HU190141B - New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids - Google Patents
New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids Download PDFInfo
- Publication number
- HU190141B HU190141B HU832817A HU281783A HU190141B HU 190141 B HU190141 B HU 190141B HU 832817 A HU832817 A HU 832817A HU 281783 A HU281783 A HU 281783A HU 190141 B HU190141 B HU 190141B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- strain
- claviceps fusiformis
- medium
- claviceps
- fusiformis
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
- C12P17/183—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing an indolo[4,3-F,G]quinoleine nucleus, e.g. compound containing the lysergic acid nucleus as well as the dimeric ergot nucleus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
A találmány tárgya új eljárás az I általános képletű klavin-típusú anyarozsalkaloidok fermentativ úton való előállítására új Claviceps fusiformis variáns törzs alkalmazásával.
Az I általános képletben R hidroxi-metilcsoportot (elimoklavin) vagy metilcsoportot (agroklavin) jelent.
Az előállított alkaloidok közül az elimoklavin az értékesebb, mely analeptikus és antiparkinzon hatású, valamint gátolja a prolak tin szekréciót [B. Berde és O.Schild: Ergol Alkaloida and Related Compounds; Handb. Exp. Pharm., 49. Spriger Verlag, Berlin (1978) ] Az elimoklavin továbbá a lizergol, valamint az ebből előállítható Nicergolin kiindulási anyaga illetve intermedierje is.
Ismeretes, hogy a növényparazita Claviceps gombák gazdanövényükkel szimbiózisban anyarozsalkoloidok bioszintézisére képesek. A klavln alkaloidokat termelő Claviceps törzsekről korán ismert volt, hogy a jellemző alkaloidokat fermentativ úton is termelik fM. Abe, és munkatársai: J. Agric. Chem. Soc. (Japán) 25, 458 (1952) ]. Noha ez nem bírt ipari jelentőséggel, az alapváz bioszintézisének kutatásához sokáig megfelelő bázist jelentett [L.C. Vining és társai: Can. J. Microbiol. 12, 915 (1966); H.G.Floss: Telrahedron 32, 873, 1976].
Az első ipari eljárást G.T.Banks és munkatársai dolgozták ki [J.Gén.Microbiol. 82, 345 (1974)]. Eljárásukban egy Pepniaetum typholdeum szklerociuméból izolált, majd szelekcióval javított Claviceps fusiformis tőrzszsel agroklavint állítottak eló.
Ezt követően Z.Rehacek állított elő új Claviceps purpurea mutánsokat. Az egyik mutáns zömében agroklavint termelő törzs volt. Két további mutáns zömében elimoklavint termelt néhány száz pg/ml összalkaloid szinttel [78.02516 és 78.02517 számon közzétett csehszlovák szabadalmi bejelentések, illetve J.Nat.Prod. 44, 225 (1981) 1.
A 735 010 számú szovjet szabadalmi leírás, illetve a Prikl. Biok. Mikrobiol 16, 569 (1980) egy, a természetben előforduló Claviceps fusiformis törzs alkalmazását ismerteti. Fermentációban a törzs jellemzően klavin-alkaloid termelő, és 6 különféle alkaloidot termel. Az össz-alkaloid szint 1220 ug/ml, s ezen belül megfelelően megválasztott táptalaj alkalmazása esetén 70-75% az elimoklavin mennyisége.
S.H.Ambike és munkatársai [Phytochem. 9, 1953-58 (1970)] azt találták, hogy a klaνίη-alkaloidokat termelő Claviceps purpurea törzsek citokrom Ρ-450-et tartalmaznak. Megfigyelték továbbá, hogy fenilbarbiturát adalékanyaggal növelni lehet a citokrom P-450 mennyiséget, és ezzel párhuzamosan növekszik a termelt összalkaloid mennyisége is.
Kísérleteink során célunk volt, hogy nagy össz-alkaloid szintet biztosító, termelésre képes törzset tenyészünk ki, mely az össz-alkaloid mennyiségen belül lehetőleg főként elimoklavint termel, esetleg attól könynyen elválasztható egyéb alkaloid (ok) mellett.
Kiindulási törzsként egy olyan Claviceps fusiformis törzset választottunk, mely glicerin-pepton táptalajon főként agroklavint, és mellékalkaloidként elimoklavint termelt [A. Tonolo, és É. Udvardy-Nagy: Acta.Microbiol.Acad. Sci. Hung. 15, 29, (1968) ]. A törzset az OKI-nál 1977. május 2-án MNG 00164 számon deponáltuk.
A kiindulási Claviceps fusiformis törzs hasonlóan az Ambike által alkalmazott Claviceps purpurea törzshöz - tartalmaz alternáló oxidáz enzimei, nevezetesen citokrom P-450et és a termelt összalkaloid-mennyiBég barbiturátokkal növelhető.
Azt találtuk továbbá, hogy a barbiturát jelenlétében növesztett tenyészet telepmorfológiája, pigmentáltsága lényegesen eltér a kiindulási törzsétől. A szelekció ismétlésével ezen új morfológiai tulajdonságok oly mértékig stabilizálódlak, hogy azok a szelektált törzset az adalék jelenléte nélkül is jellemezték. Az új törzs - adalékmenles táptalajon a kiindulási kultúrához képest magasabb citokróm P-450 tartalmat ért eL
Az új törzs növekedése visszafogottabb, poliszaharid-képzése kisebb mérvű, alkaloidée pigment termelése viszont fokozottabb, mint a kiindulási törzsé. Teljesen meglepő, hogy mig az anyatörzs főként agroklavint, addig az új variáns törzs főként elimoklavint termel. Az elimoklavin az agroklavintól egyszerűen elválasztható (pl. a 171 659 sz. magyar szabadalmi leírás szerint).
Az új törzset az OKI-nál 1981. október 15-én MNG 00211 számon helyeztük letétbe.
A találmány tárgya egyrészt új eljárás az I általános képletű klavin-típusú anyarozsalkaloidok - ahol R metil-, vagy hidroxi-metil csoportot jelent - előállítására Claviceps fusiformis törzzsel szén- és nitrogénforrást, ásványi eókat, valamint adott esetben egyéb adalékanyagokat tartalmazó folyékony táptalajon, alámerülő kultúrában, aerob körülmények között végzett fermentáció útján, oly módon, hogy termelő törzsként az MNG 00211-számon letétbe helyezett Claviceps fusiformis variáns törzset alkalmazunk.
A találmány tárgya továbbá eljárás az MNG 00211 számon deponált új Claviceps fusiformis variáns törzs előállítására és fenntartására, oly módon, hogy az MNG 00164 számon deponált Claviceps fusiformis kiindulási törzset szén- és nitrogénforrást, valamint ásványi sókat tartalmazó agar-tartalmú szilárd táptalajon, és a táptalajon 1 literére számított 1-10 mmól mennyiségű barbituráttípusú adalékanyag jelenlétében 20-28 ’C hőmérsékleten 7-21 napig inkubáljuk, és a kapott, a kiindulási törzstől lilás színük és laposan elterülő alakjuk alapján jól megkülönböztethető telepeket szelektáljuk, és a szelekciót adott esetben barbiturát jelenlétében, vagy anélkül ismételjük, ós a kapott új variáns törzset, mely legalább 85%-ban elimoklavint termel, elkülönítjük.
A találmány szerinti eljárás értelmében a kiindulási MNG 00164 számon deponált törzset valamely agar-tartalmü szilárd táptalajon tenyésztjük.
A célra alkalmas táptalaj-összetételek egyebek mellett a kővetkezők:
„A - táptalaj:
| Szacharóz | 100.0 | g |
| 1-aszparagin | 10.0 | g |
| kalcium-nitrát | 1.0 | g |
| kálium-dihidrogén-foszfát | 0.25 | g |
| magnézium-szulfát | 0.25 | g |
| kálium-klorid | 0.125 | g |
| vas(II)-szulfát | 0.033 | g |
| cinkszulfát | 0.027 | g |
| 1-cisztein-hidroklorid | 0.010 | g |
| élesztőkivonat (Difco) | 0.100 | g |
| agar-agar (Difco) | 30.0 | g |
| pH 5,2 (NaOH-val állítva). |
A felsorolt összetevőket 50-60 ’C-on csapvízben 1 literre oldjuk, majd az oldatot
110 ’C-on 30 percig sterllezzük. A kapott táptalajt lehűtve az megszilárdul.
„B” - táptalaj:
g burgonya-glükóz agárból (Difco) az „A”-táp talaj hoz hasonlóan 1 liter táptalajt főzünk.
„C” - táptalaj:
Szacharóz 100.0 g borostyánkősav 10.0 g
| kalcium-nitrát | 1.0 | g |
| ammónium-nitrát | 1.0 | g |
| kálium-dihidrogén-foszfát | 0.25 | g |
| magnézium-BZulfát | 0.25 | g |
| kálium-klorid | 0.125 | g |
| vas(II)-8zulfát | 0.009 | g |
| cinkszulfát | 0.003 | g |
| agar-agar (Difco) pH 5,5-5,6 (ΝΗιΟΗ-dal állítva). | 30.0 | g |
A felsorolt összetevőkből az „A-táptalajhoz hasonlóan 1 liter táptalajt főzünk.
„D - táptalaj:
Glicerin 100 g pepton (Difco) 20 g agar-agar (Difco) 30 g
A komponenseket 50-60 ’C-on 1 liter csapvízben oldjuk, az oldat pH-ját 6,5-6,8-ra állítjuk, majd 110 ’C-on 30 percig sterilezzük.
A felsorolt táptalajok valamelyikén steril, aerob kürölmónyek között 20-28 ’C hőmérsékleten, 1 liter táptalajra számított 0,510 mmól mennyiségben adagolt, a citokróm P450 képződést elősegítő barbiturát-típusú adalékanyag jelenlétében végezzük a tenyésztést. Barbiturát-típusú adalékként elsősorban N-fenil-barbiturátok, így fenobarbitál vagy metilfenobarbitál továbbá hexobarbitál jöhet számításba. A tenyésztést általában 7-21 napon ét végezzük, majd az új törzs telepeit elkülönítjük.
Az alábbi táblázatban felsoroljuk a kiindulási kultúrát és az új törzset megkülönböztető főbb morfológiai és biokémiai jellemzőket:
| Morfológiai jelleg telepmorfológia | MNG 00164 | MNG 00211 |
| C-jelű, agarral szilárdított tápláljon a 21. napon (2. és 3.. ábra) | 10-15 mm-es dúsan redözótt éles szélű drappos szinű telep (2. ábra) | 15-20 mm-es lapos, légmicéliumos, éles szélű, lilás színű telep (3. ábra) |
| Szubmerz tenyészetben C-jelű táptalajon a 12. napon: a) mikroszkópos megjelenés | drappos színű, vattás viszkózus tenyészet | barnás-lila színű laza, pelyhes tenyészet |
| b) mikroszkópos kép | 12-15 μ hosszú és 3-6 μ vastag sejtek hosszú, gyakran fonatokat képző hifák | 6-10 μ hosszú és 3-6 μ vastag sejtek hosszú, gyakran fonatokat képző hifák |
| Biokémiai jelleg Fenobarbital tolerancia: a) agar táptalajon b) folyékony táptalajon | 1 m mól/liter 0.6 mmól/liter | 10 mmól/liter 5 mmól/liter |
| Citokróm P-450 tartalom C-jelű táptalajon 4-7. napon nmól/g száraz sejttömeg | 1.0-1.5 | 2.5-3.0 |
Poliezacharid képzés
C-jelű táptalajon a 7. napon etanolos csapadék - képzés alapján- mg/ml 20.8 3.8
| Öeszalkaloid termelés sebessége C-jelű táptalajon a 4-7. napon, pg/ml/nap | 50-80 | 200-250 |
| Alkaloid összetétel | ||
| C-jelű táptalajon | ||
| agroklavin % | 75-80 | 5-15 |
| elimoklavin % | 20-25 | 85-95 |
| D-jelű táptalajon | ||
| agroklavin % | 90-95 | 10-15 |
| elimoklavin % | 5-10 | 85-90 |
A találmány szerinti eljárással előállított új MNG 00211 számú törzset klavin-típusú al- 20 kaloidok előállítására a következőképpen alkalmazzuk:
A fermentációs eljáráshoz valamely alkalmas folyékony táptalajt használunk, mely szén- és nitrogén-forrást, ásványi anyagokat 25 és adott esetben egyéb adalékanyagot tartalmaz.
Az alkaloid termelő fermentációnál alkal-
| mazható táptalaj-összetételek | egyebek | között |
| a kővetkezők: | ||
| „E - táptalaj: | ||
| mannit | 40.0 | g/1 |
| borosty á nkősav | 10.0 | g/1 |
| ku kor icalek vá r | 2.0 | g/1 |
| kálium-dihidrogén-foszfát | 1.0 | g/1 |
| magnézium-szulfát | 0.3 | g/1 |
| pH 5,2-5,3 (NHiOH-dal állítva) | ||
| „F” - táptalaj: | ||
| szacharóz | 50.0 | g/1 |
| reszelt burgonya | 10.0 | g/1 |
| ammónium-nitrát | 1.0 | g/1 |
kálium-dihidrogén-foszfát 0.25 g/1 magnézium-szulfát 0.25 g/1 pH 5,4-5,5 (NH«OH-dal állítva) „G” - táptalaj:
szorbit 60.0 g g/1 borostyánkősav 36.0 g g/1 kálium-dihidrogén-foszfát 0.25 g g/1 magnézium-szulfát 0.30 g g/1 vas(II)-szulfát 0.009 g g/1 cinkszulfát 0.003 g g/1 pH 5,4-5,5 (NH«0H-dal állítva)
A felsorolt öszzetetelek bármelyikét 5060 ’C-on csapvízben oldjuk, majd 110 ’C-on 30 percig sterilezzük.
A fenti táptalajok bármelyikén vagy „C” táptalajon agar-agar hozzáadása nélkül steril aerob körülmények között alámerülő kultúrában, 20-28 ’C hőmérsékleten 4,2-6,0 pH tartományban 10-15 napon át végezzük a fermentációt.
A találmány ezerinti új törzs alkalmazását az alábbi példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy igényünket a példákra korlátoznánk.
1. példa
MNG 00211 számon deponált Claviceps fusiformis variáns törzs 14 napos, „A táptalajon nőtt ferde agar tenyészetét 5 ml fiziológiás sóoldaltal lemossuk. A kapott bzuszpenzió 1 ml-ét 500 ml-es Erlenmeyer lombikban előkészített 100 ml „C jelű folyékony táptalajra oltjuk, és a kultúrát 24 ’C-on, körrázógépen (lőketszám: 240/perc; lökethossz: 2 cm) 7 napig inkubáljuk.
Az így készített oltótenyészet 4 ml-ével elindítjuk a termelő fermentációt. Az alkaloidlermelés céljára 500 ml-es Erlenmeyer lombikban 100 ml „C-táptalajt sterilezőnk. Azonos körülmények között végzett 12 napos tenyésztési idő alatt a kultúrához a 3. és 5. napon Difco élesztőkivonat 10%-os, steril, vizes oldatéból 1,0-1,0 ml-t adunk.
A fermentáció végén a drappos-lila tenyészet száraz micéliumtartalma 18 g/1, szűrig létéből van Urk reakció alapján az össz-alkaloid-tartalom elimoklavin standardre számolva 1300 μ g/ml.
A tenyészet alkaloid-komponenseit az alábbi módszer szerint határozzuk meg: 20 ml tenyészetet 40 ml 4:1 arányú kloroform-izopropanol eleggyel 9 pH értékén extrahálunk, és szerves fázisból 10 ml-t vákuumban szárazra párolunk. A bepárlási maradékot 0,5 ml 1'. 1 arányú kloroform-metanol elegyben old55 juk és az oldatból 20 μΐ-t vékonyrétegkromatográfiás módszerrel analizálunk. [Adszorbens: DC Alufolien Kíeselgel 60F2S« (Art 5554); futtató elegy: kloroform-etanol 4:1 arányú elegye; előhívás: 254 nm-ea UV-fény6θ ben; elimoklavin: Rf=0,20; agroklavin:
Rf=0,301. Az alkaloidot az adszorbensről ΙΟΙ 0 ml borkösav-metanol eleggyel leoldjuk és az oldat abszorpcióját 283 nm-en vakoldattal szemben mérjük. A 12 napos tenyészet így meghatározott elimoklavin tartalma
1150 Mg/ml, agroklavin tartalma 55 Mg/ml.
2. példa
430 ford/perces folytatjuk. A
Az MNG 00211 számon deponált Claviceps fusiformis variáns törzs liofilizált tenyészetét ml fiziológiás sóoldatban szuszpendáljuk, és a szuszpenziót 500 ml-es Erlenmeyer lombikban sterilezett 100 ml E táptalajra oltjuk. Az inokulumot az 1. példában megadott körülmények közölt 7 napig tenyésztjük, majd 2-2 ml-ét 2x100 ml, 500 ml-es Erlenmeyer lombikban előkészített „G” táptalajra oltjuk.
napos, 24 ’C-on végzett rázatés utón az oltótenyészetekkel 10 literes üvegfermentorban levő 5 literes sterilezett „G” táptalajt oltunk. A tenyésztést 24 °C-on, percenként 0,5 liter/Iiter levegő átáramoltatásával, keverés habzás szükség esetén steril Struktol SB 2020 jelű habgátlót (gyártó: Schill und Seilacher, Hamburg) adagolunk kb. 0,5 ml/1 mennyiségben.
(A habgátló poliglikol-éazterek és alkil-poliglikol-éterek nem ionos kombinációja.) közben 12 napig megakadályozására
A tenyészet száraz micélium tartalma 16 g/1, és alkaloidtartalma az 1. példában leirt módszerekkel meghatározva 1550 pg/ml össz-alkaloid, melyből 1435 Mg/ml az elimoklavin, és 90 pg/ml az agroklavin.
3. példa
Az MNG 00211 számon deponált Claviceps fusiformis variáns törzs liofilizált tenyészetét 2 ml fiziológiás sóoldatban szuszpendáljuk, majd a szuszpenziót „B” jelű, ferde agar táptalajra oltjuk. A tenyészetet sötét helyiségben 24 “C-on 14 napig inkubáljuk. A felületen kinőtt tenyészetet 5 ml fiziológiás sóoldatban homogenizáljuk és 2 ml-ét két db 500 ml-es Erlenmeyer lombikban előkészített 100-100 ml „F táptalajra oltjuk. A tenyészetet 24 “C-on 5 napig rázatjuk, majd 10 literes üvegfermentorban lévő, 5 liter sterilizett „C“ táptalajra oltjuk.
Az oltótenyésztést 24 “C-on 0,5 liter/liter/perc levegő átáramoltatással és 430 ford/perc keveréssel 2 napig végezzük. Az így nyert tenyészetet 160 liter össztérfogatú saválló-acél fermentorban lévő, 110 liter sterilizett, 20 g/1 nátrium-kloridot tartalmazó „C táptalajra oltjuk. A tenyésztést 0,4 liter/liter/perc levegő átáramoltatással, és percenként 220 fordulatszámú keverés közben 24 ’C-on 12 napig folytatjuk. A habzás megakadályozására sterilizett Struktol SB 2020 jelű habgátlót adagolunk a tenyészethez, melynek mennyisége a teljes fermenlácig és idő alatt kb. 220 ml. A tenyésztés végére elért száraz micéliumtartalom 15 g/1 és az össz-alkaloid tartalom 1815 Mg/ml; ezen belül az elimoklavin szint 1630 pg/ml, az agroklavin szint pedig 240 Mg/ml, mely értékekei nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel a következőképpen határoztuk meg:
A szűrt fermentléből egy részt desztillált vízzel lO-szereere hígítunk, és ebből 20 m1-1 injektálunk Labor MIM típusú nagy15 nyomású folyadékkromatográf 4,6x250 mm méretű, Nucleosil 10 C 18 adszorbenssel töltött oszlopéra. Az elúciót 1,0 ml/perc áramlási sebességgel acetonitrii és 0,01 M ammónium-karbonát 3:2 arányú elegyével végezzük. A detektálás UV detektorral 280 nm-en történik. A k'romatograramon az elimoklavin 8,7, az agroklavin 32,0 perces retenciós idővel jelenik meg.
Claims (2)
1. Eljárás az I általános képietű klavin-tlpusú anyarozsalkaloidok - ahol R metil-, vagy hidroxi-metil csoportot jelent - elöállí30 tására Claviceps fusiformis törzzsel szén- és nitrogénforróst, ásványi sókat, valamint adott esetben egyéb adalékanyagokat tartalmazó folyékony táptalajon, aláraerülö kultúrában, aerob körülmények között végzett fer35 mentádé útján, azzal jellemezve, hogy termelő törzsként MNG 00211-számon letétbe helyezett Claviceps fusiformis variáns törzset alkalmazunk.
2. Eljárás az MNG 00211 számon deponált
40 új Claviceps fusiformis variáns törzs előállítására és fenntartására, azzal jellemezve, hogy az MNG 00164 számon deponált Claviceps fusiformis kiindulási törzset szén- és nitrogénforrást, valamint ásványi sókat lar¢5 talmazó agar-tartalmú szilárd táptalajon, és a táptalaj 1 literére számított 1-10 mmól menynyiségű barbiturót-tipusú adalékanyag jelenlétében 20-28 ’C hőmérsékleten 7-21 napig inkubáljuk, ás a kapott, a kiindulási törzstől
50 lilás színük és laposan elterülő alakjuk alapján jól megkülönböztethető telepeket szelektáljuk, és a szelekciót adott esetben barbiturát jelenlétében, vagy anélkül ismételjük, és a kapott új variáns törzset, mely legalább
55 85%-ban elimoklavit termel, elkülönítjük.
2 rajz, 3 ábra
Priority Applications (14)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU832817A HU190141B (en) | 1983-08-10 | 1983-08-10 | New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids |
| BE1/11066A BE900294A (fr) | 1983-08-10 | 1984-08-03 | Nouvelle souche produisant de la clavine, procede pour sa preparation, ainsi qu'un procede microbiologique de production d'alcaloides de la clavine. |
| US06/637,524 US4618581A (en) | 1983-08-10 | 1984-08-03 | Clavine-producing strain, a process for the preparation thereof as well as a microbiological process for producing clavine alkaloids |
| CH3745/84A CH664758A5 (de) | 1983-08-10 | 1984-08-03 | Verfahren zur herstellung von clavin-mutterkornalkaloiden. |
| AT0258284A AT383828B (de) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | Verfahren zur herstellung von clavinmutterkornalkaloiden sowie eines diese alkaloide produzierenden stammes |
| PT79051A PT79051B (en) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | Microbiological process for the preparation of clavine alkaloides |
| FR8412593A FR2550549B1 (fr) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | Nouvelle souche produisant de la clavine, procede pour sa preparation, ainsi qu'un procede microbiologique de production d'alcaloides de la clavine |
| JP59165757A JPS60120997A (ja) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | クラビンアルカロイド生産性微生物及びその製造方法 |
| NL8402466A NL8402466A (nl) | 1983-08-10 | 1984-08-09 | Een nieuwe clavine-producerende stam, een werkwijze voor de bereiding ervan, alsmede een microbiologische werkwijze voor de productie van clavinealkaloiden. |
| GB08420369A GB2148278B (en) | 1983-08-10 | 1984-08-10 | New claviceps fusiformis strain method for obtaining said strain and fermentation process for producing clavine alkaloids using said strain |
| ES535102A ES8604306A1 (es) | 1983-08-10 | 1984-08-10 | Procedimiento de preparacion de una nueva raza productora de clavina y procedimiento microbiologico de produccion de alcaloides de clavina |
| DE19843429573 DE3429573A1 (de) | 1983-08-10 | 1984-08-10 | Bei gaerung zur clavinmutterkornalkaloiderzeugung, insbesondere elymoclavinerzeugung, faehiger claviceps fusiformis-variantenstamm sowie verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung zur herstellung von clavinmutterkornalkaloiden |
| CS846104A CS248719B2 (en) | 1983-08-10 | 1984-08-10 | Production method of the clavine alcaloids |
| JP63045978A JPS63313593A (ja) | 1983-08-10 | 1988-03-01 | クラビンアルカロイドの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU832817A HU190141B (en) | 1983-08-10 | 1983-08-10 | New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUT35011A HUT35011A (en) | 1985-05-28 |
| HU190141B true HU190141B (en) | 1986-08-28 |
Family
ID=10961237
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU832817A HU190141B (en) | 1983-08-10 | 1983-08-10 | New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4618581A (hu) |
| JP (2) | JPS60120997A (hu) |
| AT (1) | AT383828B (hu) |
| BE (1) | BE900294A (hu) |
| CH (1) | CH664758A5 (hu) |
| CS (1) | CS248719B2 (hu) |
| DE (1) | DE3429573A1 (hu) |
| ES (1) | ES8604306A1 (hu) |
| FR (1) | FR2550549B1 (hu) |
| GB (1) | GB2148278B (hu) |
| HU (1) | HU190141B (hu) |
| NL (1) | NL8402466A (hu) |
| PT (1) | PT79051B (hu) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02250747A (ja) * | 1989-03-24 | 1990-10-08 | Seiro Japan:Kk | Ｃｎｃタッピング・ドリリング・ミィリングマシン |
| CA2093422C (en) * | 1990-10-05 | 2001-04-03 | DETERGENT COMPOSITIONS CONTAINING LOW CBH I CONTENT CELLULASE COMPOSITIONS | |
| WO2003080059A1 (en) * | 2002-03-25 | 2003-10-02 | Council Of Scientific And Industrial Research | Antibiotic pharmaceutical composition with lysergol as bio-enhancer and method of treatment |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE975919C (de) * | 1951-11-02 | 1963-03-21 | Takeda Pharmaceutical Ind | Verfahren zur Gewinnung eines Mutterkornalkaloidgemisches |
| CH444175A (de) * | 1964-05-27 | 1967-09-30 | Sandoz Ag | Verfahren zur Isolierung von Ergolen-Carbonsäuren |
| HU164957B (hu) * | 1971-02-19 | 1974-05-28 | ||
| US3884762A (en) * | 1972-04-21 | 1975-05-20 | Richger Gedeon Vegyeszeti Gyar | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids |
| GB1584464A (en) * | 1977-04-19 | 1981-02-11 | Farmaceutici Italia | Ergot alkaloids |
| JPS6234061U (hu) * | 1985-08-15 | 1987-02-28 | ||
| JPS6263775A (ja) * | 1985-09-12 | 1987-03-20 | 清水建設株式会社 | 免震ダンパ− |
-
1983
- 1983-08-10 HU HU832817A patent/HU190141B/hu not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-08-03 BE BE1/11066A patent/BE900294A/fr not_active IP Right Cessation
- 1984-08-03 US US06/637,524 patent/US4618581A/en not_active Expired - Fee Related
- 1984-08-03 CH CH3745/84A patent/CH664758A5/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 AT AT0258284A patent/AT383828B/de not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 NL NL8402466A patent/NL8402466A/nl not_active Application Discontinuation
- 1984-08-09 FR FR8412593A patent/FR2550549B1/fr not_active Expired
- 1984-08-09 PT PT79051A patent/PT79051B/pt not_active IP Right Cessation
- 1984-08-09 JP JP59165757A patent/JPS60120997A/ja active Granted
- 1984-08-10 ES ES535102A patent/ES8604306A1/es not_active Expired
- 1984-08-10 CS CS846104A patent/CS248719B2/cs unknown
- 1984-08-10 GB GB08420369A patent/GB2148278B/en not_active Expired
- 1984-08-10 DE DE19843429573 patent/DE3429573A1/de not_active Withdrawn
-
1988
- 1988-03-01 JP JP63045978A patent/JPS63313593A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BE900294A (fr) | 1985-02-04 |
| PT79051A (en) | 1984-09-01 |
| DE3429573A1 (de) | 1985-02-28 |
| JPH0159877B2 (hu) | 1989-12-20 |
| CH664758A5 (de) | 1988-03-31 |
| ES8604306A1 (es) | 1986-01-16 |
| JPS6357035B2 (hu) | 1988-11-10 |
| HUT35011A (en) | 1985-05-28 |
| JPS60120997A (ja) | 1985-06-28 |
| FR2550549A1 (fr) | 1985-02-15 |
| GB2148278A (en) | 1985-05-30 |
| PT79051B (en) | 1986-08-12 |
| NL8402466A (nl) | 1985-03-01 |
| US4618581A (en) | 1986-10-21 |
| FR2550549B1 (fr) | 1988-03-18 |
| JPS63313593A (ja) | 1988-12-21 |
| GB2148278B (en) | 1986-11-26 |
| GB8420369D0 (en) | 1984-09-12 |
| CS248719B2 (en) | 1987-02-12 |
| ES535102A0 (es) | 1986-01-16 |
| AT383828B (de) | 1987-08-25 |
| ATA258284A (de) | 1987-01-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | Effect of nitrogen source on biosynthesis of rapamycin by Streptomyces hygroscopicus | |
| EP1468077B1 (en) | Mutant actinosynnema pretiosum strain with increased maytansinoid production | |
| EP1751272B1 (en) | Production of tacrolimus (fk-506) using new streptomyces species | |
| Sindelar et al. | N-demethylation of nicotine and reduction of nicotine-1'-N-oxide by Microsporum gypseum | |
| CA1225053A (en) | Methods and compounds and compositions for treating protozoal infections with a novel antibiotic | |
| WO2007039816A2 (en) | Fermentation processes for the preparation of tacrolimus | |
| HU190141B (en) | New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids | |
| KR870001987B1 (ko) | 엔듀라시딘의 제조방법 | |
| US7241601B2 (en) | Process for the preparation of Fexofenadine | |
| US3884762A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids | |
| US4369251A (en) | Method for the production of sisomicin | |
| Pan et al. | Microbiological transformation of rauwolfia alkaloids | |
| CA1236785A (en) | ANTIBIOTIC LL-D42067.beta. | |
| KR100186758B1 (ko) | 프라바스타틴(pravastatin)전구체의제조방법 | |
| CA1193211A (en) | Process for producing mitomycin a by fermentation | |
| JPH02245191A (ja) | ６―α―ヒドロキシメチルロバスタチン誘導体の製造方法 | |
| JP3030306B2 (ja) | ３−ケトー７β−ヒドロキシコラン酸の製造方法 | |
| US4609742A (en) | Difficol, intermediate in antibiotic preparation | |
| US4600691A (en) | R-(Z)-4-amino-3-chloro-2-pentenedioic acid, novel antibacterial agent | |
| EP0481711B1 (en) | Process for production of optically active 3-methyladipic acid | |
| US4009077A (en) | Process for the preparation of phenopicolinic acid | |
| EP1080220A1 (en) | New biotechnological process for preparing hydroxylated ml-236b derivatives, known as m-4 and m-4', and analogues thereof | |
| US3986928A (en) | Antibiotic a-32390 and process for preparation thereof | |
| US3979433A (en) | 1,6-Di-O-(2-isocyano-3-methylcrotonyl)-D-mannitol compounds | |
| JPH0570470A (ja) | 生理活性物質カンレマイシンｃ、その製造法及びその薬学的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HU90 | Patent valid on 900628 | ||
| HMM4 | Cancellation of final prot. due to non-payment of fee |