HRP930658A2 - Improved vaccine compositions - Google Patents
Improved vaccine compositions Download PDFInfo
- Publication number
- HRP930658A2 HRP930658A2 HRP-796/91A HRP930658A HRP930658A2 HR P930658 A2 HRP930658 A2 HR P930658A2 HR P930658 A HRP930658 A HR P930658A HR P930658 A2 HRP930658 A2 HR P930658A2
- Authority
- HR
- Croatia
- Prior art keywords
- preparation according
- amino acid
- polypeptide
- virus
- group
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title abstract description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 91
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 84
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 84
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 42
- -1 alkyl compound Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 45
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 32
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 27
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 27
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 27
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 24
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 18
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 15
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 15
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 12
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 125000003143 4-hydroxybenzyl group Chemical group [H]C([*])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 7
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 6
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 claims description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 6
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 125000004203 4-hydroxyphenyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 claims description 4
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims description 4
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 claims description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 claims description 4
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 claims description 3
- DLZKEQQWXODGGZ-KCJUWKMLSA-N 2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 DLZKEQQWXODGGZ-KCJUWKMLSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 claims description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 2
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 claims description 2
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 claims description 2
- 241000725619 Dengue virus Species 0.000 claims description 2
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 claims description 2
- 241000714165 Feline leukemia virus Species 0.000 claims description 2
- 208000007212 Foot-and-Mouth Disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 claims description 2
- XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 claims description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 claims description 2
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 claims description 2
- GLUBLISJVJFHQS-VIFPVBQESA-N Phe-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 GLUBLISJVJFHQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 claims description 2
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 claims description 2
- 241000711897 Rinderpest morbillivirus Species 0.000 claims description 2
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 claims description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 claims description 2
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 claims description 2
- 208000004006 Tick-borne encephalitis Diseases 0.000 claims description 2
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N Tyr-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HIINQLBHPIQYHN-JTQLQIEISA-N 0.000 claims description 2
- 229940124832 acellular pertussis vaccine Drugs 0.000 claims description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 claims description 2
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010010096 glycyl-glycyl-tyrosine Proteins 0.000 claims description 2
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 claims description 2
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 claims description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010005834 tyrosyl-alanyl-glycine Proteins 0.000 claims description 2
- 108010017949 tyrosyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 claims description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 4
- 206010023927 Lassa fever Diseases 0.000 claims 1
- 206010025280 Lymphocytosis Diseases 0.000 claims 1
- 150000001243 acetic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 108010077435 glycyl-phenylalanyl-glycine Proteins 0.000 claims 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 abstract description 7
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 20
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 14
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 14
- GHAXTSRJNHYMFC-SANMLTNESA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(octadecylamino)propanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 GHAXTSRJNHYMFC-SANMLTNESA-N 0.000 description 12
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 6
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- VHUVBWVDIFVVBI-SNYZSRNZSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(octadecylamino)propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CCCCCCCCCCCCCCCCCCN[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VHUVBWVDIFVVBI-SNYZSRNZSA-N 0.000 description 4
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 4
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 4
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N Lactic Acid Natural products CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000237988 Patellidae Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N ethionamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=S)=CC=N1 AEOCXXJPGCBFJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 2
- 229960002520 hepatitis vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006259 organic additive Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 2
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMPADDIETTWOQH-QHCPKHFHSA-N (2s)-6-amino-2-(octadecylamino)hexanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN[C@H](C(O)=O)CCCCN UMPADDIETTWOQH-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N (3'as,4r,7'as)-2,2,2',2'-tetramethylspiro[1,3-dioxolane-4,6'-4,7a-dihydro-3ah-[1,3]dioxolo[4,5-c]pyran]-7'-one Chemical compound C([C@@H]1OC(O[C@@H]1C1=O)(C)C)O[C@]21COC(C)(C)O2 IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N 0.000 description 1
- FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHYRLCJMMJQUBY-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCC1=CC=C(N2C(C=CC2=O)=O)C=C1 VHYRLCJMMJQUBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 101150010882 S gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 229920002359 Tetronic® Polymers 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 206010045240 Type I hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- CWGJBBRZFIPXNZ-UHFFFAOYSA-N [C-]#N.Br Chemical compound [C-]#N.Br CWGJBBRZFIPXNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000002788 anti-peptide Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000313 clinical toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N dimethyl octanediimidate Chemical compound COC(=N)CCCCCCC(=N)OC FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N iodane Chemical compound [125IH] XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 108010036504 phenylalanylglycine Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000003566 sealing material Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/10011—Hepadnaviridae
- C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
- C12N2730/10122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Diaphragms For Electromechanical Transducers (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Oscillators With Electromechanical Resonators (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Područje tehnike
Izum je iz područja imunokemije i odnosi se na preparate za cijepljenje.
Tehnički problem
Tehnički problem koji je riješen sadašnjim izumom jesu preparati za cijepljenje koji imaju poboljšanu imunogenost. Točnije, preparati iz izuma obuhvaćaju poli-peptidni imunogen u kombinaciji s dugolančanim alkilnim spojem koji funkcionira kao imunododatak.
Stanje tehnike
Dobro je poznato da su cjepiva važna u profilaksi bolesti. Cjepiva djeluju izlaganjem životinje pacijenta stranom materijalu koji je namijenjen da aktivira imuni sistem tako da poslije životinji-pacijentu daje imunitet protiv materijala bez izlaganja pacijenta riziku od bolesti. Trenutačno je za komercijalnu primjenu razvijeno oko 20 cjepiva. Najveći broj tih cjepiva načinjen je detoksifikacijom organizma koji je uzročnik bolesti, ili dijela tog organizma, pomoću jednog od postupaka kao što su, primjerice, izoliranje specifičnog netoksičnog dijela organizma ili tretiranje toksičnog dijela organizma kemikalijama, zagrijavanje ili genetsko slabljenje. Postupak detoksifikacije često producira heterogene produkte koji su kontaminirani toksičnim nusproduktima neodređenog sastava. Zbog toga djelo-tvornostr nečistih detoksificiranih cjepiva kao imunogenih materijala može biti oštećena. Nadalje, mogu nastati neugodni i ponekad permanentno štetni sporedni efekti. Dobro poznati primjer je primjena netaknutih bakterija B. pertussis kao osnova za cjepivo za dječji veliki kašalj. Cjepivo koje se trenutačno koristi u SAD je suštinski ista verzija koja je uvedena 1940. godine. Sporedni efekti variraju od minornih reakcija do objavljenih slučajeva paralize, permanentnog oštećenja mozga i čak smrti.
Napredak rekombinantnih i drugih duboko znanstvenih kemijskih tehnologija olakšao je razvoj čistijih, pa time i sigurnijih cjepiva. Međutim, zbog ove poboljšane čistoće, koja često znači da se prirodni imunostimulanti moraju odvojiti, nova cjepiva su često slaba, ili slabo imunogena, naročito kada se usporede s njihovim prethodnicima. U cilju nadoknađivanja ovog efekta, za ispoljavanje pojačane produkcije antijela, zajedno s cjepivima koriste se imunododaci.
Trenutačno se samo soli aluminija i kalcija koriste kao dodaci za komercijalna cjepiva. Međutim, soli aluminija i kalcija nisu snažni imunododaci. Nađeno je da soli kalcija imaju samo ograničenu primjenu, a soli aluminija mogu izazvati prolazne ili kronične lokalne granulome na mjestu infekcije. L.H. Collier u Lancet na str. 1364-1367 (1970), navodi da učestanost i jačina reakcija na cjepivo za tetanusni toksoid zavisi od čistoće antigena kao i od prisutnosti aluminijeva dodatka. Pravljenje aluminijevih dodataka nije uvijek reproduktivno. Dalje, sam aluminij može stimulirati produkciju IgE antitijela koja su odgovorna za posredovanje trenutnih hipersenzitivnih reakcija. Ovo je opisano u T. Mathuhasi et al, J. Infectious Disease, 146, 290 (1982).
Posljednjih godina pozornost je usmjerena korištenju organskih spojeva kao dodataka. Samo nekoliko organskih spojeva funkcionira na sličan način s komercijalno dostupnim anorganskim solima, tj. kao nosač s laganim oslobađanjem ili depo-antigen (cjepivo) pri čemu se antigen oslobađa u toku relativno dugog vremenskog perioda na mjestu injekcije. Primjeri takvih organskih spojeva su organski surfaktanti kao što su Pluronics i Tetronics koji su neionski blok kopolimeri polioksietilena i polioksipropilena koje proizvodi BASF Corporation. Takav mehanizam laganog oslobađanja dopunskog efekta bio je dugo prihvaćen za humanu primjenu pošto se smanjuje mogućnost za pretjeranu stimulaciju imunog sistema. Pretjerana stimulacija imunog sistema može dovesti do autoimune reakcije kao što će se javiti korištenjem nekog snažnog imunostimulanta, na primjer, Freundovog dodatka. Tako je mehanizam s laganim oslobađanjem poželjni mehanizam.
Mada je pokazano da su organski dodaci većinom snažni imunostimulanti, takvi visokoaktivni dodaci teže biti toksični i stoga su neprihvatljivi za humanu primjenu. Primjeri poznatih organskih dodataka su Freundov kompletan dodatak i muramil dipeptid koji su snažni imunostimulanti, ali oba ova spoja imaju ograničenu primjenu u istraživanju na životinjama zbog razmatranja toksičnosti. Mnogi organski dodaci koji imitiraju aluminijske soli su toksičniji od aluminijskih soli na primjer, za dugolančane alkilamine koje je opisao D. Gali u Imunology, 11, 369-386, 1966, navodi se da su toksični spojevi koji uglavnom remete strukturu ćelijskih membrana.
Poznato je da će heterogeni antigeni velike molekulske mase različitog sastava stvarati komplekse s netopljivim organskim molekulama, pri čemu ove posljednje funkcioniraju kao dodaci. Ovo je fenomen nespecifičnog vezanja po tome što će se on, ako je antigeni materijal velik i dovoljno različit, vezati za ma koju netopljivu organsku molekulu, bez obzira na naboj i polarnost. Kompleksnost između organskog dodatka i biomolekula javlja se preko raznih slabih, nekovalentnih sila, kao što su hidrofobne interakcije i vodikova veza.
Ova fenomen se vidi u U.S. patentu 4 428 932 od Overella i U.S. patentu 4 258 0294 od Moloneva i suradnika. Overell opisuje da alkiltirozin funkcionira kao dodatak za terapiju alergije desenzibilizacijom kada se kompleksira s heterogenim višekomponentnim alergenima velike molekulske mase, kao što je ekstrakt raži, trave i polena. Moloney et al govore o korištenju estera aminokiselina i dugo-lančanih alkohola kao dodataka, kada se kompleksiraju s višekomponentnim tetanusnim toksoidom velike molekulske mase i poliomielitis virusom tipa I, II i III.
Tako postoji potreba da se razviju netoksični preparati tipa cjepivo-dodatak koji imaju poboljšanu imunogenost i u kojima su imunogen i dodatak netoksični.
Opis rješenja tehničkog problema s primjerima izvođenja
Predmetni izum odnosi se na poboljšane preparate za cijepljenje koji obuhvaćaju neki homogeni imunogeni polipeptid i netoksičan dugolančani alki! dodatak. Tako je, prema jednom aspektu sadašnjeg izuma, osiguran preparat za cijepljenje koji obuhvaća homogeni imunogeni polipeptid i neki dodatak koji je dugolančani alkilni spoj koji se nalazi u djelotvornoj količini za pojačavanje imunogenosti polipeptida.
Prema drugom aspektu izuma, osiguran je postupak za izražavanje imune reakcije koji obuhvaća aplikaciju toplokrvnoj životinji, uključujući čovjeka, djelotvorne količine preparata za cijepljenje, ovog izuma.
Neočekivano je nađeno da, prema ovom izumu, netoksični pozitivno nabijeni dugo-lančani alkilni spojevi, naročito esteri aminokiselina ili peptida, mogu vezati homogene polipeptide na selektivan način. Ovo je specifičan fenomen koji zavisi od tipa prisutne aminokiseline u netopljivom esteru kao i od tipa homogenog poli-peptida. Ova neočekivana specifičnost je karakteristika homogenih polipeptida koji se koriste prema ovom izumu, i ne inhibira se pomoću polipeptida slične molekulske mase. Također je prema ovom izumu nađeno da kada se standardni dodatak koji sadrži aluminij zamijeni s netoksičnim dugolančanim alkilnim spojem kao dodattkom, tipično s alkil esterom dugolančane aminokiseline, može se javiti jedan ili više efekata u svezi sa izotipom produciranog antitijela. Ovaj efekt odnosi se na proizvodnju IgE antitijela. Specifično, kada se koriste dodatni preparati dugog alkilnog niza iz izuma, razine IgE antitijela neće se bitno povećati i ostati će suštinski na zapaženim razinama, usporedivši s povećanom IgE razinom kada se koriste dodaci koji sadrže aluminij. IgE antitijela su odgovorna za neposredno posredovanje u reakcijama hiperosjetljivosti. Ima izvještaja o anafilaktičkim reakcijama, pa čak i o smrti, zbog produkcije IgE u reakciji na imunizaciju s cjepivima koja sadrže aluminij. Vidi Matuhasi i suradnici, rad koji je razmotren gore. Tako su zapažene smanjene razine stvaranja IgE s dopunskim dugolančanim alkilnim preparatima iz izuma što je blagotvoran terapeutski efekt.
Drugi efekt je taj da je odnos IgG2a antitijela prema IgG1 viši po tome što su razine oba tipa antitijela povećane kada se koriste dugolančani alkilni dodaci u preparatima iz izuma, nasuprot odnosu koji se zapaža kada se koriste dodaci sa aluminijem. Ovo povećanje odnosa je također blagotvoran efekt pošto je IgG2a antitijelo važno jer je to najdjelotvornije mišje antitijelo glede aktivacije mehanizma komplementa i ćelijske citotoksičnosti zavisne od antitijela i zaštite protiv tumora i parazita.
Pojam "homogen" kako se ovdje koristi za definiranje korištenih polipeptida u preparatima cjepiva iz izuma označava imunogene polipeptidne specije koje suštinski sadrže jedan ili više epitopa patogenog sredstva koji su načinjeni kemijskom sintezom ili biološkom sintezom. U slučaju da je prisutan više nego jedan epitop, tada će homogeni polipeptid obuhvaćati imunodominantan epitop ili epitope. Kemijska sinteza se uglavnom koristi kada je prisutan jedan epitop, dok se u situaciji kada je prisutan više nego jedan epitop može koristiti kemijska ili biološka sinteza. Homogeni polipeptid može obuhvaćati druge dijelove patogenog sredstva koji nisu toksični i koji ne utječu štetno na imunogenost homogenog polipeptida.
Netoksičan dodatak je poželjno pozitivno nabijen ester aminokiseline ili peptida, određeno ester alkilalkohola koji sadrži 14 do 20 atoma ugljika i aminokiseline, dipeptida i tripeptida.
Homogeni imunogeni polipeptid koji se koristi u preparatima iz izuma je netoksičan i može pokazati imunu reakciju u pacijentu. Imunogeni polipeptid se suštinski sastoji od jednog ili više epitopa koji su izvedeni iz patogenih sredstava koja su odgovorna za AIDS, hepatitis A, hepatitits B, hepatitis C, tetanus, polio, pertusis (toksin faktora za promociju limfocitoze (LPF)), herpes simplex, respiratorni sinzitalni virus, boginje, virus influence, bjesnoću, groznicu, rotavirus, adenovirus, rinovirus, bolest stopala i usta, virus volovske i mačje leukemije, virus goveđe kuge, virus denga gripe, encefalitis koji prenosi krpelj, malariju i virus parainfluence.
U mnogim slučajevima, poželjno je da se modificira aminokiselinska sekvenca polipeptidnog imunogena koji se javlja u prirodi, s ciljem da se omogući da homogeni polipeptid bude korisniji u preparatima za cijepljenje, koji ne mijenjaju svoja imunogena svojstva. Primjeri takvih promjena uključuju modifikacije bočnih nizova aminokiselina s ciljem imitiranja posttranslacijskih modifikacija ili za mijenjanje kemijskih osobina imunogena. Moguće su također modifikacije polipeptida s ciljem poboljšanja vremena trajanja imunogena in vivo. Dalje, moguće je dodavanje ostatka cisterna na amino ili karbonilnom terminusu polipeptida s ciljem olakšavanja vezanja (kupliranja) polipeptida za noseći protein.
Ove promjene ili modifikacije mogu biti ubacivanja, izostavljanja i supstitucije, konzervativne ili nekonzervativne. Takve promjene uključuju kombinacije aminokiselina koje se javljaju u prirodi i koje se koriste u sintezi proteina, kao što je gly, ala; val, ile, leu; asp, glu; asn, gln; ser, thr; lys, arg; phe, tyr; ala, ser; ala, thr; ala, val; ala, pro; ala, glu; leu, glu, gln, gly, phe; ile, ser; i ile, met.
Imunogeni homogeni polipeptid može se proizvesti ma kojim pogodnim postupkom, tako se polipeptid može proizvesti rekombinantnim ili sintetskim tehnikama, ili njihovim kombinacijama. Poznate rekombinantne tehnike opisane su u Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratorv, Cold Spring Harbor, New York (1982), T. Maniatis et al. Na primjer, stanica se može planirati sa više nego što izrazi željeni polipeptid putem transfekcije s genom koji kodira za taj polipeptid.
Pogodni postupci za kemijsku sintezu uključuju sintezu peptida u krutoj ili u tekućoj fazi. Pogodni postupci opisani su u Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag, 1984, M. Bodanszkv; Solid Phase Peptide Synthesis, second edition, 1984, Pierce Chemical Companv, John Moeeow Stuart and Janis Dillaha Young.
Polipeptidi mogu biti poznatim tehnikama ili zatupljeni, izduženi ili na drugi način modificirani. Dalje, polipeptid može biti linearan ili cikličan.
Pročišćavanje imunogenog polipeptida može se vršiti korištenjem ma koje obično korištene tehnike. Može se koristiti ma koji kemijski ili biosintetski postupak koji razara ili odvaja druge biomolekule i neželjeni materijal, a ostavlja nedirnut željeni imunogeni polipeptid. Poželjno se imunogeni polipeptid pročišćava kromatografskim tehnikama. Određeno, mogu se koristiti takve kromatografske tehnike kao što su kromatografija s isključivanjem mase, ionska izmjena, afinitetna kromatografija ili, najpoželjnije, tekuća kromatografija visokih svojstava (HPLC). Čistoća imunogenog polipeptida može se verificirati gel-elektroforezom.
Imunogeni polipeptid treba biti dovoljne veličine da ga pacijent može prepoznati i identificirati kao stranca. Imunogen obično ima molekularnu masu najmanje 10 000 daltona. Ako je polipeptid ispod kritične veličine koju će određeni pacijent prepoznati, polipeptid se mora vezati (kuplirati) za neki nosač što će učiniti konjugat polipeptid-nosač imunogenim. Poželjno nosači su proteini. Poželjni nosači sa korištenje na životinjama su albumin volovskog seruma i kevhole Limpet hemocijanin (KLD). Nosači koji su pogodni za humanu upotrebu uključuju tetanusni toksoid, toksoid difterije, nestanično pertusis cjepivo (LPF), materijale za ukrštenu reakciju (CRM materijali) koji su antigeno slični s bakterijskim toksinima ali su netoksični na osnovu mutacije, poželjno CRM197, koji je dobiven prema Pappenheimer et al, An Immunological Study of the Diphteria Toxin Molecule, Immunochemistrv 9, 891-906 (1927), i drugi bakterijski proteinski nosači, na primjer meningokokni protein vanjske membrane. Poželjno je da je sam proteinski nosač imunogen.
Polipeptid se može vezati (kuplirati) za nosač ma kojim konvencionalnim postupkom poznatim iz tehnike. Mada je korištenje simetričnih linkera (vezivnih elemenata) kao što su neki alkil aldehidi (npr. glutaraldehid) ili neki alkil diimidat (npr. dimetilsuberimidat) unutar obima izuma, poželjno je da se koristi heterobifunkcionalni linker. Posljednji osigurava da se veza polipeptida s nosačem javlja na definiran i reproduktivan način, izbjegavanjem takvih sporednih reakcija kao što je umrežavanje nosećih molekula, što bi vodilo do nežistih heterogenih preparata. Primjeri poželjnih heterobifunkcionalnih linkera uključuju N-sukcinimidil-3-(2-piuridilditio)propionat kao što je opisano u J. Carlsson et al, Biochem. J. 173, 733-737 (1978), i sulfosukcinimidil-4-(p-maleimidofenil)butirat, kao što je opisano u J.D. Bangs et al, /. Cell. Biology 103, 255-263 (1966). Najpoželjniji je sulfo-sukcinimidil-4-(N-maleimidometil)cikloheksan-l-karboksilat, kao što je opisano u S. Hashida et al, J. Applied Biochem. 6, 56-63 (1984).
Primjeri pogodnih homogenih polipeptida su oni koji suštinski sadrže istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen hepatitis virusa, kao što je homogeni polipeptid koji suštinski sadrži istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen hepatitisa B. Drugi primjer je homogeni polipeptid koji sadrži jedan ili više epitopa površinskog antigena hepatitisa. Dalji primjeri su homogeni polipetid koji suštinski sadrži istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen gD podjedinice herpes simplex virusa, homogeni polipeptid koji suštinski sadrži jedan ili više epitopa gp41 humanog virusa imunodeficijencije ili homogeni polipeptid koji suštinski sadrži istu aminokiselinsku sekvencu kao faktor za promociju limfocitoze (LPF).
Alkil dugolančani dodatak, kao i ma koji spojevi koji proizlaze iz njegova metabolizma u pacijentu, trebaju biti netoksični. Dobro je poznato da su masni dugolančani alkoholi prirodne netoksične tvari. Kao jedan primjer, nađeno je da je oktadekanol posve netoksičan na ljudima, kao što je naznačeno s oralnom LD50vrijednošću koja je veća od 15 g/kg kao što se nalazi u Gosselin "Clinical Toxicology of Commercial Products", Fourth Edition, 1976. Nađeno je da je oktadeciltirozin netoksičan na životinjama i glavni dio prirodnih aminokiselina je netoksičan: CL. Pennev et al, Vaccine 4, 99-100 (1986). Zato treba očekivati da oktadecil-tirozin i esteri drugih alkohola i aminokiselina neće ispoljavati nikakvu toksičnost na ljudima.
Dodatak treba biti sposoban stvarati mikrodijelove veličine između oko 150 µm-1 mm (poželjno oko 250 µm) u vodenom mediju, tako da se stvara suspenzija jednolike konzistencije. Dalje, mikrodjelići dodatka trebaju omogućiti adsorpciju imunogena, tako da se omogućuje polagano oslobađanje imunogena u pacijenta.
U poželjnoj realizaciji sadašnjeg izuma je spoj formule:
[image]
u kojoj je C atom vodika, aminokiselinski ostatak ili peptidni ostatak, uključujući ostatake do 10 aminokiselina (tj. do dekapeptida); D je atom vodika ili takva farmaceutski prihvatljiva kiselina kao što je klorovodična, bromovodična, fosforna, sumporna, vinska, mliječna ili octena kiselina; E je 4-hidroksibenzil, benzil, 4-hidroksifenil, fenil, 4-aminobutil, izopropil, metil, vodik ili drugi ostatak aminokiseline koja se javlja u prirodi; A je (CH2)n, kisik ili CH2O i B je (CH2)n ili kisik, gdje je n 0 do 4, ali je A≠B za (CH2)n ili kisik; i R je alkil grupa koja sadrži 12 do 20 atoma ugljika.
Poželjno C može biti ili vodik, neka aminokiselina, neki dipeptid ili neki tripeptid. Ako je C aminokiselina, aminokiselinska sekvenca dodatka mora se izabrati od, na primjer, tirozil-glicina, glicil-glicina, glicil-tirozina ili fenil-alanil-glicina. Ako je C neki dipeptid, aminokiselinska sekvenca dodatka mora se izabrati od, na primjer, tirozil-glicil-glicina ili tirozil-alanil-glicina. Ako je aminokiselinski ostatak kiralni, može se koristiti D-enantiomer, L-enantiomer ili njihove smjese. Naročito je poželjno da dodatak obuhvaća a-aminokiselinu.
Naročito je poželjno za E da je izabran iz grupe koja sadrži 4-hidroksibenzil, benzil, 4-hidroksifenil, fenil i vodik. E je najpoželjnije da bude 4-hidroksibenzil.
Kada je A CH2O i B je (CH2)n spojevi su N-aminoaciletanolamin-O-stearati.
Kada je A CH2O i B je kisik spojevi su karbonati.
Poželjnije je dodatak klorhidrat estera aminokiseline, gdje je C vodik, D je klorovodična kiselina, A je (CH2)n, gdje je n 0-4, i B je kisik.
Najpoželjnije je dodatak oktadecil-tirozin klorhidrat gdje je C vodik, D je klorovodična kiselina, E je 4-hidroksibenzil i R je oktadecil, A je (CH2)n gdje je n nula i B je kisik.
Uglavnom, kada C nije vodik, skelet dodatka obuhvaća suštinski peptidne veze, tj. karboksilat aminokiselinskog ostatka, na način glava-rep. Alternativno, peptidna veza može biti tioamidna.
Dodatak se može načiniti ma kojim pogodnim postupkom, na primjer, aminoesterski dio dodatka može se sintetizirati ma kojim jednim od većeg broja poznatih postupaka kao što je opisano u M. Bodanszkv et al, "Peptide Synthesis" Second Edition, Wiley, New York, 1976, i R.W. Roeske, Petides (N.Y.) 3, 102 (1981). Naročito poželjan postupak je postupak esterifikacije koji je kataliziran sa metansulfonskom kiselinom, koji je opisan u C. Penney et al, J. Organic Chemistiy 50, 1457-1459 (1985).
Kada je dodatak di- ili tripeptid, peptidne veze se mogu stvarati ma kojim od postupaka koji su opisani u "Peptide Synthesis", tekstu koji je spomenut gore. Dalje, peptidne veze se mogu formirati ili prema protokolima u čvrstoj fazi ili u tekućoj fazi. Mnogi protokoli i reagensi postoje koji su korisni za stvaranje amidnih, tioamidnih ili tioesterskih veza.
Za vrijeme spravljanja dodatka, može biti poželjno da se privremeni zaštite reaktivne funkcionalne grupe. Na primjer, amini se mogu zaštititi uretanskim tipovima grupa. Aikoholi sa t-butil ili benzii grupama i kiseiine esterskim grupama. Pogodni uvjeti za zaštitu/uklanjanje zaštite opisani su u "Peptide Synthesis", tekstu koji je gore spomenut.
Dodatak se može pročistiti ma kojim od ranije opisanih tehnika. Poželjna tehnika pročišćavanja je kromatografija na silikagelu, naročito "fleš" (brza) kromatografskja tehnika kao što je opisana u W. Clark Still et al, J. Organic Chemistry 43, 2923-2925 (1978). Međutim, mogu se koristiti drugi kromatografski postupci, uključujući HPLC, za pročišćavanje dodatka. Također se može koristiti kristalizacija za pročišćavanje dodatka. U nekim služajevima nije potrebno pročišćavanje pošto se izravno iz sinteze dobiva produkt analitičke čistoće.
Preparati za cijepljenje iz izuma priređuju se fizičkim miješanjem dodatka sa homogenim imunogenim polipeptidom u odgovarajućim sterilnim uvjetima u skladu s poznatim tehnikama za proizvodnju preparata sa dodatkom. Kao što će biti jasno iz daljnje diskusije, imunogeni polipeptid će se miješati s dodatkom ili samostalno ili zajedno s nekim pogodnim nosačem.
Količine dodatka i homogenog polipeptidnog imunogena, ili samostalnog ili vezanog (kupliranog) za neki nosač, koje su potrebne za izražavanje imune reakcije za ljudima su u međusobnoj svezi, ali su unutar intervala koji se uglavnom koriste u konvencionalnim cjepivima. Na primjer, korištenje povećavajućih količina dodatka može sugerirati da se mogu koristiti smanjujuće količine imunogena, i obrnuto. Poželjna količina dodatka je 0,01 do 5 mg/ml preparata, na primjer, 0,05 mg/ml do 3 mg/ml, poželjno 0,5 do 1,0 mg/ml. Poželjna količina imunogena je između oko 1 do 100 mikrograma/ml, poželjno oko 5 do 40 mikro-grama/ml. Doza će zavisiti od pacijenta koji prima cjepivo i od takvih čimbenika kao što su veličina, težina i starost pacijenta.
Preparati za cijepljenje iz ovog izuma mogu se formulirati korištenjem sličnih tehnika s onima koje se koriste za druge farmaceutske polipeptidne preparate. Tako se dodatak i imunogen mogu pohraniti u liofiliziranom obliku i rekonstruirati u fiziološki prihvatljivom nosaču tako da se stvori prije davanja suspenzija. Alternativno se dodatak i imunogen mogu pohraniti u nosaču. Poželjni nosači su sterilne otopine, određeno, sterilne puferske otopine, kao što je fosfatna puferska slana otopina. Ma koji postupak za kombiniranje dodatka i imunogena u nosaču koji zadržava imunogenost smjese je odgovarajući.
Nosač može sadržavati prezervanse ili druge poznate aditive koji se koriste za poboljšavanje sterilnosti na polici ili djelotvornosti smjese. Pogodni prezervansi uključuju, primjerice, timerosal.
Volumen jedne doze cjepiva iz ovog izuma može varirati ali će uglavnom biti unutar intervala koji se obično koriste u konvencionalnim cjepivima. Volumen jedne doze je poželjno između oko 0,2 ml i oko 0,5 ml pri koncentracijama imunogena i dodatka koje su gore naznačene.
Preparati za cijepljenje iz izuma mogu se davati ma kojim pogodnim sredstvima. Poželjni postupci za davanje uključuju potkožno, intramuskularno, intradermalno ili nazalno davanje. Alternativno se smjesa može oslobađati iz biodifundirajućeg implanta. Može se koristiti jedno davanje. Alternativno se može izvršiti serija davanja tijekom nekoliko dana ili tjedana.
Primjeri
Sljedeći neograničavajući primjeri ilustriraju izum.
Primjer 1
Ovaj primjer opisuje priređivanje homogenog površinskog antigena hepatitisa B (HBsAg). Rekombinantni HBsAg je izoliran iz humanih 3T3 ćelija koje se inficiraju s površinskim antigenom virusa hepatititisa B koji je osigurala Mount Sinai School of Medicine (Sells et al, Production of Hepatitis B virus particles in HepG2 cells transfected with clones Hepatitits B virus DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 1005 (1987). Stanice su rasle na RPMI podlozi (Gibco) koja je dopunjena sa 10% FCS (Gibco), 1 mM natrij-piruvata i 0,5% gentamicina. U ovom trenutku, mogu se koristiti postupci pročišćavanja, naime centrifugiranje s gradijentom gustoće ili imunoafinitetna kromatografija. U centrifugiranju s gradijentom gustoće, stanični supernatant se vrti na 2000 rpm 10 minuta da se odvoje ma kakve 3T3 stanice, i tada se antigen pročisti taloženjem uz pomoć polietilenglikola (MW 8000) pri koncentraciji 10% (w/v). Dobivena granula se resuspendira u TNE puferu (10 mM Tris HC1 (pH 8,0), 100 mM NaCl, 1 mM EDTA (pH 8,0)) i vrši se centrifugiranje u gradijentu 20% do 50% (w/v) cezij-klorida u TNE puferu u SW41 polialomernim epruvetama. Gradijenti se centrifugiraju pri 35 000 rpm 60 sati na 4°C. Frakcije se skupe sa dna epruvete i gustoća se odredi korištenjem refraktometra. Frakcije s gustoćom (1,351-1,358) se spoje i dijaliziraju se prema PBS, koncentriraju se i analiziraju za homogenu koncentraciju HBsAg korištenjem Abbot RIA kita, korištenjem pozitivne kontrole kao ekvivalenta za 20 ng/ml antigena.
Postupak imunoafinitetne kromatografije se uglavnom vrši centrifugiranjem staničnog supernatanta pri 2000 rpm tijekom 10 minuta tako da se odvoje ma kakve 3T3 stanice. Anti-HBsAg afinitetna kolona, načinjena kovalentnim vezanjem anti-HBsAg monoklonskog antitijela za bromcijanom aktiviranu Sepharose CL4B se ispere sa PBS. Provjeri se OD280 nm eluenta i treba biti < 0,010 (OD280 nm=optička gustoća (apsorbancija) na 280 nm). Supernatant teče kroz kolonu dva puta da se osigura da se antigen apsorbirao na koloni. Kolona se tada ispere 3 puta da se odvoji ma kakvo nespecifično vezanje proteina za kolonu (provjeriti OD280 nm<0,010), i zatim se eluira sa glicinom/HCl (pH 2,8). Pripremi se 10 epruveta s dovoljno tris pufera (pH 11) u svakoj epruveti za neutralizaciju frakcije od 2 ml glicina/HCl. Deset epruveta se analizira pomoću OD280 nm ili mjerenjem HBsAg pomoću RIA. Frakcije koje sadrže homogeni polipeptid se kombiniraju i dijaliziraju prema PBS. Kolona se ispere 3 puta sa PBS. Kolona se čuva na PBS/natrij-azid.
Primjer 2
Sljedeće poglavlje opisuje opći postupak za kompleksiranje homogenog polipetidnog imunogena sa imunododatkom na bazi dugolančanog alkilestera.
Dugolančani alkilester aminokiseline kao imunododatak (50 mg) stavi se u normalnu posudu od 25 ml ili u Erlenmaverovu tikvicu s polugom za miješanje i zatvori se pamučnim čepom, ili drugim materijalom koji labavo zatvara. Oblik soli imunododatka se sterilizira zagrijavanjem u peći na odgovarajućoj temperaturi, kao što je diktirano točkom taljenja, tijekom 20 sati. U ohlađenu tikvicu se doda slana otopina koja je puferirana fosfatom (25 ml), sterilizirana filtracijom, >50 mM, pH=6-7. Dobivena suspenzija se blago miješa 3-20 sati, čep se zamijeni sa staklenim poklopcem i sve se drži na 4°C dok ne bude potrebno za kompleksiranje.
Za kompleksiranje imunododatka s homogenim polipeptidom. suspenzija se dovede na sobnu temperaturu i potpuno se miješa. Potrebni volumen suspenzije se prenese pipetom širokog otvora u jednaki volumen polipeptidne otopine, tako da je konačna koncentracija imunododatka bila 1 mg/ml. Međutim, volumen razrjeđivanja može se podesiti prema potrebi tako da se dobije ma koja druga željena koncentracija imunododatka. Suspenzija imunododatak-polipeptid se blago miješa preko noći na 4°C. Na kraju reakcije kompleksiranja pusti se da se suspenzija staloži, centrifugira se ako je potrebno, i mjeri se apsorbancija supernatanta na 280 nm da se odredi količina nevezanog polipeptida. Uglavnom, 30%-90% vezanog polipeptida predstavlja dobar kompleks imunododatak-polipeptidni imunogen.
Primjer 3
Ovaj primjer pokazuje sposobnost nekoliko oktadecil aminokiselinskih estera da budu dodatak homogenom polipeptidu koji je kandidat za cjepivo protiv hepatitisa.
BALB/c miševi se imuniziraju sa 50 ng površinskog antigena hepatititsa B u prisutnosti dodatka za miševe nekontrole i u odsutnosti dodatka za kontrolne miševe. Površinski antigen hepatitisa B dobiven je iz 3T3 stanica inficiranih s genom za površinski antigen. 100 µg oktadecil-aminokiseline kompleksira se sa polipeptidom kao što je opisano u primjeru 2. Ova smjesa, ukupnog volumena 0,1 ml, injicira se na dan 1 intramuskularnim putem i miševi se uzorkuju u dane 7, 14, 21, 28, 35, 42 i 61. Miševi se tretiraju s 35 ng polipeptida na dan 21.
Odredi se koncentracija antitijela u serumima pomoću radioimunotesta. Koncentracija antitijela procijenjena je uspoređivanjem sa standardnom krivuljom koja je dobivena korištenjem monoklonskog antitijela. Rezultati su prikazani u tablici 1.
Tablica 1
Reakcija antitijela na površinski antigen hepatitisa B u prisutnostu oktadecil-aminokiseline kao imunododatka
[image] *Koncentracija anti-HBsAg antitijela, ng/ml
Aminokiselinsku sekvencu površinskog antigena hepatitisa B za aminokiseline 1 do 226 (HBsAg-adw (S genski produkt)) opisao je Bhatnagar P.K. et al, Proc. Natl. Acad. Science USA 79, 4400-4404 (1982), i taj rad je ovdje specifično unijet kao referenca.
Rezultati u tablici 1 pokazuju da je zapažen efekt dodatka između dugolančanog alkilestera sa aminokiselinama i imunogenog polipeptida, površinskog antigena hepatitisa B, specifičan fenomen. Ovo se može vidjeti uspoređivanjem oktadecil-tirozina i oktadecil-lizina, i uspoređivanjem oktadecil-forfenicinola i oktadecil-forfe-nicina.
Primjer 4
Ovaj primjer demonstrira sposobnost oktadecil-tirozina da funkcionira kao doza dodatka sa polipeptidom koji je kandidatno cjepivo za hepatitis.
Protokol je opisan gore, osim što su miševi imunizirani sa 80 ng površinskog antigena hepatitisa B, dano im je 50 ng polipeptida i žrtvovani su u dane 7, 14, 28 i 35. Imunizacije se vrše u prisutnosti dodatka za miševe nekontrole i u odsutnosti dodatka za kontrolne miševe. Rezultati su prikazani u tablici 2.
Tablica 2
Reakcija antitijela na površinski antigen hepatitisa B u prisutnosti oktadecil-tirozina
[image] *CPM, vrijednost prije žrtvovanja bila je 11,5
Rezultati u tablici 2 pokazuju da je efekt dodatka zavisan od koncentracije dugolančanog alkilestera, oktadecil-tirozina, prisutnog u preparatu. Kada se aplicirana količina dodatka povećava, javlja se srazmjerno smanjivanje titra antitijela dok se ne dostigne optimalna vrijednost titra, izvan koje se titar antitijela ne povećava.
Primjer 5
Ovaj primjer demonstrira sposobnost oktadecil-tirozina da funkcionira kao doza dodatka, sa polipeptidom koji odgovara fuziogenoj sekvenci iz proteina omotača virusa humane imunodeficijencije, HIV-1.
1) HIV Peptidna sekvenca
Peptidna sekvenca HlV-a bila je kako slijedi.
Produkt: BC-101
303-
H-Val-Ala-Pro-Thr-Lys-Ala-Lys-Arg-Arg-Val-Val-Gln-Arg-GIu-Lys-Arg-Ala-Val-GIy-Ile-Gly-Ala-Leu-Phe-Leu-GIy-Phe-Leu-Gly-Ala-Ala-Gly-Ser 535
Mol. masa 3585,14 (skelet)
2) Eksperimenti s miševima
BALB/c miševi se imuniziraju sa 100 ug kemijski sintetiziranog polipeptida, koji odgovara aminokiselinskoj sekvenci ostataka 503-535 HIV-1, koje je vezana (kuplirana) sa Keyhole Limpet hemocijaninom (KLH). Oktadecil-tirozin klorhidrat, 10-100 µg, kompleksira se sa polipeptidom kao što je opisano u primjeru 2. Ova smjesa, u ukupnom volumenu 0,1 ml, injicira se na dan 1, i opet na dan 21. Miševi se uzorkuju u dane 7, 14, 21, 28 i 35.
Koncentracija antitijela u serumima određena je radioimuno-testom. Koncentracija antitijela procijenjena je uspoređivanjem sa standardnom krivuljom koja je dobivena korištenjem poliklonskog antitijela. Rezultati su prikazani u tablici 3.
Tablica 3
Reakcija antitijela na HIV-1 polipeptid, ostatke 503-535, u prisutnosti oktadecil-tirozina
[image] *Koncentracija antipeptidnog antitijela, ug/ml
Rezultati u tablici 1 pokazuju da dugolančani alkilester, oktadecil-tirozin, pokazuje efekt dodatka, zavisan o koncentraciji, s drugim imunogenim polipeptidom, naime s polipeptidom koji je izveden iz aminokiselina 503 do 535 HIV proteina gp41. Opet, dostiže se optimalni titar antitijela izvan kojega se titar dalje ne povećava.
3) Eksperimenti s babunima
Babuni se imuniziraju sa 300 µg kemijski sintetiziranog polipeptida, koji odgovara aminokiselinskoj sekvenci ostataka 503-535 HIV-1, vezanoj (kupliranoj) na Kevhole Limpet hemocijanin. 500 ug oktadecil-tirozin klorhidrata kompleksira se sa polipeptidom, kao što je opisano u primjeru 2. Ova smjesa u ukupnom volumenu 1,0 ml injicira se na dan 1 i opet na dan 35. Životinje se uzorkuju 3 dana prije prve imunizacije i u dane 14, 32 i 49. Isti eksperiment je proveden s druga dva babuna, ali sa polipeptidom koji odgovara aminokiselinskoj sekvenci 526-535 HIV-1.
Koncentracija antitijela u serumima mjerena je izravno radioimunotestom. Titracija se vrši inkubacijom uzoraka na pločama presvučenim s konjugatom peptid-albumin, i reakcijom sa zečjim antimajmunskim imunoglobulinom koji je obilježen jodom-125. Rezultati su prikazani u tablici 4.
Tablica 4
Reakcija antitijela na HIV-1 polipeptid na babunima u prisutnosti 500 ug oktadecil-tirozin klorhidrata
[image] *CPM poslije povlačenja iz skeleta albumina iz volovskog seruma sa presvučenih ploča.
Rezultati u tablici 4 pokazuju da je zapažen efekt dodatka između dugolančanog alkilestera, oktadecil tirozina i imunogenog HIV polipeptida, na višim životinjama, primjerice babunima.
Primjer 6
Ovaj primjer demonstrira promjenu u izotopu koja se javlja idući od kandidatnog cjepiva koje je dopunjeno spojem aluminija do kandidatnog cjepiva koje je dopunjeno oktadecil-tirozinom.
Protokol je bio kao što je bilo opisano u primjeru 5, poglavlje 2 (miševi), osim što je korišteno 50 µg oktadecil-tirozina i za primarnu i za sekundarnu (dan 21) imunizaciju. Reakcija izotopa antitijela određena je radioimunotestom. Koristi se anti-mišje izotopno antitijelo koje je obilježeno tricijem. Titracija se vrši inkubacijom uzoraka na pločama koje su presvučene površinskim antigenom hepatititsa B koji je pročišćen imunoafinitetnom kromatografijom. Rezultati koji su dani kao radioaktivnost (cpm) vezanog izotopa antitijela, prikazani su u tablici 5.
Tablica 5
Variranje reakcije antitijela površinskog antigena anti-hepatititsa B
[image] Rezultati koji su prikazani u tablici 5 pokazuju da promjena u reakciji na izotop antitijela ide od aluminija do dugolančanog alkilestera (oktadecil-tirozina, OT), kada se koriste kao dodatak za imunogeni polipeptid, površinski antigen hepatitisa B. Određeno, naglašava se da su razine IgE antitijela povišene kada se koristi aluminij, dok nema značajnog povećanja u razinama IgE, u usporedbi- s onima koje se dobivaju s kontrolom, kada se koristi oktadecil-tirozin (OT).
Claims (26)
1. Preparat za cijepljenje, naznačen time, što obuhvaća homogeni imunogen polipeptid i djelotvornu količinu najmanje jednog dodatka formule:
[image]
u kojoj
C se bira iz grupe koju čine vodik, aminokiselinski ostatak i peptidni ostatak;
D se bira iz grupe koju čine vodik i farmaceutski prihvatljiva kiselina;
E se bira iz grupe koju čine 4-hidroksibenzil, benzil, 4-hidroksifenil, fenil, 4-aminobutil, izopropil, metil, vodik i ostatak prirodno zastupljene kiseline; ,
A je (CH2)n, kisik ili CH2O i B je (CH2)n ili kisik, gdje je n 0-4, uz ograničenje da A i B nisu isti za (CH2)n i kisik; i
R je alkil koji sadrži 12 do 20 atoma ugljika.
2. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti dodatak obuhvaća amino-kiselinu koja ima L-konfiguraciju.
3. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti dodatak obuhvaća aminokiselinu koja ima D-konfiguraciju.
4. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti dodatak obuhvaća amino-kiselinsku smjesu D i L-konfiguracije.
5. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što se E bira iz grupe koju čine 4-hidoksibenzil, benzil, 4-hidroksifenil, fenil i vodik.
6. Preparat prema zahtjevu 5, naznačen time, što je E 4-hidroksibenzil.
7. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što se C bira iz grupe koju čine vodik, aminokiselina i peptidni ostatak koji uključuje do 10 aminokiselinskih ostataka.
8. Preparat prema zahtjevu 7, naznačen time, što se spomenuti peptidni ostatak bira između dipeptida i tripeptida.
9. Preparat prema zahtjevu 7, naznačen time, što se aminokiselina bira iz grupe koju čine tirozil-glicin, glicil-glicin, glicil-tirozin i fenilalanil-glicin.
10. Preparat prema zahtjevu 8, naznačen time, što je C dipeptid i bira se iz grupe koju čine tirozil-glicilglicin i tirozil-alanilglicin.
11. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što se farmaceutski prihvatljiva kiselina bira iz grupe koju čine klorovodična, bromovodična, sumporna, vinska, mliječna i octena kiselina.
12. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti dodatak obuhvaća a-aminokiselinu.
13. Preparat prema 'zahtjevu 1, naznačen time, što se spomenuti homogeni polipeptid bira iz grupe koja sadrži linearan i ciklički polipeptid.
14. Preparat prema zahtjevu 13, naznačen time, što je spomenuti homogeni polipeptid vezan (kupliran) za biološki nosač.
15. Preparat prema zahtjevu 14, naznačen time, što se spomenuti nosač bira iz grupe koju čine tetanusni toksoid, difterijski toksoid, nećelijsko pertusis cjepivo (LPF), materijal za križnu reakciju (CRM) i bakterijski proteinski nosač.
16. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što je spomenuti CRM CRM 197.
17. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što se spomenuti homogeni polipeptid sastoji suštinski od jednog ili više epitopa izvedenih iz patogenih sredstava koja su odgovorna za stanje izabrano od sljedećih: AIDS (SIDA), hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, tetanus, polio, pertussis (toksin faktora za promociju limfocitoze), herpes simplex, respiratorni sincitalni virus, boginje, virus inluence, bjesnoća, lasa groznica, rotavirus, adenovirus, rinovirus, bolest stopala i usta, virus volovske i mačje leukemije, virus goveđe kuge, virus denga gripe, encefalitis koji prenose krpelji, malarija i virus parainfluence.
18. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid ima suštinski istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen hepatitis virusa.
19. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, gdje spomenuti polipeptid obuhvaća jedan ili više epitopa površinskog antigena hepatitis virusa.
20. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid obuhvaća suštinski istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen hepatitisa B.
21. Preparat prema zahtjevu 20, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid ima suštinski istu aminokiselinsku sekvencu kao površinski antigen podjedinice herpes simplex virusa.
22. Preparat prema zahtjevu 20, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid obuhvaća jedan ili više epitopa qpl20 virusa humane imunodeficijencije.
23. Postupak za priređivanje preparata za cijepljenje, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid obuhvaća jedan ili više epitopa qp41 virusa humane imunodeficijencije.
24. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što spomenuti homogeni polipeptid ima suštinski isu aminokiselinsku sekvencu kao i faktor za promociju limfocitoze.
25. Preparat prema zahtjevu 1, naznačen time, što je dodatak ester alkil alkohola koji sadrži 14 do 20 atoma ugljika i aminokiseline, dipeptida ili tripeptida.
26. Preparat prema zahtjevu 25, naznačen time, što je spomenuti dodatak oktadecil tirozin.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US51846090A | 1990-05-07 | 1990-05-07 | |
| YU79691A YU79691A (sh) | 1990-05-07 | 1991-05-07 | Poboljšani preparati vakcine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HRP930658A2 true HRP930658A2 (en) | 1997-12-31 |
Family
ID=24064028
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HRP-796/91A HRP930658A2 (en) | 1990-05-07 | 1993-04-01 | Improved vaccine compositions |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0597838B1 (hr) |
| JP (1) | JPH05506234A (hr) |
| CN (1) | CN1056816A (hr) |
| AT (1) | ATE173936T1 (hr) |
| AU (1) | AU7777991A (hr) |
| CA (1) | CA2082425A1 (hr) |
| CS (1) | CS131891A3 (hr) |
| DE (1) | DE69130576T2 (hr) |
| DK (1) | DK0597838T3 (hr) |
| ES (1) | ES2124701T3 (hr) |
| FI (1) | FI925032A0 (hr) |
| HR (1) | HRP930658A2 (hr) |
| HU (1) | HUT65493A (hr) |
| IE (1) | IE911527A1 (hr) |
| IL (1) | IL97985A0 (hr) |
| MX (1) | MX172210B (hr) |
| NO (1) | NO924271L (hr) |
| NZ (1) | NZ238042A (hr) |
| TW (1) | TW221676B (hr) |
| WO (1) | WO1991016926A1 (hr) |
| YU (1) | YU79691A (hr) |
| ZA (1) | ZA913214B (hr) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MY111880A (en) * | 1992-03-27 | 2001-02-28 | Smithkline Beecham Biologicals S A | Hepatitis vaccines containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a |
| US6620414B2 (en) | 1992-03-27 | 2003-09-16 | Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) | Hepatitis vaccines containing 3-0-deacylated monophoshoryl lipid A |
| AU3541495A (en) * | 1994-09-01 | 1996-03-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Therapeutic remodeling in aids |
| FR2726471B1 (fr) * | 1994-11-07 | 1997-01-31 | Pf Medicament | Procede pour ameliorer l'immunogenicite d'un compose immunogene ou d'un haptene et application a la preparation de vaccins |
| US6027731A (en) * | 1998-11-17 | 2000-02-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Pertussis toxin induced lymphocytosis |
| JP2003523721A (ja) | 1998-12-31 | 2003-08-12 | カイロン コーポレイション | 抗原性ｈｉｖｃ型ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、ポリペプチド、およびそれらの使用 |
| ES2299276T3 (es) | 1998-12-31 | 2008-05-16 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Polipeptidos env del vih modificados. |
| US7211659B2 (en) | 2001-07-05 | 2007-05-01 | Chiron Corporation | Polynucleotides encoding antigenic HIV type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
| US20030170614A1 (en) | 2001-08-31 | 2003-09-11 | Megede Jan Zur | Polynucleotides encoding antigenic HIV type B polypeptides, polypeptides and uses thereof |
| JP2006502213A (ja) * | 2002-10-10 | 2006-01-19 | イエダ リサーチ アンド デベロップメント カンパニー リミテッド | 脂肪族アルコール類の塩基性エステルおよび抗炎症薬または免疫調整薬としての使用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1138773A (en) * | 1979-04-18 | 1983-01-04 | George Wojcik | Synthetic adjuvants for stimulation of antigenic responses |
| US4639371A (en) * | 1984-10-02 | 1987-01-27 | New York Blood Center, Inc. | Hepatitis B antigenic compositions and vaccines against hepatitis B derived therefrom |
| GB8807860D0 (en) * | 1988-04-05 | 1988-05-05 | Connaught Lab | Pertussis vaccine |
| NZ230424A (en) * | 1988-08-25 | 1992-05-26 | Liposome Co Inc | Liposomal composition comprising an externally disposed antigen |
-
1991
- 1991-04-28 IL IL97985A patent/IL97985A0/xx unknown
- 1991-04-29 ZA ZA913214A patent/ZA913214B/xx unknown
- 1991-05-01 CA CA002082425A patent/CA2082425A1/en not_active Abandoned
- 1991-05-01 JP JP91508106A patent/JPH05506234A/ja active Pending
- 1991-05-01 AT AT91908598T patent/ATE173936T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-05-01 HU HU9203480A patent/HUT65493A/hu unknown
- 1991-05-01 DE DE69130576T patent/DE69130576T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-05-01 AU AU77779/91A patent/AU7777991A/en not_active Abandoned
- 1991-05-01 ES ES91908598T patent/ES2124701T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-05-01 DK DK91908598T patent/DK0597838T3/da active
- 1991-05-01 WO PCT/CA1991/000144 patent/WO1991016926A1/en active IP Right Grant
- 1991-05-01 EP EP91908598A patent/EP0597838B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-05-03 NZ NZ238042A patent/NZ238042A/xx unknown
- 1991-05-06 MX MX025669A patent/MX172210B/es unknown
- 1991-05-06 IE IE152791A patent/IE911527A1/en unknown
- 1991-05-06 CS CS911318A patent/CS131891A3/cs unknown
- 1991-05-07 CN CN91102899A patent/CN1056816A/zh active Pending
- 1991-05-07 YU YU79691A patent/YU79691A/sh unknown
- 1991-07-15 TW TW080105479A patent/TW221676B/zh active
-
1992
- 1992-11-06 NO NO92924271A patent/NO924271L/no unknown
- 1992-11-06 FI FI925032A patent/FI925032A0/fi not_active Application Discontinuation
-
1993
- 1993-04-01 HR HRP-796/91A patent/HRP930658A2/hr not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0597838A1 (en) | 1994-05-25 |
| HU9203480D0 (en) | 1993-01-28 |
| NO924271D0 (no) | 1992-11-06 |
| MX172210B (es) | 1993-12-07 |
| TW221676B (hr) | 1994-03-11 |
| FI925032A (fi) | 1992-11-06 |
| IE911527A1 (en) | 1991-11-20 |
| DK0597838T3 (da) | 1999-08-16 |
| EP0597838B1 (en) | 1998-12-02 |
| NZ238042A (en) | 1993-12-23 |
| DE69130576D1 (de) | 1999-01-14 |
| CN1056816A (zh) | 1991-12-11 |
| ZA913214B (en) | 1992-09-30 |
| ATE173936T1 (de) | 1998-12-15 |
| JPH05506234A (ja) | 1993-09-16 |
| NO924271L (no) | 1993-01-07 |
| AU7777991A (en) | 1991-11-27 |
| WO1991016926A1 (en) | 1991-11-14 |
| YU79691A (sh) | 1994-06-10 |
| IL97985A0 (en) | 1992-06-21 |
| CA2082425A1 (en) | 1991-11-08 |
| FI925032A0 (fi) | 1992-11-06 |
| ES2124701T3 (es) | 1999-02-16 |
| DE69130576T2 (de) | 1999-07-29 |
| HUT65493A (en) | 1994-06-28 |
| CS131891A3 (en) | 1992-02-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1329766C (en) | T cell epitopes of the hepatitis b virus nucleocapsid protein | |
| ES2207177T3 (es) | Proteinas nucleo de la hepatitis b estrategicamente modificas y sus derivados. | |
| US5143726A (en) | T cell epitopes of the hepatitis B virus nucleocapsid protein | |
| US4818527A (en) | T cell epitopes of the hepatitis B virus nucleocapsid protein | |
| AU623106B2 (en) | Diagnostic system | |
| US5039522A (en) | Immunogens containing peptides with an attached hydrophobic tail for adsorption to hepatitis B virus surface antigen | |
| JPS61501705A (ja) | Ｔ細胞及びｂ細胞決定基の両者を含む合成ｂ型肝炎ウイルスワクチン | |
| JPH0674210B2 (ja) | 抗原の免疫原性の増強 | |
| WO1995031480A1 (en) | Heterodimer polypeptide immunogen carrier composition and method | |
| AU2195395A (en) | Synthetic peptide based immunogens for the treatment of allergy | |
| Boeckler et al. | Design of highly immunogenic liposomal constructs combining structurally independent B cell and T helper cell peptide epitopes | |
| CA2331258A1 (en) | Enhancement of b cell activation and immunoglobulin secretion by co-stimulation of receptors for antigen and ebv gp350/220 | |
| CZ303217B6 (cs) | Zpusob výroby vakcíny proti hepatitide typu B | |
| JP2004189751A (ja) | 非細胞性（Ａｃｅｌｌｕｌａｒ）百日咳ワクチン及びその調製方法 | |
| HRP930658A2 (en) | Improved vaccine compositions | |
| US4584195A (en) | Broad spectrum vaccine against gonorrhea | |
| JP4099059B2 (ja) | 特定交叉反応性を高める抗原構造を得る方法 | |
| US4622223A (en) | Broad spectrum vaccine against gonorrhea | |
| Leibl et al. | Adjuvant/carrier activity of inactivated tick-borne encephalitis virus | |
| EP0542753A1 (en) | Epitopes of the pre-s region of hepatitis b virus surface antigen | |
| Martin | Polymerized serum albumin beads for use as slow-release adjuvants | |
| JPH05170797A (ja) | 環状ｈｉｖ主要中和決定基ペプチド | |
| JPH0222300A (ja) | 免疫原性接合体およびその製法ならびに免疫を生ぜしめる方法 | |
| MXPA00007859A (en) | Strategically modified hepatitis b core proteins and their derivatives |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1OB | Publication of a patent application | ||
| ODBC | Application rejected |