HU183022B - Process for preparing 4-androstene-3,17-dione derivatives - Google Patents

Process for preparing 4-androstene-3,17-dione derivatives Download PDF

Info

Publication number
HU183022B
HU183022B HU76SCHE588A HUSC000588A HU183022B HU 183022 B HU183022 B HU 183022B HU 76SCHE588 A HU76SCHE588 A HU 76SCHE588A HU SC000588 A HUSC000588 A HU SC000588A HU 183022 B HU183022 B HU 183022B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
androstene
methyl
dione
hours
mycobacterium
Prior art date
Application number
HU76SCHE588A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Alfred Weber
Mario Kennecke
Rudolf Mueller
Ulrich Eder
Rudolf Wiechert
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of HU183022B publication Critical patent/HU183022B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
    • C07J1/0003—Androstane derivatives
    • C07J1/0011—Androstane derivatives substituted in position 17 by a keto group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
    • C07J1/0003—Androstane derivatives
    • C07J1/0018—Androstane derivatives substituted in position 17 beta, not substituted in position 17 alfa
    • C07J1/0022—Androstane derivatives substituted in position 17 beta, not substituted in position 17 alfa the substituent being an OH group free esterified or etherified
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
    • C07J1/0003—Androstane derivatives
    • C07J1/0033—Androstane derivatives substituted in position 17 alfa and 17 beta
    • C07J1/004—Androstane derivatives substituted in position 17 alfa and 17 beta the substituent in position 17 alfa being an unsaturated hydrocarbon group
    • C07J1/0048—Alkynyl derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J71/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
    • C07J71/0005—Oxygen-containing hetero ring
    • C07J71/001—Oxiranes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00—Preparation of steroids
    • C12P33/005—Degradation of the lateral chains at position 17
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/832—Bacillus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/84—Brevibacterium
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/863—Mycobacterium
    • Y10S435/866—Mycobacterium smegmatis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/872—Nocardia
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/886—Streptomyces

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás az (I) általános képletű 4-androszlén-3,l7-dion-származékok előállítására, ahol X 6.7-metilcncsoportot vagy egy, a 6- vagy 7-helyzetben kapcsolódó fluor-, klóratomot vagy metilcsoportot jelent.
A találmány értelmében úgy járunk el, hogy valamely (If) általános képletű szterín-származékot — ahol X a fenti jelentésű és Rj valamely szterin 8-10 szénatomos szénhidrogéncsoportját jelenti valamely, a Mycobacterium nemzetséghez tartozó mikroorganizmus kultúrával fermentálunk.
Valamely 8 10 szénatomos Rí szénhidrogéncsoporton olyan csoportot kell érteni, ahogyan az a természetben előforduló zoo- vagy fitoszterinek, például a koleszterin, sztigmászterin.kampeszterin, brasszikaszterin vagy a szrtoszterinek adott esetben hidrogénezett oldalláncában előfordul.
Alkalmas (ÍI) általános képletű szterin-származékok például a (11a) általános képlettel jellemezhető vegyületek, álról X a fenti jelentésű és R2 hidrogénatomot, metil- vagy etilcsoportot jelent.
A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként alkalmazhatunk például olyan szterineket, amelyekben az X szubsztituens 6a-fluoTatomot, óa-metilcsoportot, 6a,7a-metiléncsoportot vagy 6fJ,7(l-metiléncsoporfot, 7(3-metiícsoportot vagy 70-metilcsoportot jelent. Alkalmas kiindulási anyag például a 6a-fIuor-4-kolesztén-3on, a 6a-metil-4-kolesztén-3-on, a 7a-metil-4-kolesztén3-on, a 7(?-metil-4-kolesztén-3-on, a 6a-fluor-4-sztigmasztén-3-on, a 6ft-metil-4-sztigmasztén-3-on, a 7a metil-4-sztigmasztén-3-on, 7(3-metil-4-sztigmasztén-3-on, a 6a-fluor-4-kampesztén-3-on, a 6a-metil-4-kampesztén3-on, a 7a-metiI-4-kampesztén-3-on, a 70-metil-4-kampesztén-3-on vagy a megfelelő szitoszterin-származékok.
Ismert, hogy számos mikroorganizmus (így például az Arthrobacter, Brevibacterium, Microbacterium, Protaminobacter, Bacillus, Norcardia, Streptomyces és különösen a Mycobacterium genus-hoz tartozó mikroorganizmus) természetéből adódóan képes a zoo- és fitoszterinek széndioxidra és vízre való lebontására, és ennek a lebontásnak a során 4-androsztén-3,17-dion és l,4-androsztadién-3,17-dion közbenső termék képződik.
Ismert továbbá, hogy inhibitor adalékanyagok vagy mikroorganizmusok mutánsainak segítségével lehetőség van arra, hogy a szterinek lebontását úgy irányítsák, hogy elkerüljék a képződött 4-androsztén-3,17-dion vagy I,4-androsztadién-3,17-díon lebomlását (1 543 269 és 1 593 327 számú német szövetségi köztársaságbeli nyilvánosságrahozatali irat és a 3 684 657 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
A szakember számára is meglepő, hogy az ismert körülmények között a (11) általános képletű szterinszármazékok oldalláncai Is lebomlanak, minthogy ismert az, hogy a szterinek oldalláncának lebontását egy nagyon összetett enzimrendszer befolyásolja, és nem volt előre várható, hogy a természetben előforduló szteroidok oldalláncának lebontását befolyásoló összes enzim rendelkezik azzal a képességgel, hogy a természetben elő nem forduló, (11) általános képletű szterin-származékok oldalláncának lebontását is befolyásolja. Ezen túlmenően az sem volt előre várható, hogy az 1,4-androsztadién3,17-dion és a 4-androsztén-3,l7-dion lebontását befolyásoló enzimrendszer nem képes az 1 általános képletű androsztűn-3,17-dion-származékok lebontására.
Eltekintve attól, hogy más kiindulási anyagokat alkalmazunk és a reakciót inhibitorok távollcteben valósítjuk meg, a találmány szerinti eljárást ugyanolyan fermentációs körülmények között valósítjuk meg, mint amilyen körülményeket a szterinek ismeri mikrobiológiai oldallanc-lebontó reakcióinak eseten is alkalmazunk.
A találmány értelmében a fermentációt a Mycobacterium genus-ok szterinek oldaliaménak lebontására képes fcaktériumkultúráival végezzük. Alkalmas mikroorganizmus a Mycobacterium plilei ATCC-354.
Az irodalom számos törzset ismertet szteroidok 17alkil-oldalláncának lebontására. Az ilyen mikroorganizmusokra részletes ismertetést ad W. Charney és H L. Herzog Microbiological Transformation of Steroids, Academic Press.. New York, és London című munkája. Az. eljárásban előnyösen használható a Mycobacterium spec. NRRL-B-3805.
A Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzse a 3 759 791 sz. amerikai szabadalmi leírás ismerteti; a törzseket az A. R. S. Culture Coílectior. Ínvesíigations Eermentation Laboratory, 1815 N. University Ave, Peoria, 111. 61604 intézettől szereztük be. E törzsek kiteqedt irodalommal rendelkeznek és alkalmasak például koleszt-5-én-3(3-ol, (24R)-meíil-koleszt-5-én-3fl-ol, sztigmaszt-5-én-3(3-ol, sztigmaszt-4-én-3-on, sztigmaszta5,22-dién-3/?-ol, sztigmaszta-4,22-dién-3-on és hasonló szteroidok androszt-4-én-3,17-dionná történő átalakítására.
A fentiekben említett további törzsek ugyancsak bárki számára hozzáférhetők a megfelelő törzsgyűjteményekből.
A mikroorganizmusokat az ilyen mikroorganizmusok esetében szokásos körülmények között, valamely alkalmas táptalajban, levegőztetett, szubmerz kultúrákban tenyésztjük. Ezután hozzáadjuk a kultúrához a szubsztrátumot (valamely alkalmas oldószerben feloldva vagy előnyösen emulgeált alakban), és addig fermentáfyuk, amíg maximális szubsztrátum átalakulást nem értünk el.
A szubsztrátum alkalmas oldószerei például a metanol, etanol, glikolmonometiléter, dimetilformamid vagy dimetilszulfoxid. A szubsztrátum emulgeálását például úgy valósíthatjuk meg, hogy a szubsztrátumot mikronizált alakban vagy valamely vízzel elegyedő oldószerben (így metanolban, etanolban, glikolmonometiléterben, dimetilformamidban vagy dimetílszulfoxidban) feloldva, erős keverés közben az emulgeálás általánosan alkalmazott segédanyagait tartalmazó (előnyösen mésztelenített) vízbe adagoljuk. Az emulgeálás segédanyagai nem ionos emulgeátorok, így például etilénoxid-adduktumok vagy poliglikolok zsírsavészterei. Az alkalmas emulgeátorok példáiként megnevezzük a kereskedelemben Tegin, Tween és Span névvel kapható nedvesítőszereket.
A szubsztrátum optimális koncentrációja, beadagolásának ideje és a fermentáció tartama az alkalmazott szubsztrátum szerkezetétől és a felhasznált mikroorganizmus fajtájától függ. Ezeket az értékeket, ahogyan ez a szteroidok mikrobiológiai átalakításának esetében általában szükséges, az egyes esetekben a szakember által jól ismert előkísérletekkel kell meghatározni.
A találmány szerinti eljárással előállítható (1) általános képletű 4-androsztén-3,17-dion-szánnazckokat farmakológiailag hatásos szteroidok előállítására használhatjuk kiindulási anyagokként.
Így például a 4-androsztén-3,17-dion-származékok 17-ketocsoportját adott esetben a 3-oxocsoport kctállá
183 022 történő átalakítása után redukálhatjuk, vagy valamely (TV) általános képletű szerves fém-vegyülettel reagáltáthatjük - ahol R4 valamely rövidszénláncú telített vagy telítetlen szénhidrogéncsoportot jelent és Me valamely afkáíifématomot vagy magncziuinhaíogenidcsoportot képvisel . igy az adott esetben jelenlevő ketálcsoport lehasitása után a (Hl) általános képletű ! 7/5-hidroxj-4-androsztén-3-on-származékokat kapjuk, ahol X a fenti jelentésű és R3 jelentése megegyezik R4 jelentésével vagy jelenthet még hidrogénatómo't is.
R3 jelentésében rövidszénláncú telített vagy telítetlen szénhidrogénesoporton előnyösen metil-, etil-, vinilvagy etirűfc&oportot kefl érteni.
Az (1) általános képletű 4-ándrosztén-3,17-dion-származékok 17-ketocsOportjának redukcióját a szakember számára ismert eljárásokkal végezzük (lásd például Fried, John: Organic Reactkms in Steroid Chemistry, van Nostrand Reinhold Comp., New York, l. kötet 61. oHal (1972)1. így például ezeket a vegyületeket ketáftá történő átalakítás után nátriumbórhidriddel vagy KtíuTnsSumfniuinhrdriddel reagáltathatjuk, és a ketálcsOport elbontása után a megfelelő, (IH) általános képletű 11β hidroxi-4-androsztén-3-on-származékokat kapjuk, amelyek ismert módon anabolikus és/vagy androgén hatásúak.
Ugyanígy ismertek módszerek a 17-ketocsoport alkilezésére (lásd például Fried, John: Organic Reactions ín Steroid Chemistry, van Nostrand Reinhold Comp., New York, 2. kötet 53. oldal (1972.)J. í® az (I) általános képletű 4-an<frosztén-3,17-dion-származékokat ártott esetben a 3-oxoCsoport ketálcsoporttá történő átalakítása után például alkilmagnéziurtihalogenidekkel. vmrffitiumrnal va® alkálifémacetilrdekkel reagáltathatjuk, és áz adott esetben jelenlevő ketálcsoport lehasitása irtán a (III) általános képletű 17aR-17d-hidroxi-4-androszíén-3-on-származékofcat kapjuk, amelyek ismerten farmakológiailag hatásos anyagok va® farmakológiailag hatásos szteroidok előállítására használhatók kiindulási anyagokként.
A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagokként alkalmazott (II) általános képtetö szterin-származékokat a megfelelő szterinekből állíthatjuk elő olyan módszerek segítségével, amelyeket a megfelelő 1- és/va® 2-heíyzetben levő szubsztituensek szteroidokba történő bevitelére általánosan alkalmasak.
A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg.
A) Mikrobiológiai oldalíánclebontás
1. példa
750 ml-es Erlenmeyer lombikban levő, 200 ml térfogatú steril táptal^t, amely 1% élesztőextraktumot, 0,45% dinátriumhidrogénfoszfátot, 0,34% kátiumhidrogénfoszfátot és 0,2% Tween 80 emulgeátort tartalmaz, és amelynek pH-értékét 6,7-re állítottuk, a Mycobacterrum spec. NRRL-B-3805 törzs kultúrájának szuszpenziójával beoltunk, és három napon át rázzuk 30 °C hőmérsékleten, percenként 190 fordulattal.
E® 50 literes fermentorban levő 40 liter steril táplálót, amely 1,23% élesztőextraktumot, 0,68% káliumdihidrogénfoszfátot és 0,2% Tween 80 emulgeátort tartalmaz és amelynek pH-értékét 6,0-ra állítottuk, beoltjuk a Mycobacterium spec. tcnyészkultúrájának
200 mi ével, és 48 órán át inkubáljuk 30Ιι,Ίη, ι sékleten, levegőztetés közben (2 in'/óra).
Egy 50 literes fermentorban levő 40 liter táplál.i|i amely 2,0% kukoricalckvárt. 0,3% diammóniumhidio génfoszfátot cs 0,25% Tween 80 emulgeátort tartatnia/ és amelynek pH-értckét 6.5-rc beállítottuk, indukála céljából összekeverünk 5 g 6a-fbior-4-kolcsz<cn-3-ou nal, és 24 órán át 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk levegőztetés (2 nr'/óra) és keverés (200 fordulat/perc) közben.
Ezután a kultúrához hozzáadjuk 20 g 6a-fluor-4 kolesztén-3-on 150 ml dimetilformamiddal készített, sterilre szűrt oldatát, és további 56 órán át fermentáljuk keverés és levegőztetés közben 30 °C hőmérsékleten
A fermentáció végrehajtása után a kultúrát 3X5 liter etilénkloriddal extraháljuk, az extraktumokat vákuumban bepároljuk, és a maradékot kovasavoszíopon tisztít juk. 1® diizopropiléterből végzett átkristályosítás után 8.7 g 6«-fluor-4-androsztén-3,17-diont kapunk, antclynek olvadáspontja 229 231 °C.
A kiindulási anyagot az alábbi módon állítjuk elő.
a) 60 g 3/3-hidroxi-5-kolesztént 360 ml abszolút tetrahidrofurán és 120 ml metilénklorid ele®ébcn jeges hűtés közben összekeverünk 60 g N-brómszukcinműddel, és ezt követően részletekben hozzáadunk 120 ml, 70%-os piridin-fluorhidrogén reagenst. A reakcióele®et 1 órán át keverjük hűtés közben, majd keverés közben hozzáadjuk jeges víz és kátiumfearbonát oldatához. Éterrel végzett extrahálás után a kapott nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, és metanolból átkristályosítjuk. I® 40,8 g 5-bróm-6/5-fluor-5a-köfesztán-3/lolt kapunk, amelynek olvadáspontja 114,5 116 °C.
b) 30 g 5-bróm-6/}-f1uor-5a-kotesztán-3(l-olt 730 ml acetonban feloldunk, és 10 °C hőmérsékleten össizekeverjük 24,1 ml krómkcnsav-oldattal (amelyet 267 g króm(Vl)oxidból, 400 ml vízből és 230 ml tömény kénsavból állítottunk elő és vízzel 1000 ml-re feltöltöttük). A reakcióele®et 15 percen át keverjük 10 °C hőmérsékleten, m^d jeges vízbe keverjük, a maradékot leszűrjük és metilénkloridban felvesszük. Szárítás és bepárlás után a kapott nyersterméket 290 ml ecetsavban feloldjuk, 3 órán át keverjük 30 °C-on, mód hozzáadunk 4,65 g nátriumacetátot, és további 15 percen át keverjük 30 C hőmérsékleten. Ezután jeges vízben kicsapjuk, a csapadékot leszűrjük, és metilénkloridban felvesszük. A bepárlás után kapott maradékot szilikagélen kromatografáljuk, és metanolból átkristáfy ősit juk. í® 14,5 g 6af!nor-4-kolesztén-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 111- 115 °C.
Hasonlóképpen eljárva alakíthatjuk át az 5-sztigmasztén 3/kolt 6a fluoM^ztigmasztén-3-onná.
2. példa g 6a-fluor-4-sztigmasztén-3-ont (91,5 %-os nyerstermék) az 1. példa szerinti körülmények között a Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzs kultúrájával reagáltatunk, í® 6,1 g 6e-fluor-4-androsztén-3,I7-diont kapunk, amelynek olvadáspontja 228-231 °C.
3. példa g 6e-fluor-4-kolesztén-3-ont az 1. példa szerinti körülmények között a Mycobacterium phlei ATCC 354 törzs kultúrájával reagáltatunk. Az ele® feldolgozása 3
-3után 4.8 g ϋα-ΠυοΓ 4-androsztén-3,17 diont kapunk amelynek olvadáspontja 228 231 °C
4. példa literes Erlenmeyer lombikban levő 500 ml steril táptalajt, amely 1% élesztőextraktumot, 0,45% dinátriumhidrogénfoszfátot, 0,34% káliumdihidrogénfoszfátot és 0,2% Tween 80 emulgeátort tartalmaz, és pHértékét 6,7-re állítottuk be, beoltunk a Mycobacterium ιθ spec. NRRL-B-3805 törzs száraz kultúrájának szuszpenziójávai, és három napon át rázzuk 30 °C hőmérsékleten, percenként 190 fordulattal.
darab, Ertenrneyer lombikban levő 100 100 ml steril táptalajt, amely 2,0% kukoricalekvárt, 0,3% di- 15 arnmóniumhidro'génfoszfátot és 0,25 % Tween 80 emulgeátort tartalmaz, és amelynek pH-értékét 6,5-re állítottuk be, beoltunk a Mycobacterium spec. tenyészkultúrájának 5-5 ml-ével, és 24 órán át rázzuk 30 °C hőmérsékleten percenként 220 fordulattal. 20
Ezután minden egyes kultúrához 100 mg, 5 ml dimetilformamidban oldott 7a-metil-4-koiesztén-3-ont adunk, és további 96 órán át fermentáljuk.
Az egyesített kultúrákat etilénkloriddal extraháljuk, az extraktumot vákuumban bepároljuk, és a maradékot 25 kovasav oszlopon végzett kromatografálással tisztítjuk, így diizo propil éterből végzett átkristályosítás után 0,8 g 7a-meti!-4-androsztén-3,17-dk>nt kapunk, amelynek olvadáspontja 193-194 °C.
A kiindulási anyagot az alábbi módon állítjuk elő. 30 g koleszterint, 34,29 g lítiumbromidot és 34,3 g lítiumkarbonátot 525 ml dimetilformamidban szuszpendálunk, ezután 75-80 °C-ra (belső hőmérséklet) melegítjük, és 45 perc alatt cseppenként összekeverjük 7,95 ml bróm 170 ml dioxánna! készített elegyével. A reakció- 35 elegyet 2 órán át keverjük, majd 3 liter vízben elkeverjük, további 30 percen át tovább keverjük, jeges hűtés közben jégecettel 4-es pH-értékig savanyítjuk, és etilacetáttal extraháljuk. Az extraktumokat félig telített nátriumklorid-oldattal semlegesre mossuk, nátriumszul- 40 fáttal szárítjuk, és az oldószert vákuumban ledesztilláljuk.
így 34,4 g nyersterméket kapunk, amelyet kovasavon végzett kromatografálással tisztítunk. Ezt követően metanolból végzett kristályosítás után 25,6 g 4,6-koleszta 45 dién-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 80-82,5 °C.
g magnéziumforgácsból, 275 ml éterből és 6,26 ml metiljodidból a szokásos módon éteres metilmagnéziumjodid-oldatot készítünk.
A reakció befejeződése után az éter egyidejű ledesz- 50 tillálásával 550 ml abszolút tetrahidrofuránt csöpögtetünk hozzá, 58-60 °C belső hőmérséklet alatt. Erős jeges hűtés közben 1,4 g réz(í)kloridot adunk az oldathoz, majd további 15 perc múlva 30 perc alatt belecsöpőgtetjük 27,5 g 4,6-kolesztadién-3-on oldatát, az 55 elegyet 2 órán át keveqük, majd óvatosan összekeverjük 300 ml telített ammóniumklorid-oldattal, 2 liter éterrel felhígítjuk, és a szokásos módon feldolgozzuk.
A nyersterméket (28,7 g) 250 ml tetrahidrofuránban feloldjuk, és 10 ml 2 n kénsav hozzáadása után 2 órán át 60 visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk. A szokásos . feldolgozás után 26,3 g nyersterméket kapunk, ezt kovasavgélen végzett kromatografálással tisztítjuk. így 16,6 g 7o-inetil-4/kolesztén-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 72 73 75 °C (pentán) 66 .'·. példa darab Erieiiineyer lombikban 100 100 mg 6ametil-4-kolesziéu-3-ont Mycobacterium spec. NRRL-B3805 kultúrával fermentálunk a 4. példa szerinti módon, majd az elegyei feldolgozzuk. így 0,8 g 6a-metil-4- 5 androsztén-3,I7-dsoní kapunk, amelynek olvadáspontja 17Í-174°C.
A kiindulási anyagot az alábbi módon állítjuk elő. , g koleszterint 600 ml metilénkloridban fefofdunk, és jeges vízzel való hűtés közben 20 perc alatt részletekben hozzáadunk 17,4 g m-klór-perbenzoesavat. 30 perccel az adagolás befejezése után az elegyet 200 ml metilénkloriddal felhígítjuk, 2X200 ml telített nátriumszuffátoldattal, 2X200 ml híg nátriumhidrogénkarbonát-oldaftal kirázzuk, majd vízzel addig rázzuk, amig az oldat semleges nem lesz. Ezután nátriumszulfát felett szárítjuk, majd az oldószert vákuumban kdesztiliáljuk. A nyersterméket metanolból átkristályosítjuk.
így 23,4 g 3/3-hidroxi-5,6-epoxi-koleszterint kapunk, amelynek olvadáspontja 133- 136 °C.
3,64 g magnéziumforgácsból és 9,5 ml metiljodidból 100 ml éterben metilmagnéziumjodid-oldatot készítünk.
Ezután hozzácsöpögtetünk 20 g 3ő-hidroxi-5,6-epoxikoleszterint 400 ml abszolút toluolban, és 45 órán át keverjük 60 -65 °C hőmérsékleten. Az elegyet ezután jeges hűtés közben óvatosan összekeverjük I0Ö ml telített ammóniumklorid-oldattal, és a szokásos módon feldolgozzuk. A nyersterméket (21,3 g súlyú bamaszínű, viszkózus olajszerű anyag) 400 ml benzolban feloldjuk, és 100 ml ciklohexanon és 20 g alumíniom-izopropilát hozzáadása után 21 órán át forraljuk visszafofyató hűtő alkalmazásával. A lehűlt oldatot benzollal felhígítjuk, n kénsawal többször kirázzuk, és vízzel semlegesre mossuk.
A nyersterméket tisztítás céljából kovasavgélen, kromatografáljuk. Metanolból végzett átkristályosítás után 12,75 g 6a-metil-4-kolesztén-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 151 -154 °C.
B) A 4-androsztén-3,17-dion-származékok kémiai átalakítása.
I. példa
3,2 g 6a-fluor-4-androsztén-3,17-diont 50 ml izopropanolban feloldunk, 0 °C-ra hűtjük, és összekeverjük 135 mg finomra elporitott nátriumbórhidriddel. Az elegyet 3 órán át keverjük 0 °C hőmérsékleten, n kénsawal 5 ös pH-értékre savanyítjuk, és vákuumban teljesen bepároljuk. A maradékot metilénkloriddal extraháljuk, az extraktumot mossuk, vákuumban bepároljuk, és diizopropiléterből átkristályosítjuk. így 2,05 g 6a-fluor-4androsztén-17)3-olt kapunk, amelynek olvadáspontja 156 -158 °C. Erről a vegyületről közismert, hogy erős anabolikus hatású (Steroids,3., 109.(1964)].
II. példa
4,6 g 7a-metil-4-androsztén-3,17-diont 20 ml metanol és 5 ml ortohangyasav-trimetilészter elegyében szuszpendálunk, és 50 mg p-toluolszulfonsav hozzáadása után 2 órán át forraljuk. 15 °C-ra való lehűtés után hozzáadunk 4 ml acetont, az elegyet 90 percen át keverjük 15 °C-on, majd hozzáadunk 0,1 ml trietilamint.
A csapadékot leszűrjük, kevés metanollal mossuk, és vákuumban 20 °C-on szárítjuk. A nyersterméket 40 ml abszolút éterben feloldjuk, és szobahőmérsékleten 10
-4183 02.:
pere alatt hozzácsöpögtetjük az 3,5 g lítiumból és 9 ml metifjodidból 100 ml éterben készített lítiummetilofdathoz. Az elegyet ezután 56 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásává, majd 0 °C-ra hűtjük, óvay fosán hozzáadunk 50 ml 2 n kénsavat, cs erőteljes keve- 5 rés közben 2 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alkalmazásával. A szokásos módon végzett feldolgozás után
A 3,71 g 17(3-hidroxi-7a,17a-dimetil-4-androszíéri-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 163 165 °C (diizopropiléterből végzett átkristályosítás után); ez a vegyü- 10 let közismerten erős anabolikus hatású ÍJ. Am. Chem. Soc., 81., 4069(1959)].
III. példa
3,5 g kálium-terc-butilát 65 ml abszolút tetrahidrofuránnal készített, 10 °C-ra hűtött oldatába keverés közben, egy órán át acetilént vezetünk. Ezután hozzáadunk 5,86 g 6a-metil-4-androsztén-3,17-diont, és további 90 percen át vezetünk acetilént az elegybe. qq Ezután a reakcióelegyhez 50 ml metanolt és 3 ml 4 n sósavat adunk, majd vákuumban teljesen bepároljuk. A szokásos módon végzett feldolgozás után 4,61 g 17 acíinil- i 7 0-hidroxi-6a-metil-4-androsztén-3-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 194 -196 °C (metanol-tetrahídrofurán elegyből végzett átkristályosítás után); ez a vegyület közismerten erős progresztatív hatású vegyület ÍJ. Am. Chem. Soc.. 80., 4717. (1958)].

Claims (1)

  1. Eljárás az (?) általános képletű 4-androsztén-3,17dion-származékok előállítására - ahol X 6,7-metilén-csoportot vagy egy, a 6- vagy 7-helyzetben kapcsolódó fluor-, klóratomot vagy metilcsoportot jelent - , azzal jellemezve, hogy valamely (I!) általános képletű szterin-származékot - ahol X a fenti jelentésű és É! valamely szterin 8—10 szénatomos szénhidrogéncsoportját jelenti - Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 vagy Mycobacterium phlei ATCC 354 mikroorganizmus kultúrával fermentálunk.
HU76SCHE588A 1975-12-19 1976-12-17 Process for preparing 4-androstene-3,17-dione derivatives HU183022B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2558088A DE2558088C2 (de) 1975-12-19 1975-12-19 Verfahren zur Herstellung von 4-Androsten-3,17-dion-Derivaten

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU183022B true HU183022B (en) 1984-04-28

Family

ID=5965329

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU76SCHE588A HU183022B (en) 1975-12-19 1976-12-17 Process for preparing 4-androstene-3,17-dione derivatives

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4100027A (hu)
JP (1) JPS5294493A (hu)
AT (1) AT367092B (hu)
BE (1) BE849557A (hu)
CH (1) CH622532A5 (hu)
CS (1) CS187348B2 (hu)
DD (2) DD129334A5 (hu)
DE (1) DE2558088C2 (hu)
DK (1) DK139267C (hu)
FR (1) FR2335522A1 (hu)
GB (1) GB1571913A (hu)
HU (1) HU183022B (hu)
IE (1) IE44515B1 (hu)
NL (1) NL7614024A (hu)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4223092A (en) * 1977-10-21 1980-09-16 The Upjohn Company Process for preparing 9α-OH BN acid methyl ester
US4383947A (en) * 1981-07-24 1983-05-17 The Upjohn Company Introduction of a fluorine atom
GB2104526B (en) * 1981-07-24 1985-06-05 Upjohn Co 6-fluoro-9-hydroxyandrost-4-ene-3,17-diones and microbial preparation thereof
US5227375A (en) * 1990-02-08 1993-07-13 Endorecherche, Inc. Aromatase inhibitors
WO1999007381A1 (en) * 1997-08-11 1999-02-18 Weider Nutrition International, Inc. Compositions and treatments to reduce side effects of administration of androgenic testosterone precursors
US6071714A (en) * 1998-03-26 2000-06-06 Forbes Medi-Tech, Inc. Process for the microbial conversion of phytosterols to androstenedione and androstadienedione
DE19827523A1 (de) * 1998-06-22 1999-12-23 Jenapharm Gmbh Ungesättigte 14,15-Cyclopropano-Androstane, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Präparate
KR100432054B1 (ko) * 2001-05-11 2004-05-17 (주)유진사이언스 스테롤로부터 4-안드로스텐-3,17-디온/안드로스타-1,4-디엔-3,17-디온으로의 뛰어난 전환능을 가지는 미생물 및 이의 제조방법
WO2003059931A1 (en) * 2002-01-21 2003-07-24 Akzo Nobel N.V. PROCESS FOR THE PREPARATION OF 7α-METHYLSTEROIDS
US20040010138A1 (en) * 2002-03-21 2004-01-15 Schering Ag Process for the production of 7alpha-methyl steroids
DE10213371C1 (de) * 2002-03-21 2003-12-24 Schering Ag Verfahren zur Herstellung von 7alpha-Methylsteroiden
AR061892A1 (es) * 2007-07-11 2008-10-01 Consejo Nac Invest Cient Tec Un compuesto que presenta actividad antiinflamatoria y actividad antiviral, composiciones farmaceuticas que lo comprenden, un procedimiento para su obtencion y uso del mismo en el tratamiento de la queratoconjuntivitis epidemica y de la queratitis estromal herpetica

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1092145A (en) * 1964-06-02 1967-11-22 Noda Inst For Scientific Res Microbiological conversion of steroids
NL6705450A (hu) * 1965-10-22 1968-10-21
US3684657A (en) * 1970-05-11 1972-08-15 Searle & Co Selective microbiological degradation of steroidal 17-alkyls
US3759791A (en) * 1970-12-10 1973-09-18 Searle & Co Selective microbiological preparation of androst-4-ene-3,17-dione

Also Published As

Publication number Publication date
GB1571913A (en) 1980-07-23
FR2335522B1 (hu) 1980-07-04
BE849557A (fr) 1977-06-17
FR2335522A1 (fr) 1977-07-15
DD134106A5 (de) 1979-02-07
AT367092B (de) 1982-05-25
CH622532A5 (hu) 1981-04-15
US4100027A (en) 1978-07-11
DD129334A5 (de) 1978-01-11
DK566176A (da) 1977-06-20
DE2558088A1 (de) 1977-07-07
ATA935676A (de) 1981-10-15
DK139267C (da) 1979-06-25
JPS615715B2 (hu) 1986-02-20
DK139267B (da) 1979-01-22
IE44515B1 (en) 1981-12-30
JPS5294493A (en) 1977-08-09
NL7614024A (nl) 1977-06-21
IE44515L (en) 1977-06-19
DE2558088C2 (de) 1985-05-30
CS187348B2 (en) 1979-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4179336A (en) Microbiological degradation of sterol side chains to a 17-keto group
HU183022B (en) Process for preparing 4-androstene-3,17-dione derivatives
JP2719377B2 (ja) ９α―ヒドロキシ―１７―ケトステロイドの微生物学的製法
EP0189951A1 (en) New process for the preparation of certain steroids, especially intermediates for the preparation of proligestone and related compounds, and new intermediates formed in this process
Lacroix et al. Microbial models of drug metabolism: microbial transformations of trimegestone®(RU27987), a 3-Keto-Δ4, 9 (10)-19-norsteroid drug
US4956482A (en) Process for the preparation of pregnane derivatives
US4170518A (en) Microbiological conversion of sterol derivatives to 5-androsten-17-one derivatives and their use
US4720357A (en) New process for manufacturing derivatives of 17 alpha-hydroxy 19-nor progesterone and novel intermediates for use therein
US20040220158A1 (en) 5-Androsten-3beta-ol steroid intermediates and processes for their preparation
HU227304B1 (en) Process for producing 9alpha-hydroxy-steroids
EP0139907B1 (de) Verfahren zur Herstellung von Estran-Derivaten
US4100026A (en) Process for the preparation of 4-androstene-3,17-dione derivatives
US4097334A (en) Process for the preparation of androstane-3,17-dione derivatives
Lenz et al. Formation of 14. alpha.-cardenolides from 21-acetoxy-20-keto steroids
Fétizon et al. 1, 4-Dioxene (2, 3-dihydro-1, 4-dioxine) in organic synthesis. Part 9. Preparation of biologically active side-chains from 17-oxosteroids
US4088537A (en) Δ1 Dehydrogenation of corticoids without side chain degradation by Septomyxa
EP0655071B1 (de) VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON 1-METHYL-3-KETO-$g(D)?1,4 -STEROIDEN
CS200519B2 (cs) Způsob výroby androstanových derivátů

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee