ITTO971062A1 - Farmaco per la cura dell'ircismo contenente un adrenocorticosteroide. - Google Patents
Farmaco per la cura dell'ircismo contenente un adrenocorticosteroide. Download PDFInfo
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Description
Descrizione dell'Invenzione Industriale avente per titolo: Farmaco per la cura dell'ircismo contenente un adrenocorticosteroide
DESCRIZIONE
La presente invenzione si riferisce ad un farmaco per la cura dell'ircismo utilizzante un agente adrenocorticosteroide e, più in particolare, si riferisce a un farmaco per la cura dell'ircismo utilizzante detto agente adrenocorticosteroide in associazione con un estratto da un prodotto di fermentazione dell'acido lattico.
Sinora sono state sperimentate numerose contromisure trattamenti per l'ircismo, quali ad esempio l'eliminazione dell'odore per mezzo di deodoranti, l'inibizione di un ambiente favorevole alla moltiplicazione dei batteri per mezzo di antitraspiranti, ecc., e l'inibizione dell'attività batterica e la disinfezione mediante agenti antibatterici come gli antibiotici o i disinfettanti.
Un tessuto epiteliale secretore di steroidi, ad esempio. una ghiandola sudoripara ecc., metabolizza e secem e vari composti steroidei, come il colesterolo, l' ormone sessuale e così via .
Un tipo di composto steroideo in quest'ambito è metabolizzato dalla flora batterica che si è insediata e moltiplicata sull'epitelio ascellare, producendo così il composto steroideo odorifero 5a-androst-16-en-3-one(5α-Α), responsabile dell'ircismo. Tuttavia questo composto non è stato rivelato nella secrezione dal tessuto secretore in riferimento all'ircismo. Una teoria generale suggerisce che uno steroide C-^g metabolizzato e prodotto nel tessuto secretore possa essere nuovamente metabolizzato dai batteri insediati nel cavo ascellare formando il composto di cui sopra .
Tra . i batteri insediati su epiteli, molti propionibatteri o corynebatteri e alcuni stafilococchi includono specie dotate di una funzione nel metabolismo degli steroidi.
Contromisure convenzionali nei confronti dell'ircismo sono state adottate soprattutto inibendo la produzione di uno steroide odorifero mediante applicazione ascellare di antibiotici, ecc. per rimuovere i batteri radicati sull'epitelio ascellare. Tuttavia gli effetti sono soltanto temporanei. Allo stato della tecnica, 1'ircismo può essere eliminato solo con un trattamento chirurgico.
I presenti inventori hanno compiuto ricerche per trovare un farmaco in grado di distruggere rapidamente 1'ircismo senza intervento chirurgico e hanno così scoperto l'efficacia di un'associazione tra un adrenocorticosteroide e un agente antibatterico integrativo, come già proposto in precedenza {domanda di brevetto giapponese accessibile al pubblico n. 3-66608).
Nella terapia dell'ircismo non si è fatto alcun uso convenzionale di adrenocorticosteroidi. Di conseguenza non sono state evidenziate concrete azioni farmaceutiche degli adrenocorticosteroidi nei confronti dell'ircismo, ma si suppone che queste siano dovute alla sensibilità di un propionibatterio all'adrenocorticosteroide e, inparticolare, all'inibizione della secrezione di una sostanza causativa dello steroide odorifero dal .tessuto epiteliale ascellare in seguito all'inibizione verso un tessuto di sintetizzare e secernere steroidi - che costituisce una delle azioni fisiologiche caratteristiche di un adrenocorticosteroide .
Gli effetti terapeutici del farmaco contenente un adrenocorticosteroide per 1'ircismo sono estremamente rapidi e notevoli e gli esperimenti clinici iniziali hanno rivelato che, sia pure in rapporto ai sintomi, varie applicazioni di una quantità efficace non superiore a circa 2 mg guariscono con brillanti risultati 1'ircismo. Tuttavia un farmaco steroideo è di per sè un farmaco che potrebbe provocarereazioni farmacologiche nocive in seguito ad un uso cronico. E' perciò preferibile sfruttarne una concentrazione elevata per un breve periodo. La dose comunque è limitata in quanto potrebbero verificarsi reazioni farmacologiche avverse, quali eczema, erosione ed anche un cambiamento lichenoide, se la frequenza di somministrazione fosse aumentata in base alla costituzione, ai sintomi, ecc., senza contare la possibilità dell'insorgenza di un'infezione.
I presenti inventori hanno compiuto numerosi esperimenti ponendo attenzione al fatto che il prodotto metabolico di un batterio dell'acido lattico ottenuto mediante fermentazione dell'acido lattico non ha soltanto un'azione astringente o riparativa sulla pelle, ma mostra anche un'azione batteriostatica o battericida nei confronti dei batteri, e hanno scoperto che l'impiego di un adrenocorticosteroide dotato di un effetto terapeutico specifico contro l'ircismo in combinazione con un particolare estratto ottenuto attraverso la fermentazione dell'acido lattico inibisce sostanzialmente la reazione farmacologica nociva di detto adrenocorticosteroide.
La presente invenzione propone un farmaco per la cura. dell'ircismo caratterizzato dal fatto di contenere una quantità efficace di adrenocorticosteroide e 1 - 10% in peso di un estratto da un prodotto di fermentazione dell' acido: lattico sulla base (1 g).
Malgrado un adrenocorticosteroide con una concentrazione di circa 100 ppm sulla base abbia già un effetto significativo sul propionibatterio - una causa dell'ircismo - si preferisce usarlo a una concentrazione di almeno 300 ppm come rimedio pratico per 1'ircismo. D'altra parte, la sua somministrazione a una concentrazione non inferiore a circa 30.000 ppm (30 mg/g) non determina un effetto maggiore.
Gli adrenocorticosteroidi usati per la presente invenzione includono molti adrenocorticosteroidi conosciuti evidenzienti un effetto analogo, quali ad esempio prednisolone, cortisone, cortisolo, idrocortisone, prednisone, metilprednisone, metilprednisolone, triamcinolone, dexametasone, parametasone, betametasone e becloraetasone.
D'altro canto, reazioni farmacologiche nocive dovute a detti adrenocorticosteroidi sono decisamente inibite ad opera di detto estratto da un prodotto di fermentazione dell'acido lattico. I motivi non sono affatto chiari, ma si. ipotizza che detto estratto dal prodotto possa non solo prevenire il verificarsi di detta alterazione indotta come reazione farmacologica nociva di un adrenocorticosteroide, ma anche curare la lesione e riportare la pelle alla normalità impedendo l'induzione di una malattia infettiva. Detto estratto dal prodotto viene usato in quantità compresa tra 1 e 10% in peso rispetto alla base. Un effetto atteso si riscontra già con 1'1% in peso. L'effetto aumenta con il crescere della concentrazione, ma in pratica la terapia peggiora se si supera il 10% in peso.
E' preferibile usare una miscela di un estratto ottenuto da un prodotto di fermentazione dell'acido lattico, in particolare una soluzione purificata di acido lattico preparata mediante sterilizzazione a caldo e filtrazione con un filtro a membrana, ecc., di un liquido di fermentazione dell'acido lattico, e di un estratto derivato dal citoplasma di cellule batteriche ricavato omogeneizzando le cellule batteriche dell'acido lattico come panello per l'estratto dal prodotto di fermentazione dell'acido lattico della presente invenzione.
Detto estratto ottenuto da un prodotto di fermentazione dell'acido lattico contiene, in aggiunta ad un prodotto metabolico (acido lattico) liberato dalle cellule batteriche, vari aminoacidi, proteine, acidi nucleici, lipidi, glicoproteine e polisaccaridi, ecc., derivati dai costituenti delle cellule batteriche, essendo detti prodotti nel loro insieme indicati come estratti dal prodotto di. fermentazione dell'acido lattico.
Il batterio dell'acido lattico usato nella presente invenzione è caratterizzato dal fatto di essere un ceppo ottenuto selettivamente dalla coltura simultanea di molte specie diverse di batteri dell'acido lattico in uno stadio di crescita competitiva.
Vi sono molte specie di batteri dell'acido lattico utilizzate per l'invenzione, variando i metodi di coltura in funzione della specie. Nei gruppi (I) - (IV), ognuno dei quali contiene almeno un ceppo di bacillo dell'acido lattico ed un ceppo di micrococco dell'acido lattico, con batteri differenti tra i gruppi, ad esempio I (B. bulgaricus A, B. acidophilus 1, M. lactisacidi), II (B. bulgaricus B, B. acidophilus, M. lactisacidi), III (Kornchenbacillus A, B. acidophilus, M. lactisacidi) e IV (Kornchenbacillus B, B. acidophilus, W. lactisacidi), risultati preferibili si ottengono attraverso una coltura primaria di una molteplicità di ceppi di batteri dell'acido lattico separatamente in ciascun gruppo con condizioni date, raccogliendo quindi la coltura dei rispettivi gruppi e procedendo con un'altra coltura secondaria simultanea. In questo caso, preferibilmente il prodotto metabolico nella coltura primaria è allontanato mediante filtrazione, ecc., e solo le cellule batteriche sono coltivate nella coltura secondaria.
il trattamento dei batteri dell'acido lattico ottenuti tramite detta coltura secondaria con termosterilizzazione e filtrazione del prodotto metabolico liberato durante la coltura all'esterno delle cellule batteriche con un filtro a membrana, ad esempio sottovuoto, fornisce un liquido acido trasparente (pH 3-4) (acido lattico) come filtrato.
1/ estratto dal prodotto di fermentazione dell'acido lattico è ottenuto mediante aggiunta dei componenti di dette sostanze costituenti derivate dalle cellule batteriche ottenute sminuzzando ed estraendo le cellule batteriche come panello sul filtro.
L'invenzione sarà ora descritta per mezzo di realizzazioni .
Realizzazione 1
Si aggiunsero 87 kg di acqua purificata a 10 kg di polvere di latte scremato e 3 kg di glucosio, sterilizzando la miscela a 100°C per 60 minuti e raffreddando a 37°C per preparare un. terreno di coltura. Si inoculò quindi un batterio dell'acido lattico preparato in altro modo (Streptococcus thermophilus) e si coltivò a 37°C per 48 ore, riscaldando il fluido di coltura a 60"c per sterilizzarlo, filtrando con Celite e sottoponendo a filtrazione sterile con un filtro a membrana. Si ottenne una soluzione di acido lattico fermentato sottoforma di liquido trasparente a un pH di circa 3-4. Il batterio dell'acido lattico, come panello sul filtro, venne poi congelato e macinato per ottenere un estratto derivato dal citoplasma, ecc. delle cellule batteriche, mescolando l'estratto con detta soluzione di acido lattico per avere un estratto dal prodotto di fermenta.
zione dell'acido lattico A.
Realizzazione 2
Si coltivarono rispettivamente i gruppi (I)-(IV) di batteri dell'acido lattico con ceppi diversi tra ciascun gruppo, raggruppati in I (B. bulgaricus A, B. acidophilus, M. lactisacidi), II {B. bulgaricus B, B. acidophilus, M. lactisacidi), III (Kornchenbacillus A, B. acidophilus, M. lactisacidi) e IV (Kornchenbacillus B, B. acidophilus, W. lactisacidi), in condizioni di temperatura media pari a. circa 37°C per 120 ore usando un terreno di coltura della seguente costituzione:
Tripticasi peptone ..10,000 g
Estratto di lievito . 5,000 g
Fosfato di potassio . 6,000 g
Citrato di ammonio . 2,000 g
Glucosio .20,000 g
Sorbitan monooleato . 1,000 g
Acetato di sodio idrato .25,000 g
Solfato di magnesio . 0,575 g
Solfato di manganese . 0,120 g
Solfato ferroso . 0,034 g
Agar .15,000 g
pH 5,5
La coltura ottenuta venne trattata in modo analogo alla realizzazione 1 per ottenere un estratto dal prodotto di fer mentazione dell'acido lattico B.
Realizzazione 3 (testi di sensibilità dell'acne da propionibatterio al farmaco adrenocorticosteroideo)
Un batterio di prova da sub-coltura venne inoculato in un terreno di crescita e coltivato a 35°C per 48 ore in condizioni aerobiche, diluendo il fluido di coltura con il terreno di crescita in modo che il conteggio dei batteri risultasse circa 10®/ml, trasferendo ad un brodo GAM (Nissui Seiyaku Co., Ltd.) una quantità della cellula batterica 1 corrispondente ad un anello di platino e coltivando a 35eC per 24 ore in condizioni anaerobiche per preparare una soluzione batterica per l'inoculazione.
Detta soluzione batterica venne dispensata alle rispettive capsule di Petri con terreno di agar GAM (Nissui Seiyaku Co.·, Ltd.), 15 mi per ciascuna capsula, in modo che il conteggio batterico fosse circa 10®/ml e la soluzione si fissasse. Si utilizzò quindi un provino contenente prednisolone come adrenocorticosteroide con una concentrazione di 28 mg in 1 g della pomata base, diluendo ancora il provino gradualmente con la crema a 1 - 28.000 volte. Sui terreni di coltura si collocarono rispettivamente dischi di sensibilità (carta da filtro) (diametro 10 mm) cui era applicato il provino diluito. Si osservò un alone (cerchio di inibizione della crescita) quando la coltura venne completata dopo un tempo predeterminato. I risultati sono presentati nella tabella seguente. Come risulta evidente dalla tabella, la formazione dell'alone (4 mm) venne già osservata a una diluizione di circa 280 (1000 ppm). La larghezza dell'alone W è data dall'espressione: W=T-D/2
in cui T è la larghezza del banda di inibizione includente il provino e D è la larghezza del provino.
Formazione dell'alone (banda di inibizione della crescita) al batterio di prova
Batterio Concentra. Campione Componente Risul. di prova zione batte, Diluizione efficace tati rica (/mi) Concentra,
zione (ppm)
Acne da 1 28000 (18mm) propio- 4,8x10® 7 4000 (14mm) nibatterio 28 1000 (llmm)
280 100 (4mm)
2800 10
28000 1
Realizzazione 4
Come risulta evidente da detto test di sensibilità, r. propionibatteri avevano una sensibilità significativa verso 1'adrenocorticosteroi.de già ad una concentrazione di 100 ppm e la sensibilità aumentò notevolmente a concentrazioni superiori a 1000 ppm. Si effettuò un esperimento terapeutico applicando ad un paziente affetto da ircismo un farmaco di prova costituito da una combinazione del farmaco steroideo con una concentrazione di 300 ppm e dell'estratto dal prodotto di fermentazione dell'acido lattico A con una concentrazione pari al 3% in peso.
Nel corso dell'esperimento, il farmaco per la cura dell'ircismo contenente 0,3 mg (300 ppm) di prednisolone come adrenocorticosteroide e 30 mg dell'estratto dal prodotto A (3% in peso) in 1 g di pomata venne applicato sotto le ascelle di 350 pazienti una volta al giorno secondo un metodo generale. In molti pazienti si riscontrarono miglioramenti ma, in relazione ai sintomi, vi furono alcuni casi in cui 1'ircismo si ridusse soltanto o scomparve per poi riapparire nel volgere di una settimana. Quella concentrazione di prednisolone per questa applicazione risultò in una certa misura efficace, ma sempre in rapporto ai sintomi.
Realizzazione 5
Si effettuò un trattamento analogo su 150 pazienti affetti da ircismo usando una pomata preparata mescolando 28-mg (28000 ppm) di prednisolone e 30 mg dell'estratto dal. prodotto B in 1 g di una base. Nella maggior parte dei pazienti non si ebbero ricadute per un lungo periodo. Non conparvero reazioni farmacologiche nocive inputabili al prednisolone.
In questo test, la somministrazione ripetuta di un adrenocorticosteroide generale a 10 pazienti come cura di fenomeni atopici ecc. aveva già portato all'insorgere di eczema, antema, erosione, ecc. sulla pelle nella regione ascellare come reazione farmacologica avversa prima del trattamento dell'ircismo.
La pomata fu applicata a questi pazienti durante detto esperimento da 2 a 4 volte al giorno in funzione dei sintomi. Come risultato, dette dermatosi dovute allareazione farmacologica nociva si ridussero in misura notevole in -8 pazienti, furono completamente risolte in :2 pazienti, senza ripresa di ircismo o dermatosi. In altri 2 pazienti non si ebbero effetti e 1'applicazione venne interrotta .
Secondo la presente invenzione, notevoli effetti terapeutici sull'ircismo, tradizionalmente ritenuto difficile da curare, sono riconosciuti con un farmaco in un breve periodo. Si riscontrano modeste reazioni farmacologiche nocive da parte del farmaco adrenocorticosteroideo. La presente invenzione rivela perciò un impiego efficace come farmaco per la cura dell'ircismo.
Claims (4)
- RIVENDICAZIONI 1. Un farmaco per la cura dell1,ircismo caratterizzato dal fatto che contiene una quantità efficace di adrenocorticosteroide e 1-10% in peso di un estratto da un prodotto di fermentazione dell'acido lattico su 1 g della base.
- 2. Il farmaco per la cura dell'ircismo descritto nella rivendicazione 1, contenente 1'adrenocorticosteroide in quantità compresa tra 0,3 e 30 mg.
- 3. Il farmaco per la cura dell'ircismo descritto nella rivendicazione 1, in cui detto estratto da un prodotto di fermentazione dell' acido lattico è una miscela di un prodotto metabolico generato da cellule batteriche durante la coltura di un batterio dell'acido lattico, e di componenti derivati dal citoplasma di cellule batteriche ricavato frantumando ed estraendo le cellule batteriche ottenute filtrando a caldo la coltura.
- 4. Il farmaco per la cura dell'ircismo descritto nella rivendicazione 3, in cui detto batterio dell'acido lattico è ottenuto mediante una coltura primaria ,di una molteplicità di batteri dell'acido lattico di ceppo diverso, essendo la coltura separata in ciascun gruppo con condizioni date, e raccogliendo i batteri coltivati dell'acido lattico nei gruppi rispettivi e sottoponendoli ad una coltura secondaria simultanea .
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