HUT74383A - Cyclic neurokinin a antagonists - Google Patents

Cyclic neurokinin a antagonists Download PDF

Info

Publication number
HUT74383A
HUT74383A HU9602157A HU9602157A HUT74383A HU T74383 A HUT74383 A HU T74383A HU 9602157 A HU9602157 A HU 9602157A HU 9602157 A HU9602157 A HU 9602157A HU T74383 A HUT74383 A HU T74383A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
trp
seq
arg
leu
gly
Prior art date
Application number
HU9602157A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9602157D0 (en
Inventor
Stephen H Buck
Scott L Harbeson
Elizabeth M Kudlacz
Thomas J Owen
Original Assignee
Merrell Pharma Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merrell Pharma Inc filed Critical Merrell Pharma Inc
Publication of HU9602157D0 publication Critical patent/HU9602157D0/hu
Publication of HUT74383A publication Critical patent/HUT74383A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/22—Tachykinins, e.g. Eledoisins, Substance P; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/27—Cyclic peptide or cyclic protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Ciklusos neurokinin A antagonista vegyületek
A találmány háttere
A találmány tárgya új ciklusos peptid vegyületek, amelyek neurokinin A antagonista anyagok, valamint ezek gyógyszerészetileg elfogadható sói.
A neurikinin A és a hasonló tachikinin vegyületek, a P vegyület és a neurokinin B természetesen előforduló peptidek, amelyek a test szöveteken belül széles körben előfordulnak és számos biológiai hatással rendelkeznek. Kimutatták úgyan, hogy a tachikinin vegyületek a központi idegrendszerben is szerepet játszanak, azonban hatásuk nagy része a perifériás szövetekben vizsgált. Például a neurokinin A hatásosan összeszükíti, illetve összehúzza a légúti simaizmokat és ugyanakkor kisebb hatást fejt ki a nyálka szekrécióra, az értágításra és a hajszálér szivárgásra, és így feltehető, hogy ezek a vegyületek elsődlegesen új hörgő szűkítő ellenes hatóanyagként alkalmazhatók. Más szövetek, amelyekben a neurokinin A kimutatható és simaizom összehúzódást okoz, például az iris záróizom, a különféle gasztrointestinális traktus részek, az érrendszer, a húgy-ivarszerv rendszer beleértve a húgyvezetéket, a vesemedencét és a húgyhólyagot és ez feltételezi, hogy a tachikinin antagonisták görcs ellenes szerként alkalmazhatók.
A ciklusos peptidek alkalmazása, amelyek egy adott konformációban rögzítettek és exoproteázokkal szemben stabilizáltak, ismertek, mint peptid receptor antagonisták és ezeket a szakirodalomban leírták. Például az EP-A-0 190 946 számú szabadalmi bejelentésben leírtak ciklusos hexapeptideket, • · · · ··· · · · · · • · · · · ··· ·· ·· ·
IL amelyek LH-RH-receptor antagonisták. Az EP-A-0 528 312 számú szabadalmi bejelentésben ismertetettek ciklusos hexapeptideket, amelyek endothelin receptor antagonista hatásúak és bizonyos peptidek csoportját, amelyek NK-2 receptor antagonisták. Ezen túlmenően a WO 92/02546 számú szabadalmi bejelentésben leírtak ciklusos heptapeptideket, mint például a ciklo[-Val-trp-trpArg-Asp-Tyr-trp-J vegyületet, amelyek alkalmasak mint NK-2 receptor antagonista vagy inhibitor anyagok. Hasonlóan a Williams és munkatársai, J. Med. Chem., 36, 2-10 (1993) közleményben húsz ciklusos peptidet írtak le, amelyek a P vegyület C-terminális szekvenciájával kapcsolatosak és amelyek közül bizonyos peptid mimézis részt tartalmaznak, és szelektív NK-2 receptor antagonista anyagok. Ezen túlmenően a Harbeson és munkatársai, J. Med. Chem., 35, 3949-3955 (1992) közleményben leírták a [Leu10]NKA4.1ü analóg vegyületek szintézisét ismertetik, amelyek mindegyike amid kötést tartalmaz és amely kötést ezután redukált T(CH2NH)-amid-redukált kötéssel helyettesítenek, abból a célból, hogy az NK-2 antagonista hatást bizonyítsák. A leírt Asp-Ser-Phe-Valβ-Αΐ3-1_βυΨ[0Η2Ν(0Η2)20Η3]-ΡΐΊβ-ΝΗ2 peptid IC50 értéke 1 nm.
A találmány tárgya vegyületek vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóik, amelyek alkalmasak az említett betegségek kezelésére vagy megelőzésére. Mivel feltételezik továbbá, hogy a tachikinin vegyületek szerepet játszanak a gyulladásos és az immun szerkezet reakcióiban, ezek a vegyületek potenciálisan alkalmasak olyan betegségek kezelésre, amelyek gyulladással, beleértve az asztmát, az allergiákat, a bronchitist, a rhinitist, a Crohn betegséget, a fekélyes colitist, a reumás izületi gyulladást, az osteoarthritist, a migrént, a cistitist és a túlzott érzékenység reakciókat, kapcsolatosak. A tachikinin antagonizmus ugyancsak alkalmazható különféle köhögés, fájdalomérzet, perifériás neuro62.637/SM ο •.J pátia, herpes neuralgia utáni állapot, ellentétes immun reakciók, hányás, véráram rendellenességek, amelyek értágulatból származnak, szem betegségek, mint például kötöhártyagyulladás és kután megbetegedések, mint például érintkezési dermatitis, atópiás dermatitis, urticaria és hasonlók kezelésére. Ezen túlmenően a vegyülettel kezelhetők különféle központi idegrendszeri rendellenességek, mint például szorongás, depresszió, pszichózis, skizofrénia és dementia és ebben a kezelésben a tachikinin antagonisták felhasználhatók.
A találmány összefoglalása
A találmány tárgya az (1), (2), (3) és (4) általános képletű vegyületek, valamint ezek hidrátjai, sztereoizomerjei, izoszterjei és gyógyszerészetileg elfogadható sói.
Részletesebben a találmány tárgya az (1) általános képletű vegyület, amely egy ciklusos-hexapeptid, ahol az általános képletben Rt jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R2 jelentése benzilcsoport. 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
R3 jelentése 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport; és X jelentése hidrogénatom vagy R3 általános képletű csoport jelentése és X csoport jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
R5 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
azzal a feltétellel, hogy amennyiben R2 jelentése -(CH2)2-CONH2-csoport, akkor Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport és az Rt csoporthoz kapcsolódó szénatom konfigurációja (R);
62.637/SM t
vagy ezen vegyületek hidrátja. izoszter formája vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója.
A találmány tárgya ezen túlmenően a (2) általános képletű új peptid vegyületek, ahol az általános képletben
Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; és
R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
vagy ezen vegyületek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
A találmány tárgya továbbá új (3) általános képletű új peptid vegyületek, ahol az általános képletben
B, jelentése 1-4 szénatomos lineáris vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
B2 jelentése (CH2)4-NH2-csoport, (CH2)3-NH2-csoport, (CH2)3-NHC(=NH)NH2-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
B3 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
B4 jelentése hidrogénatom vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
vagy ezen vegyületek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
A találmány tárgya továbbá a (4) általános képletű új peptid vegyületek, ahol az általános képletben
Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport; és
Q jelentése p-klór-benzil-csoport, p-nitro-benzil-csoport, p-NH2-benzil-csoport, p-metoxi-benzil-csoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (a) képletű csoport, (b) képletű csoport vagy (c) képletű csoport;
X’ jelentése hidrogénatom;
62.637/SM • · t
t • ··· · ··· · « · · · · · ······· · · ·· ·
- 5 ahol Q és X’ jelentése a kapcsolódó szénatommal vagy nitrogénatommal együttesen, amelyhez egyenként kapcsolódnak a (d) képletű vagy a (e) képletű csoportok vagy ezek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
A találmány tárgya továbbá eljárás különféle légzőrendszeri betegségben szenvedő betegtek kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen betegnek terápiásán hatásos mennyiségű (5) általános képletű vegyületet vagy sztereoizomerjét vagy izoszterjét vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóját adagoljuk, ahol az általános képletben
Rt jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R2 jelentése benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
R3 jelentése 1-5 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, és X jelentése hidrogénatom vagy R3 és X jelentése egymáshoz kapcsolódva -(CH2)3-csoport;
R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
W jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport és Z jelentése hidrogénatom vagy W és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
azzal a feltétellel, hogy amennyiben R2 jelentése (CH2)2-COOH-csoport, akkor R1 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport és az Rt csoporthoz kapcsolódó szénatom abszolút konfigurációja (R).
A találmány tárgya továbbá eljárás fájdalomcsillapító hatás kifejtésére ilyen hatást igénylő betegben oly módon, hogy a betegnek az (1), (2), (3), (4)
62.637/SM
L t vagy (5) általános képletű vegyület vagy sztereoizomerje, izoszter formája vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formája terápiásán hatásos mennyiségét adagoljuk.
Az ábrák rövid leírása
Az 1. ábrán bemutatjuk a ciklusos peptid ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] (MDL 102,882) képességét dózisfüggő antagonista hatás kifejtésére az NKAindukált foszfatidil-inozitol (Pl) forgalomra SKLKB82#3 sejtekben. Az adatokat a teljes inozitol-foszfát akumuláció stimulálás százalékban fejezzük ki az alap szintre vonatkoztatva és ezt az adatot normáljuk az NKA által kifejtett maximális válaszfüggvényre vonatkoztatva. Az adatok átlag ± S.E.M. értékek négy eltérő kísérlet eredményeiből számítva. Az egyes dózis-válaszfüggvény vonalakat az alábbiakban adjuk meg és ezek az 1. ábrán láthatók.
-----g---- NKA (EC50 = 5.82 nM)
----------- NKA + 30 nM ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] ------Δ---- NKA + 300 nM cikio[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Giy] - -.....-.......A---- NKA + 3 liM ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly]
------$----- ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly]
A találmány részletes leírása
A leírásban az „1-5 szénatomos lineáris vagy elágazó szénláncú alkilcsoport” elnevezés alatt olyan egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoportokat értünk, amelyek 1-5 szénatomot tartalmaznak. Ilyen csoportok lehetnek például a metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropilcsoport, butil-csoport, izobutil-csoport, terc-butil-csoport, pentil-csoport, izopentil-csoport, szek-pentil-csoport, ciklopentil-csoport és hasonló csoportok.
62.637/SM
A „sztereoizomer elnevezés alatt általában olyan egyes izomer vegyületeket értünk, amelyek csak egyes atomjaik térbeli elrendeződésében különböznek egymástól. Ezek az izomerek lehetnek tükörképi izomerek (enantiomerek), geometriai izomerek (cisz/transz izomerek), illetve egynél több királis centrumot tartalmazó vegyületek izomerjei. amelyek egymásnak nem tükörképi párjai (diasztereomerek). Az aminosavak esetében a D/L vagy R/S elnevezéseket az IUPAC-IUB Joint Commission of Biochemical Nomenclature, Eur. J. Biochem. 138: 9-37 (1984) szakirodalomban leírtaknak megfelelően alkalmazhatjuk. Az „(R) abszolút konfigurációjú elnevezés alatt olyan szénatomot értünk, amelyhez az Rt csoport ilyen értelemben kapcsolódik. A természetes aminosavak a glicin kivételével királis szénatomot tartalmaznak. Hacsak másképp nem jelöljük, a találmány szerinti előnyös vegyületek optikailag aktív aminosavakat tartalmaznak, amelyek L-konfigurációjúak, azonban a találmány tárgykörébe az (1), (2), (3) vagy (4) általános képletű vegyületek esetében azokat az aminosavakat is beleértjük, amelyek akár D- vagy L-konfigu-rációjúak lehetnek vagy az aminosavak lehetnek D- és L-izomerek keverékei, beleértve a racém keverékeket is. A leírásban a swv elnevezés alatt olyan kötést értünk, amelynek sztereokémiája nem megadott. A (2) és (4) általános képletű vegyületek 2 helyzetében található aminosav „D” elnevezése, illetve a (3) általános képletű vegyület 14 helyzetében található aminosav „D” elnevezése azt jelenti, hogy az adott helyzetekben található aminosav maradék (azzal a kivétellel, amikor az aminosav maradék glicin), minden esetben „D” konfigurációjú. Az a-aminosavak rövidítéseit, amelyek a szakirodalomban szokásos rövidítések, az I. táblázatban adjuk meg.
62.637/SM
I. táblázat
Aminosav Jelölés
Alanin Alá
Glicin Gly
Izoleucin Ile
Leucin Leu
Lizin Lys
Fenil-alanin Phe
Arginin Arg
Tirozin Tyr
Triptofán Trp
Valin Val
Norvalin Nva
Noeleucin Nle
Glutánsav Glu
Prolin Pro
Ornitin Orn
p-klór-fenil-alanin p-CI-Phe
p-nitro-fenil-alanin p-NO2-Phe
p-NH2-fenil-alanin p-NH2-Phe
1,2,3,4-tetrahid ro-izoki no I i n- -7-hidroxi-3-karbonsav Tiq(OH)
1,2,3,4-tetrahid ro-izokinolin- -4-karbonsav Tiq
Naftil-alanin Nal
Fluorenil-glicin Fig
Difenil-alanin Dpa
62.637/SM i
- 9 Az „izoszter” elnevezés alatt olyan normál peptid-kötéseket értünk a kapcsolódó aminosavak között (-C(O)NH-), amely esetben ez a kötés módosított és -CH2NH-kötés (redukált), C(O)N(CH3)-kötés (N-metil-amid). -COCH2kötés (keto), -CH2(OG)CH2-kötés (hidroxil), -CH(NH2)CH2-kötés (amino), -CH2CH2-kötés (szénhidrogén) vagy invertált kötés (-HN(C=O)-). Előnyösen a találmány szerinti vegyületek nem izoszter formák.
Az (1), (2), (3), (4) és (5) általános képletü vegyületek gyógyszerészetileg elfogadható sót képezhetnek bármely nem toxikus szerves vagy szervetlen savval. Alkalmazható szervetlen savak, amelyek alkalmas sót képeznek, a sósav, a hidrogén-bromid, a kénsav és a foszforsav, valamint a savas fémsók, mint például a nátrium-monohidrogén-ortofoszfát és a kálium-hidrogén-szulfát. Alkalmazható szerves savak, amelyek alkalmas sót képeznek, például a monodi- és a tri-karbonsavak. Ilyen savak lehetnek például az ecetsav, a glikolsav, a tejsav, a piruvinsav, a malonsav, a borostyánkősav, a glutársav, a fumársav, az almasav, a borkősav, a citromsav, az aszkorbinsav, a maleinsav, a hidroximaleinsav, a benzoesav, a hidroxi-benzoesav, a fenil-ecetsav, a fahéjsav, a szalicilsav, a 2-fenoxi-benzoesav, és a szulfonsavak, mint például a metánszulfonsav és a 2-hidroxi-etánszulfonsav.
Előnyös találmány szerinti vegyületek az olyan (1), (2), (3), (4) és (5) általános képletü vegyületek, ahol az általános képletben R-i jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; ahol az Rt csoportok D- vagy L-aminosavakból származhatnak, amelyek lehetnek sorrendben fenil-alanin, tirozin és triptofán;
R2 jelentése benzil-csoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2 csoport; ahol az R2 csoportok D- vagy L-aminosavakból származhatnak, amelyek lehetnek sorrendben fenil-alanin, triptofán vagy glutamin;
62.637/SM • · · · · · • ··· · ··· • · · · · ······« ·· ··
- 10R3 jelentése 1-5 szénatomos lineáris vagy elágazó szénláncú alkilcsoport és X jelentése hidrogénatom vagy R3 és X jelentése egymáshoz kapcsolódva -(CH2)3-csoport; ahol az R3 csoportok, illetve az R3 és X csoportok kombinációban a D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, . amelyek lehetnek sorrendben: glicin, alanin, leucin, izoleucin, norleucin, valin, norvalin vagy prolin;
R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport. 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport; ahol az R4 csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, amelyek lehetnek sorrendben: glicin, fenil-alanin, triptofán vagy tirozin;
R5 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport; ahol az R5 csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, amelyek lehetnek sorrendben: glicin, alanin vagy triptofán:
Bt jelentése 1-5 szénatomos lineáris vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; ahol a Bt csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, amelyek lehetnek sorrendben: glicin, alanin, leucin, izoleucin, norleucin, valin, norvalin, fenil-alanin, tirozin vagy triptofán;
B2 jelentése (CH2)4-NH2 csoport, (CH2)3-NH2 csoport, (CH2)3-NHC(=NH)NH2 csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; és a fenti B2 csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, amelyek lehetnek sorrendben: lizin, ornitin, arginin vagy triptofán;
B3 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; ahol a fenti
B3 csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le, amelyek lehetnek sorrendben: tirozin vagy triptofán;
62.637/SM t
- 1 1 B4 jelentése hidrogénatom vagy (CH2)2-CONH2 csoport, ahol a fenti B4 csoportok D- vagy L-aminosavakból származtathatók le. amely aminosavak lehetnek sorrendben: glicin vagy glutamin;
Q jelentése p-klór-benzil-csoport, p-nitro-benzil-csoport. p-NH2-benzil-csoport, p-metoxi-benzil-csoport vagy (a), (b) vagy (c) képletű csoport és X' jelentése hidrogénatom; vagy Q és X' jelentése a kapcsolódó szénatommal és nitrogénatommal együttesen lehet (d) vagy (e) képletű csoport és a fenti Q csoport, illetve a Q és X' csoportok együttese D- vagy L-aminosavakból vezethető le. amelyek sorrendben lehetnek: p-klór-fenil-alanin, p-nitro-fenil-alanin, p-NH2-benzii-csoport, metil-tirozin, naftil-alanin, fluorenil-glicin, difenil-alanin, 1,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-3-karbonsav vagy 1,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-7-hidroxi-3-karbonsav; és
W jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport és Z jelentése hidrogénatom vagy W és Z jelentése együttesen -(CH2)3- csoport.
Előnyös (1) találmány szerinti vegyületek, ahol az általános képletben
R1 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport.
Találmány szerinti (1) általános képletű előnyös vegyületek rövidített formái a ciklo[AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6] vagy az (A) általános képletű ciklusos szerkezet, ahol AA1-AA6 jelentése a fent megadott aminosavak rövidített formái, amelyeket az RrR6 csoportokra megadtunk az (1) általános képletű vegyülettel kapcsolatban és megadásukat sorrendben végeztük.
62.637/SM i
Előnyösebb (1) általános képleten találmány szerinti vegyületek, ahol az általános képletben
Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom:
R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R5 jelentése hidrogénatom.
A (2) általános képletű vegyületek előnyösebb vegyületek csoportját képezik az (1) általános képletű vegyületeken belül. A 2-5 helyzetű aminosavak valamennyi esetben meghatározott sztereokémiával rendelkeznek és a 2 helyzetű aminosav sztereokémiája (D) konfiguráció, míg a 3-5 helyzetű aminosavak konfigurációja (L). A (2) általános képletű vegyületek rövidített leírása lehet: ciklo[AA1-trp-Leu-Arg-Trp-AAb] vagy a (B) ciklusos szerkezet, ahol trp jelentése D-triptofán, Leu jelentése L-leucin, Arg jelentése L-arginin, Trp jelentése L-triptofán és AA1 és AAD jelentése az aminosav maradékokra megadott általános képlet, amelyeket a (2) általános képlettel kapcsolatban az R-j és R6 csoportokkal kapcsolatban megadtunk.
Az (1) és (2) általános képletű találmány szerinti új peptidek példái az alábbi rövidített formában megadott vegyületek:
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 6
ciklofT rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7
ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Gly] SEQ. ID 9
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] SEQ. ID 10
ci kló [T yr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. ID 11
ciklo[T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12
62.637/SM β · • · · ϊ
I
ci klo[T yr-trp-Ala-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 13
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] SEQ. ID 14
ciklo[tyr-Gln-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 15
ci kló [T yr-trp-Leu-Arg-T yr- Alá] SEQ. ID 16
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Gly-T rp] SEQ. ID 17
ci klo[T yr-trp-Pro-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 18
ciklo[Phe-phe-Pro-Arg-Phe-Gly] SEQ. ID 19
Előnyös (3) általános képletű találmány szerinti vegyületek, ahol az általános képletben
Bt jelentése CH2CH(CH3)2 csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
B2 jelentése (CH2)3-NHC(=NH)NH2 csoport vagy 3-indolil-metil-csoport.
A (3) általános képletű vegyületek rövidített képlete lehet: ciklo[AA11-AA12-AA13-AA14-Leu-Arg-Trp-Gly] vagy a (C) általános képletű ciklusos szerkezet.
Előnyös (3) általános képletű vegyületek, ahol az általános képletben
Bt jelentése CH2CH(CH3)2 csoport:
B2 jelentése (CH2)3-NHC(=NH)NH2 csoport;
B3 jelentése 3-indolil-metil-csoport: és
B4 jelentése hidrogénatom; vagy
Bt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport;
B2 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
B3 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport; és
B4 jelentése (CH2)2-COOH csoport.
A (3) általános képletű vegyületek reprezentatív példái rövidített formában az alábbiak:
ciklo[Leu-Arg-Trp-Gly-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 20
62.637/SM • ··· · ··· · • · · · · · ······· ·· ·· · ciklo[Tyr-Trp-Tyr-glu-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID21
Előnyös (4) általános képletü vegyületek, ahol az általános képletben:
R1 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport:
X' jelentése hidrogénatom
Q jelentése p-klór-benzil-csoport. p-nitro-benzil-csoport. p-NH2-benzil-csoport vagy (a) képletü csoport.
A (4) általános képletü új peptidek reprezentatív példái rövidített formában az alábbi vegyületek:
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Na1-Gly] SEQ. ID 22
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NO2-Phe)-Gly] SEQ. ID 23
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NH2-Phe)-Gly] SEQ. ID 24
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-C1-Phe)-Gly] SEQ. ID 25
Előnyös (5) általános képletü találmány szerinti vegyületek, ahol az általános képletben:
R! jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indoíil-metil-csoport;
R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
W jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport és Z jelentése hidrogénatom vagy W és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport.
Az előnyös (5) általános képletü vegyületek rövidített leírása az alábbi: ciklo[AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6] vagy az (A) általános képletü ciklusos szerkezet, ahol AA1-AA6 jelentése az aminosav maradékok általános képlete, amelyeket korábban sorrendben az (5) általános képletü vegyületre R^Rg csoportokkal kapcsolatban megadtunk.
62.637/SM * ·
Előnyös (5) általános kepletü vegyületek azok a vegyületek, ahol az általános képletben:
R1 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport:
R5 jelentése hidrogénatom.
Az (5) általános képletü vegyületek reprezentatív példái az alábbi rövidítésű peptid vegyületek:
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 6
ci kló [T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7
ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8
ciklojT yr-trp-Leu-Arg-T yr-Gly] SEQ. ID 9
ciklojT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] SEQ. ID 10
ci k I ο [T yr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. ID 11
ci kló [T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12
ci ki ο [T yr-trp-Ala-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 13
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] vagy SEQ. ID 14
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Pro] SEQ. ID 26
Általában az (1)-(5) általános képletü vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy a megfelelő lineáris peptideket, amelyeket standard kémiai eljárásokkal nyertünk, ciklizálási reakcióban reagáltatjuk. Az A reakcióvázlatban bemutatjuk az (1), (2), (4) és (5) általános képletü ciklusos hexapeptidek előállítási eljárását, azonban a (3) általános képletü ciklusos oktapeptid vegyületeket ugyancsak előállíthatjuk a reakcióvázlat szerinti eljárásnak megfelelően.
62.637/SM
A reakcióvázlat
H2N-CH(R)-C(=O)-X (1)
AA°, AA4, AA3', AA2. AA1 kapcsolás
AA1-AA2-AA3-AA4-AA3-NH-CH(R)-C(=O)-X SEQ. ID 27 ciklizálás ciklo[AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6] SEQ. ID 28
Az A reakcióvázlatban bemutatunk egy általános szintetikus eljárást az (1)-(5) általános képletű vegyületek előállítására.
Az AA1, AA2, AA3, AA4 és AA3 általános képletű csoportok az (1) általános képletű aminosav származék szabad aminocsoportjához kötöttek lehetnek Az AA1, AA2, AA3, AA4 és AA'5 általános képletű csoportok a nem védett szabad aminocsoporthoz a szakirodalomban ismert pepiid kapcsolási eljárások segítségével köthetők. Az így kapcsolt lineáris peptid származékot ezt követően jól ismert peptid ciklizálási eljárással ciklizálhatjuk.
Általában a peptidek meghosszabbítását úgy végezzük, hogy az a-aminocsoportot a C-terminális csoporton védöcsoport mentesítjük, majd a következő alkalmasan védett aminosavat peptid kötésen keresztül a fent leírt eljárások segítségével kapcsoljuk a molekulához. A fenti védöcsoport eltávolítás! és kapcsolási eljárás addig ismételhető, amíg a megfelelő szekvenciát nem nyerjük. A kapcsolási reakciót végrehajthatjuk az A reakcióvázlatban leírt lépésenként! aminosav komponensek kapcsolásával vagy különféle fragmensek kondenzációjával (amelyek kettő - több aminosavat tartalmaznak) vagy a két eljárás kombinálásával vagy végrehajthatjuk szilárd fázisú peptid szintézis segít
62.637/SM ségével a Merrifield, J. Am. Chem. Soc.. 1963. 85. 2149-2154 közleményben leírt eljárásnak megfelelően, amely közleményt referenciaként adunk meg. Amennyiben szilárd fázisú szintetikus eljárást alkalmazunk, a C-terminális karbonsavat kapcsoljuk egy oldhatatlan hordozóanyaghoz, amely általában polisztirol. Ezek az oldhatatlan hordozóanyagok általában olyan csoportot tartalmaznak, amely az iz-karboxilcsoporttal reagál, és így egy stabil kötést képez, amely kötés a meghosszabbítási reakciókörülmények között nem bomlik, azonban később könnyen hasítható. Ilyen kötések nem limitáltan például: klórvagy bróm-etil gyanták, hidroxi-metil-gyanták és amino-metil-gyanta. Számos fenti gyanta kereskedelemben rendelkezésre áll és olyan formában, amely már a kívánt C-terminális aminosavat kötött formában tartalmazza. Számos alkalmasan védett aminosavat amenyet a fenti szintézisben alkalmazunk, kereskedelemben is beszerezhetünk. A difenil-glicin és a fluorenil-glicin aminosavak kereskedelemben ugyan nem kaphatók, azonban a szakirodalomban ismert eljárásokkal, például Chassaing, Josien, Lavielle, „Proceedings of the Eleventh American Peptide Symposium” és Martin J. O'Donnell and Robin L. Polt, J. Orq. Chem., 1982, 47, 2663-2666 közelményekben leírt módszerrel előállíthatok.
Más eljárással a találmány szerinti vegyületeket automatizált peptid szintézis berendezéssel állíthatjuk elő. Ezen túlmenően peptid szintézis eljárásokat írtak le a Stewart és Young, „Solid Phase Peptide Synthesis”, 2nd ed., Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984); Gross, Meienhofer, Udenfriend, Eds., „The peptides: Analysis, Syntheis, Biology, Vol 1, 2, 3, 5 és 9, Academic Press, New York, 1980-1987; Bodanszky, „Peptide Chemistry: A Practical Textbook”, Springer-Verlag, New York (1988); és Bodanszky és munkatársai,
62.637/SM
18„The Practical of Peptide Synthesis Springer-Verlag, New York (1984) közleményekben, amelyeket referenciaként adunk meg.
A két aminosav egy aminosav és egy peptid vagy két peptid fragmens közötti kapcsolási reakciót a szakirodalomban ismert eljárásokkal hajthatjuk végre. Ezek az eljárások lehetnek például azid-eljárás, vegyes karbonsav anhidrid (izobutil-klór-formiát) eljárás, karbodiimid (diciklohexil-karbodiimid, diizopropil-karbodiimid vagy vízoldható karbodiimid) eljárás, aktív észter (p-nitro-fenil-észter, N-hidroxi-szukcinimido-észter) eljárás, Woodward reagens K eljárás, karbonil-diimidazol eljárás, foszfor reagenst, mint például BOP-CI alkalmazó eljárás vagy oxidációs-redukciós eljárás. Az egyes eljárások ezek közül (különösen a karbodiimid eljárás) elösegíthetök 1-hidroxi-benzo-triazol adagolásával. A kapcsolási eljárásokat oldatban (folyékony fázisban) vagy szilárd fázisú reakcióban is végrehajthatjuk.
Az egyes felépítő aminosavak funkciós csoportjait a kapcsolási reakció során védőcsoporttal láthatjuk el abból a célból, hogy a nem kívánt reakciókat elkerüljük. Az alkalmazott védőcsoportok lehetnek például a Greene, „Protective Groups in Organic Chemisty, John Wiley & Sons, New York (1981) és „The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology”, Vol. 3, Academic Press, New York (1981) közleményben leírt védőcsoportok, amely közleményeket referenciaként adunk meg.
A C-terminális savmaradék α-karboxil-csoportját általában észter formában védhetjük, amelyet megfelelően hasíthatunk és így karbonsavat nyerhetünk. Az alkalmazható védőcsoportok lehetnek például: 1) alkil-észterek, mint például metil-észter és terc-butil-észter, 2) aril-észterek, mint például benzil-észter és szubsztituált benzil-észter vagy 3) észterek, amelyek enyhe bázikus
62.637/SM
- 19körülmények között vagy enyhe redukciós körülmények között hasíthatok, mint például triklór-etil-észter és fenacil-észter.
Az egyes aminosavak a-aminocsoportja védőcsoporttal látandó el. Bármely szakirodalomban ismert védőcsoport alkalmazható erre a célra. Ilyen alkalmazható védőcsoportok például: 1) acil-típusú csoportok, mint például formilcsoport, trifluor-acetil-csoport, ftalil-csoport és p-toluolszulfonil-csoport;
2) aromás karbamát-típusú csoportok, mint például benziloxi-karbonil-csoport (Cbz vagy Z) és szubsztituált benziloxi-karbonil-csoportok, 1 -(p-bifenil)-l-metil-etoxi-karbonil-csoport és 9-fluorenil-metiloxi-karbonil-csoport (Fmoc); 3) alifás-karbamát típusú csoportok, mint például terc-butoxi-karbonil-csoport (Boc), etoxi-karbonil-csoport, diizopropil-metoxi-karbonil-csoport és alliloxi-karbonil-csoport; 4) ciklusos alkil-karbamát típusú csoportok, mint például ciklopentiloxi-karbonil-csoport és adamantiloxi-karbonil-csoport; 5) alkil-típusú csoportok, mint például trifenil-metil-csoport és benzilcsoport; 6) trialkil-szilil-csoportok, mint például trimetil-szilil-csoport; és 7) tiol csoportot tartalmazó csoportok, mint például feniltio-karbonil-csoport és ditiaszukcinoil-csoport. Előnyösen alkalmazható a-aminocsoport védőcsoportok a Boc csoport vagy az Fmoc csoport, különösen előnyösen az Fmoc csoport. Számos védett aminocsoporttal rendelkező aminosav származék a peptid szintézis céljára kereskedelemben is kapható.
Az α-aminocsoport védőcsoportot a következő aminosav kapcsolása előtt a vegyületről eltávolítjuk. Amennyiben védőcsoportként Boc csoportot alkalmazunk, az eltávolítás! eljárás lehet trufluor-ecetsav önmagában vagy diklórmetános oldatban vagy dioxánban készült sósavgáz oldat alkalmazása. A kapott ammónium sót ezt követően vagy a kapcsolás előtt semlegesítjük vagy
62.637/SM
- 20a kapcsolás során in situ semlegesítjük bázikus oldat, mint például vizes puffer vagy tercier-aminok diklórmetános oldata vagy dimetil-formamid adagolásával. Amennyiben védöcsoportként Fmoc csoportot alkalmazunk, a hasításban alkalmazott reagensek lehetnek piperidin vagy szubsztituált piperidin dimetil-formamidban készült oldata, de bármely másodrendű amin vagy vizes bázis oldat alkalmazása is lehetséges. A védöcsoport eltávolítás! reakciót 0°C és szobahőmérséklet közötti hőmérsékleten hatjuk végre.
Az olyan aminosavakat, amelyek az oldalláncon funkcionális csoportot tartalmaznak, védőcsoporttal kell ellátni a peptid előállítása során és erre a célra bármely fent leírt védőcsoportot alkalmazhatunk. A szakember felismeri és meghatározhatja az alkalmas védőcsoportot, illetve az oldalláncon bevezetendő védőcsoport bevezetési, majd később hasítási eljárását. Az ilyen oldallánc védőcsoportok megválasztása olyan szempontból alapvető befolyású, hogy ezek a csoportok a védőcsoport eltávolítás során, illetve az (z-aminosav-csoport kapcsolása során nem hasadhatnak. Például amennyiben Boc csoportot alkalmazunk az α-aminocsoport védöcsoportjaként, az aminosav oldallánc aminocsoportjaiban p-toluol-szulfonil-csoport (tozilcsoport) védőcsoportot alkalmazhatunk olyan aminosavak esetében, mint például az Lys és az Arg. Amennyiben az α-aminocsoport védőcsoportként Fmoc csoportot alkalmazunk, az oldalláncban általában terc-butil-alapú védőcsoportokat alkalmazhatunk. Például arginin esetében Boc csoportot használhatunk.
Amennyiben a peptidlánc meghosszabbítása befejeződött, valamennyi védőcsoportot eltávolítjuk. Amennyiben oldatbani szintetikus eljárást alkalmazunk, a védőcsoportokat bármely eljárással eltávolíthatjuk, amelyek megfelel62.637/SM nek a védöcsoportok jellegének. Az ilyen eljárások a szakirodalomban jól ismertek.
Amennyiben szilárd fázisú szintézis eljárást alkalmazunk, a pepiidet a gyantáról általában ugyanabban a lépésben hasítjuk le, amely lépésben a védőcsoportokat is eltávolítjuk. Amennyiben Boc védőcsoportot alkalmazunk a szintézisben, a vegyületet vízmentes HF segítségével kezeljük, amely reakcióelegy segédanyagokat, mint például dimetil-szulfidot, anizolt, tioanizolt vagy p-krezolt is tartalmaz. A reakciót 0°C hőmérsékleten hajtjuk végre és ez előnyös eljárás a peptid gyantáról történő lehasításában. A peptid hasítási eljárását továbbá végrehajthatjuk más savas reagensek, mint például trifluor-metánszulfonsav/trifluor-ecetsav keverék segítségével is. Amennyiben Fmoc védőcsoportot alkalmazunk a szintézisben, az N-terminális Fmoc csoportot a fent leírt reagensek segítségével hasíthatjuk. Az egyéb védőcsoportokat, illetve a pepiidet a gyantáról például trifluor-ecetsav és különféle adalékanyagok, mint például anizol, stb. alkalmazásával hasíthatjuk le.
A lineáris peptid gyantáról történő eltávolítása, illetve bármely védőcsoport hasítása után a lineáris peptidet ciklizálási reakcióban reagáltatjuk, amely reakciót szokásos eljárásokkal hajtunk végre. A ciklizálási reakció lehet például trietilaminnal és difenil-foszofril-aziddal dimetil-formamid oldószerben végzett reakció. A nyerstermék ciklikus peptid tisztítása előtt, amely lehet kromatográfia, bármely védőcsoportot és funkcionális csoport prekurzort eltávolítunk a molekulából, illetve kívánt csoporttá alakítunk.
Az alábbi példákon részletesen bemutatjuk a jellemző szintézis eljárást. A példák illusztratív jellegűek és nem korlátozzák a találmány tárgykörét. A példákban az alábbi rövidítéseket alkalmazzuk: „g” gramm; „mmol” millimol; „ml” milliliter; „fp” forráspont; „°C Celsius fok; „Hgmm” higanymilliméter; „pl”
62.637/SM
22mikroliter; „gg” mikrogramm; „iim” mikromol; „BrZ bróm-benziloxi-karbonil-csoport; „Tos p-toluolszulfonil-csoport: „Bzl benzilcsoport; „NMP” N-metil-pirrolidinon; „HOBt” 1-hidroxi-benzotriazol; „DCC” N,N-diciklohexil-karbodiimid; „DCM” diklórmetán; „DMF” dimetil-formamid; „DPPA difenil-foszforilazid”; „TEA” trietil-amin.
1, példa ciklo|Tyr-trp-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ. IP 6 előállítása
A. Lineáris peptid előállítása
Az 1. példa szerinti pepiidet standard szilárd fázisú eljárással állítjuk elő Applied Biosystems 430A automata peptid szintetizátor alkalmazásával és a gyártó által megadott protokollnak megfelelően. Kereskedelemben kapható Boc-aminosavakat alkalmazunk, amelyek az alábbi védőcsoportokkal rendelkeznek: Tyr(BrZ), Arg(Tos), Glu(Bzl). Kereskedelemben kapható Boc-Gly-PAM gyantát (0,5 mmol, Applied Biosystems) védőcsoportját eltávolítjuk 2% anizol alkalmazásával végzett trifluor-ecetsavas kezeléssel, majd ezt követően a vegyületet NMP oldószerben Boc-aminosavak (4 ekvivalens) HOBt észtereivel kapcsoljuk. A Boc-aminosavak HOBt észtereit úgy képezzük, hogy a Bocaminosavat DCC reagenssel és HOBt reagenssel reagáltatjuk. A kapcsolási reakciót 30 percen át végezzük, majd ezt követően a gyantát NMP és DCM oldószerekkel mossuk. Ezután bármely nem elreagált amint ecetsav-anhidrid segítségével acilezünk. A védőcsoport eltávolítást, illetve a kapcsolási reakciót mindaddig ismételjük, amíg a megfelelő védett peptid-gyanta szekvencia előállítását elérjük. Ezt követően a lineáris pepiidet párhuzamosan védőcsoport mentesítjük és a gyantáról lehasítjuk. Ezt a reakciót vízmentes hidrogén-fluorid (10 ml) reakciójával végezzük 0°C hőmérsékleten 30 perc időtartamon át 5%
62.637/SM
- 23amizol jelenlétében. Ezután a peptidet 50% ecetsav segítségével, majd vízzel és vizes acetonitrillel extraháljuk, majd liofilizáljuk.
B, A lineáris peptid ciklizálása
A nyerstermék lineáris peptidet DMF oldószerben (kb. 5 umol/ml) oldjuk, majd DPPA (5 ekvivalens) TEA eleggyel ciklizáljuk úgy, hogy a pH értéket 9 értékre állítjuk be. A reakció befejezése után (4-48 óra) az oldószert elpárologtatjuk, majd a nyerstermék ciklikus peptidet acetonitril/víz elegy alkalmazásával liofilizáljuk. A ciklikus peptidet ezután 70% ecetsav alkalmazásával Spectragel GF05 olszlopon (2,5 x 55 cm) gélszűréssel sómentesítjük. Ezután a terméket reverz fázisú preparatív HPLC (nagygynomású folyadékkromatográfia (Dynamax C18, 21,4 x 250 mm, Rainin) alkalmazásával tisztítjuk. A tisztítás során különféle gradiens 0,1% vizes TFA és acetonitril elegyet alkalmazunk. A tisztított peptidet ezután analitikai HPLC (nagynyomású folyadékkromatográfia) (Vydac 218TP54, 4,6 x 250 mm) segítségével, valamint FAB-MS spektrum alapján és aminosav analízis alapján azonosítjuk.
Mól tömeg: 861,4
AAA: Tyr 0,95(1); Leu 0,99(1); Arg 1,01(1); Gly 1,05(1).
FAB-MS spektrum: 862,4
A 2-29. példák szerinti vegyületeket az 1. példa szerinti eljárásnak megfelelően állítjuk elő és azonosítjuk:
2, példa ciklofTrp-trp-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ. IP 7 előállítása
Mól tömeg: 884,4
AAA: Leu 0,96(1); Arg 0,99(1); Gly 1,05(1).
FAB-MS spektrum: 885,4.
62.637/SM
2-U
3. példa ciklo[tyr-trp-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ, ID 8 előállítása
Mól tömeg: 861,4
AAA: Tyr 1,00(1); Leu 0,95(1): Arg 1,00(1); Gly 1,05(1).
FAB-MS spektrum: 862,3
4. példa ciklolTyr-trp-Leu-Arq-Tyr-Gly] SEQ. ID 9 előállítása
Mól tömeg: 838,4
AAA: Tyr 1,91(2); Leu 0,91(1); Arg 1,01(1); Gly 1,17(1).
FAB-MS spektrum: 839,4
5. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-Trp-Ala] SEQ. ID 10 előállítása
Mól tömeg: 875,4
AAA: Tyr 0,96(1); Leu 0,94(1); Arg 1,05(1); Alá 1,05(1).
FAB-MS spektrum: 876,3
6. példa ciklofTyr-trp-Leu-Arq-Trp-Ala] SEQ. ID 11 előállítása
Mól tömeg: 875,4
AAA: Tyr 0,.97(1); Leu 0,95(1); Arg 1,03(1); Alá 1,04(1).
FAB-MS spektrum: 876,3
7. példa ciklo|Tyr-Trp-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ. ID 12 előállítása
Mól tömeg: 861,4
AAA: Tyr 0,97(1); Leu 0,99(1); Arg 0,98(1); Gly 1,07(1).
FAB-MS spektrum: 862,4
62.637/SM
8. példa cikloíTyr-trp-Ala-Arq-Trp-Gly] SEQ. ID 13 előállítása
Mól tömeg: 819,4
AAA: Tyr 0,95(1); Arg 0,99(1); Gly 1,05(1); Alá 1,02(1).
FAB-MS spektrum: 820,4
9. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ. ID 14 előállítása
Mól tömeg: 861,4
AAA: Tyr 0,96(1); Leu 0,99(1); Arg 1,00(1); Gly 1,06(1).
FAB-MS spektrum: 862.3
10. példa ciklo[tyr-Gln-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ. ID 15 előállítása
Mól tömeg: 803,4
AAA: Tyr 0,95(1); Leu 1,01(1); Arg 0,92(1); Gly 1,07(1); Glx 1,04(1).
FAB-MS spektrum: 804,5
11. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-Tyr-Ala] SEQ-ID 16 előállítása
Mól tömeg: 852,4
AAA; Tyr 1,98(2); Leu 0,96(1); Arg 1,05(1); Alá 1,01(1).
FAB-MS spektrum: 853,4
12. példa cikloíTyr-trp-Leu-Arq-Gly-Trp] SEQ ID 17 előállítása
Mól tömeg: 861,4
AAA: Tyr 0,83(1); Leu 0,89(1); Arg 1,10(1); Gly 1,19(1).
FAB-MS spektrum: 862,3
62.637/SM
13. példa ciklolTyr-trp-Pro-Arq-Trp-Gly] SEQ IP 18 előállítása
Mól tömeg: 845,4
AAA: Tyr 0,90(1); Arg 1,01(1); Gly 1,10(1); Pro 0,98(1).
FAB-MS spektrum: 846,3
14. példa ciklo[Phe-phe-Pro-Arq-Phe-Gly] SEQ IP 19 előállítása
Mól tömeg: 751,4
AAA: Arg 1,03(1); Gly 1,12(1); Pro 1,02(1); Phe 2,82(3).
FAB-MS spektrum: 752,3
15. példa cíklofl_eu-Arq-Trp-Glv-l_eu-Arq-Trp-Gly] SEQ IP 20 előállítása
Mól tömeg: 1024,6
AAA: Leu 2,00(2); Artg 1,90(2); Gly 2,10(2).
FAB-MS spektrum: 1025,4
16. példa cikloíTyr-Trp-Tvr-qlu-Leu-Arq-Trp-Gly] SEQ IP 21 előállítása Mól tömeg: 1152,5
AAA: Tyr 1,94(2); Leu 1,00(1); Arg 0,97(1); Glyx 1,03(1); Glx (1).
FAB-MS spektrum: 1153,5
17. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-Nal-Gly] SEQ IP 22 előállítása
Mól tömeg: 872,5
AAA: Tyr 0,94(1); Leu 0,98(1); Arg 1,01(1); Gly 1,08(1).
FAB-MS spektrum: 873,4
62.637/SM • · · · · · ·
18. példa cikloíTyr-trp-Leu-Arq-Íp-NO^-Phej-Gly] SEQ ID 23 előállítása
Mól tömeg: 867,4
AAA: Tyr 0,95(1); Leu 0,97(1); Arg 1,02(1); Gly 1,08(1).
FAB-MS spektrum: 868,4
19. példa ciklofTyr-trp-Leu-Arq-(p-NI-l9Phe)-Gly] SEQ ID 24 előállítása
Mól tömeg: 837,4
AAA: Tyr 0,97(1); Leu 0,98(1); Arg 1,00(1); Gly 1,06(1).
FAB-MS spektrum: 838,4
20. példa cíklo[Tvr-trp-Leu-Arq-(p-CI-Phe)-Gly] SEQ ID 25 előállítása
Mól tömeg: 857,4
AAA: Tyr 0,97(1); Leu 0,98(1); Arg 1,00(1); Gly 1,05(1).
FAB-MS spektrum: 857,3
21. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Flq)-Gly1(l) SEQ ID 29 előállítása
Mól tömeg: 896,5
AAA: Tyr 0,96(1); Leu 0,99(1); Gly 1,06(1).
FAB-MS spektrum: 879,5
22. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Flq)-Glyl(ll) SEQ ID 30 előállítása
Mól tömeg: 896,5
AAA: Tyr 0,94(1); Leu 1,01(1); Gly 1,06(1).
FAB-MS spektrum: 897,5
62.637/SM i
23. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Dpa)-Gly](l) SEQ ID 31 előállítása
Mól tömeg: 898,5
AAA: Tyr0,97(1); Leu 1,04(1); Gly 1,00(1).
FAB-MS spektrum: 899,5
24. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Dpa)-Gly](ll) SEQ ID 32 előállítása
Mól tömeg: 898,5
AAA; Tyr 1,00(1); Leu 1,04(1); Gly 0,97(1).
FAB-MS spektrum: 899,4
25. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Me-Tyr)-Gly] SEQ ID 33 előállítása
Mól tömeg; 852,4
AAA; Leu 0,97(1); Arg 0,99(1); Gly 1,04(1).
FAB-MS spektrum: 853,4
26. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Tig)-Gly1 SEQ ID 34 előállítása
Mól tömeg: 834,4
AAA: Tyr 0,96(1); Leu 0,98(1); Arg 1,00(1); Gly 1,06(1).
FAB-MS spektrum: 835,5
27. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(tiq)-Gly] SEQ ID 35 előállítása
Mól tömeg: 834,4
AAA; Tyr 0,91 (1); Leu 0,96(1); Arg 1,03(1); Gly 1,10(1).
FAB-MS spektrum: 835,5
62.637/SM
- 29• ··
28. példa ciklo[Tyr-trp-Leu-Arq-(Tiq-QH)-Gly] SEQ IP 36 előállítása
Mól tömeg: 850,4
AAA: Tyr 0,85(1); Leu 0,97(1): Arg 1,00(1): Gly 1,18(1).
FAB-MS spektrum: 851,4
29. példa ciklo|Tyr-trp-Leu-Arq-Trp-Pro] SEQ IP 26 előállítása
Mól tömeg: 901,5
AAA: Tyr 0,94(1); Leu 0,94(1); Arg 1,07(1); Pro 1,04(1).
FAB-MS spektrum: 902,5.
A találmány tárgya továbbá eljárás légzési betegségben szenvedő beteg kezelésére, azzal jellemezve, hogy a betegnek az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületek terápiásán hatásos mennyiségét adagoljuk. A „légzési betegség” elnevezés alatt olyan betegséget értünk, amely hörgőszűkülettel, illetve nyálka hiperszekrécióval járhat együtt. A légzőrendszeri betegségek, amelyek kezelésében az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületek különösen előnyösen alkalmazhatók például az asztma, a bronchitis, a rhinitis, a köhögés és az expectoratíon. Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületek, amelyek különösen előnyösen alkalmazhatók légzőrendszeri betegségek kezelésére, az alábbiak:
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. IP 6
ciklo[T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. IP 7
ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. IP 8
ci ki ο [T yr-trp-Leu-Arg-T yr-Gly] SEQ. IP 9
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] SEQ. IP 10
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. IP 11
62.637/SM
ci kló [T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12
ciklo[T yr-trp-Ala-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 13
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] vagy SEQ. ID 14
ciklo[tyr-Gln-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 15
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Ala] SEQ. ID 16
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-Gly-T rp] SEQ. ID 17
ciklo[Tyr-trp-Pro-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 18
ciklo[Phe-phe-Pro-Arg-Phe-Gly] SEQ. ID 19
ciklo[Leu-Arg-T rp-Gly-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 20
ciklo[T yr-T rp-T yr-glu-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 21
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-Na 1 -Gly] SEQ. ID 22
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NO2-Phe)-Gly] SEQ. ID 23
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NH2-Phe)-Gly] SEQ. ID 24
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-C1-Phe)-Gly] SEQ. ID25
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Pro] SEQ. ID 26
A „terápiásán hatásos mennyiség elnevezés alatt a vegyületek olyan mennyiségét értjük, amelyek egyetlen vagy többszörös dózisban a betegnek adagolva alkalmasak arra, hogy a légzörendszeri betegségekkel kapcsolatos szinptómákat csökkentsék vagy megszüntessék. A „szimptómák csökkentése” elnevezés alatt a légzörendszeri betegségekkel kapcsolatban a fentiekben azt értjük, hogy a kezelés hiányában fellépő szimptómák súlyossága csökken, de ez nem jelenti azt, hogy a betegség teljes megszüntetése vagy kizárása megtörténik. Az alkalmazandó terápiásán hatásos dózis vagy hatóanyag mennyiség meghatározása számos tényező függvénye, amelyeket a kezelőorvos határoz meg és ezek nem limitáltan az alábbiak lehetnek: az emlős típusa; az emlős testtömege, kora és általános egészségi állapota; az adott kezelendő
62.637/SM ···· ···· te· • · • ·
- 31 betegség típusa; a betegség súlyossága és előrehaladoggsági foka; az egyes beteg válaszfüggvénye; az adagolandó vegyület típusa; az adagolás útja; az adagolt készítmény biológiai rendelkezésre állási jellemzői; a választott dózisszint; a párhuzamos gyógyászati eljárás alkalmazása; valamint egyéb fennálló körülmények.
Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületek terápiásán hatásos mennyisége változhat körülbelül 0.1 mg/kg testtömeg/nap (mg/kg/nap) körülbelül 100 mg/kg/nap érték között. Előnyösen alkalmazható dózis várhatóan a körülbelül 0,5 - körülbelül 10 mg/kg/nap közötti érték.
Ezen túlmenően a találmány tárgya eljárás fájdalomcsillapító hatás kifejtése ilyen kezelést igénylő betegekben, azzal jellemezve, hogy a betegeknek az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyület fájdalomcsillapításban hatásos mennyiségét adagoljuk. Az ilyen kezelést igénylő beteg, amely fájdalomcsillapítást igényel, általában akut vagy krónikus fájdalomban szenved. A kezelést igénylő betegek meghatározása, amelyek fájdalomcsillapító hatást igényelnek, a szakemberszámára ismert. Az alkalmazható (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületek, amelyeket a fenti eljárásban fájdalomcsillapításra használhatunk, az alábbiak:
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 6
ciklo[T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7
ciklo[tyr-trp-l_eu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Gly] SEQ. ID9
ciklo[Tyr-trp-l_eu-Arg-Trp-Ala] SEQ. ID 10
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-ala] SEQ. ID 11
cí kló [T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12
ciklo[Tyr-trp-Ala-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 13
62.637/SM ···· »··· ♦· • ♦ · « · ·
-· ··*. · ··· * · · · · • ·· Μ·
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] vagy SEQ. ID 14
ciklo[tyr-Gln-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 15
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Ala] SEQ. ID 16
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-Gly-T rp] SEQ. ID 17
ciklo[T yr-trp-Pro-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 18
ciklo[Phe-phe-Pro-Arg-Phe-Gly] SEQ. ID 19
ciklo[Leu-Arg-T rp-Gly-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 20
ciklo[T yr-T rp-T yr-glu-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 21
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Na1-Gly] SEQ. ID22
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NO2-Phe)-Gly] SEQ. ID 23
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NH2-Phe)-Gly] SEQ. ID 24
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-C1-Phe)-Gly] SEQ. ID25
ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Pro] SEQ. ID 26
A „terápiásán hatásos fájdalomcsillapító mennyiség elnevezés alatt olyan mennyiséget értünk, amely egyetlen vagy többszörös dózisforma adagolása esetében a beteg számára alkalmas arra, hogy fájdalomcsillapító hatást kifejtsen. A „fájdalomcsillapító hatás” elnevezés alatt a leírásban azt értjük, hogy a kezelés hiányában fennálló fájdalom érzetet, illetve ennek súlyosságát csökkentsük, de nem jelenti azt, hogy a fájdalom teljes megszűntetését vagy megoldását elvégeznénk. A hatásos kezelés körébe beleértjük a megelőző kezelést is, amennyiben egy beteget előzetesen kezelünk, mint például operáció előtti eljárás során, ahol feltehetően a beteg akut vagy krónikus fájdalomban szenvedne a közeljövőben. A terápiásán hatásos fájdalomcsillapító mennyiség meghatározásában vagy dózisában a szakember különféle tényezőket vesz figyelembe, amelyek lehetnek nem limitáltan például az emlős típusa, az emlős mérete, kora és általános egészségi állapota, a kezelt betegség típusa, a be
62.637/SM ··_ ···· ···· .» ···· .····, .· ···· ··« ’Μ* β/ ΐ
- 33tegség súlyossága, illetve elörehaladottsági foka, az egyes beteg válaszfüggvénye, az adagolandó vegyület típusa, az adagolás útja, az adagolt készítmény biológiai rendelkezésre állási jellemzői, a választott dózishatár, a párhuzamos kezelés típusa és egyéb fennálló körülmények.
Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületek terápiásán hatásos fájdalomcsillapító mennyisége általában körülbelül 0,1 mg/kg testtömeg/nap (mg/kg/nap) - körülbelül 100 mg/kg/nap közötti érték. Előnyösen adagolandó mennyiség várhatóan körülbelül 0,5 - körülbelül 10 mg/kg/nap közötti érték.
Ezen túlmenően a találmány szerinti vegyületek alkalmasak gyógyszerészeti tachikinin antagonista hatás, különösen neurokinin A antagonista hatás kifejtésére. A találmány tárgya ebből következően új, alkalmas neurokinin A antagonista vegyületek. Mivel a találmány szerinti vegyületek tachikinin antagonista anyagok, ezek alkalmasak különféle betegségek kezelésére, amelyek lehetnek gyulladás, asztma, allergia, bronchitis, rhinitis, Crohn betegség, fekélyes colitis, reumás izületi gyulladás, osteoarthritis, migrén, cistitis és hiperérzékenységi válaszfüggvények. A tachikinin antagonista hatás ugyancsak alkalmas arra, hogy különféle egyéb betegségek kezelésében alkalmazzuk, amelyek lehetnek fájdalom, perifériás neuropathia, szédülés, krónikus köhögés, herpesz fertőzés utáni neuralgia, ellentétes immunológiai reakciók, véráram rendellenességek, amelyek értágulatból származnak, szembetegségek, mint például kötőhárnya gyulladás és kután betegségek, mint például kontakt dermatitis, atópiás dermatitis, urticaria és hasonló betegségek. Ezen túlmenően a tachikinin antagonista anyagokkal kezelhetők különféle központi idegrendszeri rendellenességek, mint például szorongás, depresszió, pszichózis, skizofrénia és dementia.
62.637/SM
- 34A találmány szerinti vegyületek igen hatásos neurokinin A antagonista anyagok és az NKí receptorokkal összehasonlítva nagyfokú szelektivitást mutatnak az NK2 receptorokkal szemben. Feltehető, hogy a találmány szerinti vegyületek a NK2 receptorokkal szembeni antagonista hatásuk révén fejtik ki hatásukat, ebből eredően a neurokinin A-mediált betegségek kezelésére alkalmasak, amely betegségek nem limitáltan lehetnek az akut és krónikus fájdalom, továbbá az asztma és egyéb gyulladásos tüdő betegségek. A találmány tárgykörébe azonban beleértjük, hogy az ilyen vegyületek végső alkalmazása során nem limitáltan más hatásokat is kifejthetünk.
A megfelelő betegségben szenvedő betegek kezelése során a találmány szerinti (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületeket adagolhatjuk bármely formában vagy úton, amely forma és út megfelelővé alakítja a vegyületet arra, hogy hatásos mennyiségben biológiailag rendelkezésre álljon. Ez az adagolás lehet például orális, aeroszol és parenterális adagolás. Például az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyületeket adagolhatjuk orálisan, aeroszol formában, szubkután módon, intramuszkuláris úton, intravénás úton, transzdermális úton, intranazális úton, rektálisan, helyileg és hasonló módon. Előnyösen alkalmazandó adagolási forma az orális és az aeroszol forma adagolása. A szekember felismeri, hogy az ilyen készítményeket könnyen előállíthatja és az adagolás útját is meghatározthatja az adott vegyület típusától függően, továbbá a betegség típusától, illetve a betegség állapotától és a mellékes körülményektől függően. Lást például a Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co. (1990) közleményt.
A találmány szerinti vegyületeket önmagukban adagolhatjuk vagy adagolhatjuk gyógyszerkészítmény formájában, amelyben gyógyszerészetileg elfogadható hordozó vagy kiszerelő anyagokkal keverékben szerepelnek. Az
62.637/SM
- 35ilyen készítményekben az egyes alkotóelemek aránya és természete a hatóanyag fajtájától függő, illetve kémiai jellemzői befolyásolják, továbbá befolyásolja az alkalmazás útja, illetve a szokásos gyógyszerészeti gyakorlat. A találmány szerinti vegyületek önmagukban is hatásosak, azonban formált alakban is adagolhatok gyógyszerészetileg elfogadható só formában, mint például savaddíciós só formában, mivel az ilyen só oldhatósága, illetve kristályosításának könnyűsége, megnövelt oldhatósága és hasonló jellemzői ezt az adagolást elősegítik.
A találmány tárgya továbbá készítmény, amely az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületet tartalmazza egy vagy több inért hordozóanyaggal keverékben vagy más elegyben. Ezek a készítmények alkalmasak például tesztvizsgálati standard, mint tömegben szállított anyag forma vagy gyógyszerészeti készítmény forma előállítására. Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületek tesztvizsgálati mennyisége az a mennyiség, amely standard tesztvizsgálati eljárásokkal és módszerekkel könnyen mérhető, amely eljárások a szakember előtt jól ismertek. Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületek tesztvizsgálat! mennyisége általában körülbelül a készítmény 0,001 tömeg% - körülbelül 75 tömeg% mennyisége. Inért hordozóanyagként bármely olyan anyagot alkalmazhatunk, amely az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletü vegyületekkel kovalens módon nem reagál vagy ezek bomlását nem idézi elő. Alkalmas inért hordozóanyagok lehetnek például a víz, vizes pufferek, mint például a nagynyomású folyadékkromatográfiás analízisben (HPLC) alkalmazott pufferek; szerves oldószerek, mint például acetonitril, etilacetát, hexán és hasonlók; továbbá gyógyszerészetileg elfogadható hordozó- és kiszerelő anyagok.
62.637/SM
• · · · • · ♦ • ·
- 36Részletesebben, a találmány tárgya gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű vegyület hatásos mennyiségét tartalmazza egy vagy több gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy kiszerelő anyaggal keverékben.
A gyógyszerkészítményeket a szakirodalomban ismert eljárásoknak megfelelően állítjuk elő. Az alkalmazott hordozó- vagy kiszerelő anyag a készítményekben lehet szilárd, félszilárd vagy folyékony anyag, amely a hatóanyag hordozóanyagaként vagy közegeként szolgálhat. Alkalmas hordozóanyagok vagy kiszerelőanyagok a szakirodalomban ismert anyagok. A gyógyszerkészítmény lehet orális, parenterális vagy helyi alkalmazású és a betegnek adagolható tabletta, kapszula, kúp, oldat, szuszpenzió vagy hasonló formában.
A találmány szerinti vegyületek például adagolhatok orális úton, például valamely inért hígítóanyagban vagy emészthető hordozóanyagban. A hatóanyag zselatin kapszulába foglalható vagy tablettává préselhető. Az orális terápiás alkalmazás céljára a találmány szerinti vegyületeket tabletta, pilula, kapszula, elixír, szuszpenzió, szirup, ostya, rágógumi és hasonló formákban alkalmazott hordozóanyagban készült formákban használhatjuk. Az ilyen készítmények legalább 4% találmány szerinti aktív hatóanyagot kell tartalmazzanak, azonban ez a tartalom változhat az adott forma függvényében és egységdózisonként lehet 4% - körülbelül 70 tömeg% közötti érték. A találmány szerinti készítményekben a hatóanyag mennyisége olyan, amely biztosítja a kívánt dózis mennyiségét. A találmány szerinti előnyös készítmények azok, amelyek úgy készülnek, hogy az orális dózisegység formában 5,0 - 300 mg találmány szerinti vegyület található.
A tabletta, pilula, kapszula, pirula és hasonló formák ezen túlmenően egy vagy több alábbi segédanyagot tartalmazhatnak: kötőanyagok, mint pél
62.637/SM
- 37dául mikrokristályos cellulóz, gumi tragakant vagy zselatin, kiszerelő anyagok, mint például keményítő vagy laktóz; dezintegráló szerek, mint például alginsav, Primogel kukoricakeményítő és hasonlók; kenőanyagok, mint például magnézium-sztearát vagy Sterotex; kenőanyagok, mint például kolloid-sziliciumdioxid; és édesítőszerek, mint például szukróz vagy szaccharin vagy ízesítőszerek, mint például mentaíz, metil-szalicilát vagy narancsíz. Amennyiben a dózisegység forma kapszula, ez ezen túlmenően tartalmazhat folyékony hordozóanyagot, mint például polietilén-glikolt vagy zsírolajat. Az egyéb dózisegység formák más segédanyagokat is tartalmazhatnak, amelyek a dózisegység fizikai jellemzőit változtatják és ezek lehetnek például bevonatok. így például a tabletta vagy pilula formák bevonhatók cukorral, shellak-kal vagy más enterik bevonatokkal. A szirup forma tartalmazhat ezen túlmenően a találmány szerinti vegyületeken kívül szukrózt, mint édesítőszert és bizonyos tartósítószereket, színezőanyagokat és festékeket, valamint ízanyagokat. Az ilyen különféle készítmények előállításában alkalmazott anyagok gyógyszerészetileg tiszták és az alkalmazott mennyiségben nem toxikus kell legyenek.
A parenterális terápiás adagolás céljára adagolt formák esetében a találmány szerinti vegyületeket oldat vagy szuszpenzió formában adolhatjuk. Ezek a készítmények legalább 0,1% találmány szerinti vegyületet tartalmazzanak, azonban a hatóanyag tartalmuk 0,1 - körülbelül 50 tömeg% között változhat. A találmány szerinti vegyület ilyen készítményekben alkalmazott mennyisége olyan, hogy a megfelelő dózis mennyiséget nyerjük. Az előnyös készítmények a találmány szerint azok, amelyek olyan parenterális dózis egységű formák, amik 5,0-100 mg találmány szerinti vegyületet tartalmaznak.
Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) találmány szerinti általános képletű vegyületeket továbbá adagolhatjuk aeroszol formában. Az aeroszol forma elnevezés
62.637/SM ···· ···· • · · · alatt azt értjük, hogy olyan rendszert állítunk elő, amelyből kolloid típusú formában nyomás alatti eszközből a vegyületet kijuttathatjuk. A kijuttatás eszköze lehet folyadék vagy komprimált gáz és egy megfelelő szivattyú rendszer, amely az aktív hatóanyagot kijuttatja. Az (1) általános képletű vegyületek aeroszol formáját egy fázisban vagy két fázisban vagy három fázisú rendszerben juttathatjuk ki abból a célból, hogy az aktív hatóanyagot a megfelelő helyre eljuttassuk. Az aeroszol kijuttatása magában foglalja a megfelelő tartályt, az aktivátort, a szelepeket, a mellékes tartályokat és hasonló berendezéseket. Előnyös aeroszol forma, amely a szakember által meghatározott.
Az (1), (2), (3), (4) vagy (5) általános képletű találmány szerinti vegyületeket továbbá adagolhatjuk helyi úton és amennyiben ilyen módon adagoljuk, akkor a hordozóanyag lehet oldat, kenőcs vagy gél forma. Az adagolás alapját képező anyag lehet például az alábbi: petrolátum, lanolin, polietilén-glikolok, méhviasz, ásványi olaj, hígítóanyagok, mint például víz és alkohol és emulzifikáló és stabilizáló szerek. A jellemző készítmény az (1) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója kb. 0,1 - kb. 10 tömeg/térfogat%-át tartalmazza.
Az oldat vagy szuszpenzió formák továbbá tartalmazhatnak egy vagy több alábbi adalékanyagot: steril hígítóanyagok, mint például injektálásra alkalmas víz, fiziológiás sóoldat, fixált olajok, polietilén-glikolok, glicerin, propilénglikol vagy egyéb szintetikus oldószerek; baktérium ellenes szerek, mint például benzil-alkohol vagy metil-parabén; antioxidánsok, mint például aszkorbinsav vagy nátrium-hidrogénszulfit; kelátképző szerek, mint például etilén-diamin-tetraecetsav; pufferek, mint például acetátok, citrátok vagy foszfátok, továbbá a tonicitást befolyásoló segédanyagok, mint például nátrium-klorid vagy dextróz. A parenterális készítményeket ampulla, eldobható fecskendő vagy több
62.637/SM
- 39dózisú ampulla formában állíthatjuk elő, amelyek műanyagból vagy üvegből készülhetnek.
A „beteg” elnevezés alatt melegvérű állatokat értünk, amely lehet emlős és amely az adott gyulladásos betegségben szenved. Az ilyen betegek körébe beleértjük például a tengerimalacot, a kutyákat, a macskákat, a patkányokat, egereket, lovakat, szarvasmarhákat, birkákat és az embereket is.
30. példa
Jódozott tachikinin kötésének antaqonizmusa NK-, és NK? receptorokhoz vélelmezett antaqonistákkal összehasonlítva
A receptor kötési tesztvizsgálatokat nyers szövet membránokon végeztük. A javasolt tachikinin antagonisták NK-1 receptor kötési affinitását tengerimalac tüdőn vizsgáltuk (Keystone Biologicals, Cleveland, OH, -80°C-on fagyasztott felhasználásig). Az NK-2 receptorhoz való affinitást HSKR-1 sejteken értékeltük, amelyek egér 3T3 fibroblaszt sejtek, amelyek a humán éhbél NK-2 receptort expresszálják. A sejteket vagy szöveteket Polytron berendezésen 15 térfogat mennyiségű 500 mmol Tris Hcl pufferben (pH = 7,4, 4°C) homogenizáltuk, amely puffer 120 mm NaCI és 5 mm KCI tartalmú volt. Az elegyet 4°C hőmérsékleten 12 percen át 48,000 xg erő alkalmazásával centrifugáltuk. A labdacsot 15 térfogat mennyiségű 50 mm Tris-HCI pufferben újra szuszpendáltuk, amely puffer 10 mm EDTA és 300 mm KCI tartalmú volt. A szuszpenziót 30 percen át jégen tartottuk. Ezt követően a szuszpenziót a fenti módon centrifugáltuk, majd a labdacsot mostuk és újra szuszpendáltuk, majd két további alkalommal 50 mm Tris-HCI puffer (pH = 7,4, 4°C) alkalmazásával újra centrifugáljuk. A végső labdacsot 20 mg/ml koncentrációban az inkubálási pufferben újra szuszpendáltuk, majd a szuszpenziót a felhasználás előtt legalább 15 percen át szobahőmérsékleten tartottuk. A receptor kötést 250 μΙ
62.637/SM • · · · ·*
I
- 40membrán preparátum (végső protein koncentráció; tüdő = 286 pg/cső, HSKR-1 sejtek = 100 pg/cső) végeztük. A kísérleteket kétszeres párhuzamos eljárásban határoztuk meg 0,1 nm alábbi radio-ligandum alkalmazásával: NK-1 receptor tesztvizsgálat esetében 125l-Bolton-Hunter Lys-3 jelzett P vegyület (New England Nuclear, specifikus aktivitás 220 Ci/mmol); az NK-2 receptor tesztvizsgálat esetében 125jód-hisztidil-1 -neurokinin A (Amersham, fajlagos aktivitás 2000 Ci/mmol) végső térfogat 500 pl puffer, ámely 50 mmol Tris-HCI (pH = 7,4, szobahőmérséklet) 0,1% marhaszérum albumin, 2 mmol MnCI2, 40 pg/ml bacitracin, 4 pg/ml leupeptin és kimosztatin 1 pmol tiorfán és különféle dózisú tachikinin antagonista tartalmú. Az inkubálást szobahőmérsékleten 90 percen át (NK-1 receptor tesztvizsgálat) vagy 2 órán át (NK-2 receptor tesztvizsgálat) végeztük. A kötési tesztvizsgálatot 50 mmol Tris-HCI puffer (pH = 7,4, 4°C) adagolásával leállítottuk, majd vákuumban az elegyet GF/B szűrőn leszűrtük, amely szűrőt előzetesen 0,1% polietilén-iminnel (NK-1 receptor tesztvizsgálat esetében) vagy 0,5% marhaszérum albuminnal (NK-2 receptor tesztvizsgálat esetében) előzetesen mostunk. A nem specifikus kötődést 1 pmol P vegyület (NK-1 receptor tesztvizsgálat) vagy neurokinin A (NK-2 receptor tesztvizsgálat) (Peptides International, Inc., Louisville, KY) jelenlétében határoztuk meg. A fajlagos kötődést úgy számítottuk, hogy a nem specifikus kötődést kivontuk a teljes kötődésből, majd ezt követően összehasonlítottuk a 70-90%-os teljes kötődéssel. Az adatokat analizáltuk, majd az IC50 értékeket nem lineáris regresszió segítségével egy iteratív görbe alkalmazásával (GraphPAD Inplot, San Diego, CA) meghatároztuk. A protein meghatározását Lowry eljárásának megfelelően végeztük.
62.637/SM
A találmány szerinti vegyületek tachikinin receptor kötődését a 2. táblázatban adjuk meg. Számos vegyületet bemutatunk, köztük a ciklofTyr-trp-LeuArg-Trp-Gly] SEQ ID. 6 számos igen magas affinitást és szelektivitást mutat az NK-2 receptorokkal szemben.
62.637/SM
2. táblázat
NK-1 & NK-2 receptor kötési affinitás
Peptid szekvencia IC50 (nM)
NK-1 NK-2
ci klo[T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] 10,000 305 ± 31
ciklo[T yr-trp-Ala-Arg-T rp-Gly] 56,7 ± 5,45
ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] >10,000 4,97 ± 0,42
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Gly] >10,00 18,9 ± 1,58
cikloftyr-GIn-Leu-Arg-Trp-Gly] 407 ± 52
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-ala] 7,99 ± 1,02
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] >10,000 193 ± 11,5
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] 9,90 ± 0,90
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Pro] 5167 ± 507 30 ±2,52
ciklo[Leu-Arg-T rp-Gly-Leu-Arg-T rp-Gly] 768 ± 75
ciklofT rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] 4833 ± 297 4,7 ± 0,15
ciklofTyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Ala] 206 ± 15
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-Gly-T rp] 360 ± 21
ciklo[Tyr-Trp-Tyr-gln-Leu-Arg-Trp-Gly] >10,000 27,0 ±0,82
ciklofT yr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] 6187 ± 277 6,79 ± 0,69
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NH2-Phe)-Gly] >10,000 20,2 ±2,03
ciklo[Tyr-trp-Pro-Arg-T rp-Gly] >10,000 5,13 ± 0,36
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NO2-Phe)-Gly >10,000 11,7 ±0,44
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-CI-Phe)-Gly] -10,000 13,3 ± 1,31
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Flg)-Gly](l I) 2766 ± 16,5 992 ± 36,5
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Dpa)-Gly](l I) 4691 ±11 878 ±162
ciklofPhe-phe-Pro-Arg-Phe-Gly] 9314 ± 2074 674 ± 57
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Flg)-Gly](l) 3642 ± 425 123 ± 1,86
ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Dpa)-Gly](l) 12,077 ±2044 2903 ± 371
Az adatok átlagérték ± S.E.M., amely 2-72 kísérletből származik.
62.637/SM
31. példa
NK-2 receptor médiáit foszfatidil-inozitol termelés antaqonizmusa
A tesztvizsgálat megkezdése előtt 2-3 nappal 24 üregű tenyésztő lemezekre 125,000 sejt/üreg koncentrációban SKLKB82&3 (marha gyomor NK-2 receptor, amelyet egér kötőszövet sejtvonalba oltottuk) tenyésztett sejteket inokuláltunk. Ezt követően a sejteket 0,5 ml 0,2 μίτιοΙ myo [2-3H(N)]-inozitolla1 elegyítettük (American Radiolabeled Chemicals Inc., fajlagos aktivitás 20 Ci/mmol). A sejttenyészetet 37°C hőmérsékleten 5% széndioxid tartalmú légtérben tenyésztettük. A teszvizsgálat napján a közeget leszívtuk, majd a sejteket D-MEM/F-12 táptalajban, amely 40 pig/ml bacitracin, 4 pig/ml leupeptin, illetve 4 pg/ml kimostatin és 0,1% marhaszérum albumin, valamint 1 μίτιοΙ tiorfan, valamint 10 mmol LiCI tartalmú volt, inkubáltuk. 15 perc eltelte után ciklo[Tyr-trp-l_eu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 vegyületet (koncentráció határérték 0,3 nm - 10 μίτιοΙ közötti) adagoltunk a sejtekhez 0,1 ml térfogatban. Ezután az elegyhez 15 perc elteltével különféle koncentrációban NKA vagy inkubálási puffért (kontrollt) adagoltunk (0,1 nm - 10 μίτιοΙ térfogat = 0,1 ml). Az elegyeket 60 percen át inkubáltuk, amely elegyek végső térfogata 1 ml volt. A reakciót úgy állítottuk le, hogy a táptalajt leszívtuk és az egyes üregekbe 0,1 ml metanolt adagoltunk. Az elegyekhez 2 alikvot mennyiségű 0,5 ml metanolt adagoltunk abból a célból, hogy a sejteket egy kloroform ellenálló csőbe gyűjtsük. Ezután az egyes csövekbe 1 ml kloroformot adagoltunk, amely csövek a metanolt/sejt szuszpenziót tartalmazunk. Ezután az egyes csövekbe 0,5 ml ddH2O adagolását végeztük. A csöveket örvény keveréssel 15 másodpercen át kevertük, majd 10 percen át 1700 xg erő alkalmazásával centrifugáltuk. 0,9 ml vizes fázis mintát vettünk, majd ezt kloroform ellenálló csövekbe helyzetük, amely
62.637/SM
csövek 2 ml ddH2O anyagot tartalmaztak. A mintákat örvény keveréssel kevertük, majd 1 ml 50%-os Bio-Rad AG 1-X8 ioncserélő oszlopra vittük (formiát forma, 100-200 mesh) (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Az oszlopokat sorrendben ezután 1) 10 ml ddH2O segítségével, 2) 5 ml 5 mm dinátriumtetraborát/60 mm nátrium-formiát segítségévei, valamint 3) 2 ml 1m ammónium-formiát/0,1m hangyasav segítségével mostuk. A harmadik elúció eluátumát gyűjtöttük, majd 9 ml szcintillációs folyadékkal számláltuk. Az alsó szerves fázisból 50 μΙ mintát vettünk, majd ezt szcintillációs csőben szárítottuk, majd 7 ml szcintillációs folyadékkal számláltuk.
Mindenegyes minta esetében meghatároztuk a vizes fázist alikvotban található DPL (teljes inozitol foszfát tartalom) arányát a szerves fázisban található DPM 50 μΙ térfogatban mért alikvot mennyiséggel összehasonlítva (összes [3H]-inozitol mennyisége). Az adatokat az agonista indukált [3HJ-inozitol foszfát akkumulálás mértékében ennek %-ában fejeztük ki az alapvonalra vonatkoztatva. Az antagonista aktivitás kimutatható, amennyiben a dózisfüggő görbék jobb irányban eltolódtak a tachikininre vonatkoztatva a ciklofTyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 jelenlétében. Az eltolódás regressziós analízist alkalmaztuk három vagy négy antagonista koncentráció esetében, és így meghatároztuk a pA2 értékeket, illetve a meredekségeket.
Dózis válaszfüggvényeket állítottuk elő, majd meghatároztuk a tesztvizsgálati vegyület inhibiáló képességét a tachikinin-indukált foszfatidil-inozitol (Pl) hozamra, a meghatározást a Bristow és munkatársai, Br. J. Pharmacol., 90: 211-21 (1987) közleménye szerint végeztük a GraphPad Inplot számítógépes program alkalmazásával. Az 1. ábrán bemutatjuk a ciklofTyr-trp-Leu-Arg-TrpGly] SEQ ID. 6 vegyület hatását a dózisfüggő antagonizmus kifejtésében az
62.637/SM
- 45NKA-indukált Pl hozamra az SKLKB82#3 sejtekben. Az adatokban a teljes inozitol foszfát akkumuláció százalékos stimulálásában adtuk meg az alapszintre vonatkoztatva és az adatokat az NKA által előállított hatás maximum értékére normáltuk. Az adatok kimutatják, hogy a ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ ID. 6 nem fejt ki agonista aktivitást (mivel nem stimulálja a Pl forgalmat, illetve hozamot még a vegyület nagyobb dózisa alkalmazásakor sem) és antagonista hatást fejt ki az NKA NK-2 receptoron kifejtett hatására (SKLKB82#3 sejtekben) (pA2 = 8,45, 95% megbízhatósági határérték = 8,228,69), valamint a meredekség = -0,85 (95% megbízhatósági határérték = -094 -0,75).
32, példa
NKA és capsaicin indukált léqzőrendszeri elváltozásra kifejtett antaqonista hatások éber tengerimalacokban
In vivő tesztvizsgálatot hajtottunk végre hím Duncan Hartley tengerimalacokon (250-350 g). Négy állaton megvizsgáltuk éber állapotban a légzési folyamat módosulását. Az állatokat szimultán alkalmaztuk a teljes test plethysmográfiát alkalmazva 4 kis plexi üveg ketrecben, amelyek mindegyike megfelelő referencia ketrechez kötött egy Validyne és DP 45-16 differenciális nyomás átvivő segítségével. A négy ketrecet levegő beáramlással láttuk el (amelyet egyben az aeroszol bejuttatásra is alkalmaztunk), valamint egy levegő kiáramlási rendszert is a ketrecekre kötöttünk. A levegő betáplálás! és elszívási vonalak azonos hosszúságúak voltak és azonos elszívású mag átmérővel rendelkeztek és azonos betáplálás! kamrából kivezetettek és közös elszívó kamrával levegőztetettek voltak. Ezt a rendszert alkalmaztuk arra a célra, hogy biztosítsuk, hogy a levegő betáplálás! rendszer és az atmoszférikus nyomás
62.637/SM
- 46 fluktuációja fázisban maradjon, valamint a nyomáskülönbség átviteli eszközből az ilyen változás jelét kiküszöböljük. Az analóg nyomás jeleket Data Translation DT2821 A-D lemez segítségével digitalizáltuk. Az adtokat 100 minta/másod-perc/állat sebességgel mértük. Mindenegyes nyomásciklus változást az alábbi paraméterek vizsgálatával analizáltunk: minimum és maximum nyomás közötti meredekség esés és növekedés meghatározása, a növekedés aránya az esési meredekségre vonatkoztatva, illetve a kezdeti átviteli nyomás, illetve a csúcs ciklusnyomás közötti változás értéke. Ezen értékek alkalmazásával (és az állatok megfigyelésével) a nyomás ciklusokat normál légzés, erőltetett belégzés (nyilvánvaló mellkasi erőltetés) jelentős légzési esemény (SREs; általában köhögés, ritkábban prüszkölés vagy lihegés, amennyiben ezt egy különösen nagy átmeneti nyomás növekedéssel jellemezhettük, ami a zajtól megkülönböztethető) és mozgás/zaj, amelyet PCAT 286 rendszerrel mértük egy System V UNIX operátor rendszer alkalmazásával. A nehéz légzést akkor tekintettük jelentősnek, amennyiben a plethysmograph nyomás fenntartott növekedése tapasztalható, amely együttjárt az állatban a légzés megfelelő eltolódásával.
A jellemző kísérletek során, amelyekben a légút válaszfüggvényét mértük különféle hörgőszükítő hatóanyagokkal szemben, az aeroszol anyagokat 19 percen át (0,33 ml/perc) adagoltuk DeVilbiss Untraneb 99 ultrahangos porlasztó segítségével és az állatokat ezen időtartam alatt figyeltük meg. A porlasztóból történő adagolás előtt 1 percen át pihenő légzést mértünk, és így az alapvonal nyomást meghatároztuk. Az előzetes kísérletek során a hörgőszűkítő hatóanyagok különféle koncentrációjának hatását értékeltük és azt a koncentrációt választottuk, amely maximális számú állatban mutatott légzési nehézséget, de csökkentette a válaszfüggvény súlyosságát. Ennek alapján a neurokinin
62.637/SM
- 47A vegyületet 0,05% végső koncentrációban és a capsaicin vegyületet 0,001% koncentrációban adagoltuk. A porlasztás esetében minden hörgőszűkítő aktív hatóanyag esetében hordozóanyagként foszfáttal puffereit fiziológiás sóoldatot (pH = 7,4) alkalmaztunk, amely önmaga nem fejtett ki légzőrendszerre semmilyen hatást. A ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ ID. 6 vegyületet i.v. úton 2. perccel az aeroszol adagolás előtt adagoltuk.
A 3. táblázatban bemutatjuk a ciklo[Tyr-trp-l_eu-ARg-Trp-Gly] SEQ ID. 6 különféle légzőrendszeri hatását, amely légzőrendszeri hatás az NKA vagy capsaicin aeroszolok következtében lépett fel. 5 mg/dózis i.v. esetében a vegyület teljes mértékben inhibiálta az NKA aeroszol légzörendszeri hatását éber tengerimalacokban. Alacsonyabb dózisok esetében (0,5-2,5 mg/kg, i.v.) a ciklusos-peptid csökkentette a nehéz légzés és az SRE kialakulását, amelyet a tachikinin idézett elő. Ezek az adatok azt mutatják, hogy a ciklo[Ty-trp-Leu-ArgTrp-Gly] SEQ. ID 6 vegyület NK-2 receptor antagonista tengerimalacokban in vivő kísérletekben a légúti rendszerekben.
A ciklusos peptid a ciklo[Ty-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 továbbá inhibiálta az endogén tachikininek által kifejtett légzörendszeri hatásokat, amelyek a capsaicin aeroszol következtében léptek fel (3. táblázat). Ugyan a ciklo[Ty-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 csak a capsaicin-indukált nehéz légzést csökkentette 20%-ban, azonban a nehéz légzés kialakulása csaknem kétszeresen késleltetetté vált; és az SRE kialakulása a capsaicin hatására ugyancsak csökkent és ezek kialakulása növekedett, mivel valószínűleg a vegyület köhögés ellenes hatással is rendelkezik.
62.637/SM
3. táblázat ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] hatása az NKA vagy capsaicin aeroszol által kifejtett légzörendszeri hatásokra éber tengerimalacokban
A. NKA aeroszol
Előkezelés Nehéz légzési esemény Nehéz légzés beállása (másodperc) SRE No. SRE beállás (másodperc)
kontroll 100% 403 ± 37 8,17 ± 1,92 435 ± 28
peptid
5 mg/kg, iv 0% - 0*
2,5 mg/kg, iv 100% 725 ± 80* 8,00 ± 0,82 791 ± 70*
1 mg/kg, iv 100% 729 ± 66* 6,33 ±0,88 816 ± 65*
0,5 mg/kg, iv 100% 521 ± 29 7,75 ± 2,21 602,5 ± 32
Az adatok átlagérték ± S.E.M. értékek 4-18 állat esetében végzett kezelés során. SRE = jelentős légzőrendszeri esemény, amely általában köhögés, ritkábban légzés kapkodás. A csillagok a kontrolitól való jelentős eltérést jelzik (p < 0,05). Pepiid = ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly].
B. capeseicin aeroszol
Előkezelés Nehéz légzési esemény Nehéz légzés beállása (másodperc) SRE No. SRE beállás (másodperc)
kontroll 100% 203 ± 30 14,9 ± 2,88 288 ± 39
peptid
5 mg/kg, iv 80% 470 ± 78* 8,11 ± 1,22* 352 ± 92
Az adatok átlagérték ± S.E.M. értékek 10 állat esetében végzett kezelés során. SRE = jelentős légzörendszeri esemény, amely általában köhögés, ritkábban légzés kapkodás. A csillagok a kontrolitól való jelentős eltérést jelzik (p < 0,05). Pepiid = ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Glyj.
62.637/SM
33. példa
Egerekben ecetsav indukált görcsök inhibiálása
A találmány szerinti vegyületek fájdalomcsillapító hatását a Whittle (Br.
J. Pharmacol. 22:2246, 1964) közleményben leírt eljárás módosított változatával határoztuk meg. 5-10 hím egerekből álló csoportokat alkalmaztuk és ezeket gerincvelő burki injektálással ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 vegyülettel (0,013-4 pg) vagy etanol/fiziológiás sóoldattal, amely 5 pl térfogatú, kezeltünk. 5 perc elteltével az egereknek 0,4 ml ecetsav (0,25 térfogat/térfogat%) intraperitoneális injekciót adagoltunk. Ezt követően 5 perccel az egereket 15 perce át megfigyeltük és megfigyeltük a vonaglást (hasi görcsök), valamint az egyes egerek esetében a vonaglások számát mértük. Az ED50 értékeket (amely az egerek 50%-ában olyan dózis, amely fájdalomcsillapítást okoz) 4 vagy több dózis esetében végzett mérés segítségével határoztuk meg és az eredményeket mennyiségi analízisnek vetettük alá megfelelő számítógépes program segítségével.
A ciklikus peptid ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 inhibiálja egerekben az ecetsav indukált görcsöket és ED50 = 0,18 pg értékkel rendelkezik (95% megbízhatósági határ = 0,03 - 0,58).
62.637/SM
- 50SZEKVENCIA LISTA (1) Általános információk:
(i) Bejelentő: Merrell Dow Pharmaceuticals Inc.
(ii) A találmány címe: Ciklusos neurokinin A antagonisták (iii) Szekvenciák száma: 36 (iv) Levelezési cím:
(A) Címzett: Marion Merrell Dow Inc.
(B) Utca: 2110 East Galbraith Road, P.O. Box 154300 (C) Város: Cincinnati (D) Állam: OH (E) Ország: USA (F) Kód: 45215-6300 (v) Komputer forma:
(A) Közeg típus: Floppy lemez (B) Komputer: IBM PC kompatibilis (C) Működtető rendszer: PC-DOS/MS-DOS (D) Software: Patentln Release#1,0, #1,25 (vi) Jelen benyújtás adatai:
(A) Bejelentés száma: WO (B) Benyújtás napja:
(C) Besorolás:
(viii) Ügyvéd/ügyvivő adatai:
(A) Név: Boudreaux, William R.
(B) Regisztrálási szám: 35,796 (C) Referencia/dockumentum szám: MO1718AWO
62.637/SM
- 51 (ix) Telekommunikációs információk:
(A) Telefon: 513-948-6566 (B) Telefax: 513-948 7961 vagy 4681 (C) Telex: 214320 (2) SEQ. ID No: 1 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 1:
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
5 (2) SEQ. ID No: 2 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú”
62.637/SM
999»
- 52(xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 2:
Xaa Xaa Leu Arg Trp Xaa
5 (2) SEQ. ID No: 3 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 3:
Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 4 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 4:
Xaa Xaa Leu Arg Xaa Xaa
5
62.637/SM (2) SEQ. ID No: 5 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 5:
Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Xaa
5 (2) SEQ. ID No: 6 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 6:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 7 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav
62.637/SM
- 54(B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 7:
Trp Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 8 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 1 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 1 helyzetben triozin, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
62.637/SM
- 55 D-konfigurációjú (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 8:
Xaa Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 9 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 9:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 10 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet
62.637/SM (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 10:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 11 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 6 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 6 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 11:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Xaa
5
62.637/SM (2) SEQ. ID No: 12 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 12:
Tyr Trp Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 13 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 13:
Tyr Xaa Alá Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 14 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav
62.637/SM
- 58 (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: pepiid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 14:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 15 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 1 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 1 helyzetben tirozin, amely
62.637/SM
- 59 D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 15:
Xaa Gin Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 16 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 16:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Alá
5 (2) SEQ. ID No: 17 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet
62.637/SM
-^.0(B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 17:
Tyr Xaa Leu Arg Gly Trp
5 (2) SEQ. ID No: 18 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 18:
Tyr Xaa Pro Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 19 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid
62.637/SM • · • · (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben fenil-alanin, amely D-konfigurációjú (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 19:
Phe Xaa Pro Arg Phe Gly
5 (2) SEQ. ID No: 20 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia.· cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 20:
Leu Arg Trp Gly Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 21 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 4
62.637/SM • · · (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 4 helyzetben glutánsav, amely D-konfigurációjú (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 21:
Tyr Trp Tyr Xaa Leu Arg Trp Gly
5 (2) SEQ. ID No: 22 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés - „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben naftil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 22:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 23 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav
62.637/SM
- 63 (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (il) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben p-nitro-fenil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 23:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 24 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés - „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
62.637/SM
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben p-NH2-fenil-alanin (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 24:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 25 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben p-klór-fenil-alanin”
62.637/SM • ··· · ··* • · · · ♦ ····*·· *· *·
- 65 (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 25:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 26 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 26:
Tyr Xaa Leu Arg Trp Pro
5 (2) SEQ. ID No: 27 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 27:
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
5
62.637/SM
- 66 (2) SEQ. ID No: 28 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 28:
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
5 (2) SEQ. ID No: 29 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben fluorenil-glicin”
62.637/SM (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 29:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 30 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben fluorenil-glicin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 30:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 31 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris
62.637/SM
- 68• · • « · · · • · · ·«»· ··· · · (ii) Molekula típusa: pepiid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben difenil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 31:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 32 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet
62.637/SM
- 69(B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben difenil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 32:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 33 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben metil-tirozin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 33:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 34 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav
62.637/SM
- 70(B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben 1,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-3-karbonsav” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 34:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 35 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely
62.637/SM • · • · · · · ·
- 71 D-konfigurációjú (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben 1,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-3-karbonsav, amely D-konfigurációjú” (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 35:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5 (2) SEQ. ID No: 36 információi:
(i) Szekvencia jellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (D) Topológia: cirkuláris (ii) Molekula típusa: peptid (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 2 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 2 helyzetben triptofán, amely D-konfigurációjú” (ix) Jellemzők:
(A) Név/key: Módosított helyzet (B) Helyzet: 5 (D) Egyéb információ: /megjegyzés = „Xaa 5 helyzetben 1,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-7-hidroxi-3-karbonsav”
62.637/SM (xi) Szekvencia leírása: SEQ ID NO: 36:
Tyr Xaa Leu Arg Xaa Gly
5
62.637/SM

Claims (35)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Az (1) általános képletű vegyület, ahol az általános képletben
    R-ι jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R2 jelentése benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
    R3 jelentése 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport; és X jelentése hidrogénatom vagy R3 általános képletű csoport jelentése és X csoport jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
    R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
    R5 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    azzal a feltétellel, hogy amennyiben R2 jelentése -(CH2)2-CONH2-csoport, akkor Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport és az Rt csoporthoz kapcsolódó szénatom konfigurációja (R);
    vagy ezen vegyületek hidrátja, izoszter formája vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyület, ahol az általános képletben
    Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
    R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
    vagy hidrátja vagy izoszter formája vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti vegyület, ahol az általános képletben R5 jelentése hidrogénatom.
    62.637/SM • · · · · · • ··· · ··· · • · · · · · ······· ·· ·· ·
  4. 4. A (2) általános képletű vegyület, ahol az általános képletben
    Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport; és
    R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
    vagy ezen vegyületek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti
    ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 6 ciklo[T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7 ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8
    vegyületek.
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti
    ci kló [T yr-trp-Leu-Arg-T yr-Gly] SEQ. ID 9 ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] SEQ. ID 10 ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. ID 11
    vegyületek.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti ciklo[Tyr-Trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 12
    ci klo[T yr-trp-Ala-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 13 ci ki o[T yr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] SEQ. ID 14
    vegyületek.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti
    ciklo[tyr-Gln-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 15 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Ala] SEQ. ID 16 ci kló [T yr-trp-Leu-Arg-Gly-T rp] SEQ. ID 17
    vegyületek.
    62.637/SM • · · · · · • ··· · ···
    4 · · · · · ······· ·· ·· * - 75-
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti ciklo[Tyr-trp-Pro-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 18 ciklo[Phe-phe-Pro-Arg-Phe-Gly]SEQ. ID 19 vegyületek.
  10. 10. A (3) általános képletű vegyületek, ahol az általános képletben
    Bt jelentése 1-4 szénatomos lineáris vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    B2 jelentése (CH2)4-NH2-csoport, (CH2)3-NH2-csoport, (CH2)3-NHC(=NH)NH2-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    B3 jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    B4 jelentése hidrogénatom vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
    vagy ezen vegyületek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
  11. 11. A 10. igénypont szerinti vegyület, ahol az általános képletben Bt jelentése CH2CH(CH3)2 csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport és B2 jelentése (CH2)3-NHC(=NH)NH2 csoport vagy 3-indolil-metil-csoport.
  12. 12. A 10. igénypont szerinti vegyület, ahol az általános képletben B, jelentése CH2CH(CH3)2 csoport, B2 jelentése (CH2)3-NHC(=NH)NH3 csoport, B3 jelentése 3-indolil-metil-csoport és B3 jelentése hidrogénatom vagy B! jelentése p-hidroxi-benzil-csoport, B2 jelentése 3-indolil-metil-csoport, B3 jelentése phidroxi-benzil-csoport és B4 jelentése (CH2)2-CONH2 csoport.
  13. 13. A 10. igénypont szerinti ciklo[Leu-Arg-Trp-Gly-Leu-Arg-Trp-Gly] vagy SEQ. ID 20 ciklo[Tyr-Trp-Tyr-glu-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 21 vegyületek.
    62.637/SM
  14. 14. A (4) általános képletü vegyület. ahol az általános képletben
    R.j jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport; és
    Q jelentése p-klór-benzil-csoport, p-nitro-benzil-csoport, p-NH2-benzil-csoport, p-metoxi-benzil-csoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (a) képletü csoport, (b) képletü csoport vagy (c) képletü csoport;
    X’ jelentése hidrogénatom;
    ahol Q és X’jelentése a kapcsolódó szénatommal vagy nitrogénatommal együttesen, amelyhez egyenként kapcsolódnak a (d) képletü vagy a (e) képletü csoportok vagy ezek gyógyszerészetileg elfogadható só formái.
  15. 15. A 14. igénypont szerinti vegyület, ahol az általános képletben Q jelentése p-klór-benzil-csoport, p-nitro-benzil-csoport, p-NH2-benzil-csoport vagy (a) képletü csoport.
  16. 16. A 14. igénypont szerinti
    cikio[T yr-trp-Leu-Arg-Na 1 -Gly] SEQ. ID 22 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NO2-Phe)-Gly] SEQ. ID 23 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-NH2-Phe)-Gly] SEQ. ID 24 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(p-C1-Phe)-Gly] SEQ. ID 25 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(tiq-OH)-gly] SEQ. ID 36 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(tiq)-Gly] SEQ. ID 35 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Tiq)-Gly] SEQ. ID 34 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Me-Tyr)-Gly] SEQ. ID 33 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Dpa)-Gly](l I) SEQ. ID 32 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Dpa)-Gly](l) SEQ. ID 31 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-(Flg)-Gly](lI) vagy SEQ. ID 30 ciklo[Tyr-trp-l_eu-Arg-(Flg)-Gly](l) SEQ. ID 29
    62.637/SM vegyületek.
  17. 17. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti vegyületet és gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz.
  18. 18. Készítmény, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti vegyületet és hordozóanyagot tartalmaz.
  19. 19. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a 10. igénypont szerinti vegyületet és gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz.
  20. 20. Készítmény, azzal jellemezve, hogy a 10. igénypont szerinti vegyületet és hordozóanyagot tartalmaz.
  21. 21. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a 14. igénypont szerinti vegyületet és gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot tartalmaz.
  22. 22. Készítmény, azzal jellemezve, hogy a 14. igénypont szerinti vegyületet és hordozóanyagot tartalmaz.
  23. 23. Az (5) általános képletű vegyület, ahol az általános képletben
    Rt jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R2 jelentése benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
    R3 jelentése 1-5 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, és X jelentése hidrogénatom vagy R3 és X jelentése egymáshoz kapcsolódva -(CH2)3-csoport;
    R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
    W jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport és Z jelentése hidrogénatom vagy W és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
    62.637/SM
    - 78··· · ··· azzal a feltétellel, hogy amennyiben R2 jelentése (CH2)2-COOH-csoport, akkor R! jelentése p-hidroxi-benzil-csoport és az R, csoporthoz kapcsolódó szénatom abszolút konfigurációja (R) alkalmazása légzörendszerin betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  24. 24. A 23. igénypont szerinti alkalmazási eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan vegyületet alkalmazunk, melynek (5) általános képletében
    Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
    R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport és Z jelentés hidrogénatom vagy R5 és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
    vagy ezek hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formája.
  25. 25. A 23. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az alábbi ve-
    gyületeket alkalmazzuk; ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 6 ci klo[T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7 ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Tyr-Gly] SEQ. ID 9 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-Trp-Ala] SEQ. ID 10 ci ki ο [T yr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. ID 11 ciklo[Tyr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12 ciklo[Tyr-trp-Ala-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 13 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] SEQ. ID 14 ci kló [T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Pro] SEQ. ID 26
    62.637/SM • · ♦ · · · • ··· < · · · • · ♦ · · · ···· ··* ·· ·· ·
  26. 26. A 23. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet asztma kezelésére alkalmazzuk.
  27. 27. A 10-13. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy a vegyületet légzörendszeri betegség kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására alkalmazzuk.
  28. 28. A 27. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet asztma kezelésére alkalmazzuk.
  29. 29. A 14-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy a vegyületet légzörendszeri betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására alkalmazzuk.
  30. 30. A 29. igénypont szerinti alkalmazási eljárás, azzal jellemezve, hogy légúti betegséget kezelünk.
  31. 31. Az (5) általános képletű vegyület, ahol az általános képletben Rt jelentése benzilcsoport, p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-
    -csoport;
    R2 jelentése benzilcsoport. 3-indolil-metil-csoport vagy (CH2)2-CONH2-csoport;
    R3 jelentése 1-5 szénatomos egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoport, és X jelentése hidrogénatom vagy R3 és X jelentése egymáshoz kapcsolódva -(CH2)3-csoport;
    R4 jelentése hidrogénatom, benzilcsoport, 3-indolil-metil-csoport vagy p-hidroxi-benzil-csoport;
    W jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy 3-indolil-metil-csoport és Z jelentése hidrogénatom vagy W és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
    62.637/SM • ♦· · · ·♦· · • · · · · · ··«*··· ·· ·· ·
    - 80azzal a feltétellel, hogy amennyiben R2 jelentése (CH2)2-COOH-csoport, akkor
    Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport és az R1 csoporthoz kapcsolódó szénatom abszolút konfigurációja (R) alkalmazása, azzal jellemezve, hogy valamely fájdalomcsillapító hatású készítmény előállítására alkalmazzuk.
  32. 32. A 31. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyület általános képletében
    Rt jelentése p-hidroxi-benzil-csoport vagy 3-indolil-metil-csoport;
    R2 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R3 jelentése CH2CH(CH3)2 csoport és X jelentése hidrogénatom;
    R4 jelentése 3-indolil-metil-csoport;
    R5 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport és Z jelentés hidrogénatom vagy R5 és Z jelentése együttesen -(CH2)3-csoport;
    vagy ezen vegyület hidrát, izoszter vagy gyógyszerészetileg elfogadható só formája és ezt a vegyületet alkalmazzuk.
  33. 33. A 31. igénypont szerinti alkalmazási eljárás, azzal jellemezve, hogy az alábbi vegyületeket alkalmazzuk.
    ciklo[Tyr-trp-l_eu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 6 ciklo[T rp-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 7 ciklo[tyr-trp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 8 ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T yr-Gly] SEQ. ID 9 ciklo[T yr-trp-Leu-Arg-T rp-Ala] SEQ. ID 10 ciklo[Tyr-trp-Leu-Arg-T rp-ala] SEQ. ID 11 ciklo[T yr-T rp-Leu-Arg-T rp-Gly] SEQ. ID 12 ciklo[Tyr-trp-Ala-Arg-Trp-Gly] SEQ. ID 13 ciklofT yr-trp-Leu-Arg-trp-Gly] SEQ. ID 14
    62.637/SM <
    • ··* • · · ··* ·*·
    - 81 ciklo[Tyr-trp-l_eu-Arg-Trp-Pro] SEQ. ID 26.
  34. 34. A 10-13. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy fájdalomcsillapító hatású készítmény előállítására alkalmazzuk.
  35. 35. A 14-16. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, azzal jellemezve, hogy fájdalomcsillapító hatású készítmény előállítására alkalmazzuk.
HU9602157A 1994-02-03 1995-01-10 Cyclic neurokinin a antagonists HUT74383A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/191,571 US5521156A (en) 1994-02-03 1994-02-03 Cyclic neurokinin A antagonists

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9602157D0 HU9602157D0 (en) 1996-09-30
HUT74383A true HUT74383A (en) 1996-12-30

Family

ID=22706020

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9602157A HUT74383A (en) 1994-02-03 1995-01-10 Cyclic neurokinin a antagonists

Country Status (19)

Country Link
US (1) US5521156A (hu)
EP (1) EP0741743B1 (hu)
JP (2) JPH09511490A (hu)
KR (3) KR100380872B1 (hu)
CN (1) CN1139931A (hu)
AT (1) ATE172205T1 (hu)
AU (1) AU691246B2 (hu)
CA (1) CA2182486C (hu)
DE (1) DE69505351T2 (hu)
DK (1) DK0741743T3 (hu)
ES (1) ES2123234T3 (hu)
FI (1) FI963074A (hu)
HU (1) HUT74383A (hu)
IL (1) IL112489A0 (hu)
MX (1) MX9603194A (hu)
NO (1) NO963255L (hu)
NZ (1) NZ279595A (hu)
WO (1) WO1995021187A1 (hu)
ZA (1) ZA95710B (hu)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5830863A (en) * 1988-06-20 1998-11-03 Merrell Pharmaceuticals Inc. Neurokinin A antagonists
US5744120A (en) * 1993-03-30 1998-04-28 The Dupont Merick Pharmaceutical Company Ternary radiopharmaceutical complexes
US5521156A (en) * 1994-02-03 1996-05-28 Merrell Pharmaceuticals Inc. Cyclic neurokinin A antagonists
US5879659A (en) * 1996-03-13 1999-03-09 Dupont Pharmaceuticals Company Ternary radiopharmaceutical complexes
MX9709494A (es) * 1996-12-04 1998-07-31 Pfizer Compuestos peptidicos ciclicos, procedimiento para su produccion, composiciones que los contienen y uso de los mismos.

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4102877A (en) * 1976-07-28 1978-07-25 Merck & Co., Inc. Cyclization of peptides
US4659691A (en) * 1985-02-08 1987-04-21 Merck & Co., Inc. Novel cyclic Hexapeptide LHRH antagonists
IT1233696B (it) * 1989-05-29 1992-04-14 Menarini Farma Ind Peptidi di sintesi antagonisti della neurochinina a. loro sali e relativi procedimenti di fabbricazione
IT1241761B (it) * 1990-08-03 1994-02-01 Menarini Farma Ind Peptidi di sintesi antagonisti della neurochinina a, loro sali e relativi procedimenti di fabbricazione
ES2103857T3 (es) * 1991-08-13 1997-10-01 Takeda Chemical Industries Ltd Peptidos ciclicos y su uso.
US5521156A (en) * 1994-02-03 1996-05-28 Merrell Pharmaceuticals Inc. Cyclic neurokinin A antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
FI963074A0 (fi) 1996-08-02
NZ279595A (en) 1997-12-19
IL112489A0 (en) 1995-03-30
NO963255D0 (no) 1996-08-02
NO963255L (no) 1996-10-02
KR100380873B1 (ko) 2003-04-18
FI963074A (fi) 1996-08-02
KR100380872B1 (ko) 2003-04-18
JP2005089471A (ja) 2005-04-07
CA2182486C (en) 2002-10-08
AU1677195A (en) 1995-08-21
MX9603194A (es) 1997-05-31
ATE172205T1 (de) 1998-10-15
KR100378726B1 (ko) 2003-10-04
EP0741743B1 (en) 1998-10-14
CA2182486A1 (en) 1995-08-10
ES2123234T3 (es) 1999-01-01
ZA95710B (en) 1995-10-16
WO1995021187A1 (en) 1995-08-10
AU691246B2 (en) 1998-05-14
CN1139931A (zh) 1997-01-08
DK0741743T3 (da) 1999-06-23
DE69505351T2 (de) 1999-06-02
JPH09511490A (ja) 1997-11-18
US5521156A (en) 1996-05-28
EP0741743A1 (en) 1996-11-13
HU9602157D0 (en) 1996-09-30
DE69505351D1 (de) 1998-11-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7732412B2 (en) Methods of treatment using novel LHRH antagonists having improved solubility properties
JP3350701B2 (ja) ボンベシン類似体類
EP0315367B1 (en) Polypeptides
US5817756A (en) Pseudo- and non-peptide bradykinin receptor antagonists
KR100306506B1 (ko) 폴리펩티드봄베신길항제
HU213114B (en) Process for producing nonapeptide bombesin antagonists and pharmaceutical compositions containing them
US5521158A (en) Pseudopeptide bradykinin receptor antagonists
JP2927936B2 (ja) ペプチド類
JP2002519993A (ja) ブラジキニン型ペプチド
CA2129032A1 (en) Phenylalanine analogs of bombesin
CA2022740C (en) Cyclic neurokinin a antagonists
JP3568952B2 (ja) ５位及び６位に修飾アミノアシル残基を有するｌｈｒｈ拮抗薬
HUT74383A (en) Cyclic neurokinin a antagonists
US5225528A (en) Cyclic hexapeptide oxytocin antagonists
US6458923B1 (en) Modified position (7) bradykinin antagonist peptides
JPH05112600A (ja) 環状ヘキサペプチドオキシトシン拮抗剤
JP2001505216A (ja) ブラジキニンｂ▲下２▼レセプターのペプチドアゴニスト
WO1994006453A1 (en) Bradykinin antagonists containing aliphatic amino acids in the 5-position

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee