HU220666B1 - Fluorozott taxolszármazékok és eljárás e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására - Google Patents

Fluorozott taxolszármazékok és eljárás e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU220666B1
HU220666B1 HU9301902A HU9301902A HU220666B1 HU 220666 B1 HU220666 B1 HU 220666B1 HU 9301902 A HU9301902 A HU 9301902A HU 9301902 A HU9301902 A HU 9301902A HU 220666 B1 HU220666 B1 HU 220666B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
formula
compound
taxol
compounds
fluoro
Prior art date
Application number
HU9301902A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT64529A (en
HU9301902D0 (en
Inventor
Shu-Hui Chen
Vittorio Farina
Joydeep Kant
Dolatrai M. Vyas
Original Assignee
Bristol-Myers Squibb Co.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/029,819 external-priority patent/US5254580A/en
Priority claimed from US08/062,687 external-priority patent/US5294637A/en
Application filed by Bristol-Myers Squibb Co. filed Critical Bristol-Myers Squibb Co.
Publication of HU9301902D0 publication Critical patent/HU9301902D0/hu
Publication of HUT64529A publication Critical patent/HUT64529A/hu
Publication of HU220666B1 publication Critical patent/HU220666B1/hu

Links

Classifications

    • H—ELECTRICITY
    • H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
    • H05K1/00—Printed circuits
    • H05K1/16—Printed circuits incorporating printed electric components, e.g. printed resistor, capacitor, inductor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/64—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C233/81—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/82—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D305/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D305/14—Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6551—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring
    • C07F9/65512—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a four-membered ring condensed with carbocyclic rings or carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
    • H—ELECTRICITY
    • H01—ELECTRIC ELEMENTS
    • H01L—SEMICONDUCTOR DEVICES NOT COVERED BY CLASS H10
    • H01L21/00—Processes or apparatus adapted for the manufacture or treatment of semiconductor or solid state devices or of parts thereof
    • H01L21/02—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof
    • H01L21/04—Manufacture or treatment of semiconductor devices or of parts thereof the devices having potential barriers, e.g. a PN junction, depletion layer or carrier concentration layer
    • H01L21/48—Manufacture or treatment of parts, e.g. containers, prior to assembly of the devices, using processes not provided for in a single one of the subgroups H01L21/06 - H01L21/326
    • H01L21/4814—Conductive parts
    • H01L21/4821—Flat leads, e.g. lead frames with or without insulating supports
    • H01L21/4839—Assembly of a flat lead with an insulating support, e.g. for TAB
    • H—ELECTRICITY
    • H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
    • H05K1/00—Printed circuits
    • H05K1/02—Details
    • H05K1/03—Use of materials for the substrate
    • H05K1/0306—Inorganic insulating substrates, e.g. ceramic, glass
    • H—ELECTRICITY
    • H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
    • H05K1/00—Printed circuits
    • H05K1/02—Details
    • H05K1/09—Use of materials for the conductive, e.g. metallic pattern
    • H05K1/092—Dispersed materials, e.g. conductive pastes or inks
    • H—ELECTRICITY
    • H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
    • H05K3/00—Apparatus or processes for manufacturing printed circuits
    • H05K3/40—Forming printed elements for providing electric connections to or between printed circuits
    • H05K3/403—Edge contacts; Windows or holes in the substrate having plural connections on the walls thereof

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Microelectronics & Electronic Packaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Computer Hardware Design (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
  • Power Engineering (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Catalysts (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Glass Compositions (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

A találmány (I) általános képletű fluorozott taxolszármazékokravonatkozik, ahol R1 –CO-fenil vagy –CO–O-(1–6 szénatomos)-alkil-csoport; R2 hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy –O–CO-(1–6 szénatomos)-alkil-csoport; Rg fenil-, naftil-, furil- vagy tienilcsoport. Atalálmány kiterjed daganatgátló (antitumor) hatású készítményekre,amelyek az (I) általános képletű vegyület daganatgátló hatásúmennyiségét gyógyászati szempontból elfogadható hígító-, vivő- és/vagysegédanyagokkal összekeverve tartalmazzák. ŕ

Description

A találmány fluorozott taxolszármazékokra, e vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítményekre, valamint ezek előállítására vonatkozik. Ezek a vegyületek daganatok kezelésére alkalmazhatók. A találmány tárgyát képezik továbbá az új taxolszármazékok szintézisében alkalmazható egyes közbenső termékek és azok előállítása is.
A taxolt első ízben a nyugati tiszafa [Western Yew, latin neve: Taxus brevifolia Nutt (Taxaceae)] törzsének kérgéből izolálták; kémiai szerkezetét az (1) képlet ábrázolja (a képletben a 2’-, 7-, 10- és 13-as helyzeteket számozással jelöltük).
A National Cancer Institute (Országos Rákintézet, rövidítve: NCI) által támogatott klinikai kísérletek során a taxol alkalmazása ígéretes eredményeket hozott petefészek-, emlőrák és egyéb rákos daganatok előrehaladott eseteinek a leküzdésében. Újabban kitűnt, hogy a taxol áttételként fellépő petefészekkarcinóma kezelésére alkalmazható.
A taxol az antimitotikus hatóanyagok között különleges helyzetű; amennyiben előmozdítja a stabilis mikrotubulusok kialakulását tubulinból még egyébként kedvezőtlen körülmények között is. A taxol a mikrotubulusokhoz kötődve stabilizálja azokat a depolimerizációval szemben, így a tubulin-mikrotubulus egyensúlyt felborítja, ennek következtében a sejtoszlást (mitózist) gátolja. A taxol hatásmechanizmusát, toxikológiai sajátságait, klinikai hatásosságát és egyéb tulajdonságait számos összefoglaló közleményben írták le, például: Roxinsky és munkatársai: „Taxol: Új, vizsgálat alatt álló, mikrotubulus elleni (antimikrotubuláris) hatóanyag”, [J. Natl. Cancer Inst. 82, 1247 (1990)].
A rák kezelésében mutatott jelentős hatásosság felfedezése óta számos laboratórium tűzött ki programot kedvező farmakológiai profillal rendelkező taxolanalógok kutatására. Ennek során állították elő a (2) képletű taxotert, amelyről közölték, hogy mikrotubulusok kialakulásának előmozdításában ugyanolyan hatásos, mint a taxol, citotoxikus hatása azonban a taxolénak mintegy kétszerese. Erre vonatkoznak az alábbi közlemények: „Az A gyűrűn oldallánc-szubsztituenst nem tartalmazó, változó C-2’ konfigurációjú, biológiailag hatásos taxolanalógok” (angolul) [J. Med. Chem. 34, 1176 (1991)]; valamint: „Összefüggések taxolanalógok szerkezete és antimitotikus hatása között” (angolul) [J. Med. Chem. 34, 992 (1991)].
Az utóbbi években értékes és váratlan eredményeket értek el fluoratom bevezetésével farmakológiailag hatásos vegyületekbe. (A biológiailag aktív, szerves fluorvegyületek előállításában elért fejlődés átfogó összefoglalása található a következő közleményben: „Előrehaladás a biológiailag aktív szerves fluorvegyületek előállításában (angolul) [Tetrahedon 43, 3123 (1987)].
Mindezek alapján a jelen találmány célja új, fluorozott taxolok és származékaik előállítása.
A jelen találmány az (I) általános képletű fluorozott taxolszármazékokra vonatkozik - ahol az (I) képletben
R1 -CO-fenil- vagy -CO-(l-6 szénatomos)-alkilcsoport;
R2 hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy -O-CO(1-6 szénatomos)-alkil-csoport;
Rg fenil-, naftil-, furil- vagy tienilcsoport (azaz Rs jelentése -W-Rx képletű csoport, amelyben W kémiai kötést, Rx pedig az imént felsorolt szubsztltuenseket jelenti).
Az (I) általános képletű fluorozott taxolszármazékok szintézise többféle úton megvalósítható. Az alább következő szintézisek leírása és a konkrét példák csupán illusztratív jellegűek, és semmi módon sem jelentenek korlátozást az (I) általános képletű vegyületek más eljárásokkal végezhető előállításával szemben.
A találmány szerinti eljárás egyik megvalósítási módját mutatjuk be az A) reakcióvázlatban. Ennek értelmében egy (II) általános képletű, 2’-hidroxilcsoportján védett taxolszármazékot (dietil-amino)-kén-trifluoriddal (rövidítve: DAST) reagáltatva (III) általános képletű 7a-fluor-taxol-származékot és (XXV) általános képletű 8-demetil-7,8-ciklopropataxolt (egyszerű elnevezéssel 7,8-ciklopropataxolt kapunk [(a) lépés], A fenti (a) lépést képviselő reakció számos oldószerben lejátszatható, ilyenek például: a tetrahidrofurán (röviden: THF), diklór-metán, dietil-éter, toluol, 1,1-dimetoxietán (röviden: DME) vagy ezek bármely kombinációja, illetve keveréke. Általában azt figyeltük meg, hogy ha az (a) lépést tetrahidrofurán (röviden: THF) és dietil-éter elegyében, vagy toluol és THF körülbelül 10:1-től 8:1-ig terjedő arányú elegyével végezzük, akkor a (III) általános képletű 7a-fluor-taxol-származékot a (XXV) képletű 7,8-ciklopropataxolhoz viszonyítva magasabb arányban nyerhetjük. E leírásunkban R3 szokásos hidroxilvédő csoportot jelent. A (III) általános képletű vegyület a (XXV) képletű vegyülettől elválasztható, azonban keverék alakjában, elválasztás nélkül is felhasználható a (b) lépésben, és az (I1) általános képletű vegyület a (b) lépés végrehajtása után elkülöníthető a (XXVI) általános képletű vegyülettől. E vegyületek bármilyen, a gyakorlattal rendelkező szakember által alkalmazott szokásos tisztítási eljárással elkülöníthetők. Az elválasztás céljára például kromatográfiát vagy frakcionált kristályosítást használhatunk. Az elkülönítés különösen célszerűen végezhető nagynyomású folyadékkromatográfia (HPLC) segítségével.
E leírásban a „szokásos hidroxilvédő csoportok (vagy egyszerűen: hidroxilvédő csoportok)” olyan szerkezeti egységek (csoportok), amelyek egy hidroxilcsoport blokkolására vagy védelmére felhasználhatók; e csoportok a szakmai gyakorlattal rendelkező egyén számára jól ismertek. E célra előnyösen olyan csoportokat alkalmazunk, amelyek eltávolítása a molekula megmaradó részében észrevehető bomlást nem okoz. Ilyen, könnyen eltávolítható hidroxilvédő csoportok például: a klór-acetil-, metoxi-metil-, (2,2,2-triklór-etoxi)-metilcsoport; a (2,2,2-triklór-etil)-oxi-karbonil-csoport [vagy egyszerűen (triklór-etil)-oxi-karbonil-csoport]; a tetrahidropiranil-, tetrahidrofúranil-, terc-butil-, benzil-, pnitro-benzil-, ρ-metoxi-benzil-, difenil-metil-csoport, valamint a tri(l—6 szénatomos alkil)-szilil-, és trifenilszilil-csoport. További, célszerűen alkalmazható védőcsoportok találhatók a „Protecting Groups in Organic
HU 220 666 Bl
Synthesis” („Védőcsoportok a szerves szintézisben”) című kézikönyv 2. fejezetében; 2. kiadás, szerk. Theodora W. Greene és Peter G. M. Wuts, kiadó John Wiley+Sons (1991). A (II) általános képletű vegyületekben védőcsoportként különösen előnyösen alkalmazható a benzil-oxi-karbonil-csoport, mely könnyen eltávolítható katalitikus hidrogenolízissel, vagy egy tri(l -6 szénatomos alkil)-szilil-csoport, amelynek eltávolítása fluoridionnal végezhető.
A találmány szerinti eljárás egy másik megvalósítási módját illusztráljuk a B) reakcióvázlatban, aminek útján az (I2) általános képletű vegyületek előállíthatok. A B) reakcióvázlat szerint az (a) lépésben egy (I1) általános képletű vegyületből reduktív úton, valamilyen redukálószerrel - például (tetrabutil-ammónium)-[tetrahidrido-borát]-tal eltávolítjuk a C-13 oldalláncot, s így (IV) általános képletű vegyületet kapunk. Ezt követően a (XV) általános képletű azetidinont a (b) lépésben reagáltatjuk egy (IV) általános képletű vegyülettel. A (XV) általános képletű azetidinonok jól ismert vegyületcsoportot képviselnek. E vegyületek és prekurzoraik szintézisét ismertetik például: Holton az 1990. december 5-én közölt 0 400 971 számú európai szabadalmi bejelentésben; továbbá Holton az 1993. március 31-én közölt 0 534 709, 0 534 708 és 0 534 707 számú európai szabadalmi bejelentésekben; Ojima és munkatársai [Tetrahedron 48, 6985-7012 (1992); J. Org. Chem. 56, 1681-1683 (1991); és Tetrahedron Letters 33, 5737-5740 (1992)]; Brieva és munkatársai [J. Org. Chem. 58, 1068-1075]; valamint Paiomo és munkatársai [Tetrahedron Letters 31, 6429-6432 (1990)]; e közleményeket teljes egészükben hivatkozásként foglaljuk jelen leírásunkba. Olyan módszerek, amelyek variációjával a (XV) általános képletű vegyületek fogalmi körébe tartozó további azetidinonok előállíthatok, s amelyeket e leírásunkban konkrétan nem közlünk, és a fentebb felsorolt kilenc közleményben és másutt sem találhatók, a szakmai gyakorlattal rendelkező egyén számára kézenfekvők.
A 0 400 971 számú közzétett európai szabadalmi bejelentés, valamint a 0 534 709, 0 534 708 és 0 534 707 számú publikált európai szabadalmi bejelentések, továbbá a Tetrahedron 48, 6985-7012 (1992) közlemény olyan eljárásokat is ismertetnek, amelyek útján a (XV) általános képletű azetidinonok a bakkatin(III)-származékok C-13 helyzetű hidroxilcsoportjával vagy a hidroxilcsoportból képezett fém-alkanoláttal (fém-alkoxiddal) reagáltathatók, s így különböző oldalláncokat tartalmazó taxolanalógokhoz juthatunk. A B) reakcióvázlat (b) lépésében előnyösen úgy járunk el, hogy a C-13hoz kapcsolódó hidroxilcsoportot (ezt a B) reakcióvázlatban *-gal jelöltük) a kapcsolás előtt fém-alkanoláttá (fém-alkoxiddá) alakítjuk. E fém-alkanolátok fémkation-komponensét előnyösen a periódusos rendszer la vagy Ha csoportjába tartozó fémek közül választjuk. A kívánt fém-alkanolátot úgy alakíthatjuk ki, hogy egy (IV) általános képletű vegyületet erős fémbázissal, például lítium-diizopropil-amid, (1-6 szénatomos alkil)lítium-, lítium-bisz(trimetil-szilil)-amid, fenil-lítium, nátrium-hidrid, kálium-hidrid, lítium-hidrid alkalmazásával reagáltatunk. Ha például a lítium-alkanolátot kívánjuk előállítani, akkor a (IV) általános képletű vegyületet közömbös (inért) oldószerben, például THF-ben n-butil-lítiummal reagáltathatjuk.
A (c) lépésben egy (V) általános képletű vegyületből az R3 védőcsoportot eltávolítva jutunk egy (I2) általános képletű vegyülethez. Ha R3 jelentése valamely tri(l—6 szénatomos alkil)-szilil-csoport - például trietil-szilil-csoport - akkor ez fluoridionnal vagy valamilyen ásványi savval alkoholban vagy acetonitrilben eltávolítható. A védőcsoport fluoridionos lehasítását közömbös oldószerben, például THF-ben, diklór-metánban (rövidítve: DKM), 1,4-dioxánban, dimetil-formamidban (röviden: DMF), kloroformban végezhetjük; a reakcióközeget előnyösen gyenge savval, például ecetsavval pufferoljuk. Ha 7,8-helyzetben ciklopropángyűrű van jelen, akkor ez a B) reakcióvázlat egyik lépését sem befolyásolja azzal az előfeltétellel, hogy megfelelő mennyiségű olyan reagenseket veszünk figyelembe, amelyek a ciklopropángyűrű jelenléte következtében elfogyhatnak. Előnyösen általában úgy járunk el, hogy a
7,8-ciklopropánszármazékot (ciklopropaszármazékot) az (a) lépés után, azonban a (b) lépés végrehajtása előtt elkülönítjük.
A C) reakcióvázlatban eljárást mutatunk be olyan (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol Rm jelentése -OCOR, -OSO2R, -OCONROR, -OCONHR, -OCOO(CH2)tR vagy -OCOOR általános képletű csoport. Az eljáráshoz szükséges (XXX) általános képletű vegyületeket az irodalomban megfelelően ismertették, vagy a taxolvegyületek kémiájában jól ismert módszerekkel előállíthatók. így például - amint ez a Ca) reakcióvázlatból látható - egy (XXXVIII) általános képletű vegyületet reagáltathatunk egy RC( = O)L, R(CH2)tOC(=O)L, ROC(=O)L, LSO2R, LCONR°R, LCONHR, R-N=C=O általános képletű vegyülettel vagy azok anhidridszármazékával - amelyekben L jelentése típusos kilépőcsoport, például: klór-, brómatom, mezil-, trifluor-metánszulfonil- vagy tozilcsoport - s így egy (XXXIX) általános képletű termékhez jutunk. Ebben az (a) lépésben normális körülmények között bázis alkalmazása szükséges a C-10 helyzetű hidroxilcsoport protonjának az elvonására (deprotonálására). E célra bázisként különösen valamilyen erős bázis - így (1-6 szénatomos alkil)-lítium, lítium-bisz(trimetil-szilil)-amid - alkalmazható körülbelül 1,1 ekvivalens mennyiségben. A bázissal a deprotonálást előnyösen aprotikus oldószerben - például THF-ben - alacsony hőmérsékleten, általában -40 °C és 0 °C közötti hőmérséklet-tartományban végezzük. A (b) lépésben a (XXXIX) általános képletű vegyületet egy (XV) általános képletű azetidinonnal lényegében ugyanolyan módon valósíthatjuk meg, mint ahogyan ezt a B) reakcióvázlat (b) lépésével kapcsolatban leírtuk, s így olyan (XL) általános képletű vegyülethez jutunk, amelyből az R3 csoport lehasításával (XXX) általános képletű terméket kapunk.
Az (I) általános képletű vegyületek szűkebb csoportját alkotó (I3) általános képletű vegyületek a D) reakcióvázlatban illusztrált eljárással kaphatók. A D) reakcióvázlat szerint az (a) lépésben egy (VI) általános kép3
HU 220 666 Bl letű vegyületet 1-2 ekvivalens szokásos, hidroxilvédő csoport bevezetésére alkalmas reagenssel - előnyösen (triklór-etil)-(klór-formiát)-tal - reagáltatunk, s így egy (XIII) általános képletű, 2’- és 7-helyzetben védett hidroxilcsoportot tartalmazó, valamint egy (VII) általános képletű, 2’- és 10-helyzetben védett hidroxilcsoportot tartalmazó taxolszármazék keverékét kapjuk.
Ezt követően a (b) lépésben a (XIII) általános képletű vegyületet l,l,2-trifluor-2-klór-trietil-aminnal reagáltatva egy (VIII) általános képletű dienonszármazékot kapunk. A (c) lépésben az R3 védőcsoportot eltávolítjuk. [A (triklór-etil)-oxi-karbonil-csoport ecetsavas közegben cinkporral távolítható el.] A (d) lépésben egy (IX) általános képletű diént katalitikusán hidrogénezve egy (X) általános képletű vegyülethez jutunk. A soron következő (e) lépésben a 2’-hidroxilcsoportot ismét védőcsoporttal látjuk el - e célra előnyösen a benziloxi-karbonil-csoportot alkalmazzuk - s így egy (XI) általános képletű vegyületet nyerünk. A (XI) általános képletű vegyületet DAST-dal kezelve jutunk egy (XII) általános képletű fluorszármazékhoz. A (g) lépésben az R3 védőcsoportot eltávolítjuk, s így kapjuk a kívánt (I3) általános képletű vegyületet.
Az E) reakcióvázlatban olyan eljárást mutatunk be, amellyel az (I) általános képletű vegyületek egy másik, szűkebb csoportját képező (I4) általános képletű vegyületek megvalósíthatók. Ennek az eljárásnak az (a) lépésében egy (VII) általános képletű vegyületet DAST-dal kezelve egy (XIV) általános képletű vegyületet állítunk elő, majd a (b) lépésben az R3 védőcsoportot eltávolítva kapjuk a kívánt (I4) általános képletű anyagot.
A (VI) általános képletű anyagok vagy ismertek, vagy az F) reakcióvázlatban feltüntetett eljárással könnyen előállíthatók. Az F) reakcióvázlat (a) lépése lényegében azonos a B) reakcióvázlat (b) lépésével. A (XXXIII) általános képletű bakkatin(III)-származék - amely a 7- és 10-helyzetű hidroxilcsoporton védőcsoportot tartalmaz - szintén vagy már ismert, vagy 10-dezacetil-bakkatin(III)-ból könnyen előállítható (lásd például az 1988. január 20-án publikált 0 253 738 számú, valamint az 1993. január 13-án publikált 0 522 958 számú európai szabadalmi bejelentéseket). A (b) lépésben a hidroxilvédő csoportokat eltávolítva jutunk a (VI) általános képletű vegyületekhez.
E leírásban az „1-6 szénatomos” és ehhez hasonló kifejezések a kérdéses csoport szénatomszámát jelentik. így például az 1-6 szénatomos alkilcsoport egyenes vagy elágazó szénláncú 1-6 szénatomos alkilcsoportokra vonatkozik, ilyenek például: a metil-, etil-, npropil-, izopropil-, η-butil-, terc-butil-, η-pentil-, nhexil-, 3-metil-pentil-csoport; a „2-6 szénatomos alkenilcsoport” kifejezés egyenes vagy elágazó szénláncú alkenilcsoportokra vonatkozik, ilyenek például: a vinil-, allil-, 1-propenil-, izopropenil-l-butenil-, 2-butenil-, 3-butenil-, metallil-, 1,1-dimetil-allil-, 1-hexenil-, 2-hexenil-csoport; a „3-6 szénatomos cikloalkilcsoport” ciklopropil-, ciklobutil-, ciklopentil- vagy ciklohexilcsoportra vonatkozik; a „2-6 szénatomos alkinilcsoport” kifejezés egyenes vagy elágazó szénláncú alkinilcsoportokra vonatkozik, amilyenek például az etinil-, propargil- (2-propinil-), 1-propinil-, 2-butinil-, 3butinil-l-hexinil-, 4-metil-2-pentinil-csoport; A „2-6 szénatomos alkéndiil-csoport” például etilén-l,2-diil(vinilén-), 2-metil-2-butén-l,4-diil- vagy 2-hexén-l,6diil-csoport lehet; az „1-6 szénatomos alkoxicsoport” egyenes vagy elágazó szénláncú (1-6 szénatomos alkil)-oxi-csoportokra vonatkozik, ilyen például a metoxi-, etoxi-, η-propoxi-, izopropoxi-, η-butoxi-, tercbutoxi- (terc-butil-oxi-), Ν-pentil-oxi-, n-hexil-oxivagy 3-metil-pentil-oxi-csoport; a „halogénatom” fluor-, klór-, bróm- vagy jódatomot jelent. Az „azetidinon” megjelölés azetidin-2-on-ra vonatkozik. Leírásunkban a szimbólumok jelentése mindaddig a fenti definíciók szerinti, míg azokat másként nem definiáljuk.
Az alábbiakban következő konkrét példákban a találmány szerinti eljárás különböző, konkrét megvalósítási formáit ismertetjük: e példákban a találmány szerinti reprezentatív vegyületek szintézisét írjuk le, ezek azonban semmiféle korlátozást nem jelentenek. A módszerek variálhatók olyan vegyületek előállítására, amelyek a találmány oltalmi körébe tartoznak, azonban konkrétan nem ismertetjük. A leírt módszerek azonos vegyületek előállítására végzett kisebb változtatásai a szakmai gyakorlattal rendelkező egyén számára nyilvánvalók.
A leírásban és a példákban a hőmérsékletértékeket - ha erre vonatkozóan külön megjegyzést nem teszünk - Celsius-fokokban adjuk meg. A magmágneses rezonancia (NMR)-színképek jellemző adatait a ppm (rész/millió rész) értékekben kifejezett kémiai eltolódásokkal (δ) fejeztük ki, és ezek tetrametil-szilánra (röviden: TMS) mint belső standardra vonatkoznak. Az ’H-NMR (proton-NMR) színképi adatokban a különböző eltolódásokra feltüntetett viszonylagos terület megfelel a molekulában lévő kérdéses funkciós csoport hidrogénatomjai számának. Az eltolódások jellegeként feltüntetjük a multiplicitást, ezek a jelölések: széles szingulett (bs), széles dublett (bd), széles triplett (bt), széles multiplett (bm), széles kvartett (bq), szingulett (s), multiplett (m), dublett (d), kvartett (q), triplett (t), a dublett dublettje (kettős dublett) (dd), a triplett dublettje (kettős triplett) (dt), valamint a kvartett dublettje (kettős kvartett) (dq). Az NMR-színképek felvételéhez alkalmazott oldószerek: DMSO-d6 (perdeutero-dimetil-szulfoxid); D2O (nehézvíz); CDC13 (deuterokloroform); valamint más, szokásos deutériumtartalmú oldószer.
Az infravörös (IR) színképek leírása csak azokat az abszorpciós hullámszámokat (cm-’) tartalmazza, amelyek a funkciós csoportok azonosítására alkalmasak.
A CeliteR a Johns-Manville Products Corporation cég diatómaföldet tartalmazó termékének kereskedelmi neve.
A leírásunkban és a példákban általában a szakterületen elfogadott rövidítéseket használjuk. Ezek közül egyesek a következők:
Ac: acetil
Ar: aril
Bz: benzoil
Cbz: benzil-oxi-karbonil
DCI: deszorpciós kémiai ionizáció
HU 220 666 Bl
DMF: dimetil-formamid
DMSO: dimetil-szulfoxid
FAB: gyorsatombombázás (-os)
h: óra (órák)
HRMS: nagy feloldású tömegszínkép
i-PrOH: izopropanol
min: perc(ek)
MS: tömegszínkép
ΝΟΒΑ: m-nitro-benzil-alkohol
Ph: fenil
tBu: terc-butil
TES: trietil-szilil
THF: tetrahidrofurán
VRK: vékonyréteg-kromatográfia szám(a) (például vegyületé)
A találmányt az alábbi, nem korlátozó jellegű példákban részletesen ismertetjük.
1. példa
7a-Fluor-taxol [(la) képletű vegyület] előállítása
A) 2’-O-(Benzil-oxi-karbonil)-taxol [(Ha) képletű vegyület] előállítása
150 mg (0,176 mmol) taxol és 93 μΐ (0,534 mmol, 3 ekvivalens) N,N-diizopropil-etil-amin 4 ml vízmentes diklór-metánnal (röviden: DKM) készült oldatához keverés közben, szobahőmérsékleten 75 μΐ (0,525 mmol, 3 ekvivalens) benzil-(klór-formiát)-ot adagolunk, utána a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd a reakcióelegyet 2 ml térfogatra töményítjük, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét alkalmazva a cím szerinti vegyületet 150 mg (0,152 mmol, 86%) hozammal, fehér porszerű termékként kapjuk, olvadáspont: 140-150 °C (bomlás közben): [a]j? -53,5° (c=0,2, 95%-os etanolban). Ή-NMR (300 MHz, aceton-de) δ: 1,18 (3H, s, 17H3), 1,92 (3H, s, 16-H3), 1,66 (3H, s, 19-H3), 1,96 (3H, s, 18-H3), 2,16 (3H, s, 10-OAc), 2,5 (3H, s, 4-OAc), 3,53 (1H, d, J=5,89 Hz, 7-OH, D2O-val cser.), 3,85, (1H, d, J=7,19 Hz, 3-H), 3,9 (1H, s, 1-OH, D2O-val cser.), 4,17 (2H, ABq, 20-H2), 4,25 (1H, m, 7-H), 4,97 (1H, d, J=9,56 Hz, 5-H), 5,19 (2H, ABq, OC//2C6H5), 5,54 (1H, d, J=5,5 Hz, 2’-H), 5,68 (1H, d, J=7,13 Hz, 2-H), 6,01 (1H, dd, J=5,5, 9,05 Hz, 3’-H), 6,17 (1H, bt, J=9,0 Hz, 13-H), 6,42 (1H, s, 10-H), 7,28-7,69 (16H, m), 7,87 (2H, „d”, J = 8 Hz, 3’NHCOP/i), 8,14 (2H, „d”, J=8 Hz, 2-CO2PA), 8,55 (1H, d, J=9,06 Hz, N/7, D2O-val cser.);
MS (FAB-NOBA/NaJ + KJ): m/e 988 (M + H) + ,
1010 (M+Na)+, 1026 (M+K)+;
IR (KBr) ymax: 3448, 1748 (C=O), 1726 (CONH),
1250 (C-O) cm1;
UV(MeOH:H2O, l:l)Ámax: 198 (ε 7,3 xlO4), 230nm (ε 2,7 x1ο4).
HRMS: a C55H58NO16 összegképletre számított érték:
(MH+): 988,3756; talált: 988,3766.
Elemzés: a C55H57NO16.H2O összegképlet alapján számított: C 65,67; H 5,92; N 1,40%;
talált: C 65,99; H 5,64; N 1,33%.
B) 2’-O-(Benzil-oxi-karbonil)-7a-fluor-taxol [(Illa) képletű vegyület] előállítása
18,7 μΐ (0,141 mmol) DAST 0,5 ml száraz DKMnal készült oldatát 0 °C-ra hűtjük, 71 mg (0,072 mmol) (Ila) képletű vegyület 1 ml DKM-nal készült oldatát adjuk hozzá, és az így kapott oldatot előbb 30 percig 0 °C-on, majd szobahőmérsékleten 4 órán át állni hagyjuk. Ezt követően a reakcióelegy elbontása céljából 0,15 ml vizet adunk hozzá, és betöményítjük. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluálószerként 40% etil-acetátot tartalmazó hexános keveréket alkalmazunk, s így 61 mg (Illa) képletű cím szerinti vegyületet és (XXVa) képletű 2’-O-(benzil-oxi-karbonil)8-demetil-7,8-ciklopropataxolt kapunk.
Ή-NMR [a (Illa) és (XXVa) képletű vegyületek keveréke, CDC13] δ: 8,08 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,65-7,17 (m, 18H), 6,85 (cser. d, J=9,4 Hz, 1H), 6,49 (s, 1H, H-10), 6,25-6,14 (m, 1H, H-13), 5,92 (dd, J = 9,4 Hz, J’=2,4 Hz, 1H, H-3’), 5,68 (d, J=7,2 Hz, 1H, H-2), 5,38 (m, 1H, H-2’), 5,06 (m, 2H), 4,96 (bd, 1H, H-5), 4,80-4,35 (m, 1H, H-7), 4,31-4,20 (m, 2H, H-20), 3,94 (d, H=7,2 Hz, 1H, H-3), 2,47-1,64 (m, 17H benne s 2,38-nál, 3H, 2,11-nél, 3H, 1,78-nál, 3H, 1,65, 3H), 1,10 (s, 3H), 1,07 (s, 3H).
C) Végtermék előállítása
A (Illa) képletű vegyület és 2’-O-(benzil-oxi-karbonil)-8-demetil-7,8-ciklopropataxol 1:1 arányú keverékéből 89 mg-ot 3 ml etil-acetátban oldunk, és 29 mg (0,027 mmol) 10% palládiumot tartalmazó csontszenes palládiumkatalizátor jelenlétében atmoszféranyomáson hidrogéngáz alatt keverjük. 12 óra elmúltával szűrjük, az oldószert eltávolítjuk, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 40% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazva 67,7 mg cím szerinti vegyületet, valamint fehér, szilárd termékként (XXVIa) képletű 8-dimetil-7,8-ciklopropataxolt kapunk.
Ή-NMR [(XXVIa) képletű vegyület és (la) képletű vegyület keveréke, CDC13] δ: 8,11 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,72-7,07 (m, 14H), 6,50 (s, 1H, H-10), 6,14 (bt, 1H, H-13), 5,80 (dd, J=9,0 Hz, J’=2,4 Hz, 1H, H-3’), 5,74 (d, J=7,2, 1H, H-2), 4,98 (d, J=8,l Hz, 1H, H-5), 4,77 (m, 1H, H-2’), 4,70-4,40 (m, 1H, H-7), 4,40-4,21 (m, 2H, H-20), 4,02 (d, J=7,2 Hz, 1H, H-3), 2,60-1,55 (m, 17H, benne s 2,37-nél, 2,20, 3H, 1,77, 3H, 1,74, 3H), 1,14 (S, 3H), 1,12 (s, 3H).
A 7-fluor-taxolnak a 8-demetil-7,8-ciklopropataxoltól való elválasztására az alábbi HPLC módszereket alkalmazhatjuk.
1. módszer
Berendezés
Szivattyú: PE 4. sorozat
Oszlop: Shandon Hypercarb (grafitozott szén), μ, 100x4,6 mm 59864750 [a preparatív méretű oszlopokról információ kapható a Keystone Scientific cégtől (Bellefonte, PA)]
Injektor: PE ISS-100
HU 220 666 Bl
Detektor: HP-1040M
Körülmények:
Mozgó fázis: 85:15 arányú DKM/hexán elegy. Az elkülönítés 80:19:1 arányú DKM/hexán/izopropanol eleggyel is elvégezhető.
Áramlási sebesség: 2,5 ml/perc Detektor: 254 nm hullámhosszon Hígítószer: a mintát DKM-ban oldjuk.
2. módszer:
Ha DYNAMAX-60A (Si 83.121-C) preparatív HPLC oszlopot használunk (30 cm χ 2,5 cm), és az eluálást 1:1 arányú etil-acetát/hexán eleggyel, 10 ml/perc áramlási sebességgel végezzük, akkor a 7a-fluor-taxol retenciós ideje 15,59 perc, a 8-demetil-7,8-ciklopropataxol retenciós ideje 16,65 perc.
2. példa
7(i-Fluor-taxol [(la) képletű vegyület] előállítása
258 mg (0,26 mmol) (Ha) képletű vegyületet 1,7 ml THF és 3,4 ml dietil-éter elegyében oldunk, és -78 °Cra hűtjük. Ekkor az oldathoz 69 pl (0,52 mmol) DASTot adunk, és a reakcióelegyet 30 percig -78 °C hőmérsékleten, majd másnapig szobahőmérsékleten keveijük. Ezt követően elbontás céljából 0,3 ml vizet adunk hozzá, és az elegyet betöményítjük. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 30% etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk, s így 87 mg (33,7%) 2’-O-(benzil-oxi-karbonil)-7-fluortaxolt [(Illa) képletű vegyületet] kapunk amorf, szilárd termék alakjában. Ennek 'H-NMR-színképe lényegében a 2. példában megadott színképpel azonos. •9F-NMR (CDC13,) O (CF3COOH-val szemben): 90 (ddd, Jf,h7=49,6 Hz, Jf,H6=40,1 Hz, Jf,H6’=21,6 Hz).
A 2’-0-(benzil-oxi-karbonil)-csoportnak a 3. példában leírt eltávolítása útján a cím szerinti vegyületet 87% hozammal kapjuk; 'H-NMR-színképe szerkezetével összhangban van.
HRMS: az MH+-ra számított érték: 856,3344; talált:
856,3367.
3. példa
N-Debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-7a-fluortaxol [(lb) képletű vegyület] előállítása
A) N-Debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-2’-O-(trietilszilil)-7a-fluor-taxol [(Va) képletű vegyület] előállítása
7a-Fluor-taxol és 2’-O-(benzil-oxi-karbonil)-8demetil-7,8-ciklopropataxol 3:2 arányú keverékéből 572 mg-ot 7 ml száraz DKM-ban oldva éjszakán át szobahőmérsékleten 286 mg (1,111 mmol) (tetrabutil-ammónium)-[tetrahidridoborát]-tal reagáltatunk. Másnap a bórhidrid feleslegét 0,4 ml ecetsavval elbontjuk, és az oldószert lepároljuk. A maradékként így kapott nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét alkalmazva fehér, habszerű termékként 271 mg tömegű keveréket kapunk, amely a (IV) képletű 7a-fluor-bakkatin(III)-ból és a (XXVII) képletű 8-demetil-7,8-ciklopropabakkatin(III)-ból áll. Az NMR-színkép a szerkezettel összhangban van.
130 mg (IV) képletű vegyületből és 8-demetil-7,8ciklopropabakkatin(III)-ból álló keveréket 1 ml száraz THF-ben oldva -40 °C-ra hűtünk, és az oldathoz 0,164 ml (0,260 mmol) 1,63 mólos hexános n-butillítium-oldatot csepegtetünk argongáz alatt. Ehhez az oldathoz 15 perc múlva 203 mg (0,530 mmol) (XVa) képletű 1 -(terc-butoxi-karbonil)-(3R,4S)-cisz-3-(trietil-szilil-oxi)-4-fenil-azetidinon 0,5 ml száraz THF-nel készült oldatát adjuk, és a reakcióelegyet 0 °C-ra hagyjuk felmelegedni. Ezután a reakcióelegyet további 90 percig 0 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd telített vizes ammónium-klorid-oldattal elbontjuk. Etil-acetátos extrakció után a szerves fázist szárítjuk, szűrjük, és vákuumban bepároljuk. Az így kapott olajszerű nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 40% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazva 143 mg fehér, habszerű keveréket kapunk, amely a cím szerinti vegyületen kívül N-debenzoil-N(terc-butoxi-karbonil)-2’-O-(trietil-szilil)-8-demetil7.8- ciklopropataxolt [(XXVIIIa) képletű vegyületet] tartalmaz.
Ή-NMR [(XXVIIIa) képletű vegyület és (Va) képletű vegyület keveréke, 300 MHz, CDC13)] δ: 8,14 (d, 2H), 7,45-7,17 (m, 8H), 6,56 (s, 0,6H, H-10), 6,32 (s, 0,4H, H-10), 6,28 (m, 1H, H-13), 5,72 (d, 0,6H, H-2), 5,62 (d, 0,4H, H-2), 5,44 (m, 1H, H-3’), 5,28 (cser. m, 1H, N-H), 5,00 (d, 1H, H-5), 4,70-4,45 (m, 1H, H-7), 4,50 (bs, 1H, H-2’), 4,40-4,35 (m, 2H, H-20), 4,05 (d, 1H, H-3), 2,63-1,15 (m, 32H), 0,73 (m, 9H), 0,34 (m, 6H).
B) N-Debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-7a-fluortaxol [(lb) képletű vegyület] előállítása 100 mg, (Va) képletű vegyületből és N-debenzoilN-(terc-butoxi-karbonil)-2’-O-(trietil-szilil)-8-demetil7.8- ciklopropataxolból álló keverék 1 ml acetonitrilből készült oldatához -5 °C hőmérsékleten 0,0192 ml (0,30 mmol) 36%-os vizes sósavoldatot adunk. A reakcióelegyet 10 percig keverjük, majd 1,5 ml etil-acetáttal hígítjuk. A szerves fázist vízzel mossuk, szárítjuk, szűrjük, és bepároljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 40% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazva 73 mg keveréket kapunk, amely habszerű termék, és a cím szerinti vegyület mellett (XXIXa) képletű debenzoil-N(terc-butoxi-karbonil)-8-demetil-7,8-ciklopropataxolt tartalmaz.
•Η-NMR [(XXIXa) és (lb) keveréke, 300 MHz, CDC13)] δ: 8,11 (m, 2H), 7,60-7,22 (m, 8H), 6,50 (s, 0,6H, H-10), 6,30 (s, 0,4H, H-10), 6,22 (m, 1H, H-13), 5,72 (d, 0,6H, H-2), 5,61 (d, 0,4H, H-2), 5,50-5,42 (m, 1H, H-3’), 5,28 (cser. bd, 1H, N-H), 5,00 (d, 1H, H-5), 4,70-4,40 (m, 1H, H-7), 4,60 (bs, 1H, H-2’), 4,40-4,23 (m, 2H, H-20), 4,02 (d, 1H, H-3), 3,40 (cser. bs, 1H, O-H), 2,65-1,10 (m, 32H).
HRMS: MH+-ra számított érték: 852.3607; talált: 852.3604.
HU 220 666 Β1
4. példa
7a.-Fluor-3 ’-defenil-3 ’-(2-furil)-N-debenzoil-N(terc-butoxi-karbonil)-taxol [(le) képletű vegyület] előállítása
A) 7a-Fluor-bakkatin(III) [(IV) képletű vegyület] előállítása
Száraz lombikba közömbös gázatmoszférában 4 g (4 mmol) 2’-O-(benzil-oxi-karbonil)-taxolt [(Ha) képletű vegyületet] és 80 ml száraz toluolt helyezünk, és az így kapott szuszpenziót szobahőmérsékleten keverjük, miközben 16 ml száraz THF-t csepegtetünk hozzá, aminek a hatására színtelen oldat képződik. Ezt az oldatot szárazjég és aceton elegyével készült fürdőben -78 °Cra hűtjük, és 1,2 ml (2,5 ekvivalens) DAST-dal kezeljük. A reakcióelegyet 16 órán át keverjük, s közben szobahőmérsékletre hagyjuk fokozatosan felmelegedni. Az így kapott szuszpenziót szűrjük, a szűrlethez 30 ml etil-acetátot adunk, és előbb telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd konyhasóoldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A fehér, habszerű nyersterméket szilikagéloszlopon kromatográfíával részlegesen tisztítjuk, ehhez eluálószerként 10% acetonitrilt tartalmazó DKM-t használunk, s így 1,45 g hozammal olyan keveréket kapunk, amely a (Illa) képletű 7a-fluorszármazékot és a 7,8-ciklopropaadduktumot [(XXVa) képletű vegyületet] az Ή-NMR-színkép alapján 82:18 arányban tartalmazza.
Az így kapott keverékből 1,45 g-ot 60 ml etil-acetátban felveszünk, 300 mg csontszenes palládiumkatalizátort adunk hozzá, és 4 órán át 345 kPa hidrogénnyomás alatt rázatjuk. Ezután a reakcióelegyet eltávolítjuk, és rövid szilikagélrétegen átszűrve bepároljuk. így fehér, habszerű termék alakjában kapjuk a kívánt terméket 1,24 g (99%) hozammal, amely az 'H-NMR-színkép alapján 90:10 arányú keverék. A 7a-fluor- és 7,8ciklopropataxol keverékét 30 ml DKM-ban felvesszük, 745 mg (2,9 mmol, 2 ekvivalens) (tetrabutil-ammónium)-[tetrahidrido-borát]-tal kezeljük, és a reakcióelegyet 6 órán át keverjük, majd 1 ml ecetsav hozzáadásával elbontjuk, 30 ml DKM hozzáadásával hígítjuk, és telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. Az így kapott nyers, szubsztituált taxánkeveréket szilikagéloszlopon kromatografálva részlegesen tisztítjuk. Eluálószerként 10% acetonitrilt tartalmazó DKM-t alkalmazva a cím szerinti bakkatin(III)-származékot 510 mg (60%) hozammal fehér, habszerű alakban kapjuk; ez a termék az *H-NMRszínkép alapján a 7a-fluor- és a 7,8-ciklopropaszármazék 90:10 arányú keveréke. A habszerű terméket forró izopropanolból átkristályosítva 410 mg kicsi, fehér tűkben kristályosodó (IV) képletű 7a-fluor-bakkatint kapunk, olvadáspont: 234-236 °C (bomlás közben). •H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: 8,14 (d, 2H, J=6 Hz), 7,65-7,52 (m, 1H), 7,52-7,49 (m, 2H), 6,57 (s, 1H), 5,72 (d, 1H, J=9 Hz), 5,03 (d, 1H, J=9 Hz), 4,86-4,79 (m, 1H), 4,55 (dd, C-7 proton 1H, J = 3,9, JH_ f=47,1 Hz), 4,36 (A ABq-ból, 1H, J=7,8 Hz), 4,27 (B
ABq-ból, 1H, J=7,8 Hz), 4,12 (d, 1H, J=6,9 Hz), 2,60-2,48 (m, 2H), 2,30-1,07 (m, 22H, benne szingulettek: 2,30; 2,21; 2,08; 1,77; 1,58; 1,13; 1,07).
B) 7a-Fluor-2’-O-(trietil-szilil)-3’-defenil-3’-(2-füril)N-debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-taxol [(Vb) képletű vegyület] előállítása
59,3 mg (0,1 mmol) 7a-fluor-bakkatin(III) [(IV) képletű vegyület] 5 ml THF-nel készült oldatát közömbös gázzal átöblitjük, majd szárazjég és aceton keverékével -55 °C-ra hűtjük. Ekkor az oldathoz injekciós fecskendővel 0,24 ml (1,2 ekvivalens) 0,5 mólos THFes lítium-(hexametil-diszilazán)-oldatot csepegtetünk, és az így kapott halványsárga oldatot 5 percig keverjük, majd 5 perc alatt 178,4 mg (6 ekvivalens) (XVb) képletű racém l-(terc-butoxi-karbonil)-cisz-3-(trietil-szililoxi)-4-(2-füril)-azetidinon 2 ml THF-nel készült oldatát csepegtetjük hozzá. Ekkor a hűtőfürdőt sójégfürdőre cseréljük, és az oldatot 0 °C hőmérsékleten 1 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 2 ml telített ammónium-klorid-oldat hozzáadásával elbontjuk, 25 ml etil-acetáttal hígítjuk, és kétszer mossuk 10 ml vízzel. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így a kívánt terméket nyers, színtelen olaj alakjában kapjuk. E nyersterméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 7:3 arányú hexán/etil-acetát elegyet alkalmazunk, s így a cím szerinti vegyületet színtelen, üvegszerű formában 80,5 mg (84%) hozammal kapjuk.
•H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: 8,13 (d, 2H, J=9,0 Hz), 7,62-7,56 (m, 1H), 7,51-7,46 (m, 2H), 7,38 (s, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,45 (dd, 1H, J=l,8, 3,2 Hz), 6,21 (d, 2H, J=3,2 Hz), 5,76 (d, 1H, J=7,2 Hz), 5,33 (bt, 2H), 5,03 (d, 1H, J=7,5 Hz), 4,75 (s, 1H), 4,57 (dd, C-7 proton 1H, J=4,3, JH_F=46,9 Hz), 4,37 (A ABqból, 1H, J=8,4 Hz), 4,27 (B ABq-ból, 1H, J=8,4 Hz), 4,05 (d, 1H, J=7,2 Hz), 2,49-1,16 [m, 11H, benne szingulettek: 2,47 (3H), 2,20 (3H), 1,88 (3H), 1,72 (3H), 1,38 (9H)], 0,83 (t, 9H, J=5 Hz), 0,55-0,37 (m, 6H);
•3C-NMR (75,6 MHz, CDC13) δ: 206,0, 171,1, 169,4,
169.1, 167,2, 155,2, 152,1, 141,8, 141,4, 133,6, 131,8,
130.1, 129,2, 128,7, 110,6, 107,1, 96,2, 93,9, 81,9,
80,7, 80,0, 78,7, 77,9, 77,8, 75,0, 72,3, 70,8, 56,9,56,7, 52,7,42,6,40,0, 35,5, 33,9, 33,6,28,1, 28,0, 25,5,22,5, 21,2, 20,7,14,6,14,5,14,3,14,2, 6,4,4,2.
C) 7a-Fluor-3’-defenil-3’-(2-furil)-N-debenzoil-N(terc-butoxi-karbonil)-taxol [(le) képletű vegyület] előállítása mg (0,08 mmol) (Vb) képletű vegyületet 2 ml acetonitrilben oldva sójégfürdőben 0 °C-ra hűtünk, és az oldathoz 0,5 ml (6 ekvivalens) 1 N sósavoldatot adunk. A reakcióelegyet 0 °C-on 30 percig keverjük, majd az oldószert vákuumban bepároljuk, és a maradékot 25 ml etil-acetát és 10 ml víz között megoszlatjuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. Az így kapott fehér, habszerű nyersterméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként 10% acetonitrilt tartalmazó DKM-t al7
HU 220 666 Bl kalmazunk, s így a cím szerinti vegyületet habszerű termékként 45,6 mg mennyiségben kapjuk (a változatlanul visszanyert kiinduló anyag figyelembevételével a hozam 77%): [a]D=26,2° (c=0,8 mg/ml, DKM). ‘H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: 8,12 (d, 2H, J=6 Hz),
7.63- 7,58 (m, 1H), 7,50 (t, 2H, J=6 Hz), 7,41 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,37-6,36 (m, 1H), 6,33-6,31 (m, 1H),
6.20 (t, 1H, J=6 Hz), 5,76 (d, 1H, J = 6 Hz), 5,37-5,23 (m, 2H), 5,02 (d, 1H, J=9 Hz), 4,71 (bs, 1H), 4,57 (dd, C-7 proton 1H, J=4,2, JH_F=46,8 Hz), 4,36 (A ABq-ból, 1H, J=8,7 Hz), 4,27 (B ABq-ból, 1H, J=8,l Hz), 4,04 (d, 1H, J=7,2 Hz), 3,28 (bs, 1H), 2,59-2,20 [m, 5H benne szingulettek: 2,41 (3H),
2.21 (3H)], 1,85 (s, 3H), 1,43-1,17 (m, 18H); ‘3C-NMR (75,6 MHz, CDC13) δ: 205,7, 169,2, 169,0,
167,1, 142,3, 140,6, 133,5, 132,1, 130,0, 129,1, 128,6, 110,5, 107,2, 95,9, 93,6, 81,8, 80,6, 78,5, 77,8, 77,7,
74.7, 72,1, 71,6, 56,9, 55,8, 51,5,42,5, 39,9, 35,4, 33,8, 33,5,28,0, 27,9, 25,6, 22,2,20,9, 20,7,14,5,14,1,14,0; HRMS: a C43H53NOi5F összegképletre számított MH+ érték: 842,3399; talált: 842,3389.
5. példa
7a-Fluor-3 ’-defenil-3 ’-(2-tienil)-N-debenzoil-N(terc-butoxi)-taxol [(Ifi képletű vegyület] előállítása
A 4. példában leírt eljárást alkalmazzuk, s így a cím szerinti vegyületet fehér, habszerű termékként 22,5 mg (61%) hozammal kapjuk.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: 8,12 (d, 2H, J=9 Hz),
7.64- 7,59 (m, 1H), 7,50 (t, 2H, J = 9 Hz), 7,28-7,26 (m, 2H), 7,09-7,07 (m, 1H), 7,01-6,98 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,19 (t, 1H, J=9 Hz), 5,76 (d, 1H, J = 6 Hz), 5,53 (bd, 1H, J=12 Hz), 5,35 (d, 1H, J=9 Hz), 5,00 (d, 1H, J=9 Hz), 4,65-4,63 (m, 1,5H, C7 rejtett proton), 4,48 (d, 0,5H, J=9 Hz), 4,36 (A ABqból, 1H, J=8,7 Hz), 4,27 (B ABq-ból, 1H, J=8.1 Hz), 4,04 (d, 1H, J=7,2 Hz), 3,28 (bs, 1H), 2,59-2,20 (m, 5H benne szingulettek: 2,39 (3H), 2,18 (3H), 1,72 (s, 3H), 1,43-1,17 (m, 18H);
‘3C-NMR (75,6 MHz, CDC13) δ: 205,6, 172,1, 169,3, 169,0, 167,0, 141,5, 140,6, 133,6, 132,1, 130,1, 129,3, 129,0, 128,6, 126,9, 125,2, 125,1, 95,9, 93,5, 81,8,
80.8, 80,2, 78,5, 77,8, 77,7, 77,3, 76,8, 74,7, 73,3, 72,2,
56.9, 52,5,42,5, 39,9, 35,5, 33,8, 33,5,28,0, 27,9, 25,6, 22,3, 20,9, 20,7, 14,6, 14,1, 14,0; [a]D=-156° (c=0,25 mg/ml, CH2C12).
6. példa
7a-Fluor-10-dezacetil-oxi-taxol [(Ic) képletű vegyület] előállítása
140 mg (0,173 mmol) 10-dezacetil-taxol 3,5 ml DKM-nal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten 0,028 ml (0,346 mmol) piridint és 0,0724 ml (0,260 mmol) triklór-etil-(klór-formiát)-ot adunk, a reakcióelegyet 0 °C-on 1 órán át állni hagyjuk, majd a hűtőfurdőt eltávolítjuk, és a reakcióelegyet másnapig szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószer lepárlása után kapott maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk. Eluálószerként 30-50% etil-acetátot tartalmazó hexános elegyeket alkalmazunk, s így habszerű termékként 92,3 mg (46%) (XHIa) képletű vegyületet kapunk.
92,3 mg (0,079 mmol) (XHIa) képletű vegyületet 2 ml száraz DKM-ban 0,0384 ml (0,238 mmol) 1,1,2trifluor-2-klór-trietil-aminnal kezelünk, a kapott oldatot másnapig keveijük, utána az oldószert lepároljuk, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk. Eluálószerként 25% etil-acetátot tartalmazó hexán alkalmazásával 42,8 mg (47%) hozammal fehér, szilárd termékként (Villa) képletű vegyületet kapunk.
mg (0,034 mmol) (Villa) képletű dienonvegyületet 0,5 ml metanol és 0,5 ml ecetsav elegyében oldunk, és 66,4 mg (1,02 mmol) cinkport adagolunk hozzá, miközben a reakcióelegy hőmérsékletét 1 órán át 40 °C-on tartjuk. Ezután az oldhatatlan csapadékot kiszűijük, a szűrletet betöményítjük, és a maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk. Eluálószerként 60% etil-acetátot és 40% hexánt tartalmazó elegyet alkalmazva 22 mg (81,5%) (IXa) képletű vegyületet kapunk, amely habszerű anyag.
mg (0,028 mmol) (IXa) képletű dienon 0,7 ml etil-acetáttal készült oldatát 14,7 mg 10%-os csontszenes palládiumkatalizátor jelenlétében enyhe túlnyomással szobahőmérsékleten 5,5 órán át hidrogénezzük. Ezt követően a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a terméket szilikagéloszlopon kromatografálva tisztítjuk. Eluálószerként hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyét használjuk, s így habszerű termékként 15 mg (68%) hozammal habszerű (Xa) képletű vegyülethez jutunk.
mg (0,034 mmol) (Xa) képletű vegyület 1 ml DKM-nal készült oldatához előbb 0,0146 ml (0,102 mmol) benzil-(klór-formiát)-ot, majd 0,0177 ml (0,102 mmol) diizopropil-etil-amint adunk, a reakcióelegyet 45 percig 0 °C hőmérsékleten, majd további 12 órán át szobahőmérsékleten keverjük, s utána az oldószert lepároljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluálószerként 40% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk, s így habszerű termékként 25,5 mg (81%) hozammal (Xla) képletű vegyülethez jutunk.
25,5 mg (0,027 mmol) (Xla) képletű vegyület és 0,8 ml DKM oldatához 0 °C hőmérsékleten 0,0071 ml (0,055 mmol) DAST-ot adunk, a reakcióelegyet 45 percig 0 °C-on, majd 5 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, s utána az oldószert lepároljuk. A maradékot kromatografálva nyers, habszerű termékként kapjuk a (Xlla) képletű vegyületet. E terméket 1 ml etilacetátban oldjuk, és 8,9 mg 10%-os csontszenes palládium hozzáadása után enyhe hidrogéntúlnyomással 12 órán át szobahőmérsékleten hidrogénezzük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a terméket szilikagélen kromatografáljuk. így habszerű termékként kapjuk az (Ic) képletű vegyületet 10 mg hozammal (a két lépésre vonatkoztatva 40% összhozammal).
‘H-NMR (CDClj) δ: 8,08 (d, 2H), 7,70 (d, 2H), 7,68-7,28 (m, 11H), 7,04 (d, 1H), 6,04 (bt, 1H), 5,75 (dd, 1H), 5,69 (d, 1H), 4,92 (d, 1H), 4,72 (dd, 1H), 4,55 (dd, Jh.f=47 Hz), 4,30-4,21 (m, 3H), 3,81 (dd, 1H), 3,47 (d, cser. 1H), 3,37 (bd, 1H), 2,48-1,30 (m, 13H, benne szingulettek: 2,30, 1,72, 1,61), 1,07 (s, 3H), 1,02 (s, 3H);
HU 220 666 BI
HRMS: az MH+-ra számított érték: 798,3290; talált:
798,3264.
7. példa
7a.-Fluor-10-dezacetil-taxol [(Id) képletű vegyület] előállítása
120 mg (0,103 mmol) a 6. példában leírtak szerint kapott (Vlla) képletű vegyület 2 ml DKM-nal készült oldatát 0 °C-ra hűtjük, és 0,0266 ml (0,207 mmol) DAST-ot adunk hozzá. Az oldatot 30 percig 0 °C-on, majd utána 4 órán át szobahőmérsékleten keveijük, utána 0,05 ml víz hozzáadásával a reakcióelegyet elbontjuk, és betöményítjük. A maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, eluálószerként 30% etil-acetátot tartalmazó hexánt alkalmazunk, s így habszerű termékként 81 mg (68%) hozammal (XlVa) képletű vegyületet kapunk. Ez utóbbiból 63 mg-ot (0,054 mmol) 0,5 ml metanolban oldunk, 0,5 ml ecetsavat adunk hozzá, majd 90 percig 45 °C hőmérsékleten 104 mg (1,62 mmol) cinkporral keveijük. Ezután a reakcióelegyet szűrjük, a szűrletet betöményítjük, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 40% hexán és 60% etil-acetát elegyét alkalmazzuk, s így fehér, szilárd termékként 38 mg (86%) hozammal jutunk az (Id) képletű vegyülethez.
Ή-NMR (CDC13) 6: 8,17 (d, 2H), 7,78 (d, 2H), 7,66-7,26 (m, 11H), 7,15 (d, 1H), 6,20 (bt, 1H), 5,83 (dd, 1H), 5,76 (d, 1H), 5,22 (s, 1H), 5,01 (d, 1H), 4,80 (m, 1H), 4,56 (dd, JH.F=47 Hz), 4,40 (m, 2H), 4,10 (d plusz cser. s, 2H), 3,55 (d, cser. 1H), 2,66-1,70 (m, 13H, benne s: 2,41, 1,82, 1,76) 1,12 (s, 3H), 1,03 (s, 3H),
HRMS: az MH+-ra számított érték: 814,3239; talált:
814,3214.
Biológiai vizsgálatok
A citotoxicitás in vitro vizsgálata
A jelen találmány szerinti 7-fluor-taxol-származékok in vitro körülmények között az emberi HCT-116 és HCT-116/VM46 vastagbél-karcinómasejtekkel szemben citotoxikus hatást mutattak. A HCT-116/VM46 sejtek olyan sejtek, amelyeket előzőleg tenipoziddal szemben mutatott rezisztenciájuk alapján szelektáltunk, és többszörös rezisztenciával rendelkező fenotípust fejeznek ki; így taxollal szemben is ellenállók. A HCT-116 emberi vastagbél-karcinómasejtek citotoxicitását az XTT (2,3-bisz(2-metoxi-4-nitro-5-szulfo-fenil)-5-[(fenil-amino)-karbonilJ-2H-tetrazólium-hidroxid) mérőmódszerrel végeztük [lásd: D. A. Scudiero és munkatársai : „Oldható tetrazólium/formazán mérőmódszer kiértékelése a sejtszaporodás és gyógyszerérzékenység (hatóanyagérzékenység) szempontjából sejttenyészetben, emberi és más daganatsejttörzsek alkalmazásával”, (angolul), Cancer Rés. 48, 4827-4833 (1988)].
A sejteket 96 üreges mikrotitráló lemezeken, üregenként 4000 sejtszámban helyeztük el, majd 24 órával később adtuk hozzá a sorozatban hígított hatóanyagoldatokat. A sejteket 37 °C hőmérsékleten 72 órán át inkubáltuk, és ennek az időpontnak az elérése után adtuk hozzá az XTT tetrazóliumszínezéket. Az élő sejtekben jelen lévő dehidrogenáz enzim az XTT-t olyan alakká redukálja, amelynek fényelnyelése 450 nm-nél van, és spektrofotometriás úton kvantitatíve mérhető: minél nagyobb az abszorpció mértéke, annál nagyobb az élő sejtek száma. Az eredményeket az IC50-n értékekben fejeztük ki: ez a hatóanyagnak azon koncentrációja, amely szükséges ahhoz, hogy a sejtek szaporodását (azaz a 450 nm-en mért abszorpcióját) a kezeletlen kontrollsejtekhez viszonyítva 50%-ban gátolja. Az ezen mérőmódszerrel meghatározott IC50 értékeket a 3. táblázatban foglaltuk össze.
3. táblázat
A vegyületek citotoxicitása emberi vastagbél-karcinómasejtekkel szemben in vitro körülmények között
A vegyület ICjo(mM)
HCT-116 HCT-116/VM46
(Ic) 0,301 0,979 (3,3)*
(Id) 0,053 1,30(25)
(la) 0,011 0,158(14)
Taxol 0,004 0,440 (124)
* A zárójelben látható szám mutatja, hogy a rezisztencia hányszorosa a HCT-116 sejtek rezisztenciájának.
Az Ml09 egérmodellen végzett vizsgálatok
William Rose leírása szerint [,,A Madison 109 tüdőkarcinóma kiértékelése, mint daganatellenes hatóanyagok szűrővizsgálati modellje” (angolul), Cancer Treatment Reports 65, 3-4. szám (1981)], Balb/cxDBA/2 F, hibrid egerekbe 0,5 ml 2 tömeg/térfogat%-os Ml09 tüdőkarcinóma-szuszpenziót ültettünk.
Az egereket a vizsgálandó vegyületekkel intraperitoneális befecskendezés útján kezeltük úgy, hogy a daganatbeültetés után 1, 5 és 9 nappal, vagy a daganatbeültetés után 5 és 8 nappal különböző dózisokat alkalmaztunk. Naponta megfigyeltük az egerek túlélését a daganat beültetése után 75-90 napon át. Az egerek egyik csoportját nem kezeltük, ez kontrollcsoportként szolgált.
A vegyületekkel kezelt (T) egerek átlagos túlélési idejét összehasonlítottuk a kontroll (C) egerek átlagos túlélési idejével. Minden egyes vizsgálandó vegyülettel kezelt egércsoportban az előbbi két érték arányát 100-zal szorozva kaptuk a T/C viszonyszámot százalékos értékben, s ezeket az értékeket tüntettük fel a 4. táblázatban.
4. táblázat
Az Ml09 modellen intraperitoneális adagolással kapott eredmények
A vegyület T/C%-ban (dózis mg/kg/befecskendezés; adagolási idő)
(Ib) 147 (40; az 5. és 8. napon)
HU 220 666 BI
Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületek emlősökön daganatgátló hatást fejtenek ki. így a jelen találmány révén lehetővé válik módszer kialakítása olyan emlődaganatok gátlására, amelyek az (I) általános képletű vegyületekkel szemben érzékenyek.
A jelen találmány továbbá azokra a gyógyászati készítményekre is kiterjed, amelyek egy (I) általános képletű vegyületet egy vagy több gyógyászati szempontból elfogadható, közömbös vagy fiziológiailag hatásos vivőanyaggal, hígítószerrel, töltőanyaggal vagy más adalék anyagokkal összekeverve tartalmaznak. A taxolkészítmények vagy a taxolszármazékot tartalmazó készítmények kialakítása (a lehetséges adagolási rendet beleértve) számos irodalmi közleményben - így például a 4 960 790 és 4 814 470 számú egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban - megtalálhatók, és ezek példái alapján a jelen találmány szerinti vegyületek is készítményekké alakíthatók. A találmány szerinti (I) általános képletű új vegyületek például tabletták, pilulák, porkeverékek, kapszulák, injekciós készítmények, oldatok, végbélkúpok, emulziók, diszperziók, táplálék-előkeverékek (premixek) és más célszerű gyógyszerformák alakjában adagolhatok. A vegyületet tartalmazó gyógyászati készítmény általában nem toxikus, gyógyászati szempontból elfogadható szerves vivőanyagot, vagy nem toxikus gyógyászati szempontból elfogadható szervetlen vivőanyagot tartalmaz, általában körülbelül 0,01-2500 mg mennyiségben, nagyobb adagolási egység esetében előnyösen 50-500 mg mennyiségben. Gyógyászati szempontból elfogadható tipikus vivőanyagok például: a mannit, karbamid, dextránok, laktóz, burgonya- és kukoricakeményítő, magnézium-sztearát, talkum, növényi olajok, polialkilénglikolok, etil-cellulóz, poli(vinil-pirrolidon), kalcium-karbonát, etil-oleát, izopropil-mirisztát, benzil-benzoát, nátrium-karbonát, zselatin, kálium-karbonát, kovasav, valamint más, célszerűen alkalmazható, gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagok. A gyógyászati készítmény továbbá nem toxikus segédanyagokat is tartalmazhat, ilyenek például: az emulgeáló-, tartósítószerek, nedvesítőszerek; a szorbitán-monolaurát, trietanol-amin-oleát, poli(oxi-etilén)-monosztearát, gliceril-tripalmitát és a nátrium-dioktil-szulfoszukcinát.
A találmány szerinti vegyületek liofilizálhatók, és kívánt esetben más, gyógyászati szempontból elfogadható vivőanyagokkal kombinálva (keverve) parenterális, befecskendezhető készítményekké alakíthatók. A parenterális adagolás céljára a liofilizált terméket vízben (vagy fiziológiás konyhasóoldatban) ismét oldjuk (rekonstituáljuk). E célra víz és valamilyen szerves oldószer, például propilénglikol, etanol keveréke is alkalmazható.
Az emlősállatok daganatainak kezelésére a jelen találmány szerinti vegyületek lényegében a taxollal azonos módon alkalmazhatók. A taxol rákos betegek esetében alkalmazható felhasználási módját, adagolását és az adagolás időrendjét behatóan vizsgálták [lásd például: Ann. Int. Med. 111, 273-279 (1989)]. A jelen találmány szerinti vegyületek esetében az adagolandó dózis - egyszeri dózis, többszöri vagy napi dózis - természetesen az alkalmazott vegyülettől függően változik, mivel a vegyületek hatékonysága különböző: függ továbbá az adagolás módjától, a beteg testtömegétől és a beteg kóros állapotától. Az adagolandó dózis nem köthető szoros határokhoz, általában azon farmakológiailag hatásos szabad formának hatékony mennyisége vagy annak moláris egyenértéke, amely egy adagolási formából a metabolizmus utján felszabadul, s amellyel a kívánt farmakológiai és fiziológiai hatások elérhetők. Az adagolandó dózis a beteg 1 kg testtömegére számítva 0,8-8 mg, illetve a beteg testfelületének 1 m2-ére vonatkoztatva körülbelül 50-275 mg. A rák kezelésében jártas onkológus kísérletezés nélkül képes a jelen találmány szerinti vegyületek hatásos adagolási rendjének a kialakítására a taxol és származékai korábbi vizsgálatainak az alapján.

Claims (12)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. (I) általános képletű fluorozott taxolszármazékok, ahol
    R1 -CO-fenil vagy -CO-O-(l-6 szénatomos)alkil-csoport;
    R2 hidrogénatom, hidroxilcsoport vagy -O-CO(1-6 szénatomos)-alkil-csoport;
    Rs fenil-, naftil-, furil- vagy tienilcsoport.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, ahol R1 jelentése terc-butoxi-karbonil- vagy C6H5CO-csoport, R2 jelentése hidrogénatom, hidroxil- vagy -OCOCH3-csoport, és Rs fenil-, 2-tienil vagy 2-furilcsoportot jelent.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-taxol.
  4. 4. A 2. igénypont szerinti N-debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-7-fluor-taxol.
  5. 5. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-10-dezacetil-oxitaxol.
  6. 6. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-lO-dezacetil-taxol.
  7. 7. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-3’-defenil-3’-(2furil)-N-debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-taxol.
  8. 8. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-3’-defenil-3’-(2tienil)-N-debenzoil-N-(terc-butoxi-karbonil)-taxol.
  9. 9. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-3’-defenil-3’-(2tienil)-taxol.
  10. 10. A 2. igénypont szerinti 7-fluor-3’-defenil-3’-(2furil)-taxol.
  11. 11. Daganatgátló (antitumor) hatású gyógyászati készítmény, amely az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület daganatgátló hatású mennyiségét gyógyászati szempontból elfogadható hígító-, vivő- és/vagy segédanyagokkal összekeverve tartalmazza.
  12. 12. Eljárás a 11. igénypont szerinti daganatgátló (antitumor) hatású gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, 1-10. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület - ahol R1, R2 és Rs jelentése az 1. igénypontban meghatározott - daganatgátló hatású mennyiségét gyógyászati szempontból elfogadható hígító-, vivő- és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
HU9301902A 1992-07-01 1993-06-30 Fluorozott taxolszármazékok és eljárás e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására HU220666B1 (hu)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US90726192A 1992-07-01 1992-07-01
US99544392A 1992-12-23 1992-12-23
US99645592A 1992-12-24 1992-12-24
US642393A 1993-01-19 1993-01-19
US08/029,819 US5254580A (en) 1993-01-19 1993-03-11 7,8-cyclopropataxanes
US08/062,687 US5294637A (en) 1992-07-01 1993-05-20 Fluoro taxols

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9301902D0 HU9301902D0 (en) 1993-09-28
HUT64529A HUT64529A (en) 1994-01-28
HU220666B1 true HU220666B1 (hu) 2002-04-29

Family

ID=27555540

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9301902A HU220666B1 (hu) 1992-07-01 1993-06-30 Fluorozott taxolszármazékok és eljárás e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

Country Status (18)

Country Link
EP (2) EP0577082B1 (hu)
JP (1) JP3261550B2 (hu)
CN (1) CN1051309C (hu)
AT (2) ATE136460T1 (hu)
AU (1) AU656475B2 (hu)
CY (1) CY1931A (hu)
DE (2) DE69302137T2 (hu)
DK (1) DK0577082T3 (hu)
ES (2) ES2087616T3 (hu)
FI (1) FI110942B (hu)
GR (1) GR3019635T3 (hu)
HK (1) HK155896A (hu)
HU (1) HU220666B1 (hu)
IL (1) IL106176A (hu)
MX (1) MX9303900A (hu)
NO (1) NO302520B1 (hu)
NZ (1) NZ248017A (hu)
PL (1) PL174374B1 (hu)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6005138A (en) 1991-09-23 1999-12-21 Florida State University Tricyclic taxanes having a butenyl substituted side-chain and pharmaceutical compositions containing them
US6794523B2 (en) 1991-09-23 2004-09-21 Florida State University Taxanes having t-butoxycarbonyl substituted side-chains and pharmaceutical compositions containing them
US6521660B2 (en) 1991-09-23 2003-02-18 Florida State University 3′-alkyl substituted taxanes and pharmaceutical compositions containing them
IL107950A (en) 1992-12-15 2001-04-30 Upjohn Co b 7, b 8 - Matano - Taxols, their preparation and pharmaceutical preparations against malignant tumors containing them
US5646176A (en) 1992-12-24 1997-07-08 Bristol-Myers Squibb Company Phosphonooxymethyl ethers of taxane derivatives
ES2145829T3 (es) * 1993-06-11 2000-07-16 Upjohn Co Uso antineoplasico de delta 6,7-taxoles y composiciones farmaceuticas que los contienen.
IL127599A (en) * 1994-01-28 2004-06-01 Upjohn Co Process for preparing isotaxol analogs
FR2721024B1 (fr) * 1994-06-09 1996-07-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
FR2721023B1 (fr) * 1994-06-09 1996-07-12 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux Taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
WO1996023779A1 (fr) * 1995-02-02 1996-08-08 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Derives ethers
IT1275936B1 (it) * 1995-03-17 1997-10-24 Indena Spa Derivati della 10-deacetilbaccatina iii e della 10-deacetil-14b- idrossibaccatina iii loro metodo di preparazione e formulazioni
FR2732342B1 (fr) * 1995-04-03 1997-04-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux taxoides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
ES2164241T3 (es) * 1995-04-28 2002-02-16 Daiichi Seiyaku Co Compuestos pentaciclicos.
EP1913958B1 (en) * 2006-08-03 2009-12-23 Sanofi-Aventis Antitumor compositions containing acetylcyclopropyl docetaxel and trastuzumab
CN101863861A (zh) * 2009-04-16 2010-10-20 山东靶点药物研究有限公司 一种简便高效地制备紫杉醇类似物Larotaxel的方法
US8791279B2 (en) * 2010-12-13 2014-07-29 Yung Shin Pharm. Ind. Co., Ltd. Process for preparing taxoids from baccatin derivatives using lewis acid catalyst

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100239201B1 (ko) * 1991-09-23 2000-02-01 로버트 엠 존슨 10-데스아세톡시탁솔 유도체

Also Published As

Publication number Publication date
PL174374B1 (pl) 1998-07-31
ATE136460T1 (de) 1996-04-15
EP0577083B1 (en) 2003-12-10
CY1931A (en) 1997-05-16
FI933017A (fi) 1994-01-02
DK0577082T3 (da) 1996-05-06
NO932371D0 (no) 1993-06-29
HUT64529A (en) 1994-01-28
NZ248017A (en) 1994-12-22
ES2087616T3 (es) 1996-07-16
DE69302137T2 (de) 1996-11-14
FI933017A0 (fi) 1993-06-30
MX9303900A (es) 1995-01-31
EP0577082B1 (en) 1996-04-10
AU656475B2 (en) 1995-02-02
EP0577083A1 (en) 1994-01-05
ATE256115T1 (de) 2003-12-15
EP0577082A1 (en) 1994-01-05
DE69333339T2 (de) 2004-09-23
IL106176A (en) 2001-01-11
HU9301902D0 (en) 1993-09-28
NO932371L (no) 1994-01-03
JPH06179666A (ja) 1994-06-28
GR3019635T3 (en) 1996-07-31
ES2211861T3 (es) 2004-07-16
FI110942B (fi) 2003-04-30
IL106176A0 (en) 1993-10-20
CN1082541A (zh) 1994-02-23
HK155896A (en) 1996-08-23
DE69333339D1 (de) 2004-01-22
AU4155693A (en) 1994-01-06
PL299513A1 (en) 1994-03-07
JP3261550B2 (ja) 2002-03-04
NO302520B1 (no) 1998-03-16
DE69302137D1 (de) 1996-05-15
CN1051309C (zh) 2000-04-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2099232C (en) Fluoro taxols
EP0600517B1 (en) 6,7-Modified paclitaxels
EP0671399B1 (en) 6,7-Epoxy paclitaxels
KR100258313B1 (ko) 6,7-변형 패클리탁셀
US5254580A (en) 7,8-cyclopropataxanes
HU220666B1 (hu) Fluorozott taxolszármazékok és eljárás e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
PL175014B1 (pl) Nowe pochodne taksanu
EP0590267A2 (en) Deoxy taxols
JPH07149779A (ja) タキサンのホスホノオキシメチルエーテル誘導体
JPH06179665A (ja) ７，８−シクロプロパタキサン類
KR100292331B1 (ko) 플루오로탁솔
RU2131874C1 (ru) Фторотаксолы, промежуточные соединения, фармацевтическая композиция и способ лечения

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees