CN112741791A

CN112741791A - 茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用

Info

Publication number: CN112741791A
Application number: CN202110196201.3A
Authority: CN
Inventors: 王璞
Original assignee: Shanghai Youren Biotechnology Co ltd
Current assignee: Shanghai Youren Biotechnology Co ltd
Priority date: 2020-03-05
Filing date: 2021-02-22
Publication date: 2021-05-04
Also published as: CN111249196A

Abstract

本发明提供了茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，所述茉莉根发酵提取物，通过以下步骤制备的：取茉莉根粉碎成粗粉；将所述粗粉与南极假丝酵母脂肪酶和表面活性剂，加入到溶剂中进行发酵，得到发酵液；所述发酵液经超声处理、过滤、浓缩、经超临界萃取，即得所述茉莉根发酵提取物。茉莉根发酵提取物含有多种小分子活性肽和氨基酸，能够抑制炎症因子，从源头上抑制炎症的产生，具有抗炎功效；且茉莉根发酵提取物的原料来自药食同源的茉莉根，对皮肤没有任何刺激性和毒副作用。

Description

茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用

技术领域

本发明涉及植物活性物提取领域，尤其涉及茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用。

背景技术

皮肤作为人体抵御外来侵袭的第一道重要防线，在机体免疫系统方面发挥重要的作用，不仅具有阻挡异物和病原体侵入，还具有感觉外界刺激、调解体温和防止体液流失等重要生理功能。当皮肤遇到诱发原因(如紫外线，化学品，过敏、皮肤损伤等)时，细胞会分泌大量的促炎症因子，促炎症因子进一步与靶细胞结合，分泌炎症因子(如IL—6和NO等)，而这些炎症因子会导致毛细血管扩张(皮肤泛红)，刺激神经细胞导致瘙痒，疼痛感。一部分促炎症因子会让免疫细胞从血液迁移到皮肤中，促进更多造成皮肤损害的酶，自由基等。常见的炎症性皮肤问题有：痤疮、红血丝、色斑、毛孔粗大和激素脸等。正常情况下炎症是人体的自动的防御反应，但是过度的炎症会对人体自身组织产生攻击，对皮肤周围组织的伤害巨大，并严重阻碍皮肤细胞的修复。因此，在护理皮肤的同时抑制炎症，对皮肤的快速修复有重要作用。

因此，研究一种能够有效抗炎，并且无刺激性和毒副作用的产品，是本领域技术人员急需解决的问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，所述茉莉根发酵提取物的制备方法包括以下步骤：取茉莉根粉碎成粗粉；将所述粗粉与南极假丝酵母脂肪酶和表面活性剂，加入到溶剂中进行发酵，得到发酵液；所述发酵液经超声处理、过波、浓缩、经超临界萃取，即得所述茉莉根发酵提取物。

进一步地，所述发酵的具体条件为：发酵pH为7-8，发酵温度为22-28℃，通入氧气反应30-36h。

进一步地，所述发酵的具体条件为：发酵pH为7.5，发酵温度为26℃，通入氧气反应35h。

进一步地，所述表面活性剂为吐温80。

进一步地，所述溶剂为乙醇溶液，其浓度为10-100％。

进一步地，所述超声处理的时间为1-2h。

进一步地，所述茉莉根发酵提取物在所述化妆品或药物中的添加量为1％～5％。

进一步地，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述药学上可接受的载体选自填充剂、粘合剂、增溶剂、崩解剂、助流剂中的任一种或两种以上。

进一步地，所述化妆品还包括辅料，所述辅料选自乳化剂、增稠剂、抗氧化剂、保湿剂、柔润剂、增溶剂、螯合剂、香精、PH调节剂、防腐剂、促渗剂、肤感调节剂、表面活性剂、色素、抛射剂中的任一种或两种以上。

进一步地，所述化妆品的剂型为膏霜剂、乳液剂、凝胶剂、气雾剂，或水剂。优选地，所述化妆品包括但不限于面膜、唇膏、洁面乳、化妆水、护肤水、护肤乳液、护肤霜、护肤啫喱、防晒霜、粉底液、洗发液、护发素和沐浴露。

如无特别说明，本申请中的所有试剂、原料和仪器均市售可得。

如无特别说明，本申请中的所有成分含量的单位“％”均是指质量百分比。

与现有技术相比，本发明具有以下优点:

茉莉根发酵提取物含有多种小分子活性肽和氨基酸，能够抑制炎症因子，从源头上抑制炎症的产生，具有抗炎的功效，从而在一定程度上促进皮肤细胞修复；且茉莉根发酵提取物的原料来自药食同源的茉莉根，对皮肤没有任何刺激性和毒副作用。

附图说明

图1.样品对Raw264.7细胞活力的影响；

图2.样品对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(NO)的影响，所有样品组和诱导组相比，*p<0.05,**p<0.01；

图3.样品对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(IL-6)的影响，所有样品组和诱导组相比，*p<0.05,**p<0.01。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。

实施例制备茉莉根发酵提取物

茉莉根发酵提取物通过以下步骤制备而得：

取茉莉根中药材50kg，碎成100-500μm颗粒状的粗粉；将粗粉与南极假丝酵母脂肪酶3kg和0.lkg吐温80，加入到无水乙醇溶剂中，调节PH值为7.5，控制温在26℃，通氧气进行发酵，发酵时间为35h；得到的发酵液经超声处理1h、过滤、浓缩、经超临界萃取，即得茉莉根发酵提取物。

效果例细胞炎症因子抑制试验

细胞和试剂：巨噬细胞系Raw264.7购自于中国科学院细胞库，RPMI1640培养基采购自Gibco，胎牛血清购自Gibco，普通96孔板，12孔板采购自Corning，CCK-8细胞活力检测试剂盒采购自日本同仁生物，IL-6ELISA试剂盒采购自R&D Systems，地塞米松采购自Sigma。

主要设备：细胞培养箱(Thermo Fisher)，生物安全柜(Labconco)，酶标仪(ThermoFisher)，显微镜，实时荧光定量PCR仪(Applied Biosystems)。

样品准备：本次检测共计2个样品，对每一个样品均进行细胞活力测试和Raw264.7细胞炎症因子(NO和IL-6)抑制实验，样品信息见表1：

表1测试样品信息

样品名称	样品准备	保存条件
			茉莉根提取物	RPMI1640培养基稀释	4℃

实验方法：

1.Raw264.7细胞活力测试

Raw264.7细胞在含5％二氧化碳、37℃的培养条件下，利用含有10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640培养基正常培养。细胞长到90％密度时，将其按照8x10⁴/ml密度接种于96孔板，贴壁48h后，分别加入10个不同浓度(5％、2％、1％、0.5％、0.25％、0.125％、0.063％、0.031％、0.016％、0.008％)的样品(即茉莉根提取物)处理24h，作为10个样品组，并设置一个不加样品的空白组作为对照组，随后按照说明书向对照组和10个样品组中分别加入CCK-8试剂孵育2h，在450nm处测量吸光度。

细胞活力％＝样品组OD值/对照组OD值×100％

2.Raw264.7细胞炎症因子(NO和IL-6)抑制实验

取处于最佳生长状态的Raw264.7细胞，常规处理，细胞悬浮液密度调整到7×10⁴-9×10⁴个/mL，以每孔100μL细胞悬液接种于96孔板中，置于37℃、5％CO₂培养箱培养。实验分为正常组(不含LPS、地塞米松和茉莉根提取物)、诱导组(加入LPS)、抗炎药组(加入地塞米松和LPS)、以及10个样品组(加入LPS和不同浓度的茉莉根提取物)，在加入LPS(Sigma)培养24h后，取上清液检测NO，并用ELISA试剂盒，检测活性物对白介素6(IL-6)的抑制作用。用酶标仪在450nm处测量吸光度。

3.统计方法

所有结果以Mean±SD表示，用one-way ANOVA进行统计分析，*p<0.05，**p<0.01。

4.实验结果

(1)茉莉根提取物对Raw264.7细胞活力的影响

实验结果如图1和表2所示，由此可知，用不同浓度的茉莉根提取物样品处理Raw264.7细胞24h后，各检测浓度对细胞活力均无明显影响(图1)。

表2.样品对Raw264.7细胞活力的影响原始数据

(2)茉莉根提取物对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(NO)的影响

实验结果如图2和表3所示，由此可知，Raw264.7细胞加入LPS以及不同浓度的茉莉根提取物样品分别处理24h，与正常组相比，阳性对照地塞米松能明显抑制LPS诱导的NO表达，抑制率为12.35％(p<0.01)。用不同浓度的样品处理Raw264.7细胞后，在高浓度处(当茉莉根提取物的质量百分比含量为1％～5％时)对NO表达量有显著抑制作用并呈现一定的剂量依赖抑制效果，即含量越高，抑制效果越好，含量为5％时的抑制率为16.13％，含量为1％时的抑制率为13.17％(图2，p<0.01)。

表3.样品对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(NO)的影响原始数据

(3)茉莉根提取物对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(IL-6)的影响

实验结果如图3和表4所示，由此可知，Raw264.7细胞加入LPS以及不同浓度的茉莉根提取物样品分别处理24h，与正常组相比，阳性对照地塞米松能明显抑制LPS诱导的IL-6分泌(图3)，抑制率为75.93％(p<0.01)。用不同浓度的茉莉根提取物样品处理Raw264.7细胞后，在高浓度处(当茉莉根提取物的含量为1％～5％时)对IL-6表达量有显著抑制作用并呈现一定的剂量依赖抑制效果，即含量越高，抑制效果越好，呈现一定的剂量依赖抑制效果，其中5％的样品对IL-6的抑制效果最好，抑制率为46.20％(图3，p<0.01)。样品在低浓度(1％以下)时对IL-6的抑制效果不显著。

表4.样品对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌炎症因子(IL-6)的影响原始数据

5结论

特定含量(1％～5％)的茉莉根提取物对LPS诱导的Raw264.7细胞分泌的炎症因子NO和IL-6有显著抑制作用，具有明显的抗炎功效。

以上所述仅为本发明较佳的实施例，并非因此限制本发明的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本发明说明书内容所做出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本发明的保护范围内。

Claims

1.茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述茉莉根发酵提取物的制备方法包括以下步骤：取茉莉根粉碎成粗粉；将所述粗粉与南极假丝酵母脂肪酶和表面活性剂，加入到溶剂中进行发酵，得到发酵液；所述发酵液经超声处理、过波、浓缩、经超临界萃取，即得所述茉莉根发酵提取物。

2.根据权利要求l所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述发酵的具体条件为：发酵pH为7-8，发酵温度为22-28℃，通入氧气反应30-36h。

3.根据权利要求2所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述发酵的具体条件为：发酵pH为7.5，发酵温度为26℃，通入氧气反应35h。

4.根据权利要求1所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述表面活性剂为吐温80。

5.根据权利要求l所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述溶剂为乙醇溶液，其浓度为10-100％。

6.根据权利要求1所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述超声处理的时间为1-2h。

7.根据权利要求1所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述茉莉根发酵提取物在所述化妆品或药物中的添加量为1％～5％。

8.根据权利要求1所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的载体，所述药学上可接受的载体选自填充剂、粘合剂、增溶剂、崩解剂、助流剂中的任一种或两种以上。

9.根据权利要求1所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述化妆品还包括辅料，所述辅料选自乳化剂、增稠剂、抗氧化剂、保湿剂、柔润剂、抗炎剂、增溶剂、螯合剂、香精、PH调节剂、防腐剂、促渗剂、肤感调节剂、表面活性剂、色素、抛射剂中的任一种或两种以上。

10.根据权利要求9所述的茉莉根发酵提取物在制备抗炎的化妆品或药物中的应用，其特征在于，所述化妆品的剂型为膏霜剂、乳液剂、凝胶剂、气雾剂，或水剂。