HUT69989A - New pharmaceutical uses of krill enzymes - Google Patents

New pharmaceutical uses of krill enzymes Download PDF

Info

Publication number
HUT69989A
HUT69989A HU9403343A HU9403343A HUT69989A HU T69989 A HUT69989 A HU T69989A HU 9403343 A HU9403343 A HU 9403343A HU 9403343 A HU9403343 A HU 9403343A HU T69989 A HUT69989 A HU T69989A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
treatment
phim
days
preparation
enzyme
Prior art date
Application number
HU9403343A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9403343D0 (en
Inventor
Ragnvald Lindblom
Faire Johan De
Original Assignee
Phairson Medical Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Phairson Medical Ab filed Critical Phairson Medical Ab
Publication of HU9403343D0 publication Critical patent/HU9403343D0/hu
Publication of HUT69989A publication Critical patent/HUT69989A/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6402—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from non-mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)

Description

A találmány nem-immunogén, fehérjeszerű anyagok és készítmények új gyógyászati aljkalmazására vonatkozik, amelyek enzimatikus hatást fejtenek ki és számos klinikai vizsgálatban, meglepő módon, hihetetlen sokféle betegség esetében gyógyulást eredményeztek. A találmánynak megfelelően úgy gondoljuk, hogy ezek az anyagok fagocitózisszerűen működnek, azaz képesnek látszanak különféle részecskék és anyagok megkülönböztetésére aszerint, hogy azok normálisnak vagy abnormálisnak tekintendők egy speciális környezetben, vagy különféleképpen vannak kifejezve, és képesek a divergens sejtek felismerésére, célbavételére és elpusztítására. Hangsúlyoznunk kell azonban, hogy a jelen leírásban a találmányt nem szándékozzuk korlátozni semmilyen feltételezett hatásmódra.
A gyógyászati alkalmazásra használható proteolitikus enzimek egyik hagyományos kipróbálási módja, hogy fehérjeszerű szerkezetekkel borított nem-gyógyuló sebek tisztítására alkalmazzák a sebészeti úton történő tisztítás helyett, főként idős betegek esetében, ahol a fekély keringési elégtelenségek következtében alakult ki . Lásd például a 4,801,451 és 4,963,491 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokat, amelyekben antarktiszi krillből (Euphasia superba) izolált exo- és endo-peptidáz enzimek keverékét és azok tisztítási célokra való felhasználását ismertetik, ami lehet gyógyászati tisztítás (4,801,451 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) és nem-gyógyászati tisztítás (4,963,491 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás). Az egyetlen gyógyászati jellegű tisztítás enzimatikus sebtisz• ·
-3títás, azaz elhalt sebek enzimatikus tisztítása. A nemgyógyászati célú alkalmazások többek között mosodai szerként, régi festmények felújítására és hasonlókra történő felhasználás. A WO/85/04809 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben antarktiszi krillből izolált enzimek emésztést elősegítő szerként való alkalmazását írják le. Az EP-A1-0170115 számú európai közzétételi iratban a krill trombuszt oldó anyagként való alkalmazását ismertetik .
Az antarktiszi krillből enzimeket és enzimkeverékeket izoláltak, és biológiai valamint biokémiai tulajdonságaikat alaposan tanulmányozták. Ezen enzimek elkülönítésére különböző izolálási eljárásokat is kifejlesztettek. Lásd például Anheller J-E., Hellgren L., Karlstam B. és Vincent J. (1989): Az antarktiszi krillből kivont új enzim preparátum biokémiai és biológiai tulajdonságai, amelyek alkalmassá teszik üszkös sebek kezelésére [Biochemical and biological profile of a new enzyme preparation from Antarctic krill (E. superba) suitable fór debridement of ulcerative lesions], Arch. Dermatol. Rés. 281. 105-110; Axelsen N. H., Kroll J. és Weeke B. (1973): A manual of quantitative immunoe1ectrophoresis: methods and appliations, Scan. J. Immunoi. 2, Suppl.; Bucht A. és Karlstam B. (1986): Immunological characterization of three highly purified trypsin-like enzymes from Antarctic krill (Euphausia superba) Bioi. Chem. Hoppe-Seyler 367, 366 (Suppl.); Bucht A., Johansson B. és Karlstam B. (1986): Separation and identification of proteases from Antarctic krill (Euphausia superba), 6th Int. Symp. HPLC Proteins,
-4Peptides and Polynucleotides, Baden-Baden pp. 34; Chen C.S., Yan T.R. és Chen H.Y. (1978): Purification and properties of trypsin-like enzymes and carboxypeptidase A from Euphausia superba, J. Food Biochem. 2., 349-366; Hellgren L., Karlstam B., Mohr V. és Vincent J. (1991): Krill enzymes - a new concept fór efficient debridement of necrotic ulcers , Int. J. Dermatol. 30, 102-103; Karlstam B. : Crossed immunoelectrophoretic krill analysis of proteins from Antarctic krill (Euphausia superba) with special reference to serine proteinases (submitted fór publication) ’’; Kimoto K.K., Kusama S. és Murakami K. (1983): Purification and characterization of serine proteinases from Euphausia Superba, Agric. Bioi. Chem. 47 , 529-534;
Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. és Randal R.J. (1951) Protein measurement with the Folin phenol reagent, J. Bioi. Chem. 193. 265-275; Moore S. és Stein W.H. (1963):
Chromatographic determination of amino acids by the use of automatic recording equipment, Methods Enzymol. 6, 819-831; Osnes K.K. és Mohr V. ( 1985 ): On the purification and characterization of three anionic serine-type peptide hydrolases from Antarctic krill, Euphausia superba, Comp. Biochem. Physiol. 82B, 607-619; és Osnes K.K. és Mohr V. (1986): On the purification and characterization of exopeptidases from Antarctic krill, Euphausia superba, Comp. Biochem. Physiol.83B. 445-448.
A találmány háttere
Az immunrendszerünk állandóan aktívan őrködik, fő funkciói közé tartozik, hogy megvédje és megőrizze « · ··
-5szervezet integritását oly módon, hogy gondoskodik a kívülről betolakodók, az öreg és elhasznált sejtek, a divergens sejtek valamint az adott környezetben abnormálisnak tekinthető oldott anyagok eltávolításáról.
A fagociták, granulociták, makrofágok és ölősejtek az immunrendszerünk ősibb elemei, működési módjuk pedig a fagocitózis, bekebelezik a kórokozókat, és lizoszómális enzimeket szabadítanak fel, amelyek megölik és megemésztik azokat.
A limfociták, T-sejtek és B-sejtek az újabb immunsejtjeink, amelyek az őrzést és a védekezést különféle módon látják el. Egyes T-sejtek toxinokat szabadítanak fel, amelyekkel megölik a mikrobákat, más típusok hírt továbbítanak és szabályozzák a válasz intenzitását és a Bsejtek antitesteket termelnek. Az ősi és új sejtek komplex módon működnek együtt testünk optimális védelme érdekében.
Egy szövetrész sérülésekor a granulociták néhány percen belül összegyűlnek a helyszínen, és elkezdik a támadást az idegen betolakodók, a sérült sejtek stb. ellen. Néhány órán belül makrofágok, ölő-sejtek és T-sejtek is válaszolnak a munkálkodó granulociták kémiai jelzésére, és belépnek a sérült részbe. A jól megkomponált osszjáték a sérült szövet megtisztításától a végső gyógyulásig tart.
Az aktíváit immunvédelem egyik jele a gyulladás, amit a különböző immunsejtekből és mikrobákból kiszivárgó toxinok okoznak, ezért az enyhe gyulladás egészséges folyamatnak tekinthető. Néha az immunvédelem túlzottan aktív, és akut gyulladás jelentkezik, ami többet árt mint használ, és ha az elnyúlt gyulladás krónikussá válik, egy autoimmun betegség
-6kezdetét jelentheti.
A gyulladás elfajulásának fő oka a mikrobiális fertőzés, mert az immunvédelem sokoldalúsága ellenére a mikrobák kifejlesztették saját védelmüket, ami hosszú távon igen veszélyes állapothoz vezethet.
A mikrobák álcázhatják magukat, hogy az immunsejtek ne tudják felismerni őket, vagy behatolhatnak sejtekbe, még immunsejtekbe is, ott élhetnek, szaporodhatnak, és megváltoztathatják a gazdasejt alapvető jellemzőit. A rákos betegségek egy része, az AIDS és ezeknél a betegségeknél kialakuló, számos komplikációt okozó opportunista fertőzések említhetők példaként a mikrobák (helytelen) viselkedésére.
Egy betegség patogenézise így attól függ, hogy az immunrendszer milyen jól működik, és normálisan tökéletesen látja-e el feladatát. A mikrobák hatása mellett a gyógyszerek az immunválasz időleges vagy tartós elnyomásának legfőbb okozói, erre a problémára a gyógyászati kutatásoknál nagy figyelmet fordítanak.
A találmány összefoglalása
Az optmális gyógyszer olyan hatóanyag lenne, amely az immunvédelemmel összhangban működik, kölcsönösen segítve egymás hatását, a betegség kiváltó okát és tüneteit célozza meg és nincsenek káros melékhatásai. Ez a találmány olyan új gyógyászati alkalmazást és új gyógyászati készítményt bocsát rendelkezésre, amelyik úgy tűnik, hogy rendelkezik az említett tulajdonságokkal. A mód, amellyel ez elérhető, magában foglalja egy vagy több proteolitikus enzim felhasználásátκ amely enzimeket az antarktiszi krillből • · · ·
-7(Euphasia superba) izoláltak. Amint fentebb említettük, ilyen enzimek már ismertek, és néhány esetben gyógyászati felhasználásukat is javasolták. Az említett enzimeknek az itt leírt célokra való felhasználásakor elért eredmények nem voltak várhatóak, és valóban nagyon meglepőek voltak. Ezen eredmények elérésének módját az alábbi példákban és a csatolt igénypontokban mutatjuk meg.
Előállítási példa
Mint fentebb említettük, proteolitikus enzimek krillből való izolálásának több módja ismert, így a következő módszer a találmány szerint használható enzim-preparátum készítésnek csak az egyik lehetséges módja.
Mélyhűtött fehér krillt (Euphasia superba) felengedtünk és homogenizáltunk. Desztillált vízzel 1:1 arányban (t/tf) hígítottuk és 0,02% nátrium-azidot adtunk hozzá, majd 6 órán át +4°C-on állni hagytuk. A vizes fázist, a 9000 rpm fordulatszámmal 40 percig centrifugált héjak és test darabok felülúszójával együtt gyűjtöttük össze. A vizes fázist etil-acetáttal egy éjszakán át +4’C-on zsírtalanítottuk. Az alsó, vizes réteget összegyűjtöttük és több órán át pároltuk.
Ezután 60%-os telítettségig telített ammónium-szulfát oldatot adtunk a maradékhoz. A kivált üledéket 9000 rpm fordulatszámmal 40 percig centrifugáltuk, 0,05 M foszfát pufferben [pH 7,4, 0,05 M nátrium-klorid (PBS)] feloldottuk, és PBS oldattal szemben dializáltuk, így nyers extraktumot kaptunk.
A nyers extraktumot Sephacryl 200 (Pharmacia, • · ··· · · · • · · · ♦ · · ···· ·
-8Svédország) oszlopra vittük, és a fehérjefrakciókat 280 nmes elnyelési sávnál összegyűjtöttük, majd a frakciók proteolitikus aktivitását vizsgáltuk. Az aktív frakciókat egyesítettük és 1iofi1izáltuk. A kevert aktivitású frakciókra a továbbiakban a következő, egymással egyenértékű elnevezéseket használjuk: Multi-Protein, ,Multi-Enzim, PHIM vagy PHIM 106.
Az izolált enzimek molekulatömeg-tartományát meghatároztuk [SDS-PAGE PAA4/30 (Pharmacia, Svédország)]. Legalább 6 sáv különült el a 18,000 és 40,000 közötti tartományban, különösen 24,000 és 34,000 között.
A fent leírt gélkromatográfiás elválasztással kapott egyik frakció endo- és exopeptidáz aktivitást is mutatott, ezt a fázist további elválasztási folyamatoknak vetettük alá. Kimutattuk, hogy ez a frakció valószínűleg egyetlen 26,000-32,000 közötti molekulatömegű enzimet tatalmaz. A továbbiakban erre az enzimre a Single-Protein vagy Single-Enzim néven hivatkozunk.
Sem a nyers extraktum, sem a Multi-Protein, sem az Single-Protein nem mutatott semmilyen baktericid hatást in vitro, de feltételezhetően bakteriosztatikus hatást igen.
Élő rákokban ezek az enzimek általában -5 és -2’C közötti hőmérsékleten működnek. Meglepő, hogy ezen enzimek hómérsékleti optimumát +55’C-nak találtuk semleges pH-η, és néhány enzim egy órán át 100’C-on is stabil.
A PHIM különböző jellemzői
A 28. ábrán a fentebb leírt módszerrel preparált PHIM hőstabilitását ábrázoltuk, azaz a PHIM relatív aktivitását
-9fejeztük ki százalékban az idő függvényében (az aktivitást a megemésztett szarvasmarha kazein mennyiséghez viszonyítottuk; BioRad Protease Substrate Tablets; 30’C-on 20 órán át) 10, 20, 30, 40, 50, 60 és 70’C-on. 70'C-on az aktivitás 25% alá csökkent 2 óra elteltével, míg 60’C-on ez a csökkenés több mint 12 órával később következett be. 40’C-on az aktivitás 25% alá csökkenése 11 nap elteltével volt tapasztalható, míg 30°C-on a PHIM aktivitása 11 nap után is körülbelül 100%-os volt.
A 29. ábrán a hőmérséklet-optimumot ábrázoltuk, azaz a PHIM teljes proteolitikus aktivitását (a megemésztett szarvasmarha kazein területet kazein ekvivalensekben, mnrben kifejezve; BioRad Protease Substrate Tablets; pH 7,0; 30°C-on 24 óráig) fejeztük ki a hőmérséklet függvényében. Érdekes megfigyelni, hogy az optimális aktivitást 55°C-on kaptuk.
A 30. ábra a PHIM pH-stabi1itását mutatja, azaz a relatív aktivitás százalékos értékét (az aktivitást a megemésztett szarvasmarha kazein mennyiségével fejeztük ki; BioRAd Protease Substrate Tablets; 30°C-on 20 óra alatt) az idő függvényében ábrázoltuk, különböző pH-értékeken. Az újraszerveződött PHIM-et 2-18 órán át szobahőmérsékleten tartottuk. Az aktivitás pH 3,5 és pH 11 értékeknél már néhány óra alatt gyorsan csökken, míg pH 7 és pH 9,5 között az aktivitás 18 óra múlva is meghaladja a 70%-ot.
A 31. ábra a PHIM pH-optimumát mutatja, azaz a PHIM teljes proteolitikus aktivitását ábrázoltuk (a megemésztett kazein területet kazein ekvivalensekben, mnr-ben kifejezve; BioRad Protease Substrate Tablets; 30’C-on 16 órán át) a pH • · · · • · · • ···· ·
-10függvényében. A proteolitikus aktivitásnak pH 8 körül optimuma van.
A 32. ábrán a PHIM in vitro dózis-aktivitás görbéje látható, azaz a PHIM teljes proteolitikus aktivitása (a megemésztett kazein területet kazein ekvivalensekben, mm2ben kifejezve; BioRad Protease Substrate Gél Tablets 30’C-on 7,0-es pH-n, 24 óra alatt). A fehérje-koncentráció mérése Bradford, M., Anal . Biochem. .7.2., 248 ( 1976) módszerével történt. Az aktivitás a PHIM növekvő dózisának függvényében gyorsan nőtt, és kb. 1,5 mg PHIM mennyiségnél elérte a maximumot, és ezen az értéken maradt 15 mg PHIM-nél is.
Klinikai esetleírások
A találmány szerint kapott terápiás hatás, a klinikai gyakorlatban felmerülő korlátok és nehézségek szemléltetésére a találmány alapján készített enzimeket és enzim keverékeket klinikailag többek között az alábbi indikációk esetében teszteltük:
- fertőzések
- gyulladások
- elhalt és abnormális sejtek
- opportunista fertőzések
- szembetegségek
- fájdalom
- rák.
A vizsgálatokat kísérleti jelleggel, az egyes indikációk esetében kis számú páciensre terveztük. A tanulmányozás céljára főleg felületi sebeket és fertőzött részeket választottunk, ahol a klinikai tünetek változását • · · i
- · · · · ·· « ··«· «
-11vizuálisan követhettük.
A legtöbb esetben a páciens kiválasztásakor a kulcsszó egyébként egészséges páciens voklt, azaz elsődleges klinikai problémára koncentráltunk, az egyéb körülmények hatását kizártuk az eredmények jó értelmezése érdekében. Az általános egészségi állapot és a szervezet alapvető jellemzői tekintetében bizonyos variabilitást ez a páciens anyag magábanfoglal, mivel a résztvevő páciensek életkora 20 és 85 között, és az indikáció könnyű ambuláns kezelést igénylő gyulladástól a kórházi felfekvésig változott. Az egyes tesztcsoportok az indikáció szempontjából az általános egészségi állapotot és az alapvető jellemzőket tekintve igen homogének volatak.
A ra.izok rövid ismertetése
Az 1-4. ábra az átlagos váladék képződés mértékét, az átlagos bőrpirosodás mértékét, az átlagos duzzadás/ödéma mértékét és az átlagos fájdalmat tünteti fel operáció utáni sebeknél a találmány szerinti Single-Enzimmel és MultiEnzimmel történő kezeléskor.
Az 5. és 6. ábra mutatja a fájdalom és a gyulladás mértékének átlagos csökkenését a találmány szerint végzett 7 napos Multi-Enzim kezelésnél, fájdalmas inyfertőzéskor.
A 7. és 8. ábra a bőrpirosodás/duzzadás és a fájdalomérzés alakulását mutatja egy felső légúti vírusos fertőzés találmány szerinti Multi-Enzimmel 9 napon át végzett kezelésekor.
A 9. és a 10. diagrammok mutatják a vizeletürítések közötti átlagos időtartamokat és a fájdalom csökkenését «V
-12• ·
·»·· húgyhólyag- és húgycső-fertőzés találmány szerinti MultiEnzimmel négy napon át végzett kezelése folyamán.
A 11. ábrán látható a fájdalom átlagos csökkenése versenylovak akut izületi gyulladásának a találmány szerinti Multi-Enzimmel, több mint hét napon át végzett kezelésekor.
A 12. ábra mutatja az Single-Enzim bontó hatékonyságát üszkös műtéti sebeken.
A 13. ábra mutatja a Multi-Enzim (PHIM) dózis-válasz görbéjét égési sebek kezelésénél.
A 14. ábrán a Multi-Enzim (PHIM) dózistartományai láthatók különféle indikációk esetében.
A 15. ábra a Multi-Enzim (PHIM) maximális akkumulált mennyiségeit mutatja testsúly kg-ra vonatkoztatva, amelyek a különféle indikációk gyógyításához szükségesek.
A 16. ábrán a Multi-Enzim (PHIM) minimális akkumulált mennyiségei láthatók testsúly kg-ra vonatkoztatva, amelyek a különféle indikációk gyógyításához szükségesek.
A 17. ábra oszlop-diagramja az egyszeri PHIM 106 injekció (IT, IP és SC) tumor ellenes hatását ábrázolja a kontroll csoporttal összehasonlítva.
A 18. ábra a 17. ábrához hasonló, de a PHIM 106 a
injekció ismételt beadásának hatására elért eredményt mutatja.
A 19. ábra oszlop-diagramja a tumor térfogatát mutatja különböző dózisú PHIM 106 adagoláskor, a kontrolihoz képest.
A 20. és 21. ábra a kontroll patkányokból készült hi sztopatο1ógiai metszeteket mutatja két kü ö ző nagyításban.
A 22. és 23. ábra a 20. és 21. ábráknak megfelelő
-13metszeteket mutatja, de ezek a találmány szerint kezelt patkányokból származnak.
A 24. és 25. ábra a kezeletlen kontroll patkányon kialakult tumorról készült fotókat, és a 26. és 27. ábrák a találmány szerint, egyszeri szubkután injekcióval kezelt patkányról készült megfelelő fotókat mutatják.
A 28. ábrán látható a PHIM hőstabilitása, azaz a PHIM relatív aktivitásának százalékos értéke a különböző hőmérsékleteken, az idő függvényében.
A 29. ábra mutatja a PHIM hőmérséklet optimumát, azaz a teljes proteolitikus aktivitást a hőmérséklet függvényében.
A 30. ábra mutatja a PHIM pH-stabilitását, azaz a relatív aktivitást százalékban kifejezve, az idő függvényében, különböző pH-értékeken.
A 31. ábra mutatja a PHIM optimális pH-értékét, azaz a teljes proteolitikus aktivitást a pH függvényében.
A 32. ábra mutatja a PHIM dózis-aktivitás görbéjét, azaz a teljes proteolitikus aktivitást a PHIM dózisok függvényében.
1-10. Klinikai példa
Fertőzések
A fertőzések és gyulladások leggyakrabban együttesen jelennek meg, és hasonló klinikai képet, bőrpirosságot, duzzadásokat, magasabb hőmérsékletet, ödémát, váladékképződést, gennyet, fájdalmat, üszkös szöveti részeket mutatnak, és néha kellemetlen szag is jelentkezik. Ezeket a klinikai tüneteket követtük és jegyeztük fel a találmány
-14szerinti, fentebb leírt Multi-Protein és Single-Protein készítményekkel végzett kezelés lefolyásának és hatásosságának értékeléséhez.
1. példa - Műtéti sebek
Ebben a kísérletben 40 pácienst viszgálatunk, két 20 fős csoportban, összesen 41 műtéti sebbel, amelyből 34 abdominális és 7 torakális seb volt. Mindegyik csoportban krillből származó 3 kazein egység/ml koncentrációjú SingleEnzim vagy 5 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Enzim készítményt teszteltünk. Liofilizált, tartósítószert és mikrobaellenes adalékanyagot nem tartalmazó fehér port használtunk, amelyet 5 ml fiziológiás sóoldattal vittünk oldatba.
A páciensanyag, 28 férfi és 12 nő átlagéletkora 52±16 év volt. A készítmény mikróbaellenes hatása a klinikai hatékonyságot tekintve a nagyon jó-tól a kiváló minősítésig terjedt. 5 napon belül a fertőzések klinikai kezelést nem igénylő szintre javultak, és a klinikai fertőzés nyilvánvaló jelei eltűntek. A két készítmény között számottevő különbség nem volt. Mellékhatás illetve gyaníthatóan a készítmény által okozott káros hatás nem lépett fel.
Az eredményeket az 1-4 ábra összegzi.
Ennél az indikációnál a hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség/100 cm2 volt.
2. példa - Kis méretű égési sebek
Ebben a kísérletben 11 pácienst vizsgáltunk, akik kisebb égési sérülése S. aureus-sal és P. aeruginosa-val
-15teljesen elfertőződött, antibiotikumokkal illetve ezüstdiazin krémmel szemben rezisztensnek bizonyult. 5 pácienst 3 kazein-egység/ml koncentrációjú Single-Enzim hidrokolloid krémmel, és 6 pácienst 5 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Enzim-oldattal kezeltünk. Liofilizált, tartósítószert és antibakteriális adalékanyagot nem tartalmazó fehér port használtunk. A Multi-Enzim készítmény: 1 ampulla 5 ml sóoldatban feloldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményez. A Single-Enzim készítmény: 1 ampulla 5 ml hidrokolloid géllel elkeverve 3 kazein-egység/ml végkoncentrácót ad.
Ennél az indikációnál a hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség/100 cm2.
napos kezelés után a sebek tünetmentesek voltak, amit az MO-tenyésztés eredménye is megerősített. Az üszkös részeket, a gennyet, a fibrines rostokat és a zúzódásos szöveteket hatékonyan lebontotta mindkét készítmény, és érzékelhető különbség sem volt a két készítmény hatása között. Káros hatást a készítmények nem okoztak.
Az eredményeket az 1. táblázatban foglaltuk össze.
• · ·
-16Kis méretű égési sérülésekre vonatkozó adatok összegzése
-P < c u m = r* *T *n Ό 1 1 1 00 3
*£ Ί5, OJ O r* © <n O VI © o vn 1 p* i © oo © m © o 00 © o
J -3 Ί? c η r Is > u u 2 O <n © X> O O «Π o n © 04 © Ό © Ό o O< e ▼ o
s o o ©
Ux- = o -3 «»> • ·
<Űí* r*í o un o ri O r-i o nr un rí o un O H un rí vn rn e un
$ —ύ Ί· 4> σ 2 o *3 o *3 □ 3 o 1 o tj ü Ö 3 O +J σ D a •e T 9 *3 C 3 o
A
-H
3 ° o CM o o vn o o Γ4 o a
J5 >e: b 2 O XO o a σι o o S o © o ao o e σι o m o m
o ΓΜ o vn a o •V o o o O m O cn
jf -e ?Í5 OsQ S.í χο QO n CM r* Ό «Ί CM Ό r* O <M
J? eh u C3 cu m *3 «j G4 «> 3 <j u s cn 50 u w C3 44 · 3 aj h® 3 09 CÓ w 3 <J u 3 C9 czí VB 3 2 3 tó eh ’C u a CU 08 3 <j u 3 a c/i eh •c u a OÍ eh 0* 4J 09 as
έΗ q •n O *C rn *r CM > ! 00 CM > 1 σ\ > Ώ > CM rn > oo X rn <M X m' X
• · ·
3, példa - Fájdalmas Ínygyulladások
A kísérletben 22 páciens akut vagy krónikus inyfertőzését/gyul1adását vizsgáltuk. Liofilizált, tartósítószert és mikröbae11enes adalékanyagot nem tartalmazó fehér port használtunk. A Multi-Enzim készítmény: 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban oldva 5 kazeinegység/ml koncentrációjú oldatot eredményez.
Naponta háromszor, reggel, délben és este egy ampullát ml csapvízzel elkevertünk, és a páciens 5 percig öblögette a szájüregét vele. A kezelés utáni két órában a páciensek nem ehettek és nem ihattak. A kezelést az eredménytől függetlenül 7 napig folytattuk.
A fájdalom csökkenéséről 20 perccel - 12 órával a kezelés után számoltak be a páciensek. A fertőzés és a gyulladás 4 napon belül eltűnt, és a kezelést követő 3 héten nem újult ki. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
Az eredményeket az 5. és 6. ábrán összegeztük.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 35 mg közötti mennyiség/kezelés.
4. példa - Felső légúti vírusos fertőzések pácienst vírusos influenzával és másodlagos felsőlégúti (sinusitis) bakteriális fertőzéssel vontunk be a vizsgálatba.
A vírusos fertőzés a légutakban a csillós hámréteget támadta meg és gyulladásos tüneteket idézett elő, amelyek kipirosodással, duzzadtsággal és fozott nyálkatermeléssel jártak. Mivel a sérült csillós hám a továbbiakban nem képes a belélegzett baktériumokat eltávolítani, ezért a
bakteriális fertőzések gyakori (szekunder) velejárói a vírusos fertőzéseknek.
A vírusos fertőzés további jelei az általános betegállapot, levertség, láz, fájdalmak.
A vírusok túlélése és osztódása a gazdaséjtekben megy végbe, ezért nehéz őket elpusztítani úgy, hogy a gazdasejt sértetlen maradjon.
Multi-Enzim készítmény: liofilizált, tartósítószert és mikröbaellenes adalékanyagot nem tartalmazó fehér port használtunk. 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban feloldva 5 kazein-egység/ ml koncentrációjú oldatot eredményez.
Megközelítőleg 0,25 ml oldatot permeteztünk az orrüregbe, és a szájüreget 4,5 ml oldattal 5 percig öblögettük. Az eljárást naponta háromszor ismételtük, és a tüneteket, a kipirosodást, duzzadást, nyálkaképződést, fájdalmat és a káros mellékhatásokat naponta lejegyeztük.
A kezelést maximum 10 napig, vagy a tünetek elmúlásáig folytattuk.
beteg 6 napos, a másik három pedig 9 napos kezelés után tünetmentes volt.
A fájdalom csökkenése minden páciensnél bekövetkezett óra és 2 nap közötti idő alatt. A sputum 3 nap múltán tiszta lett azoknál a betegeknél, akiknél előzőleg gennyes váladék volt. A pirosság, duzzadás 4 napon belül eltűnt.
Az eredményeket a 7. és 8. ábra mutatja. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
A hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 35 mg kezelésenként.
···
5. példa - Szá.iüreg-f ertőzés Herpes Sinrplex vírussal olyan pácienst kezeltünk naponta két alkalommal végzett szájöblítéssel, akinek visszatérő szájüregi Herpes Simplex fertőzése volt. Tartósítószer és mikróbaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. A Multi-Enzim készítmény: 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményez.
Az ampullát a kezelések előtt frissen készítettük, és a beteg 5 percen át öblögette az oldattal a szájüregét. A kezelés után 2 órán át az evést és ivást nem engedélyeztük. Naponta kétszer ismételtük az eljárást, és naponta egyszer feljegyeztük a tüneteket, a kipirosodást, duzzadást, fájdalmat, a káros mellékhatásokat.
A kezelést maximum 10 napig vagy a tünetek megszűnéséig folytattuk.
A fájdalom csökkenése már az első kezelés után 2 órával érezhető volt, bár néhány páciensnél az első két napon a fájdalom a kezelések között* időszakban visszatért, de a későbbiekben már nem.
nap múlva a betegek tünetmentesek voltak és a herpeszek begyógyultak. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk .
A fenti 1-5. példából kitűnik, hogy a bakteriális, vírusos és gombás fertőzések hasonló lefutásúak voltak, a fertőzés összes jele eltűnt 3-6 napon belül. Még a gyógyszer-rezisztens baktérium törzsek, mint a S. aureus és P. aeruginosa az égési sérüléseknél, és a sejtbe beépülő vírusok, mint a Herpes Simplex is ugyanúgy reagáltak. íny··· • · · • ♦ · « • · · ··· ·
-20gyulladások és felső légúti vírusos fertőzések is hatásosan voltak kezelhetők'az 5-7 napig tartó, napi mindössze 15 perces szájüreg-öblögetéssel. A rövid alkalmazási idő, és a feltételezhető, nyálból való kiöblítődési hatás alátámasztja azt az elgondolást, hogy a készítmény képes a sejteken vagy felületeken megtapadni, és a tényleges kezelés idejénél sokkal hosszabb ideig hatni.
Hasonló megfigyelésekről számoltak be erős könnyezéssel járó szemfertőzéstől szenvedő pácienseknél.
A hatásos dózis erre az indikációra vonatkozóan 0,1 és 100, előnyösen 1 és 35 mg kezelésenként.
6, példa - Decubitus ulcera fertőzések idősebb betegnél összesen 18 felfekvést tanulmányoztunk, amelyek a sarkokon és az alsó testtályékon alakultak ki. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. A Multi-Enzim készítmény: 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményez.
A fekélyeket fiziológiás sóoldattal alaposan kiöblítettük, és amennyire lehetett kitisztítottuk, majd az 5 ml Multi-Enzim készítmény becsepegtetése után félig-záró kötéssel lefedtük. Naponta kétszer ismételtük az eljárást 7 napon át, és a fekélyek gyulladtságát, kipirosodását, hőmérsékletét, duzzadtságát, üszkösödését, a gennyesedést, fájdalmat és a káros mellékhatásokat vizsgáltuk.
A fertőzés 4 napos kezelés után eltűnt. 6 seb a hetedik napra teljesen begyógyult, összesen 11 seb pedig 14 napon • · · ·
-21belül. 7 seb a páciens általános egészségi állapota miatt nem gyógyult be, de javulást mutatott. Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
A hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 25 mg/100 cm6 volt.
7, példa - Sipolyos fertőzések
A kísérlet célja az volt, hogy a krillből kivont Single-Protein és Multi-Protein készítmény antimikrobiális és lebontó hatékonyságát illetve anal fistulae fertőzéseknél való használhatóságát megvizsgáljuk. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk.
A Single-Protein készítmény endo- és exopeptidáz aktivitással bír: 1 ampulla 5 ml hidrogéllel elkeverve 3 kazein-egység/ml koncentrációjú készítményt eredményez. A Multi-Protein készítmény endo- és exopeptidáz aktivitású enzimkeverék: 1 ampulla 5 ml hidrogéllel elkeverve 5 kazein-egység/ ml koncentrációjú készítményt eredményez.
A sipolyokat steril oldattal kiöblítettük, és amennyire lehetett kitisztítottuk, majd Single-Protein géllel vagy Multi-Protein géllel kezeltük. Az eljárást naponta egyszer végeztük és a betegeknél a kipirosodást, a hőmérsékletet, duzzadást, gennyesedést, fájdalmat és a káros mellékhatásokat vizsgáltuk.
A kezelést maximum 10 napig vagy a fertőzés és gyulladás tüneteinek elmúlásáig folytattuk.
Két-két pácienst, akiknek végbélbe nem ürülő analis fistulae fertőzésük volt, vagy Single-Protein vagy Multi • f
-22Protein készítménnyel kezeltünk.
A fájdalom 48 órán belül teljesen elmúlt, és a fertőzés és gyuladás összes jele 4 nap múlva eltűnt.
A fekélyek 6-9 nap alatt begyógyultak, és nem ujúltak ki a kezelést követő 6 hónap alatt. Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
A fenti példákból látható, hogy olyan komplikált fertőzések, amelyek a szakemberek szerint általában igen nehezen kezelhetők, mint amilyen az analis fistulae és a decubitus ulcera, a találmány szerinti készítményekkel sikeresen kezelhetők, és a legtöbb esetben a kísérlet ideje alatt a végleges gyógyulás is bekövetkezett.
A hatásosnak bizonyult dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg/100 cm^ közötti volt.
8. példa - Szemfertőzések páciens gennyes szemfertőzését kezeltük naponta kétszer krillből előállított Multi-Enzim készítményt tartalmazó szemcseppel. (Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. 1 ampulla Multi-Enzim készítmény 25 ml injekcióhoz használt vízben oldva 1 kazein-egység/ml koncentrációjú készítményt eredményezett.) A fertőzött szembe reggel és este 2 csepp, körülbelül 0,4 ml teszt folyadékot csepegtettünk. Minden csepegtetéskor a szem pirosságát, duzzadtságát, a könnyképződést és a lehetséges káros mellékhatásokat vizsgáltuk.
A kezelést maximum 10 napig vagy a fertőzés és gyulladás tüneteinek elmúlásáig folytattuk.
·» · * > 4* ···· ® · · · · ··· « « • · · ·· · *··♦
-23Α páciensek panaszai 3 napon belül megszűntek. A szem környékének kivörösödése és duzzadtsága 2 napon belül elmúlt, és a túlzott könnyképződés is megszűnt 2 nap múlva. Az első kezelés után azonnal az összes beteg úgy érezte, hogy a gyulladt szem megnyugodott, a szemkörnyék irritációja, nyomásérzékenysége percek alatt megszűnt. Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
A fenti példából kitűnik, hogy a szemfertőzések kezelésekor kaptuk a leggyorsabb eredményt, annak ellenére, hogy itt nagyon alacsony dózist, 0,4 kazein-egységet használtunk kezelésenként.
A hatásosnak bizonyult dózis 0,01 és 50, előnyösen 0,1 és 5 mg közötti mennyiség volt kezelésenként.
9, példa - Műtéti sebek megelőző kezelese
Krillből előállított Single-Enzim és Multi-Enzim készítményt teszteltünk műtéti sebekhez használt preventív antimikrobiális lemosó folyadékként 20 fős csoportokon, összesen 60 betegen, és hatásukat a 0,9%-os fiziológiás sóoldatéhoz hasonlítottuk.
Nem-vérző műtéti sebek el operáció után történt, és ezt kétszer ismételtük. A sebeket a leöblítettük, steril gézzel kötéssel fedtük. A sebet fertőzött séget, gyulladást, hőmérsékletet, elhalt szövetet, fájdalmat és az esetleges kái megvizsgáltuk.
ső kezelése 6-12 órával az követően a kezelést naponta készítmény-oldattal alaposan borítottuk, és félig záró minden újrakötözéskor a kipirosodást, duzzadást, bevérzést, gennyet, vérzést, os mellékhatásokat tekintve
-24A kezelést akkor fejeztük be, amikor a seb meggyógyult, hámosodása több mint 90%-os volt, vagy amikor a teszt illetve a kontroll kezelés sikertelennek bizonyult.
Sem műtét utáni fertőzést, sem akut gyulladást, kipirosodást nem figyeltünk meg abban a két csoportban, amelyikben Single-Enzim vagy Multi-Enzim oldatokat használtunk. 18 seb gyógyult meg a 10 napos kezelés alatt. Káros mellékhatások nem jelentkeztek.
A kontroll csoportban 4 páciensnél a seb súlyosan elfertőződött, és két másik betegnél akut gyulladás alakult ki. Kipirosodás, duzzadás, fájdalom gyakran jelentkezett ebben a csoportban. 14 seb gyógyult be ,10 napon belül.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg/100 cm6 között volt.
10. példa - Húgyhólyag- és húgyvezeték-fertőzések
Ebben a kísérletben 12, fájdalmas vizeletkiválasztó rendszeri fertőzéstől szenvedő nőt vizsgáltunk. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. Multi-Enzim készítmény: 6 ampulla 50 ml fiziológiás sóoldatban 3 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
Az első vizelet az összes betegnél nagyon zavaros, a második tiszta vagy enyhén zavaros volt.
A fájdalom azonnal megszűnt, és a vizelet-visszatartási képesség is érezhetően javult két napos kezelés után. Az MO-minták megerősítették, hogy 4 napos kezelés után nincs baktérium a vizeletben, és a kezelést 4 nap múlva az összes páciensnél befejeztük. Káros mellékhatások nem jelentkeztek.
-25Az eredményeket a 9. és 10. ábra összegzi. Az átlagos MO-értékeket a 2. táblázat mutatja.
2. táblázat
Átlagos MO-állapot Krill Multi-Enzim készítménnyel való 4 napos kezelés után
MO-érték MO-érték MO-érték
a kezelés előtt a 2 . napon a 4 . napol
1,4 x 104 4,3 x 103 <1,0 x 10:
100% 31% <1%
A fenti példák mutatják, hogy a húgyhólyag és húgycső fertőzések napi kétszeri kezelése beöntéssel nagyon jó hatással volt a betegségre. Két napos kezelés után az akut gyulladás és fertőzés jelei eltűntek, és 4 napos kezelés után a páciensek összes tünete elmúlt.
A hatásos dózis 0,01 és 200, előnyösen 1 és 50 mg közötti mennyiség volt kezelésenként.
Klinikai példák - Gyulladások
Gyulladások jelenléte a legtöbb kísérlet általános jellemzője, és a gyulladások csökkenése is hasonlóan történt minden indikáció esetében. 3-4 napon belül a gyulladás mértéke annyira lecsökkent, hogy az egészséges sebgyógyulás megindulhatott. A műtét utáni sebek preventív tanulmányozásánál (9. példa) gyulladás nem alakult ki a teszt • · ·
-26csoportokban. Vesd össze még a 3. példával is (akut és krónikus iny fertőzések/gyulladások).
11. példa - Gyulladt lóizületek sánta ügető ló mellső lábának térdét vizsgáltuk ebben a kísérletben. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. Multi-Enzim készítmény: 1 ampulla 10 ml injekcióhoz használt vízben oldva 2,5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
ml teszt oldatot injekcióztunk a fájós csánkba az 1., 2., 4. és 7. napon. Az injekciók után a lovaknál az azonnali káros mellékhatásokat vagy a kondíciójuk rosszabodására utaló jeleket figyelemmel kísértük. A tüneteket naponta egyszer jegyeztük le.
esetben a fájdalom gyorsan, 30 perc - 2 óra elteltével csökkent az első kezelés után, 4 további esetben 6 órán belül és 2 további esetben a második injekció után 2 órával. 1 esetben tapasztaltuk a fájdalom megszűnését csak a 3. injekció után, és ebben az esetben a térdnél igen nagy duzzadás volt.
A melegség és a duzzadás gyorsan csökkent, és 15 esetben a gyulladásnak semmi nyoma nem volt megfigyelhető a kezelést követő második napon. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
Az eredményeket a 11. ábra összegzi.
A fenti példából kitűnik, hogy a versenylovak akut izületi gyulladása a 7 nap alatt beadott 4 intraartikuláris injekcióból álló sorozattal kezelhető. A gyulladás tünetei • ·
-27gyorsan csökkentek, és a második nap után a duzzadás és melegség is megszűnt. Egyhetes utókezelés után a lovak már könnyebb tréningre visszaállhattak.
A hatásos dózis 0,1 és 200, előnyösen 1 és 50 mg közötti mennyiség volt kezelésenként.
12-16. Klinikai példa - Elhalt és elfajult sejtek (v.ö. még 3.4.5.és 10 példával)
12, példa - Üszkös műtéti sebek páciens üszkös sebeit kezeltük krillből előállított Single-Enzim készítménnyel. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. 5 ml fiziológiás sóban oldottuk fel. SingleEnzim készítmény: 3 kazein-egység/ml.
Normál öblítés és sebtisztítás után alkalmaztuk a Single-Enzim készítményt. Naponta kétszer 1 ampullát 5 ml fiziológiás sóoldatban feloldottunk, az oldatot gézpárnára öntöttük, és teljesen befedtük vele a sebet. A megszáradt gézt öntapadós félig záró anyaggal a sebhez rögzítettük. A kötés cserélésekor a seb kipirosodását, ödémát, vérzést, duzzadtságot, hőmérsékletet, váladék-termelést, gennyesedést, üszkösödést, fájdalmat, szagot, a lehetséges káros mellékhatásokat és a páciens általános egészségi állapotát vizsgáltuk. A kezelés maximum 7 napig tartott vagy addig, amíg az elhalt sejtek, bevérzés, fibrin és genny fel nem szívódott.
A sebek típusát tekintve a betegcsoport heterogén volt, elfertőzött operációs sebek, traumák, égési sebek, lőtt • · · «
-28sebek és diabeteszes seb egyaránt előfordult. A betegek naponta kétszer poliklinikai kezelést kaptak. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
Az eredményeket a 12. ábra foglalja össze.
A fentiekből láthatjuk, hogy az üszkösödéseket, a fibrint, gennyesedést, vérrögöt és plakkokat 1 héten belül hatékonyan lobontotta a készítmény, és néhány seb be is gyógyult egy hét alatt. A diabéteszben szenvedő betegeknél az égési sebek, műtéti sebek kezelése kezdetben rendkívül kis hatékonyságúnak tűnt, de valójában a kezelés befejezésekor, a 7. napon az üszkösödés teljesen felszívódott a belső részeken, ami maradt, az a sebet héjszerűen beborító felszíni üszög volt, és a seb egy héten belül részlegesen begyógyult.
A hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg/100 cm^ közötti mennyiség volt.
13. példa - Sebforradások és keloidok kezelése
Ezen vizsgálatok célja a krillből előállított MultiProtein készítmény használhatóságának és hatékonyságának mint az utólagos műtéti korrigálás egy lehetséges alternatívájának tanulmányozása volt. Tartósítószer és mikrobáéilenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. 5 ml fiziológiás sóoldatban oldottuk fel. Endo- és exopeptidáz aktivitással rendelkező MultiProtein készítmény: 1 ampulla 5 ml injekcióhoz használt vízben oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
A heg/keloid minden centiméterébe 0,2 ml Multi-Protein
-29oldatot injekcióztunk, sebenként és naponta maximum 1 ml-t. A kezelést naponta egyszer ismételtük, és a heg/keloid kipirosodását, duzzadtságot, a heg hőmérsékletét, a vérzést, üszkösödést és a káros mellékhatásokat vizsgáltuk.
A kezelést maximum 7 napig vagy a heg/keloid 80%-os felszívódásáig folytattuk.
A Multi-Protein készítményt naponta egyszer injekcióztuk 5 arc hegre, 3 kéz- és alkar-keloidra.
A véraláfutásos hegek az eredeti méretük 25%-ára, a kötőszöveti hegdaganatok pedig méretük 70%-ára csökkentek 7 napos kezelés alatt. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk a kísérlet során.
Látható, hogy a fentiekben leírt intradermális és szubkután hegek és keloidok 75%-a illetve 30%-a a 7 nap alatt a szövetbe fecskendezett injekciók hatására felszívódott. A hegek és keloidok plasztikai korrekciójánál a heg és kelőid felszívódásának nem szabad túl gyorsan történnie, és ritkán szükséges a heg több mint 60-80%-nak eltávolítása a jó eredmény eléréséhez. A bőrnek és az alatta levő szöveteknek lassan kell az új helyzethez idomulniuk, különben egyéb problémák adódnak, így például ráncosodás alakulhat ki.
A hatásos dózis 0,1 és 50, előnyösen 1 és 10 mg közötti mennyiség kezelésenként.
14. példa - Pszoriázis és száraz ekcéma
Pszoriázisos plakkok és száraz ekcémás területek igen könnyen felszívódtak hidrogél készítmény (Single-Enzim) hatására félig záró réteg alatt. 24 órán belül a plakkok • · ·
-30teljesen eltűntek, és az érzékeny bőrrész, különösen a pszoriázisos betegeknél, nem mutatott semmilyen egyéb gyulladásos tünetet, imitációt vagy fájdalmat. Ezzel szemben az érintett bőrfelületeken kisebb gyulladás alakult ki a kezelés után, de a plakkok eltűnését követően a szteroid-tartalmú krémek hatékonysága megnőtt, és sokkal jobb hatást lehetett elérni ezekkel a készítményekkel.
A hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg/100 cm2 közötti mennyiség volt.
15. példa - Kutyák fogplakk.ia
A kísérlet célja az volt, hogy kutyák fogplakkjánál megvizsgáljuk a krillből előállított Multi-Enzim készítmény használhatóságát és hatékonyságát. Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. Multi-Enzim készítmény endo- és exopeptidáz aktivitással: 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
A frissen készített ampulla tartalmát óvatosan az Ínyre és a fogakra kentük. A nyelvet minimum 2 percre rögzítettük, és a kezelés után 2 óráig az evést, ivást megakadályoztuk. A kezelést naponta kétszer ismételtük, amíg a plakkok teljesen felszívódtak. A kutyáknál a plakkok állapotát, a nyálelválasztást és a káros mellékhatásokat naponta egyszer vizsgáltuk.
olyan vadászkopót vontunk be a vizsgálatba, amelynél a speciális tartás és táplálás során rendellenes plakk képződött. 4 nappal a kezelés után a plakkok eltűntek és a • · ·
-31kísérletet befejeztük. Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
A hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 35 mg közötti mennyiség volt kezelésenként.
16. példa - Humán fog-plakk
A tanulmány célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Múlti-Protein készítmény használhatóságát és hatékonyságát fogplakk esetében. Tartósítószer és mikróbaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk. Multi-Protein készítmény endo- és exopeptidáz aktivitással: 1 ampulla 5 ml fiziológiás sóoldatban oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
Minden kezelés előtt 1 ampulla Multi-Protein oldatot készítettünk, és a szájüreget 5 percen át öblögettük vele. A kezelés után 2 órán át az evést és az ivást nem engedélyeztük. A kezelést naponta kétszer ismételtük, és a pácienseknél a plakkok állapotát, a nyálelválasztást, száj száradást és a káros mellékhatásokat naponta egyszer vizsgáltuk. A páciensek a kísérlet alatt nem moshattak fogat.
A kezelést legfeljebb hét napig vagy addig folytattuk, amíg a plakk minden nyoma el nem tűnt.
órával a kezelés után a betegek úgy érezték, hogy simább és lágyabb a fogak környéke, és hogy a plakk teljesen elbomlott. A vizuális vizsgálat alkalmával a plakk maradéka látható volt. 2 órával a harmadik kezelés után a plakk teljesen eltűnt, a kezelést befejeztük. Káros mellékhatást
nem tapasztaltunk.
A hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 35 mg közötti mennyiség volt kezelésenként.
17. példa - Opportunista fertőzések
Az ilyen típusú fertőzések olyan betegekben fejlődnek ki, akiknél az immunrendszer működését rák, AIDS, immunrendszert gátló gyógyszerek, besugárzás stb. gátolják.
Patogén mikroba törzsek, és normálisan nem patogén törzsek patogénné válhatnak különféle fertőzéseket okozva, amelyek végül vérmérgezéshez vezetnek, és ez lesz a halál közvetlen oka az ilyen fertőzéstől szenvedő betegeknél.
beteg, kettőnek IV. stádiumban levő méhrákja és egynek sugárfertőzése volt, 7 nem gyógyuló, krónikusan fertőzött műtéti sebét kezeltük naponta kétszer, száraz pakolással. A 12., 14. és a 17. nap után a sebek begyógyultak.
A hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen.1 és 25 mg közötti mennyiség/100 cm2.
18-19. Klinikai példák - Szembetegségek
18, példa - Kutya szürkehályog
A tanulmány célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Single-Protein és Múlti-Prote in készítmény használhatóságát és hatékonyságát kutya szürke hályog kezelésére. Liofilizált, tartósítószer és mikrobaellenes adalékanyag hozzáadása nélkül készült fehér port használtunk. Single-Protein exo- és endopeptidáz aktivitással: 1 ampulla 5 ml injekcióhoz használt vízben ·· · ·
-33• · • ♦ ·· · oldva 3 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett. Multi-Protein készítmény, endo- és exopeptidáz aktivitású enzimek keveréke: 1 ampulla 5 ml injekcióhoz használt vízben oldva 5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatot eredményezett.
A jobb szemet 2 csepp, kb. 0,4 ml Múlti-Prote in oldattal kezeltük. Az eljárást naponta egyszer ismételtük, és a kutyán a szem opálosságát, illetve a káros mellékhatásokat vizsgáltuk.
Az eljárást akkor fejeztük be, amikor a szem ránézésre tisztának tűnt. A bal szemet a Múlti-Proteines kezeléssel egyező módon kezeltük Single-Protein-oldattal,
Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
Az eljárást akkor fejeztük be, amikor a szem ránézésre tisztának tűnt.
nappal később észlelhetően csökkent a jobb szem opálossága, és 10 nap múlva a szem teljesen tiszta volt, ekkor a kezelést befejeztük.
Azonos megfigyeléseket tettünk a bal szemnél is, és a kezelést ott is befejeztük 10 nap elteltével. Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
A hatásos dózis 0,01 és 50, előnyösen 1 és 5 mg közötti mennyiség kezelésenként.
19. példa - Szem hályogok
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Multi-Protein készítmény hatékonyságát és használhatóságát szürke hályog esetében.
Multi-Protein készítmény, amely endo- és exopeptidáz
-34aktivitású enzimek keveréke, 2,5 kazein-egység/ml koncentrációjú oldatát cseppentettük a jobb szembe minden harmadik napon.
Egy 80 év körüli idős nőt, aki a szürke hályog miatt az egyik szemével fényt/sötétet észlelt csak, három naponként 0,4 ml, 1 kazein-egység Mu1ti-Protein készítménnyel kezeltünk. 5 alkalom után a kezelést egyéb okokból be kellett fejezni, de az opálosság szemmel láthatóan csökkent, és a hölgy arról számolt be, hogy látása az érintett szemmel javult. A kezelés alatt, illetve a kezelést követő 1 hónap alatt irritáció, fájdalom és egyéb kellemetlenségek nem jelentkeztek.
A hatásos dózis 0,01 és 50, előnyösen 0,1 és 5 mg közötti mennyiség kezelésenként.
Klinikai példák - Fájdalom
A fájdalmat elsődlegesen a szövetek mechanikai sérülése okozza, és az akut fájdalom-érzés a sérülést követően rövid időn belül elmúlik. Bizonyos érzékenység azonban megmarad a sebgyógyulás kezdeti fázisaiban. A fertőzések és akut gyulladások okozhatnak különféle fájdalmakat a szövetek megduzzadása, kémiai reakciók, biokémiai aktivitások, üszkös szövetek kialakulása, letapadás és hegesedés következtében. A fájdalom hosszú időn át megmarad a sebgyógyulás után, sőt, állandósulhat is.
A fájdalom nagyon szubjektív paraméter, és igen nehéz klinikailag megszüntetni. A definíció szerint fájdalomnak nevezünk mindent az enyhe viszketéstől kezdve a munkaképtelenséget okozó, súlyos fájdalmakig. Azok a betegek, • · · ·
-35akiknek súlyos fájdalmaik vannak, egyre jobban hozzászoknak a fájdalomhoz, és a küszöbérték folyamatosan nö.
A fájdalom-csillapodás megkezdődése volt a leggyorsabb és legnyilvánvalóbb hatása a találmány szerinti tesztkészítményeknek. A fájdalom megszűnését az első alkalmazást követő 20 perc - 2 óra elteltével jelentették, és a legtöbb esetben a második nap után enyhe fájdalom vagy csak érzékenység maradt. Indikációtól független akut vagy krónikus fájdalomnál a betegek hasonló módon bekövetkezett fájdalom-csökkenésről számoltak be. A kezelt részeknél a tapintás-érzékelés megmaradt.
Azok a betegek, akiknek a kezelést megelőzően nem voltak fájdalmaik, arról számoltak be, hogy az első kezelést követően a fertőzött rész lecsillapodott, megnyugodott, különösen a szem és a szájüreg kezelésekor. (vö. a fenti példákkal, a fájdalom vizsgált paraméter a legtöbb kísérletben.)
A húgyhólyag fertőzésekor és Ínygyulladásoknál a fájdalomérzet fiziko-szociális kényelmetlenségekhez vezetett a betegeknél. A tesztkészítmény hatására, a fájdalom gyorsan bekövetkező csökkenésével, a betegek visszanyerik összpontosítási képességüket és 2 napos kezelés után képesek normális emberként viselkedni. (Lásd 3. és 10. példa)
A legobjektívebb eredményt a fájdalom érzékelés alakulásához a lovak begyulladt Ízületeiben kaptunk, ahol a fájdalomérzés összefüggésben volt azzal az időtartammal, amíg a sérült láb kiméivé volt. Az eredmény hasonlít az embereken végzett vizsgálatok eredményeihez. (lásd 11. példa).
-36A hatásos dózis 0,01 és 220, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség kezelésenként.
20-40. Klinikai példa - Vegyes esetek
20. példa - Gyomorfekély
Egy 40 év körüli férfit, akinek visszatérő enyhe gyomorfekély panaszai voltak, sav-rezisztens zselatin kapszulákba töltött 5 mg/kapszula PHIM készítménnyel kezeltünk. Naponta egy kapszulát vett be egy pohár vízzel 2 héten keresztül. A negyedik nap után a gyomorpanaszok megszűntek, a gyomor működése rendbe jött, a fécesz normális volt, a fájdalom elmúlt, stb.
Egy olyan 55 éves férfit, akinek 20 év óta állandó gyomorfekély panaszai voltak, a fent leírt módon kezeltünk. Már néhány napos kezelés után a panaszok eltűntek, és a gyomor normálisan működött.
A gyomorfekély olyan gyulladásos folyamat, ami valószínűleg bakteriális fertőzéssel kezdődik. Először a gyomor-nyálkahártyát fertőzik meg a mikrobák, majd kialakul a gyulladás és ezt követően a fekély. Ez azt jelenti, hogy a gyomor-nyálkahártya sejtjei egy bizonyos ponton abnormálissá válnak. Ez a helyzet egészen hasonló a bőrön létrejövő fertőzéseknél és a sebeknél kialakuló helyzethez, a különbség a bőr és a gyomor-nyálkahártya között az, hogy a nyálkahártyában Peyer plakkoknak nevezett sejtrendszer van jelen, ami nagyon aktív B-, T-sejtekből stb. áll. Úgy tartják, hogy ennek a rendszernek fontos szerepe van az autoimmun betegségek kialakulásának megakadályozásában. Abból a tényből, hogy a PHIM hatékonyan működik ebben a • « · · · ·
-37rendszerben, és rendelkezik azzal a képességgel, hogy eltávolítsa az abnormális sejteket az érzékeny nyálkahártya rétegből, logikusan következik, hogy hatásos lehet egyéb autoimmun betegségek, mint például a Crohn-szindróma, fekélyes vastagbélgyulladás, rheumatoid arthritis stb. kezelésében is.
A hatásos dózis 0,5 és 300, előnyösen 1 és 50 mg közötti mennyiség kezelésenként.
21. példa - Ráncos bőr kezelése
A bőr ráncosodásához legnagyobb mértékben a kollagénben keresztkötéseket kialakító szabad gyökök járulnak hozzá. A szabad gyökök keletkezését a megégett vagy elhalt sejtek okozzák, azáltal, hogy kiváló táptalajt biztosítanak a baktériumoknak, amelyek felgyorsítják a szabad gyökök képződését. Annak következtében, hogy lehetővé tesszük a PHIM készítménynek, hogy megegye az elpusztult sejteket és baktériumokat, a kialakult ráncok eltűnnek.
Egy 33 éves nőt kezeltünk 60 napon keresztül minden éjszaka PHIM 106 oldatba mártott gézkötés felhelyezésével. Az éjszakánként használt PHIM 106 mennyisége kb 0,15 mg volt. A kötés a bőrrel 30 percig érintkezett.
A kezelést csak az egyik szem alatti részen végeztük, a másik oldalt kontrollként használtuk. Már 15 napos kezelés után megfigyelhető különbség mutatkozott, de a 60 napos kezelés után szemmel látható különbség volt a ráncosságban. A kezelt felület sima és rugalmas volt, és a ráncok száma, mélysége jelentősen csökkent a kezeletlen területhez képest.
A hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg
-38η közötti mennyiség/cm.
22. példa - Polip
Egy 62 éves férfi végbél polipját kezeltük. A férfi 3 éve szenvedett a poliptól és belgyógyászati kezelést kapott. Különböző gyógyszereket szedett, de semmi javulást nem tapasztaltak.
ml fiziológiás sóoldatban feloldott 5 mg PHIM oldatába mártott gézkötéssel kezeltük. A kezelést összesen ötször ismételtük. Az összes panasz elmúlt, a belgyógyásznál tett legközelebbi látogatáskor a vizsgálat kimutatta, hogy a polip megszűnt. A kezelés után 8 hónappal a férfi még mindig panaszmentes.
A hatásos dózis ezen indikáció esetében 0,5 és 250, előnyösen 1 és 50 mg közötti mennyiség kezelésenként.
23. példa - Szemölcsök
Egy 35 éves férfi nyakán levő szemölcsöt kezeltük 1 héten keresztül tapasszal (Hansaplast), amelyet PHIM 106 oldatba mártottunk (kb. 0,1 mg PHIM/tapasz). A kezelést naponta egyszer ismételtük egy héten keresztül. Az egyhetes kezelés után a szemölcs teljesen eltűnt.
A hatásos dózis erre az indikációra vonatkozóan 0,5 és 250, előnyösen 1 és 50 mg közötti mennyiség kezelésenként.
24. példa - Meghűlés
Öt 30 és 63 év közötti korú beteget PHIM 106-oldattal kezeltünk néhány órával a meghűlés tüneteinek kialakulása óránkénti ···» «· ··«·
szájöblitésből állt. Az orr spray-hez használt dózis kb 0,1 mg volt orrlyukanként minden alkalommal, a szájöblitéshez pedig 1,5 mg-os dózist használtunk alkalmanként. A száj öblögetéskor a folyadékot 2-4 percig a szájüregben tartattuk, majd lenyelettük. 12 óra múlva a megfázás tünetei megszűntek, a betegek panaszmentesek voltak.
A hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség kezelésenként.
25. példa - Heamophilus influenza
Egy 34 éves nő visszatérő, Haemophilus influenza vírus által okozott sinusitis fertőzését kezeltük. Néhány órával azután, hogy az orrüregben a feszülés és fájdalomérzés kialakult, a beteg 2 percen át öblögetett 2 mg PHIM 106 megközelítőleg 0,1 mg PHIM 106-ot permeteztünk egy-egy orrüregbe. A permetezést három óránként ismételtük, 3 napon át. A nas sinus fertőzés miatt kialakuló feszülés érzés már az első kezelés után pár órával megszűnt, és a nyálkaelválasztás erősen megnőtt. 3 napig tartó kezelés után a nő panaszmentes volt.
A hatásos dózis ezen indikáció esetében 0,1 és 100, előnyösen 1 és 55 mg közötti mennyiség kezelésenként.
26. példa - Herpes Zoster
Egy 70 éves férfi arcán 10 hónapja kialakult fájdalmas
Herpes Zoster fertőzést kezeltük felületileg, 1-2 mg PHIM
-et tartalmazó gézkötéssel három naponként.
Már az első kezelést követően a viszketés és a fájdalom «·· • ·· · ·
-40is csökkent, majd 12 nap múlva teljesen eltűnt. A fertőzés miatt a férfinek problémái voltak a rágással, mert fájt a szájpadlása, de 12 nap múlva képes volt rágni minden probléma nélkül.
A hatásos dózis 0,01 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség/cm .
27. példa - Herpes genitalis
Egy 62 éves férfi 10 éve meglevő Herpes genitalis fertőzését kezeltük. A panaszok rendszeresen visszatértek 4 havonta, és az akut panaszok meglétekor a férfi tartózkodott a szexuális érintkezéstől.
PHIM 106 oldatba áztatott kötéssel kezeltük, kb. 3 mg/kötés készítménnyel. A kezelést két napon át, naponta kétszer ismételtük. Már a második kezelés után elmúltak a panaszai. A kezelés befejezését követő 10 hónapban a férfinak nem voltak panaszai.
A megfelelő dózistartomány ezen indikáció esetében 0,1 -100, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
28. példa - Hemorrhoid
Két személy hemorrhoid fertőzését kezeltük, az egyik egy 55 éves férfi, a másik egy 30 éves nő volt. A nő problémái 3 éve kezdődtek, fájdalmai és kis bevérzései voltak. Száraz PHIM 106 porral kezeltük, amit gézkötésbe csomagolva az érintett felületre helyeztünk. Egy dózis kb. 5 mg volt. Összesen 5 kezelésre volt szükség, hogy a panaszok teljesen elmúljanak. Most már egy éve nincsenek panaszai.
A férfi panaszai hol kiújultak, hol eltűntek az elmúlt
-41években. 6 hónapja a panaszok akuttá váltak, vérzések, es nagyon erős fájdalom jelentkezett. A férfit mg PHIM
106 oldatával átitatott gézkötéssel kezeltük egy alkalommal fájdalom perc múlva megszűnt az egyszeri kezelést követően az összes panasz eltűnt, és azóta nem is jelentkezett.
Ezen indikációra vonatkozóan a megfelelő dózistartomány
29. példa - Hasmenés
Egy 41 éves férfinél akut ételmérgezés alakult ki (valószínűleg Staphylococcus okozta) hasmenéssel és hányással. Egy órával a betegség kitörése után a férfit 5 mg
PHIM 106-tal kezeltük, amit a szájában tartott 3 percig, majd lassan lenyelt. Ezt az eljárást 2 óránként, háromszor megismételtük. A negyedik kezelés után a gyomorfájás megszűnt, a hányás és a súlyos hasmanés befejeződött.
A hatásos dózitartománys erre az indikációra 0,5-300, előnyösen 1-50 mg kezelésenként.
30. példa - Kopaszodás
Egy 55 és egy 62 éves férfit kezeltünk. Az elmúlt 10 évben erősen kopaszodtak. A kezelés abból állt, hogy az egész fejbőrt PHIM 106 oldattal átitattuk, összesen kb. 5 mg
PHIM-et használtunk egy kezeléshez. Hogy a nedvességet fejbőrben tartsuk, a fejre úszósapkát húztunk 30 percre.
kezelést hetente egyszer ismételtük kb. 3 hónapig.
kezelést követően új haj kezdett kinőni. A siker oka valószínűleg az, hogy a PHIM 106 hatékonyan eltávolítja a
-42baktériumoknak táptalajul szolgáló elhalt és abnormális sejteket. Az említett baktériumok toxinokat termelnek, amelyek helyileg arra késztetik a bőrréteg sejtjeit, hogy többek között TNF-t, tumor nekrózis faktort termeljenek, amely viszont, ha nagy mennyiségben van jelen, gátolja a haj növekedését. A fent említett elhalt és abnormális sejtek és baktériumok eltávolításával a mikrocirkuláció is javul, ami a haj megújulására kedvezően hat.
A megfelelő dózistartomány ezen indikáció esetében 0,01-100, előnyösen 1-15 mg/100 cm2.
31. példa - Akne
Egy 29 és egy 30 éves nő faggyúmirigygyulladásos arcát kezeltük. A 29 éves nőnek súlyos panaszai, míg a 30 éves nőnek csak mérsékelt problémái voltak, főleg a homlokon.
0,1 mg PHIM 106-tal kezeltük őket naponta többször, 4-6 napon át. A hatás már az első kezelés után észrevehető volt, és néhány nap múlva a fertőzések elmúltak, és a gyógyulás majdnem teljes volt. A kezelés után egy héttel már csak pigment foltok látszottak.
A hatásos dózis ezen indikáció esetében 0,01 és 50, előnyösen 1 és 10 mg közötti mennyiség kezelésenként.
32. példa - Bronchitis
Egy 55 éves férfinak viszonylag súlyos bronchitis panaszai voltak. A betegség légzési zavarokat, 100 méternél hosszabb táv megszakítás nélküli megtételekor nehézségeket, fáradékonyságot és száraz köhögést okozott.
A bronchitis oka, az orvos szerint egy 3 évvel korábban
-43történt Mycoplazma fertőzés, ami rezisztenssé vált az antibiotikumos kezeléssel szemben. A fertőzés hatására tüdővizenyő alakult ki, ezt a Rontgen-vizsgálat is megerősítette.
A beteg 4 mg PHIM 106 oldattal öblögetett a kezelés
során. A PHIM oldatot 4 percig tartotta a szájában, majd
lassan lenyelte. A kezelést minden második nap végeztük az
első két hétben. Ez alatt az idő alatt kis mennyiségű PHIM
106-ot is inhaláltattunk.
Az első két hétben javulást nem tapasztaltunk, de két hetes kezelés után a nyaki nyirokcsomó a bal oldalon megduzzadt és fájni kezdett. A kezelést folytattuk kb. három alkalommal. Másfél hét múlva a probléma a nyirokcsomóval megszűnt, és a bronchitiszes panaszok is alábbhagytak. További 3 hetes, négy naponként végzett szájöblögetéses kezelés után a bronchitiszes problémák teljesen megszűntek.
A 6,5 hetes kezelés után a beteg teljesen felépült, és rövidesen képes volt 5 kilométert is megtenni minden gond nélkül.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség kezelésenként.
33. példa - Prostatitis
Egy 52 éves férfi 20 éves korától minden télen prosztata-gyulladástól szenvedett. Az utolsó 4 évben a problémák akuttá váltak, és súlyos alhasi fájdalmakat okoztak. Az akut fázisokban különféle antibiotikumos kezelést kapott, de a kezelések befejezése után a tünetek néhány héten belül újra jelentkeztek. A beteg PHIM 106-ot
-44tartalmazó, sav-rezisztens kapszulákat kapott 5 mg/kapszula dózisban, ilyen visszatérő, közepes erősségű prostatitis jelentkezésekor. Két kapszulát vett be naponta, egy héten keresztül. A tünetek teljesen megszűntek, és az elmúlt 12 hónapban a betegség egyszer sem újult ki.
A hatásos dózistartomány erre az indikációra 0,5-300, előnyösen 1-50 mg kezelésenként.
34. példa - Rezisztens mikoplazma törzs által okozott fertőzés
Egy 55 éves férfi rezisztens Mycoplasma fertőzését kezeltük. A férfit 3 évvel korábban, amikor betegnek érezte magát, különböző antibiotikumokkal kezelték, de az alacsony dózis következtében rezisztencia fejlődött ki. Néhány héttel a fertőzést követően magas láza lett, súlyosan köhögött és a Röntgen vizsgálat vizenyőt mutatott ki a tüdőben.
A betegség légzési zavarokat, 100 méternél hosszabb táv megszakítás nélküli megtételekor nehézséget, fáradékonyságot, és száraz köhögést okozott.
A páciens kb. 4 mg PHIM 106 oldatával öblögetett a kezelés során. A PHIM oldatot 4 percig tartotta a szájában, majd lassan lenyelte. A kezelést minden második nap végeztük az első két hétben. Ez alatt az idő alatt kis mennyiségű PHIM 106-ot is inhaláltattunk.
Az első két hétben javulást nem tapasztaltunk, de két hetes kezelés után a nyaki nyirokcsomó a bal oldalon megduzzadt és fájni kezdett. A kezelést folytattuk kb. három alkalommal. Másfél hét múlva a probléma a nyirokcsomóval megszűnt, és a bronchitiszes panaszok is alábbhagytak.
• ·
-45További 3 hetes, négy naponként végzett szájöblögetéses kezelés után a bronchitiszes problémák teljesen megszűntek.
A 6,5 hetes kezelés után a beteg teljesen felépült, és rövidesen képes volt 5 kilométert is megtenni minden gond nélkül.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózis 0,1 és 100, előnyösen 1 és 25 mg közötti mennyiség kezelésenként.
35, példa - Mastitis embernél
Egy 28 éves nőnek a szülés után 3 nappal már tejelválasztási zavarai voltak, a tejelválasztó mirigyek kőkeménnyé váltak, és erős fájdalom jelentkezett. A problémák a szoptatás után fél órával már elkezdődtek. Uppsalaban (Svédországban) kezelték az Akadémiai Kórházban a rendelkezésükre álló különféle módszerekkel, de semmi sem használt.
Kb. 0,1 mg PHIM-et tartalmazó oldatot csepegtettünk a mellbimbóra, amikor erős fájdalom jelentkezett. A fájdalom 15 perc múlva megszűnt, és 45 perc múlva a kemény tejelválasztó mirigyek puhává váltak.
A kezelést megismételtük minden szoptatás után több mint 3 hónapig. Azért, hogy megtudjuk, hogy szükség van-e még a kezelésre, az asszony néha a szoptatás után a kezeléssel addig várt, amíg a fájdalom nem jelentkezett. Az ilyen ellenőrzésekkor az erős fájdalom visszatért, és a tejelválasztó mirigyek keménnyé váltak.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózistartomány 0,0125, előnyösen 0,1-5 mg kezelésenként.
36, példa - Allergiás viszketés
Egy 28 éves nőnek allergiás panaszai voltak, ami viszketéssel és csalánkiütésekkel járt a térd fölött és az álion, illetve az áll alatt. A kiütések a térden úgy néztek ki, mint fehér, eléggé kiterjedt kiemelkedések, míg az állat teljesen beborították a bőrrel megegyező színű pöttyszerű pattanások.
Gézkötést PHIM 106 oldattal megnedvesítettünk, és a térden levő pattanásokra terítettük. 10 perc múlva a gézkötést levettük. 45 perc elteltével kezdtek elmúlni a pattanások, és 1,5 óra múlva teljesen eltűntek. A fehér kiemelkedések és a csalánkiütések is elmúltak.
órával később az áll környéket kezeltük. Ez a terület erősen viszketett, és a vakaródzás miatt még érzékenyebb lett.
A PHIM oldatba mártott gézköfés alkalmazásakor a viszkető érzés fokozódott, és a gézkötést 7 perc múlva az erős viszketés miatt el kellett távolítani. 1,5 óra alatt a viszketés csökkent és 1,45 órával később tel jeseir' megszűnt.
Semmilyen probléma nem jelentkezett sem a térden, sem az arcon 48 illetve 24 óra eltelte után.
A megfelelő dózistartomány erre az indikációra 0,01100, előnyösen 1-25 mg/100 cm^ volt.
37. példa - Az in inhüvelyhez való tapadásának problémája
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből készült Multi-Protein anti-adheziós tulajdonságát nyúl Achilles in szakadásnál. Két nyúl bal Achilles inát elszakítottuk, majd rögtön összevartuk a széthasítás/átla
-47polás technikával, így a műtét után a láb nem volt immobilizálva.
nappal a műtét után, az inak inhüvelyhez tapadása nyilvánvaló volt, és 1 mg (0,25 ml) Multi-Proteint injekcióztunk intersticialisan az inhüvelybe az 5. napon, majd a kezelést a 7. és 9. napon megismételtük. 24 órával az első injekció után az in és az inhüvely összetapadása megszűnt, és az in szabadon mozgott az inhüvelyben. 6 héttel az operáció után a letapadás nem alakult ki újra.
hónappal később az állatokat felboncoltuk, és az inat makroszkopikusan megvizsgáltuk, hogy letapadás, fibrin és kollagén elburjánzás kialakult-e. Az in és az inhüvely külön-külön forrt össze, letapadásra utaló jelet nem találtunk. Az operált baloldali in húzószi1 árdság á t összehasonlítottuk a nem operált jobb oldali inéval, és nem találtunk különbséget a húzószilárdságban.
A Multi-Enzim készítmény specifikusan lebontotta a felesleges fibrint, anélkül, hogy az in és inhüvely tökéletes gyógyulásához szükséges fibrinre hatott volna.
A hatásos dózistartomány erre az indikációra 0,1-100, előnyösen 1-10 mg kezelésenként.
38. példa - Merev csukló mozgékonyságának visszanyerése
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Multi-Protein hatékonyságát korlátozottan mozgatható csukló fibrines szövetének lebontásánál.
Egy 40 év körüli nő csuklójának mozgékonysága a normál mobilitás 25%-ára redukálódott egy komplikált kéztörés után hosszú ideig viselt gipszkötés miatt.
• ··
-48A rendszeres torna ellenére a sérült Ízület mozgékonysága gyengén javult, és a diagnózis szerint a merevséget az Ízületet beborító fibrin okozta.
Multi-Protein készítmény injekciót adtunk intraartikulárisan 3 nap különbséggel, összesen négy alkalommal. A 14. nap után a mozgékonyság 50-60%-osra javult. 4 hónapos torna után a nő visszanyerte csuklómozgékonyságának 70-80%-át
Káros mellékhatást nem tapasztaltunk.
Erre az indikációra a hatásos dózistartomány 0,1-100, előnyösen 1-10 mg per kezelés.
39. példa - Single-Protein antitrombolitikus/antiembóliás hatása
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Single-Protein hatékonyságát trombózisok és embóliák kezelésekor.
A trombózis kialakulásához a fül vénában mesterségesen pangást idéztünk elő addig, amíg vérrög alakult ki. SingleProtein készítményt, 0,5 mg/2ml-t injekcióztunk a vénába, a trombusz elé, 2 cm-re az ischémiás helytől. 30 percen belül a vérrög tökéletesen feloldódott, és a vér szabadon folyhatott. A kezelt rész gyengén üszkösödni kezdett, de 7 nap múlva az üszög felszívódott.
A kontroll állatokon az ischémiás rész teljesen elüszkösödött 4-5 nap alatt.
A hatásos dózistartomány ezen indikáció esetében 0,1200, előnyösen 1-10 mg kezelésenként.
40, példa - Glaukoma kezelése
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Multi-Protein készítmény hatékonyságát megnövekedett intraokuláris nyomás kezelése esetén.
Egy 74 éves férfinél, aki a jobb szemében érzett enyhe fájdalomról/kellemetlen érzésről számolt be, a vizsgálat kimutatta, hogy megnövekedett intraokuláris nyomás okozza a panaszokat. A vizsgálatokon kiderült, hogy a nyomás folyamatosan nő, és nem akut probléma miatt áll fenn.
naponként 0,1 mg Múlti-Protein készítményt csepegtettünk a szembe, összesen 3 alkalommal. 2 hetes utókezelés után az intraokuláris nyomás normális volt.
A férfi az első kezelés után 20 perccel a fájdalom azonnali megszűnéséről számolt be .
Káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
A hatásos dózistartomány 0,01-50, előnyösen 0,1-5 mg kezelésenként.
41. példa - Antivirális hatás HÍV fertőzött sejtvonalakra in vitro
Ezt a kísérletet a Svéd Nemzeti Baktero1ógiai Laboratóriumban (SBL) végeztük. A Multi-Protein készítmény hatását az AZT és a foszkarnet hatásával hasonlítottuk össze. A készítményeket különböző, a hígítatlantól a 10“^ koncentrációig változó töménységben teszteltük (a legmagasabb tesztelt Multi-Protein koncentráció 5mg/ml volt). A készítményeket HIV-I vírussal 40-60%-ban fertőzött sejtvonalhoz adtuk azonos és standardizált körülmények között.
-50Kis hígításban az AZT és a foszkarnet az összes sejtet megtámadta és elpusztította a sejtkultúrában. Csak halott és roncsolt sejtek maradtak ezekben a tenyészetekben.
A Mu1ti-Protein tömény oldata gátolta a vírus szaporodását. A tenyészetekben 40-60%-os, a kezdetivel azonos mértékű volt a fertőzött sejtek száma, és ezek a sejtek leváltak a felszínről. Ezeknek a megtámadott sejteknek az alakja megváltozott, és a bennük levő vírus képtelen volt szaporodni. Az egészséges sejteket a MultiEnzimes csoportban sem a fertőzött sejtekből kiszabadult vírus, sem a Multi-Protein nem támadta meg, a sejtek a felszínre tapadtak, és morfológiailag változatlanok maradtak.
Ez azt mutatja, hogy a krillből előállított MultiProtein képes különbséget tenni egészséges és divergens, például vírust hordozó sejtek között, és valamilyen speciális módon felismeri, megtámadja és lerombolja az abnormális sejteket anélkül, hogy az egészségeseket bántaná.
A megfelelő dózistartomány ezen indikáció esetében 1500, előnyösen 10-300 mg kezelésenként.
A gátlás hatékonysága - 1. vizsgálat
Vírus (IC^q) Sejtvitalitás (tox.) (HIV-1 törzs HTLV IHb moi 0,4)
Multi-Protein 200 100 (deformált sejt)
AZT 100 100
Foszkarnet
200
100 • · · ·
-51Kontroll: 50%-ban fertőzött sejtek. A sejttoxicitást és a fertőzött sejtek %-os mennyiségét immunfluoreszcencia méréssel határoztuk meg.
A gátlás hatékonysága - 2. vizsgálat
Vírus (ICtjg) Sejtvitalitás (tox.) (HIV-1 törzs HTLV Illb moi 0,2)
Multi-Protein 200-400 100-200 (deformált sejt)
AZT 100 100
Foszkarnet 100 100
Kontroll: 50%-ban fertőzött sejtek. A sejttoxicitást és a fertőzött sejtek %-os mennyiségét immunfluoreszcencia méréssel határoztuk meg.
42. példa - Epidermophytozis - lábizzadás
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Multi-Protein készítmény hatékonyságát és használhatóságát láb epidermophytozis kezelése esetében.
páciens gombás lábfertőzését tanulmányoztuk, 3 napon át naponta egyszer 5 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Protein oldat felhasználásával 30 perces lábfürdőt, és éjszakára hidrogélt (5 kazein-egység/ml) alkalmaztunk maximum 7 napig.
A fájdalom a páciensek nagy részénél azonnal, a többieknél pedig 2 napon belül megszűnt. A repedésekben, a köröm alatt, a bőrfelszínen kialakult plakkok könnyen eltávolíthatóak lettek, a plakkok, a kellemetlen szag és a ···· • ···
-52fertőzés három nap elteltével elmúlt.
Erre az indikációra vonatkozó hatásos dózistartomány 0,01-100, előnyösen 1-25 mg/100 cm2.
43. példa - Ekcémás fertőzések
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Múlti-Protein készítmény hatékonyságát és használhatóságát ekcémás faggyútúltermeléses és pszoriázisos fertőzések esetében.
Negyven pácienst kezeltünk napi egy vagy két alkalommal Multi-Protein hidrogéllel (2,5 kazein-egység/ml).
A száraz ekcéma/plakk 2-4 kezelés, 1-2 nap után semmilyen fertőzésre utaló jelet nem mutatott. A zsíros típusú faggyú plakkok 6-9 nap múlva tűntek el, noha a fertőzés/gyulladás az első 2-4 nap alatt elmúlt.
Pszoriázisos plakkoknál a betegek az tapasztalták, hogy az általában használt szteroidtartalmú krémük hatékonysága megnőtt, valószínűleg amiatt, hogy a Multi-Enzim készítmény hatékonyan eltávolította a plakkot, és így a szteroidok könnyebben felszívódhattak a bőrbe.
Az erre az indikációra hatásos dózistartomány 0,01-100, előnyösen 1-25 mg/100 cm2.
44. példa - Fityma fertőzések
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Mu1ti-Protein készítmény hatékonyságát és használhatóságát csecsemők fityma-fertőzése esetében.
Egy 4 és egy 6 hetes csecsemőt kezeltünk naponta kétszer 1 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Protein
-53oldattal. A fityma alatti részt reggel és este, lágy katéterrel ellátott standard fecskendő segítségével, megközelítőleg 10 ml oldattal megmostuk. 3 nap elteltével mind a két csecsemő panaszmentes volt, és a fertőzés a következő 2 hónapban nem újult ki.
A fenti indikáció esetében hatásos dózistartomány 0,1-100, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
45. példa - Fityma-fertőzések kutyáknál
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a krillből előállított Múlti-Prote in készítmény hatékonyságát és használhatóságát kutyák fityma-fertőzése esetében.
Hat kutya fityma alatti területét mostuk le naponta egyszer 1 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Protein oldattal. 10 ml Multi-Protein oldatot standard eldobható fecskendőbe szívtunk fel. Lágy szilikon katétert csatlakoztattunk a fecskendőhöz, a katétert a fityma alá illesztettük, és a fityma alatti területet lassan leöblítettük. Kb. 1 ml oldatot tartottunk minimum 2 percig a fityma alatt, és 30 percig megakadályoztuk a kutyákat abban, hogy ezt a területet nyalogassák.
A gennyes folyás két napon belül megszűnt az összes esetben, és a gyulladás, fertőzés jelei 4 nap alatt elmúltak.
. A hatásos dózistartomány ezen indikáció esetén 0,1-100, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
46. példa - Szemcseppek általános felhasználásra
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a Multi···; .··. ···; *: .· .· .· * * · ·«·· ·
-54Protein készítmény hatékonyságát és használhatóságát fáradt és irritált szemek kezelésénél, ahol semmilyen jel nem mutat klinikai fertőzésre.
olyan páciensnek kezeltük ad hoc a fáradt és irritált szemét, akinek nem volt szembetegsége, akiknél a levegőben szálló porszemcsék nem okoztak allergiás reakciót, akiknek a szeme nem volt gyulladt vagy fertőzött. 2 csepp
0,1 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Protein készítmény-oldatot cseppentettünk a szembe, amikor szükséges volt.
percen belül mindenkinél csillapodott a nyomás vagy az enyhe fájdalom. A fényérzékenység csökkenéséről, a fókuszálás, pupillatágulás változásáról senki nem számolt be. Néha átmeneti szárazságot tapasztaltak.
Irritáció, fokozott könnyképződés vagy egyéb káros mellékhatást nem alakult ki.
Az alkalmas dózistartomány ezen indikáció esetében 0,01-50, előnyösen 0,1-5 mg kezelésenként.
47. példa - Tályogok borjakon
A kísérlet célja az volt, hogy kipróbáljuk a MultiProtein készítmény hatékonyságát és használhatóságát borjak tályogain, 5 kazein-egység/ml koncentrációjú Multi-Protein oldat alkalmazásával.
Két borjút, hozzávetőlegesen 25-40 ml méretű tályoggal a nyakon, ami kalcium injekció hatására alakult ki, kezeltünk naponta egy alkalommal. 10 ml Multi-Enzim oldatot csepegtettünk be dréncsövön keresztül, és 4 órán át a tályogban tartottuk. Utána a csövet kinyitottuk, és a következő kezelésig nyitva hagytuk.
··
-55A harmadik kezelés után a dréncsőből kifolyó folyadék tiszta volt, és a hatodik kezelés után a csöveket eltávolítottuk. A zsebek 9 illetve 12 nap alatt teljesen begyógyultak.
A hatásos dózistartomány ebben az esetben 0,1-200, előnyösen 1-20 mg kezelésenként.
48. példa - Kelések kutyákon
A kísérlet célja az volt, hogy megvizsgáljuk a MultiProtein készítmény hatékonyságát és használhatóságát kutyák mancsán kialakult kelések kezelése esetében.
Boxer ujjak között kialakult fájó, fertőzött és gennyes/vérző keléseit naponta kétszer kezeltük 5 kazeinegység/ml koncentrációjú Multi-Protein oldattal.
Előzőleg 2 ml oldatba mártott, majd megszárított gézt helyeztünk a kelésekre. A lábat bekötöttük, hogy rögzítsük a gézt, és gumi papucsot húztunk rá, hogy megvédjük.
A fájdalom nyilvánvalóan csökkent 1 nap múlva, és a gennyes válladék és vérzés 2 napon belül megszűnt. 5-7 nap elteltével csak halvány jelei maradtak a gyulladásnak, és 11-15 nap múlva a kelések teljesen elmúltak, a kutyák szabadon tudtak mozogni.
A hatásos dózistartomány erre az indikációra vonatkozóan 0,1 -100, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
Dózisok külöböző indikációk esetében
A 13. ábrán látható egy adott esetre, az égési sérülésekre vonatkozó dózis-hatás görbe, amely a hatékonyság százalékos értékét a PHIM mikróbaellenes hatásával kifejezve
-56mutatja a tesztelt PHIM koncentráció függvényében. A PHIM mennyisége mg/100 cm2 sebfelület egységben van megadva. 2 mg PHIM/100 cm2 seb-területnél a hatásfok majdnem 100%-os. A bemutatott dózis-hatás görbe más esetekre is jellemző lehet.
A 14. ábrán olyan PHIM dőzis-tartományok láthatók, amelyeket a 100%-os hatékonysághoz, azaz a felépüléshez alkalmaztunk a különböző indikációk esetében. A felhasznált PHIM mg/100 cm2 hatékonyságot a függvényében ábrázoltuk. PHIM/100 cm2 beteg terület) szemfertőzések gyulladások vírusos fertőzések gombás fertőzések baktériumos fertőzések fájdalom-esi llapítás
Az beteg terület egyes dózistartományok (mg következők:
0,5 - 0,8
0,1 - 15
0,1 - 1
- 15
0,5 - 25
0,1 - 25
A 15. ábra a gyógyulásig, azaz a klinikai kezelés befejezéséig felhasznált PHIM maximális akkumulált mennyiségét mutatja testsúly kg-ra vonatkoztatva, különböző indikációk esetében. A hozzávetőleges maximum-értékek (mg PHIM/ kg testsúly) az egyes esetekben a következők:
szemfertőzések 1 felszíni sebek 5 húgyvezeték fertőzések 9 gombás fertőzések 5
Herpes simplex fertőzés 5 pattanásos zsíros bőr 18 égési sérülések 20 opportunista fertőzés 28
-57A 16. ábra mutatja a gyógyulásig felhasznált összes
PHIM minimális mennyiségét testsúly kg-ra vonatkoztatva. A hozzávetőleges minimum-értékek (mg PHIM/ kg testsúly) a különböző esetekben a következők:
szemfertőzések <1 felszíni sebek 3 húgyvezeték fertőzések 7 gombás fertőzések 3
Herpes simplex fertőzés 4 pattanásos zsíros bőr 13 égési sérülések 13 opportunista fertőzés 15
Az 1-51. klinikai példákból levonható következtetések
A találmány szerinti Single-Protein és Multi-Protein készítmények igen széles skálájú hatékonysága a fagocita sejtek hatásmódjára emlékeztet.
A vizsgált indikációk esetében semmilyen klinikai korlátozás vagy hátrány nem volt megállapítható. Ezzel szemben a készítmény hatékony volt még olyan esetekben is, amikor az immunvédekezés nem aktiválódott, például pangó sebek esetén, vagy ahol az immunválasz gátolva volt, például az opportunista fertőzéseknél.
Káros mellékhatások
A fent leírt esetekben vizsgált páciensek egyikén sem figyelhettünk meg káros mellékhatást. Azoknál a betegeknél sem lépett fel káros mellékhatás, akik poliallergiától, étel-allergiától szenvedtek, érzékeny bőrűek voltak, vagy a
-58szemük hajlamos volt a kiszáradásra, illetve azoknál a betegeknél, akiknek az immunrendszere ismerten gátolt vagy hiperaktív volt, és akiket a vizsgálatokba bevontunk vagy külön csoportban vizsgáltunk.
Kimutattuk, hogy az oltalmazni kívánt Multi-Protein és Single-Protein készítmények nem toxikusak.
A fenti teljes és előzetes klinikai vizsgálatok eredménye alapján azt is megállapíthatjuk, hogy a találmány szerinti anyagok és készítmények számos más olyan betegség és állapot kezelésében is hatásosak lennének, ahol az immunrendszer szerepet játszik, ilyenek például a glaukoma, trachoma, rák, AIDS/HIV; az autoimmun-betegségek, például a rheumatoid arthritis, Crohn-szindróma, sclerosis multiplex, fekélyes vastagbélgyulladás; olyan betegségek, mint a kolera, lepra, malária, hepatitis, tífusz, sepsis; szerv- és szövet átültetéseknél (prevenció) és plasztikai sebészetben.
49. példa - Rák
Ezt a kísérletet Takashi Makita professzor végezte Japánban, a Yamaguchi Egyetemen.
Előzmények
A rákbetegségek öszetettek és különböző típusú betegségekből állnak. A összetettség fokozódik, amikor a tumor növekedésekor az elsődleges tumor áttételeket képez más szervekben, köztük a nyirokmirigyben. A daganatok okozta problémák mellett opportunista fertőzések is kialakulnak, amiatt, hogy az immunvédelem gátolva van, amit egyrészt a daganatok létrejötte, másrészt a manapság rákos betegségek-59nél leggyakrabban használt konvencionális terápia, a kemoterápia okoz.
A hagyományos kemoterápiás kezelés rengeteg egyéb problémával jár. A legnagyobb gond az, hogy a rákellenes szerek nem képesek különbséget tenni egészséges sejt és rákos sejt között. Ez a legnagyobb baj, mert így a kemoterápiás kezelés elpusztítja az immunvédelemhez szükséges fehér vérsejteket is. Ennek a következménye, hogy a rákos betegeket nem tudjuk optimálisan kezelni.
A gátolt immunvédelem azt eredményezi, hogy a daganat egyre nagyobb lesz, és kontro1állhatalan opportunista fertőzések alakulnak ki. Az optimális kezelés korlátozott lehetősége és az opportunista fertőzések együttesen csökkentik a rákos beteg életminőségét. Nagyon kevés jól kontrollált vizsgálatot végeztek embereken, és általában a hatékonyság 20 - 25%-os volt a rák típusától függően.
Egy Japánban, jól kontrollált II. fázisú primer és szekunder rákban szenvedő betegekkel végzett vizsgálatban a válasz-arány (CR és PR) adriamicinre 9,5%-os és mitomicin C-re 20%-os volt [lásd T. Taguchi és munkatársai, Régiónál Cancer Treatment (1992) 4:161-165].
Állatkísérletekben a hatékonyság jobb amiatt, hogy általában nagyobb dózist alkalmaznak mint embernél, mivel az állatokon a káros mellékhatások tanulmányozása, az objektíven mérhető paraméterek kivételével, rendkívül nehéz, A betegség előzményeire vonatkozó adatok összehasonlítása is elég nehéz.
Ciszplatint használtak patkányoknál implantált Yoshida Sarcoma kezeléséhez, és a rákos sejtekből tenyészetet
-60készítettek a túlélő sejtek tanulmányozása céljából. Az eredmény azt mutatta, hogy a sejtek 53%-a túlélte a ciszplatinos kezelést. (K.R. Harp és munkatársai, Antitumor, Toxic And Biochemical Properties of Cisplantin).
Hasonló kísérletet végeztek mitomicin C-vel is 0,5 mg/kg dózisig. Ebben az esetben a nem rezisztens YoshidaSarcoma kezelésekor a hatásfok szinte 100%-os volt patkányoknál, 30 napos túlélést véve alapul. A 0,5 mg/kg-os dózist emberen lehetetlen használni a súlyos mellékhatások, így a csontvelő gátlása miatt, ami a beteg halálát okozza. A Yoshida szarkóma mitomicin C-re könnyen rezisztenssé válhat, és ebben az esetben a 0,5 mg/kg-os vagy magasabb dózis is teljesen hatástalan.
A fent említett dózisnál és alacsonyabb dózisoknál is mellékhatásként jelentkezik a testsúly csökkenése, hajhullás, csökkenő leukocita szám, krónikus hasmenés. (Lásd Mitomicin C , Kyowo Hakko Ltd, Tokyo, Japan). A rákellenes szerek, így az adriamicin, ciszplatin, mitomicin C stb. erősen toxikusak, és csak intravénásán, vagy intraartériásan adhatók.
A rákos sejtek gyakran rezisztenciát fejlesztenek ki a használt rákellenes szerrel szemben, ahogy a baktériumok teszik az antibakteriális szerekkel szemben. A rezisztancia kialakulása a gyógyító kezelés legsúlyosabb korlátja.
A módszer és az eredmények összegzése
A tanulmány célja az volt, hogy megvizsgáljuk a PHIM 106 hatását és hatékonyságát patkányban, Yoshida szarkóma kezelése esetén.
• ·
-61PHIM 106 oldatot három különböző módon, a tumorba (i.t.), szubkután, (s.c.) és intraperitonálisan (i.p.) injektáltunk fehér Wistar patkányokba, amelyekbe Yoshida szarkómát implantáltunk. Egyszeri PHIM 106 injekciót adtunk 5 mg/kg dózisban i.p., i.t. és s.c., vagy ismételten 1,25 mg/kg dózisban s.c. naponta kétszer, 7 napon keresztül, 5 mg/kg dózisban s.c kétnaponként, összesen négyszer és 12,5 mg/kg mennyiségben s.c. minden második napon, összesen négyszer.
A kezelést akkor kezdtük, amikor a beültetett daganat mérete 10 mm x 10 mm volt.
A patkányokat az utolsó injekció után 7 nappal felboncoltuk. A tumor nagyságát megmértük és összehasonlítottuk a kontroll állatokéval.
A tumor méretének csökkenése 46%-os volt azoknál a patkányoknál, amelyeknek egyetlen i.t. injekciót, 56%-os azoknál, amelyeknek egyetlen s.c. injekciót és 49 %-os azoknál, amelyeknek egyetlen i.p. injekciót adtunk.
Abban a csoportban, amelyikben az állatok 5 mg/kg illetve 12,5 mg/kg dózist kaptak s.c. kétnaponta, összesen 4 alkalommal, a tumor-válasz 53%-os illetve 69%-os volt.
Egy patkánynál abból a csoportból, amelyik 12,5 mg/kgos dózist kapott, a tumor mérete csökkent. Az áttételek képződésének mértéke a kezelt csoportban jóval kisebb volt, mint a kezeletlen állatok csoportjában.
A kezelt állatok - a kontroll állatokkal szemben - az evést és ivást tekintve normálisan viselkedtek. A kísérlet során káros mellékhatást nem figyeltünk meg.
-62A PHIM 106 leírása
Ahogy már fentebb kifejtettük, a PHIM 106 olyan, enzimatikus tulajdonságú fehérjék elnevezésére szolgáló rövidítés, amelyek tengeri forrásból, az alábbi teszteknél antarktiszi krillből származnak. A találmánynak megfelelően ezeknek a fehérjéknek alapvetően új tulajdonságait ismertük fel. Hipotézisünk szerint a fehérjék először felismerik a beteg és abnormális sejteket valamint a mikrobákat, majd a megcélzott sejteket enzimatikus tulajdonságuk révén elpusztítják. Az egészséges szöveti sejtek érintetlenek maradnak.
A tökéletes szelektivitást biztosító mechanizmus vizsgálata még folyik, de a munkahipotézis az, hogy a fehérjék képesek ugyanazon jelre reagálni, mint immunvédelmi rendszerünk, és képesek minden idegen behatolót valamint abnormális sejtet megtámadni.
A rákos sejtek abnormálisak amiatt, hogy tumor fehérje fragmentek jelennek meg a sejtfelszínen, így az immunvédelem az egészséges szöveti sejtektől eltérő, abnormális sejtekként ismeri fel ezeket.
A PHIM 106-ot több mint 400 páciensen próbáltuk ki nyílt humán kísérletekben, és semmilyen mellékhatás nem jelentkezett.
Állatokon toxicitást nem észleltünk. Patkányokba egészen 5 g/testsúly kg dózisig injektáltunk intravénásán PHIM 106-ot anélkül, hogy a toxicitás jelei mutatkoztak volna.
Mivel a PHIM 106 24-34,000 Dalton méretű fehérjékből áll, és tengeri élőlényekből származik, ellene antitest
-63képződés megindulása volna várható, de antitest-képződést nem tudtunk kimutatni, amikor nyulakat és tengeri malacokat immunizáltunk.
Felhasznált anyagok és módszerek
A tanulmány cél.ia
A cél kis számú összehasoniító kísérletben az anyagbeadás módjainak, az injekció-sorozatok különböző időzítésének és a dózis-válasz görbének, valamint annak tanulmányozása volt, hogy összeségében milyen hatásos a PHIM 106 fehér Wistar patkányok implantált Yoshida szarkómájának kezelésekor.
A másik tervünk az volt, hogy tanulmányozzuk a PHIM 106 célzott működési módját vénás és nyirokéri daganatok kezelése során.
A kísérlet megtervezése összehasonlító kísérleteket végeztünk a PHIM 106 egyszeri i.p., i.t., s.c. injekció formájában való beadásával, ismételt dózis kétnaponkénti beadásával és összesen négy s.c. injekció formájában való beadásával. A kontroll csoport kezeletlen maradt. A kezelést akkor kezdtük, amikor a beültetett tumor mérete megközelítőleg 10 mm x 10 mm volt.
A patkányokat a kezelés befejezése után 7 nappal felboncoltuk, és a tumor nagyságát megmértük. Hisztopatológiai vizsgálatot végeztünk.
-64PHIM 106 készítmény
Tartósítószer és mikrobaellenes anyag hozzáadása nélkül készült liofilizált fehér port használtunk.
A fehér port injekciós fiziológiás sóoldatban oldottuk fel, a végkoncentráció 5 mg/ml volt.
Eljárás x 104 Yoshida szarkóma sejtet ültettünk szubkután, fehér Wistar patkányok hátára. A patkányok kezelése akkor kezdődött, amikor a tumor mérete megközelítőleg 10 mm x 10 mm volt.
Három különböző módszerrel, intraperitonealisan (i.p.), intratumorálisan (i.t.), és szubkután (s.c.) injektáltunk PHIM 106-ot a tumortól körülbelül 3-5 cm távolságban, az egészséges bőrrészbe.
Az állatokat a következő 7 csoportba osztottuk:
1. csoport: Kontroll csoport, 11 patkány, kezeletlen
2. csoport: 5 patkány, egyszeri 5 mg PHIM 106/kg injekció a tumor közetpébe adva (i.t.).
3. csoport: Egyszeri kezelés, 5 mg PHIM 106/kg injekció a szubkután (s.c. )
4. csoport: 1 patkány, intraperitoneális (i.p.) kezelés egyszeri 5 mg PHIM 106/kg injekcióval
5. csoport: 3 patkány, szubkután (s.c.) kezelés, 1,25 mg 'PHIM 106/kg naponta kétszer, 7 napig.
6. csoport: 5 patkány szubkután (s.c.) kezeléssel, 5 mg
PHIM 106/kg kétnaponta, összesen négyszer.
7. csoport: 5 patkány, szubkután (s.c.) kezeléssel, 12,5 mg
PHIM 106/kg kétnaponta, összesen négyszer.
-657 nappal a kísérlet befejezése után a patkányokat felboncoltűk, és a tumor nagyságát megmértük. A kontroll patkányokat ugyanazon a napon boncoltuk fel, mint a kezeiteket.
Minden csoportban elvégeztük a daganat hisztopatológiai vizsgálatát.
A vért összegyűjtöttük és későbbi vizsgálatok céljára tároltuk.
Eredmények
A 2. csoportban, amelyik egyszeri, 5 mg PHIM 106/kg injekciót kapott i.t, úton, a tumor a kontrolihoz képest 45%-os csökkenést mutatott.
A 3. csoportban, amelyik szintén egyszeri, 5 mg PHIM 106/kg injekciót kapott, de s.c., a tumor 56%-os csökkenést mutatott, és a 4. csoportban, amelyik a 2. és 3. csoporttal azonos mennyiséggel, de i.p. kezelést kapott, a tumor csökkenése 49%-os volt.
A 6. és 7. csoport s.c. kezelést kapott ismételt 5 mg PHIM 106/kg illetve 12,5 mg PHIM 106/kg dózisú injekciókkal, itt a méretcsökenés a kontrolihoz képest 53%-os és 69%-os volt.
A legjobb hatékonyságot az 5. csoportnál tapasztaltuk, amelyik 7 napon keresztül ismétlődő kezelést kapott. A méretcsökkenés a kontrolihoz képest 72%-os volt. Lásd a 17., 18. és 19. ábrákat.
Az összes kezelt csoportban a tumorokat több mint 50%ban üszők borította, ami igen nagy arány a kontroll csoport tumorjaihoz képest. Lásd az 1. és 2. képet.
A PHIM 106 injekció után 24 órával a tumorok • ·
-66üszkösöknek látszottak.
Káros mellékhatás nem volt megfigyelhető sem a kezelés alatt, sem a kezelést követően.
A PHIM 106 injekció után 24 órával a tumorok üszköseknek látszottak. Az üszkös rész mérete nőtt, a tumor mérete csökkent, és egyre jobban elhatárolódott a kontroll patkányokéhoz viszonyítva. Lásd a 3. és 4. képet.
A testsúlyban kimutatható volt a különbség a kezelt és a kontroll patkányok között. A kontroll patkányok testsúlya jobban megnőtt, mint a kezelt állatoké.
Káros mellékhatás nem volt megfigyelhető sem a kezelés alatt, sem a kezelést követően.
Ezen indikáció esetében a hatásos dózistartomány 0,1500, előnyösen 300 mg kezelésenként.
Megbeszélés
A patkányok korlátozott száma miatt statisztikai kiértékelést nem tudtunk végezni. A tanulmánnyal célul tűztük ki, hogy megvizsgáljuk a dózisok számának, a PHIM 106 testsúly kg-ra eső mennyiségének és a tumorellenes hatásnak a kapcsolatát, és adatokat gyűjtünk arról, hogy a különböző módon beadott PHIM 106 megtámadja-e a tumort.
A hatékonyságról kialakult általános benyomás természetesen szintén nagyon fontos célkitűzés volt.
Immuniológiai szempontból a rákos sejtek abnormálisnak tekinthetők, így a PHIM 106 a hipotézis szerint olyan sajátosságokkal rendelkezik, amelyek képessé teszik arra, hogy felimerje és megcélozza az abnormális sejteket, megtámadja és elpusztítsa a tumor sejteket, a beadás
-67módjától függetlenül. Az eredmények azt mutatják, hogy a tumorellenes hatás erőteljes, és a hatékonyság mértéke az i.p., i.t. vagy s.c injekciók esetében hasonló.
Az ismételten adott PHIM 106 dózis hatásosabb, mint az egyszeri kezelés, ahogy ez várható is volt, mivel a Yoshida szarkóma igen gyoran növő tumor.
Nagyobb mértékű daganat-csökkenést értünk el abban a csoportban, amelyik 12,5 mg PHIM 106/kg-ot kapott, mint abban, amelyik csak 5 mg PHIM 106/kg-ot.
Másrészt azok a patkányok, amelyeket 7 napon keresztül naponta, Összesen 17,5 mg PHIM 106/kg dózissal kezeltünk, kicsit jobb hatékonysággal javultak, mint azok a patkányok, amelyeket kétnaponta, összesen négy alkalommal és összesen 50 mg PHIM 106/kg dózissal kezeltünk.
A Yoshida szarkóma igen malignus és gyorsan növő tumor. Ezért várható volt, hogy a mindennapos kezelés jobb eredményt ad. A kezelt patkányok kondíciója jó, testsúlyuk kb. 10 grammal nőtt, míg a kontroll állatoké kb. 24 grammal. Ezt csak a gyors tumor növekedéssel lehet magyarázni. A kezelt csoportokban a tumor jól elkülönült egységes képződmény a kontroll állatokéhoz viszonyítva, ahol áttételek képződtek például a gyomorban stb. Ez azt is jelenti, hogy a kontroll csoportban a tumor méretének leniérése nem egyszerű, mivel igen nagy területet borít be. Érdekes megjegyezni, hogy a 12,5 mg PHIM 106/kg-os dózissal kezelt csoportban az egyik patkánynál egyáltalán nem nőtt a tumor. A tumor nagysága kb. 15%-kal csökkent az kezelés kezdő napján mérthez képest.
A tumor hisztopatológiai vizsgálata a kontroll és a
-68• · · * « 9 • · 9 ♦ •· ♦ ···· « kezelt csoportnál egyértelműen kimutatta, hogy a PHIM 106tal kezelt csoportban a daganat sokkal jobban üszkösödött, mint a kontroll csoportban.
Az a tény, hogy a PHIM 106 három különböző módon adagolva aktív, azt mutatja, hogy az artériába és a vénába kerülve is képes megcélozni a tumor sejteket. A szubkután beadás különösen érdekes, mert ilyenkor a PHIM 106 először a nyirokerekbe kerül, és egy része a nyirokrendszeren keresztül éri el a tumort. A nyirokrendszerbe került PHIM 106 a részben ezen az úton szétterjedő áttételek elpusztításában is fontos szerepet játszik. A tapasztalatunk is az volt, hogy a kontroll csoporthoz képest a kezelt csoportban kevesebb áttétel alakult ki. A kontroll csoportban nagyszámú áttételt találtunk a tüdőben, a bélben és a májban. A kezelt csoportban a patkányok több mint 95%-a felismerhető nagyságú áttételtől mentes volt. A maradék 5%nál is csak kis méretű áttételek alakultak ki, főként a bélben.
Annak ellenére, hogy a tesztelt állatok száma igen kicsi volt a különböző csoportokban, ki kell emelnünk, hogy minden állat válaszolt a kezelésre. Az a lehetőség, hogy úgy használjunk egy rákellenes hatóanyagot, hogy a beadás módja nem behatárolt, azzal együtt, hogy nincs szemmel láthatóan káros mellékhatása, a PHIM 106-ot a rákellenes szerek olyan új csoportjába helyezi, ahol a hatékonyság feltehetően a természeteshez hasonló felimerő mechanizmus sajátosságaitól függ.
A PHIM 106 mikróbaellenes hatása, amelyet a tájékozódó kísérletek során megfigyeltünk, további fontos eredmény • «
-69azoknak a rákos betegeknek a kezelése szempontjából, akik opportunista fertőzésben is szenvednek. A Yoshida szarkóma sokkal malignusabb tumor, mint emberben az ismert tumorok.
50, példa - Köldök kezelése
Egy négynapos fiút PHIM 106-tal kezeltünk, hogy eltávolítsuk az üszkösödő szöveteket és megelőzzük a fertőzés továbbterjedését.
A kezeléshez PHIM 106 oldatba mártott gézt használtunk, a dózis kb. 2 mg PHIM 106 volt gézdarabonként. A gézt a köldökzsinór köré tekertük, úgy hogy beborította az egészséges, a fertőződött és a már üszkös részeket is. A kötést 12 óra alatt négyszer cseréltük. 12 óra elteltével a PHIM 106 eltávolította az üszkös és fertőzött részeket, míg az egészséges rész érintetlen maradt. A bőr nem sérült az egészséges részen, fertőzés nyoma, bőrirritáció jele vagy gyulladás nem volt megfigyelhető. Az egészséges köldököt még 4 alkalommal kezeltük.
A születés után 6 nappal a bébi állapotát a kórházban ellenőrizték, és az orvosok legnagyobb meglepetésükre úgy találták, hogy a köldökzsinór egészséges, fertőzés jelei nem láthatók a többi, ugyanilyen okból vizsgált bébivel szemben.
Ezen indikáció esetében a megfelelő dózistartomány 0,01-100, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
51. példa - Fertőzött seb
Egy 3 hónapos fiúnak, akit víz- és heresérvvel operáltak, a műtét után 10 nappal a sebe súlyosan • · ·
-70elfertőződött és elgennyesedett. A műtéti seb egy helyen a varrat eltávolítása után szétnyílt.
A fiút 3.napig PHIM 106 oldatba mártott pakolással kezeltük, ami kezelésenként 4 mg PHIM 106-nak felelt meg. A 3 napos kezelés után a teljes fertőzés elmúlt, a seb begyógyult.
A teljes műtéti seb 15 cm hosszú volt.
A hatásos dózistartomány ezen indikáció esetében 0,0111, előnyösen 1-25 mg kezelésenként.
Toxicitás egereken
Az embereken vagy állatokon semmilyen toxicitást nem tudtunk kimutatni, annak ellenére, hogy igen magas, az effektív dózis százszorosát is elérő dózisokat alkalmaztunk. A PHIM toxicitását szubkután implantált P388 murin leukémiás (egy kémiai anyaggal indukált rákfajta) egereken is teszteltük, és összehasonlító anyagként doxorubicint (DOX), egy jól ismert rákellenes hatóanyagot használtunk. Az eredményeket az alábbi táblázat foglalja össze. Látható, hogy a PHIM-mel kezelt egerek vagy a kontroll csoport egerei közül egy sem pusztult el vagy fogyott le, míg a doxorubicinnel kezelt csoportban, kivéve a legalacsonyabb dózissal kezeiteket, minden egér lefogyott és elpusztult. Érdemes megjegyezni, hogy a legmagasabb PHIM dózis (20 mg/kg) jóval magasabb, mint azok a dózisok, amelyeket a leírásban korábban ismertetett klinikai példákban a kezelésekhez használtunk.
• · ·
-71·«
Intravénásán, naponta egy alkalommal, 9 egymást követő napon
beadott PHIM és DOX toxicitása egereken P388 murin leukémiás
Hatóanyag Dózis (mg/kg) Mortalitás Testsúly változás (g)
Kontroll 0 0/6 + 2,3
PHIM 20 0/6 + 3,3
10 0/6 + 3,3
5 0/6 + 3,3
DOX 5 6/6 -2,3
2,5 6/6 -0,6
1,25 0/6 + 0,5
Az adagolás általános szabályai
A fent leírt toxicitási tesztel kapcsolatban megállapíthatjuk, hogy az erős túladagolás ellenére nem tapasztaltunk toxikus hatást. Ez nemcsak a murine leukémia esetére igaz, hanem az összes klinikai példára is. A túladagolás következtében a klinikai teszteknél a hatékonyság sem csökkent. Másképpen megfogalmazva, a felső dózishatár sokkal magasabb az effektiv dózisnál, így gyakorlatilag bármilyen (ésszerű) dózis biztonságosan használható.
A legkisebb hatásos dózis a kezelendő állapottól • · ·
-72függően némiképp változik, és a jelenleg előnyös adagolást a különböző indikációk esetére a következőkben ismertetjük.
A beadás módjai és a készítmények
A találmány szerinti anyagok - elhanyagolható toxicitásuk következtében - biztonságosan használhatók ember és állat gyógykezelésére.
A terápia módját a különböző klinikai tünetegyüttesekhez úgy kell kialakítani, hogy - mint mindig - számításba vesszük a patológiai állapotot, valamint a beadás módját, a formát, amelyben a készítményt a szervezetbe juttatjuk, az életkort, testsúlyt és a kezelt személy általános egészségi állapotát.
A találmány szerinti anyagok oldatok formájában adagolhatok vagy alkalmazhatók. Az oldatot használhatjuk topikálisan, azaz a felületre felvíve (például felszíni sebek, ép bőr); beöntésnek (vizeletkiválasztó rendszer, fityma); szemcsepp formájában; öblögető oldatként, inhaláció útján, injekcióként (intraartikulárisan, intraarteriálisan, intravénásán, intraperitoneálisan, szubkután, intramuszkulárisan); és orrüregbe juttatva (nazálisán).
A találmány szerinti anyagok alkalmazhatók gél formájában is, például felületileg és becsepegtetve (fisztulánál, felfekvéses sebeknél).
A száraz por alakjában levő találmány szerinti anyagot topikálisan, savnak ellenálló kapszulákban intesztinálisan és inhalálás útján is adagolhatjuk.
A találmány szerinti anyagokat száraz por formában ampullák tartalmazzák, Single-Protein esetében 15 kazein• · · ·♦··
-73egység, Multi-Protein esetében 25 kazein-egység mennyiségben. Azonnal felhasználható oldat készítéséhez az ampulla tartalmát steril nátrium-klórid-oldatban vagy steril vízben oldjuk, így 0,1-25 kazein-egység Multi-Proteint vagy Single-Proteint tartalmazó oldatot kapunk.
Amikor a találmány szerinti anyagot gél formában használjuk, a poralakú Multi-Proteint vagy Single-Proteint a kívánt koncentráció eléréséhez szükséges hidrogélhez adagolva azonnal használható hidrogél-készítményt állítunk elő. A hidrogél maga alacsony molekulatömegű hidrolizált keményítőből áll, víztartalma >90%.
Kísérleteinkből megállapíthatjuk, hogy a fenti adagolási módokat használva a találmány szerinti anyagok megtalálják célpontjukat a keringési rendszer közvetítésével az artériákon, vénákon át és a nyirokereken keresztül is. A felületi kezelésnél közvetlenül érintkezik az enzim a szubsztrátjával.
Gyógyászati készítmények
Por - Ampulla kazein-egység Single-Proteint vagy 25 kazein-egység Multi-Proteint ismert módon a szokásos ampullába töltünk.
Azonnal felhasználható oldat
Az ampulla tartalmát (lásd fent) steril nátrium-klorid-oldatban (fiziológiás sóoldat) vagy steril vízben feloldjuk, így 0,1 és 25 kazein-egység/ml közötti koncentrációjú Multi- vagy Single-Protein oldatot kapunk.
• ·
-74Hidrogél
Alacsony molekulatömegű hidrolizált keményítőből álló, >90% vizet tartalmazó hidrogélt készítünk önmagában ismert módon. A gélt készítésekor adagonként csomagoljuk, és az egyes adagokat sterilizáljuk (autoklávban).
Azonnal használható hidrogél
Poralakú Mu1ti-Proteint vagy Sing1e-Proteint hidrogéllel (lásd fent) ex tempore a kívánt arányban összekeverve például 2,5 vagy 5 kazein-egység/ml koncentrációjú készítményt kapunk.
A rajzok részletesebb ismertetése
1. ábra: Átlagos váladék képződés krillből izolált Single-Enzim (--—--) és Multi-Enzim (·□· ) készítményekkel végzett 5 napos kezelés során.
Single-Enzim: összesen 20 páciens adatai a kezelés kezdetétől a 2. napig, 18 páciens adatai a 2. naptól a 3,5. napig és 9 páciens adatai a 3,5. naptól a kísérlet végéig.
Multi-Enzim: 20 páciens 21 sebbel a kezelés kezdetétől a 2,5. napig, 18 páciens 19 sebbel a 2,5. naptól a 4. napig és 12 páciens 12 sebbel a 4. naptól a kísérlet végéig.
Mindenki legkésőbb az 5. napon elérte a kezelés befejezésének kritériumát, klinikai fertőzésnek nincs jele .
2. ábra: Átlagos bőrpirosság krillből izolált SingleEnzim (--Jj--) és Multi-Enzim (··□· ) készítményekkel végzett 5 napos kezelés során.
• * • · » » ·· · ···· ·
-75Az intenzívebb bőrpirosság valószínűleg a környező szövetekben csökkent ödéma és duzzadás következtében alakult ki .
3. ábra: Átlagos duzzadás/ödéma krillből izolált
Single-Enzim (-— ) és Multi-Enzim ( · · · ΓΊ - · ) készítményekkel végzett 5 napos kezelés során.
4. ábra: Átlagos fájdalom krillből izolált Single-Enzim (--®r-) és Multi-Enzim (···□’· ) készítményekkel végzett 5 napos kezelés során. A fájdalomérzést a páciens önmaga osztályozta egy analóg skálán 0-tól 5-ig, Nincs fájdalom Elviselhetetlen fájdalom.
5. ábra: A fájdalom átlagos csökkenése krillből izolált
Multi-Enzim (-·· □ ·· ) készítménnyel végzett 7 napos kezelés során.
6. ábra: A gyulladás átlagos mértéke krillből izolált
Multi-Enzim (---0- ) készítményekkel végzett 7 napos kezelés során.
7. ábra: A bőrpirosság és duzzadás mértéke mint a gyulladásra jellemző érték krillből izolált Multi-Enzim (•••Ο·’ ) készítményekkel végzett 9 napos kezelés során.
8. ábra: A fájdalomérzés mértéke krillből izolált
Multi-Enzim (---0-- ) készítményekkel végzett 7 napos kezelés során.
9. ábra: A vizeletürítések közötti átlagos időtartam krillből izolált Multi-Enzim (-·□ ) készítményekkel végzett 4 napos kezelés során.
10. ábra: A fájdalom átlagos csökkenése krillből izolált Multi-Enzim ( - · Q· ) készítményekkel végzett 4 napos kezelés során.
• ·
11. ábra: A fájdalom átlagos csökkenése krillből izolált
Multi-Enzim (---0-- ) készítményekkel végzett 7 napos kezelés során. Definíciók: súlyos fájdalom: a ló nem használja a fájós lábat; mérsékelt fájdalom: a ló néha 30 másodpercnél hosszabb ideig használja a fájós lábat; enyhe fájdalom: a ló folyamatosan használja a fájós lábat, minden alkalommal 2 percnél hosszabb ideig.
12. ábra: A krillből izolált Single-Enzim készítmény lebontó hatása üszkös, gennyes sebekre, fibrinre, vérrögre 7 napos kezelés során.
--B--: fekete üszkös szövet; --Y--: sárga gennyes és fibrines szövetek; ·-R-·-: piros zúzott terület és hámszövet.
13. ábra: Dózis-hatás görbe - A PHIM hatékonysága mikróbaellenes hatásával kifejezve égési sérülések esetében.
14. ábra: PHIM dózistartományok - a 100%-os hatásfok, azaz a betegek teljes gyógyulásának eléréséhez használt dózisok.
A = szemfertőzés; B = gyulladás; C = vírusos fertőzés; D = gombás fertőzés; E = baktériumos fertőzés; F = fájdalomcsillapítás .
15. ábra: A pácienseknek adott akkumulált PHIM dózis maximális PHIM mennyiség/testsúly kg a felgyógyulásig.
A = szemfertőzés; G = felületi seb fertőződése; H = húgyvezeték-fertőzés ; I = gombás fertőzés; J = Herpes simplex fertőzés; K = zsíros bőrfoltok; L = égési sebek és M = opportunista fertőzések.
16. ábra: A pácienseknek adott akkumulált PHIM dózis minimális PHIM mennyiség/testsúly kg a felgyógyulásig.
Α = szemfertőzés; G = felületi seb fertőződése; H = húgyvezeték-fertőzés; I = gombás fertőzés; J = Herpes simplex fertőzés; K = zsíros bőrfoltok; L = égési sebek és M = opportunista fertőzések.
17. ábra: Egyetlen PHIM 106 injekció tumorellenes hatása
a kontrolihoz viszonyítva.
18. ábra: Ismételt PHIM 106 injekció tumorellenes hatása
a kontrolihoz viszonyítva.
Oszlop (n = 4 ) s.c. 1,25 mg/kg naponta kétszer. Q1D 1-7;
Oszlop (n=5) s.c. 5 mg /kg. Q4D D 1, 3, 5, 7; Oszlop (n=5)
s.c. 12,5 mg/kg. Q4D D 1, 3, 5, 7.
19. ábra: A tumor térfogata a kontroll és kezelt csoportokban.
20. ábra: Kontroll (kis nagyítás)
21. ábra: Kontroll (nagy nagyítás)
22. ábra: Szubkután (kis nagyítás)
23. ábra: Szubkután (nagy nagyítás)
24. ábra: Kontroll, kezelés nélkül.
25. ábra: Kontroll, kezelés nélkül.
26. ábra: Egyetlen szubkután injekció.
27. ábra: Egyetlen szubkután injekció.
28. ábra: A PHIM hőmérséklet-stabilitásának vizsgálata pH 7,0 értéken, 30°C-on, 20 órán át.
29. ábra: A PHIM hőmérsékleti optimuma. A teljes proteolitikus aktivitást szarvasmarha kazein elemésztett területeként fejezzük ki (Bio Rád Protease Substrate Tablets); pH 7,0; 30°C 24 órán át.
30. ábra: A PHIM pH-stabilitása. Oldatba vitt PHIM-et
2-18 órán át szobahőmérsékleten tartunk. A teljes ··· ·· ···» ·
-78proteolitikus aktivitást szarvasmarha kazein elemésztett területeként fejezzük ki (Bio Rád Protease Substrate Tablets), 30’C, 20 óra.
31. ábra: A PHIM pH-optimuma. A teljes proteolitikus aktivitást szarvasmarha kazein elemésztett területeként fejezzük ki (Bio Rád Protease Substrate Tablets); 30°C, 16 óra, pH 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0 és 10,0.
32. ábra: A PHIM dózis-aktivitás görbéje. Fehérje- koncentráció Bradford szerint [Bradford, M. Anal. Biochem., 7 2 , 248 ( 1976 )]. A teljes proteolitikus aktivitást szarvasmarha kazein elemésztett területeként fejezzük ki (Bio Rád Protease Substrate Gél Tablets, pH 7,0, hőmérséklet: 30’C 24 órán át. Dózisok: 0,1, 0,3, 0,5, 0,9, 2,5, 5,0 és 15 mg.

Claims (12)

  1. Szabadalmi igénypontok:
    1. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása fertőzések kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
  2. 2. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása gyulladások kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
  3. 3. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása rák kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
  4. 4. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása HIV/AIDS kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
  5. 5. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása fájdalom kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
  6. 6. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exo-peptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása polipok, szemölcsök, aranyér, folt, ránc, vékony haj, allergiás viszketés, antiadhézió kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
    2. Nem-immunogén, sarki krillből izolált, endo- és exopeptidáz hatást egyaránt kifejtő enzimkészítmény alkalmazása hályog, glaukóma stb. kezelésére alkalmas • · ··»* ·* ·4·ν ·· · ···· · -80*1 gyógyászati készítmény előállítására.
  7. 8. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a fertőzés vírusos, bakteriális, gombás vagy mikoplazmás fertőzés.
  8. 9. A 2. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a gyulladás akut vagy krónikus gyulladás.
  9. 10. A 9. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a gyulladás Ínygyulladás, izületi gyulladás, emlőgyulladás, melléküreggyulladás, hörghurut, prosztatagyulladás vagy gyomorfekély.
  10. 11. Az előző igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a fenti nem-immunogén enzimkészítmény egyetlen enzimet tartalmaz, amely endo- és exo-peptidázt hatást egyaránt kifejt és molekulatömege kb.
    26 000 és kb. 32 000 közötti.
  11. 12. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a fenti nem-immunogén enzimkészítmény endo-peptidáz hatású és exo-peptidáz hatású enzimek keverékét tartalmazza.
  12. 13. A 2., 9. és 10. igénypotok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a kezelést nem-orális adagolással végezzük.
HU9403343A 1992-05-22 1993-05-21 New pharmaceutical uses of krill enzymes HUT69989A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9201628A SE9201628D0 (sv) 1992-05-22 1992-05-22 Pharmaceutical composition

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9403343D0 HU9403343D0 (en) 1995-02-28
HUT69989A true HUT69989A (en) 1995-09-28

Family

ID=20386327

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9403343A HUT69989A (en) 1992-05-22 1993-05-21 New pharmaceutical uses of krill enzymes

Country Status (18)

Country Link
EP (3) EP0824910A3 (hu)
JP (2) JPH08501068A (hu)
KR (1) KR100290266B1 (hu)
CN (1) CN1090507C (hu)
AT (2) ATE214610T1 (hu)
AU (1) AU675942B2 (hu)
CA (2) CA2306952A1 (hu)
CZ (1) CZ286794A3 (hu)
DE (2) DE69331739T2 (hu)
DK (1) DK0642351T3 (hu)
ES (2) ES2173887T3 (hu)
HU (1) HUT69989A (hu)
NO (1) NO944448L (hu)
RU (1) RU94046254A (hu)
SE (1) SE9201628D0 (hu)
SK (1) SK140594A3 (hu)
WO (1) WO1993024142A1 (hu)
ZA (1) ZA933598B (hu)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5945102A (en) * 1994-11-22 1999-08-31 Phairson Medical Inc. Crustacean and fish derived multifunctional enzyme
US7947270B2 (en) 1992-05-22 2011-05-24 Arcimboldo Ab Removing dental plaque with krill enzymes
US5958406A (en) * 1994-11-22 1999-09-28 Phairson Medical Inc. Acne treatment with multifunctional enzyme
US6030612A (en) * 1994-11-22 2000-02-29 Phairson Medical Inc. Antimicrobial uses of multifunctional enzyme
SE9303899D0 (sv) * 1993-11-22 1993-11-22 Phairson Medical Inc Läkemedel
AU7278094A (en) * 1994-06-07 1996-01-04 M D Serv Europe S.A. Intravasal thrombolysis
AU700252B2 (en) * 1994-06-07 1998-12-24 Antarctic Pharma Ab Composition for dental use comprising krill enzyme
US6232088B1 (en) 1995-02-08 2001-05-15 Phairson Medical, Inc. Treatment and prevention of immune rejection reactions
US6040155A (en) * 1996-08-28 2000-03-21 Kay; John Multifunctional protein and DNA sequence encoding same
US6835385B2 (en) * 2002-06-14 2004-12-28 Carol J. Buck Compositions and methods for softening, thinning and removing hyperkeratotic tissue
DE10237317B4 (de) 2002-08-15 2010-04-08 3M Espe Ag Enzymhaltige Zusammensetzung, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US7332179B2 (en) 2003-12-12 2008-02-19 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Tissue products comprising a cleansing composition
EP1600141B1 (en) 2004-05-24 2013-04-17 3M Deutschland GmbH Collagenolytic active enzyme containing compositions for the treatment of dental caries
US9023323B2 (en) * 2004-12-16 2015-05-05 Colgate-Palmolive Company Oral compositions for prevention and reduction of bacterial adhesion to oral surfaces
US8894977B2 (en) 2004-12-16 2014-11-25 Colgate-Palmolive Company Oral treatment compositions containing an anti-adhesion agent, antibacterial agent and incompatible compound
US7642395B2 (en) 2004-12-28 2010-01-05 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Composition and wipe for reducing viscosity of viscoelastic bodily fluids
US8697138B2 (en) 2007-03-28 2014-04-15 Aker Biomarine As Methods of using krill oil to treat risk factors for cardiovascular, metabolic, and inflammatory disorders
ES2415684T3 (es) 2007-03-28 2013-07-26 Aker Biomarine As Composiciones de aceite de kril biológicamente eficaces
US8372812B2 (en) 2009-02-26 2013-02-12 Aker Biomarine Asa Phospholipid and protein tablets
AU2014203179C1 (en) 2013-06-14 2017-05-04 Aker Biomarine Antarctic As Lipid extraction processes
GB201400431D0 (en) 2014-01-10 2014-02-26 Aker Biomarine As Phospholipid compositions and their preparation
AU2016217559A1 (en) 2015-02-11 2017-08-31 Aker Biomarine Antarctic As Lipid extraction processes
BR112017017310B1 (pt) 2015-02-11 2022-07-26 Aker Biomarine Antarctic As Composições lipídicas e suplemento alimentar ou nutricional, alimento médico ou funcional e veículo de liberação oral compreendendo as ditas composições
CN113429458B (zh) * 2021-08-03 2022-07-01 浙江海洋大学 一种抑制二肽基肽酶iv功能的南极磷虾降血糖寡肽及用途

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0107634B1 (en) * 1982-10-25 1989-04-12 Lars Gustav Inge Hellgren Enzyme composition for cleaning, the use thereof and preparation of the composition
JPS6130527A (ja) * 1984-07-20 1986-02-12 Kao Corp 血栓溶解剤
JP2568833B2 (ja) * 1987-02-27 1997-01-08 大洋香料株式会社 う蝕予防剤
JPS63218610A (ja) * 1987-03-09 1988-09-12 Hayashikane Sangyo Kk プロテア−ゼ配合化粧品
JPH06168418A (ja) * 1992-11-26 1994-06-14 Matsushita Electric Ind Co Ltd 薄膜磁気ヘッド

Also Published As

Publication number Publication date
NO944448L (no) 1995-01-23
SE9201628D0 (sv) 1992-05-22
ATE214610T1 (de) 2002-04-15
AU4100093A (en) 1993-12-30
HU9403343D0 (en) 1995-02-28
EP0838213A1 (en) 1998-04-29
ES2255097T3 (es) 2006-06-16
DE69333931T2 (de) 2006-09-07
EP0838213B1 (en) 2005-12-07
CA2306952A1 (en) 1993-12-09
NO944448D0 (no) 1994-11-21
KR100290266B1 (ko) 2001-05-15
JP4012665B2 (ja) 2007-11-21
EP0824910A3 (en) 1998-03-04
ES2173887T3 (es) 2002-11-01
WO1993024142A1 (en) 1993-12-09
ATE311853T1 (de) 2005-12-15
JP2000351734A (ja) 2000-12-19
SK140594A3 (en) 1996-10-02
CA2136331C (en) 2005-08-30
DE69331739D1 (de) 2002-04-25
ZA933598B (en) 1993-12-13
RU94046254A (ru) 1996-11-20
CN1089505A (zh) 1994-07-20
JPH08501068A (ja) 1996-02-06
DE69333931D1 (de) 2006-01-12
EP0642351B1 (en) 2002-03-20
CN1090507C (zh) 2002-09-11
DE69331739T2 (de) 2002-11-14
CZ286794A3 (en) 1995-08-16
DK0642351T3 (da) 2002-07-15
CA2136331A1 (en) 1993-12-09
AU675942B2 (en) 1997-02-27
EP0642351A1 (en) 1995-03-15
EP0824910A2 (en) 1998-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100290266B1 (ko) 크릴 효소의 신규 제약상 용도
US6030612A (en) Antimicrobial uses of multifunctional enzyme
JP5646446B2 (ja) 医療用化合物あるいは医療用製品を作成するための生体適合性ポリマーの使用方法
EA018425B1 (ru) Фармацевтический, дезинфицирующий или консервирующий экстракт пажитника сенного (trigonella foenum-graecum), способ его получения и применение экстракта
US5958406A (en) Acne treatment with multifunctional enzyme
US4497824A (en) Method of chemically debriding ulcerated necrotic tissue
US4469702A (en) Analgesic composition and use thereof to ameliorate deep and intractable pain
US20060134641A1 (en) Treating viral infections with krill enzymes
US7947270B2 (en) Removing dental plaque with krill enzymes
HOLDER et al. The use of urea in the treatment of infected wounds
Henkel The role and applicability of hyaluronidase in clinical dentistry
Periyasami et al. Attai Vidal (Leech Therapy) in Siddha System of Medicine and their current concept in therapeutic application-A Review
Walsham Surgery: its theory and practice
Deshmukh et al. OVERVIRW ON MOUTH ULCER AND THEIR TREATMENT WITH HERBS
RU2149644C1 (ru) Способ лечения заболеваний, сопровождающихся образованием гноя и/или некротических тканей
Darling Surgical nursing and after-treatment
Darling Surgical nursing and after-treatment: a handbook for nurses and others
Edwards Cyclopaedia of the Diseases of Children, Medical and Surgical
Morrow Present-day concepts in the therapy of furunculosis
Leigheb Mite Bites G. Leigheb
Luxenburger Clinical and Experimental Use of Orthoform
Calomel By M. Duparcque.
Periyasami et al. International Journal of Ayurveda and Pharma Research

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee