ITMI960029A1

ITMI960029A1 - Derivati eterociclo-condensati di morfinoidi

Info

Publication number: ITMI960029A1
Application number: IT96MI000029A
Authority: IT
Inventors: Giulio Dondio; Silvano Ronzoni; Pier Andrea Gatti
Original assignee: Smithkline Beecham Spa
Priority date: 1996-01-10
Filing date: 1996-01-10
Publication date: 1997-07-10
Also published as: IT1282950B1; ITMI960029A0; ZA97172B

Abstract

Si descrivono composti di formula generale (I) (FORMULA I) nella quale i gruppi hanno i significati scritti di seguito. Questi composti sono potenti e selettivi agonisti e antagonisti del recettore delta-oppioidi, e sono utili come agenti farmacologicamente attivi.

Description

Descrizione dell'invenzione industriale avente per titolo: "DERIVATI ETEROCICLO-CONDENSATI DI MORFINOIDI"

La presente invenzione si riferisce a nuovi composti moriinoidi, a procedimenti per la loro preparazione e al loro uso in medicina.

La presenza di almeno tre popolazioni di recettori oppioidi (mu, delta e kappa) è ormai assodata e documentata con certezza e tutti e tre sembrano essere presenti nel sistema nervoso centrale e periferico di molte specie, uomo incluso (Lord J.A.H.et al.,Nature 1977,252, 495).

La attivazione dei tre sottotipi di recettori oppioidi può portare a una risposta antinocicettiva in modelli animali. In particolare, studi con peptidi agonisti del recettore delta (delta-agonisti) hanno indicato che la attivazione del recettore delta produce antinocicezione in roditori, primati e può indurre analgesia clinica nell'uomo (D.E. Moulin, et al. Pain, 1985, 22, 213). L'evidenza sperimentale suggerisce una minore propensione dei delta agonisti nel provocare i consueti effetti collaterali associati con la attivazione di mu e kappa (Galligan et al.,J.Pharm.Exp.Ther.,1984, 229.641).

US 5.223.507 e US 5.225.417 descrivono composti morfinoidi biciclocondensati che si suppone siano agonisti deltaoppioidi terapeuticamente utili come agenti analgesici.

W0 94/07896 descrive composti morfinoidi indolocondensati utili come agenti immunosoppressivi, antiallergici e antiinflaminatori.

E' stata ora trovata una nuova classe di derivati morfinoidi monoeterociclo-condensati che sono potenti e selettivi agonisti e antagonisti dei recettori delta-oppioidi, che quindi possono essere di potenziale utilità terapeutica come analgesici, immunosoppressivi per prevenire il rigetto in trapianti di organi e innesti di pelle, agenti antiallergici e antiinfiammatori, protettori delle cellule cerebrali, agenti per il trattamento dell'abuso di alcool e droghe, gastrite, diarrea, malattie respiratorie e cardiovascolari, tosse, malattie mentali ed epilessia e, in generale, per il trattamento di quelle condizioni patologiche che abitualmente possono essere trattate con agonisti e antagonisti del recettore oppioide delta.

Secondo la presente invenzione,è fornito un composto,o un solvato o un sale di formula (I):

nella quale,

R1 è idrogeno, C1-C6 alchile lineare o ramificato, C3-C7 cicloalchile, C4-C6 cicloalchilalchile, C3-C5 alchenile, arile, aralchile o furan-2 o 3-ile alchile o (CH2)mC0R dove m è da 1 a 5 e K rappresenta idrossi,C1-C5 alcossi, OC3~C6 alchenile o alchilarile o R1 è un gruppo A-B dove A rappresenta C1-C10 alchilene e B rappresenta un arile o eteroarile eventualmente sostituito;

R2 è idrogeno, idrossi o C1-C5 alcossi, preferibilmente metossi, alogeno, nitro, NR8R9, SR8 dove R8 e R9, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, C1-C6 alchile, COR1, preferibilmente acetile;

R3 è idrogeno, idrossi, C1-C5 alcossi,preferibilmente metossi,alogeno, SR8, dove R8 è come sopra definito, preferibilmente idrogeno, nitro, NHR10, NR10R11 , NHCOR10, NHSO2R10 dove R10 e R11, che Possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, o C1-C6 alchile, preferibilmente metile;

R4 e R5, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno indipendentemente idrogeno, idrossi, C1-C5 alcossi, preferibilmente metossi,O-fenile o assieme possono formare un grippo ossi (-0-);

R6 è un gruppo

in cui R3 ha gli stessi significati descritti sopra, l'anello fenilico potendo avere fino a tre gruppi R3, o R6 è il grippo C(Z)R12, nel quale Z è ossigeno o zolfo, R12 è C1-C18 alchile, fenile, idrossi C1-C18 alcossi o NR13R14, dove R13 e R14, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, C1-C6 alchile lineare o ramificato, C3-C7 cicloalchile, C4-C6 cicloalchilalchile, C3-C5 alchenile, arile, aralchile o un anello eterociclico eventualmente sostituito o assieme possono formare un anello C3-C5 alchile che può essere interrotto da un ossigeno o un azoto oppure R6 è un grippo CH2WA, dove W è ossigeno, zolfo o NR13 e A è idrogeno, alchile lineare o ramificato o COR13,dove R13 è come sopra definito ed è preferibilmente metile,

R7 è idrogeno, C1-C18 alchile, C2-C18 alchenile, alogeno, alogeno-C1-6 alchile o è un gruppo

in cui R3 ha lo stesso significato descritto sopra;

n è 0 o 1;

se n è 0, X e Y sono indipendentemente NH, ossigeno o zolfo o CH o un atomo di carbonio sostituito con R6 o R7; se n=l, allora X e Y sono entrambi N,o N e CH.

Quando è arile, esso è preferibilmente fenile e quando è aralchile,esso è preferibilmente fenil-C1-C6-alchile.

Esempi di R1 sono metile, etile,allile,benzile e feniletile.

Esempi di R2 sono idrogeno, idrossi,metossi.

Esempi di R3 sono idrogeno, idrossi,metossi.

Esempi di R4 e R5 sono idrogeno, idrossi, metossi, -0-fenile assieme come gruppo ossi.

Esempi di R6 sono C0NEt2, C0N(i-Pr)2, C0N(i-Pr)CH2Ph, COOEt, CSNEt2, COOH,COMe,CO-i-Bu e COPh.

Esempi di R7 sono metile, i-propile e trifluorometile.

Un gruppo di composti di formula (I) preferiti è quello in cui n=0, X è NH e Y è CH o un atomo di carbonio sostituito con R6 o R7, in cui R6 è un gruppo -C(Z)-R12 dove R12 è C1-6-alchile, C1-4-alcossi o NR13 e R14 sono come definiti sopra e Z è ossigeno e R7 è metile o alogeno-Ci_2~ alchile.

Composti di formula (I) particolarmente preferiti sono quelli in cui R6 è un gruppo C0NEt2, C0N{i-Pr)2 o COOEt e R3 è trifluorometile.

I composti di formula (I) o i loro sali o solvati sono preferibilmente sotto forma farmaceuticamente accettabile o sostanzialmente pura. Per forma farmaceuticamente accettabile si intende, tra l'altro, un livello di purezza farmaceuticamente accettabile, esclusi i normali additivi farmaceutici, quali diluenti e veicoli, e non comprendendo materiali considerati tossici ai normali livelli di dosaggio.

Una forma sostanzialmente pura generalmente conterrà almeno il 50% (esclusi i normali additivi farmaceutici), preferibilmente il 75%, più preferibilmente il 90% e ancora più preferibilmente il 95% del composto di formula (I)o il suo sale o solvato.

Una forma farmaceuticamente accettabile preferita è la forma cristallina, comprendendo tale forma in una composizione farmaceutica. Nel caso di sali e solvati anche lo ione addizionale e la porzione solvente devono essere non tossici.

Esempi di sali farmaceuticamente accettabili di composti di formula (I) comprendono i sali di addizione con convenzionali acidi farmaceutici, ad esempio maleico, cloridrico, bromidrico, fosforico, acetico, fumarico, salicilico, citrico, lattico, mandelico, tartarico, benzoico,ascorbico e metansolfonico.

I composti di formula (I) possono esistere in più di una forma stereoisomera,e l'invenzione si estende a tutte queste forme come pure alle loro miscele,compresi i racemati.

La presente invenzione fornisce anche un procedimento per la preparazione di un composto di formula {I). In generale, questi composti possono essere preparati mediante il metodo illustrato nei seguenti schemi di reazione generali, o mediante loro modificazione, usando materiali di partenza facilmente reperibili, reagenti e procedure sintetiche convenzionali. Se si desidera un particolare enantiomero di un composto della presente invenzione, questo può essere sintetizzato a partire dal desiderato enantiomero del materiale di partenza ed eseguendo reazioni che non coinvolgono processi di racemizzazione o può essere preparato mediante sintesi chirale, o per derivazione con un ausiliario chirale, dove la risultante miscela diastereoisomerica è separata e il gruppo ausiliare viene scisso per fornire i desiderati enantiomeri puri. Alternativamente, dove la molecola contenga un gruppo funzionale basico, quale ammino, o un gruppo funzionale acido, quale carbossi, sali diastereoisomeri sono formati con un opportuno acido o base otticamente attivi, seguiti da risoluzione del sale diastereoisomero con cristallizzazione frazionata e successivo recupero degli enantiomeri puri.

Composti (I) nei quali n=0, X è NH e Y è un atomo di carbonio sostituito con R7 possono essere ottenuti a partire da chetoni di formula (II) e idrazoni di formula (III), in presenza di Zn e CH3COONa in CH3COOH come solvente (Khimiya Geterot., 1972, 342) come descritto nello schema 1:

Schema 1

Composti (I) in cui n=0, X è NH e Y è un atomo di carbonio sostituito con R6, possono essere ottenuti per ciclizzazione di alogeno chetoni di formula (IV), con chetoni di formula (V) in presenza di NH4OH (Can.J.Chem.,1970,1S, 1689)come descritto nello schema 2:

Schema 2

Conposti (I)in cui n=0,X è un atomo di ossigeno e Y è un atomo di carbonio sostituito con R7 , possono essere ottenuti mediante ciclizzazione di chetoni di formula (II) con a-alogenochetoni (preferibilmente α-clorochetoni) di formula (VI), in presenza di una base. (J.Org.Chem.,1984,12,2317)come descritto nello schema 3:_

Schema 3

Composti (I) in cui n=0,X è un atomo di ossigeno e Y è un atomo di carbonio sostituito con R6, possono essere ottenuti mediante ciclizzazione dei bromochetoni di formula (IV) con chetoni (V) in etanolo in presenza di una base (preferibilmente EtONa) (J. Chem. Soc. Perkin I, 1972, 2372)come descritto nello schema 4:

Schema 4

Composti (I) in cui n=0, X è un atomo di zolfo e Y è un atomo di carbonio sostituito con R7, possono essere preparati da β-dichetoni di formula generale (VII) (sintetizzati per reazione di Claisen, a partire dai chetoni (II)ed esteri di formula R7-C00Et (J.Am.Chem. Soc., 1945, 51, 1510) e mercapto derivati di formula (Vili) in presenza di HC1 (DE 1,088,507; C.A., 1962,56, 456), come descritto nello schema 5:

Schema.5

Composti (I) in cui n=0, X è un atomo di zolfo e Y è un atomo di carbonio sostituito con R6, possono essere ottenuti facendo reagire amercaptochetoni (IX) (che possono essere preparati a partire dai bromochetoni (IV) e H2S/KOH (J.Am. Chem. Soc., 1985, 107. 4175) con un alchino derivato di formula (X), in un solvente quale DMSO, in presenza di una base quale t-BuOK (Chem. Ber., 1964, 22, 2109), come descritto nello schema 6:

Schema 6

Composti (I) in cui n=0, X e Y sono entrambi N, possono essere ottenuti da idrossiimmino-derivati (XV) e imidoil cloruri R6 e R7-sostituiti di formula (XVI) in mezzi basici, e successivo trattamento degli intermedi con H+ in toluene a ricadere (J. Org. Chem., 1993,

7092)come descritto nello schema 7:

Schema 7

Composti di formula (I) in cui n=l, X è N e Y CH possono essere ottenuti facendo reagire α-idrossimetilenechetoni (XI) (che possono essere preparati da chetoni (II) per condensazione con HCOOEt in presenza di una base (Org. Synth. Coll., 1963, 4, 536) con enammine (XII) (J. Ind.Chem.Soc., 1935,12, 289)come descritto nello schema 8:

Schema 8

Composti di formula (I) in cui n=l, e X e Y sono N possono essere ottenuti a partire α-idrossiimminochetoni (XIII) (che possono essere preparati da chetoni (II) e nitrito di i-amile come descritto in J.Med.Chem., 1991, 34, 1715) con etandiammine (XIV) e successiva aromatizzazione dell'intermedio (Chem. Ber., 1967, 100. 555) come descritto nello schema 9:·

Schema 9

I composti di formula (I) nei quali R6 = CH2WA possono essere preparati a loro volta da composti di formula (I) per interconversione chimica dei gruppi R6 quali esteri, ammidi, tioammidi con metodi noti in letteratura.

I composti di formula (I) possono essere convertiti nei loro sali farmaceuticamente accettabili per reazione con gli opportuni acidi organici o minerali.

Solvati dei composti di formula (I) possono essere formati per cristallizzazione e ricristallizzazione dal solvente appropriato. Per esempio, gli idrati possono esser formati per cristallizzazione o ricristallizzazione da soluzioni acquose, o soluzioni in solventi organici contenenti acqua.

Anche i sali o solvati dei composti di formula (I) che non sono farmaceuticamente accettabili possono essere utili come intermedi per la produzione di sali o solvati farmaceuticamente accettabili. Di conseguenza, tali sali o solvati sono parte della presente invenzione.

In generale i composti di formula (I), in quanto agiscono come ligandi selettivi dei recettori delta, possono essere utili come analgesici, immunosoppressori per prevenire il rigetto in trapianti di organi e innesti di pelle, agenti antiallergici e antiinflaminatori, protettori delle cellule cerebrali,agenti per il trattamento dell'abuso di alcool e droghe, per diminuire la secrezione gastrica, per il trattamento di diarrea, malattie cardiovascolari, tosse e depressioni respiratorie,malattie mentali, convulsioni epilettiche e altri disturbi neurologici {di seguito riferiti come "Condizioni"). In particolare, l'attività dei composti di formula (I) come delta-agonisti in prove convenzionali indica che essi sono di potenziale utilità terapeutica come agenti analgesici per il miglioramento o eliminazione del dolore.

Pertanto, la presente invenzione fornisce anche l'uso di un composto di formula (I) o di un suo sale o solvato farmaceuticamente accettabile, come sostanza terapeuticamente attiva.

La presente invenzione fornisce inoltre una composizione farmaceutica comprendente un composto di formula (I), o di un suo sale o solvato farmaceuticamente accettabile, e un veicolo farmaceuticamente accettabile.

La presente invenzione fornisce anche l'uso di un composto di formula (I), o di un suo sale o solvato farmaceuticamente accettabile, nella fabbricazione di un medicamento per il trattamento delle Condizioni.

Tale medicamento, e una composizione di questa invenzione, possono essere preparati per miscelazione di un conposto con un opportuno veicolo. Questo può contenere un diluente, un riempitivo, un disintegrante, aromatizzanti, coloranti, lubrificanti o conservanti in modo convenzionale.

Questi eccipienti convenzionali possono essere inpiegati per esempio come nella preparazione di composizioni di noti agenti per il trattamento delle condizioni.

Preferibilmente,una composizione farmaceutica dell'invenzione è in una forma di unità di dosaggio adatta per l'uso in campo medico e veterinario. Per esempio, tali preparazioni possono essere sotto forma di confezione accompagnata da istruzioni scritte o stampate per l'uso come agente per il trattamento delle condizioni.

L'opportuno intervallo di dosaggio per i conposti della invenzione dipende dal conposto che deve essere inpiegato e dalle condizioni del paziente. Dipenderà anche, tra le altre cose, dalla relazione tra potenza e assorbibilità e dalla frequenza e via di somministrazione.

Il composto o conposizione dell'invenzione può essere formulato per la somministrazione secondo qualsiasi via, ed è preferibilmente sotto forma di unità di dosaggio o in una forma tale per cui un paziente umano può auto-somministrarsela in una singola dose. Vantaggiosamente, la composizione è adatta per la somministrazione orale, rettale, topica, parenterale,endovenosa o intramuscolare. Le preparazioni possono essere concepite per assicurare un lento rilascio del principio attivo.

Le composizioni possono, per esempio, essere sotto forma di compresse,capsule, bustine, fiale, polveri, granuli, pastiglie,polveri ricostituibili, o preparazioni liquide, per esempio soluzioni o sospensioni, o supposte.

Le composizioni, per esempio quelle adatte alla somministrazione orale,possono contenere eccipienti convenzionali,quali agenti leganti.

per esempio sciroppo, acacia, gelatina, sorbitolo, gomma adragante, o polivinilpirrolidone; riempienti, ad esempio lattosio, zucchero, amido di mais, fosfato di calcio, sorbitolo o glieina; lubrificanti di conpressione, per esempio stearato di magnesio; disintegranti, per esempio amido, polivinilpirrolidine, sodio amido glicolato o cellulosa microcristallina; o agenti di formatura farmaceuticamente accettabili, quale laurilsolfato di sodio.

Composizioni solide possono essere ottenute mediante metodi convenzionali di miscelazione, riempimento, compressione o simili. Ripetute operazioni di miscelazione possono essere usate per distribuire il principio attivo per tutte quelle composizioni che impiegano grandi quantità di riempitivi. Quando la composizione è sotto forma di compressa o pastiglia, si può usare qualsiasi veicolo utile per la formulazione di composizioni farmaceutiche solide, esempi sono stearato di magnesio, amido, glucosio, lattosio saccarosio, farina di riso e gesso. Le compresse possono essere rivestite secondo metodi noti nella normale pratica farmaceutica, in particolare con rivestimenti gastroresistenti. La composizione può anche essere sotto forma di capsula ingeribile, per esempio di gelatina contenente il composto, se desiderato con un veicolo o altri eccipienti.

Conposizioni liquide per somministrazione orale possono essere sotto forma di, per esempio, emulsioni, sciroppi, o elisir, o possono essere presentate come prodotto secco da ricostituire in acqua o altro veicolo adatto prima dell'uso. Tali conposizioni liquide possono contenere additivi convenzionali quali agenti sospendenti, per esempio, sorbitolo, sciroppo, metilcellulosa, gelatina, idrossietilcellulosa, carbossimetilcellulosa, gel di stearato di alluminio, grassi idrogenati alimentari; agenti emulsionanti, ad esempio lecitina, sorbitan monooleato,o acacia; veicoli acquosi o non acquosi,che comprendono oli alimentari, per esempio olio di mandorle, olio di cocco frazionato, esteri oleosi, ad esempio, esteri di glicerina, o glicol propilenico, o alcool etilico, glicerina, acqua normale o soluzione fisiologica; conservanti, per esempio p-idrossibenzoato di metile o propile o acido sorbico; e se desiderato aromatizzanti e coloranti convenzionali.

I composti della presente invenzione possono anche essere somministrati per via non orale. Secondo la normale procedura farmaceutica, le composizioni possono essere formulate,per esempio,per via rettale come supposte. Esse possono anche essere formulate per la presentazione sotto forma di iniettabile in soluzione, sospensione o emulsione acquosa o non acquosa in un liquido farmaceuticamente accettabile, ad esempio acqua sterile apirogena o un olio o un mistura di liquidi accettabili per la via parenterale. Il liquido può contenere batteriostatici, antiossidanti o altri conservanti, tamponi o soluti tali da rendere la soluzione isotonica con il sangue, agenti addensanti, agenti sospendenti o altri additivi farmaceuticamente accettabili. Tali forme saranno presentate in forme di unità di dosaggio quali fiale o dispositivi per iniezione monouso o in forme multidose, quali una bottiglia dalla quale può essere prelevata la dose appropriata o una forma solida o concentrata che può essere usata per preparare una formulazione iniettabile.

I composti della presente invenzione possono anche essere somministrati per inalazione, attraverso la via nasale o orale. Tali somministrazioni possono essere eseguite con una formulazione spray conprendente un composto dell'invenzione e un adatto veicolo, eventualmente sospeso in,per esempio,un idrocarburo propellente.

Formulazioni spray preferite comprendono particelle micronizzate dei composti in associazione con un tensioattivo, solvente o un agente disperdente per prevenire la sedimentazione delle particelle sospese. Preferibilmente, la dimensione delle particelle è da 2 a 10 micron.

Un altro modo di somministrazione dei composti dell'invenzione comprende il rilascio transdermico utilizzando una formulazione tipo cerotto dermico. Una formulazione preferita conprende un conposto dell1invenzione disperso in un adesivo sensibile alla pressione che aderisce alla pelle, permettendo quindi al composto di diffondere dall'adesivo attraverso la pelle per il rilascio al paziente. Per una costante velocità di assorbimento, si possono usare adesivi sensibili alla pressione noti nell'arte quali gomma naturale o silicone.

Come sopra citato, la dose efficacie del composto dipende dal particolare composto utilizzato, la condizione del paziente e la frequenza e via di somministrazione. Una unità di dosaggio generalmente conterrà da 20 a 1000 mg e preferibilmente conterrà da 30 a 500 mg, in particolare 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, o 500 mg. La composizione può essere somministrata una o più volte al giorno, ad esempio 2, 3 o 4 volte al giorno e la dose totale per un adulto da 70 kg sarà normalmente nell'intervallo da 100 a 3000 mg di principio attivo.

Alternativamente la dose unitaria conterrà da 2 a 20 mg di ingrediente attivo e sarà somministrata più volte, se desiderato, a dare la precedente dose giornaliera.

Non sono previsti effetti tossicologici inaccettabili con i composti dell'invenzione quando somministrati secondo la presente invenzione.

La presente invenzione fornisce anche un metodo per il trattamento e/o la profilassi delle Condizioni in mammiferi, in particolare esseri umani,che comprende il somministrare a un mammifero avente la necessità di un simile trattamento e/o profilassi una quantità efficace di un composto di formula (I) o un suo sale o solvato farmaceuticamente accettabile.

L'attività dei conposti della presente invenzione come deltaligandi selettivi è stata determinata mediante i saggi di legame con radioligando descritti di seguito.

Membrane di cervello di topo furono preparate come descritto da Kosterlitz (Br. J. Pharmacol., 1981, 22, 939). Il legame del deltaligando preferenziale [1⁄2]-[D-Ala2,D-Leu5]encefalina (DADLE) fu valutato alla sua concentrazione di Kp (1,3 nM) alla presenza di 40 nM del ligando mu non marcato [D-Ala ,MePhe ,Gly-olJ]encefalina (DAMGO). Il legame del ligandi mu [1⁄2]-DAMGO (Eur. J. Pharmacol., 1989, 166. 213) e del ligando kappa [1⁄2]-U69593 (Excerpta Medica., 1990, 211) furono condotti a 0,5 nM. Il legame non specifico fu determinato in presenza di naloxone (10 μΜ) per tutti i ligandi triziati. I dati di legame furono espressi come inibizione percentuale e si accordavano con la seguente equazione dove X sono i valori di concentrazione del farmaco non marcato (freddo). Le IC50 ottenute furono usate per calcolare le costanti di inibizione (Ki) secondo la relazione di Cheng e Prusoff (Biochem.Pharmacol., 1973,22, 3099).

L'attività delta-agonista/antagonista dei composti della presente invenzione è determinata nel saggio biologico di CAMP in cellule NG108-15 come descritto di seguito.

Cellule NG108-15 furono cresciute a 37’C in atmosfera umidificata di CO2 al 5% e 95% di aria in DMEM (senza piruvato di sodio usando 4500 mg/1 di glucosio) addizionato con siero fetale bovino al 10% contenente glutammina 2mM, supplemento 2% HATx50, 50 yg di streptomicina e 50 I.U. di penicillina per mi di cellule confluenti che furono raccolte con EDTA 1M in soluzione fisiologica con fosfati esenti da Ca/Mg sotto agitazione meccanica. Il terreno era sostituito ogni 2 giorni. Un giorno prima dell'esperimento le cellule furono distribuite in piastre da coltura da 17 mm (circa 10x106 cellule/piastra). Dopo un giorno, il terreno di crescita fu rimosso e le cellule furono lavate due volte con un terreno di Krebs-Ringer tamponato con pH 7,4,che conteneva NaCl (125), KC1 (5), KH2P04 (0,4), MgS04 e CaCl2 (1,2), NaHC03 (25), glucosio (12). Il terreno di incubazione comprendeva inoltre 3-isobutil-l-metilxantina (IBMX) ImM. Gli esperimenti furono effettuati a temperatura ambiente. Dopo incubazione per 10 minuti per permettere l'incorporazione di IBMX, le cellule NG108-15 furono esposte a forskolina 1 μΜ e al composto in esame, per 10 minuti. La reazione fu terminata aggiungendo HC1040,4N freddo.Dopo 15 minuti, i surnatanti freddi erano raccolti con cautela e neutralizzati inpiegando K2CO31M. Dopo un'incubazione per una notte a 4*C i tubi furono centrifugati a 9000 rpm per 5 minuti, e un'aliquota da 100 pi analizzata per il contenuto di cAMP impiegando il kit disponibile commercialmente I cAMP RIA. I pellet dalle piastre originali furono sciolti in NaOH 0,5N e il contenuto di proteine fu determinato con il metodo descritto da Bradiort (Anal. Biochem. 1976, 22/ 248). I dati furono normalizzati al contenuto di proteina.

I più potenti composti descritti nella presente invenzione mostravano affinità per il recettore delta comprese fra 0,5 e 200 nM con selettività delta variabile da 20 a 1500 volte rispetto agli altri tipi di recettore. Questi composti mostravano anche potenti proprietà deltaagoniste o antagoniste nel biosaggio di inibizione di cAMP. Deltaagonisti selettivi (antagonizzati dal delta-antagonista selettivo naltrindolo) mostravano IC50 comprese fra 1 e 500 nM. Per esempio, il composto dell'esempio 10 mostra una Ki delta=2,9 nM, Ki mu/Ki delta=840 e Ki kappa/Ki delta=600. Il composto dell'Esempio 1 mostrava un'attività agonista nell'inibizione di cAMP stimolata da forskolina in cellule NG108-15 (IC50 = I5 nM) completamente antagonizzata dal delta-agonista selettivo naltrindolo (100 nM).

La costrizione addominale nel topo (MAC) (Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1957, 25, 729), lo spostamento della coda del topo (mouse tailflick MTF) (J.Pharm.Exp.Ther., 1941, 22/ 74)e lo spostamento della coda del topo in acqua calda (MTF-WW) (Life Sci., 1986, 32/ 1795) furono addottati per valutare l'efficacia antinocicettiva dei composti della presente invenzione.

I seguenti esempi illustrano la preparazione dei composti di formula generale (I) della presente invenzione. I conposti 1 e da 2 a 6 e da 8 a 19 seguono la stessa procedura generale descritta nell'Esempio 1, partendo dai corrispondenti noti idrazoni di formula generale III. Il composto 7, ottenuto per interconversione chimica del gruppo R6, è illustrato nell'esempio 2. I composti 1-19 sono riassunti nella tabella chimica.

ESEMPIO 1

[8R-(4bS*,8α,8aβ,12bβ)]-11-{N-Benzil-N-isopropilammino)-7,10-dimetil-lmetossi-5,6,7,8,12,12b-esaidro-(9H)-4,8-metanobenzofuro[3,2-e]pirrolo-[2,3-g] isochinolina cloridrato

0,65 g (2,17 mmoli) di 7,8-diidrocodeinone cloridrato, 2,2 g (6,51 mmoli) di N-benzil-N-isopropil-2-fenilidrazono-3-ossobutirammide, vengono sciolti in una miscela composta da 10 mi di acido acetico glaciale e 0,54 g (6,51 mmoli) di C^COONa. La soluzione risultante viene scaldata a 60 "Ce si aggiungono a piccole porzioni, in atmosfera di N2, 0,57 g (8,6 mmoli)di Zn in polvere. La miscela viene portata a riflusso per 2 h, raffreddata a temperatura ambiente, decantata ed i sali lavati con piccole porzioni di acido acetico. Le soluzioni riunite vengono basificate a pH 8 ed estratte più volte con acetato di etile. Gli estratti organici riuniti vengono anidrificati su sodio solfato ed evaporati sotto vuoto. Il residuo viene purificato con cromatografia a media pressione su silice (15-25 m), eluente AcOEt/MeOH/NH4OH conc.

90:10:0,5) quindi il prodotto viene sciolto in acetone/MeOH 1:1 e alla soluzione viene aggiunto HCl/Et20. Il precipitato viene filtrato, lavato e asciugato ottenendo 0,5 g del composto desiderato. P.f. = 304 "C dee.

ESEMPIO 2

[ 8R- ( 4bS* ,8α, 8aβ , 12bβ ) ] -11-Diet ilanminot iocarbonil-7 , 10-dimetil-l-metossi-5,6,7,8,12,12b,esaidro-(9H)-4,8-metanobenzofuro[3,2-e]pirrolo[2,3-g] isochinolina cloridrato

1 g (2,3 mmoli) di [8R-(4bS*,8a,8af5,12bp)]-ll-dietilamminocarbonil-7,10-dimetil-l-metossi-5,6,7,8,12b-esaidro-{9H)-4,8-metanobenzofuro[3,2-e]pirrolo[2,3-g]isochinolina, 0,950 g (2,3 mmoli) di reattivo di Lawesson,vengono sciolti in 40 mi di toluene e la miscela viene portata a riflusso per 4 ore. Il solvente viene rimosso a pressione ridotta, quindi il residuo viene ripreso in cloruro di metilene e lavato con una soluzione satura di NaHCO3. La fase organica viene anidrificata su sodio solfato.Dopo evaporazione del solvente, il residuo viene purificato con cromatografia flash (eluente, QH2Cl2/MeOH/NH4OH conc. 86:10:0,6) quindi il prodotto viene sciolto in acetone e alla soluzione viene aggiunto HCl/Et20. Il precipitato viene filtrato sciolto in MeOH e trattato con carbone attivo all'ebollizione per 30'. Dopo aver filtrato il carbone, il metanolo viene evaporato a pressione ridotta. Il residuo viene triturato con Et20 ottenendo 0,41 g del composto desiderato. P.f. > 250°C.

Claims

RIVENDICAZIONI 1. Composti di formula generale (I)

nella quale, R1 è idrogeno, C1-C6 alchile lineare o ramificato, C3-C7 cicloalchile, C4-C5 cicloalchilalchile, C3-C5 alchenile, arile, aralchile o furan-2 o 3-ile alchile o (CH2)mC0R dove m è da 1 a 5 e R rappresenta idrossi, C1-C5 alcossi, OC3~C6 alchenile o alchilarile o R1 è un gruppo A-B dove A rappresenta C1-C10 alchilene e B rappresenta un arile o eteroarile eventualmente sostituito; R2 è idrogeno, idrossi o C1-Cg alcossi, preferibilmente metossi, alogeno, nitro, NR8R9, SR8 dove R8 e R9, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, C1-C6 alchile, COR1, preferibilmente acetile; R3 è idrogeno, idrossi, C1-C5 alcossi,preferibilmente metossi,alogeno, SR8, dove R8 è come sopra definito, preferibilmente idrogeno, nitro, NHR10, NR10R11/ NHCOR10, NHSO2R10 dove R10 e R11, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, o C1-C6 alchile, preferibilmente metile; R4 e R5, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno indipendentemente idrogeno, idrossi, C3-C5 alcossi, preferibilmente metossi, Ofenile o assieme possono formare un gruppo ossi (-0-); R6 è un gruppo

in cui R3 ha gli stessi significati descritti sopra, l'anello fenilico potendo avere fino a tre gruppi R3, o R6 è il gruppo C(Z)R12, nel quale Z è ossigeno o zolfo, R12 è C1-C18 alchile, fenile, idrossi C1-C18 alcossi o NR13R14, dove R13 e R14, che possono essere uguali o diversi, sono ciascuno idrogeno, C1-C6 alchile lineare o ramificato, C3-C7 cicloalchile, C4-C6 cicloalchilalchile, C3-C6 alchenile, arile, aralchile o un anello eterociclico eventualmente sostituito o assieme possono formare un anello C3-C6 alchile che può essere interrotto da un ossigeno o un azoto oppure R6 è un grippo CH2WA, dove W è ossigeno, zolfo o NR13 e A è idrogeno, alchile lineare o ramificato o C0R13,dove R13 è come sopra definito ed è preferibilmente metile, R7 è idrogeno, C1-C18 alchile, C2-C18 alchenile, alogeno, alogeno-C1-6 alchile o è un gruppo

in cui R3 ha lo stesso significato descritto sopra; n è 0 o 1; se n è 0, X e Y sono indipendentemente NH, ossigeno o zolfo o CH o un atomo di carbonio sostituito con R6 o R7; se n=l, allora X e Y sono entrambi N,o N e CH; loro forme stereoisomeriche,comprese le miscele e i racemati, loro sali e solvati farmaceuticamente accettabili.
2. Composti secondo la rivendicazione 1, in cui n=0,XèNHeYèCHo un atomo di carbonio sostituito con R6 o R7, in cui R6 è un grippo -C(Z)-R12 dove R12 è C1-6-alchile, C1-4-alcossi o NR13 e R14 sono come definiti sopra e Z è ossigeno e R7 è metile o alogeno-C1_2~alchile .
3. Composti secondo la rivendicazione 1, in cui R6 è un gruppo C0NEt2, C0N(i-Pr)2 o COOEt e R3 è trifluorometile.
4. Composti secondo la rivendicazione 1, in cui R1 è fenile o fenil-C1 -C6-alchile .
5. Composto secondo la rivendicazione 1, scelto nel gruppo costituito da:
6. Composti delle rivendicazioni 1-5 in qualità di agenti terapeutici.
7. Uso dei composti delle rivendicazioni 1-5 per la preparazione di un medicamento come analgesico, immunosoppressore per prevenire il rigetto in trapianti, antiallergico e antiinfiammatorio, protettore delle cellule cerebrali, per il trattamento dell'abuso di alcol e droghe, per diminuire la secrezione gastrica, per il trattamento di diarrea, di malattie cardiovascolari e depressioni respiratorie, malattie mentali, convulsioni epilettiche e disturbi neurologici.
8. Composizioni farmaceutiche contenenti uno o più composti delle rivendicazioni 1-5 in qualità di principi attivi, in miscela con veicoli ed eccipienti farmaceuticamente accettabili.