HU219456B

HU219456B - 6-Helyzetben szubsztituált szteroidok, eljárás előállításukra és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények

Info

Publication number: HU219456B
Application number: HU9400134A
Authority: HU
Inventors: Robert Bucourt; Alain Piasco; Claude Tchernatinsky
Original assignee: Laboratoire Theramex S.A.
Priority date: 1991-07-18
Filing date: 1992-07-17
Publication date: 2001-04-28
Also published as: FR2679236B1; AU2388492A; HU9400134D0; FI940223A0; FR2679236A1; JPH06509108A; WO1993002095A1; BR9206282A; AU691431B2; PL172502B1; EP0595990A1; OA09929A; KR100249554B1; TNSN92064A1; PL172677B1; AU6196696A; NO305961B1; NO940159L; HUT66021A; CA2113475A1

Abstract

A találmány új, 6-helyzetben szubsztituált (I) általános képletűvegyületekre – a képletben a szaggatott vonal adott esetben jelen lévőkettős kötésre utal; R1 jelentése 1–6 szénatomot tartalmazó alkil-,1–6 szénatomot tartalmazó alkoxi-, HO–CO–(CH2)1–6–CO–O–, 2– 5szénatomot tartalmazó alkanoil-oxi- vagy hidroxilcsoport; R’1jelentése hidrogénatom; vagy R1 és R’1 együtt oxocsoportot alkot; ésR2 jelentése hidrogénatom vagy 2–5 szénatomot tartalmazóalkanoilcsoport – vonatkozik. Ezek a vegyületek progesztomimetikushatásúak, és a szteroidok kémiájából jól ismert módszerekkelállíthatók elő. ŕ

Description

A találmány új, a 6-helyzetben szubsztituált szteroidokra, ezek előállítására, illetve ilyen vegyületet tartalmazó gyógyászati készítményekre vonatkozik.

Felismertük, hogy az (I) általános képletű 3-oxo19-nor-delta-4-pregnén- vagy -delta-4,6-pregnadiénszármazékok - a képletben a szaggatott vonal adott esetben jelen lévő kettős kötésre utal;

R| jelentése 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-,

1-6 szénatomot tartalmazó alkoxi-,

HO-CO-(CH₂)j_₆-CO-O-, 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoil-oxi- vagy hidroxilcsoport;

RJ jelentése hidrogénatom; vagy

R, és R’ j együtt oxocsoportot alkot; és

R₂ jelentése hidrogénatom vagy 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoilcsoport értékes gyógyhatásúak, közelebbről erős progesztomimetikus hatást mutatnak.

A fentiekben felsorolt vegyületek közül is külön kiemelhetjük a 6-(hidroxi-metil)-19-nor-pregna-4-énszármazékokat, amelyek különösen előnyös vegyületek és az (A) részképlettel - ebben a képletben a szaggatott vonal 6-7-helyzetekben esetleg jelen lévő kettős kötésre utal - jellemezhetők.

Kettős kötés hiányában a hidroxi-metil-csoport étvágy β-helyzetű lehet.

Végül a találmány szerinti új vegyületek közül specifikusan megemlíthetjük a következőkben felsorolt vegyületeket:

- 3,20-dioxo-6-formil-17a-acetoxi-19-nor-pregna4-én;

- 3,20-dioxo-6-(acetoxi-metil)-17a-acetoxi-19-norpregna-4,6-dién;

- 3,20-dioxo-6-(metoxi-metil)-17a-acetoxi-19-norpregna-4,6-dién;

- 3,20-dioxo-6-(hidroxi-metil)-17a-hidroxi-19-norpregna-4,6-dién és 17-helyzetű acetátja;

- 3,20-dioxo-6-formil-17a-acetoxi-19-nor-pregna4.6- dién;

- 3,20-dioxo-6-etil-17a-hidroxi- 19-nor-pregna-4,6dién és acetátja, és

- 3,20-dioxo-6-propil-17a-hidroxi-19-nor-pregna4.6- dién és acetátja.

A találmány szerinti vegyületek - miként említettük - értékes gyógyhatásúak, közelebbről erős progesztomimetikus hatásúak. így felhasználhatók többek között menopauzával kapcsolatos szindrómák, így például hőhullámok, bőrproblémák és keringési rendellenességek megelőzésére vagy kezelésére. Ebből a célból a találmány szerinti vegyületeket olyan gyógyászati készítményekké alakíthatjuk, amelyek felhasználhatók parenterálisan, digesztíven, rektálisan, bőrön át vagy perkután. Ezért ezeket a gyógyászati készítményeket elkészíthetjük például ampullákba, a beteg által alkalmazott fecskendőbe vagy többszörös dózist tartalmazó üvegbe kiszerelve; injektálható oldatok vagy szuszpenziók formájában; adott esetben bevonattal ellátott tabletták, cukorbevonatú pilulák, kapszulák, ostyás készítmények, porok, rektálisan beadható kúpok vagy kapszulák formájában; poláros oldószerrel perkután felhasználásra alkalmas oldatok vagy szuszpenziók; krémek, gélek vagy kenőcsök; és végül kúpok formájában.

Terápiás felhasználásuk során a találmány szerinti vegyületeket dózisegységenként 20 mg és 50 mg, előnyösen 5 mg és 25 mg közötti mennyiségekben alkalmazzuk. A napi dózis 5 mg és 200 mg közötti, a beadás módjától, illetve a kezelendő betegségtől függően.

A találmány tárgya továbbá eljárás az (I) általános képletű - a képletben a szaggatott vonal, R_b R’i és R₂jelentése a korábban megadott - vegyületek előállítására. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy egy

a) Rj helyén 1-6 szénatomos alkoxicsoportot és R’i helyén hidrogénatomot és a szaggatott vonal helyén egyszeres kötést hordozó (I) általános képletű vegyületek - a képletben R₂ jelentése a korábban megadott előállítására egy (II) részképletű - a képletben R₃ jelentése rövid szénláncú alkilcsoport-enol-étert Vilsmeier-Hack-típusú formilezőszerrel reagáltatunk, majd egy így kapott (III) részképletű - a képletben R₃jelentése a korábban megadott -, 6-formilezett származékot egy alkálifém vegyes hidridjével redukálunk, ezután egy így kapott megfelelő (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - 6-(hidroximetil)-származékot alkilezésnek, ezt követően pedig savas hidrolízisnek vetünk alá, és így egy (V) részképletű - a képletben R₄ jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport -, alkoxi-metilezett származékokat állítunk elő, vagy

b) RJ helyén hidrogénatomot és Rj helyén 1-6 szénatomos alkilcsoportot és a szaggatott vonal helyén kettős kötést hordozó - célvegyületek előállítására egy (III) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - formilezett származékot egy megfelelő, szerves alkil-fémsóval, például egy alkil-magnéziumhalogeniddel, alkil-cink-halogeniddel vagy alkil-kadmium-halogeniddel reagáltatunk, majd a kapott karbonilszármazékot vizes savas közegben kezeljük, és a kapott alkilidénszármazékot nemesfémet, előnyösen palládiumot használva izomerizáljuk, vagy

c) R₃ és RJ helyén együtt oxocsoportot és a szaggatott vonal helyén kettős kötést hordozó célvegyületek előállítására egy (III) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - formilezett származékot kínon típusú dehidrogénezőszer hatásának teszünk ki vízzel elegyedő közömbös oldószerben, vagy

d) A^{4 6}-pregnadién-származékok előállítására egy (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - enol-étert kínon típusú dehidrogénezőszer hatásának teszünk ki vízzel elegyedő közömbös oldószerben, és a fölös reagens elbontása után (A) részképletű, (I) általános képletű hidroxi-metilezett származékot kapunk, amit kívánt esetben alkilezünk egy alkilezőszerrel egy megfelelő alkoxi-metil-származék előállítása céljából, vagy pedig acilezünk egy alkán-karbonsav reakcióképes származékával egy megfelelő alkanoil-oxi-származék előállítása céljából, vagy

e) Rj jelentésében 1-6 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó A⁴-pregnén-származékok előállítására egy (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban

HU 219 456 Β megadott - enol-étert egy alkálifém-karbonáttal és egy di(l — 6 szénatomos alkil)-szulfáttal reagáltatunk, majd perhalogénsavval kezelünk.

A találmány szerinti eljárás gyakorlati végrehajtása során kinon-típusú dehidrogénezőszerként előnyösen dibróm-diciano-benzokinont, klór-anilt, diklór-naftokinont vagy diklór-diciano-benzokinont használunk.

A találmányt közelebbről a következő példákkal kívánjuk megvilágítani.

1. példa

17a-Acetoxi-3,20-dioxo-6-propil-l 9-nor-4,6-pregnadién előállítása

Nitrogéngáz-atmoszférában egy lombikba bemérünk 24 g (57,9 mmol) 17a,-acetoxi-3-etoxi-6-formil-20oxo-19-nor-3,5-pregnadiént és 240 ml tetrahidrofuránt, majd ezt követően keverés közben szobahőmérsékleten lassan beadagolunk 48 ml, tetrahidrofuránnal készült 25%-os etil-magnézium-klorid-oldatot (134,4 mmol). A beadagolást követően a keverést 1 órán át folytatjuk, majd hűtés közben 48 ml 5 N vizes sósavoldatot adagolunk. Ezután a reakcióelegyet 1 1 vízbe öntjük. Ekkor a termék kicsapódik. A terméket ezután metilén-kloriddal felvesszük, majd a kapott oldatot szárazra pároljuk. Az így 28 g mennyiségben kapott maradékot ezt követően szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 9,5:0,5 térfogatarányú elegyét használva. Metanolból végzett átkristályosítás után 2,3 g mennyiségben 17a-acetoxi-6-propilidén3,20-dioxo-19-nor-4-pregnént kapunk.

Ezt a terméket hozzáadjuk keverés közben 1,5 g 5 tömeg% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátor 220 ml metanollal készült, illetve visszafolyató hűtő alkalmazásával forrásban tartott szuszpenziójához. Az így kapott reakcióelegyet visszafolyató hűtő alkalmazásával további 2 órán át forraljuk, majd lehűtjük és szűrjük. A szűrletet szárazra pároljuk, majd az így kapott terméket szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, toluol és etil-acetát 95:5 térfogatarányú elegyével. Az ekkor 1,6 g mennyiségben kapott nyersterméket diizopropil-éterből átkristályosítjuk. így 0,9 g mennyiségben 161-162 °C olvadáspontú, fehér színű kristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk.

UV-spektrum (acetonitril) Xmax.: 285 nm ε=24 218

IR-spektrum (ΚβΓ): karbonil 1705,1648 cm-¹acetát 1727 cm^-1C=C 1614,1574 cm-¹ [Ή]-NMR-spektrum (CDC1₃,250 MHz): δ 0,70 (s, 3, CH₃-18)

0,908 (t, 3, CH₃-6-propil)

2,07 (s, 3, CH₃-acetát)

2,11 (s, 3, CH₃-2)

6,01 (s, 2, H₄ és H₇)

2. példa

17a-Acetoxi-3,20-dioxo-6-etil-19-nor-4,6-pregnadién előállítása

Nitrogéngáz-atmoszférában egy lombikba bemérünk 5 g (12,07 mmol) 17a-acetoxi-3-etoxi-6-formil20-oxo-19-nor-3,5-pregnadiént és 50 ml tetrahidrofuránt, majd az így kapott szuszpenzióhoz keverés közben szobahőmérsékleten hozzáadunk 5 ml, tetrahidrofuránnal készült, 3 mmol/ml koncentrációjú metil-magnézium-klorid-oldatot. 1 óra elteltével hűtés közben beadagolunk 15 ml 5 N vizes sósavoldatot, majd az így kapott elegyet 500 ml vízbe öntjük. A termék ekkor kicsapódik. Szűrés és vízzel való mosás után 4,5 g (97%) mennyiségű terméket kapunk. Ezt azután szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 90:10 térfogatarányú elegyét használva. Ezt követően 14-szeres térfogatú metanolból átkristályosítást végzünk. Ekkor 1,5 g mennyiségben 17a-acetoxi-6-etilidén-3,20-dioxo-19-nor-4-pregnént kapunk.

Az így kapott terméket keverés közben hozzáadjuk 1,2 g 5 tömeg% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátor 200 ml metanollal készült, előzetesen viszszafolyató hűtő alkalmazásával fonásba hozott szuszpenziójához. Az adagolást követően a visszafolyató hűtő alkalmazásával végzett forralást 45 percen át folytatjuk, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, szűrjük és szárazra pároljuk. A kapott maradékot szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként toluol és etil-acetát 90:10 térfogatarányú elegyét használva. így 1 g mennyiségben a kívánt terméket kapjuk, amelyet azután metanolból átkristályosítunk, 0,5 g mennyiségben krémfehér színű kristályokat kapva. Ezek olvadáspontja 154-156 °C (Kofler).

UV-spektrum (acetonitril) Xmax.: 284 nm ε=22 337

IR-spektrum (ΚβΓ): karbonilcsoportok

1705-1715,

1670 cm^-1 acetát 1739 cm-¹C=C 1614,1580 cm-¹ ['Hj-NMR-spektrum (CDC1₃,250 MHz): δ 0,71 (s, 3, CH₃-18)

1,08 (t, 3, CH₃-6-etil)

2,07 (s, 3, CH₃-acetát)

2,10 (s, 3, CH₃-21)

6,01 (s, 2H, H₄ és H₇)

3. példa

17a.-Acetoxi-6-formil-3,20-dioxo-19-nor-4,6-pregnadién előállítása

Nitrogéngáz-atmoszférában keverés közben 5 g 17a-acetoxi-3-etoxi-6-formil-20-oxo-19-nor-3,5-pregnadién 135 ml aceton és 7,1 ml víz elegyével készült oldatához hozzáadunk 2,8 g 2,3-diklór-5,6-diciano-p-benzokinont. Az adagolás befejeztével a reakcióelegy hőmérséklete 19 °C-ról 21 °C-ra emelkedik, illetve a reakcióelegy elszíneződik.

perc elteltével a reakcióelegyet víz és etil-acetát elegyével hígítjuk, majd N vizes nátrium-karbonát-oldattal és ezt követően vízzel addig mossuk, míg a pH semlegessé válik. Ezután a reakcióelegyet szárazra pároljuk, majd a kapott maradékot szilikagélen kromatográfiás tisztításnak vetjük alá, eluálószerként etil-acetátot használva. Az eluátum bepárlásakor kapott maradé3

HU 219 456 Β kot átkristályosításnak vetjük alá forró dietil-éterből, majd -18 °C-os dietil-éterből. Végül a kapott kristályokat dietil-éterrel mossuk. így 500 mg mennyiségben krémfehér színű terméket kapunk, amelynek olvadáspontja körülbelül 190-200 °C. 5

UV-spektrum (acetonitril) Xmax.: 272 nm ε=20 000

IR-spektrum (K$r): karbonilcsoportok

1711,1688,

1653 cm¹ 10 acetát 1733 cm-¹ [•HJ-NMR-spektrum (CDC1₃, 250 MHz): δ 0,70 (s, 3, CH₃-18)

2,00 (s, 3, CH₃-acetát)

2,06 (s, 3, CH₃-21) 15

7,01 (d, 1, H₄ és H₇)

7,12 (d, 1, H₄ és H₇)

9,59 (s, 1, aldehid)

4. példa

17a-Acetoxi-6-(hidroxi-metil)-3,20-dioxo-l 9-nor4,6-pregnadién (B) és 17a.-hidroxi-6-(hidroxi-metil)3,20-dioxo-19-nor-4,6-pregnadién (C) előállítása

Nitrogéngáz-atmoszférában mágneses keverővei ellátott, 2 literes háromnyakú lombikba bemérünk 20 g 17a-acetoxi-3-etoxi-6-(hidroxi-metil)-20-oxo-19-nor3,5-pregnadiént, 200 ml (20 térfogat) acetont, 40 ml (2 térfogat) vizet és 18,2 g (0,93 p) 2,3-diklór-5,6-diciano-p-benzokinont. Az ekkor végbemenő reakciót vékonyréteg-kromatográfiásan követjük. A reakció 45 percen belül teljes. A kicsapást 1 1 víz adagolása útján végezzük. Ekkor csapadékkiválás észlelhető. A csapadékot kiszűrjük. Az anyalúgot 500-500 ml diklórmetánnal kétszer extraháljuk. A szerves fázisokat vízzel semleges pH-értékig mossuk. Ekkor 7,8 g (41,9%) mennyiségben barna színű olajat kapunk.

A termék tisztítását szilikagélen végezzük. Ekkor először 5,5 g mennyiségben egy első termék [(B) és 1,2 g mennyiségben egy második termék (C)] különül el.

A (B) terméket metanolból átkristályosítjuk. Ekkor 3 g mennyiségben a 202,4 °C olvadáspontú 17a-acetoxi-6-(hidroxi-metil)-3,20-dioxi-19-nor-4,6-pregnadiént kapjuk.

H4 H7

NMR-spektrum:

S 6,37 ppm. 1 proton S 6,01 ppm. 1 proton 6-hidroxi-metil S 4,34 ppm. 2 proton

H C21 S 2,10 ppm. 3 proton acetát S 2,07 ppm. 3 proton H-0 S 1,63 ppm. 1 proton H C18 S 0,73 ppm. 3 proton A (C) terméket is metanolból kristályosítjuk, amikor 0,3 g mennyiségben a 251 °C olvadáspontú (Metler) 17a-hidroxi-6-(hidroxi-metil)-3,20-dioxo-4,6-pregnadiént kapjuk.

NMR-spektrum: H4 S 6,38 ppm. 1 proton

H7 S 6,01 ppm. 1 proton

6-hidroxi-metil S 4,33 ppm. 2 proton

H C21 S 2,3 ppm. 3 proton H-0 6 S 1,63 ppm. 1 proton H C18 S 0,81 ppm. 3 proton

5. példa

17a.-Acetoxi-6-(acetoxi-metil)-3,20-dioxo-19-nor4,6-pregnadién előállítása

Mágneses keverővei és hűtővel felszerelt, 100 ml-es háromnyakú lombikba egymás után bemérünk a 4. példa szerinti (B) termékből 1 g-ot, 20 ml piridint (20 térfogat) és 2 ml ecetsavanhidridet (2 térfogat), majd az így kapott oldatot 60 °C-on 35 percen át melegítjük. Ezt követően vízből és jégből álló fürdővel végrehajtott hűtés útján a terméket kicsapjuk. A kivált terméket kiszűrjük, majd szilikagélen tisztításnak vetjük alá, amikor 0,7 g mennyiségben fehér színű anyagként a cím szerinti vegyületet kapjuk.

NMR-spektrum:	H4 H7	S 6,32 ppm. 1 proton S 6,01 ppm. 1 proton
6-acetil-metil	S	4,72	ppm. 2 proton
HC21	s	2,11	(CH₂ protonja) ppm. 3 proton
acetoxicsoportok metilcsoportja	s	2,07	ppm. 6 proton
HC18	s	0,72	(17a- és 6-acetoxi) ppm. 3 proton

6. példa

17<x-Acetoxi-6-(hidroxi-metil)-3,20-dioxo-19-nor4,6-pregnadién-hemiszukcinát előállítása

Mágneses keverővei és hűtővel ellátott 100 ml-es háromnyakú lombikba bemérünk a 4. példa szerinti (B) termékből 1 g-ot, 20 ml piridint (20 térfogat) és 0,6 g borostyánkősavanhidridet, majd az így kapott oldatot 60 °C-on tartjuk 4 órán át. Ezt követően a fölös anhidridet víz adagolása útján elbontjuk. A reakcióelegyet toluollal extraháljuk, majd az extraktumot vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A kapott terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás tisztításnak vetjük alá, amikor 0,25 g mennyiségben fehér anyagként a cím szerinti vegyületet kapjuk.

NMR-spektrum: H4	S	6,38	ppm. 1 proton
H7	S	6,01	ppm. 1 proton
6-helyzetben 2-
metilén-proton	S	4,75	ppm. 2 proton
6-helyzetben 4-he-
miszukcinát-proton	S	2,66	ppm. 4 proton
HC21	S	2,11	ppm. 3 proton
Me 17a-acetoxi S	2,02	ppm. 3 proton
HC18	s	0,72	ppm. 3 proton

7. példa

17a.-Hidroxi-6-(etoxi-metil)-3,20-dioxo-19-norpregna-4-én [(V) részképletű vegyület] előállítása

A) lépés: 3-Etoxi-6-formil-17a-hidroxi-20-oxo-19nor-pregna-3,5-dién [(III) részképletű vegyület]

Formilezőreagenst készítünk úgy, hogy nitrogéngázatmoszférában 2 °C hőmérsékleten 3,15 ml frissen desztillált foszfor-oxid-trikloridot cseppenként feloldunk 28 ml dimetil-formamidban, majd az oldatot 5 percen át keveijük. Az így kapott oldatot cseppenként 10-15 perc leforgása alatt hozzáadjuk 7 g 3-etoxi-17a-hidroxi-20oxo-19-nor-pregna-3,5-dién [(II) részképletű vegyület] 15 ml dimetil-formamiddal készült oldatához.

HU 219 456 Β

A reakcióelegyet 10 percen át keverjük, majd 14 g kálium-acetát 28 ml vízzel készült oldatának cseppenkénti adagolásával hidrolizáljuk, miközben a hőmérsékletet 30 °C alatt tartjuk. Az oldat kezdetben piros színű, majd sárgára változik, amint a kristályosodás elkezdődik. 30 perces keverés után 105 ml jeges vizet adagolunk. így 7,2 g nyers 3-etoxi-6-formil-17a-hidroxi-20oxo-19-nor-pregna-3,5-dién [(III) részvegyület] csapódik ki. Ezt etanolból átkristályosítva 3,1 g tiszta terméket kapunk, melynek elemzési adatai a következők.

IR-spektrum: 1700 (20-helyzetű karbonilcsoport)

1650 és 1615 (A³~⁵)

UV-spektrum: Zmax. 220 és 320 nm.

B) lépés·. 3-Etoxi-6-(hidroxi-metil)-17a-hidroxi-20oxo-19-nor-pregna-3,5-dién [(IV) részképletű vegyület]

1,9 g 3-etoxi-6-formil-17a-hidroxi-20-oxo-19-norpregna-3,5-diént [(III) részképletű vegyület] feloldunk 20 ml metanol és 120 mg kálium-bór-hidrid elegyében. A keveréket 45 percen át 5 °C hőmérsékleten keveijük, majd 20 ml vizes ecetsavat adunk hozzá. A kivált terméket elválasztása után szárítjuk, 1,4 g 3-etoxi-6-(hidroximetil)-17 a-hidroxi-20-oxo-19-nor-pregna-3,5 -diént [(IV) részképletű vegyület] kapva. A termék elemzési adatai a következők:

IR-spektrum: 1700 cm-¹ (20-helyzetű karbonilcsoport);

1620,1595 cm-> (C=C kötés)

UV-spektrum: Xmax. 230 nm.

C) lépés: 17a-Hidroxi-6-(etoxi-metil)-3,20-dioxo19-nor-pregna-4-én [(V) részképletű vegyület] g 3-etoxi-6-(hidroxi-metil)-17a-hidroxi-20-oxo-19pregna-3,5-diént [(IV) részképletű vegyület] feloldunk 30 ml metilén-kloridban, majd a kapott oldatban 0,5 g kálium-karbonátot szuszpendálunk. A szuszpenzióhoz intenzív keverés közben cseppenként hozzáadjuk dietilszulfát metilén-kloriddal készült oldatát. A reakcióelegyet erőteljesen keveijük 4 órán keresztül. Ezután a reagens fölöslegét 20 ml híg vizes nátrium-hidroxid-oldattal elimináljuk. A kicsapódott etilátszármazékot kiszűijük, vízzel mossuk és szárítjuk. Metanolból végzett átkristályosítás után 0,3 g mennyiségben 3-etoxi-6-(etoxi-metil)17a-hidroxi-20-oxo-19-nor-pregna-3,5-diént kapunk.

Ezt a vegyületet ezután 15 ml etanolban feloldjuk, majd a kapott oldathoz 0,2 ml perklórsavat adunk. A keveréket 30 percen át hidegben keveijük, majd telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal hígítjuk. Semlegessé válása után az elegyet szüljük. Ezután az etanolos oldatot szárazra pároljuk, és a 17a-hidroxi-6-(etoxi-metil)-3,20-dioxo-19-nor-pregna-4-ént [(V) részképletű vegyület] elkülönítjük, majd ciklohexánból átkristályosítjuk. 0,5 g tiszta 17a-hidroxi-6-(etoxi-metil)-3,20-dioxo19-nor-pregna-4-ént [(V) részképletű vegyület] kapunk.

A termék elemzési adatai a következők:

IR-spektrum: 1700 cm-¹ (20-helyzetű karbonilcsoport)

1690 cm-¹ (3-helyzetű karbonilcsoport)

1620 cm-* (C=C. kötés 4-5helyzetben)

UV-spektrum: Xmax. 243 nm.

Összehasonlító farmakológiai példa

Perkután úton beadott TX 066, TX 218 és TX 219 progeszteronhoz viszonyított pszeudogesztagén hatása (Clauberg McPhail próba)

1. Bevezetés

A TX 218 (17a-acetoxi-6-formil-3,20-dioxo-19nor-pregna-4,6-dién) és a TX 219 (17a-acetoxi-6-hidroxi-metil-3,20-dioxo-19-nor-pregna-4,6-dién) a TX 066 (17a-acetoxi-6-metil-3,20-dioxo-19-nor-pregna4,6-dién) 6-os helyzetben módosított két származéka. A TX 066 farmakológiai profiljával foglalkozik a következő cikk: Paris, J., Thevenot, R., Bonnet, P. és Granero, M.: „The pharmaceutical profile of TX 066 (17aacetoxy-6-methyl-19-nor-4,6-pregna-diene-3,20-dione), a new órai progestative”, Arzneim Forsch/Drug Rés. 33, 710-715 (1983).

A TX 218 a TX 066-nak olyan származéka, melyben a 6-metilcsoportot 6-formilcsoport helyettesíti.

A TX 219, amely a TX 218-szintézis intermediereként használható, a 6-os helyzetben hidroximetil-csoportot tartalmaz a TX 066 6-metilcsoportja helyett. A TX 219 valószínűleg a TX 066 fő metabolitja.

A fenti hatóanyagokat szubkután (SC) ivaréretlen nyulaknak adtuk be és SC beadott progeszteronnal szemben végeztünk méhnyálkahártya-indukciós tesztet Clauberg és McPhail módszere szerint. [CLAUBERG, C.: „Zűr Physiologie und Pathologie dér Sexual-Hormone insbesondere des Hormons des Corpus I. Dér biologische Test fúr das Lutheohormon an infantilen Kaninchen”, Zentralbl Gynákol. 54, 2757-2770 (1930); McPHAIL, Μ. K..: The assay of progestin”, J. Physiol. 83, 145-156 (1934)].

2. Anyagok és eljárások

2.1. A módszer alapja

A nyulak ösztradiol-benzoátot (EB2) kaptak 5 pg/nyúl/nap dózisban 6 napon keresztül ^alapkezelés”), majd SC progeszteron kezelésben részesültek (progeszteron, TX 066, TX 218 vagy TX 219), nyulanként az összdózist megadva.

A mikroszkópos értékelést sztereomikroszkóp alatt végeztük a McPhail-index alkalmazásával (0-4). A 0 érték az aktivitás teljes hiányát, a 4 érték a maximális választ jelzi.

2.2. Használt hatóanyagok és segédanyagok

- Ösztradiol-benzoát (EB2) - a Roussel Uclaf cég gyártmánya

- Progeszteron - a Sigma cég gyártmánya

- TX 066 - a THERAMEX cég gyártmánya

- TX 218 - a THERAMEX cég gyártmánya

- TX 219 - a THERAMEX cég gyártmánya

- olívaolaj

2.3. Kísérleti csoportok

A kísérlet kezdetén körülbelül 1,6 kg-os ivaréretlen nőstény nyulakat [az Elevage Scientifique des Dombes (=dombes-i tudományos tenyészet), ROMANS 01400 Chatillon sur Chalaronne francia cégtől szerezhetők be] 16 csoportra osztottuk:

1. csoport: „abszolút összehasonlító csoport” „alapkezelés” és progesztatív kezelés nélkül

HU 219 456 Β

3. csoport	progeszteron	SC
4. csoport	progeszteron	SC
5. csoport	progeszteron	SC
6. csoport	TX066	SC
7. csoport	TX066	SC
8. csoport	TX066	SC
9. csoport	TX218	SC
10. csoport	TX218	SC
11, csoport	TX218	SC
12. csoport	TX218	SC
13. csoport	TX219	SC
14. csoport	TX219	SC
15. csoport	TX219	SC
16. csoport	TX219	SC

2. csoport: EB2-vel kezelt összehasonlító csoport „alapkezelés”-sel, de progesztatív kezelés nélkül (a 3-16. csoport mind kapott ,,alapkezelés”-t)

0,4 mg/nyúl/5 nap 1 mg/nyúl/5 nap 5 mg/nyúl/5 nap 0,0125 mg/nyúl/5 nap 0,05 mg/nyúl/5 nap 0,125 mg/nyúl/5 nap 0,0125 mg/nyúl/5 nap 10

0,05 mg/nyúl/5 nap 0,125 mg/nyúl/5 nap

1,25 mg/nyúl/5 nap 0,0125 mg/nyúl/5 nap 0,05 mg/nyúl/5 nap 15

0,125 mg/nyúl/5 nap

1,25 mg/nyúl/5 nap

2.4. Paraméterek és statisztikai analízis A nyulak tömegét lemértük az „alapkezelés” kezdetén (Dl), a progeszteronkezelés második napján (D8) 20 és az elaltatásuk után (D12).

A méhkürtöt eltávolítottuk, tömegét lemértük, és „Bouin-folyadékban” [SEIFERT, P., SPITZNAS, M.: „Vasoactive intestinal polypeptide (VIP) innervation of the humán eyelid glands”, Experimental eye search, 68, 25 685-692 (1999)] fixáltuk. Minden méhkürtből kimetszettünk egy 5 pm-es központi szegmenst, és eozinnal megfestettük.

A testsúly, a méhkürt súlya és a méhnyálkahártya hámszövetének PcPhail szerinti mikroszkópos értékeié- 30 se a következőkben ismertetett, paraméteres típusú statisztikai tanulmány tárgya.

Ez a paraméteres tanulmány a következőket tartalmazza:

- a csoportátlagok többszörös összehasonlítását az 35 összes paraméter vonatkozásában, Statgraphics (Software Technology Support Center, azaz az STSC Inc. cégtől)

- regressziós tanulmányt és relatív hatékonysági tanulmányt a méhkürt tömegére és a McPhail-indexre. 40

3. Eredmények

Az 1. és 2. ábra minden értéket tartalmaz.

A nőstény nyulak testsúlya (Dl, D8 és D12) nem mutat jelentős heterogenitást a többszörös összehasonlításokban. A méhkürt tömege jelentősen megnöveke- 45 dett az EB2 összehasonlító anyag használatához képest a progeszteron 3 dózisa esetében (0,4-1 és 4 mg/nyúl/5 nap), a TX 066 két legmagasabb dózisa esetében (50 és 125 pg/nyúl/5 nap) és a TX 218 legnagyobb dózisa esetében (1,25 mg/nyúl/5 nap). A TX 50 219 viszont nincs hatással a méhkürt tömegére az adott dózistartományban.

A méhkürt tömege lineárisan növekszik a dózissal a többi három progesztatív kezelés esetében.

A McPhail-indexek átlagait a 2. ábra mutatja. 55

4. Értékelés

A tanulmányban progesztatív standardként SC adott progeszteron DE₅₀-értéke 1,44 mg/nyúl/5 nap.

A TX 066 szubkután beadva erős pszeudogesztagén hatást mutat az alkalmazott két legnagyobb dózisban. 60

A TX 066 körülbelül 30-szor aktívabb az ugyanolyan módon adott progeszteronnál a jelen tanulmányban alkalmazott dózisokban, továbbá szubkután beadva kétszer olyan hatékony, mint orálisan beadva.

A TX 218, amely TX 066-származékok szintézisében intermedier, jelentős pszeudogesztagén aktivitással bír a legnagyobb alkalmazott dózisban (1,25 mg/nyúl/5 nap). Ez az aktivitás közelítőleg megegyezik a SC beadott progeszteronéval. Pontosabban: a progeszteron indexe l,37±0,43 az 1 mg/nyúl/5 nap dózis esetén, míg a TX 066 indexe l,25±0,32 az

1,25 mg/nyúl/5 nap dózis esetén. A TX 218 nem rendelkezik pszeudogesztagén hatással szubkután beadva abban a dózistartományban, melyben a TX 066-t szubkután beadtuk (12,5 pg-125 pg/nyúl/5 nap).

A TX 219, mely valószínűleg a TX 066 fő metabolitja, nem mutat pszeudogesztagén hatást SC úton beadva.

5. Összefoglalás

A TX 066 SC úton beadva erős pszeudogesztagén hatást mutat, a DE₅₀=46 pg/nyúl/5 nap. A TX 066 31-szer aktívabb az ugyanilyen úton beadott progeszteronnál, és kétszer aktívabb SC beadva, mint orálisan beadva.

A TX 218 pszeudogesztagén aktivitást mutat 12,5 mg/nyúl/5 nap dózisban.

A TX 219, amely feltehetően a TX 066 fő metabolitja, egyáltalán nem mutat pszeudogesztagén aktivitást, legalábbis 1,25 mg/nyúl/5 nap dózisig.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. (I) általános képletű 3-oxo-19-nor-delta-4-pregnén- vagy -delta-4,6-pregnadién-származékok - a képletben a szaggatott vonal adott esetben jelen lévő kettős kötésre utal;

R, jelentése 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-,

1-6 szénatomot tartalmazó alkoxi-,

HO-CO-(CH₂)₁₆-CO-O-, 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoil-oxi- vagy hidroxilcsoport;

R’j jelentése hidrogénatom; vagy

Rj és R’j együtt oxocsoportot alkot; és

R₂ jelentése hidrogénatom vagy 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoilcsoport.
2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek közül a következő vegyületek:

- 3,20-dioxo-6-formil-17a-acetoxi-19-nor-pregna-4-én;

- 3,20-dioxo-6-(acetoxi-metil)-17a-acetoxi-19-norpregna-4,6-dién;

- 3,20-dioxo-6-(metoxi-metil)-17a-acetoxi-19-norpregna-4,6-dién;

- 3,20-dioxo-6-(hidroxi-metil)-17a-hidroxi-19-norpregna-4,6-dién és 17-helyzetű acetátja;

- 3,20-dioxo-6-formil-17α-acetoxi-19-nor-pregna4.6- dién;

- 3,20-dioxo-6-etil-17a-hidroxi-19-nor-pregna-4,6dién és acetátja; és

- 3,20-dioxo-6-propil-17a-hidroxi-19-nor-pregna4.6- dién és acetátja.

HU 219 456 Β
3. Gyógyászati készítmény, amely hatóanyagként legalább egy (I) általános képletű vegyületet - a képletben a szaggatott vonal adott esetben jelen lévő kettős kötésre utal;

Rj jelentése 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-,

1-6 szénatomot tartalmazó alkoxi-,

HO-CO-(CH₂)j~₆-CO-O-, 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoil-oxi- vagy hidroxilcsoport;

R’j jelentése hidrogénatom; vagy

Rj és R’j együtt oxocsoportot alkot; és

R₂ jelentése hidrogénatom vagy 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoilcsoport tartalmaz, a gyógyszergyártásban szokásosan használt hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal együtt.
4. A 3. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely dózisegységenként 1-50 mg hatóanyagot tartalmaz.
5. A 4. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely dózisegységenként 5-25 mg hatóanyagot tartalmaz.
6. Eljárás az (I) általános képletű 3-oxo-19-nor-delta-4-pregnén- vagy -delta-4,6-pregnadién-származékok - a képletben a szaggatott vonal adott esetben jelen lévő kettős kötésre utal;

Rj jelentése 1-6 szénatomot tartalmazó alkil-,

1-6 szénatomot tartalmazó alkoxi-,

HO-CO-(CH₂)j ₆-CO-O-, 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoil-oxi- vagy hidroxilcsoport;

R’j jelentése hidrogénatom; vagy

Rj és R’j együtt oxocsoportot alkot; és

R₂ jelentése hidrogénatom vagy 2-5 szénatomot tartalmazó alkanoilcsoport előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) Rj helyén 1-6 szénatomos alkoxicsoportot és

R’j helyén hidrogénatomot és a szaggatott vonal helyén egyszeres kötést hordozó (I) általános képletű vegyületek - a képletben R₂ jelentése a korábban megadott előállítására egy (II) részképletű - a képletben R₃ jelentése rövid szénláncú alkilcsoport - enol-étert Vilsmeier-Hack-típusú formilezőszerrel reagáltatunk, majd egy így kapott (III) részképletű - a képletben R₃jelentése a korábban megadott -, 6-formilezett származékot egy alkálifém vegyes hidridjével redukálunk, ezután egy így kapott megfelelő (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - 6-(hidroximetil)-származékot alkilezésnek, ezt követően pedig savas hidrolízisnek vetünk alá, és így egy (V) részképletű - a képletben R4 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport -, alkoxi-metilezett származékokat állítunk elő, vagy

b) R’j helyén hidrogénatomot és Rj helyén 1-6 szénatomos alkilcsoportot és a szaggatott vonal helyén kettős kötést hordozó célvegyületek előállítására egy (III) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - formilezett származékot egy megfelelő szerves alkil-fémsóval, előnyösen egy alkil-magnézium-halogeniddel, alkil-cink-halogeniddel vagy alkilkadmium-halogeniddel reagáltatunk, majd a kapott karbonilszármazékot vizes savas közegben kezeljük, és a kapott alkilidénszármazékot nemesfémet, előnyösen palládiumot használva izomerizáljuk, vagy

c) Rj és R’j helyén együtt oxocsoportot és a szaggatott vonal helyén kettős kötést hordozó célvegyületek előállítására egy (III) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - formilezett származékot kínon típusú dehidrogénezőszer hatásának teszünk ki vízzel elegyedő közömbös oldószerben, vagy

d) A^{4 6}-pregnadién-származékok előállítására egy (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - enol-étert kínon típusú dehidrogénezőszer hatásának teszünk ki vízzel elegyedő közömbös oldószerben, és a fölös reagens elbontása után (A) részképletű, (I) általános képletű hidroxi-metilezett származékot kapunk, amit kívánt esetben alkilezünk egy alkilezőszerrel egy megfelelő alkoxi-metil-származék előállítása céljából, vagy pedig acilezünk egy alkán-karbonsav reakcióképes származékával egy megfelelő alkanoil-oxi-származék előállítása céljából, vagy

e) Rj jelentésében 1-6 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó A⁴-pregnén-származékok előállítására egy (IV) részképletű - a képletben R₃ jelentése a korábban megadott - enol-étert egy alkálifém-karbonáttal és egy di(l - 6 szénatomos alkil)-szulfáttal reagáltatunk, majd perhalogénsavval kezelünk.