HUT73494A - Analogs of peptide yy and uses thereof - Google Patents

Analogs of peptide yy and uses thereof Download PDF

Info

Publication number
HUT73494A
HUT73494A HU9502833A HU9502833A HUT73494A HU T73494 A HUT73494 A HU T73494A HU 9502833 A HU9502833 A HU 9502833A HU 9502833 A HU9502833 A HU 9502833A HU T73494 A HUT73494 A HU T73494A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
arg
leu
pyy
lys
homo
Prior art date
Application number
HU9502833A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9502833D0 (en
Inventor
Ambikaipakan Balasubramaniam
Original Assignee
Univ Cincinnati
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Cincinnati filed Critical Univ Cincinnati
Publication of HU9502833D0 publication Critical patent/HU9502833D0/hu
Publication of HUT73494A publication Critical patent/HUT73494A/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57545—Neuropeptide Y
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measurement And Recording Of Electrical Phenomena And Electrical Characteristics Of The Living Body (AREA)
  • Measuring Pulse, Heart Rate, Blood Pressure Or Blood Flow (AREA)

Description

A találmány peptid-származékokra vonatkozik, amelyek gyógyászati szerként gyomor-bél-rendszeri rendellenességek kezelésére alkalmazhatók.
Az YY-peptid (PYY) egy 36 aminosav-maradékot tartalmazó peptid-amid, amelyet eredetileg sertésbélből izoláltak, és a gyomor-bél-rendszer és a hasnyálmirigy endokrin sejtjeiben lokalizálódik [Tatemoto és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci. 79, 2514 (1982)]. Az YY-peptid N-terminálisán és C-terminálisán tirozin-amidot tartalmaz; e két tirozin után nevezték el az YYpeptidet (Y a peptid-nomenklatúrában tirozin aminosav-maradé- i kot jelent). Ezenkívül a PYY-nak számos centrális és perifériás szabályozó szerepe közös a homológ peptiddel, az Y neuropeptiddel (NPY), amelyet eredetileg sertésagyból izoláltak [Tatemoto, Proc. Natl. Acad. Sci. 79, 5485 (1982)]. A PYY sejtbeli lokalizálódásával szemben a NPY a nyálkahártya alatti és myenterális neuronokbán van jelen, amelyek a nyálka, illetve a simaizom rétegeket látják el idegekkel [Ekblad és munkatársai, Neuroscience 20, 169 (1987)]. Úgy gondolják, hogy a PYY és az NPY is gátolja a bélmozgást és a vérátáramlást [Laburthe, Trends Endocrinol. Metab. 1, 168 (1990)], és ismert az is, hogy gyengítik a bazális [Cox és munkatársai, Br. J. Pharmacol. 101, 247 (1990); Cox és munkatársai, J. Physiol. 398, 65 (1988); Cox és munkatársai, Peptides 12, 323 (1991); Friel és munkatársai, Br. J. Pharmacol., 88, 425 (1986)] és a kiválasztást fokozó szerek által indukált intesztinális szekréciót patkányban [Lundberg és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci USA 79, 4471 (1982); Playford és munkatársai, Láncét 335, 1555 (1990)] és emberben (lásd Playford és munkatársai fent idézett munkáját), • ·
- 3 valamint stimulálják a nettó abszorpciót [MacFadyen és munkatársai, Neuropeptides 7, 219 (1986)]. Ezenkívül megemelkedett plazma PYY szintekről számoltak be számos olyan betegség esetén, amelyek hasmenést okoznak [Adrián és munkatársai, Gastroenterology 89, 1070 (1985)]. A fenti megfigyeléseket összegezve úgy tűnik, hogy a PYY és NPY étkezés után kerülnek a keringésbe [Adrián és munkatársai, Gastroenterology 89, 1070 (1985); Balasubramaniam és munkatársai, Neuropeptides 14, 209 (1989)], és így fiziológiás szerepet játszhatnak az intesztinális szekréció és abszorpció szabályozásában, a has- í menés természetes inhibitoraként szolgálva.
Egy nagy affinitású PYY-receptor rendszert írtak le patkány intesztinális hámrétegben [Laburthe és munkatársai, Endocrinology 118, 1910 (1986); Laburthe, Trends Endocrinol. Metab. supra], amely valamivel nagyobb affinitást mutat PYY-nal, mint NPY-nal szemben, és kimutatták, hogy ez negatív kapcsolásban van az adenilát-ciklázzal [Servin és munkatársai, Endocrinology 124, 692 (1989)]. A PYY konzisztensen nagyobb szekréciógátló potenciált mutatott, mint az NPY feszültségre kapcsolt patkány vékonybél preparátumokon (Cox és munkatársai, J. Physiol. supra), míg az NPY C-terminális fragmentumait kevésbé hatékonynak találták szekréciógátló potenciáljukat tekintve, mint a PYY-t (Cox és munkatársai, Br. J. Pharmacol. supra). Néhány részleges szekvencia alkalmazásával végzett szerkezet-aktivitás vizsgálat arra az eredményre vezetett, hogy a PYY(22-36) szekvenciát azonosították, az intesztinális PYY-receptorokkal kölcsönhatásba lépő aktív helyként [Balsubramaniam és munkatársai Pept. Rés. L 32 (1988)].
- 4 Ezenkívül a PYY-ról kimutatták, hogy számos fiziológiai aktivitásban részt vesz, többek között a tápanyagfelvétel [lásd például Bilcheik és munkatársai, Digestive Disease Week 505, 623 (1993)], sejt-proliferáció [lásd például Laburthe, Trends Endocrinol. Metab. 1, 168 (1990); Voisin és munkatársai, J. Bioi. Chem. (1993)], lipolízis [lásd például Valet és munkatársai, J. Clin. Invest. 85, 291 (1990)] és érösszehúzódás [lásd például Lundberg és munkatársai, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79, 4471 (1982)] velejárója.
A sertésből származó és humán PYY aminosav-szekvenciája í a következő:
sertés PYY: YPAKPEAPGEDASPEELSRYYASLRHYLNLVTRQRY (1) humán PYY: YPIKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY (2)
A kutya PYY és a patkány PYY aminosav-szekvenciája azonos a sertés PYY-éval.
A találmány egyrészt az YY-peptid
Rí R3 r2:x-a22-a23-a24-a25-a26-a27-a2,-a2’-a30-a3,-a32-y-r4 (I) általános képletű új analógjaira vonatkozik - a képletben X jelentése 0-5 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja az N-terminális aminosavat is, amelyhez az R! és R2 kötődik;
Y jelentése 0-4 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja a C-terminális aminosavat is, amelyhez az R3 és R4 kötődik;
R! jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport • · · · · · · · ·· • · ·· · · · · • 4 · 4 «· · • 4 · · · « * « ♦ 4 ♦·« ·« ·«.·
- 5 (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport);
R2 jelentése hidrogénatom 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például i benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport);
A22 jelentése aromás aminosav, Alá, Aib, Anb, N-Me-Ala vagy hiányzik;
A23 jelentése Ser, Thr, Alá, Aib, N-Me-Ser, N-Me-Thr, N-Me-Ala vagy hiányzik;
A24 jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Gly, Aib, Anb, N-Me-Leu vagy hiányzik;
A25 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
A26 jelentése Alá, His, Thr, 3-Me-His, 1-Me-His, β-pirazolil-alanin, N-Me-His, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-e-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom vagy egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
A jelentése egy Tyr-től eltérő aromás aminosav;
• «
- 6 28
A jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
A29 jelentése Asn, Alá, Gin, Gly, Trp vagy N-Me-Asn;
A30 jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
A31 jelentése Val, Ile, Trp, Aib, Anb, vagy N-Me-Val;
A32 jelentése Thr, Ser, N-Me-Ser, N-Me-Thr vagy D-Trp;
R3 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (pél- / dául benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport); és
R4 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport) vagy ezek gyógyászatiig elfogadható sóira vonatkozik.
Az előnyös kiviteli alakokban A27 jelentése Phe, Nal, Bip,
Pcp, Tic, Trp, Bth, Thi vagy Dip.
Előnyösek azok a kiviteli alakok, amelyekben X jelentése
A -A -A -A —A , ahol
A17 jelentése Cys, Leu, Ile, Val, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
A18 jelentése Cys, Ser, Thr, N-Me-Ser vagy N-Me-Thr;
A19 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes • · ·· ··· · β · ♦ · ♦ · « * ♦ • · · · · « · • · · ·♦« ·· · · »«
- 7 vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport), Cys vagy Orn;
A20 jelentése aromás aminosav vagy Cys; és
A21 jelentése aromás aminosav vagy Cys;
vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói.
Előnyösek továbbá azok a kiviteli alakok, amelyekben
Y jelentése A33-A34-A35-A36, ahol
A33 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport í vagy arilcsoport), Cys vagy Orn;
A34 jelentése Cys, Gin, Asn, Alá, Gly, N-Me-Gln, Aib vagy
Anb;
A35 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport, vagy arilcsoport), Cys vagy Orn; és
A jelentése aromás aminosav vagy Cys;
vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói.
A találmány szerinti vegyület képlete előnyösen az alábbi: N-a-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (3);
H-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (4);
N-a-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Trp-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (5);
N-a-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Thi-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (6);
- 8 * · · · ··«· ·· • · · · · · * • · · · · »· • · · · · « · • · ··« · · «· ··
Ν-α-Ac-Tyr-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (7);
vagy ezek valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
A találmány vonatkozik továbbá az YY-peptid
Rí R3 \ / (Π) r2-a25-a26-a27-a28-a29-a30-a31-a32-y-r4 általános képletű analógjaira - a képletben az N-terminális aminosavhoz kötődik az Rj és R2;
Y jelentése 0-4 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja a C-terminális aminosavat is, amelyhez az R3 és R4 kötődik;
Rí jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport);
R2 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport);
A25 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes • ·
- 9 vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
A26 jelentése Alá, His, Thr, 3-Me-His, 1-Me-His, β-pirazolil-alanin, N-Me-His, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-e-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
A27 jelentése aromás aminosav,
A28 jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
A29 jelentése Asn, Alá, Gin, Gly, Trp vagy N-Me-Asn; í
A30 jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
A31 jelentése Val, Ile, Trp, Aib, Anb, vagy N-Me-Val;
A32 jelentése Thr, Ser, N-Me-Ser, N-Me-Thr vagy D-Trp;
R3 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport); és
R4 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport (például metilcsoport), 6-18 szénatomos arilcsoport (például fenil- vagy naftil-acetil-csoport), 1-12 szénatomos acilcsoport (például formil-, acetil- vagy mirisztoilcsoport), 7-18 szénatomos aralkilcsoport (például benzilcsoport) vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport (például p-metil-fenil-csoport) vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sóira.
- 10 Az előnyös kiviteli alakokban A27 jelentése Phe, Nal, Bip, Pcp, Tic, Trp, Bth, Thi vagy Dip.
Előnyösek azok a kiviteli alakok, amelyekben Y jelentése A33-A34-A35-A36, ahol
A33 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport), Cys vagy Orn;
A34 jelentése Gin, Asn, Alá, Gly, N-Me-Gln, Aib, Cys vagy
Anb; (
A35 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-e-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport), Cys vagy Orn; és
Λ £
A jelentése aromás aminosav vagy Cys;
vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói.
A vegyület képlete előnyösen: N-a-Ac-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (8).
A találmány továbbá az YY-peptid új, dimer analógjaira is vonatkozik. A dimer úgy keletkezik, hogy vagy két (I) általános képletű peptidet, vagy két (II) általános képletű peptidet vagy egy (I) és egy (II) általános képletű peptidet foglal magában. Az egyik kiviteli alakban a dimert egy dikarbonsav kötőmolekula alkalmazásával alakítjuk ki, amely az egyes peptidekben lokalizálódó primer vagy szekunder szabad aminokhoz képest kötődni [lásd például R. Vavrek és J. Stewart, Peptides: Structure and Function 381-384 (Pierce Chemical Co.) (1983)]. Megfelelő
dikarbonsav kötő molekulák például a borostyánkősav, glutaminsav és a ftálsav. Egy másik kiviteli alakban a dimert egy aminosav kötő molekula alkalmazásával alakítjuk ki, amely az egyik pepiidnek egy szabad aminocsoportjához, és a másik peptidnek egy szabad karboxilcsoportjához képest kötődni. Az aminosav-kötő molekula előnyösen nem egy α-aminosav. Megfelelő aminosav kötő molekulák például az amino-kapronsav és az amino-valeriánsav. Egy újabb kiviteli alakban a dimert az egyes peptidekben lokalizálódó ciszteinek közötti diszulfid-híddal alakítjuk ki [lásd például M. Berngtowicz és G. Piatsueda, Peptides: {
Structure and Function, 233-244 (Pierce Chemical Co.) (1985);
F. Albericio és munkatársai, Peptides, 535 (1990) (ESCOM 1991)].
Az X, Y, Z; A22, A23, A24, stb. és Ser, Leu, stb. szimbólumok a peptid-szekvenciában aminosav-maradékot jelentenek, azaz =N-CH(R)-CO- maradékot, ha az az N-terminálison van, vagy -NH-CH(R)-CO-N= maradékot, ha az a C-terminálison van, vagy -NH-CH(R)-CO- maradékot, ha az nem az N- vagy C-terminálison van, ahol R egy aminosav vagy aminosav-maradék oldalláncát (vagy jellemző csoportját) jelenti. így például R = -CH2COOH az Asp-ban, R = H a Gly-ben, R - -CH2OH a Ser-ben, R = -CH3 az Ala-ban és R = -CH2CH2CH2CH2NH2 az Arg-ban. Ha az aminosav-maradék optikailag aktív, ezek a szimbólumok az L-konfigurációt jelentik, hacsak a D-konfigurációra kifejezetten nem utalunk.
A leírásban az egyszerűség kedvéért a különféle aminosavakat konvencionális vagy nem-konvencionális rövidítéseikkel jelöljük. Ezek szakember számára jól ismertek, de a biztonság • · ·· <«·* ·β • · ··· · ·· • · · · · »· • · · · · · ·
- 12 kedvéért alább felsoroljuk ezeket. A leírásban ismertetett összes peptid-szekvenciát a konvencionális módon írtuk, azaz a bal oldalon van az N-terminális aminosav és a jobb oldalon a C-terminális aminosav. Két aminosav-maradék közötti rövid vonal jelenti a peptidkötést.
Asp = D = aszparaginsav
Alá = A = alanin
Arg = R = arginin
Asn = N = aszparagin
Cys - C - cisztein í
Gly = G - glicin
Glu = E = glutaminsav
Gin = Q = glutamin
His = H = hisztidin
Ile = I = izoleucin
Leu = L = leucin
Lys = K = lizin
Met = M = metionin
Phe = F = fenil-alanin
Pro = P = prolin
Ser = S = szerin
Thr = T = treonin
Trp = W = triptofán
Tyr = Y = tirozin
Val = V = valin
Orn = ornitin
Nal = 2-naftil-alanin
Thi = 2-tienil-alanin
Pcp = 4-klór-fenil-alanin
Bth = 3-benzotienil-alanin
Bip = 4,4’-bifenil-alanin
Tic = tetrahidroizokinolin-3-karbonsav
Aib = amino-izovajsav Anb = a-amino-n-vajsav Dip = 2,2-difenil-alanin Thz = 4-tiazolil-alanin.
A találmány szerinti vegyületek gyógyászatilag elfogadható í sók formájában is lehetnek. Előnyösek például a gyógyászatilag elfogadható szerves savakkal, például ecetsavval, tejsavval, maleinsavval, citromsavval, almasavval, aszkorbinsavval, borostyánkősavval, benzoesavval, szalicilsavval, metánszulfonsavval, toluolszulfonsavval, trifluor-ecetsavval vagy pamoesavval, valamint a polimer savakkal, például csersavval vagy karboxi-metilcellulózzal, és a szervetlen savakkal, például a hidrogén-halogenidekkel, így hidrogén-kloriddal, kénsavval vagy foszforsavval vagy hasonlóval képzett sók.
A találmány tárgyát képezik továbbá a gyógyászati készítmények is, amelyek egy találmány szerinti vegyületet és egy gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagot tartalmaznak, e készítmények a túlzott intesztinális víz- és elektrolit-szekréciót képesek csökkenteni.
Az előnyös kiviteli alakokban a készítmények orális adagolásra folyadék, pirula, tabletta vagy kapszula formában vannak; a folyadékokat nazálisán adagolhatjuk cseppek vagy spray formájában, vagy intravénásán szubkután módon, parenterálisan,
- 14 • ·« ···♦ ·· ♦ · · ·4 4 • ·· 4·· • · 4 · 4« intraperitoneáiisan vagy rektálisan adagolhatjuk ezeket. Szubkután vagy intramuszkuláris adagolás céljára a gyógyászati készítmények olajos emulziók vagy diszperziók formájában is lehetnek egy lipofil sóval, például pamoesavval együtt vagy biológiailag lebontható, nyújtott felszabadulású készítmények formájában lehetnek. Maximális hatékonyság elérésére nullarendű felszabadulása kívánatos.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy eljárás a túlzott intesztinális víz- és elektrolit-szekréció csökkentésére emlősökben, a fenti eljárás értelmében az emlősnek, például embernek, a í fent említett vegyületek gyógyászatilag hatásos mennyiségét adagoljuk.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy eljárás sejt-proliferáció szabályozására emlősökben, az eljárás értelmében az emlősnek a fenti vegyületeket tartalmazó készítmények hatásos mennyiségét adjuk. Az eljárással előnyösen az intesztinális sejtek proliferációját szabályozzuk.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy eljárás a tápanyag-transzport fokozására, a lipolízis szabályozására, és a vérátáramlás szabályozására emlősökben, az eljárás értelmében az emlősnek a fent említett készítmények gyógyászatilag hatásos mennyiségét adagoljuk.
A találmány szerinti vegyületek szekréciót gátló és motilitást gátló tulajdonságaik következtében széles spektrumú biológiai aktivitással rendelkeznek. A találmány szerinti vegyületek az hámsejtekkel való közvetlen kölcsönhatás, vagy talán az intesztinális szekréciót stimuláló hormonok vagy neurotranszmitterek szekréciójának gátlása révén gátolják a gasztrointesz···· • · · ♦ · · · ··· *«l ·· 4 « · ·
- 15 tinális szekréciót. A találmány szerinti vegyületek képesek lehetnek az intesztinális vérátáramlás szabályozására is, amely viszont módosíthatja az intesztinális hidrosztatikus nyomást a nettó víz-abszorpció előnyére.
A találmány szerinti vegyületek különösen alkalmasak különféle gasztrointesztinális rendellenességek kezelésére (lásd például Harrison's Principles of Internál Medicine, McGraw-Hill Inc., New York, 12. kiadás), amelyek a túlzott intesztinális elektrolit- és víz-szekrécióval, valamint a csökkent abszorpcióval kapcsolatosak, ilyen például a fertőző (például virális vagy í bakteriális) hasmenés, a gyulladásos hasmenés, a rövid bél szindróma, vagy a tipikusan sebészeti beavatkozások, például ileosztomia után fellép hasmenés. A fertőző hasmenésekre példaként említjük - a korlátozás szándéka nélkül - az akut virális hasmenést, az akut bakteriális hasmenést (például salmonella, campylobacter vagy clostridium, vagy protozoon által okozott fertőzés következtében), és az utazók hasmenését (például Norwalk vírus vagy rotavírus fertőzés következtében). A gyulladásos hasmenésre példaként említjük a felszívódási zavar szindrómát, a trópusi sprue-t, a krónikus hasnyálmirigy-gyulladást, a Crohn-féle betegséget, a hasmenést és az irritáló bél-szindrómát. Azt is felismertük, hogy a találmány szerinti peptidek alkalmasak gasztrointesztinális rendellenességekből adódó betegségek kezelésére sürgős vagy életveszélyes helyzetben, például sebészeti beavatkozás után, vagy kolera esetén. Ezenkívül a találmány szerinti vegyületek AIDS-es betegek kezelésére is alkalmazhatók, különösen leromlás esetén.
- 16 A találmány szerinti vegyületek alkalmasak a vékonybél folyadék- és elektrolit-szekréciójának gátlására, a tápanyagtranszport fokozására - valamint a sejt-proliferáció fokozására a gasztrointesztinális rendszerben, a lipolízis szabályozására például a zsír-szövetben, és a vérátfolyás szabályozására emlősökben.
A találmány szerinti vegyületek előnyösek, mivel ezek a természetes YY-peptid csonkolt változatát képviselik; így a rövidebb peptidek nemcsak egyszerűbbé teszik a vegyületek szintézisét és tisztítását, de a gyártási műveletek számát és költségét í is csökkentik. A rövidebb PYY-vegyületek előnyösek azért is, mivel az ilyen peptidek kizárólag csak a PYY-receptorokkal lépnek kölcsönhatásba, és a homológ receptorokkal, például az NPY Y1 és Y3 receptorral nem; így a nem kívánatos agonista vagy antagonista mellékreakciók minimalizálhatók.
A találmány további jellemzői és előnyei az előnyös kiviteli alakok soronkövetkező leírásából és az igénypontokból világosan kitűnnek.
Az ábrákat röviden az alábbiakban ismertetjük.
Az 1. ábra mutatja a HF-os hasítással kapott N-a-Ac[Phe27]PYY(22-36) (3) («25 mg) félpreparatív fordított fázisú kromatogramját. Körülmények: Vydac Cl8 félpreparatív oszlop (250 x 10 mm, 300 A pórusméret, 10 mikron részecskeméret); átfolyási sebesség 4,7 ml/perc; az 1., 2., 3. és 4. frakciókat öszszegyűjtöttük, és analitikai kromatográfiás eljárással analizáltuk. A homogén frakciókat (1-3.) egyesítettük, és nagyvákuumban szárítottuk.
• ·
- 17 A 2. ábra mutatja grafikusan a 125I-PYY patkány éhbél-membránokhoz való kötődésének gátlását a PYY (1), PYY(22-36) (10), [Im-DNP-His26]PYY (9), [Ala32]PYY(22-36) (11), [Ala23,32]PYY(22-36) (12), [Glu28]PYY(22-36) (13), N-a-Ac-PYY(22-36) (14), N-a-Ac-[p.Cl-Phe28]PYY(22-36) (15), N-a-Ac-[Glu26]PYY(22-36) (16), N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3), N-a-Ac-[N-Me-Tyr26]PYY(22-36) (17), N-a-mirisztoil-PYY(22-36) (18), N-a-naftalinacetil-PYY(22-36) (19), és PYY(22-36) (10) növekvő koncentrációi által.
A 3A-B ábra mutatja a PYY (1), PYY(22-36) (10) és ana- i lógjai szekréciógátló hatását egy rövidzárási áram (SCC) alapérték felett, feszültséghez kapcsolt patkány éhbél-preparátumokbán. Az SCC változásának értékeit μΑ/0,6 cm -ben adtuk meg,
3-7 különböző éhbél-preparátumból nyert átlagérték ± SEM feltüntetésével. Az A és B görbén látható peptideket ugyanazzal a szimbólummal jelöltük, mint a 2. ábrán.
A 4. ábra mutatja grafikusan a 125I-PYY patkány éhbél-membránokhoz való kötődésének gátlását a PYY, az N-a-Ac-PYY(22-36) (14), N-a-Ac-[Tic27]PYY(22-36) (25), N-a-Ac-[Bip27]PYY(22-36) (22), N-a-Ac-[Nal27]PYY(22-36) (23), N-a-Ac-[Bth27]PYY(22-36) (21), N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3), N-ot-Ac-[Phe27]PYY(25-36) (26), N-a-Ac-[Trp27]PYY(22-36) (5) és N-a-Ac-[Thi27]PYY(22-36) (6) növekvő koncentrációi által.
Az alábbiakban ismertetjük a találmány szerinti előnyös kiviteli alakok szintézisét, biológiai hatásuk analízisét és alkalmazásukat. A szekréciógátló hatások kiváltásához szükséges szerkezeti követelmények meghatározására a PYY aktív helyének, a ♦ · · · » ♦· ·· · · Λ * • · · « «« • · · * · · · •»· *·♦ ·· ·« ··
- 18 PYY(22-36)-nak számos analógját szintetizáltuk, és összehasonlítottuk kötődési és szekréciógátló képességüket patkány éhbélen.
A találmány szerinti előnyös kiviteli alakok szerkezetét, szintézisét és alkalmazását az alábbiakban ismertetjük.
Szerkezet
A találmány szerinti peptidek általános képlete a fent megadott. Ezek mindegyike aromás aminosav-maradékot tartalmaz 27-es helyzetben, ami jelentős mind a szekréciógátló aktivitáshoz, mind a hasmenést gátló szerkénti alkalmazáshoz. í
Szintézis
A találmány szerinti peptideket a peptidkémiában szakemberek számára jól ismert bármely módszerrel előállíthatjuk. Ezen módszerek kiváló összefoglalása található például az alábbi irodalmi helyen: Solid Phase Peptide Synthesis 2. kiadás [Stewart, J. M. és Young, J. D. Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984)].
Az 1. és 2. táblázatban összefoglalt peptideket az alábbiak szerint szintetizáltuk. A peptid-szintézist egy pepiid szintetizátorban (Applied Biosystems Model 430A) hajtottuk végre. Az aminosav és szekvencia analíziseket Waters Pico-Tag és Applied Biosystems Model 470A készülékekkel végeztük. A peptideket Waters Model 600 oldószer-szállító rendszert alkalmazva tisztítottuk, amelyet egy Model 481 spektrofotométerrel és U6K injektorral egészítettünk ki a szokásos előírás szerint. A peptidek tömegét standard módszerekkel határoztuk meg a Michigan-i Egyetemen (Protein Chemistry Facility, Ann Arbor, Michigan). Az összes Boc-L-aminosav-származékot, oldószert, vegyszert és • «
- 19 gyantát kereskedelmi forgalomból szereztük be, és további tisztítás nélkül alkalmaztuk.
0,45 mmol para-metil-benzhidroxil-amin (MBHA) gyantát a peptid-szintetizátor reakcióedényébe helyeztünk, és a védett aminosavakat szekvenciálisán kapcsoltuk a gyártó által szolgáltatott program alkalmazásával, amelyet úgy módosítottunk, hogy beépítettünk egy kettős kapcsolási eljárást [lásd például Balasubramaniam és munkatársai, Peptide Research 1, 32 (1988)]. Az összes aminosavat 2,2 ekvivalens előzetesen előállított szimmetrikus anhidrid alkalmazásával kapcsoltuk. Az Arg-t, Gln-t és i
Asn-t azonban előre kialakított 1-hidroxi-benzotriazol (HOBT) észter formájában kapcsoltuk a mellékreakciók elkerülése céljából. A szintézis végén az Ν-α-Boc-csoportot eltávolítottuk, és ugyanakkor a szabad a-NH2-csoportot acileztük 2 ekvivalens ecetsavanhidriddel és diizopropil-etil-aminnal reagáltatva, amíg negatív ninhidrin tesztet kaptunk [Anal. Biochem. 34, 595 (1970)]. Körülbelül 1,0 g peptid-gyantát ezután 10 ml hidrogén-fluoriddal kezeltünk, amely körülbelül 0,8 g p-krezolt tartalmazott, 1 órán keresztül -2 és -4 °C közötti hőmérsékleten. A HF-ot vákuumban eltávolítottuk, és a maradékot dietil-éterrel egy zsugorított szűrős tölcsérbe vittük át, többször mostuk dietil-éterrel, 2 x 15 ml ecetsavval extraháltuk, és liofilizáltuk. A kapott nyers peptideket fél-preparatív RP-HPLC-vel tisztítottuk, amint azt az
1. ábra mutatja.
A szintetizált analógokra példaként említjük az alábbiakat: [im-DNP-His26]PYY
YPAKPEAPGEDASPEELSRYYASLR (im-DNP-His26]YLNLVTRQRY-NH2 (9) ·· ·»·« <·
ΡΥΥ(22-36)
ASLRHYLNLVTRQRY-NH2(10) [Ala32]PYY(22-36)
ASLRHYLNLV [Ala]RQRY-NH2(11) [Ala23,32]PYY(22-3 6)
A[Ala]LRHYLNLV[Ala]RQRY-NH2(12) [Glu28]PYY(22-36)
ASLRHY[G1u]NLVTRQRY-NH2(13)
N-a-Ac-PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRHYLNLVTRQRY-NH2 (14)(
N-oc-Ac-[p.Cl.Phe26]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLR[p.Cl.Phe26]YLNLVTRQRY-NH2(15)
N-a-Ac-[Glu28]PYY(22-36)
N-oc-Ac-ASLRHY[G1u]NLVTRQRY-NH2(16)
N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36)
N-oc-Ac-ASLRH[Phe]ENLVTRQR[N-Me-Tyr]-NH2(3)
N-oc-Ac-[N-Me-Tyr3e]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRHYENLVTRQR[N-Me-Tyr]-NH2(17)
N-a-mirisztoil-PYY(22-36)
N-a-mirisztoil-ASLRHYLNLVTRQRY-NH2(18)
N-cc-naftalinacetil-PYY (22-36)
N-oc-naftalinacetil-ASLRHYLNLVTRQRY-NH2(19)
N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Phe]ENLVTRQR[N-Me-Tyr]-NH2(3)
N-a-Ac-PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRHYLNLVTRQRY-NH2(20)
N-a-Ac-[Bth27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Bth]LNLVTRQRY-NH2(21)
- 21 • ···
N-oc-Ac-[Bip27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Bip]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Nal27]PYY(22-36)
N-oc-Ac-ASLRH[Nal]LNLVTRQRY-NH2
N-oc-Ac-[Trp27]PYY(22-36)
N-oc-Ac-ASLRH[Trp]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Thi27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Thi]LNLVTRQRY-NH2
N-<x-Ac-[Tic27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Tic]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Phe27]PYY(25-36)
N-a-Ac-H[Phe]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Phe27,Thi3ö]PYY(22-36)
N-oc-Ac-ASLRH[Phe]LNLVTRQR[Thi]-NH2
N-oc-Ac-[Thz2ó,Phe27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLR[Thz][Phe]LNLVTRQRY-NH2 N-a-Ac-[Pcp27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Pcp]LNLVTRQRY-NH2
N-oc-Ac-[Phe22,27]PYY(22-36)
N-cc-Ac-[Phe]SLRH[Phe]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Tyr22,Phe27]PYY(22-36)
N-oc-Ac-[Tyr]SLRH[Phe]LNLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Trp28]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRNY[Trp]NLVTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Trp’°]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRHYLN[Trp]VTRQRY-NH2
N-a-Ac-[Ala26,Phe27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLR[Ala][Phe]LNLVTRQRY-NH2 (22) (23) (5) (6) (25) <
(26) (27) (28) (29) (30) (Ό (31) (32) (33) .: .······:··· • ·· ··· * · · · · · ··· ·· «4·
N-a-Ac-[Bth27]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Bth]LNLVTRQRY-NH2(34)
N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-3 6)
N-oc-Ac-ASLRH[Phe]LNLVTRQRY-NH2(3 5)
N-a-Ac-[Phe27’36]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Phe]LNLVTRQR[Phe]-NH2(36)
N-a-Ac-[Phe27,D-Trp32]PYY(22-36)
N-a-Ac-ASLRH[Phe]LNLV[D-Trp]RQRY-NH2(3 7)
Analízis(
Kötődési vizsgálatok
A csak Tyr36-on jelzett 125I-PYY-t és a patkány éhbél hámsejt plazma-membránok előállítását standard módszerekkel végeztük [Laburthe és munkatársai, Endocrinology, supra; Servin és munkatársai supra; Voisin és munkatársai, Ann. N. Y. Acad. Sci., 611, 343 (1990)]. A kötődési kísérleteket 0,25 ml össztérfogatú 60 mmol/1 koncentrációjú HEPES pufferben (pH 7) végeztük, amely 2% BSA-t, 0,1% bacitracint, 5 mmol/1 MgCl2-t és 0,05 nmol/1 125I-PYY-t tartalmazott a kompetíciós peptidekkel együtt vagy anélkül. A megkötött és szabad peptideket 20000 g-vel 10 percen keresztüli centrifugálással választottuk el. A nem-specifikus 125I-PYY kötődést 1 pmol/l jelzetlen PYY jelenlétében határoztuk meg, amely az összes kötődés 10%-át jelentette.
Rövidzárási áram mérések
A peptidek szekréciógátló hatását a rövidzárási áram (SCC) mérésével vizsgáltuk Ussing kamrában rögzített és automatikusan feszültséghez csatolt patkány éhbél nyálkahártyán Cox és
- 23 ·*.· · · ·> · ·· • · · · · *· ·· «X munkatársai (J. Physiol. supra) módszere szerint. Röviden, a nyálkahártya csíkokat egy perspex Ussing kamra két fele közé helyeztük (ablakméret 0,6 cm2), amely oxigénezett (95% oxigén/5% CO2) Krebs-Henseleit-oldatot tartalmazott (117 mmol/1 NaCl, 4,7 mmol/1 KC1, 2,5 mmol/1 CaCl2, 1,2 mmol/1 MgSO4, 24,8 mmol/1 NaHCO3 és 11,1 mmol/1 glükóz, pH 7,4) 37 °C-on. Rutinszerűen minden egyes állatból négy éhbél-preparátumot készítettünk, és ezek összehasonlítható potenciálkülönbségeket és SCC-t mutattak, de statisztikus kiértékelést nem végeztünk. A preparátumokat W-p kettős feszültségkapcsoló i alkalmazásával automatikusan feszültséghez kapcsoltuk, és a rövidzárási áramot folyamatosan kijeleztük, és regisztráltuk. Amikor egy stabil alapvonal SCC-t elértünk, csak a bazolaterális rezervoárba adagoltunk peptideket, és megszerkesztettük a kumulatív koncentráció-válasz görbéket.
Adatok analízise
A kötődési kísérletekben minden egyes pont legalább három párhuzamosan végrehajtott kísérlet középértékét jelenti. Egyszerűség kedvéért az SEM értékeket a kötődési kísérletekben nem tüntettük fel a 2. ábrán, de ezek 10%-nál kisebbek voltak. Az SCC változásának értékeit μΑ/0,6 cm2 átlag ± 1 SEM-ben adtuk meg 3-7 különböző preparátumból. Az EC50 értékeket a kumulatív koncentráció-válasz görbékből számítottuk ki ismétlő görbeillesztő program segítségével. Az adatcsoportok (SCC regisztrálások) összehasonlítását páratlan Student-féle t-teszttel végeztük, ahol a p < 0,5 értéket tekintettük statisztikusan szignifikánsnak.
- 24 A találmány szerinti vegyületek biológiai aktivitásának eredményeit az alábbiakban ismertetjük (1. és 2. táblázat). A vizsgált vegyületeket tisztaságuk, valamint kötődési tulajdonságuk és szekréciógátló potenciáljuk szempontjából vizsgáltuk patkány éhbélen.
A tisztított peptidek vizsgálataink szerint >96%-ban homológok, analitikai fordított fázisú kromatográfiás vizsgálat szerint, és ezenkívül a várt aminosav-összetétellel és tömeggel rendelkeznek. így például az 1. ábra mutatja az N-a-Ac-[Phe ]-PYY(22-36) (3) peptid RP-HPLC kromatogramját. A szabad ( peptideket szekvencia-analízissel is jellemeztük (lásd 1. és 2. táblázatot). A peptidek összhozama 10% és 30% között volt.
A PYY, az [im-DNP-His26]PYY (9) és a PYY(22-36) (10) analógok a patkány éhbél hámsejt plazma-membránokhoz kötött 125I-PYY-t koncentráció-függő módon helyettesítették. Noha IC50 értékeik alapján az [im-DNP-His26]PYY (9) és a PYY(2236) (10) 20-szor kevésbé hatékonyak voltak, mint a PYY, ugyanazt a maximális választ váltották ki, mint az érintetlen hormon (lásd 2. ábrát és 1. táblázatot). A Thr helyettesítése Ala-val, mint az [Ala32]PYY(22-36) (11) esetén alacsonyabb kötődési potenciált eredményezett, míg a Ser és Thr helyettesítése Ala-val tovább csökkentette a receptor affinitást. Negatív töltés bevitele a 28-as helyzetben a helikális szerkezet megváltoztatása nélkül, mint a [Glu28]PYY(22-36) (13) esetén szintén csökkentette a kötődési lehetőséget az ionos kölcsönhatások megbomlása révén. Mivel a hidrofób csoportok ismert módon növelik a kölcsönhatást a receptorokkal [Balasubramaniam és munkatársai, Biochem. Biophys. Rés. Comm. 137, 1041 (1986)],
- 25 az Ν-α-mirisztoil- és N-oc-naftil—acetil-PYY(22-36)-származékok kötődését is meghatároztuk. Ez a két analóg valamivel kisebb kötődési affinitást mutatott, mint a PYY(22-36) (10), valószínűleg a fokozott sztérikus gátlás következtében. Másrészről a PYY(22-36) N-a-acetilezése (14) négyszeresére növelte a receptor affinitást. Az N-oc-Ac-PYY(22—36)-tal (20) végzett
6 további szerkezet-aktivitás vizsgálatokból kitűnt, hogy a Tyr helyettesítése N-Me-Tyr-nal, vagy a His helyettesítése p.Cl-Phe-nal csökkentette a kötődési potenciált. Azonban a Tyr27 helyettesítése Phe-nal 28%-kal növelte a receptor-affinitást. í
Kontrollként megvizsgáltuk a PYY(22-36) (10) és néhány analógja kötődését is. Azonban ezen analógok egyike sem gátolta a 125I-PYY kötődését még 10 pmol koncentrációban sem.
A patkány éhbél nyálkahártya-preparátumokban a PYY(22-36) (10) analógok koncentráció-függő módon csökkentették az alapvonal SCC-t (3A és B ábra), a számított EC50 értékeket az 1. táblázatban közöljük. A PYY(22-36) (10) analógjai általában kevésbé hatásosak szekréciógátló szerként, mint kötődési inhibitorként. Az analógok potenciáljának sorrendje hasonló volt, mint amelyet a kötődési vizsgálatoknál találtunk, két figyelemreméltó kivétellel, ezek az N-a-mirisztoil-PYY(22-36) (18) és az N-a-naftil-acetil-PYY(22-36) (19). Az Ν-α-acetilezés és a Tyr27 helyettesítése Phe-nal a PYY(22-36) szekréciógátló potenciálját növelte, és ez az analóg, az N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) csak 9-szer volt kevésbé hatékony, mint az érintetlen hormon. Ezenkívül nem volt szignifikáns különbség a maximális inhibitor válaszokban, amely a PYY-ra -12,6 ± 2,4 μΑ/0,6 cm2 (440 nmol,
- 26 n=6), míg az N-oc-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) esetén -12,0 ± 1,3 μΑ/0,6 cm2 (1,4 gmol, n=7) volt.
1. táblázat
PYY, PYY-fragmensek és analógjaik kötődési és szekréciógátló potenciájának összehasonlítása
Pepiid RT* MH+ (Számított) Kötődés0 (perc) ic50 (nmol/l) scc° ec50 (nmol/l)
PYY (1) 4,8 4240,2 (4241,7) 0,2 1,7
NPY (24) 34,0c 4253,8 (4254,7) 2,0 9d
[im-DNP-His26]PYY (9) 8,7C 4406,9 (4407,8) 4,0 72
PYY(22-36) (10) 4,4 1888,8 (1890,2) 4,0 77
[Ala32]PYY(22-36) (11) 4,7 1858,8 (1860,2) 71 n.d.
[Ala23,32]PYY(22-36) (12) 4,3 1842,8 (1844,2) >10000 n.d.
[Glu28]PYY(22-36) (13) 3,8 1905,1 (1906,2) 199 n.d.
N-a-Ac-PYY(22-36) (14) 10,0 1930,9 (1932,2) 1,12 40
N-a-Ac-[p.ClPhe26]PYY(22-36) (15) 14,9C 1975,4 (1976,7) 50 124
N-a-Ac-[Glu28]PYY(22-36) (16) 3,9 1947,0 (1948,2) 44,7 3000
N-a-Ac-[N-Me-Tyr36]PYY(22-36) (17) 13,5 1945,3 (1946,3) 354 792
N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) 8,3 1915,3 (1916,2) 0,80 15,1
N-a-mirisztoil-PYY(22-36) (18) 4,8 2099,0 (2100,6) 17,8 3300
N-a-naftil-acetil-PYY(22-36) (19) 17,0 2056,9 (2058,4) 8,9 19500
a: izokratikus, 27% CH3CN, amely 0,1% TFA-t tartalmaz; b: három független kísérlet átlaga;
c: izokratikus, 32% CH3CN, amely 0,1% TFA-t tartalmaz; d: irodalomból;
n.d.: nem vizsgált;
RT: retenciós idő.
- 28 Az N-a-mirisztoil-PYY(22-36) (18) és N-a-naftil-acetil-PYY(22-36) (19) analógok közepes kötődési potenciáljukkal ellentétben gyenge szekréciógátló válaszokat mutattak körülbelül 20 nmol/1 küszöb-koncentrációknál, és EC50 értékeik nagyobbak voltak, mint 2, illetve 30 pmol/l. Az N-a.-mirisztoil-PYY(22-36) (18) 7,4 pmol/l kumulatív koncentráció után az alap SCC-t -5,2 ± 0,6 μΑ/0,6 cm2-rel (n=7) csökkentette. 100 nmol/1 PYY ezt követő hozzáadása tovább csökkentette az SCC-t -10,2 ± 0,7 μΑ/0,6 cm -rel (n=7), és ez nem volt szignifikánsan eltérő a PYY(22-36)-ra (10) adott kontroli-válaszoktól.................. ké- i pes antagonizálni a PYY válaszokat, három szövetet kezeltünk az analóggal (1 pmol/l), és a PYY koncentráció-válasz görbéket megszerkesztettük, és összehasonlítottuk a kontrollokkal. A fragmens az alapáramot -0,4 ± 0,3 μΑ/0,6 cm2-rel csökkentette, és a kapott PYY EC50 érték (4,4 ± 1,2 nmol/1, n=3) nem különbözött szignifikánsan a kezeletlen kontroliétól (2,6 ±1,1 nmol/1, n=3).
Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a PYY (1) aktív helyének, a PYY(22-36)-nak (10) módosítása lényeges növekedéshez vezethet e fragmensnek mind kötődési, mind szekréciógátló potenciáljában. E sorozat kulcs-analógjai az alábbi hatáserősségi sorrendet mutatták: PYY (1) > N-oc-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) > N-a-Ac-PYY(22-36) (14) > PYY(22-36) (10). Ezenkívül vizsgálatainkból kitűnt, hogy a Ser23 és Thr32 hidroxilcsoportjai, valamint a His imidazolcsoportja fontosak az intesztinális PYY-t előnyben részesítő receptorokkal szembeni kölcsönhatáshoz. Noha általában jó korreláció volt az analógok kötődési és szekréciógátló potenciálja között, voltak azért figyelemreméltó
- 29 kivételek is. Az N-a-mirisztoil-PYY(22-36) (18) és N-a-naftilacetil—PYY(22-36) (19) analógok a 125I-PYY kötődését közepes hatékonysággal gátolták, de gyenge szekréciógátló válaszokat mutattak. Ebből a megfigyelésből arra lehet következtetni, hogy ezek az analógok antagonisták lehetnek. Azonban az éhbél-membránok előkezelése ezekkel az analógokkal nem változtatta meg szignifikánsan a PYY-ra adott szekréciógátló válaszokat, ezért ezen ellentmondás oka pillanatnyilag nem tisztázott.
A 2. táblázatban és a 4. ábrán IC50 értékeket ismertetünk a PYY(22-36) (10) további analógjaira, és a PYY(25-36) ana- í lógókra. A 2. táblázatban ismertetett eredmények alapján e sorozatba tartozó analógok az alábbi hatékonysági sorrendet mutatták:
N-oc-Ac-[Tic27]PYY(22-36) (25) < N-oc-Ac-[Bip27]PYY(22-36) (22) < N-oc-Ac-[Nal27]PYY(22-36) (23) < N-a-Ac-[Bth27]PYY(22-36) (21) < N-cc-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) < N-cc-Ac-[Phe27]PYY(25-36) (26) < N-a-Ac-[Trp27]PYY(22-36) (5) < N-oc-Ac-[Thi27]PYY(22-36) (6) < N-a-Ac-PYY(22-36) (14) < PYY (1).
2. táblázat
PYY és PYY analógok receptor-kötődési adatainak összehasonlítása
Peptid száma Peptid szerkezete IC50 (nmol/l)
PYY (1) 0,04
N-a-Ac-PYY(22-36) (14) 0,08
905 N-oc-Ac-[Bth27]PYY(22-36) (21) 0,22
906 N-oc-Ac-[Bip27]PYY(22-36) (22) 4,46
911 N-a-Ac-[Nal27]PYY(22-36) (23) 0,39
915 N-oc-Ac-[Trp27]PYY(22-36) (5) 0,10
916 N-a-Ac-[Thi27]PYY(22-36) (6) 0,095
914 N-oc-Ac-[Phe27]PYY(25-36) (26) 0,15
913 N-a-Ac-[Tic27]PYY(22-36) (25) 4,50
A napjainkig ismertetett NPY/PYY receptorokat átfogóan Y-l, Y-2 és Y-3 alcsoportokba osztották [Balsubramaniam és munkatársai, J. Bioi. Chem. 265, 14724 (1990); Michel, Trends Pharmacol. Sci. 12, 389 (1991)]. Mind az Y-l, mind az Y-2 receptor előnyben részesíti a PYY-t az NPY-nal szemben, és még fontosabb, hogy az NPY és a PYY C-terminális fragmentumai csak az Y-2 altípusra hatásosak. Ezzel szemben az Y-3 receptorok nagyobb affinitást mutatnak az NPY-nal szemben, mint a PYY-nal szemben. Mivel a patkány éhbél nyálkahártya szekréciógátló válaszok agonista hatékonyságának rendje az alábbi: PYY (1) > NPY (24) > PYY(13-36) (32) > NPY(13-36) (33), ezek a hámsejt receptorok Υ-2-szerűek, és teljesen érzéketlenek az Y-l-re szelektív [Pro34]NPY agonistával szemben (Cox és * · · · ···· ·· ·· · · · · · · • · · · · · · • · · · · · · • · · ··· ·· ·· «·
- 31 munkatársai, Peptides, supra). Az ismertetett eredmények szerint az Ν-α-Ac—PYY(22-36) (14) és N-oc-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3) hatékonyabb, mint a PYY(22-36) (10) és az NPY különböző hosszúságú, megfelelő C-terminális fragmentumai (Cox és munkatársai, Br. J. Pharmacol. supra). A PYY-nal (1) és annak C-terminális fragmentumával szemben mutatott nagyobb affinitás összehasonlítva az NPY-nal (24) és annak megfelelő fragmentumaival, összhangban van a patkány intesztinális hámsejt membránokon végzett receptor-kötődési vizsgálatokból kapott hatékonysági sorrenddel (Laburthe és munkatársai supra; Voisin í és munkatársai, Ann. N.Y. Acad. Sci. supra; Laburthe, supra;
Voisin és munkatársai Am. J. Physiol.)
Ezenkívül előállítottuk a 3. táblázatban ismertetett analógokat is, és meghatároztuk receptor-kötő aktivitásukat. A 3. táblázatban közölt eredmények azt mutatják, hogy az N-a-Ac-[Tyr22,Phe27]PYY(22-36) (7) kompetitív kötődésében hasonlít a PYY-hoz (1), jelezvén, hogy egy aromás aminosav, például Tyr bevezetése 22-es helyzetbe hatékony PYY analógot eredményez.
3. táblázat
Peptid száma Peptid szerkezete IC50 (nmol/1)
PYY (1) 0,10
917 N-cc-Ac-[Phe27,Thi36]PYY(22-26) (27) 4,46
918 N-oc-Ac-[Thz26,Phe27]PYY(22-36) (28) 4,50
904 N-a-Ac-[Pcp27]PYY(22-36) (29) 1,58
908 N-oc-Ac-[Phe22,27]PYY(22-36) (30) 11,22
910 N-a-Ac-[Tyr22,Phe27]PYY(22-36) (7) 0,10
• · · · · · • · • · · • · · • · · «
Alkalmazás
A találmány szerinti eljárás gyakorlati kivitelezése során a találmány szerinti analógok bármelyikét vagy azok kombinációját, például az N-a-Ac-[Phe27]PYY(22-36) (3), N-a-Ac-[Trp27]PYY(22-36) (24), N-a-Ac-[Phe27]PYY(25-36) (3), N-a-Ac-[Thi27]PYY(22-36) (6) peptidet vagy ezek származékai közül egyet, vagy ezek kombinációit hatásos mennyiségben bármely szokásos és elfogadható módon adhatjuk a kezelendő betegnek. Ezeket a vegyületeket, vagy készítményeket orálisan (például szájüregben), szublinguálisan, parenterálisan (például 1 intramuszkulárisan, intravénásán vagy szubkután módon), rektálisan (például kúpok vagy beöntések formájában), transzdermálisan (például bőr-elektroporálással) vagy inhalálással (például aeroszolként) adhatjuk szilárd, cseppfolyós vagy gáz halmazállapotú készítmény formájában, beleértve a tablettákat és szuszpenziókat is. Az adagolást végrehajthatjuk folyamatos terápiában alkalmazott egyetlen egységdózis formával, vagy ad libitum adott egyetlen dózissal.
Ennek megfelelően a találmány szerinti eljárást a gyakorlatban akkor alkalmazzuk a szimptómák enyhítésére, amikor arra éppen szükség van, vagy talán azok fellépése fenyeget. A találmány szerinti eljárást hatékonyan alkalmazhatjuk folyamatos vagy profilaktikus kezelésként is.
A találmány szerinti készítmények előállítására szilárd, cseppfolyós vagy gáz halmazállapotú hordozóanyagokat alkalmazhatunk; így a találmány szerinti készítmények formája lehet például tabletta, pirula, kapszula, kúp, por, enterális bevonatú vagy egyéb módon védett készítmény (például ioncserélő gyan- 33 -
• · tához kötött vagy lipid-protein hólyagokba csomagolt), nyújtott hatású készítmény, oldat, szuszpenzió, elixír, aeroszol vagy hasonló. A hordozóanyagot különféle olajok közül választhatjuk, például ásványolajat, állati, növényi vagy szintetikus eredetű olajat, így például földimogyoróolajat, szójaolajat, ásványolajat, szezámolajat, vagy hasonlót alkalmazhatunk. Előnyös cseppfolyós hordozóanyagok a víz, sóoldat, vizes dextróz és glikolok, különösen (ha a vérrel izotóniásak) injektálható oldatok előállítására. így például intravénás adagolásra alkalmas készítmények a hatóanyag steril vizes oldatai, amelyeket úgy állítunk elő, l hogy a szilárd hatóanyagot vízben oldva vizes oldatot állítunk elő, majd az oldatot sterilizáljuk. Megfelelő gyógyászati segédanyagok közé tartoznak a keményítő, cellulóz, talkum, glükóz, laktóz, talkum, zselatin, maláta, rizs, liszt, kréta, szilícium-dioxid, magnézium-sztearát, nátrum-sztearát, glicerin-monosztearát, nátrium-klorid, szárított, lefölözött tej, glicerin, propilénglikol, víz, etanol és hasonlók. A készítményekben alkalmazhatunk szokásos gyógyászati adalékanyagokat is, például konzerválószereket, stabilizálószereket, nedvesítő- vagy emulgeálószereket, ozmotikus nyomás beállítására alkalmas sókat, puffereket és hasonlókat. A megfelelő gyógyászati hordozóanyagokat és a készítményeket például a Remington’s Pharmaceutical Sciences tartalmazza (E.W. Martin). Ezek a készítmények mindenesetre a hatóanyag hatásos mennyiségét tartalmazzák egy vagy több megfelelő hordozóanyaggal, amellyel a megfelelő dózisforma elkészíthető a kezelendő alanynak való megfelelő adagoláshoz.
A találmány szerinti vegyület dózisa a fenti rendellenességek kezelésére az adagolás módjától, a kezelendő alany korától és testtömegétől, a kezelendő alany állapotától függ, és végső soron a kezelést végző orvos vagy állatorvos határozza meg. Gyógyászatilag hatásos mennyiség alatt a kezelést végző orvos vagy állatorvos által fenti módon meghatározott hatóanyag mennyiséget értjük. Jellegzetes adagolási mód az orális vagy parenterális adagolás. A napi dózis orális adagolás esetén rendszerint 0,1 - 100 mg/testtömeg kg, parenterális adagolás esetén rendszerint 0,001 - 50 mg/testtömeg kg. ί
A gasztroenterológiai rendellenességek, különösen a fertőzéses (például vírusos vagy bakteriális) eredetű vagy gyulladásos eredetű hasmenés, vagy a sebészeti beavatkozásból eredő hasmenés hatékony megelőzése vagy kezelése esetén fontos az, hogy a terápiás szer viszonylag nem toxikus, nem antigén és nem irritáló az alkalmazási koncentrációban.
A fenti példák és kiviteli alakok pusztán a találmány szemléltetésére szolgálnak, azok különféle módosításai vagy változtatásai, amelyek szakember számára nyilvánvalók, a találmány oltalmi körébe tartoznak.

Claims (20)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1.
    R,R, r2\-a22.a2J-a24-a25-a2s-a27-a2*-a2’-aJ0-a31-a32-y-r4 általános képletű vegyületek - a képletben
    X jelentése 0-5 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja az N-terminális aminosavat is, amelyhez Rj és R2 kötődik;i
    Y jelentése 0-4 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja a C-terminális aminosavat is, amelyhez az R3 és R4 kötődik;
    Rj jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport;
    R2 jelentése 1-12 szénatomos alkilcsoport, 6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport;
    A jelentése aromás aminosav, Alá, Aib, Anb, N-Me-Ala vagy hiányzik;
    A23 jelentése Ser, Thr, Alá, Aib, N-Me-Ser, N-Me-Thr, N-Me-Ala, D-Trp vagy hiányzik;
    A24 jelentése Leu, Gly, Ile, Val, Trp, Aib, Anb, N-Me-Leu vagy hiányzik;
    A25 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys
    - 36 -ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
    A26 jelentése Alá, His, Thr, 3-Me-His, 1-Me-His, β-pirazolil-alanin, N-Me-His, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-e-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
    A27 jelentése egy Tyr-tól eltérő aromás aminosav;
    A jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu; ί
  2. 2 9
    A jelentése Asn, Alá, Gin, Gly, Trp vagy N-Me-Asn;
    A jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
    A31 jelentése Val, Ile, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Val;
    A32 jelentése Thr, Ser, N-Me-Ser, N-Me-Thr vagy D-Trp;
    R3 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport; és
    R4 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport - vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói.
    2 7
    2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, amelyekben A jelentése Phe, Nal, Bip, Pcp, Tic, Trp, Bth, Thi vagy Dip.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, amelyekben
    X jelentése A17-A18-A19-A20-A21, ahol
    A jelentése Cys, Leu, Ile, Val, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
    - 37 A18 jelentése Cys, Ser, Thr, N-Me-Ser vagy N-Me-Thr;
    A19 jelentése Cys, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg,
    Lys-s-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport) vagy Orn;
    jelentése aromás aminosav vagy Cys; és jelentése aromás aminosav vagy Cys;
    vagy ezek valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, amelyekben
    A33 jelentése Cys, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg,
    Lys-s-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport) vagy Orn;
    A34 jelentése Cys, Gin, Asn, Alá, Gly, N-Me-Gln, Aib vagy Anb;
    A35 jelentése Cys, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg,
    Lys-e-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport) vagy Orn; és jelentése aromás aminosav vagy Cys;
    vagy ezek valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete N-ct-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (3), vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  6. 6. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete
    H-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (4), vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  7. 7. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete N-oc-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Trp-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (5), vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  8. 8. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete
    N-a-Ac-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Thi-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (6), vagy valamely gyógyászatilag elfogad- í ható sója.
  9. 9. A 4. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete N-a-Ac-Tyr-Ser-Leu-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (7), vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  10. 10.
    Rí R3 \ / (Π) r2-a25-a26-a27-a28-a29-a30-a31-a32-y-r4 általános képletű vegyületek - a képletben az N-terminális aminosavhoz kötődik az Rj és R2;
    Y jelentése 0-4 aminosavból álló lánc, amely magában foglalja a C-terminális aminosavat is, amelyhez az R3 és R4 kötődik;
    Rj jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport;
    ·· ·♦·* ·· • · · · ·· 9 ··
    R2 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport;
    A jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
    A26 jelentése Alá, His, Thr, 3-Me-His, 1-Me-His, β-pirazolil-alanin, N-Me-His, Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo- ί
    -Arg, Lys-s-NH-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport), Orn vagy hiányzik;
    A27 jelentése aromás aminosav,
    A jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
    A jelentése Asn, Alá, Gin, Gly, Trp vagy N-Me-Asn;
    A jelentése Leu, Ile, Val, Trp, Aib, Anb vagy N-Me-Leu;
    A31 jelentése Val, Ile, Trp, Aib, Anb, vagy N-Me-Val;
    A32 jelentése Thr, Ser, N-Me-Ser, N-Me-Thr vagy D-Trp;
    R3 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport; és
    R4 jelentése hidrogénatom, 1-12 szénatomos alkilcsoport,
    6-18 szénatomos arilcsoport, 1-12 szénatomos acilcsoport, 7-18 szénatomos aralkilcsoport vagy 7-18 szénatomos alkarilcsoport vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói.
    - 40 ·* ·♦·· 1» • » » *
    V· * « · V ·· '<*» 4 4· 27
  11. 11. A 10. igénypont szerinti vegyületek, amelyekben A jelentése Phe, Nal, Bip, Pcp, Tic, Trp, Bth, Thi vagy Dip.
  12. 12. A 10. igénypont szerinti vegyületek, amelyekben
    Y jelentése A33-A34-A35-A36, ahol
    A33 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport), Cys vagy Orn;
    A34 jelentése Cys, Gin, Asn, Alá, Gly, N-Me-Gln, Aib vagy
    Anb; «'
    A35 jelentése Arg, Lys, homo-Arg, dietil-homo-Arg, Lys-ε-ΝΗ-R (ahol R jelentése hidrogénatom, egyenes vagy elágazó szénláncú 1-10 szénatomos alkilcsoport vagy 6-18 szénatomos arilcsoport), Cys vagy Orn; és A36 jelentése aromás aminosav vagy Cys, vagy gyógyászatilag elfogadható sóik.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti vegyület, amelynek képlete N-cc-Ac-Arg-His-Phe-Leu-Asn-Leu-Val-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2 (26), vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.
  14. 14. Gyógyászati készítmény túlzott intesztinális víz- és elektrolit-szekréció csökkentésére, amely az 1. vagy 10. igénypont szerinti vegyület gyógyászatilag hatásos mennyiségét tartalmazza egy gyógyászatilag elfogadható hordozóanyaggal együtt.
  15. 15. Eljárás túlzott intesztinális víz- és elektrolit-szekréció csökkentésére emlősben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a 14. igénypont szerinti készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
    ·»··
  16. 16. Eljárás sejt-proliferáció szabályozására emlősben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a 14. igénypont szerinti készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
  17. 17. Eljárás tápanyag-transzport fokozására emlősben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a 14. igénypont szerinti készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
  18. 18. Eljárás lipolízis szabályozására emlősben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a 14. igénypont szerinti készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
  19. 19. Eljárás vérátáramlás szabályozására emlősben, azzal jellemezve, hogy az emlősnek a 14. igénypont szerinti készítmény hatásos mennyiségét adagoljuk.
  20. 20. Dimer vegyület, amely két 10. igénypont szerinti pepiidből, vagy egy 1. igénypont szerinti peptidből és egy 10. igénypont szerinti peptidből áll, és a dimer fenti két peptid közötti amid-kötéssel vagy diszulfid-kötéssel van kialakítva.
HU9502833A 1993-03-29 1994-03-29 Analogs of peptide yy and uses thereof HUT73494A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3853493A 1993-03-29 1993-03-29
US10932693A 1993-08-19 1993-08-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9502833D0 HU9502833D0 (en) 1995-11-28
HUT73494A true HUT73494A (en) 1996-08-28

Family

ID=26715298

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9502833A HUT73494A (en) 1993-03-29 1994-03-29 Analogs of peptide yy and uses thereof

Country Status (14)

Country Link
US (1) US5604203A (hu)
EP (1) EP0692971A4 (hu)
JP (1) JPH08510205A (hu)
KR (1) KR960701653A (hu)
CN (1) CN1124927A (hu)
AU (1) AU685803B2 (hu)
CA (1) CA2157766A1 (hu)
FI (1) FI954559A (hu)
HU (1) HUT73494A (hu)
NZ (1) NZ265452A (hu)
PL (1) PL310897A1 (hu)
SG (1) SG52542A1 (hu)
SK (1) SK121895A3 (hu)
WO (1) WO1994022467A1 (hu)

Families Citing this family (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5516653A (en) 1993-12-28 1996-05-14 Synaptic Pharmaceutical Corporation DNA encoding a human neuropeptide Y/peptide YY/pancreatic polypeptide receptor (Y4) and uses thereof
US5545549A (en) 1994-02-03 1996-08-13 Synaptic Pharmaceutical Corporation DNA encoding a human neuropeptide Y/peptide YY (Y2) receptor and uses thereof
US5602024A (en) 1994-12-02 1997-02-11 Synaptic Pharmaceutical Corporation DNA encoding a hypothalamic atypical neuropeptide Y/peptide YY receptor (Y5) and uses thereof
US5989920A (en) 1994-12-02 1999-11-23 Synaptic Pharmaceutical Corporation Methods of modifying feeding behavior compounds useful in such methods and DNA encoding a hypothalmic atypical neuropeptide Y/peptide YY receptor Y5
US5912227A (en) * 1995-01-27 1999-06-15 North Carolina State University Method of enhancing nutrient uptake
US7048906B2 (en) 1995-05-17 2006-05-23 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing and treating small intestinal bacterial overgrowth (SIBO) and SIBO-related conditions
US6861053B1 (en) 1999-08-11 2005-03-01 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing or treating irritable bowel syndrome and other disorders caused by small intestinal bacterial overgrowth
US6558708B1 (en) * 1995-05-17 2003-05-06 Cedars-Sinai Medical Center Methods for manipulating upper gastrointestinal transit, blood flow, and satiety, and for treating visceral hyperalgesia
FR2735983B1 (fr) * 1995-06-29 1997-12-05 Centre Nat Rech Scient Peptide permettant de modifier l'activite du systeme immunitaire humain ou animal
US6696409B1 (en) 1996-06-05 2004-02-24 Prince Of Wales Medical Research Institute Limited (Powmr Ltd.) Neuropeptide Y agonists
AU772915B2 (en) * 1996-06-05 2004-05-13 Prince Of Wales Medical Research Institute Limited Neuropeptide Y agonists
AUPO029096A0 (en) * 1996-06-05 1996-07-04 Crc For Biopharmaceutical Research Pty Ltd Npy y2 agonists
US6713265B1 (en) 1997-06-04 2004-03-30 Synaptic Pharmaceutical Corporation Methods of modifying feeding behavior, compounds useful in such methods, and DNA encoding a hypothalamic atypical neuropeptide Y/peptide YY receptor (Y5)
US5916869A (en) * 1997-06-13 1999-06-29 North Carolina State University Method of treating birds in ovo
EP1950223A3 (en) * 1998-03-09 2009-05-13 Zealand Pharma A/S Pharmacologically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis
US6046167A (en) * 1998-03-25 2000-04-04 University Of Cincinnati Peptide YY analogs
US7745216B2 (en) * 1999-02-10 2010-06-29 Curis, Inc. Methods and reagents for treating glucose metabolic disorders
ES2353728T3 (es) 1999-02-10 2011-03-04 Curis, Inc. Péptido yy (pyy) para tratar trastornos metabólicos de la glucosa.
US7601691B2 (en) 1999-05-17 2009-10-13 Conjuchem Biotechnologies Inc. Anti-obesity agents
US6734166B1 (en) * 2000-02-08 2004-05-11 North Carolina State University Method of reducing aluminum levels in the central nervous system
RU2275207C2 (ru) 2000-12-14 2006-04-27 Амилин Фармасьютикалз, Инк. Способ снижения доступности питательного вещества, способ подавления аппетита
GB0121709D0 (en) * 2001-09-07 2001-10-31 Imp College Innovations Ltd Food inhibition agent
AU2002332054B2 (en) 2001-09-24 2007-11-08 Imperial Innovations Limited Modification of feeding behavior
US8058233B2 (en) * 2002-01-10 2011-11-15 Oregon Health And Science University Modification of feeding behavior using PYY and GLP-1
WO2003057235A2 (en) 2002-01-10 2003-07-17 Imperial College Innovations Ltd Modification of feeding behavior
ATE494002T1 (de) * 2002-06-14 2011-01-15 Amylin Pharmaceuticals Inc Prävention und/oder behandlung von colitis ulcerosa mit pyy oder pyyä3-36ü
US7186692B2 (en) 2002-12-17 2007-03-06 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery and non-infused administration of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
US7229966B2 (en) 2002-12-17 2007-06-12 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
JP2006516262A (ja) * 2002-12-17 2006-06-29 ナステック・ファーマシューティカル・カンパニー・インコーポレーテッド Ｙ２受容体結合ペプチドの粘膜送達促進のための組成物および方法ならびに肥満症の治療法および予防法
US7166575B2 (en) * 2002-12-17 2007-01-23 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of peptide YY and methods for treating and preventing obesity
GB0300571D0 (en) * 2003-01-10 2003-02-12 Imp College Innovations Ltd Modification of feeding behaviour
US7811989B2 (en) 2003-01-17 2010-10-12 Ipsen Pharma S.A.S. Peptide YY analogs
US7780973B2 (en) * 2003-12-15 2010-08-24 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Method and device for minimally invasive implantation of biomaterial
EP1789440A4 (en) * 2004-02-11 2008-03-12 Amylin Pharmaceuticals Inc REASONS FOR THE FAMILY OF PANCREATIC POLYPEPTIDES AND POLYPEPTIDES CONTAINING THEM
US8076288B2 (en) 2004-02-11 2011-12-13 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Hybrid polypeptides having glucose lowering activity
BRPI0507594A (pt) * 2004-02-11 2007-07-03 Amylin Pharmaceuticals Inc polipetìdeos hìbridos com propriedades selecionáveis
CN1953763A (zh) * 2004-03-17 2007-04-25 7Tm制药联合股份有限公司 用于治疗性干预的y4选择性受体激动剂
EA011860B1 (ru) * 2004-03-17 2009-06-30 7ТиЭм ФАРМА А/С Селективные агонисты рецептора y2 для терапевтического воздействия
JP2007531714A (ja) * 2004-03-17 2007-11-08 ７ティーエム ファーマ エイ／エス 治療的介入のためのｙ２／ｙ４選択性レセプターアゴニスト
CA2588594C (en) 2004-12-13 2014-02-18 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Pancreatic polypeptide family motifs, polypeptides and methods comprising the same
US7410949B2 (en) * 2005-01-18 2008-08-12 Hoffmann-La Roche Inc. Neuropeptide-2 receptor (Y-2R) agonists and uses thereof
PA8660701A1 (es) * 2005-02-04 2006-09-22 Pfizer Prod Inc Agonistas de pyy y sus usos
US8283312B2 (en) * 2005-02-04 2012-10-09 The Research Foundation Of State University Of New York Compositions and methods for modulating body weight and treating obesity-related disorders
GB0504857D0 (en) * 2005-03-09 2005-04-13 Imp College Innovations Ltd Novel compounds and their effects on feeding behaviour
GB0511986D0 (en) * 2005-06-13 2005-07-20 Imp College Innovations Ltd Novel compounds and their effects on feeding behaviour
EP2330124B1 (en) * 2005-08-11 2015-02-25 Amylin Pharmaceuticals, LLC Hybrid polypeptides with selectable properties
BRPI0614649A2 (pt) * 2005-08-11 2011-04-12 Amylin Pharmaceuticals Inc polipeptìdeos hìbridos com propriedades selecionáveis
US8022035B2 (en) * 2005-09-21 2011-09-20 7Tm Pharma A/S Y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions
US7851590B2 (en) * 2005-09-21 2010-12-14 7Tm Pharma A/S Y2 selective receptor agonists for therapeutic interventions
BRPI0616463A2 (pt) 2005-09-29 2011-06-21 Merck & Co Inc composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto
US20070232537A1 (en) * 2005-12-19 2007-10-04 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Intranasal pyy formulations with improved transmucosal pharmacokinetics
US20070197445A1 (en) * 2006-01-18 2007-08-23 University Of Cincinnati Compounds for control of appetite
CA2664113C (en) 2006-09-22 2013-05-28 Merck & Co., Inc. Use of platencin and platensimycin as fatty acid synthesis inhibitors to treat obesity, diabetes and cancer
TWI428346B (zh) 2006-12-13 2014-03-01 Imp Innovations Ltd 新穎化合物及其等對進食行為影響
US20090099074A1 (en) * 2007-01-10 2009-04-16 Conjuchem Biotechnologies Inc. Modulating food intake
CA2682727C (en) 2007-04-02 2016-03-22 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Indoledione derivative
GB0708226D0 (en) * 2007-04-27 2007-06-06 7Tm Pharma As Y-receptor agonists
CA2758415C (en) 2008-04-14 2019-06-04 The General Hospital Corporation Plectin-1 targeted agents for detection and treatment of pancreatic ductal adenocarcinoma
US8299023B2 (en) 2008-09-17 2012-10-30 Hoffmann-La Roche Inc. Neuropeptide-2 receptor (Y-2R) agonists
LT2393828T (lt) 2009-02-03 2017-01-25 Amunix Operating Inc. Prailginti rekombinantiniai polipeptidai ir juos apimančios kompozicijos
US9260500B2 (en) 2009-07-02 2016-02-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Peptide and use thereof
TW201138808A (en) 2010-05-03 2011-11-16 Bristol Myers Squibb Co Serum albumin binding molecules
DK2651398T3 (en) 2010-12-16 2018-03-12 Novo Nordisk As Solid compositions comprising a GLP-1 agonist and a salt of N- (8- (2-hydroxybenzyl) amino) caprylic acid
CA2865578C (en) 2012-02-27 2023-01-17 Amunix Operating Inc. Xten conjugate compositions and methods of making same
RS57727B1 (sr) 2012-03-22 2018-12-31 Novo Nordisk As Kompozicije glp-1 peptida i njihovo dobijanje
US9085637B2 (en) 2013-11-15 2015-07-21 Novo Nordisk A/S Selective PYY compounds and uses thereof
US10583172B2 (en) 2013-11-15 2020-03-10 Novo Nordisk A/S HPYY(1-36) having a beta-homoarginine substitution at position 35
JP6731958B2 (ja) 2015-06-12 2020-07-29 ノヴォ ノルディスク アー／エス 選択的ｐｙｙ化合物及びその使用
MX2019002410A (es) 2016-08-28 2019-09-18 The State Of Israel Ministry Of Agriculture & Rural Development Agricultural Res Aro Volcani Center Metodo para controlar infecciones fungicas en plantas.
WO2019149880A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Novo Nordisk A/S Solid compositions comprising a glp-1 agonist, a salt of n-(8-(2-hydroxybenzoyl)amino)caprylic acid and a lubricant
MX2022005676A (es) 2019-11-13 2022-10-27 Amunix Pharmaceuticals Inc Polipéptidos xten con código de barras y composiciones de estos, y métodos para preparar y usar los mismos.

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS646294A (en) * 1987-02-09 1989-01-10 Ajinomoto Kk Novel peptide derivative
US5026685A (en) * 1988-07-15 1991-06-25 The Salk Institute For Biological Studies NPY peptide analogs

Also Published As

Publication number Publication date
KR960701653A (ko) 1996-03-28
EP0692971A1 (en) 1996-01-24
FI954559A0 (fi) 1995-09-26
US5604203A (en) 1997-02-18
AU685803B2 (en) 1998-01-29
CA2157766A1 (en) 1994-10-13
AU6621494A (en) 1994-10-24
NZ265452A (en) 1997-09-22
JPH08510205A (ja) 1996-10-29
FI954559A (fi) 1995-09-26
EP0692971A4 (en) 1997-11-12
SG52542A1 (en) 1998-09-28
CN1124927A (zh) 1996-06-19
SK121895A3 (en) 1996-10-02
HU9502833D0 (en) 1995-11-28
PL310897A1 (en) 1996-01-08
WO1994022467A1 (en) 1994-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT73494A (en) Analogs of peptide yy and uses thereof
US6046167A (en) Peptide YY analogs
US6242563B1 (en) Peptide analogues
US20100331245A1 (en) Peptide yy analogs
EP1015007A1 (en) Analogs of peptide yy and uses thereof
AU7174494A (en) Neuropeptide y antagonists and agonists
DK2473518T3 (en) Stabilized melanocortin ligands
JP2837352B2 (ja) 胃腸運動活性を抑制するモチリン類似ポリペプチド
EP1133522B1 (en) Antagonistic analogs of gh-rh inhibiting igf-i and -ii
US20080221038A1 (en) Compounds for Control of Appetite
US20070287665A1 (en) Urotensin-II agonists and antagonists
EP0431113A1 (en) Atrial peptide derivatives
AU2002232903A1 (en) Urotensin-II agonists and antagonists
EP1878743A2 (en) Urotensin-II agonists and antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal