマルトース１
０ｍｇを加え、精製水１ｍＬにて溶解した。この溶液を
凍結乾燥した。以下同様に下記の成分で構成されている
組成物例２から８の組成物を調製した。 組成物例２ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 ラクトース １０ｍｇ 組成物例３ ＵＴＭ２ ２．５ｍｇ力価 塩酸アルギニン ２０ｍｇ 組成物例４ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 蔗糖 １０ｍｇ 組成物例５ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 マンニトール １０ｍｇ 組成物例６ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 グリシン ２０ｍｇ 組成物例７ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 精製ゼラチン ２０ｍｇ 組成物例８ ＵＴＭ１ ２．５ｍｇ力価 ＨＳＡ １０ｍｇ

【００５５】

【表１】

【００５６】 表３および表４に示すように、マルトース、ラクトー
ス、蔗糖および塩酸アルギニンを添加した場合、他の一
般的な添加剤を添加した場合に比較してヒト尿中可溶性
トロンボモジュリンが顕著に安定化された。特に長期間
に渡る安定化効果が顕著であった。

【００５７】（実験例３） 溶液安定性試験 前述の可溶性トロンボモジュリンの取得例１で得られた
ＵＴＭ０を用いて、マルトース、ラクトース、蔗糖ある
いは塩酸アルギニンを０．５ないし５ｍｇ／ｍＬ含有す
る０．０５ｍｇ力価／ｍＬの可溶性トロンボモジュリン
溶液を調製した。これらを室温に保存し、２４時間後に
残存力価を測定した。測定方法は前記実験例１の方法に
より行った。いずれの組成物においても顕著な活性の低
下は認められなかった。

【００５８】可溶性トロンボモジュリンが変性して凝集
体を生じ、凝集体が混在したままヒト血中に投与された
場合、その凝集体は変性した蛋白質であるため、過敏症
等の免疫反応を惹起する、あるいは塞栓症を誘発する危
険性がある。従って、凝集体生成率が低いことは、注射
用医薬製剤において重要な利点である。さらに、製剤を
開発する場合、室温で長期間保存可能かどうかは、一般
に４０℃、６ヶ月間保存での安定性を目安として判断す
るが、本発明で得られる可溶性トロンボモジュリン含有
製剤は前述の実験例で示されるように、より過酷な条件
である５０℃、６ヶ月間の保存でも極めて安定であっ
た。また、溶液状態での保存性もよく、凍結乾燥型の組
成物を医薬として用いる場合にも再溶解後に安心して使
えることが確認された。

【００５９】（実験例４）前述の可溶性トロンボモジュ
リンの取得例１で得られたＵＴＭ０を用いて、下記に示
した溶液状の組成物を調製し、力価を測定した。他に、
対照としてＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価を生理食塩液２ｍ
ｌにて溶解した溶液を用意し、力価を測定した。これら
０．２４ｍｌをシリンジを用いてプラスチック製容器に
入った生理食塩液（１００ｍｌ）に混注し、可溶性トロ
ンボモジュリンの理論終濃度を約０．００３ｍｇ力価／
ｍｌとした。混注後３時間目に液を採取し、残存力価を
測定した。力価測定方法は前記実験例１の方法により行
った。 組成物例９ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価とポリソルベ
ート８０ ５ｍｇを加え、生理食塩液２ｍｌにて溶解し
た。 組成物例１０ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価と精製ゼラチ
ン １０ｍｇを加え、生理食塩液２ｍｌにて溶解した。

【００６０】 表５に示すように、ヒト尿中可溶性トロンボモジュリン
はプラスチック製容器に対して著しい吸着を示した。ポ
リソルベート８０を添加するとゼラチン添加に比べて、
顕著に吸着が防止された。

【００６１】（実験例５）前述の可溶性トロンボモジュ
リンの取得例１で得られたＵＴＭ０を用いて、下記に示
した溶液状の組成物を調製し、力価を測定した。他に対
照としてＵＴＭ０２．５ｍｇ力価を生理食塩液２ｍｌに
て溶解した溶液を用意し、力価を測定した。これら１ｍ
ｌを輸液セット（テルフュージョン^R ＴＳ−Ａ２００
ＣＫ、テルモ製）を装着した生理食塩液（大塚生食注、
５００ｍｌ、プラスチック製容器）に混注し、可溶性ト
ロンボモジュリンの理論終濃度を約０．００２５ｍｇ力
価／ｍｌとした。混注直後に輸液セットを通して得られ
た液、また、３時間後にプラボトルから直接採取して得
られた液について残存力価を測定した。力価測定方法は
前記実験例１の方法により行った。 組成物例１１ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価とポリソルベ
ート８０ １ｍｇを加え、生理食塩液２ｍｌにて溶解し
た。以下同様に下記の成分で構成されている組成物例２
から６の組成物を調製した。 組成物例１２ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価 ポリソルベート８０ ０．５ｍｇ 組成物例１３ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価 ポリソルベート２０ １ｍｇ 組成物例１４ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価 ポリソルベート２０ ０．５ｍｇ 組成物例１５ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価 プルロニックＦ６８ ５ｍｇ 組成物例１６ ＵＴＭ０ ２．５ｍｇ力価 プルロニックＦ６８ １ｍｇ

【００６２】 表６に示すように、ポリソルベート８０、ポリソルベー
ト２０、プルロニックＦ６８を添加した場合、その濃度
が０．００００５wt％以上でヒト尿中可溶性トロンボモ
ジュリン希薄水溶液の輸液セット並びにプラスチック製
容器中での活性が維持されることが判明した。

【００６３】（実験例６）前述の可溶性トロンボモジュ
リンの取得例１で得られたＵＴＭ０を用いて、下記に示
した凍結乾燥された注射剤を調製した。これらを５０℃
の恒温槽に保存し、３カ月および６カ月目に力価残存率
を測定した。測定方法は上記実験例１の方法により行っ
た。結果を表７に示す。尚、力価残存率は凍結乾燥直後
の力価に対する％で表した。製剤例１０ ＵＴＭ０ １
５０ｍｇ力価、塩酸アルギニン１２００ｍｇおよびプル
ロニックＦ６８ ６０ｍｇを加え、注射用蒸留水６０ｍ
Ｌにて溶解した。この溶液を無菌ろ過後、無菌ガラスバ
イアルに２ｍＬずつ分注した後、凍結乾燥し、用時溶解
型の注射剤を調製した。以下同様に下記の成分を用いて
製剤１１から１３の製剤を調製した。 製剤例１１ ＵＴＭ０ １５０ｍｇ力価 塩酸アルギニン １２００ｍｇ ポリソルベート８０ ６０ｍｇ 精製ゼラチン ３００ｍｇ 製剤例１２ ＵＴＭ０ １５０ｍｇ力価 マルトース ６００ｍｇ プルロニックＦ６８ ６０ｍｇ 製剤例１３ ＵＴＭ０ １５０ｍｇ力価 マルトース ６００ｍｇ プルロニックＦ６８ ６０ｍｇ 精製ゼラチン ３００ｍｇ

【００６４】 表７に示すように、アルギニンあるいはマルトースと非
イオン性界面活性剤を組み合わせて添加した場合、ヒト
尿中可溶性トロンボモジュリンの長期間に渡る保存安定
性が有意に増大した。従って、長期保存時でも安定性に
優れ、低濃度に希釈したときも容器への吸着が起こらな
い可溶性トロンボモジュリン含有組成物が得られること
が確認できた。

【００６５】（製剤実施例）次に実施例によって本発明
を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によ
ってなんら限定されるものではない。 （実施例１） ＵＴＭ０ １０ｍｇ力価 ラクトース １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００６６】 （実施例２） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 ラクトース １００ｍｇ プルロニックＦ６８ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ２．７３ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００６７】 （実施例３） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 ２００ｍｇ ポリソルベート８０ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ２．７３ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００６８】 （実施例４） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 ２００ｍｇ プルロニックＦ６８ １０ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００６９】 （実施例５） ＵＴＭ０ ５０ｍｇ力価 マルトース １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ２３．２ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ５．５ｍｇ 塩化ナトリウム ８１．８ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７０】（実施例６）実施例５と同成分の可溶性ト
ロンボモジュリン含有凍結乾燥組成物を調製した。別
に、０．１％ポリソルベート８０水溶液を無菌的に調製
し、１．０ｍｌずつ分注して熔閉し、溶解用溶液アンプ
ルとした。

【００７１】 （実施例７） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 蔗糖 １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７２】（実施例８）実施例７と同成分の可溶性ト
ロンボモジュリン含有凍結乾燥組成物を調製した。別
に、０．１％ポリソルベート８０水溶液を無菌的に調製
し、１．０ｍｌずつ分注して熔閉し、溶解用溶液アンプ
ルとした。

【００７３】 （実施例９） ＵＴＭ１ ２５ｍｇ力価 ラクトース ８００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ２３．２ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ５．５ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７４】 （実施例１０） ＵＴＭ２ ５０ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 ２００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７５】 （実施例１１） ＵＴＭ１ １０ｍｇ力価 蔗糖 １００ｍｇ ポリソルベート８０ ５０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ２３．２ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ５．５ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７６】 （実施例１２） ＵＴＭ２ ５０ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 ２００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ ポリソルベート８０ １０ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７７】 （実施例１３） ＲＴＭ１ ２５ｍｇ力価 ラクトース ２００ｍｇ ポリソルベート８０ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ８１．８ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７８】 （実施例１４） ＲＴＭ１ ２５ｍｇ力価 ラクトース ２００ｍｇ プルロニックＦ６８ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ８１．８ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００７９】 （実施例１５） ＲＴＭ２ ２５ｍｇ力価 ラクトース １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解した全量を１０ｍＬと
し、無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填
し、凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結
乾燥組成物を調製した。

【００８０】（実施例１６）実施例１５と同成分の可溶
性トロンボモジュリン含有凍結乾燥組成物を調製した。
別に、０．１％ポリソルベート８０水溶液を無菌的に調
製し、１．０ｍｌずつ分注して熔閉し、溶解用溶液アン
プルとした。

【００８１】 （実施例１７） ＲＴＭ２ １０ｍｇ力価 マルトース １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ８１．８ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解した全量を１０ｍＬと
し、無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填
し、凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結
乾燥組成物を調製した。

【００８２】 （実施例１８） ＲＴＭ２ １０ｍｇ力価 マルトース １００ｍｇ 精製ゼラチン １００ｍｇ プルロニックＦ６８ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ８１．８ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解した全量を１０ｍＬと
し、無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填
し、凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結
乾燥組成物を調製した。

【００８３】 （実施例１９） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 １００ｍｇ ラクトース １００ｍｇ ポリソルベート８０ １０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ０．７７ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ０．１８ｍｇ 塩化ナトリウム ２．７３ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００８４】 （実施例２０） ＵＴＭ０ ２５ｍｇ力価 Ｌ−アルギニン塩酸塩 １００ｍｇ マルトース １００ｍｇ プルロニックＦ６８ １０ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００８５】 （実施例２１） ＵＴＭ１ １０ｍｇ力価 ラクトース １００ｍｇ 蔗糖 １００ｍｇ ポリソルベート８０ ５０ｍｇ リン酸水素二ナトリウム・１２水和物 ２３．２ｍｇ リン酸二水素ナトリウム・２水和物 ５．５ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１０ｍＬとし、
無菌濾過した後１．０ｍＬずつ無菌バイアルに充填し、
凍結乾燥して、可溶性トロンボモジュリン含有凍結乾燥
組成物を調製した。

【００８６】

【発明の効果】本発明の可溶性トロンボモジュリン含有
組成物は、凍結・乾燥・保存・加熱および再溶解の過程
いずれにおいても安定であり、特に、凍結乾燥した本発
明の可溶性トロンボモジュリン含有組成物については室
温において長期間に渡る保存性に優れる。今回見いださ
れた安定化のための必須成分および吸着防止剤はいずれ
も極めて高い安全性を有しており、本発明の組成物を医
薬品として用いる場合に、長期間に渡り活性の低下や凝
集物の出現等の心配がなく、極めて高い品質を維持する
事ができる。とくに凍結乾燥製剤は、５０℃で６ヶ月の
保存でも十分に安定である。また、本発明の可溶性トロ
ンボモジュリン含有組成物は低濃度の水溶液としたとき
も容器への吸着が防止され、医療現場において輸液にて
希釈して投与する場合も吸着により有効量を減ずること
なく投与が可能となる。従って、安全でかつ室温におけ
る長期の保存性に優れた、血液凝固疾患に係わる疾病の
予防治療薬を提供することが可能である。更に、臨床使
用時の容器への吸着が防止された、血液凝固疾患に係わ
る疾病の予防治療薬を提供することが可能である。ま
た、本発明の可溶性トロンボモジュリン含有組成物、そ
の製法、可溶性トロンボモジュリンの安定化剤、安定化
方法、吸着防止剤あるいは吸着防止方法は可溶性トロン
ボモジュリンの精製工程でも利用でき、さらに各種用途
に用いるための可溶性トロンボモジュリンの原体の保存
にも利用できる。

【００８７】

【配列表】SEQUENCE LISTING <110> Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. <120> Composition Containing Soluble Thrombomoduli
ns <130> MD0397JP01 <141> 1999-06-01 <160> 1 <210> 1 <211> 28 <212> PRT <213> human

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 畠 誠七 東京都新宿区四谷一丁目７番地 持田製薬 株式会社内 (72)発明者 鈴木 茂治 東京都新宿区四谷一丁目７番地 持田製薬 株式会社内 (72)発明者 工藤 弓夫 東京都新宿区四谷一丁目７番地 持田製薬 株式会社内

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】可溶性トロンボモジュリンと、マルトー
   ス、ラクトース、蔗糖、アルギニンおよびその塩から選
   ばれる１種あるいは２種以上とを含有することを特徴と
   する可溶性トロンボモジュリン含有組成物。